KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI n-HEKSANA, ETILASETAT DAN ETANOL DAUN ANDONG (Cordyline fruticosa Goepp.) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus SKRIPSI
OLEH: HERYANI SITANGGANG NIM 081524076
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2011
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI n-HEKSANA, ETILASETAT DAN ETANOL DAUN ANDONG (Cordyline fruticosa Goepp.) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus SKRIPSI Diajukan Untuk Melengkapi Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
OLEH: HERYANI SITANGGANG NIM 081524076
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2011
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI n-HEKSANA, ETILASETAT DAN ETANOL DAUN ANDONG (Cordyline fruticosa Goepp.) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli, Shigella dysenteriae DAN Staphylococcus aureus OLEH: HERYANI SITANGGANG NIM 081524076 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Pada tanggal: Agustus 2011
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. NIP 195109081985031002
Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. NIP 195304031983032001
Pembimbing II,
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt NIP 195109081985031002
Dra. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt. NIP 195008221974121002
Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 195310301980031002
Medan, Agustus 2011 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra., Apt. NIP 195311281983031002
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR Segala puji dan syukur penulis sampaikan kehadirat Allah SWT yang telah
melimpahkan
rahmat
dan
karunia-Nya,
sehingga
penulis
dapat
melaksanakan penelitian dan menyelesaikan penulisan skripsi ini dengan baik. Skripsi ini yang merupakan salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Latar belakang penelitian ini bertujuan untuk memanfaatkan fraksi nheksana, etilasetat dan etanol dari daun Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) terhadap bakteri Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus yang digunakan untuk menyembuhkan penyakit diare, disentri dan penyakit kulit. Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terima kasih yang sebesarbesarnya kepada Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt., dan Ibu Dra. Masfria, MS., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, kesabaran dan petunjuk kepada penulis sehingga dapat penyusunan skripsi ini. Ucapan terima kasih
menyelesaikan
juga kepada Bapak Prof. Dr.
Sumadio Hadisahputera., Apt., yang telah memberikan izin fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan. Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada Bapak dan Ibu dosen penguji ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt., dan Drs. Panal Sitorus, M.Si., Apt., yang telah memberikan kritikan, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Penulis juga tidak lupa mengucapkan terima kasih dan pengharapan yang tulus kepada kedua orang tua, Ayahanda M. Sitanggang dan Ibunda H. Br Limbong tercinta, kakak, adik serta teman-teman (kak emi, kak ira, kak rohana, kak liska, mawaddah, fitri, tina,riva, siska, puspa, lisa, nina, asril, dwi, mirza) atas doa, dorongan dan pengorbanan baik moril maupun material dalam penyelesaian skripsi ini.
Medan, Agustus 2011 Penulis
Heryani Sitanggang
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI n-HEKSANA, ETILASETAT DAN ETANOL DAUN ANDONG (Cordyline fruticosa Goepp.) TERHADAP BAKTERI Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus ABSTRAK Salah satu tanaman yang digunakan masyarakat sebagai obat tradisional adalah tanaman Andong. Telah dilakukan karakterisasi simplisia dan uji aktivitas antibakteri dari beberapa fraksi daun Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) suku Liliaceae terhadap bakteri Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi agar, yaitu melalui pengukuran diameter zona hambat sekitar punch hole. Fraksinasi dilakukan secara perkolasi dengan menggunakan pelarut n-heksana, etilasetat dan etanol. Hasil karakterisasi simplisia diperoleh kadar air 5,32%, kadar sari yang larut dalam air 11,72%, kadar sari yang larut dalam etanol 16,06%, kadar abu total 2,35% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,39%. Hasil skrining fitokimia menunjukkan adanya senyawa golongan alkaloida, flavonoida, saponin, tanin, glikosida dan steroida/triterpenoida. Hasil pengujian aktivitas antibakteri dari daun andong menunjukkan bahwa fraksi n-heksana tidak memiliki kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus. Hasil uji aktivitas antibakteri menunjukkan bahwa fraksi etilasetat memberikan hasil memuaskan untuk bakteri Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus pada konsentrasi 500 mg/ml dan KHM untuk ketiga bakteri berbeda-beda yaitu bakteri Escherichia coli pada konsentrasi 50 mg/ml, Shigella dysenteriae pada konsentrasi 45 mg/ml dan bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 60 mg/ml. Sedangkan fraksi etanol memberikan hasil memuaskan untuk bakteri Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus pada konsentrasi 300 mg/ml dan KHM untuk ketiga bakteri berbeda-beda yaitu bakteri Escherichia coli pada konsentrasi 55 mg/ml, Shigella dysenteriae pada konsentrasi 50 mg/ml dan bakteri Staphylococcus aureus pada konsentrasi 70 mg/ml. Kata kunci: Daun andong, Cordyline fruticosa Goepp, Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus.
Universitas Sumatera Utara
THE CHARACTERIZATION OF SIMPLEX AND TEST OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY FRACTION n-HEKSANA, ETILASETAT AND ETHANOL OF ANDONG LEAF (Cordyline fruticosa Goepp.) AGAINTS Escherichia coli, Shigella dysenteriae AND Staphylococcus aureus ABSTRACT One of the plant whom people used as a herbal medicine is Andong. An experiment was conducted for the characterization of simplex and test of antbacterial activity of some fraction of andong leaf (Cordyline fruticosa Goepp.) against the growth of Escherichia coli, Shigella dysenteriae and Staphylococcus aureus. The experiment of the antibacterial activity was conducted by using agar diffusion method in which the diameter of the inhibition zone around the disk is punch hole. The plant material was fractionation by percolation using n-heksana, etilasetat, ethanol as solvent. The result of the experiment also showed a water content value of 5.32% water soluble extract 11.72%, ethanol soluble extract 16.06%, total ash value 2.35% and acid insoluble value 0.39%. The result of phytochemical screening is flavonoida, alcaloida, saponin, tannin, glycocida and steroid/triterpenoida. The experiment from antibacterial activities of andong leaf (Cordyline fruticosa Goepp.) shows that fraction of n-heksana can’t stop the growth of Escherichia coli, Shigella dysenteriae and Staphylococcus aureus. The test of antibacterial activities shows that etilasetat fraction gaves a good result for Escherichia coli, Shigella dysenteriae and Staphylococcus aureus at concentration 50 mg/ml and KHM for three different bacteries Escherichia coli at concentration 50 mg/ml, Shigella dysenteriae at 45 mg/ml and Staphylococcus aureus at 60 mg/ml. In the case of ethanol fraction gaves a good result at concentration 300 mg/ml and KHM for three different bacteries Escherichia coli at concentration 55 mg/ml, Shigella dysenteriae at 50 mg/ml and Staphylococcus aureus at 70 mg/ml Keywords: Andong leaf, Cordyline fruticosa Goepp, Escherichia coli, Shigella dysenteriae and Staphylococcus aureus.
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI Halaman JUDUL .............................................................................................................. i HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... iii KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv ABSTRAK ....................................................................................................... v ABSTRACK .................................................................................................... vi DAFTAR ISI ...................................................................................................vii DAFTAR TABEL ...........................................................................................xi DAFTAR GAMBAR .......................................................................................xii DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................xiii BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1 1.1 Latar Belakang ................................................................................ 1 1.2 Perumusan Masalah ......................................................................... 3 1.3 Kerangka Konsep Penelitian ............................................................ 4 1.4 Hipotesis ......................................................................................... 5 1.5 Tujuan Penelitian ............................................................................. 5 1.6 Manfaat Penelitian ........................................................................... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................... 6 2.1 Uraian Tanaman Andong ................................................................. 6 2.1.1 Habitat Tanaman Andong (Cordyline fruticosa Goepp) ........... 6 2.1.2 Sistematika Tumbuhan ............................................................ 6 2.1.3 Sinonim .................................................................................. 6 2.1.4 Nama asing ............................................................................. 7 2.1.5 Nama daerah ........................................................................... 7 2.1.6 Morfologi Tanaman Andong ................................................... 7 2.1.7 Khasiat Tumbuhan .................................................................. 7 2.2 Kandungan kimia ............................................................................. 8 2.2.1 Saponin .................................................................................. 8 2.2.2 Tanin ..................................................................................... 8 2.2.3 Flavonoida .............................................................................10 2.2.4 Steroida ..................................................................................10
Universitas Sumatera Utara
2.2.5 Glikosida ................................................................................11 2.3 Ekstrak ............................................................................................11 2.3.1 Pengertian ...............................................................................11 2.3.2 Metode Ekstraksi .....................................................................12 2.4 Bakteri .............................................................................................13 2.5 Bkateri Gram Positif ........................................................................17 2.5.1 Bakteri Staphylococcus aureus ................................................17 2.6 Bakteri Gram Negatif .......................................................................18 2.6.1 Bakteri Escherichia coli ..........................................................18 2.6.2 Bakteri Shigella dysenteriae ....................................................19 2.7 Fase Pertumbuhan Bakteri ...............................................................19 2.8 Media Pertumbuhan Bakteri .............................................................21 2.9 Media Isolasi Biakan Bakteri ...........................................................22 2.10 Pengukuran Aktivitas Antimikroba ................................................23 BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................25 3.1 Alat dan Bahan .................................................................................25 3.1.1 Alat-alat ...................................................................................25 3.1.2 Bahan-bahan .............................................................................25 3.2 Penyiapan Bahan Tanaman ..............................................................26 3.2.1 Pengambilan Bahan Tanaman .................................................26 3.2.2 Identifikasi Tumbuhan ............................................................26 3.2.3 Pengolahan Bahan Tanaman ...................................................27 3.3 Karakterisasi Simplisia ....................................................................27 3.3.1 Pemeriksaan Organoleptis .......................................................27 3.3.2 Pemeriksaan Makroskopik ......................................................27 3.3.3 Pemeriksaan Mikroskopik .......................................................27 3.3.4 Penetapan Kadar Air ...............................................................28 3.3.5 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Air ............................28 3.3.6 Penetapan Kadar Sari yang Larut dalam Etanol .......................29 3.3.7 Penetapan Kadar Abu Total ....................................................29 3.3.8 Penetapan Kadar Abu yang Tidak Larut dalam Asam...............29 3.4 Pembuatan Pereaksi .........................................................................30
Universitas Sumatera Utara
3.4.1 Pereaksi Asam Klorida 2N ......................................................30 3.4.2 Kloralhidrat .............................................................................30 3.4.3 Pereaksi Mayer .......................................................................30 3.4.4 Pereaksi Bouchardat ................................................................30 3.4.5 Pereaksi Dragendorf ................................................................30 3.4.6 Pereaksi Molish ......................................................................30 3.4.7 Pereaksi Besi (III) Klorida 1% ................................................31 3.4.8 Pereaksi Timbal (II) Asetat .....................................................31 3.4.10 Pereaksi Natrium Hidroksida 2N ...........................................31 3.4.11 Pereaksi Asam Sulfat 2N........................................................31 3.5 Skrining Fitokimia ...........................................................................31 3.5.1 Pemeriksaan Alkaloida ............................................................31 3.5.2 Pemeriksaan Flavonoida .........................................................32 3.5.3 Pemeriksaan Saponin ..............................................................32 3.5.4 Pemeriksaan Glikosida ............................................................32 3.5.5 Pemeriksaan Tanin ..................................................................33 3.5.6 Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida ........................................33 3.5.7 Pemeriksaan Glikosida Antrakuinon .......................................33 3.6 Pembuatan Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol Daun Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) Secara Perkolasi .................................34 3.7 Pembuatan Media ............................................................................34 3.7.1 Pembuatan Nutrient Agar (NA) ...............................................34 3.7.2 Pembuatan Media Agar Miring ...............................................35 3.7.3 Larutan NaCl 0,9 % ................................................................35 3.7.4 Suspensi Standar Mc Farland 0,5 ............................................36 3.8 Pembiakan Bakteri ...........................................................................36 3.8.1 Pembuatan Stok Kultur ...........................................................36 3.8.2 Pembuatan Inokulum ..............................................................36 3.9 Pembuatan Larutan Uji (Fraksi n-heksana, etilasetat dan etanol) dari Daun Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) Dengan Berbagai Konsentrasi .....................................................................................36 3.9.1 Pembuatan Larutan Uji Fraksi n-Heksana ...............................36 3.9.2 Pembuatan Larutan Uji Fraksi Etilasetat ..................................37
Universitas Sumatera Utara
3.9.3 Pembuatan Larutan Uji Fraksi Etanol ......................................37 3.10 Pengujian Efek Antibakteri Secara In Vitro .....................................38 3.10.1 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksana ...........................38 3.10.2 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etilasetat .............................38 3.10.3 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol .................................39 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................40 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .........................................................46 5.1 Kesimpulan .....................................................................................46 5.2 Saran ...............................................................................................47 DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................48 LAMPIRAN ....................................................................................................51
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL Halaman Tabel 1 Hasil Karakterisasi Serbuk Simplisia Daun Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) ...............................................................41 Tabel 2 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) ................42 Tabel 3 Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli, Shigella dysenteriae dan Staphylococcus aureus Pada Fraksi Etilasetat dan Etanol .........................................................44 Tabel 4 Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli Pada Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol .............60 Tabel 5 Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri Shigella dysenteriae Pada Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol ......61 Tabel 6 Hasil Pengukuran Daerah Hambat Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus aureus Pada Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol ..62
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1 Kurva Fase Pertumbuhan Bakteri ............................................... 21 Gambar 2 Tanaman Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) ......................... 52 Gambar 3 Daun Segar Andong ................................................................... 53 Gambar 4 Simplisia Daun Andong ............................................................. 53 Gambar 5 Mikroskopik Penampang Melintang daun Andong ..................... 54 Gambar 6 Mikroskopik Penampang Membujur daun Andong ..................... 55 Gambar 7 Mikroskopik Serbuk Simplisia daun Andong .............................. 56 Gambar 8 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etilasetat Daun Andong Terhadap Bakteri Escherichia coli ............................................. 63 Gambar 9 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etilasetat Daun Andong Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae ....................................... 63 Gambar 10 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etilastat Daun Andong Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ................................... 63 Gambar 11 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Daun Andong Terhadap Bakteri Escherichia coli ............................................. 64 Gambar 12 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Daun Andong Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae ....................................... 64 Gambar 13 Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Etanol Daun Andong Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ................................... 64 Gambar 14 Uji Blanko fraksi n-heksana, etilasetat dan etanol terhadap Bakteri Escherichia coli ............................................................. 65 Gambar 15 Uji Blanko fraksi n-heksana, etilasetat dan etanol terhadap Bakteri Shigella dysenteriae ....................................................... 65 Gambar 16 Uji Blanko fraksi n-heksana, etilasetat dan etanol terhadap Bakteri Staphylococcus aureus .................................................. 65
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1 Hasil Identifikasi Tumbuhan .................................................. 51 Lampiran 2 Tanaman Andong (Cordyline fruticosa Goepp.) ..................... 52 Lampiran 3 Gambar Daun Segar dan Simplisia Daun Andong ................... 53 Lampiran 4 Mikroskopik Penampang Melintang Daun Andong ................ 54 Lampiran 5 Mikroskopik Penampang Membujur Daun Andong ............... 55 Lampiran 6 Mikroskopik Serbuk Simplisia Daun Andong ........................ 56 Lampiran 7 Bagan Prosedur Kerja ............................................................ 57 Lampiran 8 Bagan Uji Aktivitas Antibakteri dari Larutan Uji ................... 59 Lampiran 9 Hasil Pengukuran Daerah Hambatan Pertumbuhan bakteri Escherichia coli Pada Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol .............................................................................. 60 Lampiran 10 Hasil Pengukuran Daerah Hambatan Pertumbuhan bakteri Shigella dysenteriae Pada Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol .............................................................................. 61 Lampiran 11 Hasil Pengukuran Daerah Hambatan Pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus Pada Fraksi n-Heksana, Etilasetat dan Etanol............................................................................... 62 Lampiran 12 Gambar uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun Andong ......................................................................... 63 Lampiran 13 Gambar uji aktivitas antibakteri fraksi etanol daun Andong .......................................................................... 64 Lampiran 14 Gambar uji blanko ................................................................. 65 Lampiran 15 Perhitungan Data .................................................................... 66
Universitas Sumatera Utara