Jana Fauknerová Matějčková
význam klinické biochemie odběr biologického materiálu vyšetření moče vyšetření krve vyšetření mozkomíšního moku, žaludeční šťávy biochemické sady
biochemie analytická chemie fyziologie farmakologie imunologie endokrinologie toxikologie výpočetní technika
stanovení diagnózy kontrola choroby terapie prevence - screening
základní speciální ◦ podrobnější diagnóza, monitorování terapie
vysoce speciální ◦ vzácné diagnózy, monitoring hladiny speciálních léků, metabolické funkce
orientační – u lůžka, při návštěvě, v ordinaci akutní – pohotovostní, neprodleně statim – stanovení do 2 hodin
75% chyb je způsobeno špatným odběrem na oddělení:
další chyby jsou způsobeny transportem materiálu:
◦ nedodržení zásad správného odběru a přípravy pacienta (před a po jídle, v nesprávné poloze, při podávání léků) ◦ hemolýza ◦ dlouhé stažení paže, nedokončené srážení krve ◦ použití nesprávného antikoagulancia při odběru nesrážlivé krve ◦ nesprávně uskladněný biologický materiál (nedodržení skladovací teploty, světlo apod.) ◦ záměna biologického materiálu ◦ kontaminace biologického materiálu
Asi 25% chyb připadá na personál, který špatně označí údaje na žádance a na materiálu. Chyby může způsobit i laboratoř např. špatné nastavení fotometrů, znečištěné kyvety, nesprávná teplota při inkubaci apod.
moč krev stolice likvor – mozkomíšní mok žaludeční šťáva výpotek
odběr ranní moče sbíraná moč – 3, 6, 12, 24 hod.
vyšetření:
◦ fyzikální – objem, barva, zápach, zákal, hustota, pH ◦ chemické – bílkoviny, Glc, ketolátky, žlučová barviva, urobilinogen, Hb, ery, kreatinin, ◦ močový sediment
kvantitativní stanovení * proteiny (albumin, ELFO) * glukóza * ionty * urea * kreatinin * kyselina močová * -amyláza * toxikologická vyšetření (léky,kovy) * hormony a jejich metabolity: kortizol, testosteron, pregnandiol, aldosteron, hCG, estriol 17-ketosteroidy, 17-hydroxysteroidy kys. vanilmandlová, kys. homovanilová, kys. 5-hydroxyindoloctová (5-HIO)
bílkoviny – proteinurie - nad 0,15 g/d
glukóza – glykosurie – nad 1,4 mmol/L
◦ důkaz kyselinou sulfosalicylovou ◦ další vyšetření ◦ po námaze, po prochlazení, premenstruační, onemocnění ledvin, metabolické poruchy, srdeční nedostatečnosti ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
proužky Glukophan, Heptaphan … Fehlingovo činidlo diabetes mellitus akutní pankreatitida nádory hypertyreóza
http://old.lf3.cuni.cz/chemie/cesky/praktika/navody_sem2.htm
ketolátky
žlučová barviva – bilirubin, urobilinogen, strekobilinogen, urobilin, strekobilin
◦ Lestradetovo činidlo, proužky Heptaphan ◦ u stavů, které vedou ke ketoacidóze ◦ diabetické kóma, hladovění, zvracení, … ◦ hepatitidy, poškození jater ◦ nadměrná tvorba bil z Hb
krev – hemoglobin
choriogonadotropní hormon
◦ testační proužky ◦ onemocnění ledvin, močových cest ◦ těhotentsví
http://old.lf3.cuni.cz/chemie/cesky/praktika/navody_sem2.htm
orgánový – ery, leukocyty, epitelie, válce neorgánový – krystaly urátů, šťavelanů, fosforečnanů, uhličitanů a jiných solí patogeny – mikroby, plísně, kvasinky, prvoci, parazité
http://old.lf3.cuni.cz/chemie/cesky/praktika/navody_sem2.htm
kapilární – glykémie, ketolátky venózní – sérum, plazma arteriální – pouze lékařem, stanovení dle Astrupa plazma – K2EDTA, K3EDTA sérum antikoagulancia – heparin, EDTA, citrát sodný, šťavelany
příprava a zpracování vzorků před analýzou náběr krve ◦ sérum
z celé krve nebuněčná složka krve vzniká po vysrážení plné krve a následným odstraněním krevního koláče neobsahuje fibrinogen a další srážecí faktory krve jímá do obyčejných zkumavek či stříkaček bez jakýchkoliv protisrážlivých látek
◦ plazma
z venózní, arteriální, kapilární krve tekutá složka krve jímá do zkumavek či stříkaček s protisrážlivými látkami (heparin, EDTA, citrát)
HEMOLÝZA (K+, LD, AST)
CHYLÓZNÍ SÉRUM
HYPERBILIRUBINÉMIE (nad 100 mol/l)
rozdíly plazma / sérum při koagulaci se z rozpadlých trombocytů uvolňuje K+ častější hemolýza je u séra
vyšetření prováděná v séru ◦ ionty – Na+, K+, Ca2+, Mg2+, Fe2+, Cu2+, Cl-, PO43◦ celkový cholesterol, HDL, TAG, elektroforéza proteinů ◦ stanovení glykémie, oGTT ◦ stanovení žlučových barviv ◦ stanovení enzymových aktivit – AST, ALT, LDH, CK, ALP, GMT ◦ stanovení hormonů – thyreoidální hormony, estradiol, testosteron, kortizol …
Biochemický analyzátor ADVIA 1650
celkový protein (64 - 83 g/l) albumin (32 - 45 g/l) ~ 60% ELFO C-reaktivní protein (CRP) ◦ do 40 mg/l virové ◦ nad 60 mg/l bakteriální
fibrinogen prealbumin
arteriální krev posouzení vnitřního stavu prostředí přímo se měří pH, pCO2, pO2 software – vyhodnotí parametry ABR dle Henderson-Haselbachovy rovnice a určí koncentraci HCO3- a případně base excess nebo base deficit u metabolické acidózy se počítá anion gap
fyzikální vyšetření – barva, zápach, množství mikroskopické vyšetření – přítomnost tukových kapének a škrobu ◦ onemocnění pankreatu – velké množství nenatrávených škrobových zrn
chemické vyšetření – pH, přítomnost okultního krvácení (pomocí hemokultů) a žlučová barviva ◦ screening a prevence tumorů rekta
http://www.calibex.com/hemoccult-test/zzcalibex2zB1z0 --search-html?nxtg=952e0a240533-6089CD4E49008F7E
liquor cerebrospinalis omývá CNS a míchu normální – sterilní, 100 – 150 mL diagnostika infekcí nervové soustavy odběr – lumbální punkcí mezi bederními obratli L3 a L4 u starších a L4 – L5 u mladších lidí u malých dětí punkce pod foramen occipitale
fyzikální vyšetření ◦ barva likvoru – norma je čirá tekutina ◦ zákal – při bakteriální kontaminaci ◦ červené zbarvení – přítomnost krve chemické vyšetření ◦ Glc (45% glykémie),u infekcí se snižuje (bakterie) ◦ chloridy, bílkoviny - Ig mikroskopické vyšetření ◦ lymfocyty – normálně ◦ granulocyty, monocyty, plazmatické buňky, erytrocyty, makrofágy, nádorové buňky – chorobné
onemocnění dvanáctníku a žaludku odběr pomocí sondy
fyzikální vyšetření
◦ vzhled, barva, zápach – normální – bezbarvá ◦ vyšetření žaludeční acidity - kvantitativně pomocí sondy
obecný biochemický soubor – screeningový soubor cílené (orgánové) biochemické soubory ◦ soubor pro vyšetření ledvin
soubory syndromově specializované ◦ ověření diagnózy, pro určení metabolického rizika – soubor pro odhalení rizika urolithiázy
venózní krev ◦ ◦ ◦ ◦ ◦
koncentrace iontů: Na+, K+, Cl-, HCO3-, Ca2+ glykémie krevní obraz a sedimentace jaterní enzymy: ALT, AST koncentrace močoviny (urea) a kreatininu koncentrace lipidů a cholesterolu
moč
◦ přítomnost bakterií a leukocytů – známka zánětu ◦ přítomnost bílkovin ◦ přítomnost erytrocytů a hemoglobinu – známka krvácení v ledvinách nebo močových cestách
základní vyšetření
Speciální vyšetření:
Vysoce speciální vyšetření:
◦ ALT, AST, GMT, ALP, bilirubin, U-urobilinogen, Ubilirubin, celkový albumin ◦ ELFO bílkovin, prealbunim, glutamátdehydrogenáza, cholinesteráza, laktátdehydrogenáza, o-GTT, P-Fe ◦ ceruloplasmin, S-Cu, α1-antitrypsin, amoniak, Pžlučové kyseliny, serologická vyšetření při infekci virem hepatitidy B, stanovení koagulačních faktorů, které jsou syntetizovány v játrech
ALT (alaninaminotransferáza) ◦ cytoplasmatický enzym lokalizovaný především v hepatocytu ◦ do krve se dostává při poškození buněčné membrány (při malém poškození) ◦ katalyzuje přenos aminoskupiny z L-ala na 2oxoglutarát za vzniku pyruvátu a L-glutamátu ◦ reakce volně reverzibilní, uplatňuje se při syntéze, odbourávání a přeměně amk ◦ zvýšení specifické pro jaterní postižení (akutní virová hepatitida) ◦ norma 0,6 – 1,0 kat/L
AST (aspartátaminotransferáza) ◦ nitrobuněčný enzym obsažený především v srdečním svalu, játrech a kosterním svalstvu ◦ cytoplazmatický a mitochondriální izoenzym ◦ katalyzuje přenost aminoskupiny z L-aspartátu na 2-oxoglutarát za vzniku oxalacetátu a Lglutamátu ◦ zvýšení u chorob jater (AST vyšší než ALT svědčí o nekróze buněk) ◦ snížení v terminální fázi jaterního selhání ◦ norma 0,7 – 1,0 kat/L
GMT (gamaglutamyltransferáza)
◦ indikátor hepatobiliárního poškození, zvláště u chronických stavů a při cholestase (nejvyšší hodnoty při obstrukci žlučových cest) ◦ katalyzuje přenos g-glutamylu z glutathionu na amk a umožňuje transport amk přes buněčnou membránu – do cytosolu ◦ nejcitlivějším ukazatelem poškození jater alkoholem, metastatické procesy v játrech ◦ u virové hepatitity v rekonvalescenci (hodnocení průběhu) ◦ norma do 1,0 kat/L
ALP (alkalická fosfatáza) –
hodnoty: 1 - 10 let 1,12-6,2 kat/l 10 - 15 let 1,35-7,5 kat/l 15 - 110 let 0,66-2,2 kat/l
◦ celková aktivita 4 enzymů (jaterní, kostní, střevní, placentární) ◦ katalyzuje hydrolýzu fosfátových esterů při alkalickém pH ◦ hepatobiliární onemocnění (obstrukce, abscesy, metastázy)
ACP – kyselá foafatáza
hodnoty:
Muži: 0 – 108 nkat/l Ženy: 0 - 92 nkat/l
◦ tkáň prostaty, buňky kostní tkáně = osteoklasty, tkáň ledvin, v erytrocytech a trombocytech ◦ aktivita stoupá u karcinomu prostaty, při odbourávání kostní tkáně, onemocnění ledvin (je zadržována v krvi), u hemolytických anémií a trombóz
bilirubin je uvolněn do krve hodnoty: celkový 2,0-17,0 mol/l konjugovaný 0,0-5,1 mol/l
velmi špatně rozpustný v plazmě – transport ve vazbě na albumin („nekonjugovaný bilirubin = „nepřímý“) v játrech bil odstraněn z albuminu a přijat hepatocyty zvýšení rozpustnosti (polarity) kyselinou glukuronovou → bilirubindiglukosiduronát rozpustný ve vodě, „konjugovaný bilirubin“ = „přímý“ COOH O OH
OH
OH OH
kyselina glukuronová
do jater – konjugace s kys. glukuronovou UDP–glukuronát + bilirubin bilirubin glukosiduronát bilirubin glukosiduronát žluč střevo – redukce na urobilinogen a sterkobilinogen urobilinogen a sterkobilinogen ◦ reabsorbovány a zpět do jater (enterohepat. cirkulace) ◦ oxidovány na barvivo urobilin (oranžový) a sterkobilin (žlutý) – vyloučení stolicí ◦ urobilinogen – vylučován i močí
Hemolytický ikterus = žloutenka
◦ zvýšená tvorba při nadměrném rozpadu Hb: převaha nekonjugovaného bilirubinu, chybí bilirubinurie ◦ novorozenecký ikterus, hemolytické anémie, hemolysa po transfuzi
Hepatocelulární ikterus
◦ nedostatečné vychytávání a poruchy transportu v jaterních buňkách: zvýšený konjugovaný i nekonjugovaný bilirubin ◦ hepatitidy, toxické poškození jater, jaterní cirhosa, selhání jater, extrahepatální uzávěr, záněty žlučových cest a žlučníku
Obstrukční ikterus
◦ porucha odtoku žluče z jater ◦ funkce jater je normální, konjugovaný bil se vylučuje močí
AST kreatinkináza – CK myoglobin troponin LDH
kreatinkináza
◦ cytoplazmatický enzym ◦ katalyzuje fosforylaci kreatinu na kreatinfosfát pomocí ATP ◦ obsažena v kosterním svalstvu, v myokardu a v mozkové tkáni ◦ dvě podjednotky M (muscle) a B (brain) tři izoenzymy
CK-BB (CK-1, mozkový izoenzym)
CK-MB (CK-2, myokardiální izoenzym) CK-MM (CK-3, svalový izoenzym)
kardiomyocyt – pracuje za aerobních podmínek, zdrojem energie jsou MK a ketolátky ischemie myokardu – angina pectoris při poškození po infarktu myokardu – vyplavování kreatinkinázy ◦ izoenzym se stanovuje 4-5 hod. po IM ◦ CK se vylévá i při poškození hladkého svalstva
troponin ◦ bílkovina, obsahuje 3 podjednotky – Tn-I, Tn-T, Tn-C troponin T se váže k molekule tropomyosinu troponin C váže kalciové ionty (bez kterých by neprobíhala kontrakce troponin I inhibuje vazbu aktinu a myosin.
◦ Tn-I a Tn-c - jedinečné aminokyselinové složení, specifické pro myokard ◦ kardiální izoformy TnT a TnI obsaženy v kontraktilním aparátu ◦ nekróza kardiomyocytů – zvýšení Tn-I a Tn-T ◦ sérové hladiny Tn-I stoupají 4 hod. po IM ◦ u dospělého jsou 2 izoformy Tn-T: Tn-T1 a Tn-T2 ◦ sérové hladiny Tn-T2 stoupají během 4 hod. po IM a zůstávají vysoké asi 14 dní
myoglobin ◦ vysoce nespecifický marker pro srdeční sval
◦ ve tkáni svalů uchovává kyslík ◦ při nedostatku O2 je uvolňován a využíván mitochondriemi svalu k syntéze ATP ◦ váže kyslík pevněji než Hb, nedokáže ale uvolnit O2 a transportovat ho do periferních tkání, uvolní ho až ve svalu (nižší pO2)
◦ jeho koncentrace se zvyšuje při jakémkoliv hematomu nebo při i.v. podání myorelaxancií
exokrinní činnost pankreatu - -amyláza při akutní pankreatitidě rychle stoupá a pak rychle klesá katalytická aktivita v séru při chronické pankreatitidě přetrvává vysoká aktivita -amylázy v séru -amyláza – Mr =45 000 – prochází přes glomeruly v ledvinách – aktivita se měří i v moči
analyt
patologie
P-amoniak
selhání jaterní funkce, Reyův syndrom, metabolické defekty enzymů v cyklu tvorby močoviny
S-amyláza
onemocnění pankreatu, choroby jater, chronické onemocnění ledvin
ALP
choroby jater a žlučových cest, choroby kostí, choroby trávicího ústrojí
bilirubin
ikterus, hepatitidy
S-bílkovina
↑ dehydratace, cirhóza, ↓ zvýšené ztráty, snížená syntéza (především albuminu)
S-ferritin
ženy 23-110 g/L, muži 35-217 mg/L
S-glukóza
↑ diabetes mellitus, onemocnění nadledvin nebo hypofýzy, hypertyreóza, onemocnění pankreatu
S-cholesterol
do 6,5 mmol/L, ↑ nefropatie, hepatopatie,pankreatopatie
analyt
patologie
CK – M (kosterní sval), B (mozek), MB - myokard
↑ onemocnění kosterního svalstva, onemocnění myokardu, IM
S-kreatinin
↑ snížené vylučování ledvinou, prerenální příčiny, zvýšená produkce kreatininu, ↓ úbytek svalové hmoty, preeklampsie, eklampsie
kyselina močová
↑ DNA, nedostatečné vylučování ledvinami
LDH – 5 frakcí
↑ krevní choroby, mononukleóza, onemocnění myokardu, IM, hepatopatie, svalové onemocnění
S-myoglobin
poškození myokardu nebo kosterního svalstva
S-železo
↓ nedostatek Fe, nedostatečnost resorpce Fe, poruchy transportu Fe, poruchy vestavby Fe do Hb, akutní a chronická infekce, ↑ excesivní příjem Fe, poškození jater, hepatitidy, zvýšené odbourávání Fe
