INSEMINACE KONÍ • „Multimediální učební pomůcka pro výuku reprodukce hospodářských zvířat II“ • Řešitelé : prof. Ing. František Louda, DrSc. • Ing. Alena Ježková, CSc. • Doc. Ing. Luděk Stádník, Ph.D. • Ing. Jan Navrátil, CSc. • Ing. Jan Beran • FOND ROZVOJE VYSOKÝCH ŠKOL č.projektu 2652 /2010
• © Katedra speciální zootechniky, FAPPZ, ČZU v Praze 1
Plemenný hřebec
Typický představitel Českého teplokrevníka
2
Pohlavní vydražďování hřebce před odběrem ejakulátu
koní
3
Odběr spermatu hřebce pomocí fantomu
4
Plodnost, pohlavní aktivita, puberta Plodnost zahrnuje:kvalitu ejakulátu – libido sexuális –pohlav. aktiv. pohlavní aktivita – je ovlivněna ročním obdobím,hladinou testosteronu –v letě vyšší o více než 3ng/cm3 - velikostí varlat, plemenem, věkem objem ejakulátu - kolísá od 50 do 200 cm3 (prům. 120) - na podzim v zimě poloviční produkce spermií - Odhad celkové denní produkce spermií – velikost varlat - Puberta – definována věkem - 83 týdnů – produkcí cca - 5O mil. spermií a aktivita 10% -Zařazení do plemenitby - chladnokrevná plemena – ve věku 3 let - teplokrevná plemena – ve věku nad 4 roky - po výkonnostních zkouškách nebo po výsledcích na dostihové dráze -
5
Přednosti inseminace koní a- čerstvým semenem - hygiena,kontrola zdravot. stavu pohlavních orgánů - efektivní využití hřebců do vyššího věku - transport klisny – zranění přepravou nebo hřebcem - zapuštění klisen, které nemohou být zapuštěny hřebcem - ověřená kvalita ID - vyšší % zabřezávání - rozvoj obchodu se spermatem b-mraženým spermatem - vytvoření banky semene - využití spermatu mimo sezónu mražení - mezinárodní výměna spermatu - využití spermatu nežijících hřebců 6
Pohlavní ústrojí hřebce v době klidu – horizontální postavení varlat v šourku
7
Zatahování pyje po odběru ejakulátu
8
Vlastnosti hřebčího semene
- spermatogenní cyklus trvá 12-13 dnů - objem želatinózní složky kolísá – až 1/3 ejakulátu - fruktóza v semen. plazmě zanedbatelné množství - ergothionin a kys. citronová – velké množství - málo fosfolipidů – přímý vztah k citlivosti na chladový šok - u hřebců je třeba 1,5-2,2 skoků - na jednu ejakulaci do umělé vaginy 9
Frekvence odběru ejakulátu a vlastnosti hřebčího ejakulátu - Hřebci v inseminaci se odebírají 1 x za týden - Při zhoršení kvality ejakulátu –prodloužit sexuální pauzu Vlastnosti ejakulátu : - Objem – kolísá od 50do 200 cm2 (chladnokr. -150, teplokr. – 60) - hlenová složka ejakulátu –baktericidní účinky - Barva - bílá až do šeda – závisí na koncentraci spermií - Konzistence – vodnatá - pH - 6,7-7,5 (pokud stoupne pH na 7,8 – výrazně alkalické, - znamená, že nebyl získán celý ejakulát ) - Koncentrace – od 0,1do 0,3x106/mm3 (spermiová frakce až 0,8) - Celkový počet spermií v ejakulátě – kolísá od 6 do 48x109 projevuje se vliv ročního období - Aktivita – 60-80% , patologické – do 30-35%, 10
Příprava umělé vagíny k odběru spermatu Nasazení jednorázové vložky – vytvoření prostoru pro vodu 40- 42 oC
•
11
Příprava vagíny k odběru vymazávání sterilní vazelínou
12
Krakovský typ vagíny pro odběr spermatu od hřebců
13
Sterilní sběrač semene se před odběrem překryje sterilní gázou, která slouží k filtraci želatinózní frakce a udržení sterility odebraného spermatu
14
Fantom obalený sterilní folií připravený k odběru. Přítomnost klisny stimuluje pohlavní aktivitu odebíraného hřebce
15
Technika odběru pomocí zkrácené vagíny - asistentka zachycuje ejakulát do sběrače
16
17
Odebraný ejakulát ve sběrači
18
Mikroskopické hodnocení spermatu
19
Stanovení objemu získaného ejakulátu vážením a ekvilibrace naředěného
20
Inseminační dávka
- Značení – jméno a registr, laboratoř, den odběru Ins. dávky pro krátkodobou konzervaci - objem - 10 cm3 - 300x106 spermií - aktivita 60% - Ins. dávka dlouhodobě konzervovaného spermatu - objem – 10 cm3 - 300 až 400x106 spermií - aktivita– nejméně 30% - do 10 000 nepatogenních mikroorg. v 1 cm3
21
Příprava inseminační dávky a její kompletace + inseminační pipeta a rukavice
22
Chladící box (+40C) - pro krátkodobou konzervaci spermatu, ID, ředidel, chladových akumulátorů
23
ID připravená k odeslání
24
Dlouhodobá konzervace spermatu U hřebců jsou výrazné rozdíly v mrazitelnosti spermatu a jeho následné oplozovací schopnosti - projevuje se vliv individuál. složení semenné plazmy - vliv individuálního porušení akrozomu mražením Forma mražení ID - v peletách – 0,1 - 0,5 – 1 cm3 - Nagase (1996) - v pejetách – objem 5-6 cm3 - Martin (1979) - glycerin – individuální citlivost semene Rozmrazování ID ve vodě zahřáté na 45-500C - po dobu 10-20 sec. 25
Kontejner na uchovávání ID v tekutém dusíku
26
INSEMINACE KLISNY – II. část
27
Faktory ovlivňující pohlavní aktivitu klisen
28
Anatomické zvláštnosti pohlavního ústrojí klisny
děložní krček - větší průměr - na pohmat měkký růžice krčku - vystupuje 2,5 cm do vagíny délka krčku - 5-15 cm vulva - délka 10-13 cm vagína - délka 15-22 cm děloha - tělo délka17-20 cm, přechází neznatelně v rohy - jejich délka 26 cm a více - tělo dělohy - má značnou kapacitu (objem) - stěny dělohy – na pohmat tuhé a tenké - - chybí tonus - dělohy -
29
Fixace klisny před inseminací
30
Délka říje – připouštěcí období
Říje u klisny - trvá – 5 -7 dnů, - kolísá od 3do 13 dnů, opakuje se po 21 dnech - nejvýraznější říje - od února do června, též (po celý rok) - na podzim-horší výsledky zabřez. - prodlužování noci v 11.-12. měs.- na 20 hod. a následně -prodlužování dne v lednu – urychlí nástup říje o 1. měsíc - připouštěcí období - od ledna do června 31
Nástup říje a ovulace
-
Po porodu – 4.-7. den a trvá do 10. -13. dne, zapouštění hřebcem - 9. den po porodu Ovulace – variabilní – zpravidla ke konci říje Ovulace – též v druhé polovině říje 24-28 hod. před koncem říje Zrání graaf. Folikulů - probíhá v ovulační jamce V době říje se krček otevře na - 2-4 prsty Začátek říje u klisny náhlý - konec pozvolný Neexistuje korelace mezi intenzitou říje a stupněm vývoje folikulů 32
Zjišťování říje - hřebcem
-
Po porodu – 4.-7. den a trvá do 10. -13. dne, přirozené zapouštění hřebcem - 9. den po porodu ovulace - variabilní – zpravidla ke konci říje ovulace - též v druhé polovině říje 24-28 hod. před koncem říje zrání graaf. folikulů probíhá v ovulační jamce V době říje se krček otevře na 2-4 prsty Začátek říje u klisny náhlý - konec pozvolný Neexistuje korelace mezi intenzitou říje a stupněm vývoje folikulů 33
Zjišťování říje technikem
Musí být tři příznaky: 1- vnější projevy říje 2- otevření dělož. krčku na 3 prsty 3- palpací - rektálně sledovat velikost folikulů – stupně 1 až 6 největší Vaječník klisny – tvar ledviny, povrch hladký,( 4x2x2 cm) Na vaječníku klisny dozrává jeden folikul v tzv.ovulační jamce V průběhu říje se folikuly intenzívně zvětšují
34
Stanovení příznaků říje přivedením klisny k hřebci
Zjišťování říje zkušebním hřebcem – 4 stádia : 1- příznaky nevýrazné – neklid 2- příznaky zřetelnější – zvedání ocasu, blýská, stojí klidně 3- příznaky říje – sama jde k hřebci 4- příznaky velmi zřetelné – je obtížné ji odvést od hřebce - toto je nejvhodnější doba pro IA, AI se opakuje po 36-48 hod. do konce říje -po skončení říje - klisna hřebce odbíjí -po zapuštění za 16.-21. dnů se klisna vede k hřebci – zkouška zabřeznutí 35
Příprava klisny na vyšetření a inseminaci
36
Vyšetření stádia říjového cyklu u klisny pomocí sonografu
37
Klisna připravená k vyšetření a posouzení poševních hlenů
38
Rektální vyšetření pohlavního ústrojí klisny před inseminací
39
Dynamika vývoje folikulů v době říje
40
Stupně růstu folikulů v době říje:
1. stupeň- do 3 dnů po začátku říje – 5x3x2 cm 2. stupeň – zvětšení časti vaječníku – stává se asimetrický – trvá další 1 až 3 dny-6x4x3 3. stupeň – vaječník – hruškovitý tvar- trvá 1-3 dny – u folikulu patrná fluktuace a vystupuje z vaj. 4. stupeň – citlivost vaječníku a f. zřetelná – 7x6x6 - folikul vystouplý, naplněný tekutinou, uvnitř silný tlak – fluktuace - není patrná - začít inseminovat 5. stupeň – dochází k ovulaci- vaječník ztrácí kulatou formu, stádium trvá 1- 3 hodiny 6. stupeň – tvorba ŽT v místě prasklého folikulu Optimální doba pro AI - 4.-5 stupeň- dále reinseminovat pokud nedojde k ovulaci do 24-48 hod. 41
Terciální folikul klisny před ovulací
42
Inseminace klisny - schéma
43
Způsoby inseminace
Vaginální metodou – do dělohy - Otevřený krček - Ampule se semenem zahřátým na 350C- svisle držet flakon s ID - pozor na vzduchovou bublinu při AI , též pod rukou vniká vzduch - Zasunout inseminační pipetu 10-15 cm do krčku - Sevřít děložní krček po zasunutí pipety - Inseminace 15.sec. – reinseminace nutná - Dodržovat hygienu a sterilitu provedení AI - Velikost ID - 10 ml čerstvé, mražené – 5-25 ml - Po AI klisnu provádět – vypuzení vzduchu z dělohy 44
Napojení inseminační pipety na inseminační dávku
45
Kontrola vzduchové bubliny při plnění pipety spermatem
46
Navlečení jednorázové rukavice
47
Vložení inseminační pipety do dlaně
48
Dlaň chrání konec inseminační pipety při jejím zavedení do vagíny
49
Potření rukavice vazelínou
50
Zavedení inseminační pipety pod ochranou dlaně
51
Vytlačení ID na konec děložního krčku – do dělohy
52
Masáž dělohy s cílem vytlačení vzduchu, který zhoršuje postup spermií
53
Vliv světelného dne na pohlavní aktivitu klisen
54
Hormonální profil v průběhu říjového cyklu klisny
55
Uzavřené typy vagín v ČR se nepoužívají Missouri
Colorado
56
Každý plemenný hřebec musí být licentován – obdrží „Registr plemeníka“
57
Poděkování za spolupráci rodině Ing.Zdeňka Mullera, CSc. - z Mnětic u Pardubic
58
