HEMOLYZE Nejčastější důvod odmítnutí vzorku
Daniela Horáčiková Product Specialist Czech and Slovak republics
Chyby v medicíně Prevence chyb v medicíně je jedním z hlavních úkolů ve zdravotnictví Chyba v medicíně: událost, která může způsobit nebo vést k nesprávné léčbě nebo poškodit pacienta Diagnostická chyby jsou součástí chyb v lékařství. Jsou to všechny chyby mezi objednáním testu a dodáním výsledku
Hemolytické vzorky se v klinických laboratořích objevují často: prevalence je kolem 3,5% ze všech rutinních vzorků, nebo 4070% ze všech nevhodných vzorků
Úloha laboratoře
• Poskytnout co nejpřesnější výsledky pro diagnostiku • Poskytnout je včas = co nejdřív • Zpracovat všechny = jakékoliv vzorky
Jak toho dosáhnout
• Kvalitně vyabavené laboratoře • Dostatek kvalifikovaných zaměstnanců • Práce s kvalitními vzorky
Rubbish in = rubbish out
Co je to hemolyze? Jaké jsou příčiny?
Hemolyze: narušení membrány červených krvinek, které způsobí uvolnění hemoglobinu a jiných komponentů do obklopující tekutiny. Plazma nebo sérum tak získá růžové/červené zabarvení Horní referenční limit pro volný hemoglobín v plazmě je 20mg/L a 50 mg/L v séru. Vizuálně je hemolýza identifikovatelná je-li vyšší než 30mg/L Existují 2 zdroje hemolyze: 1. Hemolyze In-vivo: patologické změny – např. anémie nebo reakce po tranfuzi 2. Hemolyze In-vitro: nesprávný odběr vzorku, jeho zpracování nebo transport
Stupeň hemolyze
Rôzne stupne hemolýzy
Co způsobuje hemolyzi? Lidský faktor u odběru
Odběr z katetru Velikost jehly Způsob dezinfekce/čístění místa odběru Doba škrcení Traumatický odběr, změna pozice jehly v žíle Způsob promíchání Odběr pomocí sříkačky nepromíchání
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: Katetr, IV odběr • krev putuje různými vnitřními průměry a ůhly (katetry, konektory). Výslední turbulence způsobí protržení RBC Pozn: Odběr krve by měl být z periferní žíly kdykoliv je to možné.
Doporučení:
První zkumavku vyhoďte Použijte katetr s větším průměrem Použijte specielní zkumavku s malým objemem Vyhněte se turbulenci – lineární katetr Ujistěte se, že všechny konektory jsou správně sesazeny
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: Velikost jehly • velký průměr jehly (nižší G, např. 18G): krev natéka do zkumavky rychleji a silněji a kromě hemolýzy může způsobit kolaps/narušení žíly • malý průměr jehly (vyšší gauge, např. 25G): Při použití vekoobjemové zkumavky RBC se potrhají kvůli příliš silnému /rychlému nasávání. Krev putuje extrémně malým otvorem velkou rychlostí.
Doporučení: Vybírejte velikost jehly podle veliosti žíly, místa odběru a stavu pacienta Použijte speciální zkumavky pro menší objemy
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: Desinfekce • odebrání krve před úplným vyschnutím alkoholové desinfekce může způsobit hemolyzi a vpich je pro pacienta bolestivý
Doporučení: Ponechte desinfekci volně vyschnout
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: Doba škrcení • dlouhodobé škrcení může zvýšit hemokoncentraci • osmotický tlak může zůsobit narušení RBC
Doporučení: Škrtidlo uvolněnte hned jek krev začne natékat do první zkumavky Škrtidlo by mělo být uvolněno do 1 minuty od nasazení
Co způsobuje hemolyzi? odběr: Traumatický odběr • poškození žíly může způsobit hemolyzi – nesprávné umístění jehly
Doporučení: Dodržujte zásady správné praxe pro odběr Nezkoušejte více krát, raději zkuste jiné místo Nepřemísťujte jehlu dopředu, dozadu, raději zkuste jiné místo
Co způsobuje hemolyzi? odběr: prudké míchání • prudké míchání způsobuje narušení RBC
Doporučení: Zkumavku jemně převraťte o 180° nahoru dolů a nahoru – počet převrácení viz doporučení výrobce
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: žádné míchání • nepromíchání aditiv s krví způsobí zvýšení koncentrace, které může spůsobit narušení membrány RBC (NaOx) a naruší funkčnost aditiva
Doporučení: zkumavku jemně převraťte o 180°nahoru dol ů a nahoru – počet převrácení viz doporučení výrobce
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: nesprávný poměr krev:aditivum • nenaplněná zkumavka: zvýšení koncentrace, které může spůsobit narušení membrány RBC (NaOx) a naruší funkčnost aditiva
Doporučení: zkumavku vyndejte z držáku, až plně ustane tok krve
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: přenos vzorku ze stříkačky Nedoporučuje se, je-li nutné, je třeba vzít v úvahu: • přivelký tah pístu při odběru způsobuje velkou rychlost náběru = RBC narušení • Krev se může začít srážet a hemolyzovat při naběru do stříkačky velkého objemu • Přenos silným tlakem ze stříkačky do odběrové zkumavky může způsobit hemolyzi
Doporučení: …
Co způsobuje hemolyzi? Odběr: přenos vzorku ze stříkačky Doporučení: : Pře použitím vyzkoušejte volnost pohybu pístu stříkačky Při přenosu krve ze stříkačky zajistěty aby krev tekla pomalu po stěnách zkumavky Nepoužívejte stříkačky větších objemů než je požadovaný objem krve/zkumavky Netlačte na píst stříkačky při přenosu do vakuové zkumavky Krev přeneste do zkumavky ihned po doběru Použijte vhodnou pomůcku pro přenos krve se stříkačky do zkumavky
Co způsobuje hemolyzi? transport Vysoká nebo nízká teplota Potrubní pošta
Co způsobuje hemolyzi? zpracování • • • • • • • • • •
Typ centrifugy Doba od odběru do centrifugace Kalibrace centrifugy Extrémní teploty v centrifuze Nespávná kvalita gelové bariéry Rychost centrifugace Doba centrifugování Buňky na uzávěru Automatické otevírání zkumavek Opakovaná centifugace vzorků
Co způsobuje hemolyzi? Zpracování: Doba mezi odběrem a centrifugací • dlouhodobý kontakt plazmy/séra s RBC může způsobzt hemolyzi Doporučení: : Oddělte plazmu/sérum od buněk do dvou hodin od doby odběru, není-li doporučeno jinak
Co způsobuje hemolyzi? Zpracování : extrémní teploty v centrifuze • extrémní teploty můžou způsobit narušení membrán RBC Doporučení: : Ujistěte se, že teplota v centrifuze zodpovídá doporučením výrobce Používáte-li zkumavky s gelovým separátorem, dodržujte doporučení výrobce. Teplota by neměla klesnout pod 4°C
Co způsobuje hemolyzi? Zpracování : opakovaná centrifugace před analýzou vzorku • je-li vzorek re-centrifugován RCB se dostanou do kontaktu se sérem/plaznou a buňky se homogenisují v séru/plazmě Doporučení: : Gelové zkumavky necentrifugujte znovu. Je-li potřeba, centrifugujte alikvot séra/plazmy U negelových zkumavek- skladujte alikvot séra/plazmy
Co způsobuje hemolyzi? Stav pacienta Metabolické poruchy (nemoci jater, srpková anémie, autoimunní hemolytické anemie) Chemické látky (olovo, sulfonamidy, antimalarika, analgetika) Fyzické faktory (mechanical srdeční chlopeň, popíleniny 3,stupně) Infekce (parasity, bakterie)
Co způsobuje hemolyzi? 1. 2.
Hodnoty některých analytů se zvyšují v důsledku narušení membrány RBC: Lactate Dehydrogenase draslík Hemolyze může také interferovat s některými analytickými metodami, např. spektrofotometrie
Děkuji!
šťastná zkumavka = šťastný pacient
