Gyors vizsgálati módszerek a víz mikrobiológiai ellenőrzésében

Gyors vizsgálati módszerek a víz mikrobiológiai ellenőrzésében Reskóné Dr. Nagy Mária WESSLING Hungary Kft. Dömötör Szilveszter Agro-Legato Kft.

Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

IDEXX Laboratories, Inc.

Központ: Westbrook, Maine, USA 17 országban működtet irodákat, amelyek 175 ország ügyfeleit szolgálják ki, 5600 munkatársat foglalkoztat világszerte.

Világviszonylatban piacvezető a víz mikrobiológiában. legnépszerűbb vezető terméke: Colilert-18

Distributor Support Manager (Europe, Middle East & North Africa ): Dr Mike Cresswell MSB Cbiol. Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Cégalapítás: 1984. Globális vezető a technológia-alapú diagnosztikai termékek, szolgáltatások terén : •Víz minőség

Üzletági bevételek

•Állategészségügy

Házi kedvencek csoport

•Tej minőségbiztosítás

Haszonállat szolgáltatások

•Haszonállat, baromfi (PAS)

Víz Tejipar Egyéb

Az IDEXX stratégiája: a fejlesztés, gyártás, marketing és értékesítés legmagasabb szintű végrehajtása, egyedülálló ügyfélszolgálat, támogatás és technikai segítésnyújtás. Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Elfogadás/jóváhagyás /validálás IDEXX vízvizsgálati termékekre

Colilert-18 ISO 9308-2:2012 MSZ EN ISO 9308-2:2014 Ivóvizek: Coliform/E. coli vizsgálatára a 98/83 / EK irányelv alternatív módszerként jelöli. Ivóvizek: Coliform/E. coli – AFNOR val. 2009. Szennyezett vizek: Faecal coliforms - Journal of AOAC InternatIonal, Vol. 94, no. 5, 2011. Ivóvizek, természetes fürdővizek: Coliform/E. coli – AFNOR val. 2012. Enterolert-DW Ivóvíz: Enterococcusok – AFNOR val. 2013. Enterolert E Fürdővíz, szennyezett víz: Enterococcusok – AFNOR val. 2015. Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Termékek Coliform and E. coli

Enterococci

P. aeruginosa

Minőségbiztosítás

Colilert® Colilert®-18 Colisure® Colilert ® 250

Enterolert® Enterolert®-E Enterolert®-DW Enterolert® 250

Pseudalert™ Pseudalert™ 250

Quanti-Cult® Water QC

Cryptosporidium/ Giardia

Összcsíraszám meghatározás

Mennyiségi meghatározás

Kellékek

Filta-Max® Filta-Max xpress® Invitrogen Dynabeads® for IMS

SimPlate® for HPC HPC for Quanti-tray®

Quanti-Tray® Quanti-Tray®/2000


Mintagyűjtő edények Inkubátorok

Magyarországi ismertség, használat 2002. augusztus 8. A Colilert-Quanti Tray az OTH által elismert alternatív módszer ivóvíz és fürdővíz vizsgálatra, elsőként a Bakonykarszt ZRt. alkalmazza ivóvízre. 2005 Colilert – akkreditált egyedi mószer, ivóvízhez: Bakonykarszt ZRt., DRV vízvizsgáló laboratóriuma. Később követi a DRV, majd több vízvizsgáló laboratórium. 2012 Áttörés – A Colilert ISO szabványos módszer ISO 9308-2:2012 Egyre több labor használja az IDEXX módszert országszerte, köztük hatósági partnerek, valamint magáncégek is. 2014 Az év során több tízezer tesztet használtak fel Magyarországon főleg ivóvízvizsgálati célra, 70% E.coli, Coliform, 15% Enterococcus, 15% egyéb teszt (Pesudomonas, HPC) Kihirdetésre kerül a Magyar Szabvány az IDEXX Colilert/Quanti Tray módszerre MSZ EN ISO 9308-2:2014 Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

IDEXX víz üzletág a nagyvilágban A Világ 115 országában évente több mint 20 millió víztesztet használnak fel 7 kontinensen 2 milliárd ember ivóvizének vizsgálata történik folyamatosan IDEXX gyorstesztekkel

Gógyszeripari szintű létesítmények, gyártás tiszta térben

Gyártás

Elosztás

Franciaország, Svájc, USA, Egyesült Királyság, Kína

USA, Kanada, Hollandia, Ausztrália, Japán, Kína


Leggyakrabban használt tesztek típusai Megbízható eszközök – steril edényzet, dehidratált tápközeg, Gyors, egyszerű mintakezelés, Rövid inkubálás – 1 nap, Gyors, megbízható értékelés. 1. Higiénés indikátorok jelenléte /hiánya Ásványvizek, palackozott vizek (250 ml) Coliform/ E. coli Colilert 250

Értékelés

Enterococcusok Enterolert 250

Pseudomonas aeruginosa Pseudalert 250

Inkubálás


Leggyakrabban használt tesztek típusai 2.) Legvalószínűbb szám (MPN 100 ml-ben) meghatározása Quanti-Tray® módszerrel További eszközök: Quanti-Tray tálca 51 résszel – tiszta vizek Quanti-Tray /2000 tálca 97 résszel –szennyezettebb vizek Automatikus , Quanti-Tray lezáró készülék UV lámpa a kiértékeléshez


A módszer alkalmazása a mennyiségi tesztek esetében ugyanaz, az értékelés módja különbözik Lépések: Reagens betöltése a mintába

Feloldódást követően a Qanti-Tray tálca megtöltése

Coliform/ E. coli

Enterococcusok

Pseudomonas aeruginosa

Colilert Colilert 250

Enterolert Enterolert 250

Pseudalert Pseudalert 250

Colilert 18

Enterolert-DW

Colisure

Enterolert-E

A mintával telt tálca zárása Inkubálás után a vizsgálat módszerének megfelelő értékelés


Coliform és E. coli kimutatása, számlálása Colilert

Inkubálás: 36 ± 0.2°C / 24-28 óra Colilert 18 Inkubálás: 36 ± 0.2°C / 18-22 óra Coliform pozitív: E. coli pozitív: UV fényben (650 nm) sárga cellák száma fluoreszkáló cellák száma

Tiszta vizek: Quanty-Tray 51, MPN 100 ml-ben: 0-200 Szennyezett vizek: Quanty-Tray/2000 (97) MPN 100 ml-ben: 0-2419


Colilert, Colilert 18 működése

Az orto-nitrofenil-β-D-galaktopiranosid (ONPG) ß-galaktozidázzal történő enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a minta színtelenről sárgára változik. Az eljárás UV megvilágítást nem igényel.

A 4-metil-umbelliferil-β-D-glükuronid (MUG) ß-glükuronidázzal történő enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a minta coliform pozitív, sárga buborékjai közül az E. coli pozitívok UV megvilágítás alatt kéken fluoreszkálnak. Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Enterococcusok kimutatása, számlálása Enterolert-DW

Inkubálás: 41 ± 0.5°C/ 24 óra

Klórral, vagy egyéb kezelt ivóvíz

Enterococcusok

Enterolert-E

Inkubálás: 41 ± 0.5°C/ 24 óra

Szennyezett vizek, természetes fürdővizek

Enterococcusok

Természetes megvilágításban a zöld szín pozitív eredményt jelent

UV fényben (650 nm) fluoreszkáló cellák száma


Enterolert-DW, Enterolert-E működése

Enterolert-DW: az orto-nitrofenil-β-D-glükozid (ONPG) glükozidázzal való enzimatikus bontásán alapszik. Az emzimaktivitás eredményeként a pozitív minta színe kékről zöldre változik. Az eljárás UV megvilágítást nem igényel.

Enterolert-E: a 4-metil-umbelliferyl ß-D-glucosid ß-glükozidázzal való enzimatikus bontásán alapszik . Az emzimaktivitás eredményeként a pozitív minta színe UV megvilágításban fluoreszkál. Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Más higiénés szennyezést jelző mikrobák kimutatása, számlálása Hasonló elven működik a többi teszt is, ahol a pozitív buborékok számát vagy az egyszerűen leolvasható elszíneződés, vagy UV fény hatására történő fluoreszkálás adja. Pseudalert – Pseudomonas aeruginosa 24 óra 38 ± 0.5°C-on

SimPlate – Telepszám/Mikrobaszám


Szabványosítás, validálás Coliform és E. coli számlálása Colilert18

98/83 / EK irányelv alternatív módszerként jelöli MSZ ISO 9308-2:1993

MSZ EN ISO 9308-2:2012 a Colilert18 módszert tartalmazza A fáradságos többcsöves módszer helyett a Quanti-Tray/2000 szennyezettebb vizek esetében jól alkalmazható. Megfelel a minta korábbi 3x5 ismétlésű, 1:1, 1:10, 1:100 arányú hígításainak eredményével.


Szabványosítás, validálás Coliform és E. coli , fekál coliform számlálása Colilert 18 MSZ EN ISO 9308-2:2012 Quanti-Tray/2000

Ivóvizek, természetes fürdővizek: Coliform/E. coli vizsgálatán felül, Colilert18 eredménye megfeleltethető az MSZ EN ISO 9308-3:2000 mikrotiter módszernek. Ld. AFNOR val. 2012. A Colilert18 módszer 44.5°C ±0.2°C, 18-22 óra inkubálás mellett alkalmas a Fekál coliformok MPN számának megadására szennyezett vizekből. A módszert az AOAC validálta (Journal of AOAC. InternatIonal Vol. 94,no.5. 2011) Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Szabványosítás, validálás Enterococcusok számlálása MSZ EN ISO 7899-2:2000

Enterolert-DW: Ivóvizek esetében megfeleltethető. Ld. AFNOR val. 2013. Enterolert-E: szennyezettebb vizek, pl. természetes fürdővizek esetében eredménye az MSZ EN ISO 7899-1:2000 módszerének megfeleltethető. Ld. AFNOR val. 2015. IDEXX 2015. áprilisától ISO 17025 szerinti QC bizonyítvánnyal látja el a Coliform / Escherichia coli, Enterococcusok, Pseudomonas aeruginosa és heterotróf telepszám vizsgálatára gyártott termékeit: Colilert, Colilert-18, Enterolert, Enterolert-DW, Enterolert-E, Pseudalert és HPC SimPlate. Hungalimentaria – Budapest, 2015. április 22-23.

Módszerváltások Többcsöves módszer

Membránszűrés

100

% Market Shares

80

60

40

20

0 1900

1950

Years

2000

Irányított szubsztrát technologia


Köszönetnyilvánítás

Dr Mike Cresswell MSB Cbiol. Distributor Support Manager


Köszönjük a figyelmet!


Gyors vizsgálati módszerek a víz mikrobiológiai ellenőrzésében

Recommend Documents