Evy Sulistyoningrum 1, Fajar Wahyu Pribadi 1

Mandala of Health. Volume 4, Nomor 1, Januari 2010

Sulistyoningrum, Suspensi Meniran

PENGARUH PEMBERIAN SUSPENSI MENIRAN (Phyllanthus niruri L.) TERHADAP KERUSAKAN HEPAR TIKUS PUTIH YANG DIINDUKSI ANTITUBERKULOSIS RIFAMPISIN DAN ISONIAZID Evy Sulistyoningrum 1, Fajar Wahyu Pribadi1 1

Fakultas Kedokteran dan Ilmu-Ilmu Kesehatan, Universitas Jenderal Soedirman, Purwokerto E-mail: [email protected]

ABSTRACT Tuberculosis treatment required at least two antituberculosis drugs (ATDs) and long term course. Isoniazid (INH) and Rifampicin are the two most active ATDs and were used in whole course of treatment. INH and Rifampicin combination increased risk of hepatotoxixity. Meniran (Phyllanthus niruri L.) contains phyllanthin, active subtance that is believed to have hepatoprotective activity. The aim of this study was to know the effect of meniran suspension on AST/ALT blood levels and histopathological findings after induction of Rifampicin and INH. Twenty five male albino rats (Rattus norvegicus) wistar strain aged two months and weighed 150-200 grams were divided into five groups of five each. Positive control (A) was treated with aquadest, negative control (B) was treated with Rifampicin and INH; one dose meniran (I) was pre-treated with 16,2 mg meniran before ATDs; two dose meniran (II) was pre-treated with 32,4 mg meniran before ATDs, three dose meniran (III) was pre-treated with 48,6 mg meniran before ATDs. The drugs were administered orally for 28 days. Blood samples for ALT/AST levels and histopathology sample were taken at the end of study. One way ANOVA, post hoc and linear regression were used for data analysis. There was significant mean difference for ALT levels (p=0,000) but not for AST level (p> 0,05). Increasing dose of meniran decreased serum level of ALT (r=-0,539). Vacuolar degeneration, necrosis and portal triad leucocytes infiltration were most common in negative control groups, while these changes were reduced in meniran-treated groups. We can conclude that meniran pretreatment reduces INH-rifampicin-induced hepatotoxicity. Key words: Phyllanthus niruri L., isoniazid, rifampicin, hepatotoxicity, AST/ALT blood levels, histopathological findings of liver

ini potensial meningkatkan resiko kejadian

PENDAHULUAN Tuberkulosis

(TBC)

merupakan

penyakit yang sudah lama dikenal, akan

kerusakan hepar3. Untuk

menghindari

efek

samping

tetapi sampai saat ini TBC masih menjadi

pengobatan

masalah kesehatan utama di seluruh dunia.

hepatoprotektan yang dapat melindungi hati.

Prinsip

Meniran atau Phyllanthus niruri L telah

paling

pengobatan sedikit

dua

TBC

menggunakan

diberikan

digunakan selama lebih dari 2000 tahun

berlangsung dalam jangka panjang1. Lima

untuk pengobatan penyakit kuning, darah

obat lini pertama yang sering digunakan

tinggi,

dalam

diabetes

TBC

obat

dapat

dan

pengobatan

macam

TBC,

adalah

INH,

diare, dan

gonorrhea,

peluruh

batu,

lain-lain.

Meniran

juga

rifampisin, pirazinamid, ethambutol, dan

dipercaya mempunyai efek hepatoprotektif.

streptomisin. INH dan rifampisin merupakan

Phyllanthus niruri L mengandung zat aktif

dua

alkaloid,

obat

yang

paling

aktif

sehingga 2

astragalin,

brevifolin,

asam

digunakan sepanjang waktu pengobatan .

karboksilat, corilagin, cymene, asam ellagit,

Penggunaan kombinasi INH dan rifampisin

ellagitannin,

gallocatechin,

geraniin,

1



hipophyllantin, lignan, lintetralins, lupeols,

hepatotoksik pada tikus wistar adalah 50

metil salisilat, nirantin, nirtetralin, niruretin,

mg/KgBB/hari melalui sonde selama 28

nirurin, niruriside, norsecurinin, phyllanthin,

hari7. Dosis meniran yang digunakan pada

phyllanthinin, phyllanthenol, phyllochryine,

penelitian ini adalah dosis pada manusia

phyltetralin, asam respandusinik, quercetin,

yaitu 900–2.700 mg/hari6 dikalikan faktor

quercetol,

konversi. Pemeriksaan kadar AST dan ALT

quercitrin,

rutin,

saponin,

4

triacontanal, dan tricontanol . Senyawa aktif

dilakukan

yang diduga memiliki efek pelindung hati

pembuatan

5

di

LPPT

sediaan

UGM,

sedangkan

histologis

dengan

adalah phyllantin . Dosis serbuk meniran

pewarnaan Hematoksilin-Eosin dilakukan di

yang digunakan pada pengobatan hepar

Laboratorium Patologi Anatomi FKH UGM.

6

manusia berkisar antara 900–2700 mg/hari . Penelitian

ini

bertujuan

untuk

Penelitian eksperimental

ini

adalah

dengan

penelitian

menggunakan

mengamati aktivitas hepatoprotektif meniran

rancangan

dilihat dari perbaikan kadar AST/ALT dan

Hewan coba dibagi menjadi lima kelompok,

gambaran histologis hepar pasca induksi

yaitu

antituberkulosis.

mendapatkan akuades 5 mL/hari selama 28

Hasil

penelitian

ini

post-test-only

kelompok

control

kontrol

group.

positif

(A)

diharapkan dapat menjadi dasar penggunaan

hari;

suspensi meniran sebagai salah satu alternatif

mendapatkan Rifampisin-INH 50 mg/kgBB

hepatoprotektan yang ditambahkan pada

dalam akuades 5 mL/hari selama 28 hari;

pengobatan TBC dan diharapkan menjadi

kelompok I mendapatkan suspensi meniran

data dasar untuk pengembangan penelitian

16,2 mg dalam 2,5 mL akuades dilanjutkan

yang lebih mendalam.

Rifampisin-INH 50 mg/kgBB dalam akuades

kelompok

kontrol

negatif

(B)

2,5 mL/hari selama 28 hari; kelompok II mendapatkan suspensi meniran 32,4 mg

METODE PENELITIAN Penelitian ini menggunakan 25 ekor

dalam

2,5

mL

akuades

dilanjutkan

tikus putih (Rattus norvegicus) strain wistar


jantan berumur dua bulan dengan berat 150-

2,5 mL/hari selama 28 hari; dan kelompok III

200 gram dalam keadaan sehat dan suspensi

mendapatkan suspensi meniran 48,6 mg

tanaman meniran (Phyllanthus niruri L.)

dalam

yang didapatkan dari Laboratorium Layanan


Praklinik dan Penelitian Terpadu (LPPT)

2,5

UGM. Bahan kimia meliputi Rifampisin,

pemberian suspensi meniran dan Rifampisin-

INH dan akuadest sebagai pelarut didapatkan

INH adalah 30 menit. Pada akhir penelitian

dari

FKIK

dilakukan pengambilan darah melalui vena

UNSOED. Dosis rifampisin dan INH yang

orbital untuk pemeriksaan kadar AST dan

Laboratorium

digunakan

untuk

Farmakologi

menimbulkan

2,5

mL/hari

mL

akuades

selama

28

dilanjutkan

hari.

Interval

efek

2



ALT dan hewan coba dikorbankan dengan

2. Hepar tikus kelompok kontrol positif tidak

cara dekapitasi untuk preparasi hepar.

menunjukkan gambaran peradangan portal, nekrosis hepatosit dan degenerasi vakuoler

Perbedaan rerata kadar ALT dan AST tiap kelompok dianalisis dengan uji ANOVA

(Gambar

2).

1 jalan dengan taraf kepercayaan 95%

kelompok

kontrol

dilanjutkan uji post hoc. Analisis regresi

gambaran kerusakan

linear digunakan untuk mengetahui hubungan

portal ringan sampai sedang (Gambar 3),

antara dosis meniran dengan kadar ALT dan

degenerasi vakuoler ringan (Gambar 4) dan

AST. Data gambaran histopatologis hepar

nekrosis sentrilobuler ringan sampai sedang

dianalisis

(Gambar 5).

secara

menghitung

deskriptif

distribusi

dengan

frekuensi

untuk

HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil pengukuran ALT dan AST

dilanjutkan

pada

tabel

post

hoc

1.

Uji test

negatif

hepar

tikus

menunjukkan

berupa peradangan

Tabel 1. Kadar ALT dan AST tiap kelompok perlakuan

menilai perubahan pada sel dan jaringan.

disajikan

Sedangkan

ANOVA (α=0,05)

menunjukkan bahwa rerata kadar ALT

Kelompok

Kadar ALT (IU/mL)

p*

Kadar AST (IU/mL)

p*

A

26,58 + 2 ,84

B

43,28 + 3,08

0,00

78,92 + 4,71

p>0,05

0,00

88,22 + 7,34

p>0,05

I

25,68 + 2,74

0,00

70,26 + 12,10

p>0,05

II

25,22 + 4, 68

0,00

59,38 + 29,69

p>0,05

III

24,70 + 3,18

0,00

58,28 + 11,89

p>0,05

Data ditampilkan sebagai mean + SD. *Hasil post hoc test, nilai p dibandingkan dengan kelompok B. Kelompok A : kontrol positif; Kelompok B : kontrol negatif (Rifampisin-INH 50 mg/kgBB); Kelompok I : meniran 16, 2 mg+Rifampisin-INH 50 mg/kgBB; Kelompok II : meniran 32,4 mg+Rifampisin-INH 50 mg/kgBB, Kelompok III : meniran 48,6 mg+RifampisinINH 50 mg/kgBB

berbeda bermakna pada kelompok kontrol negatif dengan kelompok kontrol positif, kelompok meniran 1 dosis, 2 dosis, dan 3 dosis (p=0,00), akan tetapi tidak terdapat perbedaan signifikan pada kelompok meniran 1, 2 dan 3 dosis. Terdapat penurunan ALT

Tabel 2. Hasil pemeriksaan histopatologis hepar

mulai pada pemberian meniran 1 dosis. Uji

Peradangan portal

Nekrosis sentrilobuler

Degenerasi vakuoler

A B

Ringan 0 4

Sedang 0 1

Ringan 0 3

Sedang 0 1

Ringan 0 5

Sedang 0 0

I II III

4 3 3

0 0 0

2 0 0

0 0 0

3 3 2

0 0 0

regresi linier menunjukkan bahwa suspensi meniran memberikan kontribusi 29,10 % dalam penurunan kadar ALT dan terdapat hubungan yang kuat antara dosis meniran dengan penurunan kadar ALT (r = -0,54). Hasil analisis statistik untuk rerata kadar AST menunjukkan bahwa rerata kadar AST pada tiap kelompok adalah tidak berbeda bermakna (p> 0,05). Hasil

pemeriksaan

gambaran

histopatologis hepar dapat dilihat pada tabel

Data menampilkan jumlah hewan yang mengalami kelainan histologis. Kelompok A : kontrol positif; Kelompok B : kontrol negatif (Rifampisin-INH 50 mg/kgBB); Kelompok I : meniran 16,2 mg+Rifampisin-INH 50 mg/kgBB; Kelompok II : meniran 32,4 mg+Rifampisin-INH 50 mg/kgBB, Kelompok III : meniran 48,6 mg+Rifampisin-INH 50 mg/kgBB

3



Hepar tikus kelompok meniran 1 dosis mengalami peradangan portal, degenerasi vakuoler dan nekrosis sentrilobuler ringan dengan

frekuensi

yang

lebih

a

kecil

dibandingkan kontrol negatif. Hepar pada kelompok meniran 2 dan 3 dosis tidak mengalami

nekrosis

sentrilobuler

tetapi

mengalami peradangan portal dan degenerasi vakuoler ringan (Gambar 6) dengan frekuensi lebih kecil dibanding kontrol negatif dan meniran 1 dosis.

Gambar 4. Hepar kelompok B. Degenerasi vakuoler (derajat ringan), hepatosit mengalami degenerasi (a) ukurannya membesar dengan sitoplasma vakuoler (Pewarnaan HE, 400x)

a

Gambar 2. Hepar kelompok A. Tampak parenkim dan lobulus hepar normal, tidak terdapat peradangan hepatosit (a) mengelilingi vena sentralis (b) (Pewarnaan HE, 400x)

a

Gambar 5. Hepar kelompok B. Nekrosis (derajat ringan), tampak hepatosit di sekitar vena sentralis kehilangan gambaran inti (a). Pewarnaan HE, 400x)

b

b a Gambar 3. Hepar kelompok B. Peradangan daerah portal (derajat sedang), tampak infiltrat sel radang berwarna ungu (a) disekitar hepatosit normal (b) (Pewarnaan HE, 400x)

Gambar 6. Hepar Kelompok III. Peradangan daerah portal dan degenerasi vakuoler (derajat ringan), tampak kelompok sel radang berwarna ungu (a) disekitarnya tampak hepatosit mengalami degenerasi vakuoler ukurannya membesar dengan sitoplasma vakuoler (b) (Pewarnaan HE, 400x)

4



Hasil pengukuran kadar ALT dan AST

degenerasi vakuoler dengan derajat ringan

pada kelompok yang diberikan Rifampisin

sampai sedang. INH menyebabkan kerusakan

dan INH menunjukkan angka yang lebih

hepar berupa degenerasi vakuoler, nekrosis

tinggi dibandingkan kelompok yang lain.

fokal

Hasil

penelitian

menyebabkan jejas hepatoseluler akut yang

Santhosh et al. yang menyebutkan bahwa

manifest sebagai jejas akut berkisar dari

pemberian

akan

nekrosis fokal sampai gagal hepar fulminan

meningkatkan kadar ALT dan AST, laktat

dan jejas hepatoseluler yang terdiri atas

dehidrogenase, fosfatase asam, dan alkalin

degenerasi vakuoler atau apoptosis disertai

fosfatase, selain itu juga meningkatkan kadar

eosinofilia. Pemakaian INH jangka lama juga

trigliserida, kolesterol dan asam lemak bebas

dapat

di dalam serum. Penelitian lain yang

kronik yang manifest sebagai fibrosis hepatis

ini

konsisten

dengan

8

INH

dan

Rifampisin

9

dan

minimal13.

kolestasis

menyebabkan

jejas

INH

hepatoseluler

konsisten adalah penelitian Kalra et al. yang

dan sirosis14.

menyebutkan pemberian INH dan Rifampisin

Rifampisin muncul sebagai nekrosis yang

meningkatkan kadar ALT dan AST mencapai

tergantung dosis, degenerasi vakuoler dan

3-4 kali lipat.

infiltrasi sel radang15.

Kadar

ALT

merupakan

indikator

INH menimbulkan kerusakan hepar

kerusakan membran sel. Kadar enzim ini

melalui

meningkat secara abnormal pada sel hepar

melibatkan

10

Kerusakan hepar akibat

jalur

idiosinkratik reaksi

yang

dapat

hipersensitivitas 16

yang mengalami peradangan atau kematian .

diperantarai sistem imun . INH merupakan

Kadar AST merupakan indikator kerusakan

inhibitor

11

enzim

sitokrom

P-450

yang

mitokondria . Walaupun AST dan ALT

mengkatalisis fase I atau reaksi hidroksilasi

sering dianggap sebagai enzim hati karena

obat.

tingginya konsentrasi keduanya di dalam

menghasilkan produk metabolit antara yang

hepatosit, namun hanya ALT yang dianggap

jauh lebih toksik dari zat asal dan dapat

spesifik, hal ini dikarenakan AST juga

menyebabkan kerusakan sel hepar akut14.

terdapat di dalam miokardium, otot rangka, 12

otak dan ginjal .

Gangguan

pada

fase

ini

dapat

Rifampisin menimbulkan kerusakan hepar melalui jalur idiosinkratik. Rifampin

Gambaran histopatologis yang dapat

merupakan induktor aktivitas enzim sitokrom

diamati pada kerusakan hepar akibat INH dan

P-45014. Keterlibatan rifampin pada aktivitas

Rifampisin antara lain degenerasi vakuoler,

sitokrom

nekrosis sentrilobuler dan peradangan portal.

homeostasis

Hasil ini konsisten dengan penelitian Kalra et

bertanggung jawab pada kerusakan hepar

9

al.

P-450 kalsium.

ini

mempengaruhi Jalur

lain

yang

yang menyebutkan kerusakan hepar

akibat rifampisin adalah melalui mekanisme

akibat INH dan Rifampisin muncul sebagai

stres oksidatif dimana terjadi peningkatan

inflamasi portal, nekrosis, perlemakan dan

lipid peroksidase15. Penggunaan kombinasi

5


INH dan rifampisin potensial meningkatkan 3


INH

dan

Rifampisin

berkurang

pada

resiko kejadian kerusakan hepar . Rifampisin

pemberian suspensi meniran (Phyllanthus

meningkatkan toksisitas INH melalui induksi

niruri L) mulai dosis 16,2 mg/hari.

sitokrom P-450 karena asetil-INH dari INH diubah menjadi monoasetil hidrazin yang

UCAPAN TERIMA KASIH Ucapan

dikatalisis oleh sitokrom P-450 menjadi zat 15

hepatotoksik lain .

terimakasih

disampaikan

kepada Lembaga Penelitian UNSOED atas

Pemberian

suspensi

meniran

dukungan dana penelitian yang diberikan

menurunkan kadar ALT secara signifikan

oleh

dan

yang

Farmakologi UNSOED dan Laboratorium

peradangan

LPPT UGM untuk penyediaan alat dan bahan

mengurangi

mengalami portal,

frekuensi

kerusakan

nekrosis

hepar

baik

sentrilobuler

maupun

melalui

penelitian

serta

DIPA

II;

Laboratorium

Laboratorium

Patologi

degenerasi vakuoler. Hal ini menunjukkan

Anatomi FKH UGM untuk pengadaan hewan

Phyllanthus

coba dan pembuatan preparat.

niruri

L

memiliki

efek

melindungi hati terhadap kerusakan akibat INH dan Rifampisin. Kandungan Phyllanthus yang diduga bersifat anti-hepatotoksik adalah hypophyllanthin Phyllanthin

phyllanthin .

hypophyllanthin

dapat

memberikan efek hepatoprotektor pada hepar karena

memiliki

Kandungan

aktivitas

antioksidan

1.

5

dan

dan

DAFTAR PUSTAKA

2.

antioksidan17.

ini

melindungi

jaringan hepar dari kerusakan oksidatif dan

3.

18

membantu mekanisme regenerasi sel hepar . Antioksidan

juga

mempunyai

aktivitas

4.

stabilisasi membran sel hepar sehingga mengurangi kerusakan hepar19. 5.

KESIMPULAN Pemberian

suspensi

meniran

(Phyllanthus niruri L) mulai dosis 16,2 mg/hari dapat menurunkan kadar ALT akibat induksi

INH

dan

Rifampisin

6.

secara

signifikan. Semakin besar dosis meniran yang diberikan semakin rendah kadar ALT.

7.

Rahajoe, NN, D Basir, MS Makmuri, CB Kartasasmita (editor), Pedoman Nasional Tuberkulosis Anak, Unit Kerja Koordinasi Pulmonologi, PP Ikatan Dokter Anak Indonesia, Jakarta, 2005. Chambers, Antimycobacterial Drugs, Dalam Katzung, BG (editor), Basic and Clinical Pharmacology, 8th Edition, Lange Medical Books-McGraw-Hill, New York, 2001, 80313. Palmer, Medications and The Liver/Hepatitis, 2004, Available from URL: http://www.liverdisease.com/cf_o/search.jht ml.[diakses pada 21-01-2008] Bagalkotkar G, Sangidu SR, Saad MS, Stansals J, Phytochemicals from Phyllanthus niruri Linn. and Their Pharmacological Properties:A Review, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2006, 58 (12),1559-70. Tabassum NS, Chattervedi S, Aggrawal SS, Ahmed N, Hepatoprotective Studies on Phyllanthus niruri on Paracetamol-Induced Liver Cell Damage in Albino Mice, JK Practitioner, 2005, 12 (4), 211-2. Reichert R, Phytotherapeutic Alternatives for Chronic Hepatitis. Quart Rev Natural Med, 1997, 103–8. Rana S, Ravinder P, Kim V, Kartar S, Effect of Different Oral Doses of IsoniazidRifampicin in Rats, Molecular and Cellular Biochemistry, 2006, 289,:39-47.

Frekuensi kerusakan hepar akibat induksi

6


8.

9.

10.

11.

12.

13.

14.

Santhosh S, Sini TK, Anandan R, Mathew PT, Effect of Chitosan Supplemention on Antitubercular Drugs-Induced Hepatotoxicity in Rats, Toxicology, 2006, 219, 53-9. Kalra BS, Aggarwal S, Khurana N, Gupta U, Effect of Cimetidine on Hepatotoxicity Induced by INH-Rifampicin Combination in Rabbits, Indian J Gastroenterol, 2007, 26,1821. Jensen JE dan Freese D, Liver Function Tests, Rocky Mountain System Inc, Colorado, 2006. Wang FR, Ai H, Chen XM, Lei CL, Hepatoprotective Effect of a ProteinEnriched Fraction from The Maggots (Musca domestica) Against CCl4-Induced Hepatic Damage in Rats, Biotechnol Lett, 2007, 29, 853-8. Sacher RA dan RA McPherson, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium, Edisi 11, 2004, EGC, Jakarta. Mitchell JR, Zimmerman HJ, Ishak KG, Thorgeirsson UP, Timbrell JA, Snodgrass WR, et al., INH Liver Injury; Clinical Spectrum, Pathology and Probable Pathogenesis, Ann Intern Med, 1976, 84, 181-92. Mehta N, Oszick L, Gbadehan E, Drug Induced Hepatotoxicity, 2007. Available from URL:


15. Chen J, dan Raymond K, Roles of Rifampicin in Drug-drug Interactions : Underlying Molecular Mechanisms Involving Nuclear Pregnane X Receptor, Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials, 2006, 5:3. 16. Kaplowitz N, Drug-Induced Liver Injury, 2006, Clinical Infectious Diseases. 38 : S448 17. Kassuya CAL, Leite DVP, de Melo LV, Rehder VLG, Calixto JB, Anti-Inflammatory Properties of Extracts, Fractions and Lignans Isolated from Phyllanthus amarus, Planta Med, 2005, 71, 721-6. 18. Bhattacharjee, R dan Sil PC, Protein Isolate from the Herb, Phyllanthus niruri L. (Euphorbiaceae), Plays Hepatoprotective Role Against Carbon Tetrachloride Induced Liver Damage via Its Antioxidant Properties, Food and Chemical Toxicology, 2007, 45 (5),817-26. 19. Tasduq SA, Singh K, Satti NK, Gupta DK, Suri KA, Johri RK, Terminalia chebula (fruit) Prevents Liver Toxicity Caused by Sub-chronic Administration of Rifampicin, INH and Pyrazinamide in Combination, Hum Exp Toxicol, 2006, 25 (3), 111-8.

http://www.emedicine.com/cf_o/searc h.jhtml.[20-01-2008]

7

Evy Sulistyoningrum 1, Fajar Wahyu Pribadi 1

Recommend Documents