EFEK KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH (Piper betle L) DENGAN AMOKSISILIN TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus
SKRIPSI
OLEH: REMON GORTAP SIAHAAN NIM 121524135
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
Universitas Sumatera Utara
EFEK KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH (Piper betle L) DENGAN AMOKSISILIN TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus
SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara OLEH: REMON GORTAP SIAHAAN NIM 121524135
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI EFEK KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH (Piper betle L) DENGAN AMOKSISILIN TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus OLEH: REMON GORTAP SIAHAAN NIM 121524135 Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Pada Tanggal: 2 Juni 2016 Disetujui Oleh: Pembimbing I,
Panitia Penguji:
Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt. NIP 197812052010121004
Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
Pembimbing II,
Popi Patilaya, S.Si, M.Sc., Apt. NIP 197812052010121004
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt. NIP 195310301980031002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt. NIP 195107231982032001
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt. NIP 195112231980032002
Medan, Juli 2016 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Kuasa atas segala limpahan rahmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara dengan judul “Efek Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Sirih (Piper betle L) dengan Amoksisilin terhadap Pertumbuhan Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus”. Pada kesempatan ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesarbesarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, Bapak Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt., dan Bapak Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah meluangkan waktu, memberikan bimbingan dan nasehat selama penelitian sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi ini. Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan saran, arahan, kritik dan masukan kepada penulis dalam penyelesaian skripsi ini. Ucapan terima kasih juga penulis sampaikan kepada Ibu Dra. Erly Sitompul, M.S., Apt., selaku penasehat akademik yang telah memberikan arahan dan bimbingan kepada penulis serta Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah mendidik penulis selama masa perkuliahan. Ucapan terima kasih penulis kepada Ibu kepala Laboratorium Farmakognosi dan Laboratorium Mikrobiologi yang telah memberikan bantuan dan fasilitas.
iv
Universitas Sumatera Utara
Ucapan terima kasih dan penghargaan yang sebesar-besarnya kepada Alm. Ayahanda tercinta Bangun Siahaan dan Ibunda Darna Aritonang serta ucapan terima kasih penulis kepada abang dan kakak tercinta yang selalu memberikan motivasi untuk terus berjuang menyelesaikan penyusunan skripsi ini. Semoga Tuhan Yesus memberikan balasan yang berlipat ganda dan pahala yang sebesarbesarnya kepada semua pihak yang telah membantu dalam penyelesaian skripsi ini. Penulis menyadari bahwa tulisan ini masih jauh dari kesempurnaan. Penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang Farmasi.
Medan, Penulis,
Juli 2016
Remon Gortap Siahaan NIM 121524135
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan dibawah ini: Nama
: Remon Gortap Siahaan
Nomor Induk Mahasiswa
: 121524135
Program Studi
: Ekstensi Farmasi
Judul Skripsi
: Efek kombinasi ekstrak etanol daun sirih (piper betle L) dengan amoksisilin terhadap pertumbuhan bakteri escherichia coli dan Staphylococcus aureus.
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka. Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena didalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing. Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Juli 2016 Yang membuat pernyataan,
Remon Gortap Siahaan NIM 121524135
vi
Universitas Sumatera Utara
EFEK KOMBINASI EKSTRAK ETANOL DAUN SIRIH (Piper betle L) DENGAN AMOKSISILIN TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Escherichia coli DAN Staphylococcus aureus ABSTRAK Kombinasi antibiotik dan ekstrak tanaman merupakan konsep baru untuk pengobatan infeksi bakteri resisten. Daun sirih memiliki aktivitas antibakteri terhadap Escherichia coli dan Staphylococcus aureus karena mengandung metabolit sekunder seperti senyawa flavonoid, saponin, tanin, dan minyak atsiri. Kombinasi ekstrak dengan amoksisilin perlu diuji untuk mengetahui efektivitas dibandingkan tunggal. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui karakteristik simplisia dan ekstrak serta aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin. Simplisia dikarakterisasi untuk menentukan kadar air, kadar sari larut dalam air, kadar sari larut dalam etanol, kadar abu total, dan kadar abu tidak larut asam serta kandungan senyawa kimia. Ekstrak diperoleh dengan menyari serbuk simplisia dalam etanol 96% secara maserasi. Kandungan senyawa kimia ekstrak daun sirih juga diuji dalam penelitian ini. Uji aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin menggunakan bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dilakukan dengan metode difusi agar menggunakan cakram kertas. Serbuk simplisia daun sirih mengandung kadar air 3,66%, kadar sari larut dalam air 22,54%, kadar sari larut etanol 14,65%, kadar abu total 9,25%, dan kadar abu tidak larut dalam asam 1,03%. Serbuk simplisia dan ekstrak etanol daun sirih mengandung senyawa flavonoid, saponin, tanin dan steroid/triterpenoid. Aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih memiliki konsentrasi hambat minimum (KHM) pada bakteri Escherichia coli pada konsentrasi 8 mg/mL dengan diameter zona hambat 7,22 mm dan pada amoksisilin 5 µg/mL dengan diameter zona hambat 6,83 mm. Pada bakteri Staphylococcus aureus konsentrasi hambat minimum (KHM) untuk ekstrak etanol daun sirih pada konsentrasi 9 mg/mL dengan diameter zona hambat 6,23 mm dan untuk amoksisilin 10 µg/mL dengan diameter zona hambat 7,05 mm. Kombinasi ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin untuk bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus dengan konsentrasi hambat minimum (KHM) dari keduanya mengalami peningkatan diameter zona hambat dan memiliki efek yang sinergis. Kata kunci:
antibakteri, kombinasi, KHM, daun sirih, amoksisilin, Escherichia coli,Staphylococcus aureus.
vii
Universitas Sumatera Utara
THE COMBINATION EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF BETEL LEAF WITH AMOXICILLIN AGAINTST BACTERIAL GROWTH Escherichia coli AND Staphylococcus aureus ABSTRACT The combination of antibiotic and plant extract is a new concept and has been used for the treatment of resistant bacterial infections. Betel leaves have antibacterial activity against Escherichia coli and Staphylococcus aureus because they contain secondary metabolites such as flavonoid, saponin, tanin, and steroid/ triterpenoid. Extract combination with amoxicillin needs to be tested to determine the effectiveness of a single comparison. This study aims was to investigated the characteristics of simplex, extract and antibacterial activity of ethanol extract of betel leaf wihich was combinated with amoxicillin. Simplisia characterized to determine the water content, the levels of soluble extract in water, the levels of soluble extract in ethanol, total ash and acid insoluble ash content and the amount of chemical compounds. The extraction of betel leef was maseration by using ethanol 96%. The content of betel leaf extract chemical compounds were also tested in this research. Antibacterial activity test of ethanol extract of betel leaf which was combination with amoxicillin using the Escherichia coli and Staphylococcus aureus as a bacterium that was agar diffusion method by using the paper discs. Powder simplicia betel leaf was obtained water content is 3.66%, water soluble extract value content 22.54%, ethanol soluble extract content value 14.65%, total ash value 9.25%, and the acid insoluble ash value 1.03%. Phytochemical screening of simplicia powder and ethanol extract of betel leaves contained flavonoid, saponin, tanin and steroid. Antibacterial activity test of ethanol extract of betel leaf had minimum inhibitory concentration (MIC) of the bacteria Escherichia coli at a concentration 8 mg / mL with a diameter zone of inhibition 7,22 mm and mix of amoxicillin 5 ug / mL with diameter zone of inhibition 6.83 mm. While Staphylococcus aureus bacteria had minimum inhibitory concentration (MIC) of ethanol extracts of betel leaf at a concentration of 9 mg / mL with a diameter of 6.23 mm and mix of amoxicillin and 10 ug / mL with diameter zone inhibition 7.05 mm. Antibacterial activity test of combination ethanol extracts of betel leaf with amoxicillin for both of Escherichia coli and Staphylococcus aureus had increase minimum inhibitory concentration (MIC) and diameter of zone inhibition and have a synergistic effect. Keywords:
antibacterial, combination, MIC, betel Escherichia coli, Staphylococcus aureus.
leaves,
amoxicillin,
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman JUDUL ........................................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................
iii
KATA PENGANTAR ................................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ............................................
vi
ABSTRAK ..................................................................................................
vii
ABSTRACT ................................................................................................
viii
DAFTAR ISI ...............................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .......................................................................................
xiv
DAFTAR GAMBAR ..................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ...............................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .......................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ...............................................................
2
1.3 Hipotesis ................................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian ...................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian .................................................................
4
1.6 Kerangka Pikir Penelitian ......................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...............................................................
6
2.1
Uraian Tanaman Sirih..........................................................
6
2.1.1 Morfologi tanaman sirih.............................................
6
2.1.2 Sistematika tanaman sirih ..........................................
6
2.1.3 Nama lain tanaman sirih ............................................
7
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.4 Kandungan dan khasiat ..............................................
7
Ekstraksi ..............................................................................
7
2.2.1 Metode ekstraksi ........................................................
8
Antibiotik.............................................................................
9
2.3.1 Penggolongan antibiotik ............................................
9
2.3.2 Amoksisilin ................................................................
12
2.3.2.1 Uraian umum amoksisilin .............................
12
2.3.2.2 Farmakologi amoksisilin ...............................
12
2.3.3 Kombinasi zat yang bersifat antibakteri.....................
13
2.4
Sterilisasi .............................................................................
14
2.5
Bakteri .................................................................................
15
2.5.1 Fase pertumbuhan bakteri ..........................................
17
2.5.2 Klasifikasi bakteri ......................................................
18
2.2
2.3
2.6
Uraian Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli ......................................................................................
19
2.6.1 Bakteri Escherichia coli .............................................
19
2.6.2 Bakteri Staphylococcus aureus...................................
19
2.6.3 Pengukuran aktivitas antibakteri ................................
20
BAB III METODE PENELITIAN..............................................................
22
3.1
Tempat Pelaksanaan Penelitian ...........................................
22
3.2
Alat dan Bahan ....................................................................
22
3.2.1 Alat-alat ......................................................................
22
3.2.2 Bahan-bahan...............................................................
23
Penyediaan Sampel ..............................................................
23
3.3.1 Pengambilan Sampel ..................................................
23
3.3.2 Identifikasi tanaman ...................................................
23
3.3
x
Universitas Sumatera Utara
3.4
3.5
3.6
3.3.3 Pengolahan simplisia..................................................
23
Pemeriksaan Karakteristik Simplisia ...................................
24
3.4.1 Pemeriksaan organoleptik ..........................................
24
3.4.2 Pemeriksaan makroskopik .........................................
24
3.4.3 Pemeriksaan mikroskopik ..........................................
24
3.4.4 Penetapan kadar air ....................................................
24
3.4.5 Penetapan kadar sari larut dalam air ..........................
25
3.4.6 Penetapan kadar sari larut dalam etanol .....................
25
3.4.7 Penetapan kadar abu total ..........................................
26
3.4.8 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam .............
26
Pembuatan Larutan Pereaksi ...............................................
26
3.5.1 Larutan pereaksi bouchardat ......................................
26
3.5.2 Larutan pereaksi molisch ...........................................
26
3.5.3 Larutan pereaksi dragendorff .....................................
27
3.5.4 Larutan pereaksi asam klorida 2N .............................
27
3.5.5 Larutan pereaksi asam sulfat 2N ................................
27
3.5.6 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2N ....................
27
3.5.7 Larutan pereaksi Liebermann-burchard .....................
27
3.5.8 Larutan pereaksi besi (iii) klorida 1% ........................
27
3.5.9 Larutan pereaksi timbal asetat 0,4 M .........................
27
3.5.10 Larutan pereaksi mayer ............................................
28
Uji Golongan Senyawa Kimia .............................................
28
3.6.1 Pemeriksaan alkaloida................................................
28
3.6.2 Pemeriksaan glikosida................................................
28
3.6.3 Pemeriksaan flavonoida .............................................
29
3.6.4 Pemeriksaan tannin ....................................................
29
xi
Universitas Sumatera Utara
3.6.5 Pemeriksaan saponin ..................................................
29
3.6.6 Pemeriksaan steroida/triterpenoida ............................
30
3.7
Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih ................................
30
3.8
Pembuatan Larutan Uji Ekstrak Etanol Daun sirih .............
30
3.9
Pembuatan Larutan Uji Amoksisilin ...................................
31
3.10 Pembuatan Larutan Uji Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Sirih dengan Amoksisilin ....................................................
31
3.10.1 Pembuatan larutan uji kombinasi ekstrak etanol Daun Sirih dengan amoksisilin terhadap bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus .........
31
3.11 Sterilisasi Alat .....................................................................
32
3.12 Pembuatan Media ................................................................
32
3.12.1
Pembuatan media nutrient agar (NA) ...................
32
3.12.2
Pembuatan media nutrient broth (NB) ..................
33
3.12.3
Pembuatan agar miring..........................................
33
3.13 Pembiakan Bakteri...............................................................
33
3.13.1
Pembuatan stok kultur bakteri ...............................
33
3.13.1.1 Bakteri Staphylococcus aureus ................
33
3.13.1.2 Bakteri Escherichia coli .........................
33
3.13.2 Pembuatan inokulum bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .................................
33
3.14 Pengujian Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .................................................................
34
3.15 Pengujian Aktivitas Antibakteri Amoksisilin terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .........
34
3.16 Pengujian Aktivitas Antibakteri Ektsrak Etanol Daun Sirih Kombinasi dengan Amoksisilin terhadap Bakteri Escherichia coli dan Staphylococcus aureus ....................
35
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................
36
xii
Universitas Sumatera Utara
4.1
Identitas Tanaman ...............................................................
36
4.2
Karakteristik Simplisia ........................................................
36
4.2.1 Pemeriksaan karakterisasi ..........................................
36
4.3
Skrinning Fitokimia .............................................................
38
4.4
Rendemen Simplisia dan Ekstrak ........................................
39
4.5
Pemeriksan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli ...................................................................
39
Pemeriksaan Uji Aktivitas Antibakteri Amoksisiliterhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli ...................................................................
42
Efek Kombinasi Aktivitas Antibakteri Antara Ekstrak Etanol Daun Sirih dengan Amoksisilin terhadap Bakteri Staphylococcus aureus ........................................................
44
Pemeriksaan Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Sirih Kombinasi dengan Amoksisilin terhadap Bakteri Escherichia coli .....................................................
48
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.....................................................
51
4.6
4.7
4.8
5.1
Kesimpulan ..........................................................................
51
5.2
Saran ....................................................................................
51
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................
52
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL Tabel
Halaman
4.1
Hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia daun sirih .................
37
4.2
Hasil uji golongan senyawa kimia daun sirih .............................
39
4.3
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli ..................
40
Hasil uji aktivitas antibakteri amoksisilin terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli .............................
43
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih Kombinasi dengan amoksisilin terhadap bakteri Staphylococcus aureus ...............................................................
45
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih Kombinasi dengan amoksisilin terhadap bakteri Escherichia coli...............................................................................................
48
4.4
4.5
4.6
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Rumus bangun amoksisilin.......................................................
12
2.2
Efek kombinasi agen mikroba secara DDT ..............................
14
4.1
Hasil uji aktivitas kombinasi antibakteri ekstrak etanol daun Sirih dengan amoksisilin terhadap bakteri staphylococcus aureus .......................................................................................
45
Grafik perbandingan uji aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak etanol daun sirih dengan KHM amoksisilin terhadap bakteri Staphylococcus aureus .................................................
46
Hasil uji aktivitas antibakteri amoksisilin kombinasi dengan ektrak etanol daun sirih terhadap bakteri Staphylococcus aureus .......................................................................................
46
Grafik perbandingan uji aktivitas antibakteri kombinasi dari KHM ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin terhadap bakteri staphylococcus aureus ..................................................
47
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin terhadap bakteri Escherichia coli ..........................
48
Grafik perbandingan uji aktivitas antibakteri kombinasi ekstrak etanol daun sirih dengan KHM amoksisilin terhadap bakteri Escherichia coli ...........................................................
49
Hasil uji aktivitas antibakteri amoksisilin kombinasi dengan ekstrak etanol daun sirih terhadap bakteri Escherichia coli .....
49
Garfik perbandingan uji aktivitas antibakteri kombinasi dari KHM ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisili terhadap Bakteri Escherichia coli ...........................................................
50
4.2
4.3
4.4
4.5
4.6
4.7
4.8
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1
Tanaman sirih dan daun sirih ................................................
56
2
Gambar daun sirih kering serta serbuk simplisia daun sirih ..
57
3
Hasil pemeriksaan mikroskopik daun sirih dengan serbuk Simplisia daun sirih ................................................................
58
4
Perhitungan karakterisasi simplisia daun sirih .......................
59
5
Bagan penelitian .....................................................................
63
6
Hasil uji aktivitas antibakteri yang menunjukkan efeksinergis antara ekstrak etanol daun sirih kombinasi dengan amoksisilin terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli ...............................................................
64
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih terhadap bakteri Staphylococcus aureus ...............................
65
Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih terhadap bakteri Escherichia coli ...........................................
66
Hasil uji aktivitas antibakteri amoksisilin terhadap pertumbuhan bakteri Staphylococcus aureus .........................
67
Hasil uji aktivitas antibakteri amoksisilin terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli....................................
68
Hasil uji kombinasi aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin terhadap bakteri Staphylococcus aureus .....................................................................................
69
Hasil uji kombinasi aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih dengan amoksisilin terhadap bakteri Esherichia coli.....
70
Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih terhadap bakteri Staphylococcus aureus ...............................
71
Gambar uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun sirih terhadap bakteri Escherichia coli ...........................................
72
Gambar uji aktivitas antibakteri amoksisilin terhadap bakteri Staphylococcus aureus ...............................................
74
7
8
9
10
11
12
13
14
15
xvi
Universitas Sumatera Utara
16
Gambar uji aktivitas antibakteri amoksisilin terhadap bakteri Escherichia coli ......................................................................
75
xvii
Universitas Sumatera Utara
