Dr. Kriszt Balázs tanszékvezető egyetemi docens
Élelmiszerek, takarmányok mintavétele aflatoxin-vizsgálatokra, a mikotoxinok bevitele az állati szervezetbe a takarmányokon keresztül Szipola Ilona Élelmiszerbiztonsági Üzletág-vezető helyettes
Témakörök
• • • • • •
Aflatoxin szennyezettség eloszlása Hibaterjedés Mintavételi előírások Mintavevő eszközök, mintavételi terv Mintavétel folyamata Takarmány szennyezettség carryover (átvitel) hatása tejben
Aspergillus flavus telepek a kukorica csövén
Aspergillus flavus telepek a kukorica szemén
Hombárok
Római kori hombár
Középkori angol hombár
Síktároló épület metszete
Gabonasilók
Szállítóeszközök vízen, közúton, vasúton…
Egyenetlen szennyezőanyag-eloszlás
Egyenetlen szennyezőanyag-eloszlás
Egyenletes szennyezőanyag-eloszlás
Hibaterjedés mintavétel – vizsgálati eredmény 1/2
Alapsokaság (tétel)
Mintavételi hiba
Minta
Következtetés a tétel minőségére
Mintatárolás nem-megfelelősége Minta-előkészítés Minta-előkészítés hibája Laboratóriumi minta
Mérési hiba (referencia, műszer, személyzet Analitikai mérés Elvi, számolási hiba Vizsgálati jegyzőkönyv
Hibaterjedés mintavétel – vizsgálati eredmény 2/2
+
Mintavételi hiba (≈80%)
+
Előkészítési Mérési hiba hiba
=
A teljes folyamat hibája (bizonytalansága)
Mérési eredmények valószínűsége
Carl Friedrich Gauss (Gauß) (1777. április 30. – 1855. február 23.) német matematikus és természettudós.
Gyakoriság
Mérési bizonytalanság
Ha a mérési eredmények sokasága normális eloszlású: A gyakoriság görbéje egy Gaussfüggvénnyel írható le. A nem homogén sokaság statisztikai viselkedése ennél jóval kedvezőtlenebb! -3
-2
-1
0 Szórás (σ; s)
1
2
3
Szabványok
MSZ 6367-1:1983
Élelmezési, takarmányozási, ipari magvak és hántolt termények. Előkészítés és mintavétel
MSZ 6884-2:1994
Takarmányvizsgálati módszerek. Mintavétel
MSZ EN ISO 24333:2010
Gabonafélék és gabonatermékek. Mintavétel
MSZ EN ISO 6497:2005
Takarmányok. Mintavétel
Jogszabályok
A BIZOTTSÁG 152/2009 EK a takarmányok hatósági RENDELETE ellenőrzése során alkalmazott mintavételi és vizsgálati módszerek megállapításáról A BIZOTTSÁG 401/2006/EK az élelmiszerek mikotoxin RENDELETE tartalmának hatósági ellenőrzéséhez használandó mintavételi és elemzési módszerek megállapításáról
Mintavevő eszközök
Pneumatikus mintavevő Mintavevő kanál
Mintavevő pipetta
Mintavevő dárda
Zsákmintázó stekker
Sablonok a mintavételhez
Teherautó, vasúti vagon mintavételi pontjai
Uszály, osztott rakterű ömletsztett árut szállító eszköz
36 kukoricaszem, közülük 4 szem szennyezett…
Alapsokaság (tétel, batch, lot) Sötét:Világos = 1:8
Reprezentatív minta: 9 kukoricaszemből 1 szennyezett
Reprezentatívnak tekinthető minta
Alapsokaság (tétel, batch, lot) Sötét:Világos = 1:8 Minta - Sötét:Világos = 1:8
Gabonafélék mintavétele
A tételek altételekre való osztása a terméktől és a tétel tömegétől függően
Árucikk
Gabonafélék és gabonakészít mények
A tétel tömege Az altételek (tonna) tömege vagy száma ≥ 1 500 500 tonna
A részminták száma 100
Az egyesített minta tömege (kg) 10
> 300 és < 1 500 ≥ 50 és ≤ 300
3 altétel
100
10
100 tonna -
100 3–100
10 1–10
< 50
Laboratóriumi minta előállítása Homogenizálás Ellenőrzési minta Érdekvédelmi minta Érdekvédelmi minta Ellenőrzési minta Érdekvédelmi minta Érdekvédelmi minta
Ellenőrzési minta
Érdekvédelmi minta Érdekvédelmi minta 100 db egyedi minta
30 kg egyesített minta
10-10 kg tömegű részminták
10-10 kg tömegű homogenizált részminta
Párhuzamos minták
Tej mintavétele
Kereskedelmi forma
A tétel térfogata vagy tömege (liter vagy kg)
A részminták legkisebb száma
Az egyesített minta legkisebb térfogata vagy tömege (l, kg)
Ömlesztett
-
3–5
1
Palack/csomag
≤ 50
3
1
Palack/csomag
50–500
5
1
Palack/csomag
> 500
10
1
Tak. mikotoxin szennyezettségének carry-over hatása tejben
A takarmányokban előforduló aflatoxin B1 a tejtermelő állatok szervezetébe kerülve a bendő mikroflórájának hatására átalakul és Aflatoxin M1 formában a véráramon keresztül a májba jut és ott raktározódik valamint megjelenik a tejben .
A takarmányokban előforduló Fusarium toxinok (DON, F2, T2, fumonizinek) bejutása a tejbe nagyon alacsony hatásfokú. Az ochratoxin A felhalmozódási helye a máj és a vese. Nem jellemző a tejbe való átmenet.
Az aflatoxin B1 átjutása a takarmányokból a tejbe
Az aflatoxinok gyorsan felszívódnak a tehenek gyomor-bélcsatornájából. Egy korai felszívódásra már a száj vagy a nyelőcső nyálkahártyáján keresztül is sor kerülhet, még mielőtt a toxinok a bendőbe jutnak. Az aflatoxin B1 biotranszformációja főleg a májban zajlik, ahol a mitokondriális citokróm P450 oxidatív rendszer az aflatoxin B1-et átalakítja aflatoxin M1gyé. Az aflatoxin B1 szájon át történő felvétele után már mintegy 15–30 perccel kimutatható aflatoxin M1 szintek lehetnek a tejben. A tej aflatoxin M1 szintjei – a felvett toxin mennyiségtől függően – a toxinfelvétel után mintegy 45–60 perccel érik el a csúcsértékeket. A felvett aflatoxin B1 kb. 5%-a kerülhet be a tejbe. Ha a teheneknek közvetlenül a fejés előtt aflatoxinnal szennyezett takarmányt adunk, nagyobb lesz az esélye annak, hogy magas aflatoxin M1 szintek jelennek meg a tejben. Ha a fejés után etetjük meg a teheneket, ez kedvező lehet az adott napon kifejt tej toxintartalma szempontjából, de az ilyenkor felvett aflatoxin B1 aflatoxin M1 formájában jelen lesz a következő napon kifejt tejben. (Dewegovda, 1998.).
Az aflatoxin B1 átjutása a takarmányokból a tejbe
The EFSA Journal (2004) 39, 1-27
Opinion of the Scientific Panel on Contaminants in the Food Chain on a request from the Commission related to Aflatoxin B1 as undesirable substance in animal feed
(Request N° EFSA-Q-2003-035) (adopted on 3 February 2004)
Az aflatoxin B1 átjutása a takarmányokból a tejbe
A tejelő tehén tejébe naponta átkerülő aflatoxin M1 mennyisége a naponta adagolt takarmány szennyezettségétől függően: 10,95 + 0,787 * (X μg aflatoxin B1) = aflatoxin M1 (ng/kg tej)
X = aflatoxin B1 a napi takarmánybevitellel a takarmány aflatoxin-szennyezettségéből számított érték
Petterson (1998) Swedish University of Agricultural Sciences, Upsala,Sweden http://www.google.hu/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=4&ved=0CDoQFjAD&url=http%3A%2F%2Fwww.nebih.gov.hu%2Fdata%2Fcms %2F143%2F48%2Fszennyezok.ppt&ei=dSSxUMy0CoSPswbPj4GQDQ&usg=AFQjCNGExtF6t4mfOTcwhkS1-fkne_sOPA
Az aflatoxin B1 átjutása a takarmányokból a tejbe
ng/L M1
50
µg/kg B1
Köszönöm megtisztelő figyelmüket