LAMPIRAN. Larutan dapar fosfat ph 7,4 isotonis

LAMPIRAN Lampiran 1. Flowsheet pembuatan larutan dapar fosfat pH 7,4 isotonis Natrium dihidrogen fosfat

Dinatrium hidrogen fosfat

ditimbang 0,8 g

ditimbang 0,9 g

dilarutkan dengan 100 ml aquadest bebas CO2

dilarutkan dengan 100 ml aquadest bebas CO2 dipipet 80 ml

dipipet 20 ml campuran

ditambahkan 0,44 g/100 ml NaCl diaduk sampai larut dan dihomogenkan Larutan dapar fosfat pH 7,4 isotonis

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Flowsheet pembuatan usus halus homogen Kelinci jantan dipuasakan selama 20-24 jam dianastesi dibedah pada bagian perut tetapi jangan sampai mengenai tulang dada Usus halus dibersihkan bagian dalam dan bagian luarnya dicuci dengan NaCl fisiologis dingin ditimbang dipotong kecil-kecil dimasukkan kedalam alat homogenizer mixer ditambahkan dapar fosfat pH 7,4 isotonis dingin sebanyak 5 kali berat usus halus dihomogenkan Usus halus homogen dipipet 50 µl dimasukkan kedalam politube disimpan pada temperature 0-40C dengan bantuan es 50 µl usus halus homogen


Lampiran 3. Flowsheet pembuatan LIB I parasetamol dalam dapar fosfat pH 7,4 isotonis 100 mg parasetamol dimasukkan kedalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis ditambahkan dapar fosfat pH 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok homogen LIB I dengan konsentrasi 2000 mcg/ml


Lampiran 4. Flowsheet pembuatan LIB II parasetamol dalam dapar fosfat pH 7,4 isotonis LIB I parasetamol

dipipet masing-masing 0,5 ml; 1 ml; 1,5 ml; 2 ml; 3,5 ml; 4,5 ml; 5,5 ml; 6,5 ml dan 7,5 ml dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml ditambahkan dapar fosfat pH 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok homogen LIB II dengan konsentrasi 100 mcg/ml, 200 mcg/ml, 300 mcg/ml, 400 mcg/ml, 700 mcg/ml, 900 mcg/ml, 1100 mcg/ml, 1300 mcg/ml, 1500 mcg/ml


Lampiran 5. Flowsheet pembuatan larutan parasetamol dengan berbagai konsentrasi 7,5 mg; 15,1 mg; 22,6 mg; 37,8 mg; 75,5 mg parasetamol baku dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis dicukupkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok sampai homogen Larutan parasetamol dengan konsentrasi 1 mM, 2 mM, 3 mM, 5 mM, 10 mM


Lampiran 6. Flowsheet pembuatan larutan aspirin dengan berbagai konsentrasi 0,9 mg; 2,7 mg, 4,5 mg aspirin baku dimasukkan masing-masing ke dalam labu tentukur 50 ml dilarutkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis dicukupkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis sampai garis tanda dikocok sampai homogen Larutan aspirin dengan konsentrasi 0,1 mM, 0,3 mM dan 0,5 mM


Lampiran 7. Flowsheet penentuan kurva absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan 50 µl Usus halus homogen disimpan pada temperatur 0-40C dengan bantuan es diprainkubasikan selama 3 menit pada suhu kamar dimasukkan 100 µl LIB I kedalam politube dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada suhu kamar ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm

Supernatan dipipet 0,5 ml

Endapan (dibuang)

dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis dingin diukur absorbansinya pada panjang gelombang 200-400 nm Panjang gelombang maksimum


Lampiran 8. Kurva absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan


Lampiran 9. Flowsheet penentuan kurva kalibrasi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan 50µl Usus halus homogen disimpan pada temperature 0-40C dengan bantuan es diprainkubasi selama 3 menit dimasukkan 100 µl LIB II kedalam politube dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada temperatur 270C ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm


Endapan (dibuang)

dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml cukupkan dengan dapar fosfat pH 7,4 isotonis dingin sampai garis tanda diukur absorbansinya dengan spektrofotometer pada λ 243,5 nm Hasil


Lampiran 10. Flowsheet penentuan absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan

50µl Usus halus homogen disimpan pada temperatur 0-40C dengan bantuan es diprainkubasi selama 3 menit dimasukkan 100 µl larutan obat berbagai konsentrasi kedalam politube dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada suhu kamar diinkubasi dengan variasi waktu 0,5 menit, 0,75 menit, 1 menit, 2 menit, 3 menit, 5 menit, 7 menit, 10 menit dan 15 menit ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm


Endapan (dibuang)



Lampiran 11. Flowsheet penentuan absorpsi parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan

50µl Usus halus homogen disimpan pada temperatur 0-40C dengan bantuan es diprainkubasi selama 3 menit dimasukkan 100 µl larutan obat parasetamol berbagai konsentrasi kedalam politube dimasukkan 100 µl larutan aspirin konsentrasi ke dalam politube yang sama

berbagai

dihomogenkan dengan touch mixer diinkubasi selama 3 menit pada suhu kamar diinkubasi dengan variasi waktu 0,75 menit, 2 menit dan 5 menit ditambahkan etanol sebanyak 4 kali volume sampel dihomogenkan dengan touch mixer disentrifuse selama 30 detik, 3000 rpm


Endapan (dibuang)



Lampiran 12. Penentuan persamaan regresi dan kurva kalibrasi parasetamol pada usus halus kelinci yang dihomogenkan dalam dapar fosfat pH 7,4 isotonis Konsentrasi (ppm) X 0 100 200 300 400 700 900 1100 1300 1500

Absorbansi

Σx = 6500

Σy = 2,5582

Y 0 0,0379 0,0741 0,1354 0,1678 0,2861 0,3546 0,4327 0,4954 0,5742

x2

y2

XY

0 10000 40000 90000 160000 490000 810000 1210000 1690000 2250000 Σ x2 = 6750000

0 0,00143641 0,00549081 0,01833316 0,02815684 0,08185321 0,12574116 0,18722929 0,24542116 0,32970564 Σ y2 = 1,02336768

0 3,7900 14,8200 40,6200 67,1200 200,2700 319,1400 475,9700 644,0200 861,3000 Σxy = 2627,0500

x = 650 y = 0,25582 Persamaan regresi : y = ax + b

a=

∑ xy − (∑ x)(∑ y) / n ∑ x − (∑ x ) / n

a=

2627,05 − (6500)(2,5582) / 10 6750000 − (6500) 2 / 10

2

2

a = 0,0003

b = y – ax b = 0,25582– (0,0003)(650) b = 0,0200 Jadi, persamaan regresi adalah y = 0,0003x + 0,0200 r=

r=

∑ xy − (∑ x)(∑ y) / n {∑ x − (∑ x) / n)}(∑ y − (∑ y ) 2

2

2

/ n}

2627,05 − (6500)(2,5582) / 10 {6750000 − (6500) 2 / 10}{1,02336768 − (2,5582) 2 / 10}

r = 0,9986


Lampiran 13. Contoh perhitungan konsentrasi larutan obat parasetamol 2 mM Contoh perhitungan konsentrasi larutan obat parasetamol dengan menggunakan rumus sebagai berikut sehingga diperoleh konsentrasi 2 mM :

C=

mg 1000 x BM V

C=

15,11 1000 x 151,16 50

C = 2 mM


Lampiran 14. Contoh perhitungan konsentrasi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan pada dapar fosfat pH 7,4 isotonis Konsentrasi parasetamol dihitung dengan menggunakan persamaan regresi dari kurva kalibrasi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan pada dapar fosfat pH 7,4 isotonis: Y = 0,0003x + 0,02 Sebagai contoh, absorpsi parasetamol dengan konsentrasi 1 mM pada t = 0,5 menit diperoleh absorbansi = 0,0552 maka : X =

Y − 0,02 0,0003

X =

0,0552 − 0,02 0,0003

X = 117,67 mcg/ml = 0,7785 mM Ini merupakan konsentrasi supernatan, untuk memperoleh konsentrasi yang diabsorpsi maka dikurangkan dengan konsentrasi awal, maka diperoleh konsentrasi yang diabsorpsi: Cterabsorpsi = C0 - Csupernatan Cterabsorpsi = 1- 0,7785 mM Cterabsorpsi = 0,2215 mM


Lampiran 15. Contoh perhitungan Standar Deviasi No 1 2 3

x 0,2700 0,1995 0,2017 Σx = 0,6711 x = 0,2237

x-x 0,0463 -0,0242 -0,022

(x-x)2 0,00214369 0,00058564 0,00048400 Σ(x-x)2 = 0,00321333

Untuk menghitung standar deviasi digunakan persamaan : SD =

SD =

∑ ( x − x)

2

n −1

0,00321333 3 −1

SD = 0,0398


Lampiran 16. Gambar usus halus kelinci

usus halus

Es batu Usus halus yang telah dipotong kecil-kecil


Lampiran 17. Gambar Alat Homogenizer Mixer Modifikasi dan usus halus homogen

Alat Homogenizer Mixer (Modifikasi)

Usus halus yang dihomogenkan

Es batu


Lampiran 18. Hasil uji T-Test profil laju absorpsi parasetamol dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan H0 : Tidak ada perbedaan laju absorpsi parasetamol dengan parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan H1 : Ada perbedaan laju absorpsi parsetamol dengan parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan Group Statistics Std. Error Jenis Konsentrasi_1

Konsentrasi_2

Konsentrasi_3

Konsentrasi_5

N

Mean

Std. Deviation

Mean

Paracetamol

3

.536900

.2642245

.1525501

Paracetamol+Aspirin

3

.364433

.1723154

.0994863

Paracetamol

3 1.339167E0

.0669664

.0386631

Paracetamol+Aspirin

3 1.200667E0

.0059138

.0034143

Paracetamol

3 2.267533E0

.2420864

.1397687

Paracetamol+Aspirin

3 2.077233E0

.1537012

.0887394

Paracetamol

3 2.473100E0

.3364901

.1942726

Paracetamol+Aspirin

3 2.295033E0

.2255652

.1302301

3 2.534233E0

.3033499

.1751391

3 2.355600E0

.2197610

.1268791

Konsentrasi_10 Paracetamol Paracetamol+Aspirin


Independent Samples Test Levene's Test for Equality of Variances

F Konsentrasi_1

Equal variances assumed

Sig.

.515 .513

Equal variances not assumed Konsentrasi_2


7.535 .052



1.145 .345



.863 .405

Equal variances not assumed Konsentrasi_10 Equal variances assumed Equal variances not assumed

.455 .537

t-test for Equality of Means

t

df

Mean Sig. (2- Differenc Std. Error tailed) e Difference

95% Confidence Interval of the Difference Lower

Upper

.947

4 .000

.1724667

.1821237 -.3331899

.6781232

.947

3.441 .000

.1724667

.1821237 -.3673210

.7122543

3.568

4 .000

.1385000

.0388136

.030736 3

.2462637

3.568

2.031 .000

.1385000

.0388136 -.0260675

.3030675

1.149

4 .000

.1903000

.1655596 -.2693670

.6499670

1.149

3.387 .000

.1903000

.1655596 -.3041095

.6847095

.761

4 .000

.1780667

.2338840 -.4712995

.8274328

.761

3.495 .000

.1780667

.2338840 -.5099872

.8661205

.826

4 .002

.1786333

.2162684 -.4218240

.7790906

.826

3.646 .002

.1786333

.2162684 -.4455349

.8028016


Uji Independent T-Test laju absorpsi parasetamol: Ttabel: T0,05 = 3,182 Thitung > Ttabel = H0 ditolak dan H1 diterima. Jadi, ada perbedaan laju absorpsi parsetamol dengan parasetamol dengan penambahan aspirin dalam usus halus kelinci yang dihomogenkan.


Lampiran 19. Tabel Nilai Kritis Distribusi t


LAMPIRAN. Larutan dapar fosfat ph 7,4 isotonis

Recommend Documents