Egészségtámogató és élelmiszerbiztonsági kockázatot jelentő összetevők meghatározására alkalmas analitikai módszerek fejlesztése Tömösközi Sándor, Bucsella Blanka, Bugyi Zsuzsanna, Hajas Lívia, Harasztos Anna, Szendi Szilvia, Török Kitti, Bagdi Attila, Balázs Gábor és hallgatóink… Budapesti Műszaki és Gazdaságtudományi Egyetem Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
HUNGALIMENTARIA 2013 „Kockázatbecslés, önellenőrzés, élelmiszerbiztonság” tudományos konferencia 2013. április 16-17..
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Előadásvázlat
• Rövid bevezető búza és gabonaminősítésről… • A gabonák újra felfedezett komponensei • egészségtámogató makro- és mikrokomponensek • élelmiszerbiztonsági kockázatot jelentő összetevők – allergia és cöliákia • Analitikai módszerfejlesztése • Néhány alkalmazási példa
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Jellemző nagyipari gabonafeldolgozás ma
Teljes kiőrlésű liszt
Forrás: Molnár Dóra 2012
Finomliszt
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Mit „tud” a búza…? – Először: technológiai szempontból az igazi unikum a fehérlisztből készített tészta minősége
Gyúrhatóság (mindenféle tésztánál) Nyújthatóság (pl. rétes vagy pizza)
Gázvisszatartás (pl. kenyér, péksütemény, piskóta)
Hidratáció, vízfelvétel (pl. száraztészta)
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Mit „tud” a búza…? – A technológia tulajdonság alakulásának fő „felelőse” a sikérfehérje
=
+
Glutenin polipeptidalegységekből felépült makro-polimer ELASZTIKUS
Gliadin
Sikér
KOMPLEX monomer, REOLOGIAI hidrofób TULAJDONSÁG fehérjék PLASZTIKUS
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Mit „tud” a búza…? – A fehérjeösszetételt és a technológiai minőséget befolyásoló tényezők Gének 1A 1B 1D
6A 6B 6D
HMW LMW Gliadin 10-15%
30-35%
Glutenin polimerek
35-40%
Nemesítés
Termesztés
Feldolgozás
• Genetikai potenciál
• Környezeti hatások
• Technológiai fejlesztések
Gliadin monomerek
További komponensek Sikér (fehérje-szénhidrát-lipid komplex) Oldható fehérjék Keményítő Feldolgozás → Hidratáció → Dagasztás
Végtermék
Agrotechnológia Talaj minősége Időjárás Kártevők…
Nem keményítő jellegű szénhidrátok Lipidek Antioxidánsok…
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Mit „tud” a búza…? – A technológiai minőséget befolyásoló tényezők is igénylik a módszerfejlesztéseket… BW@PR MBW
BW@BD
TMBW
RBD
PR MT Time (s)
RVA
nRev2gM
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Mit „tud” a búza…? – Másodszor: táplálkozástani szempontból többet, mint amit ma hasznosítunk
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – azok a bizonyos élelmi rostok… Sample preparation
Weighing of duplicate samples Incubation 1, gelatinization and degradation of starch. Incubation 2, degradation of proteins. Incubation 3, final degradation of starch.
Total Dietary Fibre
Insoluble and Soluble Dietary Fibre Filtration and washing wi th water
Precipitation with alc ohol Filtration and washing wi th alc ohol Washing wi th acetone Drying ashing and weighing
Washing wi th acetone
IDF in residue
SDF in filtrate
Drying and weighing
Precipitation with alc ohol Filtration and washing wi th alc ohol
IDF
TDF Drying ashing and weighing
IDF + SDF =TDF
SDF
Forrás: Foss
Washing wi th acetone
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – azok a bizonyos élelmi rostok… Sample preparation
Weighing of duplicate samples Incubation 1, gelatinization and degradation of starch. Incubation 2, degradation of proteins. Incubation 3, final degradation of starch.
Total Dietary Fibre
Insoluble and Soluble Dietary Fibre Filtration and washing wi th water
Precipitation with alc ohol Filtration and washing wi th alc ohol Washing wi th acetone Drying ashing and weighing
Washing wi th acetone
IDF in residue
SDF in filtrate
Drying and weighing
Precipitation with alc ohol Filtration and washing wi th alc ohol
IDF
TDF Drying ashing and weighing
IDF + SDF =TDF
SDF
Forrás: Foss
Washing wi th acetone
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Rostkomponensek meghatározása
Rostkomponensek: elsősorban sejtfal alkotók A célkeresztben lévő molekulák mindig bonyolult mátrixban helyezkednek el, akár kovalensen kapcsolódva egyéb komponensekhez Forrás: http://wbc.agr.mt.gov/ consumers/diagram_kernel.html
Forrás: Saulnier L Guillon F Sado PE Ruoau X 2007 Elsevier
Forrás: IiyamaK Lam TBT StoneBA 1994 Covalent crosslinks in the cell wall PlantPhysiol 104315-320 ures
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Rostkomponensek meghatározása Arabinoxilánok gázkromatográfiás meghatározása Az alditol acetát képzésen alapuló módszert Englyst és Cummings (1984) dolgozta ki először összes NSP (nem keményítő jellegű poliszaccharid, elsősorban AX és AG) tartalom meghatározására. Ennek továbbfejlesztett változatát alkalmazzuk kutatásban fajtaminőítésben, és a gyakorlatban liszt, korpa vizsgálatára malmi frakciók, valamint termékek – kenyér, reggeli cereáliák- WE-AX és TOT-AX tartalmának meghatározására.
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Rostkomponensek meghatározása Arabinoxilánok gázkromatográfiás meghatározása Analitikai teljesítményjellemzők Analitikai jellemző
Ismételhetőség
Minta
TOT-AX % Teljes őrlemény (2009)
2,60
Teljes őrlemény (2008)
4,14
Száraz tészta
6,14
Malmi frakciók
1,31
Teljes őrlemény (2009)
6,32
Teljes őrlemény (2008)
6,66
Száraz tészta
5,90
Malmi frakciók
9,91
WE-AX %
Szűkített reprodukálhatóság
RSD% (két minta esetén különbség%)
TOT-AX % Teljes őrlemény (2008)
23,20
Teljes őrlemény (2009)
15,00
Teljes őrlemény (2008)
20,83
Teljes őrlemény (2009)
9,48
WE-AX %
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Rostkomponensek meghatározása ß-glükánok
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Rostkomponensek meghatározása ß-glükánok mérésére alkalmas enzimes módszer
Elv: Megazyme Ltd
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Rostkomponensek meghatározása Alkalmazási példa ß-glükánok mérésére
2 m/m % sz.a
1,5 1
0,5 0
Búza finomliszt
BKL
Teljes kiőrlésű búzaliszt
Teljes kiőrlésű zabliszt
Rozs finomliszt
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Egészségtámogató mikrokomponensek analízise: fenolos savak
• Hidroxilezett fahéj- és benzoesav származékok. • Növényi szekunder metabolitok: a fenilalanin és a tirozin lebontási útvonalának (sikiminsav út) intermedierjei. • Előfordulási formái: szabad, konjugált, kötött. • Gabonákban a fő komponens a ferulasav (~70%) • Antioxidatív hatás: • a bélrendszer teljes védelme az oxidatív stressztől; • más antioxidánsok transzkripciójának stimulálása az Antioxidant Response Element aktiválásával • Koleszterin szint csökkentő hatás. • Antivirális, antimikrobiális hatás.
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Egészségtámogató mikrokomponensek analízise: fenolos savak
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Egészségtámogató mikrokomponensek analízise: fenolos savak Végtermékek (kísérleti tészta és pékáruk fenolossav tartalma, megj.: a fenolossav-tartalom erősen korrelációt mutat az össz. Antioxidáns kapacitással)
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Egészségtámogató mikrokomponensek analízise: alkilrezorcinok A bioaktív komponensek egyik fajtája a fenolos lipidek csoportjába tartozó, 1,3-dihidroxi benzol származékok, az alkilrezorcinok. Az AR molekula gerincét a rezorcinol gyűrű adja, melynek 5-ös pozíciójában főként telített alkil-csoport helyezkedik el, melynek szénatom száma 15 és 25 között változik. Hatás, szerep: Biomarker, lehetséges antikarcinogén (?), gammatokoferol szintézist növeli (?). Módszer Kolorimetriás Vékonyréteg kromatográfia Folyadék kromatográfia
Gázkromatográfia
Előny homológ meghatározás olcsóbb az egyes homológok egymás melletti kimutatására alkalmas olcsóbb kvantitatív meghatározásra alkalmas megfelelő detektorral összekapcsolva jó a szelektivitása kvantitatív meghatározásra alkalmas a homológok egymás mellet meghatározhatóak a telítetlen homológok is vizsgálhatóak
Hátrány nagy munka- és időigény veszélyes vegyszer használat nem alkalmazható kvantitatív kimutatásra nagy munka- és időigény nem lehet homológokat elkülöníteni
nagy munka- és időigény
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Egészségtámogató mikrokomponensek analízise: alkilrezorcinok Mintaelőkészítés: etilacetát +metil-behenát (belső standard) 24 órás folyamatos rázatásra a felülúszót bepároljuk visszaoldjuk etil-acetátban, újra bepároljuk. az egyesített fázisokat visszaoldjuk 10 l etil-acetátban Mérés GC-vel (módszerfejlesztés folyamatban, cél a szelektivitás javítása)
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Analitikai fejlesztések – Egészségtámogató mikrokomponensek analízise: alkilrezorcinok mennyisége gabonatermékekben
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Mit „tud” a búza…? – Harmadszor: egyes fogyasztói csoportoknak a technológia szempontból fontos sikér (és egyéb gabona-) fehérjék élelmiszerbiztonsági kockázatot jelentenek
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Az élelmiszerallergiát és intoleranciát kiváltó komponensek az élelmiszerek természetes alkotói – a módszerek érvényesítése több problémát felvet
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Az élelmiszerallergiát és intoleranciát kiváltó komponensek az analitikájának fejlesztésével kapcsolatos kutatások a BME-ABÉT-en
Anyagfejlesztés
JÖVŐ
Bugyi Zsuzsanna és munkatársainak előadása holnap: Élelmiszer-allergének mennyiségi meghatározása immunanalitikai módszerekkel- Lehetőségek és korlátok
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Összegzés helyett… a lehetőségekről - Tipikusan interdiszciplináris területeket művelünk, amely a szakterületek (agrárkutatás és termesztés, kémia, analitika, biotechnológia, élelmiszerfejlesztés, klinikum…) együttműködése nélkül nem működőképes - A vázolt területeken van talán esélyünk arra, hogy mind alapkutatásban, mind az eredmények alkalmazásában újdonságokat tudjunk felmutatni és azokat értékesíteni. - A hallgatók bekapcsolódódása óriási érték és lehetőség. - A szakmai eredményeket igyekszünk azonnal beépíteni a graduális és posztgraduális képzésekbe és az analitikai szolgáltatásokba.
BME -Alkalmazott Biotechnológia és Élelmiszer-tudományi Tanszék
Köszönet… •
• • •
Közvetlen kollégáinknak, akik folyamatosan részt vesznek a fejlesztésekben Bucsella Blankának Hajas Líviának Harasztos Annának Kormosné Bugyi Zsuzsannának Szendi Szilviának Szűcsné Makay Erikának Török Kittinek Bagdi Attilának Balázs Gábornal Gergely Szilveszternek Salgó Andrásnak Lelkes hallgatóinknak A Tanszék és a Kar résztvevő munkatársainak Együttműködő partnereinknek: AboMill, BOKU (Bécs), ICC, Debreceni Egyetem, Gyermely zRt, MTA-MgKI, KÉKI, KITE, Lipóti Pékség, Szerencsi Mg zRt ( A felsorolás nem teljes…)
Köszönet… •
Közvetlen kollégáinknak, akik folyamatosan részt vesznek a fejlesztésekben Bucsella Blankának Hajas Líviának Harasztos Annának Kormosné Bugyi Zsuzsannának Szendi Szilviának Szűcsné Makay Erikának Török Kittinek Bagdi Attilának Balázs Gábornal Gergely Szilveszternek Salgó Andrásnak
•
Lelkes hallgatóinknak
•
A Tanszék és a Kar résztvevő munkatársainak
•
Együttműködő partnereinknek: AboMill, BOKU (Bécs), ICC, Debreceni Egyetem, Gyermely zRt, MTA-MgKI, KÉKI, KITE, Lipóti Pékség, Szerencsi Mg zRt ( A felsorolás nem teljes…)
Köszönet…a projektek támogatásáért Pannon minőségű búza kialakítása a nemesítés, a termesztési és feldolgozási technológia fejlesztésén keresztül (TECH 20096A3)
Cukorcirok nemesítésének, tárolásának és feldolgozásának fejlesztése (TECH_08_A3/2-20080401)
Egészségmegőrzés és hagyomány: alapanyag-, termék- és technológiafejlesztés a gabonavertikumban (TECH_08_A3/2-2008-0425)
A sikér és pentozán összetétel sütési minőségre gyakorolt hatásainak vizsgálata (CK-80334) MoniQA – Analitikai módszerek harmonizálása az élelmiszer ellátó láncban az élelmiszer minőség és biztonság monitorozása céljából (Fp6)
Healthgrain - Exploiting Bioactivity of European Cereal Grains for Improved Nutrition and Health Benefits (Fp6)
„Minőségorientált, összehangolt oktatási és K+F+I stratégia, valamint működési modell kidolgozása a Műegyetemen” (TÁMOP-4.2.1/B-09/1/KMR-2010-0002)
Köszönöm, hogy meghallgattak!