80
Daftar Pustaka Alisyahbana M, Ervina M, Monica WS, Liliek SH. 2002. Uji antioksidan dan antiradikal bebas ekstrak rimpang temu mangga (Curcuma mangga Val. et Zyp.), rimpang temu putih (Curcuma zedoaria Rosc.) dan daun kemuning (Murraya paniculata (L.)Jack). Di dalam: Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXI. Surabaya: 27-28 Maret 2002 Anonim. 1994. Dictionary of natural products. Chapman & Hall. Volume ke-3:2638 Baratawidjaja K. 2001. Imunologi dasar. Ed ke-4. Penerbit FKUI. Bergman M, Salman H, Bessler H, Omanski M, Punsky I, Djaldetti M. 2002. Interaction between phagocytosis and IL-1ß production by rat peritoneal macrophages. Biomed Pharmacother 56:159-162. Briskin DP. 2000. Medicinal plants and phytomedicines. Linking plant biochemistry and physiology to human health. Plant Physiol 124:507-514. Chakraborty S, Ghosh U, Bhattacharyya NP. Bhattacharya RK, Roy N. 2006. Inhibition of telomerase activity and induction of apoptosis by curcumin in K-562 cells. Mutation Research -10191:1-10 (In Press) Calixto JB, Otuki MF, Santos ARS. 2003. Anti-inflammatory compounds of plant origin. Part 1. Action on arachidonic acid pathway, nitric oxide and nuclear factor κB (NF-κB). Planta Medica 69:973-983. Campbell NA, Reece JB, Mitchell. 2000. Biologi. Jilid I Ed ke -5. Rahayu L.[et.al], penerjemah; Safitri A, Simarmata L, Hardani HW, editor. Jakarta: Penerbit Erlangga. Terjemahan dari: Biology. Colegate SM, Molyneux RJ. 1993. Bioactive natural products. CRC Pr. Cotran RS, Kumar V, Collins T. 1999. Pathology basis of disease. Ed ke-6. WB Saunders. Dalimartha S. 2003. Atlas tumbuhan obat Indonesia . Jilid 3. Jakarta: Puspa Swara. Denicourt C, Dowdy SF. 2004. Targeting apoptotic pathways in cancel cells. Science 305 (5689):1411-1413. De Padua LS, Bunyapraphatsara N and Lemmens RHMJ (editors).1999. Plant resources of South-East Asia, Medicinal and poisonous plants. Prosea Publ 12(1):216-219. Dewick PM. 2003. Medicinal natural products: a biosyn thetic approach. Ed ke-2. J Wiley. Dorai T, Aggarwal BB. 2004. Role of chemopreevtive agents in cancer theraphy. Cancer Letters 215:129-140.
81
Fabarius A, Hehlmann R, Duesberg PH. 2003. Instability of chromosome structure in cancer cells increases exponentially with degrees of aneuploidy. Cancer Genetics and Cytogenetics 143:59-72. Flora SD, Ferguson LR. 2005. Overview of mechanisms of cancer chemopreventive agents. Mutation research 591:8-15. Fransworth NR. 1986. Biological and phytochemical screening of plant. J.Pharm Sci 55(3):225-265 Freshney RI. 1992. Introduction to basic principles. Di dalam: Freshney RI, editor. Animal cell culture.A practical approach . Ed ke-2. Oxford Univ Pr. Gibbs JB. 2000. Mechanism-based target identification and drug discovery in cancer research. Science 287:1969-1973. Gritter RJ, Bobbitt JM, Scwarting AE. 1991. Pengantar kromatografi. Padmawinata K penerjemah: Niksolihin S, editor. Ed ke-2. Penerbit ITB. Terjemahan dari: Introduction to chromatography. Harbone JB.1987. Metode fitokimia: penuntun cara modern menganalisis tumbuhan. Terbitan ke-2. Padmawinata K, I. Soediro penerjemah; Niksolihin S., editor. Penerbit ITB. Terjemahan dari: Phytochemical methods. Heilmann J, Wasescha MR, Schmidt TJ. 2001. The influence of glutathione and cysteine levels on the cytotoxicity of helenanolide type sesquiterpene lactones against KB cells. Bioorganic & Medicinal Chemistry 9:2189-2194. Heim KE, Tagliaferro AR, Bobilya DJ. 2002. Flavonoid antioxidants:chemistry, metabolism and structure-activity relationships. J Nutritional Biochemistry 13:572-584. Ichinose M, Sawada M, Sasaki K, Oomura Y. 1998. Enhancement of phagocytosis in mouse peritoneal macrophages by fragments of acidic fibroblast growth factor (aFGF). International J. Immunopharmacology 20:193-204. Incalci M, Steward WP, Gescher AJ. 2005. Use of cancer chemopreventive phytochemicals as antineoplastic agents. Lancet Oncol 6:899-904. Iswantini D, Purwantingsih S, Darusman LK, Esvandiari. 2002. Studi pendahuluan ekstrak temu putih dan kunir putih sebagai antikanker. Di dalam: Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXI. Surabaya: 27-28 Maret 2002. Jang MK, Lee JH, Kim JS, Ryu J-H. 2004. A curcuminoid and two sesquiterpenoids from Curcuma zedoaria as inhibitors of nitric oxide synthesis in activated macrophages. Arch Pharm Res 27(12):1220-1225.
82 Jiang DQ, Pu QL, Huang P, Huang XM, He YZ, He CH .1989. Studies on the chemical constituens of Curcuma kwangsiensis. Chem Abstr (25) (Desember 18,1989):436 (228992 w). Katzung BG. 2001. Basic and clinical pharmacology. Ed ke -8. Appl Lange. Kim KY , Kim JW, Hong BS, Shin DH, Kim HY, Yang HC. 2000. Genotoxicity and anticlastogenic activities of polysacharide from Curcuma zedoaria . Mol Cell 10:392-398. Kim KI, Shin KS, Jun WJ, Hong BS, Shin DH, Cho HY. 2001. Effect of polysacharides from rhizomes Curcuma zedoaria on macrophages function. Biosci Biotech Biochem 65(11):2369-2377. Kresno SB. 2001. Imunologi:diagnosis dan prosedur laboratorium. Ed ke-4. Penerbit FKUI. Kutuk O dan Basaga H. 2004. Aspirin inhibits TNFα and IL-1 induced NF-?B activation and sensitizes Hela cells to apoptosis. Cytokine 25:229-237. Lin JK, Shoei-Yn, Lin-Shiau 2001. Mechanisms of cancer chemoprevention by curcumin. Proc Natl Sci Counc 25(20):59-66 Liang Oei-Ban, penemu; PT Darya -Varia Laboratoria Jakarta.9 Juni 1992. Combinations of compounds isolated from Curcuma spp as anti-inflmmatory agents. ID 5 120 538. Li-Zhang D, Li LJ, Huang GS, Liu SG, Yen LF, Fang FD. 2002. The genetics characteristics of chromosomes of cell lines determines their tumorigenicity in nude mice. (HGM2002) http://hgm2002.hgu.mrc.ac.uk/Abstracts/Publish/WorkshopPosters/WorkshopPost er07/hgm0386.htm [29 Oktober 2005] MacDonald C. 1998. Primary culture and the establishment of cell lines. Di dalam: Davis JM, editor. Basic cell culture:a practicalapproach. Oxford Univ Pr. Marles RJ. Pazos -Sonou L, Compadre CM, Pezzuto JM, Bloszyk E, Armason JT. 1995. Sesquiterpene lactones revisited . Amason JT, Mata R, Romeo JT, editor. Di dalam: Phytochemistry of medicinal plants. Plenum Pr. Mattjik AA, Sumertajaya. 2002. Perancangan percobaan. Ed ke-2. IPB Press. McKenzie KE, Umbricht CB, Sukumar S. 1999. Application of telomerase research in the fight against cancer. Mol Med Today March:114-122. McLaughlin JL, Rogers LL. 1998. The use of biologycal assays to evaluate botanicals. Drug Inform J 32:513-524. McMurry J. 1984. Organic chemistry. Brooks/Cole Publishing Company
83
Meyer BN, Ferrigni NR, Putnam JE, Jacobsen LB, Nichols DE, McLaugghlin JL. 1982. Brine shrimp: a convinient general bioassay for active plant constituens. Hippokrates (45)31-34. Murakami A et al. 1998. Screening for in vitro anti-tumor promoting activities of edible plants from Indonesia. Cancer Detect Prev 22 (6):516-525 Murwanti R, Meiyanto E, Nurrochmad A, Kristina SA. 2004. Efek ekstrak etanol rimpang temu putih (Curcuma zedoaria Rosc.) terhadap pertumbuhan tumor paru fase inisiasi pada mencit betina diinduksi benzo(a)piren. Majalah Farmasi Indonesia 15(1): 7-12. Navarro DF et al. 2002. Phytochemical analysis and analgetic properties of Curcuma zedoaria grown in Brazil. Phytomedicine 9:427-432. Nafrialdi, Ganiswara S. 1995. Antikanker dan imunosupresan. Didalam: Ganiswara S, editor. Farmakologi dan Terapi. Ed.ke- 4. Bagian Farmakologi FKUI. Nurrochmad A dan Murwanti R. 2002. Efek hepatoprotektif ekstrak alkhohol rimpang temu putih (Curcuma zedoaria Rose) pada tikus jantan. Pharmacon 1(1):31-36. Priosoeryanto BP, S Tateyama ,R.Yamaguchi and K. Uchida.1995. Antiproliferation and colony-forming inhibition activities of recombinant feline interferon (rFeIFN) on various cells in vitro.Can J Vet Res 59:67-69 Priosoeryanto BP, Sumarny R, Rahmadini Y, nainggolan CRM, Miswidia, Andani S. 2001. Growth inhibition effect of plants extract (Mussaendah pubescens and Curcuma zedoaria) on tumo r cell lines in vitro. Di dalam: International Symposium-cum Workshop.Phillippines, August 27-31, 2001. Remers WA. 1991. Antineoplastic . Di dalam: Wilson and Gisvold’s text book of organic medicinal and pharmaceutical chemistry. Ed ke-9. JB Lippincott. Robinson T. 1995. Kandungan organik tumbuhan tinggi. Ed ke-6. Padmawinata K,penerjemah; Sutomo, editor. Penerbit ITB. Terjemahan dari:The organic constituents of higher plants. Rungeler P, Castro V, Mora G, Goren N, Vichnewski W, Phal Hl. 1999. Inhibitio n of transcription factor NF-κB by sesquiterpene lactones: a Proposed molecular mechanism of action. Biorganic & Medicinal Chemistry 7:2343-2352. Rusmarilin H. 2003. Aktivitas anti-kanker ekstrak rimpang lengkuas lokal [Alpinia galanga (L) SW] pada galur sel kanker manusia serta mencit yang ditransplantasai dengan sel tumor primer. [disertasi]. Bogor: Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Saputra K, Maat S, Soedoko R. 2000. Terapi biologi untuk kanker. Airlangga University Press.
84
Shiobara Y, Asakawa Y, Kodama M, Takemoto T. 1986. Zedoarol, 13hydroxygermacrone and curzeone, three sesquiterpenoids from Curcuma zedoaria. Phytochemistry 25(6):1351-1353. Shu Yue-Zhon. 1998. Recent natural products based drug development:a pharmaceutical industry prespective. J Nat Prod 61(8):1053-1071. Silverstein RM, Wester FX. 1995 Spectrometric identification of organic compounds. Ed ke-6. J Wiley. Sirait M. 2001. Pengembangan obat bahan alam. Seminar Sehari Perhimpunan Peneliti Bahan Obat Alami IV. Jakarta: 7 Maret 2001. Siswandono dan Soekardjo B. 2000. Kimia medisinal. Ed ke-2 Airlangga University Press. Sudibyo RS. 2000. Gas chromatographic-mass spectrometric analysys of the main component of volatile oil isolated from Curcuma zedoaria Rosc. Majalah Farmasi Indonesia 11(1): 39-44. Suffness M, Pezzuto JM. 1991. Assays related to cancer drug discovery. Di dalam: Hostettmann K, editor. Assays for bioactivity. Academic Pr. Sugiyanto, Sudarto B, Meiyanto E, Nugroho AE. 2003. Aktivitas antikarsinogenik senyawa yang berasal dari tumbuhan. Majalah Farmasi Indonesia 14(3):132-141. Suharmiati, Handayani L, Roosihermiatie B. 2002. Pengobatan kanker dan tumor dengan menggunakan ramuan trasisional yang mengandung kunir putih (Curcuma mangga Val. Et Zyp) (Stu di kasus di Laboratorium Penelitian dan Pengembangan Pelayanan Obat Tradisional tahun 2000 sampai dengan 2001 . Di dalam: Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXI. Surabaya:2728 Maret 2002 Sumarny R, Safitri AI, Djamil R. 2006. Kadar kurkumin dan potensi anti oksidan ekstrak etanol Curcuma zedoaria (Berg) Roscoe., Curcuma mangga Val et Zyp. dan Curcuma xanthorrhiza Roxb. Journal Ilmu Kefarmasian Indonesia (In press) Sunardi C, Dewi PNL, Sutedja L, Kardono LBS. 2002. Studi aktivitas antimikroba minyak atsiri dari rimpang Kaemperia rotunda L., Curcuma zedoaria Rosc. Dan Curcuma mangga Val.Et ZIJP. Di dalam: Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXI. Surabaya: 27-28 Maret 2002 Surh YJ et al. 2001. Molecular mechanism underlying chemopreventive activities of anti-inflammatory phytochemicals: down regulations of COX-2 and iNOS through suppession of NF-kappa B activation. Mutation Research 480:43-68.
85 Syu WJ, Shen CC, Don MJ, OU JC, Lee GH and Sun CM. 1998. Cytotoxicity of curcuminoids and Syukur C. 2002. Temu putih tanaman obat antikanker. Penebar Swadaya Syukur C dan Hernani. 1999. Budidaya tanaman obat komersial. Penebar Swadaya some novel compounds from Curcuma zedoaria, J Nat Prod 61(12):1531-1534. Takano I, Yasuda I, Takeya K, Itokawa H. 1995. Guaiane sesquiterpene lactones from Curcuma aeruginosa . Phytochemistry 40(4):1197-2000Tang W and Eisenbrand G.1992. Chinese drugs of plant origin . Springer Publishing. Tannock IF, Hill RP. 1998. The basic science of oncology. Ed ke-8. McGraw-Hill. Tim Surkenas. 2002. Survei kesehatan nasional 2001. Badan Libangkes Depkes RI. Vincent I, Pae CI, Hallows JL. 2003. The cell cycle and human neurodegenerative disease. Meijer L, Jézéquel A, Robe rge M, editor. Di dalam: Progress in cell cycle research. Volume ke-5. Life in Progress Editions. Wagner H and Jurcic K. 1991. Assays for immunomodulation and effects on mediators of inflammation . Di dalam: Dey PM, Harbone JB, editor. Methods in plants biochemistry:assays for bioactivity. Volume ke-6. Academic Pr. Wilson B, Abraham G, Manju VS, Mathew M, Vimala B, Sundaresan S. 2005. Antimicrobial activity of Curcuma zedoaria and Curcuma malabarica tubers. J Ethnopharmacology 99:147-151. Williams HD, Fleming I. 1985. Spectroscopic methods in organic chemistry. Ed ke-3. McGraw-Hill. Windono T, Parfati N. 2002. Curcuma zedoaria (Bergius) Roscoe: kajian pustaka dan aktivitas farmakologik. Artocarpus 2(1):1-10. Wong S. 1997. Agents affecting the immune response. Di dalam: Burger’s medicinal chemistry and drug discovery:therapeutic agents. Ed ke-5. Volume ke-4. J Wiley. Zachary I. 2003. Determination of cell number. Di dalam: Di dalam:Hughes D, Mehmet, editor. Cell proliferation & apoptosis. Bios Scientific.
86 Lampiran 1
Hasil Determinasi Tumbuhan
87 Lampiran 2. Rangkuman hasil ekstraksi, fraksinasi dan pemurnian Rimpang temu putih (C. zedoaria ) I. Sebanyak 1.000 gram serbuk rimpang temu putih (TP) diekstraksi dengan cairan penyari n-heksana, methanol (MeOH) dan etil asetat (EtOAc) dan diperoleh : 1. Ekstrak n-heksana
= 104 gram
= 10,4%
2. Ekstrak MeOH
=
55 gram
=
5,5%
3. Ekstrak EtOAc
=
72 gram =
7,2%
II. Sebanyak 60 gram ekstrak EtOAc difraksinasi dengan kolom kromatografi; sebagian digunakan untuk penapisan fitokimia dan pengujian bioaktivitas. Hasil fraksinasi 60 gram ekstrak EtOAc
% perolehan fraksi ~ 1.000 gram TP
Kode Fraksi
gram
%
(Perhitungan perolehan)
1. Fraksi A
9,3
15,5
15,5/100 x 7,2% = 1,1160%
2. Fraksi B
0,87
1,45
1,45/100 x 7,2% = 0,1044%
3. Fraksi C
0,99
1,65
1,65/100 x 7,2% = 0,1188%
4. Fraksi D
13,77
22,95
22,95/100 x 7,2% = 1,6524%
5. Fraksi E
33,9
56,5
56,5/100 x 7,2% = 4,0680%
III. Sebanyak 500 mg fraksi B dan 700 mg fraksi C dimurnikan dengan KCKT; sebagian digunakan untuk karakterisasi kimia dan pengujian bioaktivitas. Hasil fraksinasi dari 500 mg fraksi B
% perolehan fraksi ~ 1.000 gram TP
Kode Fraksi
mg
%
(Perhitungan perolehan)
1. Fraksi B-1
26
5,2
5,2/100 x 0,1044% = 0,005%
Hasil fraksinasi dari 700 mg fraksi C
% perolehan fraksi ~ 1.000 gram TP
Kode Fraksi
mg
%
(Perhitungan perolehan)
1. Fraksi C-1
53
7,6
7.6/100 x 0,1188% = 0,009%
2. Fraksi C-2
44
6,3
6,3/100 x 0,1188% = 0,008%
3. Fraksi C-3
35
5,0
5,0/100 x 0,1188% = 0,006%
88 Lampiran 3. Warna dan harga Rf dari pemisahan secara KLT
Fase diam
:
lempeng silika GF 254
Fase gerak
:
n-heksana:EtOAc
Jarak rambat
:
8 cm
Pengamatan
:
sinar UV 366 nm
Warna bercak dan harga Rf dari fraksi A,B,C dan D
Fraksi
Perbandingan
EtOAc
Fase gerak
A
15 : 1
B
C
D
6,5 : 3,5
6,5 : 3,5
6,5 : 3,5
AlCl3 5 % dalam etanol Warna
Rf
Lieberman Bouchard Warna
Rf
Hijau kuning
0,88
Hijau kuning
0,88
Biru
0,69
Biru
0,69
Oranye
0,43
Hijau kuning
0,43
kuning
0,25
kuning
0,24
Kuning
0,85
Biru
0,84
Coklat
0,74
Coklat
0,75
Kuning hijau
0,60
Coklat muda
0,68
Coklat gelap
0,74
Coklat gelap
0,75
Hijau kuning
0,60
Coklat muda
0,63
Hijau kuning
0,39
Hijau kuning
0,40
Biru
0,24
Kuning
0,25
Coklat gelap
0,74
Coklat gelap
0,75
Biru
0,25
Hijau kuning
0,40
Kuning hijau
0,18
Kuning
0,19
89 Lampiran 4. Kromatogram dengan KLT dan KCKT fraksi B-1 dan C-1
A. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Fase diam
: lempeng silika gel GF 254
Fase gerak
: n-heksana: EtOAc (8,5:1,5)
Jarak rambat
: 8 cm
Penampak bercak : -----------
Rf 0,33
Rf 0,35
UV 254 nm
UV 254 nm
B. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) Instrumen
: Shimadzu LC 10 AT VP
Kolom
: Shim Pack CLC Sil (4,6 mm x 15 cm)
Fase gerak : n-heksan:EtOAc = 9:1 (fraksi B-1) n-heksan:EtOAc = 8,5:1,5 (fraksi C-1) Laju alir
: 0,5 mL/menit
Vol. Injeksi : 20 µL Detektor
: UV, λ 254 nm
90 1. Kromatogram fraksi B-1 dengan KCKT Detector A (254nm) B B-1 (5000 ppm)
Name Retention Time Area
B-1 35.092 54660452
3
Volts
2
1
0
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
Minutes
2. Kromatogram fraksi C-1 dengan KCKT
22.408 C-1 44598756
Detector A (254nm) C C-1 (5000 ppm)'
Retention Time Name Area 24170125
1.5
6.983
Volts
1.0
0.5
0.0 0
5
10
15
20 Minutes
25
30
35
91 Lampiran 5. Data uji kematian larva udang dan nilai LC50
Ekstrak /Fraksi Ekstrak EtOAC
Ekstrak EtOAC
Ekstrak EtOAC
Fraksi A
Fraksi A
N 1
2
3
1
2
Fraksi A
3
Fraksi B
1
Fraksi B
Fraksi B
2
3
Kadar bpj 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000 1 10 100 1000
Log C (X) 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3 0 1 2 3
Mortalitas S % 2 7 10 33 16 53 21 70 2 7 7 23 17 57 22 73 5 17 8 27 9 30 25 83 4 13 9 30 19 63 26 87 7 23 9 30 16 53 27 90 4 13 8 27 18 60 30 100 2 7 6 20 25 83 30 100 3 10 7 23 22 73 30 100 3 10 7 23 23 77 30 100
Probit (Y) 3,52 4,56 5,08 5,52 3,52 4,26 5,18 5,61 4,05 4,39 4,48 5,95 3,87 4,48 5,33 6,13 4,26 4,48 5,08 6,28 3,87 4,39 5,25 7,75 3,52 4,16 5,95 7,75 3,72 4,26 5,61 7,75 3,72 4,26 5,74 7,75
LC 50 (bpj)
Rataan LC 50 (bpj)
101,41
99,35
97,25
99,33
36,50
29,00
17,70
27,73
18,27
17,81
16,95
17,68
92 Lampiran 5. Data uji kematian larva udang dan nilai LC50 (lanjutan)
Ekstraki /fraksi Fraksi C
N 1
Fraksi C
2
Fraksi C
Fraksi D
Fraksi D
3
1
2
Fraksi D
3
Fraksi E
1
Fraksi E
Fraksi E
2
3
Kadar Log C bpj (X) 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3 1 0 10 1 100 2 1000 3
Mortalitas S % 6 20 8 27 18 60 30 100 6 20 7 30 15 50 30 100 7 23 9 30 21 70 30 100 3 10 4 13 12 40 30 100 2 7 6 20 11 37 30 100 1 3 5 17 13 43 30 100 6 20 7 23 8 27 26 87 6 20 9 30 16 53 24 80 7 23 8 27 16 53 21 70
Probit (Y) 4,16 4,39 5,25 7,75 4,16 4,48 5 7,75 4,26 4,48 5,52 7,75 3,72 3,87 4,75 7,75 3,52 4,16 4,67 7,75 3,12 4,05 4,82 7,75 4,16 4,26 4,39 6,13 4,16 4,48 5,08 5,84 4,26 4,39 5,08 5,52
LC 50 (bpj)
Rataan LC 50 (bpj)
14,68
15,57
11,57
13,94
30,38
30,27
35,02
31,89
86,84
49,55
83,07
73,15
93 Lampiran 6. Jumlah sel tumor pasca perlakuan fraksi EtOAc dan analisis statistik A. Data jumlah sel tumor sel (x104/mL) dan penghambatan pertumbuhan sel tumor Perlakuan fraksi
K (-)
Rataan SD EtOAC 100 bpj Rataan SD A 30 bpj Rataan SD B 15 bpj Rataan SD C 15 bpj Rataan SD D 30 bpj Rataan SD E 75 bpj Rataan SD
N 1 2 3
1 2 3
1 2 3
1 2 3
1 2 3
1 2 3
1 2 3
Sel HeLa S Sel x104 % PP 221,33 228,67 232,00 227,33 5,46 161,00 27,3 165,33 27,7 185,67 20,0 170,67 24,98 13,17 4,34 170,33 23,0 162,00 29,2 167,00 28,0 166,44 26,74 4,19 3,25 164,67 25,6 180,33 21,1 165,00 28,9 170,00 25,21 8,95 3,89 165,00 25,5 152,00 33,5 146,00 37,1 154,33 32,02 9,71 5,95 162,67 26,5 166,33 27,3 157,33 32,2 162,11 28,65 4,53 3,08 190,00 14,2 221,00 3,4 232,33 -0,1 214,44 5,79 21,91 7,45
Sel K-562 S Sel x104 % PP 265,33 267,33 267,67 266,78 1,26 155,67 41,3 160,33 40,0 153,33 42,7 156,44 41,36 3,56 1,35 210,33 20,7 202,67 24,2 217,67 18,7 210,22 21,20 7,50 2,78 128,00 51,8 127,00 52,5 123,33 53,9 126,11 52,72 2,46 1,10 124,67 53,0 116,00 56,6 120,00 55,2 120,22 54,93 4,34 1,81 179,33 32,4 175,00 34,5 178,33 33,4 177,56 33,44 2,27 1,06 187,67 29,3 186,33 30,3 188,00 29,8 187,33 29,78 0,88 0,51
Sel WeHi S Sel x 104 % PP 267,00 292,33 271,00 276,78 13,62 220,67 17,4 232,67 20,4 217,33 19,8 223,56 19,19 8,06 1,62 230,67 13,6 234,00 20,0 212,67 21,5 225,78 18,36 11,48 4,19 159,67 40,2 156,00 46,6 161,00 40,6 158,89 42,48 2,59 3,61 137,33 48,6 139,00 52,5 140,33 48,2 138,89 49,74 1,50 2,35 220,67 17,4 218,33 25,3 224,67 17,1 221,22 19,92 3,20 4,67 209,67 21,5 182,67 37,5 191,00 29,5 194,44 29,50 13,83 8,02
Keterangan: jumlah sel (x1 04/mL) pada setiap ulangan adalah rataan dari 3 kali pembacaan hasil
94
B. Analisis statistik dan uji jarak berganda Duncan dari fraksi EtOAc
Perlakuan Fraksi B Fraksi C Fraksi A Fraksi D Fraksi E Ekstrak EtOAc
Kadar bpj 15 15 30 30 75 100
HeLa 25,20 ± 3,89 Ab 32,03 ± 5,95 Ab 26,73 ± 3,25 Bb 28,66 ± 3,08 Bb 5,83 ± 7,45 Aa 25,00 ± 4,34Bb
Rataan PP (%) Sel K562 52,73 ± 1,10C e 54,93 ± 1,81 B e 21,20 ± 2,78 ABa 33,43 ± 1,06 B c 29,80 ± 0,51 Bb 41,33 ± 1,35Cd
WEHI 164 42,46 ± 3,61B c 49,77 ± 2,35 B c 18,37 ± 4,19A a 19,33 ± 4,67 Aa 29,50 ± 8,02 B b 19,20 ± 1,62 Aa
Keterangan : 1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata, p<0,05 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata, p<0,05
95
Lampiran 7. Jumlah sel tumor pasca perlakuan fraksi bioaktif dan analisis statistik A. Data pengamatan jumlah sel dan PP Jumlah sel tumor (x 10 4/mL) dan PP (%) pasca perlakuan dengan fraksi B-1 Fraksi B-1 K (-) 0,0 bpj
N 1 2 3
Rataan SD 0,5 bpj
1 2 3
Rataan SD 1,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 2,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 4,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 8,0 bpj Rataan SD
1 2 3
Sel HeLa S Sel PP (%) 280,00 266,00 281,00 275,67 8,39 227,00 18,93 213,00 19,92 194,33 30,84 211,44 23,23 16,39 6,61 171,00 38,93 172,67 35,09 168,67 39,98 170,78 38,00 2,01 2,57 165,00 41,07 169,67 36,22 150,33 46,50 161,67 41,26 10,09 5,15 148,33 47,02 141,33 46,87 139,67 50,30 99,92 33,01 77,87 24,13 103,33 63,10 92,00 65,41 92,00 67,26 95,78 65,26 6,54 2,09
Sel K-562 S Sel PP (%) 213,33 224,00 206,33 214,56 8,90 125,00 41,41 133,33 40,48 127,67 38,13 128,67 40,00 4,26 1,69 115,00 46,09 117,33 47,62 115,00 44,26 115,78 45,99 1,35 1,68 106,67 50,00 105,67 52,83 103,67 49,76 105,33 50,86 1,53 1,71 97,67 54,22 99,33 55,65 97,67 52,67 66,18 37,19 55,99 30,74 70,33 67,03 82,67 63,10 65,00 68,50 72,67 66,21 9,06 2,79
Sel WEHI 164 S Sel PP (%) 285,33 276,67 252,00 271,33 17,29 186,67 34,58 203,00 26,63 176,67 29,89 188,78 30,37 13,29 4,00 172,00 39,72 185,00 33,13 165,00 34,52 174,00 35,79 10,15 3,47 159,00 44,28 174,67 36,87 141,33 43,92 158,33 41,69 16,68 4,18 130,33 54,32 163,00 41,09 115,33 54,23 103,34 33,19 76,81 25,99 107,33 62,38 100,00 63,86 104,33 58,60 103,89 61,61 3,69 2,71
Keterangan: jumlah sel pada setiap ulangan adalah rataan dari 3 kali pembacaan hasil
96
Jumlah sel tumor (x 10 4/mL) dan PP (%) pasca perlakuan dengan fraksi C-1
Fraksi C-1 K (-) 0,0 bpj
N 1 2 3
Rataan SD 0,5 bpj
1 2 3
Rataan SD 1,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 2,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 4,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 8,0 bpj Rataan SD
1 2 3
Sel HeLa S Sel PP (%) 277,67 285,67 279,67 281,00 4,16 201,67 27,37 191,33 33,02 176,00 37,07 189,67 32,49 12,91 4,87 149,00 46,34 127,33 55,43 148,33 46,96 141,56 49,58 12,32 5,08 124,67 55,10 120,00 57,99 123,67 55,78 122,78 56,29 2,46 1,51 111,67 59,78 106,33 62,78 115,00 58,88 111,00 60,48 4,37 2,04 100,67 63,75 103,67 63,71 108,33 61,26 104,22 62,91 3,86 1,42
Sel K-562 S Sel PP (%) 260,00 264,00 263,00 262,33 2,08 206,67 20,51 188,33 28,66 184,33 29,91 193,11 26,36 11,91 5,10 165,33 36,41 173,67 34,22 168,00 36,12 169,00 35,58 4,26 1,19 138,67 46,67 145,33 44,95 133,67 49,18 139,22 46,93 5,85 2,13 120,33 53,72 124,33 52,91 109,33 58,43 118,00 55,02 7,77 2,98 116,00 55,38 95,33 63,89 94,33 64,13 101,89 61,14 12,23 4,98
Sel WEHI 164 S Sel PP (%) 282,33 264,67 267,00 271,33 9,60 238,33 15,58 220,33 16,75 207,67 22,22 222,11 18,19 15,41 3,54 182,00 35,54 178,00 32,75 174,67 34,58 178,22 34,29 3,67 1,42 169,67 39,90 145,67 44,96 151,00 43,45 155,44 42,77 12,60 2,60 128,00 54,66 114,67 56,68 118,67 55,56 120,44 55,63 6,84 1,01 103,00 63,52 107,00 59,57 109,67 58,93 106,56 60,67 3,36 2,49
Keterangan: jumlah sel pada setiap ulangan adalah rataan dari 3 kali pembacaan hasil
97
Jumlah sel tumor (x 10 4/mL) dan PP (%) pasca perlakuan dengan fraksi C-2
Fraksi C--2 K (-) 0,0 bpj
N 1 2 3
Rataan SD 0,5 bpj
1 2 3
Rataan SD 1,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 2,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 4,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 8,0 bpj Rataan SD
1 2 3
Sel HeLa S Sel PP (%) 280,00 266,00 281,00 275,67 8,39 180,67 35,48 189,00 28,95 197,00 29,89 188,89 31,44 8,17 3,53 159,00 43,21 164,33 38,22 171,00 39,15 164,78 40,19 6,01 2,66 130,33 53,45 149,33 43,86 152,00 45,91 143,89 47,74 11,81 5,05 115,67 58,69 111,33 58,15 122,33 56,47 116,44 57,77 5,54 1,16 91,33 67,38 93,33 64,91 94,67 66,31 93,11 66,20 1,68 1,24
Sel K-562 S Sel PP (%) 260,00 264,00 263,00 262,33 2,08 169,67 34,74 176,33 33,21 183,67 30,16 176,56 32,71 7,00 2,33 158,67 38,97 137,00 48,11 113,33 56,91 136,33 48,00 22,67 8,97 113,33 56,41 125,67 52,40 123,33 53,11 120,78 53,97 6,55 2,14 118,67 54,36 130,00 50,76 106,67 59,44 118,44 54,85 11,67 4,36 97,33 62,56 90,33 65,78 90,33 65,65 92,67 64,67 4,04 1,82
Sel WEHI 164 S Sel PP (%) 285,33 276,67 252,00 271,33 17,29 211,00 26,05 186,00 32,77 173,33 31,22 190,11 30,01 19,17 3,52 173,00 39,37 164,33 40,60 153,67 39,02 163,67 39,66 9,68 0,83 158,67 44,39 114,00 58,80 116,33 53,84 129,67 52,34 25,14 7,32 103,67 63,67 105,33 61,93 101,00 59,92 103,33 61,84 2,19 1,88 81,33 71,49 90,33 67,35 93,00 63,10 88,22 67,31 6,11 4,20
Keterangan: jumlah sel pada setiap ulangan adalah rataan dari 3 kali pembacaan hasil
98
Jumlah sel tumor (x 10 4/mL) dan PP (%) pasca perlakuan dengan fraksi C-3
Fraksi C--3 K (-) 0,0 bpj
N 1 2 3
Rataan SD 0,5 bpj
1 2 3
Rataan SD 1,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 2,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 4,0 bpj
1 2 3
Rataan SD 8,0 bpj Rataan SD
1 2 3
Sel HeLa S Sel PP (%) 296,33 294,33 303,33 298,00 4,73 240,67 18,78 224,33 23,78 229,33 24,39 231,45 22,32 8,37 3,08 192,33 35,10 209,67 28,76 208,00 31,43 203,33 31,76 9,56 3,18 162,67 45,11 170,00 42,24 172,00 43,30 168,22 43,55 4,91 1,45 124,33 58,04 125,67 57,30 136,67 54,94 128,89 56,76 6,77 1,62 103,67 65,02 107,67 63,42 120,00 60,44 110,45 62,96 8,51 2,32
Sel K-562 S Sel PP (%) 272,67 284,00 252,33 269,67 16,05 206,67 24,21 202,00 28,87 176,67 29,99 195,11 27,69 16,14 3,07 171,00 37,29 174,67 38,50 152,33 39,63 166,00 38,47 11,98 1,17 126,33 53,67 136,33 52,00 132,33 47,56 131,67 51,07 5,03 3,16 117,00 57,09 128,33 54,81 120,00 52,44 121,78 54,78 5,87 2,32 100,33 63,20 106,33 62,56 88,33 64,99 98,33 63,59 9,17 1,26
Sel WEHI 164 S Sel PP (%) 261,33 253,33 257,00 257,22 4,00 201,67 22,83 193,00 23,81 188,33 26,72 194,33 24,45 6,77 2,02 167,33 35,97 158,00 37,63 168,00 34,63 164,44 36,08 5,59 1,50 127,33 51,27 120,67 52,37 126,67 50,71 124,89 51,45 3,67 0,84 111,33 57,40 102,67 59,47 111,33 56,68 108,44 57,85 5,00 1,45 96,00 63,26 97,67 61,45 97,00 62,26 96,89 62,32 0,84 0,91
Keterangan: jumlah sel pada setiap ulangan adalah rataan dari 3 kali pembacaan hasil
99
B. Analisis statistik dan uji jarak berganda Duncan dari fraksi bioaktif A. Fraksi B-1 Kadar µg/mL HeLa 0,5 23,2 ± 6,60 1,0 38,0 ± 2,57 2,0 41,3 ± 5,14 4,0 48,1 ± 1,94 8,0 65,3 ± 2,08 Rataan marginal 43,2 ±1 4,61 A B. Fraksi C -1 Kadar µg/mL HeLa 0,5 32,5 ± 4,87 1,0 49,6 ± 5,08 2,0 56,3 ± 1,51 4,0 60,5 ± 2,04 8,0 62,9 ± 1,43 Rataan marginal 52,3 ± 11,66 A C. Fraksi C -2 Kadar µg/mL HeLa 0,5 31,4 ± 3,53 1,0 40,2 ± 2,65 2,0 47,7 ± 5,05 4,0 57,8 ± 1,16 8,0 66,2 ± 1,24 Rataan marginal 48,67±13,02 A D. Fraksi C-3 Kadar µg/mL HeLa 0,5 22,3 ± 3,08 1,0 31,8 ± 3,18 2,0 43,6 ± 1,45 4,0 56,8 ± 1,61 8,0 63,0 ± 2,32 Rataan marginal 43,5 ± 15,8 A
Rataan % PP Sel K562 WEHI 164 40,0 ± 1,69 30,4 ± 3,99 45,9 ± 1,68 35,8 ± 3,47 50,9 ± 1,70 41,7 ± 4,18 54,2 ± 1,49 49,9 ± 7,61 66,2 ± 2,79 61,6 ± 2,71 51,5 ± 9,24 B 43,8 ± 12,05 A
Rataan Marginal 31,2 ± 8,29 a 39,9 ± 5,19 b 44,6 ± 5,81 c 50,7 ± 4,83 d 64,4 ± 3,05 e
Rataan % PP Sel K562 26,4 ± 5,10 35,6 ± 1,19 46,9 ± 2,13 55,0 ± 2,98 61,1 ± 4,98 45,00 ± 13,45 B
Rataan Marginal 25,7 ± 7,36 a 39,8 ± 7,82 b 48,7 ± 6,27 c 57,0 ± 3,20 d 61,6 ± 3,05 e
Rataan % PP Sel K562 32,7 ± 2,33 48,0 ± 8,97 54,0 ± 2,14 54,9 ± 4,36 64,7 ± 1,82 50,84 ±11,61 A Rataan % PP Sel K562 27,7 ± 3,07 38,5 ± 1,17 51,1 ± 3,16 54,8 ± 2,33 63,6 ± 1,26 47,1 ± 13,22B
WEHI 164 18,2 ± 3,54 34,3 ± 1,42 42,8 ± 2,59 55,6 ± 1,01 60,7 ± 2,48 42,3 ± 15,9 C
WEHI 164 30,0 ± 3,52 39,7 ± 0,83 52,3 ± 7,32 61,8 ± 1,88 67,3 ± 4,20 50,2 ± 14,71 A
WEHI 164 24,5 ± 2,02 36,08 ± 1,50 51,5 ± 0,84 57,9 ± 1,45 62,3 ± 0,91 46,4 ± 14,67 B
Rataan Marginal 31,4 ± 2,99 a 42,6 ± 6,19 b 51,4 ± 5,36 c 58,2 ± 3,90 d 66,0 ± 2,64 e
Rataan Marginal 24,8 ± 3,35 a 35,4 ± 3,48 b 48,7 ± 4,25 c 56,5 ± 2,08 d 63,0 ± 1,50 e
Keterangan : 1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata (p<0,05)
100 Lampiran 8. Nilai kadar hambat median (IC 50) fraksi bioaktif dan analisis statistik
A. Nilai IC50 Fraksi B-1
Rataan ± SD C-1
Rataan ± SD C-2
Rataan ± SD C-3
Rataan ± SD
Nilai IC-50 fraksi KCKT terhadap sel tumor HeLa K-562 WEHI-164 3,6559 1,6553 2,7027 3,7948 1,3950 4,4781 2,5781 1,8655 3,3258 3,34 ± 0,666 1,64 ± 0,236 3,50 ± 0,900 1,9642 3,6601 3,2396 1,2794 2,9546 3,2983 1,4206 2,4654 3,3775 1,55 ± 0,362 3,03 ± 0,600 3,31 ± 0,069 1,7729 2,1419 2,1522 2,5515 1,9998 1,6592 2,4569 1,5180 2,1305 2,26 ± 0,425 1,89 ± 0,327 1,98 ± 0,279 2,8628 2,5176 2,6712 3,1959 2,4934 2,5757 3,5432 2,5066 2,6363 3,20 ± 0,340 2,51 ± 0,121 2,63 ± 0,049
B. Analisis statistik dan uji jarak berganda Duncan dari nilai IC50 fraksi bioaktif
Kadar hambat median (IC50) fraksi bioaktif Fraksi Bioaktif B-1 C-1 C-2 C-3 Keterangan :
HeLa 3,34 ± 0,666 B b 1,55 ± 0,362 A a 2,26 ± 0,425 A a 3,20 ± 0,340 A b
Rataan Nilai IC50 (bpj) K-562 1,64 ± 0 ,236 A a 3,03 ± 0,600 B c 1,89 ± 0,327 A ab 2,51 ± 0,121 B bc
WEHI 164 3,50 ± 0,900 B b 3,31 ± 0,069 B b 1,98 ± 0,279 A a 2,63 ± 0,049 B ab
1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata (p<0,05)
101 Lampiran 9. Sel fagosit aktif dan indeks fagosit pasca perlakuan fraksi EtOAc
A. Data sel fagosit aktif dan indeks fagosit
Kadar bpj 0 0 0 Rataan SD 10 10 10 Rataan SD 100 100 100 Rataan SD 1000 1000 1000 Rataan SD
Sel Fagosit (%) B C 58.0 56.0 57.0 55.5
D 53.5 50.0
A 10.08 10.02
Indeks Fagosit B C 10.05 9.95 10.23 10.1
55.0 55.5 0.5 57.0 57.5 57.5
52.0 51.8 1.8 60.0 61.0 60.0
10.01 10.04 0.04 11.47 11.45 11.41
10.12 10.13 0.09 13.4 13.47 13.59
10.14 10.06 0.10 13.08 13.01 13.19
10.03 10.04 0.11 11.6 11.69 11.6
64.0 1.3 69.0 70.0 71.0
57.3 0.3 61.0 61.0 60.0
60.3 0.6 70.0 70.5 70.0
11.44 0.03 12.89 13 12.87
13.49 0.10 15.3 15.23 15.33
13.09 0.09 16.1 16.07 15.99
11.63 0.05 13.77 13.79 13.76
65.8 1.5 71.0 71.5
70.0 1.0 77.0 79.0
60.7 0.6 66.0 67.5
70.2 0.3 77.0 76.5
12.92 0.07 14.26 14.2
15.29 0.05 16.35 16.66
16.05 0.06 18.99 19.15
13.77 0.02 15.61 15.59
69.0 70.5 1.3
75.0 77.0 2.0
64.0 65.8 1.8
76.0 76.5 0.5
14.24 14.23 0.03
16.5 16.50 0.16
19.11 19.08 0.08
15.65 15.62 0.03
N 1 2
A 59.0 55.5
3
1 2 3
55.0 56.5 2.2 59.0 60.5 60.5
55.5 56.8 1.3 63.5 63.0 65.5
1 2 3
60.0 0.9 64.5 67.5 65.5
1 2 3
Keterangan: Data setiap ulangan adalah rataan dari 2 kali pembacaan hasil
D 10.16 9.94
102 B. Analisis statistik dan uji jarak berganda Duncan Rekapitulasi sel fagosit aktif (SFA) pasca perlakuan fraksi EtOAc Kadar bpj 0 10 100 1000 Rataan Marginal
A 56,5 ± 2,17 60,0 ± 0,86 65,8 ± 1,53 70,5 ± 1,32 63,2 ±5,76 B
Sel fagosit aktif (%) B C 56,8 ± 1,26 55,0 ± 0,50 64,0 ± 1,32 57,3 ± 0,28 70,0 ± 1,00 60,7 ± 0,58 77,0 ± 2,00 65,8 ± 1,76 66,9±7,86 59,8± 4,18 D
D 56,8 ± 1,25 60,3 ± 0,58 70,2 ± 0,28 76,5 ± 0,50 65,9 ± 8,17
A
Rataan marginal 56,4 ± 1,35a 60,4 ± 2,58b 66,7 ± 4,13c 72,4 ± 4,97d
B
Keterangan : 1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata,p<0,05 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata, p<0,05
Stimulasi sel fagosit aktif (SFA) pasca perlakuan fraksi EtOAc Kadar bpj 10 100 1000
A 6,2 16,5 24,8
Stimulasi sel fagosit aktif (%) B C 12,6 3,3 23,2 9,3 35,5 18,6
D 6,2 23,5 34,6
Rekapitulasi indeks fagosit pasca perlakuan fraksi EtOAc Kadar bpj 0 10 100 1000 RM Keterangan :
A 10,04±0,04 11,44±0,03 12,92±0,07 14,23±0,03 12,2±1,82 A
Indeks fagosit B C 10,13±0,09 10,06±0,10 13,49±0,10 13,09±0,09 15,29±0,05 16,05±0,06 16,50±0,16 19,08±0,08 13,9±2,77C 14,6±3,88 D
D 10,04±0,11 11,63±0,05 13,77±0,02 15,62±0,03 12,8±2,44B
Rataan marginal 10,07±0,03a 12,41±0,03b 14,51±0,02c 16,36±0,06d
1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata,p<0,05 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata,p<0,05
Stimulasi indeks fagosit pasca perlakuan fraksi EtOAc Kadar bpj 10 100 1000
A 14,0 28,7 41,8
Stimulasi indeks fagosit (%) B C 33,1 30,1 50,9 59,5 62,9 89,6
D 15,8 37,1 55,5
103 Lampiran 10. Sel fagosit aktif dan Indeks fagosit pasca perlakuan fraksi bioaktif
A. Data sel fagosit aktif dan indeks fagosit pasca perlakuan fraksi bioaktif Kadar bpj 0
Sel fagosit aktif
N 1 2 3
Rataan SD 6.25
1 2 3
Rataan SD 12.5 Rataan SD 25
1 2 3
1 2 3
Rataan SD 50
1 2 3
Rataan SD 100 Rataan SD
1 2 3
B-1 56.5 55.0 56.0 55.8 0.8 62.0 64.0 62.0 62.7 1.2 64.5 66.5 66.0 65.7 1.0 69.0 70.0 69.0 69.3 0.6 72.0 73.0 73.5 72.8 0.8 78.5 77.5 76.0 77.3 1.3
C-1 55.0 56.5 56.5 56.0 0.9 60.0 59.5 59.0 59.5 0.5 64.0 62.0 64.5 63.5 1.3 65.0 68.5 66.5 66.7 1.8 71.5 70.5 70.5 70.8 0.6 76.5 77.0 76.0 76.5 0.5
C-2 53.5 53.0 54.0 53.5 0.5 57.5 58.0 58.0 57.8 0.3 60.0 60.5 61.5 60.7 0.8 63.5 63.5 63.0 63.3 0.3 66.0 65.0 66.5 65.8 0.8 72.0 69.5 71.0 70.8 1.3
Indeks fagosit
C-3 56.0 54.5 55.5 55.3 0.8 59.0 58.0 59.5 58.8 0.8 62.0 63.0 63.0 62.7 0.6 67.0 67.5 67.5 67.3 0.3 70.5 70.5 71.0 70.7 0.3 74.0 73.0 74.5 73.8 0.8
B-1 9.9 9.9 9.9 9.89 0.04 10.6 10.6 10.6 10.59 0.03 10.8 10.7 10.8 10.77 0.03 11.1 11.1 11.1 11.1 0.0 11.5 11.4 11.5 11.5 0.0 11.8 11.8 11.9 11.8 0.0
C-1 9.8 10.0 9.9 9.87 0.08 10.2 10.3 10.3 10.27 0.05 10.5 10.4 10.5 10.49 0.06 10.8 10.7 10.6 10.7 0.1 10.9 10.9 11.0 10.9 0.1 11.6 11.4 11.5 11.5 0.1
C-2 9.9 9.9 9.8 9.88 0.04 10.1 10.0 10.1 10.06 0.04 10.3 10.2 10.2 10.22 0.04 10.5 10.4 10.5 10.5 0.1 10.6 10.6 10.8 10.7 0.1 10.9 11.0 11.0 11.0 0.1
Keterangan: Data setiap ulangan adalah rataan dari 2 kali pembacaan hasil
C-3 9.9 9.9 9.9 9.89 0.03 10.1 10.1 10.1 10.09 0.03 10.2 10.3 10.2 10.23 0.02 10.4 10.5 10.5 10.5 0.0 10.7 10.6 10.7 10.7 0.0 11.0 10.9 11.0 10.9 0.0
104 C. Analisis statistik dan uji jarak berganda Duncan sel fagosit aktif dan indeks fagosit dari fraksi bioaktif Rekapitulasi sel fagosit aktif pasca perlakuan fraksi bioaktif Kadar bpj 0,0 6,25 12,5 25,0 50,0 100,0 RM
B-1 55,8±0,8 62,7±1,2 65,7±1,0 69,3±0,6 72,8±0,8 77,3±1,3 67,28±0,22B
Sel fagosit aktif (%) C-1 C-2 56,0±0,9 53,5±0,5 59,5±0,5 57,8±0,3 63,5±1, 3 60,7±0,8 66,7±1,8 63,3±0,3 70,8±0,6 65,8±0,8 76,5±0,5 70,8±1,3 65,19±0,22C 62,00±0,22A
C-3 55,3±0,8 58,8±0,8 62,7±0,6 67,3±0,3 70,7±0,3 73,8±0,8 64,77±0,22B
Rataan marginal 55,27±0,27a 59,25±0,27b 63,13±0,27c 66,67±0,27d 70,04±0,27e 74,63±0,27f
Keterangan : 1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) Stimulasi sel fagosit aktif pasca perlakuan fraksi bioaktif Kadar bpj 6,25 12,5 25,0 50,0 100,0
B-1 12,2 17,6 24,2 30,4 38,5
Stimulasi sel fagosit aktif (%) C-1 C-2 3,0 8,1 13,4 13,4 19,0 18,4 26,5 23,1 36,6 32,4
C-3 6,3 13,3 21,7 27,7 33,4
Rekapitulasi indeks fagosit pasca perlakuan fraksi bioaktif Kadar Indeks fagosit Rataan bpj B-1 C-1 C-2 C-3 marginal 0,0 9,89±0,04 9,87±0,08 9,88±0,04 9,89±0,03 9,88±0,02 a 6,25 10,59±0,03 10,27±0,05 10,06±0,04 10,09±0,03 10,25±0,01b 12,5 10,77±0,03 10,49±0,06 10,22±0,04 10,23±0,02 10,42±0,02c 25,0 11,1±0,00 10,7±0,10 10,5±0,10 10,5±0,00 10,67±0,03d 50,0 11,5±0,00 10,9±0,10 10,7±0,10 10,7±0,00 10,93±0,02e 100,0 11,8±0,00 11,5±0,10 11,0±0,10 10,9±0,00 11,31±0,03f C B A A RM 10,9±0,69 10,6±0,57 10,4±0,40 10,04±0,39 Keterangan : 1. Huruf kecil superskrip yang berbeda ke arah kolom menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) 2. Huruf besar superskrip yang berbeda ke arah baris menunjukkan berbeda nyata (p<0,05) Peningkatan indeks fagosit (%) pasca perlakuan fraksi bioaktif Kadar bpj 6,25 12,5 25,0 50,0 100,0
B-1 7,1 8,9 12,0 15,8 19,8
Stimulasi indeks fagosit (%) C-1 C-2 4,1 1,8 6,2 3,4 8,2 6,1 10,9 7,8 16,7 10,9
C-3 2,0 3,4 5,7 7,9 10,6
105 Lampiran 11. Data pengamatan jumlah kromosom sel tumor
No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38
K(-) 49 53 53 48 47 54 50 50 53 49 50 53 49 48 49 53 48 53 50 48 49 53 51 53 47 54 48 47 48 53 49 53 54 47 51 47 50 48
Sel HeLa B-1 48 47 47 48 48 49 47 49 48 46 47 48 47 47 47 46 48 47 47 46 46 47 47 47 48 46 47 46 48 47 47 48 48 46 48 48 47 47
C-1 47 49 48 48 48 47 48 50 47 45 48 49 49 47 47 46 46 48 48 46 45 48 49 48 47 46 46 48 48 46 48 48 47 46 49 47 49 48
K(-) 48 48 50 51 48 51 51 49 49 49 51 51 48 51 50 50 52 49 48 51 49 51 47 48 51 46 50 51 51 50 48 51 51 51 46 48 48 51
Sel K562 B-1 48 49 49 50 46 47 47 48 50 46 46 48 48 49 48 50 48 48 49 50 46 45 47 48 48 47 47 46 46 46 49 50 51 50 46 46 48 47
C-1 48 50 49 49 44 49 48 46 51 46 50 49 48 48 49 53 48 53 50 48 49 53 51 53 47 48 54 47 53 48 49 51 47 51 46 47 50 53
Sel WEHI K(-) B-1 46 37 44 40 49 38 49 42 44 41 46 41 48 40 46 40 49 37 46 38 48 38 49 38 44 40 49 41 49 45 51 38 48 40 51 39 46 43 48 40 48 39 46 41 51 44 46 39 47 40 48 47 50 45 47 45 51 43 48 48 46 40 51 42 47 48 47 40 46 37 44 37 46 45 51 43
C-1 45 39 40 44 42 41 46 43 41 42 39 39 40 42 43 48 43 40 40 42 41 44 46 40 41 42 40 38 41 49 45 46 47 47 40 48 48 45
106 Data pengamatan jumlah kromosom sel tumor (sambungan)
39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 Jml Rataan SD Modus 2 n± 2 n+
Sel HeLa K(-) B-1 C-1 53 48 48 50 48 48 51 46 46 49 47 48 49 48 48 53 48 46 53 47 49 50 47 47 49 49 47 54 47 48 51 48 46 53 50 46 2524 2368 2371 50,48 47,36 47,42 2,32 0,90 1,16 53 47 48 21 49 49 29 1 1
Sel K562 K(-) B-1 C-1 51 48 48 50 48 50 49 49 53 51 47 51 51 47 47 47 48 49 48 46 53 51 47 50 51 46 49 48 47 51 46 50 48 50 47 53 2476 2387 2475 49,52 47,74 49,5 1,62 1,45 2,34 51 48 48 22 42 28 28 8 22
K(-) 48 48 47 51 46 48 48 48 49 44 46 46 2379 47,58 2,03 46 0 50
IP
1,10
1,08
1,19
No
1,03
1,03
1,04
1,08
Sel WEHI B-1 C-1 39 48 39 44 45 47 43 49 44 44 36 37 46 37 38 46 43 42 41 40 39 40 41 41 2053 2142 41,06 42,84 3,05 3,28 40 40 39 30 11 20
1,03
Keterangan : 1. 2. 3. 4.
Kromosom sel manusia (2n=46); sel mencit (2n=40) Sel manusia (HeLa dan K-562):~diploidi(2n±):< 46-49; hiper-diploidi (2n+);50-59 Sel mencit (sel WEHI) ; ~ diploidi (2n±), < 40-43 ; hiperdiploidi (2n+), 44-53 Angka dicetak tebal menunjukkan tingkat hiper-diploidi (2n+)
1,07