51
DAFTAR PUSTAKA Aldercreutz CH. 1995. People who eat soybeans have less cancer. J Nutr. 15(3):757S-770S Aldercreutz H. 2002. Phytoestrogens and breast cancer. Lancet Oncol, 3:364 Akimaya T, Ishida J, Nakagawa S, Ogawara H, Watanabe SI, Itoh N, Shibuya M, Fukami Y. 1987. Genistein, a specific inhibitor of tyrosine-spesific protein kinase. J. Biol Chem.267:5592-5596. [Asiamaya]Aasiamaya.22007.kKedelaig(GlycineMmaxLL.Merr.).hhttp://www.asi amaya.com [16 mei 2007]. Astuti S. 1999. Pengaruh Tepung Kedelai dan Tempe dalam Ransum terhadap Fertilitas Tikus Percobaan.[ Thesis]. Bogor: Program Pascasarjana IPB. Baker DEJ, Lindsey JR, Weisborth SH. 1980. The Labaratory Rat. Vol II. Research applicatiaons. Academic Press Inc. London. Bennett GW, Whitehead SA. 1983. Mammalian Neuroendocrinology. London & Canberra: Croom Helm. Biben A. 2001. Optimalisasi Terapi Sulih Hormon Sejak Masa Perimenopause. Dalam: Baziad A, Rachman IA, Sungkar A. Kumpulan makalah Konggres I Menopause-Andro-Pause Indonesia.Jakarta: 15-16 September. Cahyadi W. 2007. Kedelai Khasiat dan Teknologi. Jakarta : Bumi aksara. Cole HH, Cupps PT. 1977. Reproduction in Domestic Animals. Ed ke-3.Academic Press. New York and London. Gadjahnata KHO. 1989. Biologi Kedokteran I. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan, Dirjen Pendidikan Tinggi, Pusat Antar Universitas Ilmu Hayat Insitut Pertanian Bogor. Bogor: IPB Press. Ganong WF. 2003. Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Ed ke-20. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Guyton AC. 1994. Fisiologi Kedokteran bagian III. Ed ke-7. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Guyton AC .1996. Fisiologi Manusia dan Mekanisme Penyakit (Human Physiology and Mechanism of disease) . Terjemahan. Ed ke-3. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Hafez ESE. 1970. Reproduction and Breeding Techniques for Laboratory Animals. Philadelphia : Lea and Febiger.
52
Hafez ESE. 1987. Reproduction in Farm Animals. Ed-5. Lea and Febiger Philadelphia. Hafez ESE, Jainudeen MR, Rosnina Y. 2000. Hormones, growth factors and reproduction. Di dalam: Reproduction in Farm Animals. Ed ke-3. Lippincott Williams & Wilkins. Philadelphia. hlm 31-54. Heinnermen J. 2003. Peran Isoflavon untuk Kesehatan Anda. Jakarta: Prestasi Pustakaraya. Hidayati. 2003. Peran isofavon untuk kesehatan reproduksi Dunia Kedokteran 193
wanita. Cermin
Hudson EJ. 2003. Breast Cancer: Dietary links to gland and tumor development and effects of genistein and α-Lactalbulin on primary tumors in vitro. A thesis submitted to the Graduate Faculty of North Carolina State University in partial fulfillment of the requirements for the degree of Master of Science. Hunter RHF. 1995. Fisiologi dan Teknologi Reproduksi Hewan Betina Domestik. Alih bahasa D.K. Harya Putra. Bandung : Institut Teknologi Bandung Press. [Ipteknet]Iipteknet.22007.tTanamanoObatiIndonesia.hhttp://www.iptek.net.id/ind/ pd_tanobat/index.php. [1 Mei 2007]. Jha HC, Kiriakidis S, Hoppe M, Egge H.1997. Tempe constituents as antioxydants. Paper Abstract for International Tempe Symposium, Bali. Institutes Physiological Chemistry, University of Bonn. Johnson M, dan Everitt B. 1984. Essential Reproduction. Blackwell Scientific Publications. London. Koswara S. 1995. Teknologi Pengolahan Kedelai Menjadikan Makanan Bermutu. Jakarta: Pustaka Sinar Harapan. Kuiper GGJM, Enmark E, Peitohuikki M, Nillson S, Gustaffson JA. 1996. Cloning of a Novel Estrogen Receptor Expressed in Rat Prostrate and ovary. Proc Natl Acad Sci. USA. 93: 5925-5920. Macmillan KL, Burke AJ. 1996. Superovulatory doses of pregnant mare serum gonadotropin cause delayed implantation and infertility in immature rats. Bio. Reprod. 25 : 253-260 Malole MBM, Pramono CSU. 1989. Penggunaan Hewan-hewan Percobaan di Laboratorium. Departemen Pendidikan dan Kebudayaan, Dirjen
53
Pendidikan Tinggi, Pusat Antar Universitas Bioteknologi. Bogor: IPB Press. Mattjik AA, Sumertajaya IM. 2006. Perancangan Percobaan Dengan Aplikasi SAS dan MINITAB. Ed ke-3. Bogor: IPB Press. MuchlisMM,AkrisnawatiAA.22007.PPeluangPPerbaikanKKualitasBBijiKKedelai. http://www.puslittan.bogor.net/webbaru/downloads/Sem223311MMuchlis Adie.zipp[30 Mei 2007] Nakajima N, Nozak N, Ishihara N, Ishikawa A, Tsuji H. 2005. Analysis of isoflavone content in tempeh, a fermented soybean, and preparation of a new isoflavone- enriched tempeh. Journal of Bioscience and Bioengineering vol.100.No.6, 685-6876.2005.DOL:10.1263/jbb.100.685. Nalbandov AV. 1990. Fisiologi Reproduksi pada Mamalia dan Unggas. Ed ke-3.Jakarta: UI-press. Partodihardjo, S. 1992. Ilmu Reproduksi Hewan. Fakultas Kedokteran Hewan. Bogor: Institut Pertanian Bogor. Paech K et al. 2001.Interaction of Phytoestrogen with estrogen receptor ER-α dan ER-ß at ap-1 sites. Science 277:1508-1510. PawiroharsonoSS.22007. Prospek dan Manfaat Isoflavon untuk Kesehatan. Jakarta: Direktorat Teknologi Bioindustri, Badan Pengkajian dan PenerapanaTeknologi.Shttp://www.tempointeraktif.com/medika/arsip/042 001/indexisi.asp?fi:epus [1 Mei 2007]. Persky VW, Turyk ME, Lingt W, Freels S, Barnes S.2002. Effect of soy protein on endogenous in postmenopausal women. Am J. Clin Nutr.75:145-153. Pomfrey VJ. 2004. Genestein : A multimechanistic anti-cancer agent from soya. http://www.vivienpomfrey.co.uk. Pineda MH. 1989. Female Reproductive System. London : Lea & Febiger. Qiju W. 2003. Purification and antioxidant activities of soybean isoflavon. A Thesis Submitted to the Graduate Faculty of the Louisiana State University and Agricultural and Mechanical College in partil filfillment of the requirements for the degree of Master of Science in The Department of Food Science B.S.,Zhejiang University. Redina OFA, Maksimovsky LF. 1994. Induction of superovulation in DD mice at different strages of the oestrus cycle. J Reprod Fert.102 : 263-267
54
Ruggiero RJ, Pharm D, Frances EL. 2002. Estrogen: Physiology, Pharmacology, and formulations of replacement therapy. J Midwifery and Women ̉s Health. 47(3) : 130-138
Setchell KDR. Absorption and metabolism of isoflavones. The Soy Connection Newsletter. 6:2. Setchell KDR and Cassidy A. 1999. Dietary isoflavon : Biological effects and relevance to human health. Symposium on phytochemicals : Biochemistry and Physiology. J Nutr.129 : 758S-767S. Sibuea WH, Ndraha S, Haryono SJ, dan Rumondor B. 1996. Tumor Payudara. Petunjuk praktis bagi kaum awam. Pusat Informasi Kesehatan RS.Tebet. Silva JRV, Van den Hurk R, de Matos MHT, Dos Santos RR, Pessona C, de Moraes MO, Fiqueiredo JR. 2004. Influences of FSH and EGF on primodial folicles during in vitro culture of caprine ovarian cortical tissue. Theriogenology 61: 1691-1704. Smith JB, Mangkoewidjojo S. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan Dan Penggunaan Hewan Percobaan di Daerah Tropis. Jakarta:UI Press. Sofyan R. 2000. Terapi Kanker pada Tingkat Molekuler. Cermin Dunia Kedokteran 5:27. Sullivan R. 2007. Brown Rat. http://en.wikipedia.org/wiki/Brown_rat [3 Mei 2007]. Syarief R, Hermanianto J, Hariyadi P, Wiraatmadja S. 1999. Wacana Tempe Indonesia. Surabaya: Universitas Katolik Widya Mandala. Tanu I. 2005. Farmakologi dan Terapi. Ed ke-4. Jakarta: Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Toelihere MR. 1979. Fisiologi Reproduksi pada Mamalia pada Ternak. Bandung: Penerbit Angkasa. Tou JCL, Grindeland RE, Wade CE. 2003. Effect of diet and exposure to hindlimb suspension on estrous cycling in Sprague-Dawley rats. Am J Endrocrinol Metab 286 Turner CD, Bagnara JT. 1976. Endokrinologi Umum. Ed ke-6. Yogyakarta: Air Langga University Press. [USDA]UUnitedSStatesDDepartmentOofAAgriculture.22007.GGlycinemmaxL (L.) Merr.soybean. http://plants.usda.gov/tools.html [30 mei 2007].
55
Vincent A, Fitzpatrick LA. 2000. Soy isoflavones: Are they useful in menopouse. Subspecialty Clinics: Endroconology, Metabolism, and Nutrition. Mayo Clin Proc. 75: 1174-1184. Wang HJ and Murphy PA. 1994. Isoflavones content in commercial soybean food. J. of Agric Food Chem.42: 1660-1673. Warner M, Nilson S, Gustafsson JA. 1999. The estrogen receptor family. Curr Opin Ol stet Gynecol. 11: 249-254 Winarsi H. 2005. Isoflavon berbagai sumber, sifat, dan manfaatnya pada penyakit degeneratif. Yogyakarta: Gadjah mada University Press. Winarsi H, Muchtadi D, Zakaria FR, Purwantara B. 2004. Efek susu skim yang disuplementasi isoflavon kedelai dan Zn terhadap sindrom nenopause pada wanita premenopause. J teknologi Industri Pangan. 15(3): 179-187. Wylie J, Rosett. 2005. Menopause, micronutrients, and hormane therapy. Am J. Clin Nutr 81:1223S-1231S. Whitten PL, HB Patisaul. 2001. Cross-species and interassay comparisons of phytoestrogenaction.EEnvironHHealthPPerspect.hhttp://www.soyonlinese rvice.co.nz/htm [20 Mei 2007] Yu Y, Li W, Han Z, Luo M, Tan J. 2003. The effect of folicle-stimulating hormone on folicular development, granulosa cell apoptosis and steroidogenesis and its mediation by insulin like growth factor i in the goat ovary. Theriogenology 60:1691-1704. Yulianto.22003.KKedelai,BBahanPPanganPPenyayangTTulang.http://www.sinar harapan.coid/iptek/kesehatan/2003/1024/kes1.html.[16 Mei 2007] YuliantoWWA.22004.KKedelaiKKayaFFotokimiaPPenyayangLLansia.hhttp://w ww.kompas.com/ [16 Mei 2007]. Zhang Y, Song TT, Cunnick JE, Murphy PA, Hendric HS. 1999. Daidzein and genistein glucuronides in vitro are weakly estrogenic and active human natural killer cell at nutritionally relevant concentrations. J. Nutr.129:399405.
56
Lampiran 1. Proses pembuatan tepung kedelai
Kedelai
Penggilingan (diblender)
Pengeringan (oven), suhu 450C, kadar air 10%
Penepungan (disk mill)
Pengayakan (60 mesh)
Tepung Kedelai
57
Lampiran 2. Proses pembuatan tempe.
KEDELAI
Pembersihan
Pencucian + Perendaman Perebusan (1000C, 30 Menit)
Perendaman dengan air rebusan (22 Jam)
Pengupasan kulit Perebusan dalam air asam (45 menit) Pendinginan (suhu kamar) Peragian (2 gr/kg kedelai) Pembungkusan dengan plastik Inkubasi (suhu 310C, RH 78-85%; 24 jam)
TEMPE
58
Lampiran 3. Proses pembuatan tepung tempe.
Tempe Mentah
Pengirisan Tempe (1 x 2 x 0,5 cm3)
Penggilingan (diblender)
Pengeringan (oven), suhu 450C, kadar air 10%
Penepungan (disk mill)
Pengayakan (60 mesh)
Tepung Tempe
59
Lampiran 4. Prosedur analisis kandungan isoflavon.
Ekstraksi Tepung Kedelai dan Tepung Tempe Tepung kedelai dan tepung tempe dikeringkan selama 4 jam. Selanjutnya diekstrak dengan larutan methanol 99,8% sebanyak 2 kali, masing-masing 100 ml dengan menggunakan pompa vakum yang sudah dilapisi kertas kering, sehingga metanol yang digunakan untuk mengekstrak sebanyak 200 ml. Senyawa isoflavon termasuk senyawa polar sehingga mudah larut dengan larutan polar seperti alkohol atau metanol. Ekstraksi dilakukan 2 kali agar senyawa isoflavon dalam tepung kedelai dan tepung tempe terekstrak secara keseluruhan. Ekstrak yang diperoleh disimpan dalam ruang dingin kurang lebih 00C selama satu malam untuk menggumpalkan lemaknya. Lemak yang ada dipisahkan melalui penyaringan dengan pompa vakum yang dilapisi kertas saring. Filtrat yang diperoleh selanjutnya diuapkan dengan rotavapor pada suhu 400C. Ekstrak yang telah kering dilarutkan dalam 10 ml metanol absolute (p.a), kemudian disentrifuse pada kecepatan 4000 rpm selama 5 menit dengan tujuan untuk mendapatkan filtrate yang bening dan memisahkan endapan yang terbentuk.
Pemurnian Isoflavon Filtrat yang terbentuk diambil 1.5 ml dan dimurnikan dalam kolom kromatografi volume 12 ml yang berisi MN-Poliamida CC6 dengan ukuran partikel 0.05-0.16 mm. Sebelum filtrate dituangkan ke dalam kolom, MNPoliamida CC6 direndam semalam dalam kromatografi dengan larutan metanol 25%. Elusi dalam kolom dilakukan secara bertahap dengan metanol 25%, 50%, 70%, masing-masing 50 ml. Eluen yang didapat dari elusi metanol 70% (fraksi 70%) ditampung dan dikeringkan dengan rotavapor pada suhu 400C sampai kering. Residu (endapan kering yang diperoleh) dilarutkan dalam 1 ml metanol absolut dan disentrifuse pada 4000 rpm selama 5 menit untuk memisahkan endapan yang ada, kemudian disaring. Filtrat yang bening siap untuk dianalisa dengan menggunakan HPLC.
60
Identifikasi Isoflavon Analisis kuantitatif dilakukan dengan kromatografi cairan tekanan tinggi (HPLC). HPLC yang digunakan berada pada kondisi sebagai berikut: Volume sampel
: 40 µl
Kolom
: Li chrosorb RP-18 (250 x 4 mm, 5 µm)
Eluen
: Asam asetat 3% (pelarut A); Acetonitril (pelarut B)
Gradien
: 20% dalam (A + B) sampai 60% (A+B) selama 35 menit.
Detektor
: UV 261 nm
Kecepatan alir
: 0.8 ml/menit
Suhu
: 350C
61
50 g Sampel dikeringkan pada suhu 400c selama 5 jam Diekstraksi dengan metanol absolut dua kali masing-masing 100 ml, disaring dengan dengan pompa vakum Ekstrak disimpan dalam ruang pendingin 00C selama semalam untuk menggumpalkan lemaknya Lemak dipisahkan dengan pompa vakum Filtrat jernih diuapkan dengan rotavapor pada suhu 400C Residu dilarutkan dalam 10 ml metanol absolut Disentrifuse pada kecepatan 4000 rpm selama 5 menit Diambil 1.5 ml filtrat untuk dipurifikasi dalam kolom kromatografi yang berisi MN-Poliamida CC6 Dielusi bertahap dengan metanol 25%, 50% dan 70%, masing-masing 50 ml Hasil elusi dengan 70% metanol dikeringkan dengan rotavapor pada suhu 400C Residu dilarutkan dalam ml metanol grade HPLC Disentrifusi pada 4000 rpm selama 5 menit Diambil 40 µl untuk diinjeksi pada HPLC
Bagan Alir Analisis Kuantitatif Senyawa Isoflavon
62
Lampiran 5. Kromatogram HPLC Standar Senyawa Isoflavon.
63
Lampiran 6. Kromatogram HPLC Tepung Kedelai.
64
Lampiran 7. Kromatogram HPLC Tepung Tempe
65
Lampiran 8. Contoh perhitungan kandungan senyawa isoflavon Tepung kedelai.
206.37 ppm
Tepung tempe
901.24 ppm
66
Lampiran 9. Data rataan fase siklus estrus tikus non ovariektomi sesudah diberi pelet (Non-Ov K) Tabel 1. Rataan fase siklus estrus pertama tikus non ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pellet Tikus Ke-
H-14
H-15
H-16
H-17
H-18
P
E
M
D
D
12
12
24
60
D
P
12
12
24
60
D
D
P
12
12
24
60
M
D
D
D
12
12
24
60
D
D
D
P
12
12
24
60
P
S
P
S
P
S
P
S
P
1.
P
E
M
M
D
D
D
D
2.
E
M
M
D
D
D
D
3.
E
M
M
D
D
D
4.
D
D
P
E
M
5.
E
M
M
D
D
Tabel 2. Rataan fase siklus estrus kedua tikus non ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pellet Tikus Ke-
H-18
H-19
H-20
H-21
H-22
P
E
M
D
D
12
12
24
60
D
P
12
12
24
60
D
D
P
12
12
24
60
M
D
D
D
12
12
24
60
D
D
D
P
12
12
24
60
S
P
S
P
S
P
S
P
S
1.
P
E
M
M
D
D
D
D
2.
E
M
M
D
D
D
D
3.
E
M
M
D
D
D
4.
D
D
P
E
M
5.
E
M
M
D
D
67
Tabel 3. Rataan fase siklus estrus ketiga tikus non ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pellet Tikus Ke-
H-23
H-24
H-25
H-26
H-27
P
E
M
D
D
12
12
24
60
D
P
12
12
24
60
D
D
P
12
12
24
60
M
D
D
D
12
12
24
60
D
D
D
P
12
12
24
60
P
S
P
S
P
S
P
S
P
1.
P
E
M
M
D
D
D
D
2.
E
M
M
D
D
D
D
3.
E
M
M
D
D
D
4.
D
D
P
E
M
5.
E
M
M
D
D
Lampiran 10. Data rataan fase siklus estrus tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai (Non-Ov Kd) Tabel 1. Rataan fase siklus estrus pertama tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-14
H-15
H-16
H-17
P
E
M
D
P
S
P
S
P
S
P
S
1.
E
E
M
M
D
D
P
P
24
24
24
24
2.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
3.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
4.
E
M
M
D
D
P
P
E
24
24
24
24
5.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
68
Tabel 2.Rataan fase siklus estrus kedua tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-17
H-18
H-19
H-20
P
E
M
D
P
S
P
S
P
S
P
S
1.
E
E
M
M
D
D
P
P
24
24
24
24
2.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
3.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
4.
E
M
M
D
D
P
P
E
24
24
24
24
5.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
Tabel 3. Rataan fase siklus estrus ketiga tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-21
H-22
H-23
H-24
P
E
M
D
P
S
P
S
P
S
P
S
1.
E
E
M
M
D
D
P
P
24
24
24
24
2.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
3.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
4.
E
M
M
D
D
P
P
E
24
24
24
24
5.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
69
Tabel 4. Rataan fase siklus estrus keempat tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-25
H-26
H-27
H-28
P
E
M
D
P
S
P
S
P
S
P
S
1.
E
E
M
M
D
D
P
P
24
24
24
24
2.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
3.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
4.
E
M
M
D
D
P
P
E
24
24
24
24
5.
P
P
E
E
M
M
D
D
24
24
24
24
Lampiran 11. Data rataan fase siklus estrus tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung tempe (Non-Ov T). Tabel 1. Rataan fase siklus estrus pertama tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung tempe Sesudah diberi tepung tempe Tikus H-14 H-15 H-16 H-17 H-18 H-19 H-20 H-21 KeP E M P S P S P S P S P S P S P S P
D
1.
P E E E M M M M D D D D P P
P
48
36
48
48
2.
D D D P P P P E E E M M M M
D
48
36
48
48
3.
M M M D D D D P P P P E E E
M
48
36
48
48
4.
P P E E E M M M M D D D D P
P
48
36
48
48
5.
E E E M M M M D D D D P P P
P
48
36
48
48
70
Tabel 2. Rataan fase siklus estrus kedua tikus non ovariektomi sesudah diberi tepung tempe Sesudah diberi tepung tempe Tikus H-22 H-23 H-24 H-25 H-26 H-27 H-28 H-29 KeP E M S P S P S P S P S P S P S P S
D
1.
P
E E E M M M D D D D D P P P 48
36
48
48
2.
D
D P P P P E E E M M M M D D 48
36
48
48
3.
M
M D D D D P P P P E E E M M 48
36
48
48
4.
P
E E E M M M M D D D D P P P 48
36
48
48
5.
E
E M M M M D D D D D P P P P 48
36
48
48
Lampiran 12. Data rataan fase siklus estrus tikus ovariektomi sesudah diberi pelet (Ov K) Tabel 1. Rataan fase siklus estrus pertama tikus ovariektomi sesudah diberi pelet. Sesudah diberi pelet Tikus Ke-
H-14
H-15
H-16
P
E
M
D
P
12
0
24
36
P
M
12
0
24
36
D
P
M
12
0
24
36
P
M
M
D
12
0
24
36
D
P
M
M
12
0
24
36
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
D
2.
M
D
D
D
3.
M
D
D
4.
D
D
5.
D
D
71
Tabel 2. Rataan fase siklus estrus kedua tikus ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pellet Tikus Ke-
H-17
H-18
H-19
P
E
M
D
P
12
0
24
36
P
M
12
0
24
36
D
P
M
12
0
24
36
P
M
M
D
12
0
24
36
D
P
M
M
12
0
24
36
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
D
2.
M
D
D
D
3.
M
D
D
4.
D
D
5.
D
D
Tabel 3. Rataan fase siklus estrus ketiga tikus ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pelet Tikus Ke-
H-20
H-21
H-22
P
E
M
D
P
12
0
24
36
P
M
12
0
24
36
D
P
M
12
0
24
36
P
M
M
D
12
0
24
36
D
P
M
M
12
0
24
36
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
D
2.
M
D
D
D
3.
M
D
D
4.
D
D
5.
D
D
Tabel 4. Rataan fase siklus estrus keempat tikus ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pelet Tikus Ke-
H-23
H-24
H-25
P
E
M
D
P
12
0
24
36
P
M
12
0
24
36
D
P
M
12
0
24
36
P
M
M
D
12
0
24
36
D
P
M
M
12
0
24
36
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
D
2.
M
D
D
D
3.
M
D
D
4.
D
D
5.
D
D
72
Tabel 5. Rataan fase siklus estrus kelima tikus ovariektomi sesudah diberi pelet Sesudah diberi pellet Tikus Ke-
H-26
H-27
H-28
P
E
M
D
P
12
0
24
36
P
M
12
0
24
36
D
P
M
12
0
24
36
P
M
M
D
12
0
24
36
D
P
M
M
12
0
24
36
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
D
2.
M
D
D
D
3.
M
D
D
4.
D
D
5.
D
D
Lampiran 13. Data rataan tikus ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai (Ov Kd). Tabel 1. Rataan fase siklus estrus pertama tikus ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-14
H-15
H-16
P
E
M
D
E
12
12
24
24
M
M
12
12
24
24
P
M
M
12
12
24
24
D
P
E
M
12
12
24
24
P
E
M
M
12
12
24
24
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
P
2.
E
D
D
P
3.
E
D
D
4.
M
D
5.
D
D
73
Tabel 2. Rataan fase siklus estrus kedua tikus ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-17
H-18
H-19
P
E
M
D
E
12
12
24
24
M
M
12
12
24
24
P
M
M
12
12
24
24
D
P
E
M
12
12
24
24
P
E
M
M
12
12
24
24
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
P
2.
E
D
D
P
3.
E
D
D
4.
M
D
5.
D
D
Tabel 3. Rataan fase siklus estrus ketiga tikus ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-20
H-21
H-22
P
E
M
D
E
12
12
24
24
M
M
12
12
24
24
P
M
M
12
12
24
24
D
P
E
M
12
12
24
24
P
E
M
M
12
12
24
24
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
P
2.
E
D
D
P
3.
E
D
D
4.
M
D
5.
D
D
74
Tabel 4. Rataan fase siklus estrus keempat tikus ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-23
H-24
H-25
P
E
M
D
E
12
12
24
24
M
M
12
12
24
24
P
M
M
12
12
24
24
D
P
E
M
12
12
24
24
P
E
M
M
12
12
24
24
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
P
2.
E
D
D
P
3.
E
D
D
4.
M
D
5.
D
D
Tabel 5. Rataan fase siklus estrus kelima tikus ovariektomi sesudah diberi tepung kedelai Sesudah diberi tepung kedelai Tikus Ke-
H-26
H-27
H-28
P
E
M
D
E
12
12
24
24
M
M
12
12
24
24
P
M
M
12
12
24
24
D
P
E
M
12
12
24
24
P
E
M
M
12
12
24
24
P
S
P
S
P
S
1.
M
M
D
D
P
2.
E
D
D
P
3.
E
D
D
4.
M
D
5.
D
D
75
Lampiran 14. Data rataan tikus ovariektomi sesudah diberi tepung tempe (Ov T). Tabel 1. Rataan fase siklus estrus pertama tikus ovariektomi sesudah diberi tepung tempe Sesudah diberi tepung tempe Tikus Ke-
H-14
H-15
H-16
H-17
H-18
P
E
M
D
D
24
12
12
60
D
D
24
12
12
60
P
E
M
24
12
12
60
D
D
P
P
24
12
12
60
P
P
E
M
24
12
12
60
P
S
P
S
P
S
P
S
P
1.
P
P
E
M
D
D
D
D
2.
D
P
P
E
M
D
D
3.
D
D
D
D
D
P
4.
E
M
D
D
D
5.
D
D
D
D
D
Tabel 2. Rataan fase siklus estrus kedua tikus ovariektomi sesudah diberi tepung tempe Sesudah diberi tepung tempe Tikus Ke-
H-18
H-19
H-20
H-21
H-22
P
E
M
D
D
24
12
12
60
D
D
24
12
12
60
P
E
M
24
12
12
60
D
D
P
P
24
12
12
60
P
P
E
M
24
12
12
60
S
P
S
P
S
P
S
P
S
1.
P
P
E
M
D
D
D
D
2.
D
P
P
E
M
D
D
3.
D
D
D
D
D
P
4.
E
M
D
D
D
5.
D
D
D
D
D
76
Tabel 3. Rataan fase siklus estrus ketiga tikus ovariektomi sesudah diberi tepung tempe Sesudah diberi tepung tempe Tikus Ke-
H-23
H-24
H-25
H-26
H-27
P
E
M
D
D
24
12
12
60
D
D
24
12
12
60
P
E
M
24
12
12
60
D
D
P
P
24
12
12
60
P
P
E
M
24
12
12
60
P
S
P
S
P
S
P
S
P
1.
P
P
E
M
D
D
D
D
2.
D
P
P
E
M
D
D
3.
D
D
D
D
D
P
4.
E
M
D
D
D
5.
D
D
D
D
D
77
Lampiran 15. Data pengukuran estradiol pada fase diestrus tikus putih ( Rattus norvegicus) galur Sprague- Dawley. Perlakuan (P)
Ulangan (n)
Non-Ov K
5
Non-Ov Kd
5
Non Ov T
5
Ov K
5
Ov Kd
5
Ov T
5
Hasil pengukuran (pg/ml) 21.052 21.647 21.052 21.089 23.087 22.807 14.355 13.021 21.685 19.602 23.780 29.051 29.819 24.072 21.385 13.021 13.888 13.743 13.719 13.021 14.505 14.632 15.045 14.704 15.072 18.508 14.863 14.837 14.760 18.476
Rataan ± SE 21.58± 0.438
18.294 ± 2.192
25.621 ± 1.822
13.478 ± 0.659
14.791 ± 0.127
16.288 ± 1.127
78
Lampiran 16. Hasil Analisis Statistik Kadar Estradiol Tikus non ovariektomi UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KADAR ESTRADIOL TIKUS PUTIH GALUR SPRAGUE-DAWLEY
(Rattus norvegicus)
The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values perlakuan 3 Non-Ov K Non-Ov Kd Non-ov T Number of Observations Read Number of Observations Used
15 15
The ANOVA Procedure Dependent Variable: kadar estradiol Source Model Error Corrected Total
Source perlakuan
Sum of Squares 134.6890012 133.0916864 267.7806876
DF 2 12 14
R-Square 0.502983
Mean Square 67.3445006 11.0909739
F Value Pr > F 6.07 0.0151
Coeff Var Root MSE kadar estradiol Mean 15.25315 3.330311 21.83360 DF Anova SS Mean Square F Value Pr >F 2 134.6890012 67.3445006 6.07 0.0151
The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for kadar estradiol NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate. Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 11.09097 Number of Means Critical Range
2 4.589
3 4.804
Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N perlakuan
B B
A A
25.621 21.585 18.294
5 5 5
Non-ov T Non-ov K Non-ov Kd
79
Lampiran 17. Hasil Analisis Statistik Kadar Estradiol Tikus Ovariektomi (Rattus norvegicus)
UJI BEDA NILAI TENGAH UNTUK KADAR ESTRADIOL TIKUS PUTIH GALUR SPRAGUE-DAWLEY
The ANOVA Procedure Class Level Information Class perlakuan
Levels 3
Values Ov K Ov Kd Ov T
Number of Observations Read Number of Observations Used
15 15
The ANOVA Procedure Dependent Variable: kadar estradiol Source Model Error Corrected Total R-Square 0.535406 Source perlakuan
Sum of Squares 19.77408373 17.15877520 36.93285893
DF 2 12 14
Mean Square 9.88704187 1.42989793
F Value 6.91
Pr >F 0.0101
Coeff Var Root MSE kadar estradiol Mean 8.050823 1.195783 14.85293 DF Anova SS Mean Square F Value Pr >F 2 19.77408373 9.88704187 6.91 0.0101
The ANOVA Procedure Duncan's Multiple Range Test for kadarestradiol NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate. Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 1.429898 Number of Means Critical Range
2 1.648
3 1.725
Means with the same letter are not significantly different. Duncan Grouping Mean N perlakuan
B B
A A
16.2888 14.7916 13.4784
5 5 5
Ov T Ov Kd Ov K
80
Lampiran 18. Hasil analisis statistik untuk panjang siklus estrus terhadap kadar estradiol. UJI KORELASI DAN REGRESI UNTUK PANJANG SIKLUS ESTRUS TERHADAP KADAR ESTRADIOL The SAS System The CORR Procedure 2 Variables: x
y
Simple Statistics Variable Maximum x 180.00000 y 25.62140
N
Mean
Std Dev
Sum
Minimum
6
106.00000
39.73915
636.00000
72.00000
6
18.34327
4.56042
110.05960
13.47840
Pearson Correlation Coefficients, N = 6 Prob > |r| under H0: Rho=0 x
y
x
1.00000
y
0.91334 0.0109
0.91334 0.0109 1.00000
The GLM Procedure Number of Observations Read Number of Observations Used
6 6
The GLM Procedure Dependent Variable: y Source Model Error Corrected Total
Source 1 86.74539293 Source x
DF 1 4 5 R-Square 0.834193 DF 86.74539293 DF 1
Parameter Intercept x
Sum of Squares Mean Square 86.7453929 86.7453929 17.2417847 4.3104462 103.9871777 Coeff Var Root MSE 11.31838 2.076161 Type I SS Mean Square 20.12 0.0109 Type III SS Mean Square 86.74539293 86.74539293
Estimate 7.232973860 0.104814083
Standard Error 2.61766466 0.02336456
F Value 20.12
Pr> F 0.0109
y Mean 18.34327 F Value
Pr> x
F Value 20.12
Pr >F 0.0109
t Value 2.76 4.49
Pr > |t| 0.0507 0.0109
81
