Clostridium difficile en de Belgische surveillance

Clostridium difficile en de Belgische surveillance

Johan Van Broeck Laboratoire de référence C. difficile Referentielaboratorium Cliniques Universitaires St-Luc

UCL Brussel Bruxelles

Inleiding Clostridium difficile NAP1/027 stam Evolutie Surveillance België Surveillance Europa Perspectieven

Cliniques Universitaires St-Luc

Faculteit Geneeskunde Tandheelkunde Farmacie Te Brussel

Cliniques Universitaires St-Luc 893 bedden Laboratoria

Revalidatiecentrum Cliniques Universitaires St-Luc



Fysiopathologie Bacil Gram + Sporuleert Groeit in anaërobe omstandigheden Sommige produceren toxines Kan diarree en eventueel Pseudo-membranen-colitis veroorzaken

Clostridia : C tetani C botulinum C perfringens Cliniques Universitaires St-Luc

Fysiopathologie

Clostridium difficile:


7/10 produceren toxines

Toxine A:

enterotoxine

Toxine B:

cytotoxine

Toxine A + Toxine B

diarree

Pseudo Membranen Colitis

Fysiopathologie


Fysiopathologie Pseudo-Membranen Colitis


Fysiopathologie Eén bacterie, twee gedaanten ( Dr Jekyll Mr Hyde)

Vegetatieve vorm

sporen


Vegetatieve gedaante Sterft in contact met lucht gedood door: - alkohol - hitte - detergent - zuur

Vegetatieve gedaante Sterft in contact met lucht gedood door: - alkohol - hitte - detergent - zuur

Gesporuleerde vorm overleeft: - in lucht - 1 uur in alkohol - 80°C - detergent - zuur

sporen Fysiopathologie

Handhygiene!!!! Alcohol?


Fysiopathologie


Fysiopathologie Er moet een intestinale perturbatie zijn:


antibiotherapie chemotherapie radiotherapie

Fysiopathologie


Er moet een intestinale perturbatie zijn:


Natuurlijke barrières verstoord:

immunogedeprimeerden inname van anti-zuur middelen





omgeving die veel sporen bevat (nosocomiaal)







Rust en revalidatiecentra


dieren












Leeftijd Cliniques Universitaires St-Luc

Therapie

Intestinale perturbatie

normale darmflora herstellen

-stopzetten van de antibiotherapie -behandeling tegen C. difficile : metronidazole vancomycine transplantatie




Serogroup C stammen geisoleerd bij epidemies in :

Belgie Frankrijk Zwitzerland Duitsland Canada Benin Cliniques Universitaires St-Luc

Zuid-Afrika

NAP1/027 een nieuw opduikende C. difficile stam In 2002

epidemies Canada ~2000 overlijdens verhoogde Morbiditeit verhoogde Mortaliteit USA, GB, Frankrijk, Nederland en België



Outbreaks due to Type 027

Sporadic cases due to Type 027


First Australian isolation of epidemic Clostridium difficile PCR ribotype 027 Med J Aust. 2009 Jun 15;190(12):706-8 Riley TV, Thean S, Hool G, Golledge CL.


Waarom is deze NAP1/027 stam zo virulent?


NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o

Mutation position 117 in tcdC

o

Increased production tox A and B

o

Ribotype 027/ PFGE NAP1

o

Binary toxin

o

FQ resistance

Toxinotype NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

Toxinotype Clostridium difficile:


7/10 produceren toxines

Toxine A:

enterotoxine

Toxine B:

cytotoxine

Toxine A + Toxine B

diarree

Pseudo Membranen Colitis

Toxinotype 2000 in Japan en USA


Toxine A:

enterotoxine

negatief

Toxine B:

cytotoxine

Toxine B

Pseudo Membranen Colitis ?

Toxinotype De genen die coderen voor de toxines van Clostridium difficile Het locus PALOC (Pathogenicity Locus) Rupnik et al.

tcd D

tcd B

up regulator


tcd E

tcd A

tcd C

down regulator

Toxinotype

Het locus PALOC (Pathogenicity Locus) Rupnik et al.

tcd D

tcd B

tcd E

tcd A

deletie


tcd C

Toxinotype Het locus PALOC (Pathogenicity Locus) Rupnik et al.

tcd D

tcd B

tcd E

tcd A

deletie


tcd C

Toxinotype Toxinotypage Het locus PALOC (Pathogenicity Locus) Rupnik et al.


Toxinotype Toxinotypage 78 à 88 %

van alle stammen

toxinotype 0

3%

van alle stammen

toxinotype III

NAP 1/ 027 toxinotype III


Toxinotype Toxinotypage

NAP 1/ 027 Toxinotype III


18 bp deletion tcdC NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

18 bp deletion tcdC

Het locus PALOC (Pathogenicity Locus) Rupnik et al.

tcd D

tcd B

tcd E

tcd A

tcd C

deletie


Mutation in position 117 in tcdC NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

Mutation in position 117 in tcdC De genen die coderen voor de toxines van Clostridium difficile Het locus PALOC (Pathogenicity Locus)

Punctuele mutatie in positie 117

Rupnik et al.

tcd D

tcd B

up regulator


tcd E

tcd A

tcd C

down regulator

Production augmentée de tox A et tox B NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

Verhoogde productie van tox A et tox B

Toxine A

Toxine B


Verhoogde productie van tox A et tox B

Production toxine A et B toxine A NAP 1/027 = referentiestam


toxine B 16 1

NAP 1/027 = referentiestam

23 1

Ribotype 027 / PFGE NAP1 NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

Ribotype 027 / PFGE NAP1 Pulsed Field Gel Electrophoresis electrophorese

Enzymatische restrictie van het gehele genoom

8 7

8

6 5 4 3

5

3

2 1 6

4

Restrictie site

7

1

2

Ribotype 027 / PFGE NAP1 1a 1a

2a

1b

2a

2a 2a

2a

2a

2a

Ribotype 027 / PFGE NAP1 Pulsed Field Gel Electrophoresis De stam NAP 1/ 027 North America PFGE type 1a 1b Warny et al.


Ribotype 027 / PFGE NAP1


Intergenic spacer region Primer 2

16 S Primer 1


23 s

Ribotype 027 / PFGE NAP1


Toxine binaire NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

Binair toxine De genen die coderen voor de toxines van Clostridium difficile Het locus PALOC (Pathogenicity Locus) Rupnik et al.

tcd D

tcd B

up regulator


tcd E

tcd A

tcd C

down regulator

Binair toxine Locus binair toxine CDT

cdt A

1382 bp

cdt B

52 bp

2628 bp

CDTc CDTa Cliniques Universitaires St-Luc

CDTb

CDTc 4.3 kb ou 2.3 kb

Resistentie aan fluoroquinolones NAP1/027 isolate


o

Toxinotype III

o

18bp deletion tcdC

o


o


o


o

Binary toxin

o

FQ resistance

Resistentie aan fluoroquinolones

Invloed van antibiotica druk




Waarom een referentiecentrum Clostridium difficile?


CD NAP1/027 in Europe February – June 2004 outbreak at the Stoke Mandeville Hospital (UK) (CDR weekly 2005:15) (Eurosurveillance 2005:10;6) o 150 patients o 12 deaths o Almost all strains : NAP1/027 o Parallel with a change of AB regimen (moxifloxacin)

April - July 2005 outbreak in Harderwijk (Netherlands) (Eurosurveillance 2005:10;7) o Incidence : 4/10 000 pt admissions 83/10 000 o Typical NAP1/027

September 2005 outbreak in Ieper (Belgium) (Eurosurveillance 2005:10;10) o Incidence : 10/10 000 adm(Jan 05) 33/10 000 (Sep 05) o 4 patients (>70 y.) 1 death o Typical NAP1/027


Clostridium difficile en de Belgische surveillance

Recommend Documents