CENDAWAN DAN BAHAN KIMIAWI SEBAGAI FORMULA INOKULAN PENGINDUKSI GAHARU
RINA SITI HODIJAH
DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011
CENDAWAN DAN BAHAN KIMIAWI SEBAGAI FORMULA INOKULAN PENGINDUKSI GAHARU
RINA SITI HODIJAH
Skripsi Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains di Departemen Biologi
DEPARTEMEN BIOLOGI FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2011
Judul
: Cendawan dan Bahan Kimiawi Sebagai Formula Inokulan Penginduksi Gaharu.
Nama
: Rina Siti Hodijah
NIM
: G34062147
Departemen
: Biologi
Menyetujui :
Pembimbing I,
Pembimbing II,
Dr. Ir. Gayuh Rahayu NIP. 19580105 198303 2 002
Dr. Ir. Bonny P.W. Soekarno, MS NIP.19620618 198811 1 001
Mengetahui : Kepala Departemen Biologi Institut Pertanian Bogor
Dr. Ir. Ence Darmo Jaya Supena, M.Si NIP. 19641002 198903 1 002
Tanggal Lulus :
ABSTRAK RINA SITI HODIJAH. Cendawan dan Bahan Kimiawi Sebagai Formula Inokulan Penginduksi Gaharu. Dibimbing oleh GAYUH RAHAYU dan BONNY POERNOMO WAHYU SOEKARNO. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh asam salisilat 0,1 mM dan metil jasmonat 0,75 mM terhadap pertumbuhan Acremonium sp. (IPBCC 08.566, IPBCC 07.525) dan Fusarium sp. (IPBCC 08.568, IPBCC 08.569 dan IPBCC 08.570) pada media laboratorium dan formula inokulan berbentuk pelet. Acremonium sp. atau Fusarium sp. (diam. 5 mm) ditumbuhkan pada media PDA dan dipasangkan dengan lempeng kertas saring (diam. 5 mm) yang mengandung 1 mL asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM. Pengamatan dilakukan terhadap diameter koloni dan jumlah konidia setiap dua hari sampai koloni memenuhi cawan. Senyawa kimia yang tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan diteliti lebih lanjut sebagai komponen formulasi pelet dan pelet diuji viabilitasnya. Uji viabilitas dilakukan dengan menumbuhkan cendawan berupa pelet pada media PDA. Asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan miselium dan produksi konidia pada semua isolat. Namun asam salisilat 0,1 mM merangsang pembentukan konidia Fusarium IPBCC 08.568 (sebesar 1,005x produksi konidia kontrol). Secara umum Acremonium sp. maupun Fusarium sp. pada pelet dengan penambahan asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM dan 750 mM memiliki viabilitas sebesar 85-95,8% dan tidak berbeda nyata dari kontrol yaitu sebesar 90-96,6%. Sedangkan semua cendawan pada pelet yang diberi asam salisilat 100 mM tidak tumbuh sehingga dianggap tidak viabel.
ABSTRACT RINA SITI HODIJAH. Fungi and Chemical Substance as bases of Agarwood Induction Agent Formulation. Supervised by GAYUH RAHAYU and BONNY POERNOMO WAHYU SOEKARNO. This research was carried out to investigate the effect of salicylic acid 0,1 mM and methyl jasmonate 0,75 mM on Acremonium sp. (IPBCC 08.566, IPBCC 07.525) and Fusarium sp. (IPBCC 08.568, IPBCC 08.569 and IPBCC 08.570) growth in vitro and in form of inoculant formulation. Acremonium sp. or Fusarium sp. (diam. 5 mm) were first grown on PDA side by side with filter paper (diam. 5 mm), containing 1 mL salicylic acid 0,1 mM or methyl jasmonate 0,75 mM. The diameter of the colony and total conidial density was observed every two days until the colony reached the edge of the Petri dishes. Chemical that has no influence on Acremonium sp. and Fusarium sp. growth, were studied to evaluate its posibility to form pellet with sawdust mixture. The ability of Acremonium sp. and Fusarium sp. to grow after formulated in form pellet is assessed on PDA. In vitro experiment showed that salicylic acid 0,1 mM or methyl jasmonate 0,75 mM did not effect the mycelial growth and conidial production of all isolate. Eventhough salicylic acid 0,1 mM slighly stimulated conidial production Fusarium sp. IPBCC 08.568 (about 1,005x control). Viability of Acremonium sp. or Fusarium sp. in pellet with salicylic acid 0,1 mM or methyl jasmonate 0,75 mM and 750 mM was about 85-95,8% and were not significantly different from the control that were about 90-96,6%. Whereas all the fungi in pelet that was mixed with salicylic acid 100 mM did not grow so as to be regarded as not viable.
PRAKATA Alhamdulillah, segala puji bagi Allah SWT. tiada sekutu bagi-Nya. Dialah yang maha berkehendak atas segala sesuatu, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmiah ini sebagai syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Sains Departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Institut Pertanian Bogor. Judul yang dipilih dalam penelitian ini adalah Cendawan dan Senyawa Kimiawi sebagai Formula Inokulan Penginduksi Gaharu. Penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dr. Ir. Gayuh Rahayu dan Bapak Dr. Ir. Bonny Poernomo Wahyu Soekarno, MS selaku pembimbing yang telah memberikan bimbingan, saran, koreksi, motivasi, dan fasilitas selama penyusunan karya ilmiah ini serta Bapak Ir. Hadisunarso, M.Si. selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan kritik untuk perbaikan karya ilmiah ini. Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada kedua orang tua, kakak-kakakku dan adik-adikku atas dukungan moril dan materi serta kasih sayang yang tak terhingga; epoy teman seperjuangan; kak Lia atas bimbingan teknisnya; mba Dita, kak Tia, kak Dory, Uni Dezi, mbak Ade, kak Riana, kak Jaka, ibu Emi dan pak Kus atas pengalamannya; sahabat Kerzjakru dan teman-teman Bio 43. Semoga karya ilmiah ini bermanfaat. Bogor, Mei 2011
Rina Siti Hodijah
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Bogor pada tanggal 27 November 1987 sebagai anak keempat dari enam bersaudara, putri dari pasangan Bapak Ahmad Suhadri dan Ibu Dewi Nurul Fadjar. Pada tahun 2006 Penulis lulus dari Sekolah Menengah Umum Negeri 4 Bogor dan diterima di Institut Pertanian Bogor (IPB) melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI). Penulis diterima di Mayor Biologi, Departemen Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam dan memilih Minor Ekonomi Pertanian, Departemen Ekonomi dan Sumberdaya Lingkungan, Fakultas Ekonomi dan Manajemen. Selama mengikuti perkuliahan, Penulis menjadi asisten praktikum mata kuliah Biologi Dasar pada semester ganjil tahun 2008 sampai semester genap tahun 2010 dan Biologi Cendawan pada semester ganjil tahun 2010. Penulis aktif menjadi pengurus Himpunan Mahasiswa Biologi (HIMABIO) bidang Biologi Sains (BIOSAINS) pada masa kepengurusan 2007-2008. Pada bulan Juli-Agustus 2009 Penulis melakukan Praktek Lapang di Laboratorium Kultur Jaringan, Services Laboratory SEAMEO BIOTROP dengan judul Kultur Jaringan Jati (Tectona grandis Linn. F.) di Services Laboratory SEAMEO BIOTROP.
DAFTAR ISI Halaman DAFTAR TABEL .........................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................................
vi
PENDAHULUAN Latar Belakang ................................................................................................ Tujuan ............................................................................................................
1 1
BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat .......................................................................................... Alat dan Bahan................................................................................................ Metode ............................................................................................................ Peremajaan biakan Acremonium sp. dan Fusarium sp. ............................ Pengaruh Metil Jasmonat dan Asam Salisilat terhadap Acremonium sp. dan Fusarium sp. pada PDA .................................................................. Formulasi Inokulan.................................................................................... Analisis Data ............................................................................................. HASIL DAN PEMBAHASAN Hasil ................................................................................................................ Pengaruh senyawa kimia terhadap pertumbuhan koloni Acremonium sp. dan Fusarium sp ....................................................................................... Pengaruh senyawa kimia terhadap jumlah konidia Acremonium sp. dan Fusarium sp ............................................................ Viabilitas cendawan................................................................................... Pembahasan .................................................................................................... Pengaruh asam salisilat dan metil jasmonat terhadap Pertumbuhan Acremonium sp. dan Fusarium sp ..................................... Viabilitas cendawan...................................................................................
1 1 2 2 2 2 2
3 3 4 4 5 5 5
SIMPULAN DAN SARAN Simpulan ........................................................................................................ Saran ...............................................................................................................
6 6
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................................
6
LAMPIRAN ..................................................................................................................
8
DAFTAR TABEL
Halaman 1 Isolat Acremonium sp. dan Fusarium sp. yang berpotensi menginduksi gaharu................................................................................................. 2 Pengaruh asam salisilat 0,1 mM dan metil jasmonat 0,75 mM pada produksi konidia Acremonium sp. dan Fusarium sp. .......................................
2 4
DAFTAR GAMBAR Halaman 1 Pengaruh asam salisilat 0,1 mM dan metil jasmonat 0,75 mM pada pertumbuhan Acremonium sp. dan Fusarium sp. ............................................ 2 Hasil uji viabilitas cendawan pada pelet ..................................................................
3 4
PENDAHULUAN Latar belakang Gubal gaharu merupakan resin gaharu yang diproduksi oleh pohon gaharu sebagai bentuk pertahanan terhadap suatu gangguan (Dewan Standarisasi Nasional Indonesia 1999). Menurut Nobuchi dan Siripatanadilok (1991), gangguan dapat berupa pemberian pestisida, pelukaan, dan atau infeksi cendawan. Selain pestisida, beberapa senyawa sinyal sekunder seperti metil jasmonat, asam salisilat dan etilen pernah diteliti kemampuannya dalam menginduksi senyawa gaharu. Putri at al. (2008) menemukan bahwa metil jasmonat pada 750 mM dapat menginduksi pembentukan wangi melati pada pohon gaharu dengan indeks perubahan warna kayu lebih rendah dari Acremonium. Pemberian metil jasmonat 750 mM secara berulang mampu meningkatkan deposit senyawa terpenoid (Hamim et al. 2008). Pemberian asam salisilat dapat menginduksi pembentukan senyawa terpenoid tetapi tidak dapat menginduksi wangi gaharu (Rahayu 2010). Pemberian etilen dalam bentuk etepon mampu menginduksi berbagai wangi kayu namun tidak mampu mengubah warna kayu menjadi lebih baik daripada ketika kayu diinduksi Acremonium sp. (Rahayu et al. 2009a). Selain bahan kimia, beberapa cendawan telah dilaporkan mampu menginduksi pembentukan gubal gaharu. Rahayu et al. (1999) menyatakan bahwa beberapa isolat Acremonium sp. asal gubal gaharu pada Gyrinops verstegii dan A. malaccensis mampu menginduksi gejala pembentukan gubal pada pohon gaharu (A. crassna, A. malaccensis, A. microcarpa) umur 2 tahun. Santoso (1996) melaporkan bahwa Fusarium oxyporum dan F. lateritium mampu menginduksi pembentukan gubal gaharu. Selain itu Parman dan Mulyaningsih (2004) melaporkan bahwa Fusarium lateritium terbukti efektif dalam memacu terbentuknya gubal gaharu. Pada saat ini gubal gaharu alami dengan kualitas baik sudah sulit ditemukan. Upaya peningkatan produksi gubal secara buatan melalui pemberian bahan kimia tunggal atau inokulasi cendawan tunggal belum memperoleh hasil yang memadai. Oleh sebab itu, modifikasi inokulan perlu dilakukan. Artatiah (2005) melaporkan bahwa formulasi Acremonium pada media padat yang dikombinasikan dengan alginat
dan dicelupkan ke dalam CaCl2 menghasilkan batangan pelet yang mudah dibuat, peluang kontaminasi kecil dan memiliki viabilitas yang tinggi. Selain itu komposisi nutrisi media padat yang terdiri dari jagung sebagai sumber karbohidrat dan dedak sebagai sumber protein dan lemak dapat memacu pertumbuhan cendawan (Artatiah 2005). Namun Maryani (2005) menemukan bahwa CaCl2 dapat menekan perkecambahan konidia. Oleh sebab itu modifikasi pembuatan pelet perlu dilakukan. Pemberian inokulan ganda (cendawan dan senyawa kimia) berpengaruh terhadap pembentukan gubal. Acremonium sp. yang dikombinasikan dengan metil jasmonat mampu menginduksi pembentukan gubal dengan mutu yang lebih baik dari perlakuan tunggalnya (Rahayu et al. 2009b). Namun formulasi inokulan tersebut belum tersedia. Oleh sebab itu pengembangan inokulan berbasis campuran senyawa kimia dan cendawan perlu dilakukan. Sebelum formulasi ini dibuat perlu diketahui pengaruh senyawa kimia tersebut terhadap pertumbuhan Acremonium sp. dan Fusarium sp. penginduksi wangi gaharu. Tujuan Penelitian ini bertujuan mengetahui pengaruh metil jasmonat dan asam salisilat terhadap pertumbuhan Acremonium sp. dan Fusarium sp. pada media laboratorium dan pada formula inokulan berbentuk pelet.
BAHAN DAN METODE Waktu dan Tempat Penelitian dilaksanakan pada bulan Februari sampai Desember 2010 di Laboratorium Mikologi Departemen Biologi, FMIPA, IPB, Bogor. Alat dan Bahan Alat yang digunakan adalah laminar air flow, autoklaf, cawan petri, erlenmeyer, mikroskop cahaya, haemacytometer, cork borrer, lempeng kertas saring, pipet mikro, alat pelet, oven dan beberapa peralatan laboratorium lainnya. Bahan yang digunakan adalah biakan Acremonium sp. dan Fusarium sp. koleksi IPBCC, Departemen Biologi FMIPA IPB (Tabel 1), media Potato Dextrose Agar (PDA), metil jasmonat, asam salisilat, alkohol, akuades steril, jagung dan dedak.
2
Tabel 1. Isolat Acremonium dan Fusarium yang berpotensi menginduksi gaharu. Cendawan No Aksesi Acremonium sp F IPBCC 07.525 Acremonium sp L IPBCC 08.566 Fusarium sp A IPBCC 08.568 Fusarium sp B IPBCC 08.569 Fusarium sp D IPBCC 08.570 Metode Peremajaan Biakan Acremonium sp. dan Fusarium sp. Acremonium sp. dan Fusarium sp. diremajakan pada media PDA dan diinkubasi pada suhu ruang selama 7 hari. Isolat ini digunakan sebagai sumber inokulum untuk pembuatan inokulan.
Media yang tidak diberi senyawa kimia dan ditumbuhi cendawan saja dijadikan pembanding. Senyawa kimia yang tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan diteliti lebih lanjut sebagai komponen formulasi pelet. Formulasi Inokulan dan Uji Viabilitasnya Jagung pecah dimasak dengan perbandingan 1kg jagung : 1 liter air, kemudian ditiriskan. Setelah jagung tiris, jagung dimasukkan ke dalam plastik tahan panas untuk kemudian disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit. Kemudian sepotong biakan Acremonium sp. atau Fusarium sp. diinokulasikan ke media jagung secara aseptik. Kemudian inokulan tersebut diinkubasi pada suhu ruang sampai cendawan memenuhi plastik pada media jagung (± selama 10 hari). Dedak dicampur dengan air 60% dari bobot total kemudian dimasukkan ke dalam plastik tahan panas dan disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 1210C selama 15 menit. Kemudian bahan tersebut dicampur dengan inokulan pada media jagung dan ditambahkan dengan larutan asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM dan dibentuk berupa pelet. Pelet kemudian dikeringkan pada suhu 40oC dan diuji viabilitasnya pada kondisi ruang. Uji viabilitas dilakukan dengan menumbuhkan cendawan berupa pelet pada media PDA. Pada uji viabilitas, setiap 5% pelet dari pembuatan 1kg bahan pelet atau minimal sebanyak 100 pelet dari masing-masing perlakuan ditanam pada media PDA. Viabilitas dihitung berdasarkan:
Pengaruh Metil Jasmonat dan Asam Salisilat terhadap Acremonium sp. dan Fusarium sp. Sebanyak 1 potong Acremonium sp. atau Fusarium sp. (diameter 5 mm) ditumbuhkan pada media PDA dan dipasangkan dengan lempeng kertas saring (diameter 5 mm) yang mengandung 1 mL metil jasmonat 0,75 mM atau asam salisilat 0,1 mM. Kemudian potongan isolat tersebut diinkubasi pada suhu ruang. Pengamatan dilakukan terhadap pertumbuhan (diameter koloni dan jumlah konidia) kedua cendawan tersebut setiap dua hari sampai koloni memenuhi cawan. Jumlah konidia dihitung menggunakan haemacytometer dengan metode pengenceran. Koloni Acremonium sp. atau Fusarium sp. dalam media PDA dibilas dengan beberapa ml aquades steril. Kemudian sebanyak 0,1 sampai 0,5 ml air bilasan dipipet dan diletakkan pada lekukan pada tepi kaca tutup haemacytometer. Ruang haemacytometer dibiarkan sampai cairan terpenuhi secara kapiler. Selanjutnya haemacytometer diletakkan di atas pentas mikroskop, diamati dengan objek berkekuatan rendah dan dihitung jumlah konidia. Jumlah konidia dihitung setiap dua hari sampai koloni memenuhi cawan pada tingkat pengenceran 106. % Viabilitas cendawan = Jumlah pelet yang menunjukkan pertumbuhan cendawan x 100%. Total jumlah pelet yang diuji Analisis Data Penelitian ini dilakukan menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan tiga kali ulangan. Data hasil pengamatan diameter koloni dan jumlah
konidia dianalisis dengan program SAS versi 9.1.3.
HASIL Pengaruh senyawa kimia terhadap Acremonium sp. dan Fusarium sp. (a) 11 1 1 22 22
(b)
11
22
1
22
1
1 (c)
(d)
(e)
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
Gambar 1 Pengaruh senyawa kimia asam salisilat (kiri), metil jasmonat (tengah) dan kontrol (kanan): (a) Fusarium sp. IPBCC 08.568, (b) Fusarium sp. IPBCC 08.569, (c) Fusarium sp. IPBCC 08.570, (d) Acremonium sp. IPBCC 07.525, (e) Acremonium sp. IPBCC 08.566 yang dipasangkan pada sistem kultur ganda cendawan (1) dan lempeng kertas berbahan kimia (2).
4
Koloni Acremonium sp. dan Fusarium sp. dapat memenuhi cawan dalam waktu 10 hari. Pemberian asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM pada masing-masing isolat cendawan tidak berpengaruh terhadap pertumbuhan Acremonium sp. dan Fusarium sp.. Hal itu terlihat dari diameter koloni yang bertambah setiap harinya sampai koloni memenuhi cawan (Gambar1).
Pengaruh asam salisilat dan metil jasmonat terhadap jumlah konidia Asam salisilat 0,1 mM maupun metil jasmonat 0,75 mM tidak mempengaruhi produksi konidia Acremonium sp. (IPBCC 08.566 dan IPBCC 07.525) dan mikrokonidia Fusarium sp. (IPBCC 08.569, dan IPBCC 08.570). Namun asam salisilat 0,1 mM merangsang pembentukan konidia Fusarium IPBCC 08.568 sebesar 1,005 x produksi konidia kontrol (Tabel 2).
Tabel 2 Pengaruh asam salisilat 0,1 mM dan metil-jasmonat 0,75 mM pada produksi konidia Acremonium sp. dan mikrokonidia Fusarium sp. pada hari ke 10 interaksi. Jumlah konidia (x106 konidia/ml) Cendawan Asam Salisilat Metil Jasmonat Kontrol Acremonium sp. IPBCC 07.525 2.06a 2.04b 2.05ab Acremonium sp. IPBCC 08.566 2.46a 2.46a 2.46a a b 2.34 2.34b Fusarium sp. IPBCC 08.568 2.35 a a 2.49 2.49a Fusarium sp. IPBCC 08.569 2.49 a a 2.33 2.33a Fusarium sp. IPBCC 08.570 2.33 *) angka pada baris yang sama yang diikuti dengan huruf yang berbeda, berbeda nyata pada α=0.05
Viabilitas Cendawan Viabilitas cendawan pada pelet merupakan daya tahan hidup cendawan setelah inkubasi dalam bentuk pelet. Secara umum Acremonium sp. (IPBCC 08.566, IPBCC 07.525) maupun Fusarium sp. (IPBCC 08.568, IPBCC 08.569 dan IPBCC 08.570) pada pelet dengan penambahan asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM dan 750 mM memiliki viabilitas yang tinggi yaitu antara 85-95,8% dan tidak berbeda nyata dari kontrol. Cendawan pada pelet kontrol tanpa penambahan senyawa kimia memiliki viabilitas sebesar 90-96,6%. Semua cendawan, kecuali Acremonium sp. IPBCC 07.525, pada pelet (a) (b)
dengan penambahan asam salisilat 0,1 mM atau metil jasmonat 0,75 mM mulai tumbuh pada hari ke-3. Acremonium sp. IPBCC 07.525 pada perlakuan tersebut mulai tumbuh pada hari ke-4 (Gambar 2a). Sedangkan semua cendawan pada pelet kontrol mulai tumbuh pada hari ke-3 (Gambar 2c). Berbeda dengan perlakuanperlakuan tersebut diatas, cendawancendawan pada pelet yang diberi metil jasmonat 750 mM baru tumbuh pada hari ke-7. Sedangkan cendawan-cendawan pada pelet yang diberi asam salisilat 100 mM tidak tumbuh sehingga dianggap tidak viabel (Gambar 2b). (c)
Gambar 2 Uji viabilitas cendawan Acremonium sp. IPBCC 07.525 pada hari ke-4 setelah pelet ditanam: dengan perlakuan metil jasmonat (a), dan dengan perlakuan asam salisilat (b), kontrol (c).
PEMBAHASAN Pengaruh Asam Salisilat dan Metil Jasmonat terhadap Pertumbuhan Koloni Acremonium sp. dan Fusarium sp. Asam salisilat 0,1 mM dan metil jasmonat 0,75 mM tidak menghambat pertumbuhan koloni Acremonium sp. (IPBCC 07.525 dan IPBCC 08.566) dan Fusarium sp. (IPBCC 08.568, IPBCC 08.569, dan IPBCC 08.570). Diameter koloni selalu bertambah sampai koloni memenuhi cawan dan produksi konidianya relatif sama dengan kontrol. Hal ini menunjukkan bahwa asam salisilat 0,1 mM dan metil jasmonat 0,75 mM aman bagi pertumbuhan miselium cendawan tersebut. Hasil penelitian ini berbeda dari Yao dan Tian (2005) yang menyatakan bahwa asam salisilat 2 mM menghambat pertumbuhan miselium Monilinia fructicola pada PDA. Sedangkan metil jasmonat 0,2 mM agak menghambat pertumbuhan miselium dan perkecambahan spora pada M. fructicola (Yao dan Tian 2005). Aktivitas penghambatan bahan kimia terhadap pertumbuhan cendawan telah dilaporkan oleh banyak peneliti. Mills et al. (2004) melaporkan bahwa sodium metabisulfite dan propyl-paraben pada konsentrasi 0,002 mM, 0,02 mM dan 0,2 mM menghambat pertumbuhan miselium dan perkecambahan spora Alternaria alternata, Botrytis cinerea, Fusarium solani var. coeruleum, Phytophthora erythroseptica, P. infestans, Verticillium albo-atrum, and V. dahliae. Sodium benzoat, sodium metabisulfat, potassium sorbat dan trisodium fosfat pada konsentrasi 0,2 mM dapat menghambat pertumbuhan miselium dan perkecambahan spora Fusarium sambucinum (Mecteau et al. 2002). Gramaje et al. (2009) melaporkan bahwa penggunaan azoxystrobin, carbendazim, flusilazole, imazalil, prochloraz dan tebuconazole dengan konsentrasi masing-masing 0,1 ppm pada fungisida dapat menghambat pertumbuhan miselium Phaeomoniella Chlamydospora. Asam salisilat 0,1 mM maupun metil jasmonat 0,75 mM tidak mempengaruhi produksi konidia Acremonium sp. (IPBCC 08.566 dan IPBCC 07.525) dan mikrokonidia Fusarium sp. (IPBCC 08.569, dan IPBCC 08.570). Namun asam salisilat 0,1 mM merangsang pembentukan konidia Fusarium IPBCC 08.568 (sebesar 1,005 kali produksi konidia kontrol). Sebaliknya
Charoenporn (2010) melaporkan bahwa ekstrak Chaetomium globosum N0802 dengan heksan (157 µg/ml) menghambat produksi konidia Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici. Pada penelitian sebelumnya asam salisilat 100 mM terbukti mampu menginduksi gaharu yang ditandai dengan perubahan warna kayu tanpa membuat kerapuhan pada kayu (Rahayu 2010) dan metil jasmonat 750 mM juga mampu menginduksi terbentuknya senyawa terpenoid pada gaharu (Putri et al. 2008). Konsentrasi ini 1000 kali dari konsentrasi yang digunakan di laboratorium. Jerald (1992) menyatakan bahwa pestisida yang dipergunakan di pertanaman jagung, kedelai, kapas, gandum dan sorgum efektif digunakan dengan konsentrasi 1000 x (1000 g/l) dari konsentrasi uji laboratorium (1g/l). Selain itu Jerald (1992) juga melaporkan bahwa herbisida efektif dipergunakan di lahan irigasi pada konsentrasi 5 mg/l berdasarkan hasil penelitian di laboratorium yang menggunakan herbisida dengan konsentrasi 0,005 mg/l. Yang et al. (1997) melaporkan bahwa pemberian asam salisilat dan metil jasmonat dengan konsentrasi tertentu dapat mengaktivasi respon pertahanan tanaman terhadap serangan patogen dan juga berperan dalam transduksi sinyal gen Pathogenesis-Related (PR) pada Systemic Acquired Resistance (SAR) tanaman terhadap serangan patogen. Selain itu metil jasmonat 0,75 mM merupakan senyawa sinyal (Michiho 2005) dan dapat merangsang pembentukan senyawa fitoaleksin pada kultur sel gaharu, sehingga pembentukan senyawa fitoaleksin tersebut dapat menghambat atau bahkan membunuh cendawan (Franceschi et al. 2002). Viabilitas Cendawan Secara umum cendawan baik Acremonium sp. (IPBCC 08.566, IPBCC 07.525) maupun Fusarium sp. (IPBCC 08.568, IPBCC 08.569 dan IPBCC 08.570) pada pelet dengan penambahan senyawa kimia yaitu asam salisilat 0,1 mM atau 100 mM atau metil jasmonat 0,75 mM atau 750 mM memiliki viabilitas yang tinggi yaitu antara 85-95,8%. Sedangkan cendawan pada pelet kontrol tanpa penambahan senyawa kimia memiliki viabilitas sebesar 90-96,6%. Semua cendawan, kecuali Acremonium sp. IPBCC 07.525, pada pelet dengan penambahan asam salisilat 0,1 mM atau
metil jasmonat 0,75 mM mulai tumbuh pada hari ke-3. Acremonium sp. IPBCC 07.525 pada perlakuan tersebut mulai tumbuh pada hari ke-4. Sedangkan semua cendawan pada pelet kontrol mulai tumbuh pada hari ke-3. Berbeda dengan perlakuan-perlakuan tersebut diatas, cendawan-cendawan pada pelet yang diberi metil jasmonat 750 mM baru tumbuh pada hari ke-7. Sedangkan cendawan-cendawan pada pelet yang diberi asam salisilat 100 mM tidak tumbuh sehingga dianggap tidak viabel. Artatiah (2005) melaporkan bahwa pertumbuhan Acremonium sp. pada pelet mulai terlihat pada hari ke-3 setelah pelet ditanam di media PDA. Cendawan pada pelet asal media padat memiliki viabilitas yang baik, menghasilkan spora yang lebih toleran terhadap kekeringan dan lebih viabel bila diformulasikan dalam bentuk kering (Artatiah 2005).
SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Asam salisilat 0,1 mM dan metil jasmonat 0,75 mM tidak menghambat pertumbuhan koloni dan produksi konidia Acremonium sp. dan mikrokonidia Fusarium sp. asal gaharu. Viabilitas cendawan pada pelet dengan penambahan asam salisilat 0,1 mM maupun metil jasmonat 0,75 mM dan 750 mM pada Acremonium sp. atau Fusarium sp. berkisar antara 85-95,8% dan pelet kontrol tanpa penambahan senyawa kimia sebesar 90-96,6%. Sedangkan cendawan pada pelet dengan penambahan asam salisilat 100 mM tidak viabel. Saran Viabilitas cendawan perlu diuji pada pelet yang telah disimpan lebih dari tiga bulan. Selain itu efektifitas pelet dalam menginduksi pembentukan gubal gaharu in planta perlu diuji. DAFTAR PUSTAKA Artatiah H. 2005. Formulasi Acremonium Penginduksi Gubal Gaharu [Skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Charoenporn C. 2010. Evaluation of bioagent formulations to control Fusarium wilt of tomato. AJB 9(36): 5836-5844.
Dewan Standarisasi Nasional Indonesia. 1999. SNI 01/5009. 1-1999 Gaharu. Jakarta: Dewan Standarisasi Nasional. Franceschi Vr, Trygve K, Erik C. 2002. Application of methyl jasmonate on Picea abies stem induces defense related in phloem and xylem. AJB 89:578-586. Gramaje D, Aroca A, Raposo R, Garcı´aJime´nez J, Armengol J. 2009. Evaluation of Fungicides to Control Petri Disease Pathogens in the Grapevine Propagation Process. Spain: Crop Protection. Hamim, Rahayu G dan Rosita R. 2008. Efektivitas Pemberian Metil Jasmonat secara Berulang dalam Meningkatkan Deposit Senyawa Terpenoid Pohon Gaharu (Aquilaria crassna). Makalah disampaikan pada Seminar Nasional I Gaharu, Menuju Produksi Gaharu secara Lestari di Indonesia. Bogor, 12 November 2009. Jerald L. 1992. Fate of Pesticides and Chemicals in The Environment. New York: John Willey and Sons, Inc. Maryani N. 2005. Respon Acremonium spp. Asal Gaharu Terhadap Alginat dan CaCl2 [Skripsi]. Bogor: Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor. Mecteau R, Arul J, Tweddell R. 2002. Effect of organic and inorganic salts on the growth and development of Fusarium sambucinum, a causal agent of potato dry rot. Mycol Res 106: 688-696. Michiho I. 2005. Induction of sesquiterpenoid production by Methyl Jasmonate in Aquilaria sinensis cell suspension culture. Essential Oil Res http//www.findarticles.com [16 Juni 2010]. Mills A, Platt H, Hurta R. 2004. Effect of salt compounds on mycelial growth, sporulation and spore germination of various potato pathogens. Postharvest Biol Technol 34: 341-352. Nobuchi T, Siripatanadilok S. 1991. Preliminary observation of Aquilaria crassna wood asosiated with the formation of Aloewood. Bull Kyoto Univ 63: 226-235. Parman, Mulyaningsih T. 2004. Pengembangan teknologi produksi gubal gaharu. Diskusi Sehari Pengembangan Gaharu; Jakarta, 9 Desember 2004. Jakarta: Badan
7
Penelitian dan Pengembangan Kehutanan, Departemen Kehutanan. Putri AL, Gayuh R, Juliarni. 2008. Induksi pembentukan senyawa terpenoid pada pohon gaharu (Aquilaria crassna) dengan Acremonium sp. dan metil jasmonat. Enviagro 2: 23-28. Rahayu G, Isnaeni Y, Umboh MIJ. 1999. Potensi beberapa hifomiset dalam induksi gejala pembentukan gubal gaharu. Makalah Seminar Kongres Nasional Ke XV dan Seminar Ilmiah PFI: Purwokerto,16-18 September 1999. Purwokerto: Perhimpunan Fitopatologi Indonesia. Hlm: 1-6. Rahayu G, Santoso E dan Widyastuti FR. 2009a. Efektivitas Etilen dalam Menginduksi Pembentukan Senyawa Terpenoid pada Pohon Gaharu (Aquilaria microcarpa). Makalah disampaikan pada Seminar Nasional I Gaharu, Menuju Produksi Gaharu secara Lestari di Indonesia. Bogor, 12 November 2009. Rahayu G, Santoso E dan Yunita L. 2009b. Interaksi Acremonium sp. dan Metil Jasmonat dalam Peningkatan Mutu Gaharu Asal Aquilaria microcarpa.
Makalah disampaikan pada Kongres Nasional Fitopatologi Indonesia ke XX. Makassar, 4-7 Agustus 2009. Rahayu G. 2010. Modification of Wood Characteristic of Aquilaria crassna by Application of Salicylic Acid in Comparison to Acremonium Inoculation. Paper presented in the 2010 Meeting of the Association for Tropical Biology and Conservation. Bali, 19-23 July 2010. Santoso E. 1996. Pembentukan Gaharu dengan cara inokulasi. Makalah diskusi hasil penelitian dalam menunjang pemanfaatan hutan yang lestari; Bogor, 11-12 Maret 1996. Bogor: Badan Litbang Kehutanan Pusat Litbang Hutan dan Konservasi Alam. Hlm: 1-3. Yang Y, Shah J, Klessig DF. 1997. Signal perception and transduction in plant defense response. Genes Dev 11: 16211639. Yao H, Tian S. 2005. Effects of pre-and post-harvest application of salicylic acid or methyl jasmonate on inducing disease resistance of sweet cherry fruit in storage. Postharvest Biol.Technol 35:253–262.
LAMPIRAN
Lampiran 1 Analisis ragam dan uji lanjut Duncan. I.
Sidik ragam jumlah konidia Acremonium sp. IPBCC 07.525 Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat bebas (db) 2 6 8
Jumlah Kuadrat (JK) 0,0003 0,0001 0,0004
Kuadrat Tengah (KT) 0,0001 0,0000
F-hitung
P Hitung
0,0370
< ,0001
F-hitung
P Hitung
0,2963
< ,0001
F-hitung
P Hitung
0,0270
< ,0001
F-hitung
P Hitung
0,7290
< ,0001
F-hitung
P Hitung
0,7290
< ,0001
II. Sidik ragam jumlah konidia Acremonium sp. IPBCC 08.566 Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat bebas (db) 2 6 8
Jumlah Kuadrat (JK) 0,0001 0,0001 0,0002
Kuadrat Tengah (KT) 0,0000 0,0000
III. Sidik ragam jumlah konidia Fusarium sp. IPBCC 08.568 Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat bebas (db) 2 6 8
Jumlah Kuadrat (JK) 0,0002 0,0000 0,0002
Kuadrat Tengah (KT) 0,0000 0,0000
IV. Sidik ragam jumlah konidia Fusarium sp. IPBCC 08.569 Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat bebas (db) 2 6 8
Jumlah Kuadrat (JK) 0,0000 0,0002 0,0002
Kuadrat Tengah (KT) 0,0000 0,0000
V. Sidik ragam jumlah konidia Fusarium sp. IPBCC 08.570 Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat bebas (db) 2 6 8
Jumlah Kuadrat (JK) 0,0000 0,0002 0,0002
Kuadrat Tengah (KT) 0,0000 0,0000
