12/18/2015
BIOTEKNOLOGI TANAMAN Dr. Refli., MSc Jurusan Biologi FST – UNDANA Kupang, 2015
Materi Kuliah Bioteknologi. Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
PENDAHULUAN TUMBUHAN PANGAN
SANDANG
OBAT-OBATAN
PERTUMBUHAN PENDUDUK
±10 miliar Thn 2050-60
PERTANIAN & KEHUTANAN
?
BIOTEKNOLOGI Materi Kuliah Bioteknologi. Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
1
12/18/2015
Mengapa TUMBUHAN menjadi FOKUS BIOTEKNOLOGI?
ALASAN TUMBUHAN mampu mengkonversi energi matahari energi kimia FOTOSINTESIS PRODUSEN
300.000 Sp yang diketahui hanya RATUSAN yang dimanfaatkan ada BIDANG PERTANIAN
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
PEMANFAATAN & HASIL dari TUMBUHAN
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
2
12/18/2015
PERBAIKAN SIFAT TANAMAN PERBAIKAN SIFAT AGRONOMI Tehnik Lama Persilangan (sexual crossing)
Tehnik baru Mikropropagasi
Mutasi (mutation)
Fusi protoplasma Alami
Artifisial Rekayasa genetik
radiasi
Kimia
Fisika
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
PLANT BREEDING METHODS • Methods of hybridization –Self-pollinated species –Outcrossing species –Synthetic varieties –Hybrid varieties
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
3
12/18/2015
Self-pollinated species • • • • • •
Be grown as varieties derived from a pure line Pedigree Breeding Single-Seed Descent Bulk Breeding Methods Backcross Breeding Increasing Seed, Testing, and Releasing of PureLine Varieties
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Self-pollinated species
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
4
12/18/2015
Self-pollinated species
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Synthetic varieties
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
5
12/18/2015
Outcrossing species
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Outcrossing species
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
6
12/18/2015
Outcrossing species; Recurrent Selection
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Outcrossing species; Synthetic Varieties
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
7
12/18/2015
Outcrossing species; Hybrid Varieties
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Marker-Assisted Selection
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
8
12/18/2015
NEW VARIETIES BY MODERN BIOTECNOLOGY
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Some phermaceuticals products produced from tropical plant sources
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
9
12/18/2015
Breeding Enhancements • • • •
Doubled Haploidy Marker-Assisted Selection Mutation Breeding Apomixis
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
INDUKSI BREEDING MUTATION •
Mutagenesis
• •
Efektifitas Isolasi mutan ditentukan efesiensi penggunaan mutagen Jenis mutagen:
– proses mutasi, untuk mengkaji seleksi persilangan
– Kimia : ethylmethane sulfonate, methyl methanesulfonate, methyl ethanesulfonate, methyl ethanesulfonate, colchicine, potassium cyanide, hydrogen peroxide, uranyl nitrate, ferri sulphate, Di(beta-, diethyl sulfate, diepoxybutane, ethylene imine, diethyl 1,3propanedisulfonate , sodium azide
– Radiasi : X-rays,γ-rays, & electrons – Fisika: ion beam, perbedaan: higher linear energy transfer (LET) (≥10–1000 keV/mm than X-rays,γ-rays (sekitar 0.2 keV/mm) • on beams menyebabkan kerusakan lebih besar dibanding X-rays,γ-rays menghasilkan efektifines yang tinggi pada material biologi
• Sifat yang diamati: 1) the percentage of mature X1plants, 2) the average fertility of the X1 plants, 3) the mutation rate, and 4) the types of mutations Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
10
12/18/2015
INDUKSI BREEDING MUTATION • LET : – energi yang disimpan pada material ketika partikel yang mengion ketika melewati material tersebut – Jumlah energi yang ditrasfer ke substasi dan menyebabkan kerusakan – Satuan kiloelectronvolt per micrometer (keV/mm) = jumlah enegi rata-rata yang dilepas per jarak tertentu Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
INDUKSI BREEDING MUTATION • Dampak mutasi – Delesi, duplikasi, inversi, translokasi, substitusi basa nitrogen
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
11
12/18/2015
INDUKSI BREEDING MUTATION
• ion beams successfully induced many carnation flower color and shape mutants. Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
INDUKSI BREEDING MUTATION • Mutagenesis dengan menggunakan metode the transposonAc/Ds system – Memasukan fragmen DNA yang telah diketahui urutan nukleotidanya • Dua tagged lines : T-DNA & transposon-tagged lines (a transposonActivator(Ac)/Dissociator(Ds) system
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
12
12/18/2015
INDUKSI BREEDING MUTATION
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Apomixis
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
13
12/18/2015
KULTUR JARINGAN • Definisi : tehnik menumbuhkan sel atau jaringan menjadi tumbuhan utuh • Lebih mudah diaplikasikan pada tumbuhan totipotensi tumbuhan > totipotensi hewan – Kemampuan sel membelah, tumbuh dan berdiferensiasi hingga menjadi tumbuhan
• Eksplan bag. Tumbuhan yang ditumbuhkan sebagai bahan awal untuk dikultur
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
KULTUR JARINGAN Jenis kultur Medium tumbuh
Kultur kalus (medium padat)
Kultur suspensi (medium cair)
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
14
12/18/2015
KULTUR JARINGAN A. Kultur Kalus
B. Kultur liquid
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
KULTUR JARINGAN Jenis kultur Kultur kalus Kultur meristem Kultur organ
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
15
12/18/2015
Plant meterials for explants • Eksplan : materi tumbuhan yang digunakan dalam budidaya jaringan • Protoplasma: dikultur dalam media car • Kalus : koloni sel yang belum mengalami differensiasi • Mutasi lebih efektif pada kultur kalus dibanding biji atau daun utuh
Materi tanaman untuk eksplan
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
16
12/18/2015
Sterilisasi dan inokulasi eksplan
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Kelebihan kultu jaringan dibanding perbanyakan konvensional • Lebih cepat dengan produksi yang tinggi, kontaminasi terhadap penyakitl ebih kecil, lebih homogen, ketersediaan bibit terjamin kualitas dan keberlanjutann ya.
Perbandingan produksi kentang secara budidaya konvensional dan kultur jaringan (sumber Mantel et al ., 1985)
Tahun
Konvensional
Kultul jaringan
Pertama
100 g umbi ↓ 1 tanaman dewasa
100 g umbi ↓ 1 tanaman prekondisi ↓ 10 Kultur tunas ↓ Perbanyakan tunas ↓ 650.000 umbi berukuran kecil
↓
Kedua
1.6 kg umbi ↓ 16 tanaman dewasa ↓
Panen
16 X 600 g umbi = 25,6 kg
617.500 tanaman ↓ 617.500 tanaman x 500 umbi = 308.750 kg
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
17
12/18/2015
REKAYASA GENETIK PADA TANAMAN • Telah diaplikasikan untuk mendapatkan: – – – – –
Tanaman tahan virus Tanaman tahan insekta Tanaman tahan herbisida Tanaman penghasil bahan aktif dan antibiotik Tanaman sebagai bioreaktor
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Tehnik Rekayasa
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
18
12/18/2015
Tehnik Rekayasa
Genetically modified organisms (GMOs)
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
. Genetically modified tomatoes produce mRNA that decreases the effects of the pectinase gene
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
19
12/18/2015
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Gladiol
Bakteri Erwina sp Tanaman gladiol dan bakteri Erwina sp sumber gen β karoten
Gen-gen tersebut diambil dari dan disisipkan ke plasmid Agrobacterium
Kemudian bakteri rekombinan tersebut diifeksikan ke sel-sel embrio biji padi sehingga terjadi fusi materi genetik. Sel dikultur hingga tumbuh menjadi tumbuhan yang dewasa yang meghasikan b karoten 40 Beyer Prof. Peter (IRRI, 2001)
20
12/18/2015
REKAYASA GENETIK PADA TANAMAN – Mature larva of the common stalk borer, Papaipema nebris, boring into a corn plant early in the growing season. Feeding within the stalk causes deformed or stunted plants that often lead to the death of the plant
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
21
12/18/2015
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Tumbuhan sebagai detektor ranjau darat
Bantuan Bioteknologi Tanaman (dikembangkan oleh Aresa Biodetection) • Gen yang peka terhadap logam dimasukkan ke dalam tanaman • Apabila akar tanaman menyentuh ranjau darat, Tanaman berubah warna dari hijau menjadi merah
44 Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
22
12/18/2015
Fitoremediasi • Sekitar 350 spesies tumbuhan di alam mampu menyerap material-material beracun yang mencemari lingkungan. • Contoh
– Bunga matahari telah digunakan menyerap logam-logam radioaktif cesium dan strontium pada lokasi kebocoran reaktor nuklir di Chernobil Rusia – Tumbuhan air seperti selada air telah digunakan untuk menyerap arsenik yang mencemari badan air
– Enceng gondok diduga mampu menyerap sejumlah logam yang terdapat pada badan-badan air di sekitar industri
45 Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Tumbuhan sebagai degradator polutan
46 Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
23
12/18/2015
Transgenic plants
Royal Demolition eXplosive
Gene from bacterium moved to plant genome Stimulates plant growth! 47 Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
Peningkatan risistensi terhadap stres abiotik melalui rekayasa genetik
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
24
12/18/2015
TUMBUHAN SEBAGAI BIOREKTOR BAGI PENYEDIAAN OBAT-OBATAN – Kebutuhan molekul terapi meningkat – Bioteknologi memenuhi kebutuhan tersebut dengan lebih ekonomis – Sumber molekul: • Sel bakteri, sel hewan, sel tumbuhan
– Tumbuhan sebagai bioreaktor BIOAKTIF: • lebih murah & mudah dapat dilakukan skala budidaya pertanian – Beberapa produk biofarmaka yang mahal sudah dapat diproduksi dengan memanfaatkan tumbuhan. Contoh human lysosomal enzymes , human growth hormone, recombinant antibodies , recombinant subunit vaccines
• Dapat mengurangi kontaminasi patogen hewan • Produk dapat dimodifikasi pada tahap akhir translasi
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
TUMBUHAN SEBAGAI BIOREKTOR BAGI PENYEDIAAN OBAT-OBATAN – Protein rekombinan yang diekspresi dalam bioreaktor tanaman diarahkan dan didegradasi dalam sel – Sistem tanaman yang digunakan sebagai bioreaktor: • Vakuola penyimpan protein • Badan minyak • Eksudat akar • Kloroplas • Kultur suspensi sel
The plant bioreactor system
– beberapa organel berfungsi sebagai sumber, deliver dan penyimpanan bioaktif
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
25
12/18/2015
TUMBUHAN SEBAGAI BIOREKTOR BAGI PENYEDIAAN OBAT-OBATAN – SEED OIL BODY AS BIOREACTOR
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
TUMBUHAN SEBAGAI BIOREKTOR BAGI PENYEDIAAN OBAT-OBATAN – Protein rekombinan yang diekspresi dalam bioreaktor tanaman diarahkan dan didegradasi dalam sel – Sistem tanaman yang digunakan sebagai bioreaktor: • Vakuola penyimpan protein • Badan minyak • Eksudat akar • Kloroplas • Kultur suspensi sel
The plant bioreactor system
– beberapa organel berfungsi sebagai sumber, deliver dan penyimpanan bioaktif
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
26
12/18/2015
Terima Kasih
Refli, Materi Kuliah Bioteknologi . Jurusan Biologi FST Universitas Nusa Cendana. 2015
27