Biobiztonság 3. Dr. Szatmári István
Biobiztonsági védelmi szintek •
A kórokozók veszélyességi besorolása, valamint a biológiai kockázatot befolyásoló tényezők figyelembe vétele, értékelése alapján a munkahelyeket be kell sorolni biobiztonsági védelmi szintekbe (BSL-1, 2, 3, 4, illetve állatkísérletes laboratórium esetén ABSL-1, 2, 3, 4), mely szintek egyben meghatározzák a biológiai expozíció (biológiai hatásnak való kitettség) megakadályozására tett védelmi intézkedéseket. Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
2
Biobiztonsági szintek •
A biobiztonsági, avagy elszigetelési szint a biológiai ágens munkafolyamatok és eljárások védőeszközök felszerelések - illetve ezek kombinációinak - függvénye.
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
3
BSL laboratóriumok általános jellemzése* Biobiztonsági Laboratórium szint típusa
Laboratóriumi gyakorlat
Alap – BSL-1
Oktató, kutatás
Alap – BSL-2
Eü-szolgáltató, GMP + védőruha, diagnosztika, bioveszély jel kutatás
GMT
Biztonsági eszközök Nincs, nyitott asztali munka Nyitott asztali munka + biztonsági fülke
Elszigetelt - Speciális diagnosztika, BSL-3 kutatás
BSL-2 + speciális ruha, Biztonsági fülke szabályozott belépés, (BSC) minden irányított légáramlás tevékenységhez
Maximálisan Veszélyes kórokozó elszigetelt - egység BSL-4
BSL-3 + zsilip, zuhany kimenetelnél, speciális hulladék kezelés
Class III BSC vagy + nyomás, autokláv, szűrt levegő
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
4
BSL laboratóriumok általános követelményei* Követelmény
BSL-1
BSL-2
BSL-3
BSL-4
A laboratórium izolálása
Nem
Nem
Igen
Igen
A szoba tömíthetősége mentesítéshez
Nem
Nem
Igen
Igen
Belső levegőztetés
Nem
Kívánatos
Igen
Igen
Szabályozott levegőztető rendszer
Nem
Kívánatos
Igen
Igen
HEPA-szűrős levegő kibocsátás
Nem
Nem
Igen
Igen
Duplaajtós bejárat
Nem
Nem
Igen
Igen
Zsilip
Nem
Nem
Nem
Igen
Zsilip zuhannyal
Nem
Nem
Nem
Igen
Előszoba
Nem
Nem
Igen
Nem**
Előszoba zuhannyal
Nem
Nem
Igen
Nem**
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 ** mivel van zsilip Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
5
BSL laboratóriumok általános követelményei* Követelmény
BSL-1
BSL-2
BSL-3
BSL-4
Kibocsátott anyag kezelése
Nem
Nem
Igen
Igen
Autokláv a telephelyen
Nem
Kívánatos
Igen
Igen
Autokláv a laboratóriumban
Nem
Nem
Kétoldalt nyitható autokáv
Nem
Nem
Kívánatos
Igen
Biobiztonsági fülkék
Nem
Kívánatos
Igen
Igen
A személyzet biztonsági monitorozásának lehetősége (ellenőrző ablak, zártláncú tevevízió, kétutas kommunikáció
Nem
Nem
Kívánatos
Igen
Kívánatos
Igen
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
6
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok normál alaplaboratóriumok, ahol kis kockázatú biológiai ágensek jelenlétével lehet számolni • A biológiai kockázat minimalizálására lényegében a Jó (vagyis biztonságos) Mikrobiológiai Technikák alkalmazása a kívánatos, kevés speciális megszorítás szükséges. * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
7
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Bejutás a laboratóriumba Amely munkahelyen 2. vagy magasabb veszélyességű csoportba tartozó mikroba előfordulása várható, vagy felhasználása történik, a bejárati ajtóra ki kell helyezni a biológiai veszélyre figyelmeztető nemzetközi szimbólumot és feliratot.
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
8
Biológiai veszély jelzése a laboratórium ajtaján
BIOLÓGIAI VESZÉLY BELÉPÉS CSAK ENGEDÉLLYEL Biobiztonsági szint: ____________________________ Felelős személy: _______________________________ Baleset esetén hívandó: _________________________ Telefon nappal:__________ Telefon otthon:_________ Belépési engedélyt a fent nevezett felelőstől kell kérni
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
9
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Bejutás a laboratóriumba Csak engedéllyel rendelkezők mehetnek a laboratórium munkaterületére Az állatházakba ezen túlmenően is külön engedéllyel szabad bemenni A laboratórium ajtóit csukva kell tartani Gyerekek nem látogathatják a laboratóriumot Csak a vizsgálatokba bevont állatok kerülhetnek be a laboratóriumba
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
10
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Egyéni védelem Laboratóriumi ruha, köpeny vagy egyenruha viselése szükséges a laboratóriumi munkaterületeken Megfelelő kesztyűt kell viselni mindazon műveleteknél, ahol vérrel, testfolyadékokkal, potenciális fertőző anyagokkal, fertőzött állatokkal való érintkezés lehetséges. A használat után a kesztyűt aszeptikusan kell lehúzni, és kezet kell mosni. A személyzet mindig mosson kezet a fertőző anyagokkal és állatokkal való műveletek után, valamint mielőtt elhagyják a laboratóriumi munkaterületeket. * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
11
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Egyéni védelem Védőkesztyűt, arcvédő pajzsot, vagy egyéb védőeszközt kell viselni, amikor a szemet vagy arcot meg kell védeni fröcsköléstől, tárgyak hatásától, mesterséges UV sugaraktól Tilos a védőruházatot a laboratóriumon kívül használni (pl. irodában, étkezőben, könyvtárban, WC-n) A használatban lévő védőruházatot ne tartsuk együtt az utcai ruhával Nem zárt lábbeli a laborban nem használható Ételt, italt tárolni, enni, inni, dohányozni, kozmetikai szereket használni, kontakt-lencsét ki-betenni tilos a laboratóriumban * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
12
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Eljárások Szájjal pipettázni szigorúan tilos! Semmit ne vegyünk a szánkba a laborban, a címkéket ne nyelvünkkel nedvesítsük! Minden technikai lépést úgy végezzünk, hogy minimális legyen az aerosol és cseppképződés Tűt és fecskendőt csak injektálásra és testnedv vételére használjunk Minden kiömlést, balesetet, a fertőző anyaggal történt valódi és potenciális expozíciót a vezetőnek jelenteni kell, az írásos dokumentumokat meg kell őrizni! * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
13
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Eljárások Ki kell dolgozni (és szükség esetén alkalmazni kell) egy az elszennyeződés feltakarítására szóló eljárást A folyékony hulladékokat fizikai, vagy kémiai úton fertőtleníteni kell, mielőtt a csatornába öntenénk Azokat a jegyzőkönyveket, papír alapú dokumentumokat, melyeket a kísérletsorozat végén kiviszünk a laboratóriumból, meg kell óvni a szennyeződéstől
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
14
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Laboratóriumi munkaterületek A laboratóriumot tartsuk tisztán, rendben, ne legyenek a munkavégzéshez nem szükséges anyagok, tárgyak benne Legyen elegendő terület a munkavégzéshez, a tisztítási eljárások elvégzéséhez, a műszerek, berendezések elhelyezéséhez, a napi használathoz szükséges anyagok tárolására A falaknak, mennyezetnek és padozatnak simának kell lennie, hogy könnyen tisztíthatók legyenek. Ne eressze át a folyadékokat és legyen ellenálló a laboratóriumban alkalmazott kémiai szereknek és fertőtlenítőknek. A padló legyen csúszásgátolt felületű. * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
15
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Laboratóriumi munkaterületek A laborasztalok legyenek vízállóak, s rezisztensek savra, lúgra, szerves oldószerekre, fertőtlenítőkre, és mérsékelten a hőre A munkafelületeket meg kell tisztítani bármely veszélyes anyag kispriccelése után, valamint a munkanap végén Minden szennyezett anyagot, mintát, stb. fertőtleníteni kell kidobás, vagy újra felhasználás előtt Legyen kellő fényerejű megvilágítás, de kerüljük a vakító, tükröződő fényeket Legyen megfelelő vészvilágítás áramszünet esetére, a biztonságos menekülés biztosítására * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
16
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Laboratóriumi munkaterületek Kívánatos, hogy legyen tartalék áramforrás (generátor), hogy áramszünet esetén is megfelelő védelmet jelentsenek az inkubátorok, biobiztonsági fülkék, hűtőés fagyasztószekrények Ha ablak van a laboratóriumon, gondoskodni kell a rovarok távoltartásáról A BSL-2 laboratóriumok esetén a laboratórium közelében ajánlott egy autokláv működtetése Gondoskodni kell a vandálok, szélsőséges állatvédők esetleges támadásának kivédéséről is * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
17
BSL-1 laboratóriumok*
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
18
BSL-2 laboratóriumok*
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
19
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Egészségügyi és orvosi felügyelet célja Biztosítani az aktív vagy passzív immunizálást, ahol ez indokolt (munkavállalóval egyeztetve) Elősegíteni egy laboratóriumi fertőzés korai felismerését Kizárni (kiszűrni) a fertőzésre fokozottan érzékeny munkavállalókat (terhes nő, gyenge immunrendszer) a veszélyes laboratóriumi munkából Biztosítani a megfelelő egyéni védőeszközöket és megfelelő eljárásokat
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
20
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Egészségügyi és orvosi felügyelet célja BSL-1 laboratóriumok esetében – annak ellenére, hogy kicsi az esélye egy fertőző betegség megkapásának -, minden laboratóriumi dolgozónak át kell esnie egy foglalkoztatást megelőző egészségügyi ellenőrzésen, ahol a dolgozó egészségügyi történetét is rögzítik. Betegségek vagy laboratóriumi balesetek azonnali jelentése kívánatos.
* Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
21
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Egészségügyi és orvosi felügyelet célja BSL-2 laboratóriumok esetében – a foglalkoztatás előtti egészségügyi ellenőrzés kötelező! A dolgozó egészségügyi történetét vezetni kell, és célzott foglalkozásegészségi értékelést kell végezni! A betegségeket és hiányzásokat nyilván kell tartani, ami a laboratórium vezetőségének feladata. Szülés-korú nőket tájékoztatni kell arról, hogy milyen kockázatokat hordozhat a megszületendő gyermekekre egyes mikroorganizmusoknak való kitettség (pl. rubeóla vírus). A magzat védelmében hozott intézkedések nagymértékben függenek a mikroorganizmusoktól. * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
22
BSL-1 és BSL-2 laboratóriumok* • Oktatás Az emberi hiba és gyenge technika minden, a laboratóriumi dolgozót védő biztonsági védelmet felülírhat. A dolgozó legyen biztonságtudatos A dolgozó legyen jól informált a laboratóriumi veszélyek felismerésében és kezelésében (pl. aerosolok belélegzése, fertőzés szájon át, fertőzés bőrön át – szúró- és vágóeszközök, harapás és karmolás állatok kezelésekor, munkavégzés vérkészítményekkel, stb.) A dolgozó legyen kiképezve a biztonságos munkavégzési folyamatokra és alkalmazza azokat A dolgozó legyen kiképezve az egyéni védőeszközök használatára és legyen gyakorlata az alkalmazásukban * Laboratory biosafety manual, Third edition, WHO, Geneva, 2004 Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
23
Fedezd fel a hibát! • Mindent el lehet rontani a helytelen magatartással
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
24
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
25
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
26
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
27
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
28
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
29
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
30
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
31
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
32
Fedezd fel a hibát!
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
33
ABSL-1 • Egy állatkísérletes egységben 1-es szintű biobiztonsági fokozat alkalmazandó, amikor olyan biológiai ágensekkel fertőzött állatokkal dolgoznak, amelyek egyértelműen körülírhatóak, és amelyek nem képesek egészséges emberek vagy más állatok megbetegedését okozni. • Az 1-es szintű biobiztonsági fokozat leginkább úgy biztosítható, ha a felhasznált állatok beszerzési forrását ellenőrizzük. Ugyanakkor biztosítani kell, hogy a szállítás alatt, valamint az állatkísérletes egységben sem fertőződhessenek az állatok. Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
34
ABSL-2 • Egy állatkísérletes egységben 2-es szintű biobiztonsági fokozat alkalmazandó, amikor olyan biológiai ágensekkel fertőzött állatokkal dolgoznak, amelyek humán vagy állati megbetegedéseket képesek okozni, és amelyek elsősorban a bőr vágott vagy egyéb sérülésein keresztül, az emésztőrendszerbe jutással, valamint a szembe, orrba vagy szájba történő fröccsenés útján fertőzhetnek.
Az ABSA oktatófilmje – magyar fordítás a sanofi-aventis/Chinoinban történt 2010-ben Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
35
Főbb felhasznált irodalmak • Laboratory Biosafety Manual (3rd Edition). Part I. 3. Basic Laboratories, World Health Organization, Geneva, 2004 • Sanofi-aventis TRIBIO Classification Standard (2009) • Az illusztrációként használt képek többsége a Wikipédiáról lett letöltve • Felhasználásra került az ABSA honlapján (www.absa.org) megtalálható oktatófilm, a sanofiaventis/CHINOIN-ban készült magyar feliratozással
Biobiztonság 3. – Dr. Szatmári István
36