BAKTERI KITINOLITIK Pseudomonas sp TNH 54 DAN PERANANNYA PADA PROSES ENZIMATIS MATERIAL KITIN

Prosiding Seminar Nasional Kimia dan Pembelajarannya, ISBN : 978-602-0951-12-6 Jurusan Kimia FMIPA Universitas Negeri Surabaya, 17 September 2016

BAKTERI KITINOLITIK Pseudomonas sp TNH 54 DAN PERANANNYA PADA PROSES ENZIMATIS MATERIAL KITIN Oleh : Nuniek Herdyastuti Jurusan Kimia FMIPA – Universitas Negeri Surabaya Email : [email protected] Abstrak Bakteri kitinolitik merupakan bakteri yang mempunyai kemampuan untuk mendegaradasi senyawa kitin dengan menggunakan enzim kitinase. Pseudomonas sp TNH 54 merupakan salah satu bakteri kitinolitik yang telah diisolasi dari tanah sawah di sekitar kampus UNESA dan telah diuji secara morfologi, fisiologi dan genetik berdasarkan 16SrRNA. Kitin sebagai polimer yang melimpah di alam setelah selulosa berperan sebagai substrat bagi enzim kitinase yang selanjutnya didegradasi untuk menghasilkan senyawa turunan kitin seperti N- Asetil glukosamin. Dikarenakan bentuk kitin yang sangat rapat maka perlu dilakukan modifikasi kitin dengan tujuan untuk memutus ikatan hidrogen di dalamnya. Modifikasi kitin dapat dilakukan dengan menambahkan senyawa kimia seperti asam klorida, natrium hidroksida ataupun sodium dodecyl sulphate. Enzim kitinase menunjukkan aktivitas tertinggi 1,858 U/mL dengan menggunakan kitin jenis amorf. Hal ini dikarenakan adanya penataan ulang kembali pada rantai kitin sehingga terjadi perubahan volume dan luas pori sebesar 3,252 m2/g serta morfologinya lebih terbuka dibandingkan dengan kitin yang tidak dimodifikasi. Kitinase mempunyai manfaat yang cukup banyak diantaranya sebagai anti jamur dan berperan pada pembentukan senyawa N-Asetil glukosamin. Sebagai anti jamur, kitinase mampu menunjukkan kemampuan penghambatan terhadap pertumbuhan jamur Aspergillus niger, Aspergillus parasiticus ataupun Fusarium oxysporum f.sp.capsici. Hasil degradasi kitinase terhadap kitin jenis amorf mampu menghasilkan N-Asetilglukosamin dengan kemurnian 76%. Dikatakan bahwa N-asetil glukosamin adalah senyawa tidak beracun, aman bagi tubuh dan merupakan kandidat food supplement serta berperan sebagai pengobatan pada penderita osteoarthritis. Kata kunci : Bakteri kitinolitik, kitin, N-Asetil glukosamin, Pseudomonas sp TNH 54 Kitin dan perannya sebagai substrat

mengolah udang untuk ekspor dalam

kitinase

bentuk udang beku dihasilkan limbah

Kitin merupakan polimer yang

berupa kulit keras (cangkang) sekitar 50 –

sangat melimpah di alam sehingga dapat

60 % yang dibuang begitu saja atau hanya

diperoleh dari berbagai sumber, salah

digunakan sebagai campuran makanan

satunya adalah dari cangkang udang windu

ternak

(Penaousse

dihasilkan

monodon).

Pada

pabrik

pembekuan udang (cold storage) yang

sehingga limbah

diperkirakan udang

lebih

akan dari

500.000 ton. Dalam Firdaus (2009), A-8


Focher menyatakan bahwa, kulit udang

Linier polisakarida yang dibentuk

mengandung protein (25 – 40 %), kalsium

dari

karbonat (45 – 50 %), dan kitin (15 – 20

glukosamin

%), tetapi besarnya kandungan komponen

merupakan

seperti

pada

Gambar

tersebut tergantung pada jenis udangnya.

1(Nathalie,

2006).

Ikatan

tersebut

Kandungan kitin dalam kulit udang lebih

membentuk fibra yang linier, rantainya

sedikit dari kandungan kulit kepiting,

dapat membentuk kristal karena adanya

tetapi kulit udang lebih mudah didapat dan

ikatan

tersedia

dalam

membentuk

sebagai

limbah.

jumlah

banyak

N-asetil-

membentuk polimer

hidrogen

intramolekul

mikrofibril

yang

kitin

dan

panjang

menghasilkan struktur yang rigid dan

diperkirakan dunia dapat memperoleh

stabil (Gooday, 1990). Dalam Yurnaliza

kembali

(2002),

dari

tahun

residu

1993

kitin

Pada

yang

-1,4

ikatan

invertebrata

laut

Richard

menyatakan

kitin

sebanyak 37.000 ton dan meningkat

berbentuk padat, amorf, tidak berwarna,

menjadi 80.000 ton pada tahun 2000

tidak larut dalam air, asam encer, alkohol

(Ogawa et al., 2002). Dengan kata lain

dan semua pelarut organik tetapi kitin

kitin dapat diproduksi secara murah dan

dapat larut dalam fluoroalkohol dan asam

sekaligus

membantu

menyelesaikan

mineral pekat.

masalah

lingkungan

dan

untuk

mempromosikan nilai ekonomis produksi laut.

Gambar 1. Kitobiosa, merupakan disakarida N-Asetil-glukosamin yang membentuk seyawa kitin

A-9


Kitin mempunyai tiga bentuk struktur

yebabkan kitin tidak larut dalam pelarut,

yaitu α, β dan γ. Kitin-α lebih banyak

sedangkan

ditemukan

bentuk

swollen di dalam air sehingga dapat larut

polimorfik yang paling stabil dengan

seperti dalam asam format (Coutiño et al.,

struktur yang rapat padat, mempunyai

2006 ; Majtán et al., 2007).

di

alam

karena

rantai anti paralel dan mempunyai ikatan hidrogen yang ditemukan

pada

kuat.

Kitin-α

golongan

kitin-β

dapat

membentuk

Keberadaan kitin di alam yang

banyak

sangat

crustaceae

melimpah

terdegradasi,

karena

ini

dengan

adanya

cepat

beberapa

seperti kepiting, lobster dan sebagainya.

bakteri dan fungi yang mempunyai enzim

Bentuk kitin-β jarang ditemukan, terdapat

kitinase yang mampu mendegradasi kitin.

pada

Dua

golongan

moluska,

mempunyai

famili

tersebut

mengandung

struktur paralel tertutup dengan interaksi

endokitinase dan eksokitinase yang akan

intramolekul yang lebih lemah tetapi

memotong

sedikit lebih stabil daripada kitin-α, dan

(Gambar 2).

mempunyai

kelarutan

rantai

kitin

secara

tertinggi

dibandingkan dua bentuk lainnya. Bentuk ketiga adalah kitin-γ merupakan gabungan dari struktur kitin α dan β. Struktur kitin-α yang men

Gambar 2. Sisi spesifik pemotongan tiga jenis kitinase terhadap kitin

A - 10

acak


Proses degradasi enzim kitinase memotong

modifikasi terhadap kitin.

kitobiosa (GlcNAc)2 menggunakan enzim

bahwa kitin jenis koloidal sebagai sumber

kitobiosidase

(ekso-N,N’-diasetil

kitin terbaik untuk memproduksi kitinase

kitobiohidrolase) atau memotong kitotriosa

(Suraini et al., 2008; Shanmugaiah et al.,

(GlcNAc)3

enzim

2008 ; Herdyastuti, 2009 ; Singh, 2010 ;

(ekso-N,N’,N’’-triasetil

Day, 2011). Modifikasi kitin jenis lain

kitotriohidrolase) dari ujung reduksi atau

yaitu kitin jenis amorf dapat menunjukkan

nonreduksi rantai kitin (Brurberg, 2000).

aktivitas yang lebih tinggi terhadap enzim

menggunakan

kitotriosidase

Kitin diidentifikasi sebagai sumber

kitinase

dibandingkan

Dilaporkan

dengan

kitin

karbon terbaik. Bentuk kitin yang rapat

koloidal (Gambar 3) yaitu sebesar 1,585

dan kompak karena adanya bentuk - 

U/mL (Herdyastuti, 2015). Kitin

secara

dengan

komersial

dapat

dalam

menstabilkan bentuk polimorfiknya secara

berbagai

bidang

alami dapat menyebabkan kitin tidak larut

enzimologi,

dalam pelarutnya (Majtán, 2006). Hal ini

pangan

dapat menyebabkan kesulitan pada reaksi

kosmetik dan lain-lain (Rattanakit et al.,

enzim dan substrat, sehingga dilakukan

2002).

rantai

antipararel

yang

gizi,

dimanfaatkan misalnya

obat-obatan, mikrobiologi,

biokimia, pertanian, tekstil,

Aktivitas kitinase (U/mL)

2 1,5 1

0,5 0 Kt

Gambar 3.

Kk Jenis Ks Subtrat Ka

Kb

Uji aktivitas kitinase dengan berbagai jenis substrat : kitin serbuk (Kt), kitin koloidal (Kk), kitin superfine (Ks), kitin amorf (Ka) dan kitin bead (Kb)

A - 11


Pseudomonas

sp

TNH

54

dengan menghasilkan monomer N-asetil

sebagai

glukosamin.

pengahasil enzim kitinase Kitinase

(EC.3.2.1.14)

adalah

Telah diisolasi bakteri dari lumpur

enzim yang mengkatalisis hidrolisis kitin

sawah yang ada di lingkungan kampus

menjadi oligomer atau monomer senyawa

UNESA secara langsung menggunakan

N-asetil

medium

glukosamin.

Kitinase

dapat

LB.

Berdasarkan

morfologi

dihasilkan oleh beberapa mikroorganisma

koloni yang diperoleh pada media LB

dan

padat diperoleh 63 isolat yang mempunyai

mempunyai peran penting

pada

fisiologi dan ekologi. Kitinase dapat

aktivitas

ditemukan

koloni

pada

bakteri,

jamur

dan

kitinase.

Hasil

menunjukkan

karakteristik

bahwa

koloni

kelenjar pencernaan binatang yang dapat

berwarna kuning, bentuk bulat, elevasi

mengkonsumsi kitin sebagai makanannya.

konveks, margin rata dan diameter koloni

Tronsmo dan Harman (1993) menyatakan

3 – 5 mm seperti pada Gambar 4.

bahwa enzim kitinase dibagi dalam tiga

Uji fisiologi dilakukan dengan

tipe, yaitu :

menggunakan

a) Endokitinase (EC.3.2.1.14) Enzim

endokitinase

bekerja

Microbact

dengan

ditemukan

pada

ini

banyak

beberapa

varietas

TNH54 diduga merupakan kelompok dari Burkholderia pseudomallei dengan percent probability 99%. Hasil identifikasi 16S-

tanaman.

rRNA isolat TNH54 menunjukkan bahwa

b) eksokitinase atau kitobiosidase Enzim

jenis

eksokitinase

isolat akan

merupakan

golongan

seperti tampak pada pohon filogenetik

reduksi kitin pada setiap tahapnya dan

(Gambar

biasanya banyak ditemukan pada bakteri.

-1,4-

TNH54

Pseudomonas sp dengan kemiripan 98 %

menghidrolisis kitin pada ujung non

c)

(Gram Negative

morfologi dan fisiologi terhadap isolat

asetil glukosamin dengan berat molekul jenis

GNB

kits

seperti pada Tabel 1. Berdasarkan uji

kitin membentuk oligomer pendek N-

Enzim

Identification

Bacilli) 12ª/B/E, 24E – Oxidase Positive

memotong ikatan -1,4 bagian internal

rendah.

TM

5).

Sehingga

isolat

yang

ditemukan disebut sebagai Pseudomonas

N-asetilglukosaminidase

sp TNH 54 (Herdyastuti et al, 2012).

(EC.3.2.1.30) Enzim -1,4- N-asetilglukosaminidase bekerja pada pemutusan diasetil atau

Pseudomonas

sp

TNH

menghasilkan

enzim

54

mampu

kitinase

dengan

aktivitas spesifik 7,53 U/mg dengan

kitobiosa, kitotriosa dan kitotetraosa A - 12


pengendapan

amonium

sulfat.

Hasil

keberadaan

logam

Mn2+

serta

karakterisasi kitinase menunjukkan kondisi

menunjukkan massa atom relative pada

optimum pada pH 5, suhu 35 C,

26,1 dan 29 kDa menggunakan staining

mempunyai nilai KM 1,51 mg/mL dan

Calcofluor White M2R (Herdyastuti et al,

Vmaks 0,35 µml/mL jam, diaktivasi dengan

2012).

Gambar 4. Hasil isolasi bakteri dari tanah sawah menunjukkan single coloni (a) dan pewarnaan gram (b) Tabel 1. Karakter Fisiologi Isolat TNH54 hasil Identification kits MicrobactTM GNB (Gram Negative Bacilli) 12ª/B/E, 24E – Oxidase Positive

UJI

Hasil

UJI

Hasil

UJI

Hasil

Reduksi Nitrate (NIT) Produksi H2S (H2S) Asam dari xylose (XYL) Hidrolisis Urea (UR)

+

Tryptophane deaminase (TDA) Asam dari inositol (INO) Asam dari sukrosa (SUC) Asam dari adonitol (ADO) Arginine dihidrolase

-

Oxidase (OXI)

+

Motilitas (MOT)

+

Lysine decarboxilase (LYS) Asam dari glukosa (GLU) Onitrophenol Galaktopiranosida (ONPG) Voges proskauer (VP)

+

Ornithine decarboxyl (ORN) Asam dari mannitol (MAN) Indole (IND)

+

+

Gelatin liquefaction (GEL) Asam dari sorbitol (SOR) Asam dari laktose (LAC) Asam dari raffinose (RAF)

-

Penggunaan sitrat (CIT) Malonate inhibition (MAL) Asam dari rhamnose (RHA) Asam dari arabinosa (ARA) Asam dari salicin (SAL)

+ +

+

+ +

A - 13

+ -

+ + -

+ +

+ + +


Gambar 5. Phylogenetic tree bakteri kitinolitik dari lumpur sawah dikelompokkan dalam Pseudomonas sp dengan kemiripan 98% Pemanfaatan mikroba kitinolitik

sp dan Pseudomonas sp telah berhasil

merupakan salah satu cara pengendalian

digunakan sebagai kontrol pada beberapa

hayati yang efektif untuk jamur patogen

jamur patogen (Gomes et al., 2000 ;

tanaman. Enzim kitinase yang diproduksi

Gohel, 2006 ; Nandakumar et al., 2007).

oleh

Hal ini dikarenakan adanya kitin pada

beberapa

terbukti dapat

mikroorganisma

telah

menghidrolisis struktur

media

dapat

menginduksi

kitin, senyawa utama penyusun dinding sel

kitinase

tabung kecambah spora dan miselia,

mendegradasi

sehingga jamur tidak mampu menginfeksi

dibandingkan bila ditumbuhkan tanpa kitin

tanaman.

secara

(Parani dan Saha, 2009). Enzim kitinase

mikroskopik menunjukkan kemampuan

dari Pseudomonas sp TNH 54 terbukti

enzim kitinase yang bertanggungjawab

mampu menunjukkan penghambatan pada

terhadap degradasi dinding sel jamur

pertumbuhan Aspergillus niger sebesar

fitopatogenik

3,63 cm dengan indeks kitinolitik 1,17

Sejumlah

Hasil

observasi

(Harigi, agen

et

al.

2007).

biokontrol

dari

sehingga

produksi

jamur

seperti pada Gambar 6.

mikroorganisma kitinolitik Trichoderma A - 14

kemampuan lebih

baik


A

B

Gambar 6. Hasil penghambatan kitinase terhadap jamur patogen A. niger (A) dan kontrol (B) Kitin jenis amorf sebagai penghasil

menunjukkan

senyawa N-Asetil glukosamin

penggembungan pada masing-masing jenis

Struktur kitin yang rapat dan kompak

apabila

dimodifikasi

bahwa

perlakuan

kitin merubah luas dan volume pori

maka

menjadi lebih besar meskipun jari-jarinya

strukturnya menjadi lebih terbuka dan

tidak

berongga

2007)

mempermudah enzim untuk berinteraksi

sehingga memudahkan interaksi enzim

terhadap substratnya sehingga aktivitasnya

dengan substrat. Hal ini dikarenakan

tinggi (Herdyastuti et al, 2015).

(Illankovan

et

al.,

terjadinya penataan ulang kembali pada

berubah.

Hal

Berdasarkan

tersebut

morfologi

akan

pada

rantai kitin yang dapat terlihat pada

Gambar 7 menunjukkan bahwa kitin jenis

perubahan karakteristik secara fisik dan

amorf lebih terbuka dibandingkan dengan

morfologi dibandingkan kitin serbuk. Kitin

kitin serbuk sehingga lebih cepat terbentuk

dengan jenis amorf dapat menunjukkan

produknya

aktivitas yang lebih tinggi dibandingkan

yang diduga sebagai N-Asetil glukosamin.

dengan

Apabila

kitin

modifikasi

lainnya

berupa

dalam

potongan-potongan

bentuk

kitin

serbuk

dikarenakan adanya perubahan luas dan

diperlukan waktu inkubasi lebih dari 12

volume pori seperti pada Tabel 2 dan

hari

Gambar

glukosamin (Hoang et al., 2011).

7.

Hasil

analisis

tersebut

A - 15

untuk

mendapatkan

N-Asetil


Tabel 2. Hasil analisis sifat fisik berbagai jenis kitin No. 1. 2. 3. 4. 5.

Nama Substrat Kitin serbuk Kitin koloidal Kitin superfine Kitin amorf Kitin bead

Jari-jari pori (A) 19,108 19,044 162,879 19,159 19,011

Luas Pori (m2/g) 1,365 2,780 6 x 10-2 3,252 0,606

Volume pori (cc/g) 4,00 x 10-2 5,00 x 10-2 1 x 10-4 1,30 x 10-2 4,00 x 10-3

Gambar 7. Perbedaan morfologi kitin sebelum didegradasi (a) dan setelah didegradasi oleh kitinase (b) selama 36 jam

N-asetil-glukosamin merupakan turunan

senyawa antara dan diperlukan pada fungsi

monosakarida glukosa dan didistribusikan

sel.

secara luas di seluruh dunia. Monosakarida

glukosamin

amino tersebut mempunyai rumus molekul

supplement,

C8H15NO6, dan berat molekulnya adalah

pengobatan pada penderita osteoarthritis

221,2. Secara umum N-asetil-glukosamin

(Illankovan et al., 2006). Penelitian medis

merupakan serbuk berwarna putih dan

yang

sedikit manis, mempunyai titik leleh pada

menunjukkan

221° C mempunyai kelarutan 25 % dalam

pengobatan penyakit autoimun dengan

air , serta 1 % larutan air tidak berwarna

menggunakan turunan glukosa. Turunan

dan jelas (Chen and Liu, 2010).

glukosa berpartisipasi dalam berbagai

N-Asetil berfungsi

sebagai

glukosamin nutrien,

N-asetil D-glukosamin dan Dmerupakan kandidat serta

melibatkan

berperan

food

sebagai

N-asetilglukosamin

potensi

pada

berbagai

dapat

fungsi tubuh, dan banyak yang percaya

metabolit

bahwa glukosamin dengan atau tanpa A - 16


kondroitin, dapat meredakan rasa tidak

mengungkapkan

nyaman dan peradangan pada orang yang

glukosamin tidak beracun, aman bagi

menderita arthritis. Pusat penelitian Irvine,

tubuh dan lebih lanjut menunjukkan bahwa

Universitas

54% dari glukosamin yang diberikan akan

bahwa

California

adanya

menyebutkan

supplement

N-asetil

glukosamin

mengurangi glikosilasi

kelainan protein

N-asetil-

diekskresikan ke dalam urin dalam satu

glukosamin dalam makanan, lebih efektif daripada

bahwa

hari.

dan

dapat

dalam

proses

diproduksi pada kondisi optimal dengan

serta

konsentrasi substrat 1,2 %, suhu 30 C dan

dalam

sel

N-Asetil

glukosamin

yang

menghambat inflammatory demyelination

waktu

pada

membuka

selanjutnya dimurnikan dengan etanol

kemungkinan untuk melakukan terapi

menunjukkan kromatogram seperti pada

metabolisme dengan N-asetil glukosamin

Gambar 8.

mencit.

Hal

ini

inkubasi

selama

8

jam

dan

untuk mencegah penyakit pada system

N-Asetil glukosamin tersebut telah

pusat syaraf, Multiple sclerosis (MS) yang

dikarakterisasi berdasarkan sifat fisik dan

dalam waktu dekat dapat menyebabkan

kimia,

inflamasi dan dalam jangka panjang

diaplikasikan

menyebabkan

seperti dalam bidang kesehatan sebagai

neurodegeneration

(Demetriou, 2005). Hasil uji toksisitas

diharapkan dalam

ke

depan

beberapa

dapat bidang

pengobatan osteoarthritis.

Gambar 8. Kromatogram N-Asetil glukosamin hasil hidrolisis enzimatis menunjukkan waktu retensi 3,1menit

A - 17


deproteinasi, deasetilasi I dan deasetilasi II. DPPM UII Yogyakarta. Gooday, G.W. 1990. Physiology of Microbial Degradation of Chitin and Chitosan, Biodegradation. 1 : 177-190 Gohel,V., Chaudhary, Vyas, and Chhatpar. 2006. Stastical Screenings of Medium Components for The Production of Chitinase by The Marine Isolate Pantoe dispersa. Biochemical Engineering Journal. 28 : 50-56 Gomes R.C., L.T.A.S. Semeˆdo, R.M.A. Soares, C.S. Alviano, L.F. Linhares and R.R.R. Coelho. 2000. Chitinolytic activity of Actinomycetes from a cerrado soil and their potential in biocontrol. Letters in Appl. Microbiol. 30 : 146–150 Harighi,M.J., Zamani,M.R., and Motallebi, M. 2007. Evaluation of Antifungal Activity of Purified Chitinase 42 from Tricodherma atroviride PTCC5220. Biotechnol.6 (1) : 2833 Herdyastuti,N., Raharjo T.J., Mudasir, Matsjeh,S. 2009. Kitin dari limbah cangkang udang sebagai media untuk bakteri kitinolitik yang diisolasi dari lumpur sawah, Jurnal Manusia dan Lingkungan .16 (2) : 115-121 Herdyastuti,N., Cahyaningrum S.E., Raharjo T.J., Mudasir, Matsjeh,S. 2012. Potential antifungal of Chitinolytic Bacteria Pseudomonas sp TNH54 from Mud Field, Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. 3 (3) : 11171124 Herdaystuti, N. Cahyaningrum, S.E., Tamimi M. and Wirawan A. (2015). Modification of chitin as substrates for chitinase, African

Ucapan Terima kasih Ucapan terima kasih ditujukan kepada Kemenristek Dikti yang telah memberikan dana pada penelitian yang telah kami lakukan baik Hibah Bersaing maupun Fundamental (2008 – 2016). Kepada teman-teman di kelompok Kitinase : Bu Sari Edi serta mahasiswa bimbingan saya : Mizan Tamimi, Fauziah, Adi Wirawan, Rio Widodo, Intan Ayu Apriliana, Fitria Dewi, Intan Fitria, Medya Indra dan Kartika

Vidya

yang

telah

banyak

membantu penelitian.

Daftar Pustaka Chen, J.K., Shen,C.R., and Liu, C.L. 2010. N-Acetylglucosamine : Production and applications, Marine. Drugs, 8 : 2493-2516 Coutinõ, L.R., Marıá del Carmen, M.C., Huerta, S., Revah, S., Shirai, K. 2006. Enzymatic hydrolysis of chitin in the production of oligosaccharides using Lecanicillium fungicola chitinases. Process Biochemistry. 41 : 1106– 1110. Dai De-hui, Wei-lian Hu, Guang-rong Huang and Wei Li. 2011. Purification and characterization of a novel extracellular chitinase from thermophilic Bacillus sp. Hu1. African Journal of Biotechnology . 10(13) : 2476-2485 Demetriou, M. 2005 The Journal of Immunology.175(11) : 7202-7208. Firdaus, F., Darmawan, E., Mulyaningsih, S. 2009. Karakteristik spektra infrared (IR) kulit udang, kitin dan kitosan yang dipengaruhi oleh proses demineralisasi, A - 18


Journal of Biotechnology. 14 (18) : 1590-1595 Hoang,K.C., Lai,T.H., Lin,C.S., Chen,Y.T., and Liau, C.Y. 2011. The Chitinolytic Activities of Streptomyces sp. TH-11, Int. J. Mol. Sci. 12 : 56-65 Ilankovan P., Hein S., Chuen-How Ng, Trung T.S., Stevens W.F. 2007. Production of N-acetyl chitobiose from various chitin substrates using commercial enzymes. J.Carb.Poly. available online at www.sciencedirect.com Jamialahmadi,K., J.Behravan, MF.Najafi, MT.Yazdi, AR. Shahverdi, and MA.Faramarzi. 2011. Enzymatic production of N-Acetyl-Dglucosamine from chitin using crude enzyme preparation of Aeromonas sp PTCC1691. Biotechnology. 10 (3) : 292-297. Majtán, J., B´ıliková, K., Markoviˇc, O., Ján Gróf, Kogan, G., and Simúth, J. 2007. Isolation and characterization of chitin from bumblebee (Bombus terrestris). Intern. J. Biol. Macromol. 40: 237– 241 Nandakumar,R., Babu,S., Raguchander,T., and Samiyappan,R. 2007. Chitinolytic Activity of Native Pseudomonas fluorescens Strains, J. Agric. Sci. Technol. 9: 61-68 Nathalie,C., Fleury, A., Fukamiza,T., and Ryszard,B. 2006. Two-exo--Dglukosaminidase from Actinomycetes define anew subfamily 2 of glikoside hydrolases. Biochem.Journal. 394 : 675-686. Ogawa K. Yoshida, Kariya, Ohnishi and Ikeda R. 2002. Purification and Characterization of a Novel Chitinase from Burkholderia cepacia strain KH2 isolated from the Bed Log of Lentinus edodes, Shiitake mushroom. J.Gen. Appl. Microbiol. 48 : 25-33.

Parani,K., and Saha, B.K. 2009. Studies on interaction of Serratia marcescens (SR1) with fungal pathogens, American-Eurasian J.Agric. & Environ.Sci. 5(2) : 215-218 Rattanakit N, Plikomol A, Yano S, Wakayama M, Tachiki T. 2002. Utilization of shrimp shellfish waste as a substrate for solid-state cultivation of Aspergillus sp S1-13: Evaluation of a culture based on chitinase formation which is necessary for chitin-assimilation. J.Biosci.Bioeng. 93 (6) : 550-556 Shanmugaiah, V., Mathivanan N., Balasubramanian, N. and Manoharan, P.T. 2008. Optimization of cultural conditions for production of chitinase by Bacillus laterosporous MML2270 isolated from rice rhizosphere soil, African J. Biotechnol. 7 (15) : 2562-2568 Singh, A.K. 2010. Optimization of culture conditions for thermostable chitinase production by Paenibacillus sp. D1, African Journal of Microbiology Research. 4(21) : 2291-2298 Suraini, A.A., Sin T.L., Alitheen N., Shahab N. and Kamaruddin K.2008. Microbial Degradation of Chitin Materials by Trichoderma virens UKM1. J. Biol. Sci. 8 (1) : 52-59 Yurnaliza. 2002. Senyawa Kitin dan Kajian Aktivitas enzim Mikrobial Pendegradasinya, FMIPA-USU.

A - 19

BAKTERI KITINOLITIK Pseudomonas sp TNH 54 DAN PERANANNYA PADA PROSES ENZIMATIS MATERIAL KITIN

Recommend Documents