36
BAB III METODOLOGI PERCOBAAN
Adapun langkah-langkah yang dilakukan dalam pengujian adalah : Acuan
: MA POM No.03/MM/00
Prinsip
: Identifikasi formaldehid secara reaksi warna setelah didestilasi uap dari cuplikan
3. 1 Alat-alat - Tabung reaksi
Pyrex
- Gelas ukur 10 ml
Pyrex
- Gelas ukur 5 ml
Pyrex
- Labu Kjeldhal 800 ml
Duran
- Labu ukur 100 ml
Pyrex
- Corong
Pyrex
- Labu ukur 10 ml
Pyrex
- Beaker glass 250 ml
Pyrex
- Hot plate /Pemanas listrik
Gerhadt
- Pendingin Liebig
Pyrex
- Termometer 100 oC
Pyrex
- Timbangan Analitik Elektronik AND GR 300/14216551 - Spektrofotometer UV 1700
Shimadzu
- Heating Mantle Barnstead
EMo 500/CE
- Statif dan klem - Aluminium foil
Universitas Sumatera Utara
37
3. 2 Bahan-bahan - Formaldehid 37 % p.a - Asam Sulfat (p) p.a - Serbuk asam kromatropat p.a - Aquades - Sampel manisan mangga
3. 3 Pereaksi-pereaksi - Asam Pospat 10 % - Asam Sulfat 60 % - Asam Kromatropat 0.5 %
3. 4 Cara Pembuatan Pereaksi 1. Asam Fosfat 10 % Sebanyak 12 ml Asam Fosfat 85 % , diencerkan dengan aquades dalam labu ukur 100 ml sampai garis batas standar. 2. Asam Sulfat 60 % Sebanyak 63 ml H 2 SO 4 (p), diencerkan dengan aquades dalam labu ukur 100 ml sampai garis batas standar. 3. Asam Kromatropat 0.5 % Sebanyak 500 mg asam kromatropat, dilarutkan dalam H 2 SO 4 60 % sampai 100 ml.
Universitas Sumatera Utara
38
3. 5 Prosedur Percobaan 3. 5. 1 Pembuatan Larutan Baku Sebanyak 10 ml formaldehid 37 %, diencerkan dengan aquades dalam labu ukur 100 ml sampai garis batas standar. 3. 5. 2 Analisa formaldehid dalam sampel 3. 5. 2. 1 Perlakuan Sampel Di timbang sampel manisan mangga sebanyak 10-20 g, dimasukkan kedalam labu kjeldhal 800 ml yang telah berisi air 100-200 ml. Kemudian ditambahkan 5 ml larutan asam posfat 10 %. Kemudian didestilasi perlahan hingga diperoleh 90 ml destilat yang ditampung dalam gelas ukur yang berisi 10 ml air (ujung pendingin harus tercelup). Kemudian sebanyak 1-2 ml destilat dimasukkan kedalam tabung reaksi, ditambahkan 5 ml larutan asam kromatropat 0.5 % dalam asam sulfat 60 % yang dibuat segar. Kemudian dipanaskan dalam penangas air yang mendidih selama 15 menit. Jika terjadi perubahan warna larutan menjadi ungu maka sampel mengandung formaldehid. Kemudian diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 570 nm. Kemudian dilihat panjang gelombang dari sampel (Horwitz, 1970). 3. 5. 2. 2 Perlakuan Larutan Baku Di ambil formaldehid 37 % sebanyak 1-2 ml dimasukkan kedalam tabung reaksi, ditambahkan 5 ml larutan asam kromatropat 0.5 % dalam asam sulfat 60 % yang dibuat segar. Kemudian dipanaskan dalam penangas air yang mendidih selama 15 menit. Kemudian diukur dengan spektrofotometer pada panjang gelombang 570 nm. Kemudian dilihat panjang gelombang dari larutan baku.
Universitas Sumatera Utara
39
3. 5. 3 Penggunaan Spektrofotometer UV Cahaya Tampak A. Prosedur Analisa Kualitatif 1. Hidupkan alat dengan menekan tombol power pada posisi ON pada seluruh alat. 2. Klik U3000, Restor, tekan tombol Enter. 3. Klik Control, klik go to wave length. 4. Masukkan panjang gelombang yang diinginkan, klik Run. 5. Masukkan blanko pada kuvet Refrence dan kuvet sampel. 6. Klik Control, klik Autu 100 % (Abs). 7. Klik Parameter, klik Scan Parameter. 8. Klik Abs pada data Mode, pilih Scan speed (nm) pada angka 300, sampling internal pilih Auto, masukkan angka pada Start WL dan End WL, klik Ok. 9. Klik instrument parameter, klik Slit (nm) pada angka 2.0, klik Auto Change pada Lamp Change, klik Auto Gain pada pint Voltage, Analog Recorder pilih angka 0, V=0 dan V1=1000, klik Ok. 10. Klik Out-put, klik sampel/coment, isikan nama sampel dan Comenter, klik Ok. 11. Ganti Blanko dengan sampel pada Cuvet sampel, klik Scan, start scan, tunggu sampai terdengar bunyi sinyal. 12. Klik data procesing, klik peak, print peak, klik Run.
Universitas Sumatera Utara
40
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4. 1 Hasil 4. 1. 1 Uji Organoleptis Adapun uji organoleptis yang dilakukan berdasarkan pengamatan panca indra dapat dilihat dalam tabel 4.1. dibawah ini : Nama Sampel
Kemasan
Bentuk
Warna
Rasa
Bau
Manisan Mangga
Bungkus plastik
Potongan buah
Coklat
Manis
Khas
Tabel 4. 1 Uji Organoleptis
4. 1. 2 Data percobaan Adapun data yang diperoleh dari identifikasi formaldehid dalam sampel manisan mangga melalui destilasi uap dan spektrofotometri dapat dilihat dalam tabel 4.2. dibawah ini : Perlakuan
Syarat
Cara
Hasil
Identifikasi
Tidak
Destilasi-
Formaldehid(+) Permenkes 722/88
formaldehid boleh ada
Pustaka
spektrofometri Tabel 4. 2 Data Percobaan
4. 1. 3 Pengujian Reaksi Warna Pada Larutan Baku Pembanding Adapun hasil pengamatan yang terjadi pada larutan baku pembanding formaldehid setelah penambahan aquades, asam pospat 10 %, asam sulfat 60 % dan asam kromatropat 0.5 % kemudian dipanaskan 15 menit di air mendidih dan
Universitas Sumatera Utara
41
dilanjutkan pengamatan pada spektrofotometer UV 1700 Shimadzu pada λ 570 nm dapat dilihat pada table 4.3 dibawah ini : Nama Zat
Pereaksi
Baku pembanding
Aquades
formaldehid 37 %
As. Pospat 10 %
Pengamatan
Hasil
15 menit
Formaldehid (+)
Ungu
As. Sulfat 60 % As. Kromatropat
- Spektrofotometer λ 570 nm
0.5 %
Tabel 4. 3 Pengujian Reaksi Warna Pada Larutan Baku Pembanding
5. 1. 4 Pengujian Reaksi Warna Pada Zat Uji Sampel Manisan Mangga Adapun hasil pengamatan yang terjadi pada zat uji sampel manisan mangga setelah penambahan aquades, asam pospat 10 %, asam sulfat 60 % dan asam kromatropat 0.5 % kemudian dipanaskan 15 menit di air mendidih dan dilanjutkan pengamatan pada spektrofotometer UV 1700 Shimadzu pada λ 570 nm dapat dilihat pada table 4.3 dibawah ini : Nama Zat
Pereaksi
Zat uji
Aquades
manisan mangga
As. Pospat 10 %
Pengamatan
Hasil
15 menit
Formaldehid (+)
Ungu
As. Sulfat 60 % As. Kromatropat 0.5 %
- Spektrofotometer λ 570 nm
Tabel 4. 4 Reaksi Warna Pada Zat Uji Sampel Manisan Mangga
4. 2 Pembahasan 4. 2. 1 Larutan Baku Formaldehid 37 % Adapun hasil pengamatan yang terjadi pada larutan baku pembanding formaldehid 37 %, dari hasil destilat dari sampel manisan mangga setelah
Universitas Sumatera Utara
42
penambahan aquades, asam pospat 10 %, asam sulfat 60 % dan asam kromatropat kemudian dipanaskan 15 menit di air mendidih, maka akan terjadi perubahan warna dari bening menjadi warna ungu dalam larutan tersebut dan kemudian dilanjutkan identifikasi menggunakan spektrofotometer UV 1700 Shimadzu pada λ 570 nm menghasilkan panjang gelombang dari sampel 567.60 nm dengan absorbansi 0.140. Adapun reaksi antara formaldehid dengan asam kromatropat dapat dilihat pada gambar dibawah ini :
Gambar 2 Reaksi asam Kromatropat dengan Formaldehid
4. 2. 2 Sampel Manisan Mangga Hasil pengamatan yang terjadi pada zat uji sampel manisan mangga melalui destilasi uap setelah penambahan aquades, asam pospat 10 %, asam sulfat 60 % menghasilkan berupa destilat, kemudian destilat ditambahkan asam kromatropat lalu dipanaskan 15 menit di air mendidih, maka akan terjadi perubahan warna dari bening
Universitas Sumatera Utara
43
menjadi warna ungu dalam larutan tersebut dan kemudian dilanjutkan identifikasi menggunakan spektrofotometer UV 1700 Shimadzu pada λ 570 nm menghasilkan panjang gelombang dari sampel 564.00 nm dengan absorbansi 0.080. Berdasarkan hasil tersebut dapat dilihat bahwa panjang gelombang dari larutan baku pembanding formaldehid 37 % adalah 564.00 nm dengan absorbansi 0.080 dan panjang gelombang dari sampel manisan mangga 567.60 nm dengan absorbansi 0.140, Kisaran panjang gelombang 564.00 nm – 567.60 nm tersebut menunjukkan bahwa sampel manisan mangga mengandung formaldehid (+) .
Universitas Sumatera Utara
44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
6. 1 Kesimpulan Hasil identifikasi formaldehid dalam manisan mangga memberikan hasil yang positif, baik dengan reaksi warna maupun dengan spektrofotometri UV 1700 Shimadzu, panjang gelombang dari larutan baku pembanding formaldehid 37 % adalah 564.00 nm dengan absorbansi 0.080 dan panjang gelombang dari sampel manisan mangga 567.60 nm dengan absorbansi 0.140, kisaran panjang gelombang 564.00 nm – 567.60 nm tersebut memberikan kesimpulan bahwa sampel manisan mangga menggunakan formaldehid (+) sebagai bahan pengawetnya.
6. 2 Saran Diharapkan dilakukan pengujian terhadap formaldehid pada makanan jenis lainnya.
Universitas Sumatera Utara
