Ph.D. Értekezés
AZ AKUT FÁZIS REAKCIÓ HATÁSA AZ IGF RENDSZER SZABÁLYOZÁSÁRA PATKÁNYMÁJBAN Dr. Lelbach Ádám
Ph.D. Program- és Témavezeto: Prof. Dr. Fehér János, az MTA doktora
Nemzetközi kutatási együttmuködés: Prof. Dr. med. Dr. h.c. Giuliano Ramadori a Gasztroenterológiai- és Endokrinológiai Klinika igazgatója Georg-August Egyetem, Göttingen, Németország
Semmelweis Egyetem Általános Orvostudományi Kar II. Belgyógyászati Klinika
Budapest, 2005
ÖSSZEFOGLALÓ Bevezetés: Katabolikus állapotok csökkent szérum inzulin-szeru növekedési faktor 1 (IGF-I) és IGF-köto fehérje 3 (IGFBP-3) koncentrációval és
emelkedett szérum IGFBP-3 proteáz aktivitással és szérum IGFBP-1 és IGFBP-4 koncentrációval társulnak. Számos adat támasztja alá akut fázis citokinek, interleukin-6 (IL-6), IL-1 és tumor nekrózis faktor ? (TNF? ) szerepét katabolikus állapotokban létrejött anyagcsere elváltozásokban. Célkituzések: A. In vitro, primér patkány májsejt kultúrákban vizsgáltuk akut fázis mediátorok, IL-6, IL-1? és TNF? hatását az IGF-I és az IGFBP-k bioszintézisére. B. In vivo, patkányokba intramuszkulárisan fecskendezett terpentin olaj hatását vizsgáltuk (akut fázis modell) az IGF-I és az IGFBP-k génexpressziójára. Eredmények: A. Hepatocitákban, Kupffer sejtekben (Ks) és hepatociták és Ks-k kokultúrájában az IL-6 dózisfüggoen csökkentette az IGF-I bioszintézisét. Az IL-6 növelte az IGFBP-1 és -4 mRNS expresszióját és fehérje szekrécióját hepatocitákban, illetve az IGFBP-3 mRNS expresszióját és fehérje szekrécióját Ks-ben. Kokultúrákban IL-6 hatására az IGFBP-1, -3 és -4 bioszintézise dózisfüggoen növekedett, míg az IL-1? ?és a TNF? hatása kevésbé volt jelentos. Neutrális pH érték mellett, IGFBP-3 ellenes proteáz aktivitást nem tudtunk kimutatni az IL-6-tal kezelt kokultúrák médiumaiból. B. Az IGF-I génexpressziója csökkent a májban, a lépben és kisebb mértékben az izomban és a szívben, de a vesében, a tüdoben és a bélben nem. Az IGFBP-1 transzkriptek mennyisége növekedett a májban és a vesében, de a tüdoben, a bélben, a lépben, a szívben és az izomban nem. Az IGFBP-3 mRNS mennyisége minden vizsgált szervben növekedett, kivéve a vesét, ahol kismértéku csökkenést lehetett kimutatni. Az IGFBP-4 mRNS expresszió növekedett a májban, vesében, tüdoben és a bélben, de a lépben, szívben, izomban nem. A májban az IGFBP-1, -3 és -4 szekréció növekedett. A kezelt állatok szérumában az IGFBP-1, -3 és -4 csökkent rövid ideig tartó emelkedéssel megszakítva - majd ismét növekedett, elérve a kontroll szintet. A kezelést követoen neutrális pH értéken IGFBP-3 ellenes proteolítikus aktivitást nem tudtunk kimutatni. Következtetések: Az IGF-I és az IGFBP-1 és -4 katabolizmusban megfigyelt változásai korrelálnak az IL-6-nak primér májsejtkultúrákban ezen fehérjék bioszintézisére gyakorolt hatásával, míg neutrális IGFBP-3 proteáz aktivitást nem lehetett kimutatni. Az IGF-I és az IGFBP-k bioszintézisében bekövetkezett változások, melyeket in vivo modellünkben megfigyeltünk, korrelálnak in vitro megfigyeléseinkkel, de kutatási eredményeink alapján, a májon kívul más szervek is fontos szerepet játszhatnak az IGFBP-3 és -4 akut fázis válasz alatti bioszintézisében. Kulcsszavak: 3
Interleukin-6, inzulin-szeru növekedési faktor 1, inzulin-szeru növekedési faktor-köto fehérjék, IGFBP-3 proteáz, hepatociták, Kupffer sejtek, kokultúra, akut fázis válasz, máj, vese, tüdo, bél, lép, szív, izom
BEVEZETÉS Az inzulin-szeru növekedési faktorok (IGF-I, -II) egymáshoz hasonló szerkezetu polipeptidek, melyek szerepet játszanak a sejtnövekedés, sejtdifferenciálódás és a sejtanyagcsere szabályozásában és endokrin, autokrin és parakrin mehanizmusok szabályozása alatt állnak. Az inzulinszeru növekedési faktorok hat, egymáshoz hasonló szerkezetu kötofehérjéhez (IGFBP-1-tol - 6) kapcsolódnak nagy affinitással, melyek befolyásolják az inzulin-szeru növekedési faktorok muködését, szállító fehérjéik a keringésben, tárolóik különbözo szöveti részecskékben, gátolják az IGF hatását receptoraikhoz való kapcsolódásuk gátlásával vagy serkentik a mitogén választ a felhasználható növekedési faktorok forrásának biztosításával. A plazmában, az IGFBP-3, az IGF-I (vagy IGFII) és a sav függo alegység (ALS) egy nagy molekulasúlyú 150 kilodalton tömegu molekulakomplexet alkot. Ez a három alkotórészbol álló egység (150 kDa egység) köti a legtöbb keringo IGF-et, meghosszabbítja féléletidejüket és raktárként is szolgál. Ezen kívul az IGF-k kisebb, 30-40 kD tömegu, két alkotórészbol álló egységet is képesek létrehozni (kapcsolódva IGFBP-1, -2 és -4-el), melyek át tudnak haladni a kapillárisokon és serkentik az IGF szállítását a célszövetekhez. Felnott patkányokban a keringo IGF-k, az egyes IGFBP-k és az ALS fo forrása a máj. Patkány hepatocitákról bizonyították, hogy kiválasztanak IGFBP-1, -2 és -4-et, illetve ALS-t. IGFBP-3 expressziót azonban csak Kupffer sejtekben (Ks), endotel sejtekben (Es) és Ito-sejtekben (HSC) találtak. Az IGF-I legnagyobb részét a hepatociták termelik. Kritikus állapotú betegekben traumát, kiterjedt sebészi beavatkozást és égési sérülést követoen, krónikus fertozésben és gyulladásos betegségben szenvedokben jelentos anyagcsereváltozások mennek végbe, melyek testsúlycsökkenéssel, negatív nitrogén egyensúllyal és jelentos izomsorvadással járnak, melyet nem lehet csupán a csökkent kalóriabevitellel magyarázni. Számos megfigyelés támasztja alá akut fázis citokinek - interleukin (IL)-6, IL-1 és tumor nekrózis faktor ? (TNF? ) - szerepét traumás és krónikus betegségek bizonyos anyagcsere változásainak lehetséges mediátoraiként. Ezek a katabolikus állapotok összefüggésben állnak az IGF rendszer számos összetevojének változásaival. A legállandobb változások az IGF-I szintjének csökkenése és az IGFBP-1 szintjének emelkedése a plazmában. Nemrég közölt tanulmányok bizonyították az IGFBP-4 emelkedését a plazmában és a májban számos katabolikus állapotban. Ezen állapotok kísérletes modelljeiben (pl. lipopoliszacharid (LPS) injekciója, égési sérülés patkányokban) a plazma IGF szintjének csökkenése és az IGFBP-1 szint növekedése szorosan összefüggést mutatott a máj 4
megváltozott IGF-I és IGFBP-1 fehérje tartalmával és mRNS expressziójával. Ezen kívul hasonló IGF-I és IGFBP-1 szérum koncentrációt lehetett megfigyelni rekombináns IL-1 és TNF? ?kontroll állatoknak való adását követoen, míg neutralizáló TNF? antitestek és IL-1 receptor antagonisták gyengítették az IGF-I és IGFBP-1 szérum koncentrációinak szepszis okozta változásait. Ezidáig akut fázis mediátorok direkt hatását az IGF-I és az IGFBP-k bioszintézisére csak HepG2 sejteken és primér patkány hepatocita kultúrákon vizsgálták. Ezen tanulmányok bizonyították, hogy akut fázis mediátorok gátolják a növekedési hormon (GH) stimulálta IGF-I és IGFBP-1 szintézist. Kritikus állapotú betegek plazma IGFBP-3 szintje - egyes tanulmányok szerint - IGFBP-3 specifikus proteázok hatására csökkent, míg tudomásunk szerint az IGFBP-3 expresszióját betegek májában vagy más szerveiben ezidáig nem vizsgálták. Katabolikus állapotok in vivo kísérletes modelljeiben az IGFBP-3 plazma koncentrációival kapcsolatban ellentmondásosak az eredmények. Escherichia coli-ból származó LPS-sel injektált patkányokban a plazma IGFBP-3 szintje nem változott, míg ebben az állatmodellben az IGFBP-3 fehérje mennyisége növekedett a májban. Egy másik modellben, patkányok égési sérülését követoen a plazma IGFBP-3 koncentrációja, csakúgy, mint az IGFBP-3 mRNS a májban, csökkent. Míg mind az LPS injekció, mind az égési sérülés csökkent IGF-I és növekedett IGFBP-1 plazma koncentrációt okozott, a két modellben az IGFBP-3 különbözo szabályozásának oka ismeretlen.
CÉLKITUZÉSEK
A. in vitro az IL-6, IL-1? és a TNF? direkt hatásának vizsgálata az IGF-I, IGFBP-1, -3 és -4 bioszintézisére primér patkány hepatocita, Ks és ezen két májsejt kokultúrájában.
B. in vivo intramuszkuláris terpentin olaj injekció által kiváltott akut fázis válasz során patkányban az IGF-I és IGFBP-1, -3 és -4 génexpresszióra gyakorolt hatások részletes elemzése a májban, vesében, tüdoben, bélben, lépben, szívben és izomban.
MÓDSZEREK Patkány májsejtek izo lálása és tenyésztése Izolált májsejtek citokin kezelése Akut fázis reakció indukálása 5
IGF-I meghatározása RNS izolálása és Northern blot analízis Májszövet homogenizátum készítése fehérje vizsgálatokhoz IGFBP detektálása Ligand blot-tal Sejtmentes IGFBP-3 proteáz assay Statisztikai analízis
DISZKUSSZIÓ Számos megfigyelés támasztja alá akut fázis citokinek, mint IL-6, IL1 és TNF? ? szerepét az IGF rendszer több komponensének változásaiban katabolikus állapotokban emberben és állatmodellekben. A legállandóbb változások az IGF-I szintjének csökkenése és az IGFBP-1 szintjének emelkedése a plazmában, mely ezen komponensek megváltozott májbeli génexpressziójának a következménye. In vitro vizsgálatainkban kimutattuk, hogy IL-6, IL-1? és TNF? ?szerepet játszanak az IGF-I és IGFBP-k bioszintézisének szabályozásában primér májsejtkultúrákban. Ezen citokinek serkento hatást fejtettek ki az IGFBP-1, -3 és -4 expressziójára, míg az IGF-I-et gátolták. In vivo vizsgálataink megerosítették azokat a korábbi in vivo megfigyeléseket, melyek katabolikus állapotokban - mint szepszis, endotoxémia vagy citokin indukálta gyulladás - csökkentette a plazma IGF-I szintjét egerekben, patkányokban, kutyákban, birkákban és emberben is. A májat tartják a keringo IGF-ek legfobb forrásának és korábbi tanulmányok bizonyították, hogy katabolikus gyulladásos állapotokban az IGF-I májbeli szintézise és szekréciója csökkent. A kritikus állapotú betegek állatmodelljeiben észlelt csökkent plazma IGF-I szintek kapcsolatban állhatnak akut fázis mediátorok májsejtek IGF-I szintézisére gyakorolt direkt hatásával, mivel az IL-6 gátló hatást fejtett ki hepatociták, Ks-k illetve ezen májsejtek kokulturájának IGF-I mRNS expressziójára. Ezen eredmények összhangban vannak azon korábbi tanulmányokkal, melyekben akut fázis mediátorok gátolták a GH indukálta IGF-I szintézist primér patkány májsejtkultúrákban. Nemrég közölt tanulmányokban az IGFBP-1 és -4 emelkedését mutatták ki a plazmában és a májban is. Vizsgálataink kiteljesítik ezeket a megfigyeléseket és lehetséges, hogy legalább részben, ezen citokinek in vivo direkt, a hepatocitákra (melyek fo forrásai az IGFBP1 és -4-nek a májban) gyakorolt hatása szerepet játszik az IGFBP-1, -4 emelkedésében a plazmában és a májban. In vivo modellünkben, intramuszkuláris terpentin olaj injekció által kiváltott akut fázis válasz hatását vizsgáltuk az IGF-I és az IGFBP-k szabályozására patkányban. Vizsgálati eredményeink alapján akut fázis mediátorok szerepet játszanak az IGF-I és IGFBP-k bioszintézisének szabályozásában. Intramuszkuláris terpentin olaj injekció szervspecifikus serkento hatást fejtett ki az IGFBP-1, -3 és -4 génexpressziójára, míg az IGF-I génexpresszióját gátolta.
6
A keringo IGF-k fo forrása a máj, korábbi tanulmányok bizonyították, hogy az IGF-I májbeli szintézise és szekréciója csökkent katabolikus gyulladásos állapotokban. A csökkent IGF-I plazma szintek, melyeket kritikus állapotú betegek állatmodelljeiben figyeltek meg összefüggésben állhatnak az IGF-I májsejtekben csökkent génexpressziójával, mivel intramuszkuláris terpentin olaj injekció gátló hatást fejtett ki az IGF-I mRNS expressziójára a májban. Intramuszkuláris terpentin olaj injekciót követoen csökkent az IGF-I génexpressziója a lépben is és egy kisebb csökkenést lehetett megfigyelni az izomban és a szívben is. Ezek az eredmények összhangban vannak azon korábbi tanulmányok eredményeivel, melyekben különbözo katabolikus gyulladásos állapotokban csökkent az IGF-I mRNS expresszió a vázizomzatban. Az IGF-I fontos anabolikus hatást gyakorol a vázizomzatra, az IGF-I génexpressziójának csökkenése felelos lehet, legalábbis részben, a károsodott izomfehérje egyensúlyért és a ne gatív nitrogén egyensúlyért katabolikus állapotokban. Nemrég közölt tanulmányok bizonyították IGFBP-1 és -4 emelkedését a plazmában és a májban számos katabolikus állapotban és in vitro tanulmányaink kiteljesítették ezeket a megfigyeléseket, azt sugallva, hogy akut fázis mediátorok in vivo hatásának legalábbis egy része direkt hatás a hepatociták szintjén, melyek a fo forrásai az IGFBP-1 és -4-nek a májban. Az IGFBP-1-et illetoen in vivo adataink alátámasztják in vitro megfigyeléseinket, mert az IGFBP-1 mRNS expressziójának jelentos emelkedését figyeltük meg a májban intramuszkuláris terpentin olaj injekciót követoen patkányokban és más szervek közül csak egy kisebb mértéku mRNS expresszió emelkedést a vesében. Mitöbb, nem tudtunk kimutatni IGFBP-1 mRNS expressziót vagy az mRNS expresszió indukcióját a tüdoben, a vékony- és vastagbélben, a lépben, a szívben és az izomban a kezelést követoen, mely megerosíti azokat a korábbi in vivo megfigyeléseket, hogy ezekben a szervekben nincs, vagy alig kimutatható az IGFBP-1 génexpresszió, és megerosíti az IGFBP-1 bioszintézisének szabályozásában az IGFBP-1 májbeli génexpressziójának fontosságát úgy egészséges, mint katabolikus állapotokban. Ami az IGFBP-4-et illeti, in vivo eredményeink megerosítik in vitro eredményeinket, mivel az IGFBP-4 mRNS májbeli expressziójának jelentos növekedését észleltük, de a vese, tüdo, vékony és vastagbél IGFBP-4 mRNS expressziója felhívja a figyelmet az IGFBP-4 bioszintézisének szabályozásában akut fázis válasz során májon kívuli szervek fontosságára is. Kritikus állapotú betegekben IGFBP-3 specifikus proteázok hatására csökken a plazma IGFBP-3 szintje, míg a nem betegek IGFBP-3 expresszióját a májban vagy más szervekben ezidáig, ismereteink szerint, nem vizsgálták. Éppen ezért, elméleti marad a kérdés, hogy az IGFBP-3 csökkent plazma koncentrációja emelkedett proteolízis, vagy megváltozott szervspecifikus IGFBP-3 génexpresszió következménye-e. Katabolizmust modellezo állatkísérletekben, a plazma IGFBP-3 koncentrációjával kapcsolatosan ellentétes tanulmányok kerültek napvilágra. Patkányokban, melyekbe Escherichia coli-ból származó LPS-t 7
injektáltak az IGFBP-3 plazma szintje nem változott, míg ebben az állatmodellben az IGFBP-3 fehérje mennyisége emelkedett a májban. Ezzel ellentétben, égési sérülés modellben, patkányokban, az IGFBP-3 plazma koncentrációja és az IGFBP-3 mRNS mennnyisége is csökkent a májban. A két modell közötti különbség egyik magyarázata lehet az eloidézett katabolizmus súlyosságában való különbség, de az IGFBP-3 mRNS expresszió sajátos ido kinetikája akut fázis válasz során a májban és más szervekben, melyet saját modellünkben bemutatunk és késobb részletesen ismertetünk, szintén a más katabolikus modellekben az IGFBP-3 plazma koncentrációiban és a májbeli IGFBP-3 génexpresszióban leírt különbségek magyarázatául szolgálhat. In vivo modellünkben, intramuszkuláris terpentin olaj injekció által kiváltott akut fázis válasz során patkányban, vizsgáltuk az IGFBP-3 génexpressziójának szabályozását a májon kívul más szervekben is. Eredményeink arra utalnak, hogy legalábbis az in vivo hatások egy része az akut fázis mediátorok nem parenhimás májsejteken keresztüli hatása során jön létre, mivel intramuszkuláris terpentin olaj injekció jelentosen stimulálta az IGFBP-3 mRNS expresszióját a májban, de minden vizsgált szervben is, kivéve a vesét, ahol gátlást lehetett megfigyelni. Különbözo szervek megnövekedett IGFBP-3 génexpressziója, mely jelentos és összehasonlítható mértéku volt a májéval, ugyan azt az ido kinetikát mutatta - maximumuk 4h- val a kezelést követoen volt - mint a májban. Mitöbb, az IGFBP-3 mRNS expressziójának növekedése a tüdoben, a vékony- és vastagbélben, a lépben, a szívben és az izomban, tekintettel ezen szervek viszonylagosan nagy összmennyiségére, utalhat az IGFBP-3 bioszintézisében betöltött fontosságukra akut fázis válasz során, de valódi jelentoségüket nem lehet pontosan meghatározni kísérleteink alapján, mivel a kérdés hiteles mennyiségi analízise nem kivitelezheto. Az IGFBP-3 mRNS szintjének jelentos csökkenése a kezelést követoen 4h- val kezdodött a különbözo szervekben és 12h-val a kezelést követoen érte el minimumát, mely alátámasztja a szérum IGFBP csökkenésének a szintézis csökkent volta miatti elméletét, melyet késobb részletezünk. Szignifikáns IGFBP-3 proteolízist mutattak ki számos katabolikus állapotban lévo beteg szérumában, de in vitro vizsgálataink során májsejtek kondicionált médiumában nem tudtunk kimutatni neutrális IGFBP-3 proteáz aktivitást és a kokultúrák akut fázis mediátorokkal való kezelése sem indukálta neutrális IGFBP-3 proteáz elválasztását. Mitöbb, in vitro vizsgálataink során nem tudtuk a rhIGFBP-3 fragmentálódását kimutatni neutrális pH-n sem a kontroll, sem intramuszkuláris terpentin olaj injekció adását követoen a kezelt állatok szérumában. Ezen adatok azt sugallják, hogy katabolikus állapotokkal járó betegségekben szenvedok szérumában kimutatott IGFBP-3 proteázok a májon kívüli szervekbol származhatnak, vagy mivel a májsejtekbol származó kondicionált médiumok pH-jának savas irányba történo változtatása az IGFBP proteázok aktiválásához vezetett in vitro vizsgálatainkban, lehet, hogy egy savas pH-jú mikrokörnyezet - például a sérülés közelében - szerepet játszik az IGFBP-3 biológiai hatásosságának szabályozásában. 8
A kezelt állatok szérumában az IGFBP-1, -3 és -4 már 30 perccel a terpentin olaj injekció adását követoen csökkenni kezdett, és a minimumát a kezelést követo 1-2 h között érte el, melyet az IGFBP-1, -3 és -4 rövid emelkedése követett 4-6h között, majd egy jelentos csökkenés után, mely legalacsonyabb a kezelést 12h-t követoen volt, fokozatosan emelkedett és elérte a kontroll szintet. Az IGFBP-k csökkenése a szérumban lehet a clearance megnövekedett volta, vagy a szintézis csökkenésének következménye. In vivo tanulmányunkban azonban nem tudtunk IGFBP-3 proteolízist kimutatni intramuszkuláris terpentin olaj injekció adását követoen patkányokban, mitöbb, az IGFBP-k elso emelkedése a szérumban együtt járt a májban és más szervekben az IGFBP-k mRNS szintézisének emelkedésével. A fenti adatokra alapozva a plazma IGFBP-k szintjének intramuszkuláris terpentin olaj injekciót követoen kialakuló változásai a következoképpen jöhetnek létre. Az IGF-k két alkotórészbol álló egységet alkothatnak az IGFBP-kel, melyek kis molekulatömegük miatt gyo rsan eltávoznak a keringésbol, a plazma IGFBP-k csökkenéséhez vezetve. (Hasonló mechanizmust feltételezett Lang és munkacsoportja égési sérülés modellükben, ahol az ALS expressziójának igen jelentos májbeli csökkenését illetve a plazma ALS csökkenését észlelték, melynek okaként a két összetevobol álló egység képzodését feltételezték.) Ugyanebben az idoben az IGFBP-k génexpressziójának kompenzatórikus emelkedése kezdodik szervfüggo módon, mely túlszárnyalja az IGFBP-k szérumbeli clearance-t. Ez az IGFBP-k gyors és rövid génexpressziója, így a szérumban való jelenlétük a folyamatot követoen ismét gyorsan csökken. Amint lezajlik az akut fázis válasz, az IGFBP-k keringésbol való clearancee lelassul, és az IGFBP-k megnövekedett génexpressziója következtében a szérum IGFBP-k ugyanazt a mintát mutatják, mint a kontroll. Összefoglalva, jelen adataink alátámasztják az akut fázis mediátorok fontos szerepét az IGF-I és IGFBP-k bioszintézisének szabályozásában a májban és felhívja a figyelmet az IGFBP-3 és kisebb mértékben az IGFBP4 megváltozott génexpressziójára akut fázis válasz során májon kívüli szervekben is. Intramuszkuláris terpentin olaj injekció patkányokban növelte az IGFBP-1, -3 és -4 bioszintézisét, míg az IGF-I-é csökkent. Az IGF-I és IGFBP-k termelésének szabályozása akut fázis válasz során a májban és más szervekben fontos szerepet játszhat az IGF-I biológiai felhasználhatóságának és biológiai hatásainak szabályozásában katabolikus állapotokban.
TÉZISEK
9
1. Hepatocitákban, Kupffer sejtekben (Ks) és hepatociták és Ks-k kokultúrájában az IL-6 dózisfüggoen csökkentette az IGF-I bioszintézisét. 2. Az IL-6 stimulálta az IGFBP-1 és -4 mRNS expresszióját és fehérje szekrécióját hepatocitákban és hepatociták és Ks-k kokultúrájában. 3. Az IL-6 stimulálta az IGFBP-3 mRNS expresszióját és fehérje szekrécióját Ks-ben és hepatociták és Ks-k kokultúrájában. 4. Az IL-1? ?és a TNF? szerepet játszik az IGF-I és az IGFBP-1, -3 és -4 bioszintézisének szabályozásában primér hepatocita, Ks és hepatocita és Ks kokultúrákban, hasonló módon, mint az IL-6, de hatásuk kevésbé jelentos. 5. Neutrális pH-n IGFBP-3 ellenes proteolítikus aktivitást nem tudtunk kimutatni az IL-6, IL-1? és TNF? -val kezelt kokultúrák mediumaiban. 6. Terpentin olaj intramuszkuláris injekciója csökkentette az IGF-I génexpresszióját a májban, lépben és kisebb csökkenés megfigyelheto volt az izomban és a szívben is, de a vesében, tüdoben és a bélben nem. 7. Terpentin olaj intramuszkuláris injekciója növelte az IGFBP-1 transzkriptek mennyiségét a májban és a vesében, de a tüdoben, bélben, lépben, szívben és izomban nem. 8. Terpentin olaj intramuszkuláris injekciója növelte az IGFBP-3 mRNS expresszióját minden szervben, kivéve a vesét, ahol csökkentette. 9. Terpentin olaj intramuszkuláris injekciója növelte az IGFBP-4 mRNS expresszióját a májban, vesében, tüdoben és a bélben, de a lépben, szívben és izomban nem. 10. Terpentin olaj intramuszkuláris injekció növelte az IGFBP-1, -3 és -4 fehérje szekréciót a májban. 11. Terpentin olaj intramuszkuláris injekciója csökkentette az IGFBP-1, -3 és -4 mennyiségét (egy rövid emelkedéssel megszakítva) majd ismét elérte a kontroll szintet. 12. Terpentin olaj intramuszkuláris injekcióját követoen, neutrális pH-n, IGFBP3 ellenes proteolítikus aktivitást nem lehetett kimutatni. PUBLIKÁCIÓK JEGYZÉKE
10
Közlemények:
1.
A. Lelbach, J-G. Scharf, G. Ramadori: Regulation of insulin- like growth factor-I and of insulin- like growth factor binding protein-1, -3 and -4 in cocultures of rat hepatocytes and Kupffer cells by interleukin-6 (Journal of Hepatology, 35 (2001) 558-567)
2.
Lelbach Á, Muzes Gy, Fehér J: A tumoros cachexia molekuláris háttere (Orvosi Hetilap, 46 (2004) 2313-2360)
3.
Lelbach Á, Székács B: A citokinek jelentosége az öregedés molekulárbiológiájában (Családorvosi Fórum, 9 (2004) 2-6)
4.
A. Lelbach, Gy. Muzes, J. Fehér: The insulin- like growth factor system: IGFs, IGF-binding proteins and IGFBP-proteases (Acta Physiol Hung. 92 (2005) 97-107)
5.
A. Lelbach, Gy. Muzes, J. Fehér: Current perspectives on catabolic mediators of cancer cachexia (Medical Science Monitor, 2005, nyomdában)
6.
A. Lelbach, K. Tron, R. Novosyadlyy, G. Ramadori, J-G. Scharf: Tissuespecific expression of IGF-I, IGFBP-1, -3 and -4 during acute phase response induced by turpentine oil injection in rats (Journal of Hepatology, közlés alatt)
7. A. Lelbach, Gy. Muzes, J. Fehér: Az inzulin-szeru növekedési faktorok és terápiás alkalmazásuk lehetoségei (Orvosi Hetilap, közlés alatt)
8. Lelbach Á, Székács B, Fehér J: Az öregedés molekulárbiológiája (Orvosi Hetilap, közlés alatt)
Tankönyv fejezetek:
9.
Geriátria (egyetemi tankönyv): Az öregedés biológiai és élettani vonatkozásai (társszerzo: Székács B, 2005)
10. Geriátria (egyetemi tankönyv): A kötoszövet és támasztó szervrendszer fiziológiás öregedése (társszerzo: Székács B, 2005) Eloadások:
11
11. Lelbach Á, Lugasi A, Blázovics A, Kéry Á, Fehér E, Fehér J: Speciesfüggo antioxidáns védelem emlosök jejunumában (A Magyar Belgyógyász Társaság XXXVI. Nagygyulése, 1996, Magyar Belorvosi Archívum, 1996; Supplementum 2:173.). 12. A. Lelbach: Introduction, methods and preliminary results in the examination of the interaction of hepatocytes and Kupffer cells during regulation of the synthesis of insulin- like growth factor binding protein-3 (IGFBP-3) (Graduiertenkolleg 335, 2nd Workshop, Göttingen, Germany, 1999) 13. A. Lelbach: Modulation der hepatischen IGF-I und IGFBP – Expression durch proinflammatorische Zytokine (Symposium der Abteilung für Gastroenterologie und Endokrinologie der Georg-August Universität Göttingen, Hahnenklee, Germany, 2000) 14. A. Lelbach: Modulation der Biosynthese der hepatischen IGF System Komponenten durch proinflammatorische Zytokine in primären kultivierten Leberzellen der Ratte (Symposium der Abteilung für Gastroenterologie und Endokrinologie der Georg-August Universität Göttingen, Hahnenklee, Germany, 2001) 15. A. Lelbach, J.G. Scharf, G. Ramadori, J. Feher: Modulation of the Hepatic Expression of IGF System Components by Inflammatory Cytokines (33rd Annual Scientific Meeting of the Hungarian Medical Association of America, Sarasota, U.S.A., 2001) 16. A. Lelbach: The IGF system and the role of proimflamatory cytokines in the development of catabolism. (International Medical Association for Experimental and Clinical Research – IV. Annual Meeting, Sümeg, Hungary, 2003).
Poszterek:
17. A. Lelbach, Z. Bansagi, T. Zagoni, M. Petri, A. Somogyi: Use of percutan gastrostomic drain in benign pyloric stenosis syndrome (40th Annual Meeting of the Hungarian Society of Gastroenterology, Balatonaliga, Hungary, 1998) 18. A Lugasi, A Lelbach, A Blazovics, A Kery, E Dworschak, J Feher: In vitro and in vivo antioxidant activity of natural flavonoids and polyphenols from Sempervivum tectorum (Cholestatic liver disease: Molecular biology, clinic and therapy Falk Symposium, Bratislava, Slovakia, 1996) 19. A Lelbach, J-G Scharf, H Hartmann, G Ramadori: Interleukin (IL)-6 und 1ß? stimulieren die Biosynthese von IGF-Bindungsprotein-1 und -4 (IGFBP-1 12
und -4) in primär-kultivierten Hepatozyten der Ratte (55. Tagung der Deutschen Gesellschaft für Verdauungs- und Stoffwechselkrankheiten mit Sektion für Gastroenterologische Endoskopie, Hamburg, Germany, 2000; Zeitschrift für Gastroenterologie 2000; 38: 746.) 20. A Lelbach, J-G Scharf, G Ramadori: Regulation of insulin- like growth factor-I and of insulin- like growth factor binding protein-1, -3 and -4 in cocultures of rat hepatocytes and Kupffer cells by interleukin-6 (Kongress der Deutschen Gesellschaft für Verdauungs- und Stoffwechselkrankheiten, Hannover, Germany, 2002) 21. A Lelbach, K Tron, R Novosyadlyy, G Ramadori, J-G Scharf: In vivo expression of IGF-I, IGFBP-1, -3 and -4 during acute phase response in rat liver; comparison with other organs (19. Jahrestagung der Deutschen Arbeitsgemeinschaft zum Studium der Leber, Berlin, Germany, 2003, Zeitschrift für Gastroenterologie 2003; 41: 109.) 22. T. Zagoni, Z Tarjan, A Lelbach: The role of virtual colonoscopy in the evaluation of IBD (12th United European Gastroenterology Week, Prague, Czech Republic, 2004, Gut and Endoscopy 2004
?
13
