Laboratorní příručka IP-2/A-01 Pracoviště
Oddělení lékařské mikrobiologie Centra imunologie a mikrobiologie Na kabátě 229 400 11 Ústí nad Labem
Vedoucí CIM: RNDr.Vlastimil Král, CSc. Tel: 477751800 Vedoucí OLM: MUDr.Miriam Králová
Tel: 477751831
1
Mikrobiologická Mykobakteriologická Mykologická Parazitologická vyšetření provádí: Laboratoř lékařské mikrobiologie tel.477751830 Laboratoř diagnostiky TBC tel.477751836
2
OBSAH 1. Úvod 2. Použité zkratk y 3. Příjem vzorků 4. Dostupnost služeb 5. Zvláštní požadavk y ( statim, ústní, opakovaná vyšetření) 6. Vyřizování stížností Nabídkový list laboratoře bakteriologie 7. Technika a náležitosti vyšetření primárních biologických vzorků na kultivaci a citlivost 7.1 HCD, DCD, liquor 7.2 Sputum 7.3 Dutiny orgánů 7.4 Liquor latexovou aglutinací 7.5 Stěry z kůže, spojivkový vak, zvukovod 7.6 Stolice 7.7 Stolice na průkaz virových antigenů 7.8 Moč a moč na SGA 7.9 Moč na průkaz antigenu Strep.pn. a Legionella pn. 01 7.10 Stěr z GUT 7.11 Stěr na průkaz m ykoplasmat 8 Odborná literatura k odběrům na K+C Nabídkový list laboratoře průkazu m ykobakterií v primárních biologick ých vzorcích 9 Technika a náležitosti odběru na BK 9.1 Sputum na BK
3
9.2 Aspirát z bronchu, BAL, 9.3 Lymfatická uzlina 9.4 Mozkomíšní mok 9.5 Menstruační krev 9.6 Stolice 9.7 Moč 9.8 Laryngeální výtěr 9.9 Stěr z píštěle, z rány 10 Poznámk y k vyšetřením na BK, doplňková vyšetření 11. Odborná literatura k vyšetřením na BK Nabídkový list laboratoře m ykologie 12. Technika odběru primárních biologick ých vzorků na mykologické vyšetření 12.1 HCD 12.2 DCD 12.3 Kožní povrch as detritu kožních adnexa 12.4 Oko, ucho 12.5 Tkáň, biopsie 12.6 Tekutý hnis, exsudáty 12.7 Sekret z UGT ♂ a ženy 12.8 Moč 13. Odborná literatura k myk ologick ým vyšetřením Nabídka úseku parazitologie 14 Technika a náležitosti k odběru na parazitologická vyšetření 14.1 Stolice na průkaz střevních parazitů 14.2 Stolice na přítomnost měňavek 14.3 Průkaz vajíček ektoparazitů
4
14.4 Průkaz vývojových stádií krevních parazitů – tlustá kapka 14.5 MOP – mikroskopick ý obraz poševní 14.6 Kultivace bičíkovců 15. Odborná literatura k vyšetření na parazity Literatura: Přecechtěl, F.: Lékařská mikrobiologie praktikum. SPN 1976 Jabor,A, Bébrová, E.: Laboratorní příručka OHS Kladno 1999 Miller, J.,M.: Specimen management in Clinical Mikrobiology. ASM Press USA 1999
1. Úvod Vážení klienti, kolegyně a kolegové, předkládáme Vám nabídku mikrobiologických (M), mykologických (My), parazitologických (P) vyšetření a služeb oddělení lékařské mikrobiologie (OLM) Centra imunologie a mikrobiologie Zdravotního ústavu se sídlem v Ústí nad Labem. Spektrem vyšetření a snahou o rozvoj oboru, které jsou založeny na aktuálních potřebách klinických oborů splňujeme požadavky na moderní laboratorní diagnostiku přenosných onemocnění. Laboratoře OLM se pravidelně účastní systémů externího hodnocení kvality na úrovni ČR. Kvalitní a včasný diagnostický postup však není jediným cílem týmu OLM CIM ZÚ Ústí nad Labem. Nedílnou součástí naší práce je účast na interpretaci výsledků pro vlastní klinickou diagnózu a konzultace. OLM spolupracuje s ostatními odděleními CIM ZÚ. Poskytujeme informace týkající se:
5
• • • • • •
správného odběru biologického materiálu výběru vhodných transportních souprav konzultace nových metod moderní bakteriologické diagnostiky sledujeme výskyt rezistence k antimikrobiálním a antimykobakteriálním látkám účastníme se akreditovaných programů dalšího vzdělávání v IPVZ Praha a NCO NZO Brno úzce spolupracujeme s orgány ochrany veřejného zdraví (KHS) a pomáháme spoluvytvářet podklady pro práci epidemiologů KHS Ústeckého kraje
Cílem našeho přístupu je snaha o kvalitní vyšetření biologického materiálu, snížení nákladů na vyšetření a úsilí o minimální zatížení vyšetřovaného člověka. Předkládaná nabídka vyšetření je periodicky aktualizována. Za veškeré připomínky a podněty týkající se naší práce předem děkujeme. Zveme rovněž na www.zuusti.cz. V Ústí nad Labem, srpen 2010
ing.Pavel Kutil ředitel pověřený řízením ZÚ se sídlem v Ústí nad Labem
Kontakty: MUDr.Miriam Králová MUDr.Dagmar Šrejberová Mgr. Romana Chrudimská Lenka Bednaříková
tel.: 477751831 tel.: 477751841 tel.: 477751808 tel.: 477751830
6
2. Použité zkratky AP CEM AT ATB BAL BK CIM DCD DDD DG GBS HCD CHT KHS LIS LV M MAC MOP MOTT OLM ěle OPP NRL OOVZ
Akreditační pracoviště Centra epidemiologie a mikrobiologie antituberkulotikum antibiotikum bronchoalveolární laváž bacil Kochův = průkaz Mycobacterium tuberculosis Centrum imunologie a mikrobiologie dolní cesty dýchací dezinfekce, dezinsekce, deratizace diagnóza streptokoky ze skupiny B horní cesty dýchací chemoterapeutikum Krajská hygienická stanice laboratorní informační systém laryngeální výtěr mikrobiologie komplex M.avium-intracellulare mikrobiální obraz poševní Mykobakteria jiná než tuberkulózní = podmíněně patogenní Oddělení lékařské mikrobiologie Oddělení přípravných provozů národní referenční laboratoř Orgán ochrany veřejného zdraví
7
P PCR SOP STD SZÚ ZP ZÚ
parazitologie polymerázová řetězcová reakce standardní operační postup sexuálně přenosná infekce Státní zdravotní ústav zdravotní pojišťovna Zdravotní ústav
Svoz primárních biologických vzorků pro OLM CIM je zajišťován vlastní svozovou službou, jejíž provoz je povolen OOVZ, a která dodržuje pravidla Evropské dohody o mezinárodní silniční přepravě nebezpečných věcí (ADR). Optimální trasa svozu je zajišťována pracovníky svozové služby. Je aktuálně upravována na základě požadavků zákazníků, kteří dostávají vizitky s kontaktem na oba řidiče svozu. Klienti mohou telefonicky přímo u řidičů objednat přepravu urgentního vzorku. Na pokyn indukujícího lékaře si nemocní zajišťují transport vzorků do laboratoře sami.
3. Příjem vzorků Příjem vzorků ze svozu a individuálně doručených vzorků probíhá v budově Zdravotního ústavu se sídlem v Ústí nad Labem v přízemí vpravo v místnosti označené jako „Centrální příjem biologického materiálu“ nebo ve 2. patře vpravo přímo na OLM. Za správné provedení odběru, řádné vyplnění žádanky a zabezpečení materiálu pro transport odpovídá odesílatel vzorku. Za zabezpečení materiálu během transportu odpovídá přepravce. Důvody pro odmítnutí biologického materiálu nebo požadavku o vyšetření v laboratoři: • žádanka s biologickým materiálem, na které chybí nebo jsou nečitelné základní údaje pro podklady k účtování se ZP (číslo pojištěnce, příjmení a jméno, kód zdravotní pojišťovny, ICZ odesílajícího lékaře nebo pracoviště, základní diagnóza) a tyto údaje není možné ihned doplnit na základě dotazu u klienta či
8
odesílajícího lékaře nebo obsahuje požadavky na vyšetření, které laboratoře OLM CIM ZÚ Ústí nad Labem neprovádějí • žádanka nebo odběrová nádobka jsou viditelně kontaminovány odebraným biologickým materiálem (nedokonale uzavřená nádobka, materiál vylitý) • biologický materiál, který nelze věrohodně identifikovat • biologický materiál doručen bez žádanky • odběrová souprava s biologickým materiálem, kde zjevně došlo k nedodržení časového faktoru k doručení, vzorek neodpovídá objemem požadovanému vyšetření, vzorek bez zajištění odpovídajících podmínek transportu apod. • biologický materiál v nesterilní odběrové soupravě D:06
4. Dostupnost služeb laboratoří OLM CIM – provozní doba pondělí až pátek 7:00 – 15:30 Oddělení lékařské mikrobiologie CIM sobota 7:00 – 09:00 Laboratoř bakteriologie OLM jindy: statimy aj. urgentní stavy dle epidemiologické situace v regionu na služ.telefon: 477751830 Příjem vzorků k laboratornímu vyšetření je prováděn do ukončení uvedené pracovní doby. Provoz OLM CIM je zajištěn také ve svátečních dnech obdobně jako o sobotách od 07:00 – 09:00, popř. na uvedeném služebním telefonu.
9
5. Zvláštní požadavky na vyšetření (statimové vzorky, ústní požadavky, dodatečná a opakovaná vyšetření) 5.1 Statimové vzorky Indikace akutních vyšetření je omezena pro případy hospitalizovaných nemocných v těžkém stavu, když by výsledek akutního vyšetření mohl bezprostředně ovlivnit péči o nemocného. Netýká se bakteriologických vyšetření, u nichž je materiál vždy zpracováván ihned po doručení do laboratoře. Kultivační nálezy podléhající hlášení, nálezy u vybraných diagnóz jsou telefonicky sdělovány odesílateli jako předběžný výsledek. Biologický materiál na akutní vyšetření musí být dodán s příslušnou dokumentací a označením „urgentní“ nebo „statim“ neprodleně po odběru do laboratoře, kde odborný pracovník provede vyšetření. Výsledky urgentních vyšetření se sdělují telefonicky a vydávají se v podobě výsledkového listu ihned po kontrole a podepsání odpovědným pracovníkem.
5.2 Ústní (např. telefonické) požadavky na vyšetření, dodatečná vyšetření Ze vzorků dodaných do laboratoře lze dodatečně, např. na základě telefonické konzultace a po následném objednání indukujícím lékařem, provádět další požadovaná vyšetření jen při dodržení následujících pravidel: Dodatečná vyšetření požadovaná akutně budou provedena neprodleně po telefonickém doobjednání. Jméno žadatele se zapíše do záznamového listu telefonického hlášení nebo do příslušné žádanky o předchozí vyšetření. Pracovník, přijímající takový požadavek, stvrzuje písemně podpisem doobjednání vyšetření. Dodatečná vyšetření nepožadovaná akutně se provedou až po doručení dodatečné žádanky do laboratoře.
10
Možnost dodatečného vyšetření závisí na množství uchovaného vzorku a specificitě požadovaného vyšetření. O stanovení citlivosti na ATB je možno požádat v průběhu kultivace vzorku.
5.3 Opakovaná vyšetření Pokud při transportu nebo manipulaci se vzorkem dojde ke znehodnocení vzorku, odpovědní pracovníci laboratoře informují indukujícího lékaře, případně telefonicky dohodnou nový odběr biologického vzorku. Pokud se vyskytnou v preanalytické fázi vyšetřením vzorku nějaké důvody, které by mohly limitovat výsledek, indukující lékař o tom obdrží informaci telefonicky popř. písemně ve formě komentáře k výsledku vyšetření. D:11
6. Vyřizování stížností Pokud se vyskytnou výhrady k odborné činnosti laboratoří CIM OLM ZÚ nebo vzniknou-li neshody, zda laboratoř pracuje v souladu s uváděnou politikou jakosti, může oprávněný klient podat písemnou stížnost (do14 dnů od obdržení výsledku): příjemcem je vždy vedoucí CIM OLM je proveden písemný záznam o stížnosti a nápravná doporučená opatření stěžovatel je do 30 dnů písemně informován vedoucím centra o vyřízení stížnosti spolu s návrhy na řešení. E:03 Literatura: Přecechtěl, F.: Lékařská mikrobiologie praktikum. SPN 1976 Jabor,A, Bébrová, E.: Laboratorní příručka OHS Kladno 1999 Miller, J.,M.: Specimen management in Clinical Mikrobiology. ASM Press USA 1999 th Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8 Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Votava, M.: Lékařská mikrobiologie obecná, Neptun Brno, 2001, ISBN 80-902896-2-2, Str. 215-232
11
Nabídkový list laboratoř bakteriologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Doporučená odběrová souprava
Teplota úschovy do transportu
výtěr z horních tampon cest dýchacích v Amiesově (krk, nos, tonzily) transportním médiu sterilní sputum, BAL nádobka se širokým hrdlem sterilní likvor zkumavka
pokojová T
likvor na průkaz bakteriálních antigenů latexovou aglutinací
Pokojová T
sterilní zkumavka – 2 ml
2-8 °C
Pokojová T
Max. doba transportu do lab. 24 hod.
2 hod. 24 hod. co nejrychleji (2 hod.)
co nejrychleji (2 hod.)
12
Předběžný výsledek/ doba odezvy
Poznámka
Provádí se
24 hod./ podezření po – so v závislosti na na záškrt, černý nálezu 48-72 hod. kašel konzultovat 24 hod./ telefonicky po – so v závislosti na nálezu 48-72 hod. mikroskopie za 2 hod., kultivace za 24 hod./ v závislosti na nálezu 48-72 hod. výsledek přijetí laboratoře
denně
v den cílené vyšetření po – so do dle klinického stavu (rozhoduje odebrané množství)
Nabídkový list laboratoř bakteriologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku hnisy punktáty aspiráty plodová voda, stěry z oka, ucha, ran, kůže výtěry sekční materiál aj. na aerobní vyšetření stolice – aerobní vyšetření a průkaz Campylobacter jejuni
Doporučená odběrová souprava tekutý materiál, sterilní stříkačka, sterilní zkumavka stěr–tampon v Amiesově event.Stuartově transportním médiu
Teplota úschovy do transportu 2-8 °C
Max. doba transportu do lab. co nejrychleji (2 hod.)
pokojová T
Předběžný výsledek/ doba odezvy mikroskopie v den přijetí do laboratoře, aerobní kultivace za 24 hod./ v závislosti na nálezu 48-72 hod.
Poznámka nutno zabránit přístupu vzduchu (jednorázová stříkačka s chráněným konusem)
Provádí se denně
72 hodin tampon v Amiesově transportním médiu
Stolice Suchý vatový Průkaz adenovirů tampon a rotavirů Příp.odběrová souprava na parazitologii
pokojová T
24 hod.
48 hod./ v závislosti na nálezu 72 hod., pozitivní nález sdělen ihned telefonicky
Pokojová T Chladnicová T
Ihned
20 minut doručení materiálu
48 hod.
13
podezření na po – so choleru konzultovat telefonicky, návraty z ciziny vyznačte na žádance od po – so biol.
Nabídkový list laboratoř bakteriologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Doporučená odběrová souprava
Teplota úschovy do transportu
Max. doba Předběžný transportu výsledek/ do lab. doba odezvy pokojová T Do 24 hod v závislosti ihned na nálezu do 24 h.4°C -20°C. 48-96 hod.
stolice – anaerobní vyšetření
tampon v Amiesově transportním médiu, stolice v odběrové nádobce s lopatičkou (na parazity), min. 5 g
kultivace výtěru z genitourinárního traktu (vagina, vulva, cervix, mužská a ženská uretra)
tampon v Amiesově transportním médiu, podložní sklo se zábrusem
pokojová T
3 h.– 24 hod.
výtěr z orofaryngu nebo rekta na kultivaci N. gonorrhoeae
tampon v Amiesově transportním médiu
pokojová T
3 h.– 24 hod.
14
24 /dle nálezu 72 hod GO 24-72 hod. ihned telefonicky 24 / 72 hod., GO ihned telefonicky
Poznámka
cílené vyšetření dle klinického stavu
Provádí se po – so
včetně po – so N.gonorrhoeae, anaerobů, sklo na požádání dodáme po – so
Nabídkový list laboratoř bakteriologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku moč – kvantitativní vyšetření
moč novorozenců na průkaz antigenu Streptococcus agalactiae Moč: průkaz přítomnosti antigenu Legiolella pneum. Streptococcus pneumoniae jiné tělní tekutiny dialyzační roztoky
Doporučená odběrová souprava sterilní nádobka se širokým hrdlem, sterilní zkumavka
Teplota Max. doba Předběžný úschovy do transportu výsledek/ transportu do lab. doba odezvy co 24 hod., 2-8 °C nejrychleji v závislosti (2 hod.) na nálezu 48-72 hod.
Poznámka
Provádí se
pro kvantitativní po – so vyšetření moče nejsou vhodné komerční odběrové soupravy (Uricult aj.)
sterilní nádobka se 2-8 °C širokým hrdlem, sterilní zkumavka
co nejrychleji (2 hod.)
výsledek 2448 hod.
žádost o vyšetření vyznačte na žádance
po – so
sterilní nádobka se 2-8°C širokým hrdlem, sterilní zkumavka
co nejrychleji
výsledek v den přijetí do laboratoře
žádost o vyšetření vyznačte na žádance
po – pá
aerobní kultivace pokojová T anaerobní kultivace aerobní kultivace po podání ATB anaerobní
co nejrychleji (max. 24 hod.)
aerobní kultivace v závislosti na nálezu za 24 – 72 hod. anaerobní – 5 dní
15
denně
Užívané zkratky výkonů a postupů: OS: TS: PT: CHT:
odběrová souprava transportní souprava pokojová teplota = + 20°C – + 25°C chladnicová teplota = obvykle +4°C - +8°C
7.Technika a náležitosti odběru biologických materiálů pro vyšetření na kultivaci a citlivost Biologické materiály ke kultivačnímu průkazu mikroorganismů na kultivaci a citlivost (= K+C) se odbírají : • do sterilních odběrových souprav • v dostatečném množství • z místa předpokládaného výskytu biologického původce • obvykle před zahájením antibiotické terapie • v případě kontrolního bakteriologického vyšetření se druh terapie a její délka vyznačí v příslušné kolonce na průvodním listu k požadovanému vyšetření • odebrané vzorky se označí identifikačními štítky • vyplní se průvodní list = žádanka o vyšetření • zajistí se rychlý transport do laboratoře
16
Typ vyšetření: 7.1 Stěr z horních cest dýchacích = nos, krk Nemocný je odebírající osobou poučen o smyslu odběru, jeho technice a délce laboratorního vyšetření. Vzorek: stěr, výtěr OS/TS: sterilní vatový tampón na špejli/ Amiesovo transportní médium Odběr: setřít tampónem postižené místo a tento zasunout do plastového sáčku popř. do PVC pouzdra s transportním médiem Transport: teplota / čas = PT/max. 24 hodin
7.2 Sputum, bronchoalveolární laváž Nemocný je odebírající osobou poučen o smyslu odběru, jeho technice a délce laboratorního vyšetření. Vzorek: ranní sputum před provedením osobní hygieny , aspirát biol. materiálu při bronchoskopii OS/TS: sterilní sputovka z plastu, sterilní zkumavka Odběr: sám nemocný po instrukci nebo instrumentálně při výkonu lékařem Transport: ChT/ihned popř. max. do 24 hodin
7.3 Biologické materiály z dutin orgánů – exsudáty, sekrety, tekuté hnisy, mozkomíšní mok (kultivačně)
17
Lékař odebere biologický materiál do sterilní nádoby z plastu nebo do sterilní zkumavky a vyplní ji celou biologickým materiálem příp. do injekční stříkačky a nasadí na jehlu kónus jehly popř.sterilní gumovou zátku • Pozn: laboratoř na vyžádání odběrovou soupravu dodá přes svozovou službu. Na průvodním listě vyznačí, zda požaduje i kultivaci na průkaz anaerobních mikroorganismů. Vzorek: tekutý biologický materiál OS/TS: sterilní zkumavka, jednorázová stříkačka s konusem Odběr: lékař specialista sterilním instrumentariem Transport: PT/ ihned popř. max. do 24 hod.
7.4 Mozkomíšní mok (přímý průkaz bakteriálních antigenů) latexovou aglutinací Pro vlastní odběr mozkomíšního moku platí stejné podmínky jako pro kultivaci moku. Vzorek: tekutý biologický materiál OS/TS: sterilní zkumavka, jednorázová stříkačka s konusem Odběr: lékař specialista sterilním instrumentariem Transport: PT/ ihned popř. max. do 2 hod. po odběru
7.5 Stěry – z kůže, spojivkového vaku, ze zevního zvukovodu, Vzorek: stěr z místa výskytu původce zánětu, afektu OS/TS: sterilní vatový tampón na špejli/ Amiesovo transportní médium Odběr: setřít tampónem postižené místo a tento zasunout do PVC pouzdra s transportním médiem
18
Transport: PT/ do 24 hod.
7.6 Stolice – aerobní a mikroaerofilní kultivace (Campylobacter spp.) Vzorek: stolice OS/TS: sterilní odběrový tampon/ Amiesovo transportní medium Odběr: komerční sterilní tampon na plastové tyčince; odebírající zavede tampon do rekta max. 2 cm hluboko a odebraný vzorek zasune do transportního media v PVC pouzdře Transport: PT/ChT / do 24 hod. • Pozn: kultivace prokáže bakteriální původce průjmů, případnou serotypizaci poddruhů EPEC apod. • Při návratu z exotických destinací prosíme o sdělení na průvodním listě – místo, trvání a charakter obtíží kvůli možnosti průkazu zde neobvyklých původců
7.7 Stolice – přímý průkaz antigenu adenovirů a rotavirů Vzorek: stolice velikosti hrášku OS/TS: sterilní odběrový tampon/ odběrovka z plastu na parazitologii Odběr: komerční sterilní tampon na plastové tyčince; odebírající zavede tampon do rekta max. 2 cm hluboko a lopatičkou odebraný vzorek zasune do transportního PVC pouzdra Transport: PT/ChT / ihned popř. v ChT do 48 hod.
7.8 Moč – kultivace + cílený průkaz Streptococcus agalactiae ( GBS)
19
Vzorek: 1) ranní střední proud moči 2) cévkovaná moč OS/TS: sterilní širokohrdlá odběrová nádoba z plastu; sterilní zkumavka Odběr: ad 1) po předchozím omytí zevního ústí uretry proudem pitné vody a za použití mýdla vymočit do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml ad) 2) aseptické zavedení sterilní cévky; odstříknutí první porce do odpadu a odběr středního proudu do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml Transport: ChT/ do 2 hod. od odběru • Pozn.: způsob odběru určí lékař dle diagnózy nemocného
7.9 Moč – cílený průkaz solubilního antigenu Streptococcus pneumoniae a Legionella pneumophilla O1 Vzorek: 1) ranní střední proud moči 2) cévkovaná moč OS/TS: sterilní širokohrdlá odběrová nádoba z plastu; sterilní zkumavka Odběr: ad 1) po předchozím omytí zevního ústí uretry proudem pitné vody a za použití mýdla vymočit do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml ad) 2) aseptické zavedení sterilní cévky; odstříknutí první porce do odpadu a odběr středního proudu do sterilní odběrové nádoby min. 5-10 ml Transport: ChT/ do 2 hod. od odběru • Pozn.: způsob odběru určí lékař dle diagnózy nemocného
20
7.10 Stěry z genitoureterálního traktu ♂+♀na K+C Vzorek: výtěr sterilním vatovým tampónem z místa předpokládané infekce OS/TS: sterilní odběrový tampon/ Amiesovo transportní medium Odběr: provádí lékař – specialista po lehkém stlačení vyšetřované oblasti GUT. Setře vytékající sekret sterilním tampónem (1-2 ks) Transport: PT/ ihned – max. 24 hod. • Pozn.: jeden tampón pro standardní kultivační vyšetření • jeden tampón pro mikroskopické vyšetření sekretu • u mužů ranní odběr sekretu před vymočením min. 3 hodiny • u obou pohlaví z rekta po zasunutí tampónu do oblasti max. 3 cm
7.11 Stěry z genitoureterálního traktu ♂+♀ pro stanovení přitomnosti Mykoplazmat Vzorek: výtěr = seškrab z uretry (♂) nebo cervixu (♀) provede ošetřující lékař OS/TS: brush tampón/ transportní médium R 1 Odběr: seškrab sliznice s detritem buněk a vytřepání biologického materiálu do média R1 Transport: PT/ do 5 hod. ChT/ 48 hod. • Pozn.: odběrové brush tampóny a médium R1 dodá na požádání OLM CIM ZÚ
21
8. Odborná literatura k odběrům biologických materiálů K+C Burkhardt, F. et al.: Mikrobiologische diagnostik, Gerg Thieme, Stuttgart SRN, 1992, ISBN 3-13-743601-X Str. 15-47 Duben, J. a kol.: Vyšetření při bakteriálních onemocněních, Avicenum Praha, 1986, 08-078-86 Miller, J.M.: Specimen Management in Clinical Mikrobiology, ASM USA, 1999, ISBN 1-55581-138-8, Str. 33-167 th Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8 Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Votava, M.: Lékařská mikrobiologie obecná, Neptun Brno, 2001, ISBN 80-902896-2-2, Str. 215-232
22
Nabídkový list laboratoř mykobakteriologie - Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Doporučená odběrová souprava
Teplota úschovy do transportu
Max. doba transportu do laborat.
Předběžný výsledek/ doba odezvy
Poznámka
Provádí se
Aspirát Punktát Hnis
sterilní nádobka se 2-8°C širokým hrdlem
2 hod. - 48 Mikroskopie Kultivaci hod. 24h v Bactec Kultivace až 9 vyznačte týdnů
po - pá
Sputum BAL
sterilní nádobka se 2-8°C širokým hrdlem
2 hod. - 48 Mikroskopie Kultivaci hod. 24h v Bactec Kultivace až 9 vyznačte týdnů
po – pá
Likvor
sterilní zkumavka
Pokojová teplota
ihned
Mikroskopie Kultivaci 24h v Bactec Kultivace až 9 vyznačte týdnů
po - pá
Tkáň
Sterilní nádobka
2-8°C
Do 48 hod.
Mikroskopie Kultivaci 24h v Bactec Kultivace až 9 vyznačte týdnů
po - pá
Moč
Sterilní nádobka
2-8°C
Do 48 hod.
Mikroskopie se neprovádí Vzorek 30 ml Kultivace až 9 týdnů
po - pá
23
Laryngeální 3 sondy na drátě= 2-8°C výtěr 1 vyš.=dodá ZÚ na Stěr z píštěle vyžádání
Do 48 hod.
Odběrovka parazitol.vyš.
Do 48 hod.
Stolice
pro 2-8°C
Mikroskopie se neprování Kultivace až 9 t. Mikroskopie se neprování Kultivace až 9 t.
Kultivaci v Bactec vyznačte
po - pá
Kultivaci v Bactec vyznačte Vzorek fazole
po - pá
vel.
9. Technika a náležitosti k odběru biologických materiálů pro vyšetření na mykobakteria (=BK) K odběrům biologických materiálů se používají doporučené sterilní odběrové komerční soupravy. Případně OLM CIM ZÚ dodá speciální odběrovou soupravu na telefonické vyžádání (= LV) 47 7751836. Transport vzorků k vyšetření zabezpečuje svozová služba ZÚ Ústí nad Labem tel:724 325 038; 602 215 986, a to dle pokynu a po schválení OOVZ. Induktor (= odesilatel) odebraného materiálu zajistí dokumentaci vzorku na průvodním listě k vyšetření. Doporučené odběrové soupravy jsou uvedeny v tabulce nabídky na mykobakteriologická vyšetření..
9.1 Sputum na BK Se odebírá po instrukci a pod dohledem zdravotnického pracovníka, a to v množství min. 2 ml až max. 5 ml do plastikového sterilního kontejneru se zevně vyznačeným graduováním odebraného množství. Odběrové kontejnery dodá na vyžádání laboratoř dg. TBC OLM CIM ZÚ.
24
9.2 Aspirát, BAL, tekutý hnis, punktáty, výpotky, žaludeční šťávy, tkáně Uvedené biologické materiály odebírá lékař při instrumentálních popř. sekčních výkonech. Nepoužívají se žádné fixační ani transportní tekutiny vyjma sterilního fyziologického roztoku při odběru aspirátu z bronchu případně odběru tkáně. Odebrané biologické materiály se ihned transportují do laboratoře. V případě nutnosti je lze do transportu uchovat v chladničce max. 48 hodin a kontaktuje se svozová služba ZÚ.
9.3 Lymfatické uzliny Odebírá odborný lékař při instrumentálním výkonu, a to po dezinfekci odběrového místa 70% aethanolem. Jiný použitý dezinfekční roztok se vyznačí do průvodního listru k požadovanému vyšetření.
9.4 Mozkomíšní mok Odebírá odborný lékař do sterilní Wassermannovy zkumavky nebo do sterilního kontejneru z plastu, a to minimálně v množství 1 ml. Odebraný materiál se ihned transportuje k vyšetření do laboratoře. V případě nutnosti jej lze do transportu uchovat při pokojové T max. 48 hodin a kontaktuje se svozová služba ZÚ.
9.5 Menstruační krev Odebírá se menstruační krev na sterilní menstruační tampón ze stlačené gázy, a to při pravidelné menstruaci třikrát po sobě. Tampón se zavede do pochvy na noc po omytí zevních genitálií. Ráno odebírající zdravotník vyjme ženě tampón a umístí do sterilního PVC kontejneru na objem až 100 ml. Vhodnější je odběr živé tkáně při curretage.
25
9.6 Stolice Odebírá se do sterilní odběrové soupravy s lopatičkou určenou pro parazitologická vyšetření, a to cca v množství velikosti lískového ořechu.
9.7 Moč Odebírá si pacient sám po instrukci personálem. První ranní moč – střední proud – v množství minimálně 30 ml. Odběrový sterilní kontejner dodá OLM CIM ZÚ.
9.8 Laryngální výtěr = LV Odebírá se výjimečně u nespolupracujících pacientů: děti, klienti psychiatrických léčeben apod. Jeden odběr tj. jedno vyšetření = 3 LV vatové sondy z chrómmolybdenového drátu. Před vlastním odběrem se zvlhčí ve sterilním fyziologickém roztoku event. ve sterilní destilované vodě. Drát se ohýbá o stěnu odběrové soupravy tak, aby jej bylo možno zavést za kořen jazyka nad epiglottis. Poté pacient vydatně zakašle. Pacient je předem instruován o postupu odběru. Odebírající personál dodržuje zásady bezpečnosti a ochrany zdraví při rizikové práci tj. chrání se respirátorem a osobními ochrannými prostředky jako jsou pryžové rukavice, empír, štít. U LV se neprování přímá mikroskopie biologického materiálu.
9.9 Stěry z píštělí a hnisavých nehojících se ran a ložisek K jednomu vyšetření se použijí 3 sterilní vatové sondy z chrómmolybdenového drátu. Zásadně neužívat detoxikované tampóny na špejli s aktivním uhlím. Nepoužívat odběrové tampóny s transportním médiem dle Amiese či Stuarta!
26
10. Poznámky k požadovaným vyšetřením na BK Speciality jako požadavky o rychlé kultivační tj. metabolické metody popř. o molekulárně genetické metody (= PCR) vyznačí induktor výkonu sám na průvodní list k vyšetření. V případě chybění přesného požadavku na typ vyšetření je lékařem laboratoře TBC osobně určeno, jak bude biologický materiál zpracován. Rychlou metabolickou kultivační metodou se obvykle zpracovávají vzácné biologické materiály ( např. mozkomíšní mok a punktáty) a všechny primární biologické vzorky s diagnózami A: 15 až A:19; A:31 a Z: 03.0. Molekulárně genetické metody průkazu původce TBC provádí Oddělení molekulární biologie CIM – vedoucí: ing. I.Stiborová Tel.: 47 7751804 Test buněčné imunity Quantiferon® TB Gold provádí Oddělení buněčné imunity CIM ZÚ – RNDr. J..Pohořská; Tel.: 47 7751806
11. Odborná literatura k odběrům biologických materiálů na BK Aziz, M.A. et al.: Guidelines for Surveillance of Drug Resistence in Tuberculosis. WHO /TB/2003.320, Geneva 2003 Burkhardt, F. et al.: Mikrobiologische diagnostik, Georg Thieme, Stuttgart SRN, 1992, ISBN 3-13-743601-X, Str. 1547 Kent, P.T. et al.: Public Health Mycobacteriology. A Guide for the Level III Laboratory. CDC Atlanta USA 1985 Kolektiv autorů pod vedením SZÚ NRL pro mykobakteria: Doporučené standardní metody v mikrobiologii mykobakteriálních infekcí, TRIOS Praha 1993 Miller, J.M.: Specimen Management in Clinical Mikrobiology, ASM USA, 1999, ISBN 1-55581-138-8, Str. 33-167 th Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8 Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Narvaiz de Kantor, I. Et al.: Laboratory Services in Tuberculosis Kontrol Part I – III. WHO/TB/98.258, Geneva 1998 Pio,A., Chaulet, P.: Tuberculosis Handbook. WHO / TB/98.253, Geneva 1998
27
Nabídkový list mykologie - Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Orofaryngeální oblast=krk+nos+mandle
Sputum, BAL, aspirát z bronchu
Vyšetření pohlavních orgánů Likvor
Moč
Odběrová souprava
Teplota uchování vzorku Sterilní odběrový Pokojová T vatový tampón v transport.médiu Amies Sterilní širokohrdlá 2-8°C sputovka
Doba od odběru do transportu Ihned až 24 hodin
Trvání vyšetření
48 hod. až 2 Uvádějte týdny přesnou Dg.
Ihned až 24 Mikroskopie hodin 24 h. Kultivace až 2 týdny ihned Mikroskopie Sterilní vatový 2-8°C tampón ihned; v transp.médiu kultivace Amies 48 h. až 2 tý Sterilní zkumavka Pokojová T Ihned jinak Mikroskopie max. 24 h. v ihned; chladu kultivace 48 h. až 2 tý Sterilní nádobka, 2-8°C ihned 48 h. až 2 tý zkumavka
28
Poznámka
Provádí se po - pá
po - pá
po - pá
po - pá
po - pá
12. Technika a náležitosti odběru biologických materiálů pro mykologická vyšetření 12.1 Horní cesty dýchací • • • • • • •
Odběry na mykologická vyšetření odebírá ošetřující odborný lékař Na sterilní vatový tampón Nalačno Pacient předem neprovádí hygienu dutiny ústní Stírají se viditelné mléčné povlaky či pablány v dutině ústní Výtěr z nosohltanu se provede sterilním tampónem na drátě Diagnóza a předchozí léčba ATB popř. steroidy aj. se zaznamenají do průvodního listu
12.2 Dolní cesty dýchací • • • •
Sputum se odebírá do sterilního širokohrdlého kontejneru z plastu Při první ranní expektoraci Materiál uchovat do transportu v chladničce Při instrumentálních výkonech se odebírá BAL
29
12.3 Stěry z kožního povrchu a detritus kožních adnex • • • • • • •
Odběr sterilním vatovým tampónem do transportního Amiesova média Sterilním skalpelem seškrábnout ložisko s povrchu do sterilní Petriho misky či do sterilní Wassermannovy zkumavky-dodá OLM Sterilními nůžkami nebo skalpelem odstřihnout či seškrábnout postižená adnexa tj. vousy, vlasy, ochlupení, a to nejlépe i s vlasovým folikulem U akutních procesů sejmout krusty do sterilní zkumavky Obsah puchýřků nabodnout sterilní jehlou a poté setřít sterilním vatovým tampónem U onychomykóz odstřihnout vnitřní část nehtového lůžka Před odběrem dezinfikovat plochu 70% alkoholem
12.4 Stěry z oka, ucha • • • •
Provádí odborný lékař – specialista sterilním vatovým tampónem Krouživým pohybem po ložisku Lze provést současně stěr druhým sterilním tampónem na podložní sklíčko k mikroskopickému vyšetření Lze provést seškrab sterilním skalpelem
12.5 Tkáň, biopsie •
Odběr se provede do sterilní zkumavky se sterilním fyziologickým roztokem
30
12.6 Tekutý hnis, punktát, aspirát, exudát, • • •
Tekutý materiál se odebere sterilní stříkačkou a opatří kónusem Obsah lze vstříknout do sterilní zkumavky Neužívá se žádná fixační tekutina
12.7 Sekret z urogenitálního ústrojí ženy a muže • • • • •
Provádí lékař specialista za použití sterilního vyšetřovacího instrumentaria U dětí a těhotných se zavede vatový tampón za ústí močové trubice a sekret se nechá nasáknout vyšetřovanou tekutinou U cervixu se odstraní hlenová zátka; poté se vatový tampón zanoří do cervikálního kanálu a rotačním pohybem se provede odběr sekretu U mužů odebíráme ejakulát po vícedenní sexuální abstinenci Prostatický exprimát se nabere až po zevní masáži prostaty do sterilní zkumavky
12.8 Moč • • • • • • • •
Pacienta poučíme předem o náležitostech odběru Odebíráme do sterilní širokohrdlé nádoby Odebírá se střední proud moči Zabráníme kontaminaci ze zevního genitálu Muži i ženy si před odběrem omyjí zevní genitál mýdlovou vodou U novorozenců se očistí zevní genitál a nalepí se plastikový adhezivní sáček V indikovaných případech provede lékař specialista suprapubickou punkci močového měchýře Přednost se dává cévkované moči
31
13. Odborná literatura k mykologickým vyšetřením Burkhardt, F. et al.: Mikrobiologische diagnostik, Georg Thieme, Stuttgart SRN, 1992, ISBN 3-13-743601-X Frágner, P.: Parazitické houby u člověka, Nakl.čs.akademie věd 1958 Miller, J.M.: Specimen Management in Clinical Mikrobiology, ASM USA, 1999, ISBN 1-55581-138-8, Str. 33-167 th Murray, P.R. et al.: Manual of Clinical Mikrobiology 8 Edition, ASM USA, 2004, ISBN 1-56581-265-4, Str. 55-64 Otčenášek,M. et al.: Vyšetřovací metody při mykotických onemocněních. Avicenum Praha 1990. ISBN 80201-0059-8
32
Nabídka úseku parazitologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Odběrová souprava
Teplota uchování vzorku Stolice na průkaz střevních Odběrovka pro 2-8°C parazitů paraz.vyšetření
Doba od Trvání Poznámka odběru do vyšetření transportu ihned Do 48 3 odběry po hod. sobě s odstupem 2 dnů Odběrovka na Pokojová T Ihned po 24 hod. 10 ml stolice objem 30 ml defekaci
Provádí se
Průkaz měňavek=trofozoity+cysty
po - pá
Vyšetření vajíček Vydá indukující Pokojová T Nemá Enterobius a Taenia lékař nebo ZÚ čas.omezení
24 hod.
Průkaz trofozoitů Giardia Zkumavka intest. v žaludeční šťávě zátkou
Tentýž den
se 37°C
ihned
33
po - pá
Odběr ráno po - pá po instrukci lékařem Min. 5 ml po - pá
Nabídka úseku parazitologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Teplota uchování vzorku Kultivační Sterilní zkumavka Pokojová T vyšetření na s Diamondovým Trichomonas mediem + vaginalis odběrovým tampónem (vydá ZÚ)
Doba od Trvání odběru do vyšetření transportu V den 72 hodin odběru
Stolice na průkaz vývojových stádií střevních parazitů Čerstvá stolice na průkaz živých měňavek
Širokohrdlý Chladnicová odběrový kontejner z T plastu
V odběru
Širokohrdlý 37°C odběrový kontejner z plastu
Doru čit ihned odběru
Vajíčka Enterobius vermicularis
Odběrová souprava
Průsvitná lepicí folie Nemá na podložním skle omezení
den 48 hodin
Max. do 24 po hod. a temperovat na 37°C Nemá 10 minut od omezení doručení vzorku
34
Poznámka
Provádí se
Odběrovou po - pá soupravu skladovat ve 4°C; p řed odběrem temperovat na 25°C Stolice vel. po - pá Ořechu 3 odběry po sobě á 3 dny 10 ml stolice
čerstvé po - pá
Odběr ráno před po – pá hygienou GUT Pásku přiložit na anální řasy a nalepit zpět na sklíčko
Nabídka úseku parazitologie – Mikroskopická a kultivační vyšetření Typ vzorku
Mnohobuněční nebo jejich části
Odběrová souprava
Teplota uchování vzorku červi Širokohrdlý Chladnicová PVC kontejner T
Krevní roztěr odmaštěná 2 pokojová T Nebo tlustá kapka na podložní skla malárii se zábrusem na popis vaginální nátěr 1x Giemsa 1x Gram k průkazu bičíkovců, kvasinek aj.mikroflóry kultivační vyšetření na bičíkovce=Trichomonas a rod Candida
sterilní podložní skla
pokojová T
transportní Diamondovo medium s odběrovým tampónem
pokojová T
35
Doba od odběru do transportu Doručit ihned po odběru
Trvání vyšetření
Poznámka
Max. do 24 Nepřidávat hod. fixační činidla Části červů lze vložit do fyziol. roztoku Doručit ihned po roztěr nechat ihned po doručení a dobře zaschnout odběru obarvení dopravit v laboratoři v transportním pouzdře Doručit o 24-48 hodin roztěr nechat ochranném dobře zaschnout pouzdře dopravit v den v transportním odběru pouzdře v den 72 hodin transp. media odběru skladovat v CHT max. 4 týdny před odběrem předehřát na PT
Provádí se po - pá
po - pá
po - pá
po - pá
Pozn.: serologická, imunochemická, molekulárně genetická vyšetření provádí CIM OLI. Dotazy na tel. 47 7751800, -802, 804. Přehled metod uveden na Intranetu ZÚ v laboratorní příručce Po telefonické domluvě je možné provést i specializovaná vyšetření jako krevní roztěr a tlustá kapka na malárii aj.
14.Technika a náležitosti parazitologická vyšetření
k
odběru
biologických
materiálů
na
14.1 Stolice na střevní parazity a jejich vývojová stádia 3
Nejlépe čerstvou a poté zchlazenou stolici objemu 5 cm tj. velikosti vlašského ořechu odebereme do kontejneru z plastu s lopatičkou k parazitologickému vyšetření. Do průvodního listu zaznamenáme makroskopický vzhled tj. viditelné příměsi: parazity příp. jejich části, krev, hlen. Vzorek označíme, zchladíme a do hodiny necháme dopravit k vyšetření do laboratoře.
14.2 Stolice k průkazu přítomnosti měňavek a živých stádií ostatních prvoků 3
Čerstvá a temperovaná (=37°C) stolice v množství 10 cm se odebere do kontejneru z plastu. Do průvodního listu zaznamenáme makroskopický vzhled tj. viditelné příměsi: krev, hlen. barvu. Vzorek označíme a do hodiny necháme dopravit při PT k vyšetření do laboratoře.
36
14.3 Průkaz vajíček ektoparazitů pomocí lepící průhledné pásky Před ranní hygienou perianální oblasti přiložíme proužek lepící pásky (Isolepa) na perianální slizniční řasy a otisk přilepíme na odmaštěné čisté podložní sklíčko, které na okraji označíme. Vzorek bez časového omezení transportujeme v ochranném obalu do laboratoře k vyšetření.
14.4 Krevní roztěr k vyšetření krevních parazitů – tlustá kapka Standardním způsobem odebíráme venózní nebo kapilární krev opakovaně na začátku vzestupu tělesné. Vždy odebereme krev na 2 roztěry současně. K vyšetření tlustou kapkou přikládáme sklíčko k prstu vyšetřovaného shora. Odebíráme až 4. a další kapky. K odběru na vyšetření tlusté kapky vytvoříme na sklíčku 3 kapky do 2 trojúhelníku a rohem dalšího sklíčka je rozetřeme po ploše sklíčka max. 1-1,5 cm po povrchu. Kromě tlusté kapky provedeme hranou sklíčka na další sklíčko krevní roztěr.
14.5 Roztěr vaginálního výtěru k barvení MOP – Gram, Giemsa Na 2 sterilní podložní skla provedeme odběrovým vatovým tampónem homogenní tenký roztěr. Necháme zaschnout při PT. Odběry na sklech popíšeme na okraj číslem či příjmením.. Vložíme do transportního pouzdra z plastu na sklíčka. Odešleme k vyšetření do laboratoře.
14.6 Kultivace bičíkovců (Trichomonas) a kvasinek Zkumavky s transportním médiem temperujeme na 25°C a sekret odebraný sterilním vatovým tampónem ze zadní klenby poševní zalomíme o okraj zkumavky do média ve zkumavce. Co nejdříve transportujeme při PT do laboratoře k vyšetření.
15. Odborná literatura k vyšetřením na parazitologii Jírovec,O. a kol.: Parazitologie pro lékaře. Avicenum 1977 th Murray,P.: Manual of Clinical Mikrobiology 8 Edition.Section X. AMS Press Washington DC 2003
37
38
