Octrooiraad
[id a T e n r ï z a g e f e g g i n g mi
Nsdariand
|54|
7611164
(19] ML
Met S9mTc gemerkt radiodiagnosïieum voor lever- en beenmsrgonderzool:.
151] Int.CI2.: A61K43/00, A61K29/00. (71) Aanvrager: Union Carbide Corporation te New York. f74]
Gem.: Dr. S, Rosenthal c.s. Vereenigde Octrooibureaux Nieuwe Parklaan 107 's-Gravenhage.
Aanvrage Nr. 7611164. Ingediend 8 oktober 1976. Voorrang vanaf 9 oktober 1975. Land van voorrang: Ver. St. v. Am. (US). Nummer van de voorrangsaanvrage: 621087.
[43] Ter inzage gelegd 13 april 1977.
De aan dit blad gehechte stukken zijn een afdruk van de oorspronkelijk ingediende beschrijving met conclusie(s)er»eventuele tekening(en).
Union Carbide C o r p o r a t i o n , NEW YORK» Net
gg™
Tc gemerkt radlodlagnosticum voor l e v e r - en bgenmargondarzosk. De uitvinding betreft v e r b e t e r d e met technèfcium-»99m gemerkte
d i a g n o s t i c s voor het ondefzoek van lever en beenmerg, alsmede werkwijzen om deze tos te p a s s e n . De uitvinding betreft in het bijzonder met technetium gemerkte r a d i o d i a g n o s t i c a , d i e n a t r i u m f y t a a i sn t i n ( ï l ) ianen b e v a t t e n , dis met o x a l a a t een c h e l a a t hebben gevormds, alsmede sen werkwijze om deze te bereiden. Volgens sen ander a s p e k t b e t r s f t da werkuiij2s n i o t - r a d i o a e t i e v e r a d i o d i a g n o s t i c a , die natriumfytaat en t i n ( l l ) i o n e n bevatten, d i e mst o x a l a a t i o n e n zijn g c c h s l a e r d , welke radiodiagnostica geschikt z i j n voor lever™ en beenmargonderzosk qqm als ze met "" Te zijn gemerkt, alsmede sen werkwijze om ss t e bereiden, Technstium-99m, ; i s een buitengewoon n u t t i g . i n s t r u m e n t voor msdischs toepassingen geworden, daar h e t zowel b i j medisch speurwerk als voor h e t stellen van diagnosen a l s radionuclide i s o t o p a n i n d i c a t o r ( k o r t h e i d s h a l v e "merker" of " t r a c e r " genoemd) wordt gebruikt» Doordat technetium 99m een korte h a l v s r i n g s t i j d heeft (6 uur) worden ds organen n i e t lang aan s t r a l i n g b l o o t g e s t e l d ^ z i j n g a m m a - s t r a l i n g s a n s r g i e (140 Kev.) i s niet slechts voldoende om door ds w e e f s e l s te dringen, doch kan ook gemakkelijk worden g e c o l l i m e s r d ; t e r w i j l de afwezigheid van b e t a - e t r a l i n g h s t mogelijk maakt m i i l i c y r i e - h o e v s e l heden van h s t r a d i o n u c l i n e o r a a l of door middel van Injecties aan de patiënt toe te dienen, zonder d a t een s c h a d e l i j k e s t r a l i n g s d o s i s wordt bereikt. Door deze f y s i s c h e eigenschappen wordt technetium-99m veelvuldig a l s r a d i o k o l l o ï d of i n een complex of gecombineerd met geschikte dragers voor in~vivo d i a g n o s e s , z o a l s s c i n t i g r a f i s c h o n d e r zoek van de layer, de longen, bloed, beenderen en tumors gebruikt. Aangezien voor d i t onderzoek geen operatie is vereist,, i e da belangr-tolling voor du/u werkwijze da l a s t e t s Jaren tobtjanamtin, 'Chüminch hohoovt tochnoU.uw hot gta*>p t/'n«A v«/i hnt Periodiek Systeem der Elementen sn gr is dan ook veel overeenkomst tussen zijn chemischB eigenschappen sn die van mangaan en rhenium» Opgelost in water is de messt stabiele vorm van technetium hst
761116 4
p e r t e c h n e t a a t - i o n (TcO^**) , dat bij zijn b i o l o g i s c h e verdeling roei: jodide overeenkomt, waardoor hst geschikt is om voor onderzoek van organen ta worden gebruikte Bovendien maakt zijn geschiktheid om na reductie tot lagere oxydatietrappen met andere materialen te worden gecombineerd technetium geschikt om na met een g e s c h i k t e drager tg z i j n gecheleerd voor onderzoek van de n i e r f u n c t i e of de bloed™ functie of na op fysische wijze in k o l l o l d a l e vorrn t e z i j n gebracht voor lever onderzoek of in deeltjesvorm voor longonderzoek t e worden gebruikt» Technetium wordt in het algemeen in da vorm van natrium» p e r t e c h n e t a a t in een i s o t o n i s c h e zoutoploaing voor het marken van d i a g n o s t i c s gebruikt», Met technetium~99m gemerkte complexen, dia een aantal bestanddelen, waaronder tin{ïï)chloride en g l u c o n a a t , msrcaptan en t h i o k e t s l en n a t r i u m c i t r a a t bevatten worden voor r e n a l e s c i n t i g r a f i e 99(fi gebruikt. Bovendien worden r a d i o k o l l o ï d e n z o a l s Tc-zwavelk o l l o ï d e n , die uit n a t r i u m t h i o s u l f a a t of w a t e r s t o f s u l f i d e worden beta 9™ 99m raid» " Tc-fcechnetiumdioxydekolloïden, Tc-tin(II)chloride kollo99m , «. iden an T c - f i t a a t k o l l o l d e n , die u i t n a t r i u m f y t a a t en t i n ( l ï ) chloride zijn b e r e i d , voor lever-onderzoek g e b r u i k t .
Tin(lI)oxyde-
kolloïden, die uit t i n ( l l ) c h l o r i d e , gebufferd met n a t r i u m f o s f a a t z i j n b e r e i d , worden voor het onderzoek van beenmerg g e b r u i k t . Een doel van de u i t v i n d i n g i s het beschikbaar s t e l l e n van met technicum-99m gemerkte r a d i o d i a g n o s t i c s , die zowel voor l e v e r a l s beenmergonderzoak kunnen worden g e b r u i k t , alsmede een werkwijze om dsze te bereiden. Een ander doel van de u i t v i n d i n g i s het beschikbaar s t e l l e n van een s t a b i e l k o l l o i d , d a t t i n ( l l ) o x a l a a t en natriumfytaat bevat, alsmede een werkwijze om deze t e b e r e i d e n . Nog weer een ander doel van de u i t v i n d i n g i s het v e r s c h a f f e n van een v e r pakt t i n ( l l ) o x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t reagens voor het bereiden van naar grootte g e s t a b i l i s e e r d e met technicum~99m gemerkte kolloïden en een eenvoudige werkwijze om het reagens met gemakkelijk verkrijgbare tschnetlumpertachneQt-zoutoploesingen to gobruikon, Andsms dOfjl«twi« lingsn en voordelen van ds u i t v i n d i n g z u l l e n deskundigen duidelijk worden u i t onderstaande b e s c h r i j v i n g van de voorkeursuitvoeringsvormen van de kolloïden, de reagens-verpakking (Hierna v e e l a l " s e t " genoemd),
7 6 1 1 1 6 4
en da werkwijzen om déze te b s r e i d a n f alsmede uit andere in dez@ be* s e h r i j v i n g voorkomende b i j z o n d e r h e d e n . De u i t v i n d i n g berust op ds o n t d e k k i n g , dat tin(ll)oxslaat en n a t r i u m f y t a a t , mits in een juists verhouding gemangd, een stabiel r a d i o k o l l o i e d vormen, dat kan worden drooggeuroren. Hoewel ds aard van hei mechanisms n i e t geheel d u i d e l i j k i s , nssmt men aan d a t h a t r a d i o k o l l o i e d n i e t i n v i v o , doch i n v i t r o wordt gevormd,, Als h e t drooggsvrorsn produkt met z o u t o p l o s s i n g e n van tschneti.um-99m wordt g s r a e o n s t i t u e e r d , ontstaat een radiokolloied mat een d e e l t j e s g r o o t t e van minder dan ongeveer 5 micron. Wordt d i t r a d i o - k o l l o i e d
intrave-
neus b i j sen p a t i e n t g e i n j s c t e a r d , dan wordt h e t i n f a g o c y t i s c h e K n u f f e r c e l l e n van ds lever opgenomen. Genoemd drooggevroren produkt kan mat kleins hoeveslheden z o u t o p l o s s i n g of waterhoudends o p l o s s i n g worden g a r e c o n s t i t u s B r d en i n een autoclaaf worden behandelde Het aldus varkrsgen k o l l o i e d h e e f t sen g e r i n g e r e deeltjesgrootte van minder dan ongeveer 1 micron verkregen en kan, gemerkt met technetium' 99m, voor beenmergonderzoek worden g e b r u i k t , door da k l e i n s r s dasltjss in da r e e t i c u l o e n d o t h e l i a l s cellen van het beenmerg t e vangens Er werd gevonden, dat t i n ( l l ) o x a l a a t een bater kolloied g a e f t , dat b e t e r tegen oxydatis door l u c h t z u u r s t o f en tagan behandeling in eer? a u t o c l a a f bestand i s dan t i n - f y t a t e n , dis u i t
tin(ll)-
chlorida zijn bereid» In het algemeen worden in water opgeloste t i n ( I I ) v e r b i n d i n g e n gemakkelijk t o t t i n ( ï V ) v e r b i n d i n g e n geoxydaerd. Bovendien wordt tin in de 2 + - o x y d a t i e t r a p als het in water is opgelost en ar geen s t e r k e complexvormende anionen zijn, stark gehydrolyseardo Da gehydrolysserda en gsoxydeerde t i n v e r b i n d i n g e n , die in waterhoudends oplossing zijn gevormd gevsn onoplosbare verbindingen» Deza onoplosbare verbindingen verhinderen de reactie van tin. bij da bereiding van een rediodiagnogtlcufo,, Deze mui li. Jkh&'riwerd onderVHfigon door oon m)% oxnlnnt gfjoholuorrJ U.ÏI(ÏX)ts*n t»; ' j t ? b f f / u n t met tin t e chölsren voorkomt o x a l a a t da ongewenste o x y d a t i e van tin en hat o n t s t a a n van U n ( l V ) i o n e n in o p l o s s i n g . Anders zouden oxydat i e r a i d d e l s n , zoals peroxydan, hydroxylgroepen, e , d , die ten gevolge van r a d i o l y s e zijn ontstaan, g e ï o n i s e e r d tin v e r b r u i k e n , Volgens de
7 61116 4
u i t v i n d i n g wordt d i t echter voorkomen door t i n ( l ï ) o x a l a a t toe fee passen, daar dit» opgelost i n water, n i e t s t e r k g e ï o n i s e e r d is» wat b i j t i n ( l l ) c h l o r i d e j u i s t wel h s t geval i s , SSin Volgens de u i t v i n d i n g kan een met Tc gemerkt radio-» diagnosticum voor leveronderzoek worden bereid door een e e r s t e óan t e voren bepaalde hoeveelheid n a t r i u m f y t a a t i n een waterhoudends opl o s s i n g opts l o s s e n , die p r a k t i s c h geen meegevoerde zuurstof
bevat;
een tweeds vooruit v a s t g e s t e l d e hoeveelheid t i n ( l l ) o x a l a a t i s een niat-oxyderend zuur op t e l o s s e n , met dien v e r s t a n d e , dat de e e r s t e van t e voren bepaalde hoeveelheid ten minste het equivalentgewicht van de tweede i s ; de oplossing vart n a t r i u m f y t a a t met de t i n ( l l ) oxalaatoplossing in aanraking t e brengen, waardoor een o x a l a a t f y t a a t bevattende oplossing wordt verkregen? en de pH van de o x a l a a t f y t a a t oplossing op ongeveer 4 - ongeveer 7, b i j voorkeur op ongeveer 6 in t e s t e l l e n . Da tweede van t e voren v a s t g e s t e l d e hoeveelheid d i e n t In een hoeveelheid aanwezig t s z i j n , d i s ten minste v o l doends i s am de i n t o t a a l aanwezige hoeveelheid technetium t s r e duceren» Hat kan gewenst z i j n de c o n c e n t r a t i e van de oplossing zodanig in te s t e l l e n , dat deze per cm3 een vooraf bepaald percentage n a t r i u m f y t a a t - t i n oxalaat bevat® Tevens i s het gewenst het v r i e s drogen van de oplossing t o t een vaste stof b i j een temperatuur onder ongeveer 30°C, b i j voorkeur tussen ongeveer 30°C en ongeveer «•10°C t s doen p l a a t s v i n d e n , a l s hat gewenst i s de oplossing voordat men deze gebruikte enige maanden t e bewaren. Wordt de oplossing i n een k o r t e r t i j d s v e r l o o p g e b r u i k t , dan kan z i j i n v l o e i b a r e toestand worden toegepasts Wenst men een o p l o s s i n g , die voor leveronderzoek moet dienen t dan kan het drooggevroren r e s i d u opnieuw i n een waterhoudende oplossing worden opgelost» Het i s gewenst van eventueel meegesleepte of opgeloste zuurstof
ZOVSBI
u i t de waterhoudende oplossing t e v e r w i j d e r e n , dat
geen oxydatie van t i n ( ï l ) t o t t i n ( ï V ) kan p l a a t s v i n d e n , aangezien een d e r g e l i j k s oxydatio Bwr> va XIeidlgt)
sim hafc tenhfitjUnm J.-fï
de weg zou etaan 6 Hiertoe kan men een waterhoudende oplossing met een niet-oxyderend gas doorblazen om het meegesleepte z u u r s t o f g a s t e
78
11
1
6 4
vervengen en te v e r w i j d e r e n . Hst niet-oxyderende gas mag"- niet in aanmerkelijks mats door de waterhoudende oplossing worden geabsorbeerd, terwijl het evenmin giftig mag zijn» Tot de geschikte nietoxyderende gassen behoren stikstof, kooldioxyde, edels gassen s.d. Geschikte niet-oxyderende zuren z i j n o . a . HC1, a z i j n z u u r , zwavelzuur, f o s f o r z u u r e . d . Volgens de u i t v i n d i n g d i e n t ten minste het e q u i v a l e n t gewicht van t i n o x a l a a t aan n a t r i u m f y t a a t aanwezig t e z i j n e De gewichtsverhouding n a t r i u m f y t a a t : t i n ( l l ) o x a l a a t i a b i j voorkeur ten minste ongeveer 3 ; 1, b e t e r nog ten minste 13 g 1 en het l i e f s t tussen ongeveer 3 % 1 en ongeveer 20 : 1» I s da gew« verhouding n a t r i u m f y t a a t : t i n ( I ï ) o x a l a a t k l e i n e r dan ongeveer 1 % 1, dan wordt san minder s t a b i e l r a d i o k o l l o i e d volgens de u i t v i n d i n g verkregen, hetgeen ongewenste v a r i a t i e s i n d e e l t j e s g r o o t t e en ongebonden technetium ten gevolge h e e f t . ggm Een ander aspskt van de u i t v i n d i n g b e t r e f t aen met Tc gemerkt k o l l o i s d voor beenmergonderzosk, dat men v e r k r i j g t door de oplossing of het g e r e c o n s t i t u e e r d a drooggevroren produkt van t i n ( l l ) - : o x a l a a t n a t r i u m f y t a a t gedurende oen bepaalde t i j d b i j een bepaalde
;
temperatuur i n een autoclaaf t e behandelen, waardoor een k o l l o i e d met een d e e l t j e s g r o o t t e van minder dan 1 micron en een pH van ongeveer 3 - 7
:
wordt verkregen. Uolgens een voorkeursuitvoeringsvorm van de werkwijze van
da u i t v i n d i n g wordt n a t r i u m f y t a a t i n water o p g e l o s t , d a t met s t i k stof is doorgeblazen. Het t i n o x a l a a t wordt i n een niat-oxyderend zuur, b i j voorkeur geconcentreerd w a t e r s t o f c h l o r i d e z u u r ,
opgelost
en aan de n a t r i u m f y t a a t o p l o s s i n g toegevoerd. De pH wordt door middel van een s t e r k s base, het l i e f s t 1N NaOH op ongeveer 4 - 7 ,
doch b i j ''
voorkeur op ongeveer 5 gebracht, waarna de oplossing met water, dat mot s t i k s t o f was doorgeblazen t o t san öan te voren bepaald volurna wordt aangevuld on vorvolgone g o f i l t r o o r d . Vorvolgone wordt dö opl o s s i n g in g e l i j k e hoeveelheden van 1 cm3 i n serumfiolen gedaan en kan i n v l o e i b a r e vorm worden g e b r u i k t , hoewel men er de voorkeur
j
aan g e e f t , haar bij een temperatuur onder 30°C, bij voorkeur van 3Q°C : tot -10°C aan vriesdroging t e onderwerpen.
7611164
Volgens een andere uitvoeringsvorm van de u i t v i n d i n g kan sen o p l o s s i n g of een g e r e c o n s t i t u e e r d drooggevroren produkt van t i n ( i ï ) o x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t i n een a u t o c l a a f worden behandeld» waarna er ten hoogste ongeveer 5 cm3 technetium-99m in z o u t o p l o s s i n g aan •wordt toegevoegd» Dit gemerkte k o l l o i e d kan voor beenmergonderzoek worden g e b r u i k t . B i j de werkwijze van de u i t v i n d i n g wordt b i j deze uitvoeringsvorm de o p l o s s i n g van t i n o x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t of h e t g e r e c o n s t i t u e e r d e drooggevroren t i n ( ï l ) - o x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t met ongeveer 0,5 - ongeveer 1 cm3 z o u t o p l o s s i n g i s
(dat
gereconstitueerd)
ongeveer 1 - 6 u u r , doch b i j voorkeur ongeveer 2 uur en onder een druk van ongeveer 0,7 - 3,0 a t a , b i j voorkeur van ongeveer 2,0 a t a o en een temperatuur van ongeveer 116 - 143 C, b r j voorkeur van ongeo veer 132 0 in een a u t o c l a a f verwarmd. l'oor h e t bereiden van beenmergradiodiagnosticum kan ten hoogste ongeveer 5 cm3 technetium-99m in de vorm van n a t r i u m p e r t e c h n e t a a t in een z o u t o p l o s s i n g aan h e t i n dB a u t o c l a a f
behandelde
k o l l o i e d worden toegevoegd. De h o e v e e l h e i d , d i e men de p a t i ë n t
als
i n j e c t i e t o e d i e n t hangt van de a c t i v i t e i t s c o n c e n t r a9t9m i e a f , die a l s k a r a k t e r i s t i e k e waarde ongeveer 1 - ongeveer 4mCi
Tc h e e f t »
De u i t v i n d i n g wordt door onderstaande voorbeelden t o e g e licht? VOORBEELD I ïïsn bereidde a l s v o l g t een t i n ( l l ) o x a l a a t - k o l l o i e d j 200 mg t i n ( l ï ) o x a l a a t ( S n C 2 0 4 ) werd i n 100 cm3 w a t e r , d a t met s t i k s t o f was doorgeblazen o p g e l o s t j men verdunde 10 cm3 van deze oplossing
;
t o t 100 cm3 door water toe t e voegen, d a t ook met s t i k s t o f was d o o r - >j geblazen, waarna ds pH van de VBrdunde o p l o s s i n g 4,1 was„ De a l d u s
•
verdunde oplossing word dnov e»n Q,?2
:
1 crn3 van hot f l l t r m i t In
f i l t e r rjwfil
&nn nuvinii f i o o l vmi 10 tm'.'i hinnl
wee/-ns gMbf-»ohU
Ook werden monsters van h e t f i l t r a a t aan v r i e s d r o g i n g onderworpen. 99m
De v l o e i b a r e en de drooggevroren monsters werden met 3 cm3
Tc gemerkt, waarna een proef met levende muizen werd genomen en chromatografische analyses ; werden gedaan-. Het % bindingsrendement
! I j ;
van het chemische merken en dB s t a b i l i t e i t van h e t p r e p a r a a t werden
i
door middel van o p s t i j g e n d e p a p i e r c h r o m a t o g r a f i e b e p a a l d , waarvoor
1
7 6 1 1 1 6 4
Whatman -ff~ 1 papierstrookjes i n 85$' a methanol" werden g s b r u i k t ,
ter-
w i j l voor het onderzoek door a f t a s t e n een r a d i o c h r o m a t o g r a f i s c h e a f t a s t e r werd g e b r u i k t . Wen gaf de levende muizen een i n j e c t i e van 0,2 cm3 in da s t a a r t a d e r e n en doodde ze 0,5 uur daarna* Da r e s u l t a t e n z i j n vermeld i n onderstaande TABEL A« TABEL A Vsrdaling van ^ 9 m T c - t i n ( l I ) o x a l a a t i n de weefsels voor en na hst vriesdrogen» n
Proef met levende muizen % van g e ï n j e c t e e r d e a c t i v i t e i t Vloeibaar Drooggevroran x)
'9
Lsver
91,7
93,4
Milt
1,7
2,6
Longen
0,6
2,6
Ingewanden
1,6
0,2
Nieren
0,7
0,2
0,0
0,0
3,8
1,0
r
Hart
Geraamte
x) Chromatografische a n a l y s e ^ ? 99% gevonden, opnemingstijd 30 minuten. Uit deze t a b e l b l i j k t , dat na v r i e s d r o g i n g een t i n ( I I ) a x a l a a t - k o l l o i e d op z i c h z e l f ongeschikt zou z i j n om a l s l e v a r s f t a s t middel t e wordsn g e b r u i k t , aangezien de d e e l t j e s zich opssnhopen, waardoor ds longen er t a v s e l van cpnemsno VOORBEELD I I Om een t i n ( l l } o x a l a a t ~ k o l l o i e d t e s t a b i l i s e r e n , werd op de volgends wijzB n a t r i u m f y t a a t toegevoegd: 90 cm3 water.werd 1 uur mat s t i k s t o f doorgeblazen, waarna de pH van het doorgeblazen water mat 0,1N HC1 op 3,0 werd g e b r a c h t . ïn d i t met s t i k s t o f
doorgeblazen
water werd 400 mg n a t r i u m f y t a a t opgelost,, waardoor de pH t o t ongeveer 10 s t e e g . Daarop werd de pH van ds oplossing door middel van 1N HC1 weer op 3,0 gebrachto Men voegde 20 mg t i n ( l l ) o x a l a a t toe en roerde t o t a l l e s was opgelosto Vervolgens l i e t men 1 cm3 van de .op-
7611164
«8w
lossing via sen 0 , 2 2 y 6 f i l t s r i n sen sarumficdL van 10 cm3 lopen an onderwierp haar aan v r i e s d r o g i n g . Bovenbeschreven n a t r i u m f y t a a t - t i n ( ï l ) o x a l a a t - p r e p a r a a t werd op levsnde muizen beproefd. De longen 5
namen
zeer weinig op en
ds opneming door da l e v e r was bevredigend. Een v e r g e l i j k i n g met de r e s u l t a t e n van Voorbeeld I waarin geen f y t a a t werd g e b r u i k t ,
lesrt,
dat door toevoeging van n a t r i u m f y t a a t de d e e l t j e s g r o o t t e van het o x a l a a t k o l l o l e d werd g e s t a b i l i s e e r d , waardoor werd voorkomsn, dat da
10
longen t e veel opnamen. Bovenbeschreven p r e p a r a a t werd gsmarkt 99m met 3 cm3 Tc van geringe c o n c e n t r a t i e en in 4 muizen ingespoten» de r e s u l t a t e n van deze muizsnproef z i j n vermeld i n onderstaande TABEL B. TABEL B
15
' Verdeling van T i n ( l l ) o x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t over de v e r s c h i l l e n d e weefsels. Prosf met lavende muizan x) % van gsfilnjectaerde a c t i v i t e i t Orgaan Lever
25
91,3
Hilt
2,5
Longen
0,1
Ingewanden
1,1
Nieren
0,6
Hart
0,1
Geraamte 30
• 4,3
x) Gemiddelds van 4 muizen? opnamingstijd 30 minuten. VOORBEELD I I I Op :de in Voorbeeld I I beschreven wijze werden 3 aanmaken mat technatium-99m gemerkt t i n ( l l ) o x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t - k o l l o i e d
berBid.
B i j het bereiden van deze aanmaken werd e c h t e r de n a t r i u m f y t a a t 35
c o n c e n t r a t i e constant op 400 mg per 100 cm3 gehouden, t e r w i j l de con-
7 6 1 1 1 6
4
c e n t r a t i e van het toegepaste t i n ( l l ) o x a l a a t tussen 10 en 40 mg/100 cm3 werd g e v a r i e e r d , n . l . r e s p e c t i e v e l i j k 10, 20 en 40 mg t i n ( H ) o x a l a a t per 100 cm3. Alle 3 c o n c e n t r a t i a e gaven b i j proeven op levende muizen na 30 minuten opneemtijd ongeveer d e z e l f d e r e s u l t a t e n . Uit de chromatografischa r e s u l t a t e n bleek e c h t e r , dat b i j een c o n c e n t r a t i e 9 9m van 10 mg t i n ( l ï ) o x a l a a t per 100 cm3 s l e c h t s Tc was gebonden, hetgeen onbevredigend i s , t e r w i j l 40 mg t i n ( l l ) o x a l a a t per 100 cm3 99m 91% gebonden Tc opleverde, hetgeen de voorkeur g e n i e t . Om da t o t a l e hoeveelheid aanwezig technetium chemisch t e reduceren i s derhalve ten minste '10 mg t i n ( l l ) o x a l a a t nodig. VOORBEELD IV Volgens ds i n Voorbeeld I I beschreven werkwijze werden 3 aanmaken met t8chnetium-99m gemerkt t i n ( l l ) o x a l a s t « n a t r i u m f y t a a t b e r e i d . B i j het bereiden van deze 3 aanmaken werd e c h t e r de t i n ( l ï ) oxalaatconcentra±ie constant op 20 mg per 100 cm3 gehouden, t e r w i j l de c o n c e n t r a t i e van het n a t r i u m f y t a a t ( i n o s i t o l h e x a f o s f a a t ) tussen 100 an 600 mg/100 cm3 werd g e v a r i e e r d , rul» r e s p e c t i e v e l i j k 100, 400 en 600 mg n a t r i u m f y t a a t per 100 crn3. Autoradiografische proeven op muizen, toonden aan, dat de materialen uitmuntend door de l e v e r werden opgenomen. De r e s u l t a t e n , die na 30 minuten met levende muizen werden verkregen, z i j n vermeld i n onderstaande TABEL C: TABEL C V a r i a t i e i n c o n c e n t r a t i e van Fytaat i n T i n ( l l l ) Oxalaat Colloied. Proef met levende muizen % van G e ï n j e c t e e r d e a c t i v i t e i t 400 mg Na
100 mg Na
fytaat
600 mg Na fytaat
Orgaan
fytaat
Lever
84,1
91,8
92,2
Milt
2,6
2,4
1,7
Longen
0,3
0,1
0,2
Ingewanden
1,8
0,9
1,2
Nisran
0,9
0,4
0,5
0,1 '4,3
<.0,1
Hart
<0,1
Geraamte i « 11 1 6
10,3
4
.
4,2
-10-
>VOORBEELD V Op de in Voorbeeld I I beschreven wijze werden 6 aanmaken m
mst " Tc-gemerkt t i n ( l l ) a x a l a a t - n a t r i u m f y t a a t kolloied b e r e i d . Voor het bereiden van deze aanmaken werd echter 1M HC1 gebruikt om da pH van de eindprodukten op r e s p e c t i e v e l i j k 3 , 0 j 4 , 0 ; 5,0; 6,0; 7,0; en 8,0 te brengen, voordat z i j aan vriesdroging warden onderworpen. Van deze aanmaken werden g e l i j k e hoeveelheden aan f i o l e n verdeeld, waarna ze werden drooggevroren. Uit a u t o r a d i o g r a f i s op muizen bleek, dat de materialen uitstekend door ds l e v e r werden opgenomen en dat b i j deze verschillende pH-waarden v e r g e l i j k b a r e r e s u l t a t e n werden verkregen. Da r e s u l t a t e n , die na 30 minuten met iBVenda muizsn werden verkregen, z i j n vermeld in onderstaande TABEL Di TABEL D Invloed van de pH op T l n ( l I ) Q x a l a a t Kolloied Proef mat levende muizen % van g e ï n j e c t e e r d e a c t i v i t e i t Orgaan
pH 3,0
pH 4,0
pH 5,0
pH 6,0
pH 7,0
pH 8,0
Lever
91,9
B9,8
92,4
90,4
88,0
Milt Longen
2,4 0,1
2,6
2,0
91,9 2,8
2,0
1,7
0,2
0,2
0,1
0,2
0,2
Ingewanden
1,0 0,6
1,4 0,6
1,1 0,5
1,2
2,2 1,0
3,0
<0,1
<0,1
4,0
5,4
Mieren Hart Geraamte
0,1
0,4 <0,1
<0,1
1,2 <0,1
3,8
3,6
4,2
5,7
vofiHörei.0 rretr- u vtf » -VI itf Volgens orieters taande webwijze uistti een mmitmnk \/nn '/(ill tuirf Ma f y t a a t - t i n ( l l ) o x a l a a t kolloied boreid. 200 cm3 Water werd in son 3-halzenkolf van 250 cm3 45 minutsn met s t i k s t o f
doorgeblazen.
800 mg Natriumfytaat werd afgewogen en onder roeren in de kolf ge-
7 6 1 1 1 6 4
-11-
b r a c h t , waardoor sen pH van ongeveer 10 werd verkregen. Men roarda de kolf 10 minuten of t o t d a t het f y t a a t was o p g e l o s t . Da pH werd met 1N HC1 (ongeveer 2,7 cm3) op 6,0 g e b r a c h t , waarna onder roeran 80 mg t i n ( ï l ) o x a l a a t i n de kolf werd g e b r a c h t . Na ongeveer 20 minuten werd de pH met 1N NaOH op 6,0 i n g e s t e l d , waarna de gehele oplossing door een 0,22 ?
7611164
TABEL E
Verdeling van Na-fyfcaat-Tin(Xï)oxalaat Kolloied over da verschillende O»
organen van muizen
___
Proef bij levende muizen; ^ van gs£nJecfceerde activiteit
Opnemingstljd
Lever
Wilt
Longen
Nieren
Hart
Waag
Ingewanden
0,2
0,9 0,3
<0,1 <0,1 <0,1
0,2
0,9 0,7 1,3
0,2
0,7
< 0,1
0,2
0,8
2,5
0,1
0,6
<0,1
1,2
0,1
< 0,1
87,9
3,4
0,5 0,8 0,3 1,0
< 0,1
92,0
3,6 3,2 2,4
0,4 0,2 0,3
<0,1 <0,1
0,1 0,2
0,6
2,0
0,1 0,1 0,2
91,7
2,2
92,2 90,5
10 minuten 20 minuten
91,5
2,9
90,3
2,2
30 minuten
92,4
1 uur 2 uur 3 uur 4 uur
91,G
5 uur 6 uur
< 0,1 < 0,1 0,1
0,2
1,8 1,3 2,2 2,1
Geraamte 3,7 5,7
3,5 4*1 2,9 3,2 3,5 3,5 5,2
-13-
Fïen deed met natriumfytaat~tin(ll)oxalaatf d a t met 3 cm3
QQm verdund Te was gereeonstitueerd een 6 uur durende clearance
(azuiverings)proef op muizen. -Het materiaal werd chromatografisch in 85$ methanol beproefd en vertoonde
y- 99% binding. Hst bloed
ward 99m in capillairen verzameld, gewogen, geteld en met een standaard Tc oplossing vergeleken. Bovendien werd een 6 uur durende clearanoe-proef op een konijn gedaan,ggwaarvoor het tin(ïl)oxalaat-natriU!Bfytaai, dat met 3 cm3 verdund m Te was gereconstitueerd werd gebruikt» Het konijn QQm werd geïnjecteerd met 0,4 cm3 van het met Tc gemerkte kolloied. Op verschillende tijdstippen werden bloedmonsters genomen) die
ggm met een standaard
Tc-oploesing werden vergeleken» Het konijn
werd gedood en lever en milt werden verwijderd en gewagen, waarna de activiteit per gram weefsel werd bepaald. De verhouding milt g lever was 1,1 t 1, hetgeen een gunstige verhouding voor levermilt onderzoek ia. 0e resultaten van de bloed-clearance bij de muizen en bij het konijn zijn varmeid in onderstaande TABEL F.
7611164
TABEL
Bload-Clearanea van Na°fytaat°° Tin( 11 )oxalaafc
E
x)
bij muizen en gen konijn®
Konijn
Huizon
Opneemtijd
10 20 30 1 2 3 4 6
minuten minuten minuten uur uur uur uur uur
% geïnjecteerde activiteit in bloed 2,1 0,7 0,9 0,4 0,5 0,3 0,4 0,3
x) Gereconstitueerd bij een pH van 8,0
Opneemtijd
% geïnjecteerde a c t i v i t a l t i n vloed
10 minuten
2,9
30 minuten
2,9
1 2 3 4 6
uur uur uur uur uur
2,2 1,5 1,9 3,2
1,4
-15-
B i j een a n d e r e proef werd bovenbeschreven tin(ïï)oxalaatNa-fytaafc, dat met "fflTc was gemerkt b i j 6 muizen I n g e s p o t e n . Da muizen werden i n een a t o f u i i s s e l i n g s k o o i g e b r a c h t en er werden gezamenlijke urinemonsters op gezette t i j d e n gesteld, terwijl de go_
urine-clearance van de
Tc-aetiviteit met de geïnjecteerde ac-
tiviteit werd vergeleken* De resultaten z i j n in onderstaande TABEL G
samengevat: > TABEL G Urine Clearance van N a « f y t a e t « T i n { I l ) o x a l a a t bij muizen x)
Tijdsverloop na
% activiteit
% geïnjecteerde activiteit
injectie
per monster
uitgescheiden
0,3
0,3
1 uur
2,8
3,1
2 uur
2,0
5,1
3 uur
2,4
7,5
4 uur
0,9
8,4
5 uur
1,8 1,0
10,2
30 minuten
6 uur
11,2
x) Gersconstitusard op pH 6,0» Ean fiool met tin(H)oxalaat-natriurafytaat werd met ggm 3,0 cm3 verdund
Tc gereconstitueerd* De gemerkte verbinding werd
chromatografiach geanalyseerd. Na 30 minuten was er 99% binding; na 6 uur was er 9B% binding; en na 24 uur was nog 90% van het
Tc
gebonden. Na 24 uur werd met de gereconstitueerde verbinding een p r o e f op lavende muizen genomen. U i t de r e s u l t a t e n b l e a k , dat; h e t tln(lZ)oxal8at-n8triumfytaat kolloied t o t t e n m i n s t e 24 u u r , het met
nadat
Tc is gereconstitueerd of gemerkt kan worden gebruikt* De resultaten zijisamengevat in onderstaande TABEL H
7611164
-16-
TABEL H
24-uur stablllteitaproef met tin(ll)oxalaat-Na f y t a a t
Proef met levende muizen x) Orgaan
% geïnjecteerde activiteit
Lever
92,3
Flilt
4,0
Longen
0,0
Ingewanden
0,9
Nieren
0,0
Hart
0,0
Geraamte
2,9
x) Gemiddelde van 2 muizen, opneemtijd 30 minüten.
VOORBEELD VII Op de volgende wijze werd een grote tin(ll)axalaat natriumfytaat kolloied-aanmaak bereid» Men bracht 373 mg tin(ll)oxalaat in een fiol van 5 cm3 die een magnetisch roerstaafje bevatte flen voegde 3,0 cm3 geconcentreerd HC1 toe, waarna de o p l o s s i n g werd geroerd, totdat hst tin(H)oxalaat was opgelost. Wen pipeteerde 2,0 cm3 van deze oplossing in een 1 liter kolf, d i e 2,4 g natriumfytaat opgelost in 500 cm3 water bevatte, welk l a a t s t e met atikstofgas was doorgeblazen* De pH van de oplossing werd met (ongeveer 15 cm3) 1N NaOH op 6,0 gebracht) De oplossing werd met water, dat met stikstof was doorgeblazen tot 600 cm3 verdund en geroerd, totdat zij helder was geworden. De heldere, o p l o s s i n g werd door een 0,22 (c PIILLIPORE filter gefiltreerd en in g e l i j k e hoeveelheden van 1 cm3 over serumfiolen van 10 crn3 verdeeld*
De l a a t s t e worden in een v r i e s k a s t gubraoht m e«r» Vï-lssdroglfig onderworpen» Een proef met levende muizen, waarbij een opneemtijd van 30 minuten gold, gaf bevredigende resultaten, daar uit chroma-
99m tografische analysen bleek, dat 94$
Tc was gebonden»
De resultaten zijn in onderstaande TABEL I samengevat;*
761116 4
TA8EL
I
G r o t e produktle-aanraaak van Tln(ll)oxalaat-natrlurofytaat k o l l o i e d »
Proef roet levende muizen % gewonnen a c t i v i t e i t
Orgaan
90,5
Lever
nut
3,6
Ingewanden
•1,3
Nieren
0,5
Hart
< 0.1
Longen
0,1
Geraamte
4,0
VOORBEELD V I I I Kan bereidde op de i n Voorbeeld VII beschreven w i j z e sen aanmaak van tin(lI)oxalaat-natriumfytaat k o l l o i e d om dit met een niet-radioactief r e a g e n s » d a t v o o r l e v e r o n d e r z o e k w o r d t ge» brulkt en door New England N u c l e a r , R a d i o p h a r m a c e u t i c a l Division, Atomlight Place, North Sallerica, Massachusetts 0 1 8 6 2 , wordt geleverd, te vergelijken, welk fcin(ll)fytaat 20 mg natriumfytaat en 2 mg t i n ( I I ) c h l o r i d e per f i o o l bevatte» Elk produkt werd roet 4 cm3 verdund " r a Tc (10 mGi/cmS} gereconstitueerd, Chromatografiache analyse en in vivo-proeven werden na een opneemtijd van 30 minuten met beide reagentia gedaan» Voor beide reagentia was de binding 99iji van Tc bevredigend» Uit deze proeven bleek, dat het met technetium 99m gesterkte
was en in mindere mate in longen en nieren werd opgenomen danhet raat tochnetium-99 m gamerkte Un(n)fytö«i>.lt3VtjrftKiJbir/o«»t'(nJdfitil van New England Nuclear. Uit de in vivo-proef blijkt, dat er minder vrij partechnetaat was als tin(lI)ion met oxalaat was gecheleerdo Het f e i t , dat nieren en longen zoveel opnemen is bij leveronderzoek o n g e w e n s t , aangezien het invloed op dit onderzoek heeft. De resultaten van deze proeven zijn in onderstaande TABEL 3 samengevat:
7 6 1 1 1 6 4
-18»
TABEL
3
Vergelijkende proeven met 2 radiodiagnostische produkten voor leveronderzoek
Proef roet levende muizen % teruggewonnen activiteit
Orgaan
New England Nuclear
" m Tc-tin(ll)fytaat
(mat tin(ll)ehlorlds)
(met tln(ll)oxalaat)
Lever
81,7
90,5
Milt
2.4
3,6
Ingewanden
2,3
1,3
Mieren
2,0
0,5
Hart
0,5
< 0,1
Longen
3,7
<0,1
Geraamte
7.5
4,0
% Binding
94,2
> 99
VOORBEELD IX
' -
Op de in Voorbeeld VII beschreven wijze werd het ala produkt verkregen kolloied met 3 cm3 verdund
Tc (30mCi
Tc)
gereconstitueerd en 1 uur in een autoclaaf verhit» Plan verkreeg betere resultaten door met 0,5 cm3 zoutoplossing te reconstitueren en 1 uur in een autoclaaf te verhitten. Het in de autoclaaf verhitte 99m produkt werd vervolgens met 3 cm3 verdund Tc gemerkt» Het bleek, dat men een kleiner kolloied verkreeg, naarmate het volume, dat in ds autoclaaf werd verhit kleiner was» Het verdient derhalve de voorkeur het kolloied pas dan te merken als het in de autoclaaf verhit is geweest, te meer daar het verhitten van een radioactieve oplossing bssmettings- en atralingsproblernen kan veroorzaken» In onderstaande TABEL K zijn de resultaten van da vergelijkende dierproef samengevat»
7 6 1 1 1 6
4
«19—
TABEL
K
Vergslljklngaproef met tln(ll)oxalaat-natrlumfytaet als het op
2 verschillende manieren In een autoclaaf wordt verhit. Olerproef met muizen % totale activiteit Gereconstltueerd met 3 cm3 Tc en vervolgens 1 uur
in een autoclaaf verhit
Gereconstltueerd met 0,5 cm3
zoutoplossingen en vervolgens 1 uur in een autoclaaf verhit
Orgaan Lever
79,5
54,4
Milt
2,5
1,4
15,7
37,4
Ingewanden
1,2
3,7
Mieren
0,5
1,5
<0,1
0,2
;
0,5
1,4
|
Lichaam
Hart
Longen
%
" m T c binding
^
99 %
VOORBEELD X Volgens ds in Voorbeeld VII beschreven werkwijze voor het bereiden van tin(II)oxalaat-natriumfytaat kolloled werden enigs aanmaken bereid® Bij 1 van deze aanmaken werd het kolloled met 0,5 cm3 zoutoplossing gereconstltueerd en 1 uur in een autoclaaf verhit. Vervolgens werd 3 cm3 verdund
toegevoegd, waarna 1,0 cm3 in
een konijn werd geïnjecteerd» Een uur later werd het konijn gedood en werd het dijbeen ontleed» Het beenmerg werd afgescheiden door het foot irt ylo&Jfoero nHkot^f ia f«owrjdt>/t?ft on liat; af i;0 to^o»^ mdij*,b buide sihdeh vsn hst dijbeen weten
v&t»ljfte?rl
.
hnttttm
w&i-rJ vnn bsfc
beem en van het beenmerg de radioactiviteit bepaald en op basis van het gewicht berekend, waarbij een verhouding beenmerg s been ® 7 $ 1 werd verkregen. Bij een herhaling van da proef mat een tweede aanmaak werd een verhouding beenmerg i been * 12 s 1 verkregen»-
1
1
6
4
-20-
Bij een derde aanmaak ward het kolloied mat 0,5 cm3 zoutoplossing gereconstitueerd en 1 uur in een autoclaaf verhit, 99m Na 72 uur werd 3,0 cm3 verdund Te toegevoegd, waarna een dierproef tnet muizen werd gedaan» Het produkt bleek na in de autoclaaf te zijn verhit buitengewoon stabiel te zijn, 0e resultaten van de dierproef zijn 8amengeval in TABEL L. TABEL l
Stabiliteit van Tin(ll)-oxalaat-Hatriuaifytaat na verhitting in een autoclaaf.
Dierproef op muizen Orgaan
% totaal activiteit x)
Lever
60,0
Rilt
1,6
Lichaam
32,0
Ingewanden
3,7
Nieren
1,7
Hart
'
0,1
Longen
-1,0
x) Gemiddelde van 2 muizen, opneemtijd 1 uur
Chromatografi8che analyse
«—» 99$ gevonden
Bij een vierde aanmaak werd het kolloied met 0,5 cm3 zoutoplossing gereconstitueerd en gedurende verschillende tijden in een autoclaaf verhit. In onderstaande TABEL PI ziet men de resultaten van de dierproef 1 uur na de injectie, als het materiaal respectievelijk 1, 4,5 en 9 uur in de autoclaaf verhit was geweest.
- - -17 6 1 1 1 6 4
TABEL «
Uitwerking van da verhittingstijd In da autoclaaf op tin(ll)oxalaat-natrlurofytaat
Dierproef op muizen % totale actlvitalt Verblijfstijd in de autoclaaf 1 uur
4,5 uur
9 uur
54,5
38,5
53,3
1*4
0,9
1.3-
37,4
49,0
35,3
Ingewanden
3,7
5,7
6,1
Nltiroft
1,0
3,-0
M
Hart
0.2
M
M
Longen
1,4
2,4
1,6
Orgaan Lever Milt Lichaam
Chronatografisohe Analyse Tc binding
99%
/•>-» 99%
VOORBEELD XI men bereidde óp de in Voorbeeld VII beschreven wijze een aantal monsters tin(lï)oxalaat-natriumfytaat kolloied. Hat kolloied werd met 0,5 cm3 van een zoutoplossing gereconetitueerd en vervolgens één uur bij 121°C en 1,05 atm. in een autoclaaf verhit. Bij onderzoek onder de microscoop bleek het kolloied geen deeltjes, die groter dan ongeveer 5 micron zijn, ts bevatten. Bovendien bleek het niet-giftig an pyrageenvrij te zijn. Bij analyse : van het tln(ll) in de in het autoclaaf verhitte kolloied bleek tevens dat het gehalte aan tin(ll) in do in de autoclaaf verhitte monsters gelijk was aan dat van de niet in de autoclaaf verhitte kolloiedmonsters. Tijdens het verhitten in de autoclaaf trad geen oxydatie op. Hen deed een vergelijkende proef met twee produkten, die
7 6 1 1 1 6
4
«22»
natriumfytaat an tin(ll)chloride omvatten» welke produkten van New England Nuclear, Radiopharmaceutical Division, Atomlight Place, North Bellerica, Massachusetts 01862 en Diagnostic Isotopes, Ins. 123 Pleasant Avenue, Upper Saddle River, New Jersey 07458, kunnen 5
worden betrokken. Beide produkten werden met 0,5 cm3 van een zoutoplossing gereconstitueerd en 1 uur in de autoclaaf verhit om ze !
:
met hst tin(ll)fytaat kolloied volgens de uitvinding, waarbij tin(lï}'oxalaat wordt gebruikt, te vergelijken. Hen gebruikte ter vergelijking een monster van bovenbeschreven aanmaak, die bereid
10
was uit in de autoclaaf verhit tin(Il)fytaat kolloied, waarbij tin(il)oxalaat was gebruikt. De beide produkten, die tin(ïï)chloride bevatten, werden tijdens het verhitten in de autoclaaf afgebroken en kregen een 99m gele kleur. Er was geen Tc gebonden en bij een proef met muizen
15
bleek, na sen opneemt!jd van 1 uur een hoog percentage in de ingewanden te zijn opgenomen, hetgeen op vrij pertechnetaat wijst. Men deed een tweede proef met het door Diagnostic Isotopes, Ind. in de handel gebrachte produkt, waarbij voor het verhitten in de auto-
20
claaf een equivalente hoeveelheid natriumoxalaat aan de fiool werd 99m 1 toegevoegd. Er was geen Tc gebonden, hetgeen erop wijst, dat het tin(ll) als oxalaat aanwezig most zijn om een radiodiagnosticum volgens ds uitvinding te verkrijgen. De resultaten van de vergelij: king met de béide in de handel verkrijgbare produkten worden in onderstaande tabel N vermeld*
25
TABEL M Vergelijking van i n d e autoclaaf verhit tin(II Fytaafc, waarbijffin(7l7pxalaat'isgebruikt met produkten, die tin(llJchloride bevalTênr^ " Proef roet levende muizen
30
% totale activiteit Orgaan
NCW produkt
DsI* produkt
Lever
54,5
12,4
9,6
Milt
1,4
0,5
0,4
37,4
41,5
34,9
3,7
43,0
51,6
Lichaam 35
Tin(ït)oxaXaat
Ingewanden
7 8 1 1 1 6 4
«•23»*
Tabel N (vervolg) Orgaan
NEW produkt
Tln(ll)oxalaat
Oȕa produkt
Nieren
1,5
1,6.
2,1
Hart
0,2
0,3
0,3
Longen
1,4
0,8
1.0
Chromatografiacha
Analyse % " m T c binding
0%
^ 99%
VOORBEELD XII
Men bereidde op de in Voorbeeld XI beschreven wijze een in de autoclaaf verhit tin(ll)fytaatmonster, dat met " r a Tc werd gemerkt* Men deed een bloedclearanceproef van 24 uur bij muizen, waarbij het in de autoclaaf verhitte monster werd gebruikt® Elke muls ward met 0,2 cm3 die 1,70 mCi " m T e bevatte, ingespoten. De resultaten zijn gelijk aan die welke met niet^Se autoclaaf verhit tin(n)oxalaat-natriuiiifytaat kolloied volgens Voorbeeld V werden verkregen en worden in onderstaande tabel 0 vermeld.
TABEL 0 Bloedclearance met in de autoclaaf verhit
QQm
Tc tln(ll)oxalaat-natriumfytaat bij muizen.
Opneemtijd
% van geïnjecteerde activiteit in het
bloed 30 minuten
3,0
1 uur
1,7
2 uur
2,0
3 uur
1,3
4 uur
1,8
6 uur
1,6
24 uur
0,6 Bovendien werd de verdeling in de organen versus de tijd
met het in de autoclaaf verhitte monster bepaald* Elke muis werd met 0,2 cm3 van het produkt ingespoten en na verschillende tussenpozen werden de muizen gedood en werd een proef gedaan. Na 24 uur
7611164
«24»
ia het kolloied nog in de lever aanwezig» hetgeen overeenkomt met 99m een
Tc-zwavelkolloied. Oe resultaten worden in onderstaande
TABEL P vermeld.
7 6 1 1 1 6 4
TfiBEL P 4 o> V e r d e l i n g van i n een a u t o c l a a f v e r h i t T i n ( I I ) o x a l a a t - N a t r i u m f y t a a t v e r s c h i l l e n d e organen van muizen*
•J^ISFE
K o l l o i e d o v e r da
€?>
D i e r p r o a f mat muizen % Activiteit
Dpnaemtijd 30 1 2 3 4
minuten UUP uur uur
Longen
Nieren
Hart
Ingewanden
1,3 1,4 1,3
1,4 0,7 0,6
1 2,1 2,4
0,2
3,3
37,0
0,0
3,5
30,8
0,0
26,9
1,3
0,6
30,0
1,7
0,5
1,8
0,0 0,1
3,3 3,6 3*8
0,9
0,6
0,1
3,3
32,7
1,3
0,8
2,1 1,3
0,1
2,3
21,0
Lever
Wilt
53,8 61,7
UUP
65,1 S3 s 0 62,1
6 uur 24 uur
60,3 73,5
x)
x) Gemiddelde van 2 muizen
Geraamta
30,1
«26»
Kan bepaalds de urineclearance b i j muizen roet aen ander monster van i n de a u t o c l a a f v e r h i t
tin(ll)oxalaat-natriumfytaat
kolloied* Plen s p o o t 5 muizen i n en o n d e r z o c h t deze o v e r een p e r i o d e van 24 u u r . U i t de vermelde r e s u l t a t e n b l i j k t » d a t ds u r i n e » clearance v e e l s n e l l e r plaatsvindt b i j g e b r u i k van het i n de a u t o claaf verhitte tin(ll)oxalaat-natriumfytaat kolloied dan b i j g e b r u i k van een n i e t i n de a u t o c l a a f v e r h i t produkt. Ds r e s u l t a t e n worden i n o n d e r s t a a n d e t a b e l Q v e r m e l d .
TABEL
Q
Urine-clearance van i n de autoclaaf verhit ^ïï^lTJïïxaTaat-natriumfytaat.
Tijd na het inspuiten ^^^^^^^^^ 30 minuten
% van geïnjecteerde activiteit afgescheiden 8,9
1 uur
20,4
2 uur
27,3
3 uur
30,0
4 uur
31,8
24 uur
42,5 Plen verhitte nog een monster van het op bovenbeschreven
wijze bereide tin(lI)oxalaat-natriumfyteat kolloied in de autoclaaf 99(0 met 0,5 cm3 van een zoutoplossing. Men voegde 6 cm3 Tc van een hoge concentratie toe (30 mCi/cm3). De met een proef bij muizen verkregen resultaten kunnen worden met die van de voor» , 99vergeleken (i) beelden XI en XII en ongeveer 99% Tc was gebonden. 99m Hieruit blijkt, dat Tc met grote activiteit en 6 cm3 toegevoegd volume met het radiodiagnosticum voor beenmergonderzoek volgens de uitvinding bevredigende resultaten geeft. VOORBEELD X I I I Men r e c o n s t i t u e e r d e twee m o n s t e r s van h s t i n Voorbeeld VII b e r e i d e t i n ( l l ) o x a l a a t - n a t r i u m f y f c n a t met 0 , 5 om3 van &t>n zoutoplossing, waarna deze een uur in de autoclaaf werden verhit. Den voegde aan een monster 6 cm3 pertechnetaat van hoge concentratie
7 6 1 1 1 6 4
«27-
tea sn aan h s t andara monster 3 cm3 pertechnetaat van geringe conc e n t r a t i e * Nadat een en a n d e r r e s p e c t i e v e l i j k 24 uur en 1 uur had g e s t a a n , deed men met b e i d e m o n s t e r s proeven mat m u i z e n . Ma 24 uur daalde h s t parcentage gebonden " m T c van rasor dan 99% t o t 915?. Dit wordt ook aangegeven door de proef, waaruit blijkt, dat de door de Ingewanden opgenomen activiteit in 24 uur grote? i s . Het prapa»» raat verschaft echter nog een bevredigend middel voor besnmargonderzeek. De resultaten worden in TABEL R vermeld. TABEL R Stablllteifcsproef van 24 uur met In de autoB l a a f ^ v e r K l ' t ' ' t i n ('II) o x a l a a t - n a l r l u m T y l a a ^ » Proef met muizen x) % van totale activiteit 3cr»3 Tc04" 1 uur staan
Orgaan
6cm3 Te04** 24 uur staan
Lever
56,6
48,7
Milt
1»?
2,7
35,4
39,7
Ingewanden
3,7
5,7
pilaren
1-,5
- 2,0
Hart
0,1
0
Longen
1,2
1,3
Lichaam
K) Gamiddelde van 2 muizen, opneemtijd 1 uur % " m T c geoonden
>99*
91,
VOORBEELD XIV Men reconstitueerde versoheidene fiolen met tin(ll)oxalaat-natrlumfytaat kolloied, dat op de in Voorbeeld VII beschreven yijza was bereid met 0,5 cm3 van een zoutoplossing, waarna zij een uur in esn autoclaaf werden verhit. Gedurende 7 dagen werd per dag 99m één fiool beproefd door 3 cm3 Tc van geringe concentratie toe te voegen en een biologische proef met muizen te doen. In alle gevallen bleef het percentage gevonden ^ m T c groter dan 99% en kon hst r e a g e n s een bevredigend middel voor baenmergonderzoek zijn.
7 1 1 1 1 6
4
-28<
Een verbruiker zou v e r s c h i l l e n d e f i o l e n van h s t fcin(ll)oxalaatn a t r i u m f y t a a t aan h e t b e g i n van een week i n de a u t o c l a a f
kunnen
v e r h i t t e n en g e d u r e n d e tenminste 7 dagen d a g e l i j k s een f i o o l kunnen g e b r u i k e n . De r e s u l t a t e n worden i n onderstaande TABEL S vermeld® i TABEL S
I
Proef van 7 dagen met i n de autoclaaf verhit a l s mXHcfH voor beenmergonderzóek t e gë'Bruïken Hn(II)ox1araal-natriumfytaaE
;
!
Proef roet muizen x)
!
% van totale activiteit
j
T i j d na verhitten i n autoclaaf (dagen) j 6
7
68,5
66,8
67,2
2t2
1,8
ï,2
1,5
30,3
26,2
24,4
26,1
24,8
Ingewanden
3,9
3,6
3,3
3,6
3,8
Nieren
2,2
1,6
1,6
1,4
2,2
Hart
0,1
0,2
0,0
0,1
0,0
Longen
0,8
0,9
0,5
0,9
0,5
1
2
60,9
65,4
1,8
Orgaan Lever Kilt Lichaam
3
•
x) gemiddelde van 2 muizen, opneemtijd 1 uur. VOORBEELD XV Pien reconstitueerde verscheidene fiolen met volgens de in Voorbeeld VII beschreven werkwijze bereid tin(IIJoxalaat-natriumfytaat kolloied met 0,5 cm3 van een zoutoplossing en verhitte deze 1 uur in een autoclaaf. Om de invloed van volume en totale activi99m teit te beproeven, spoot men in 4 fiolen 1,2, 4 en 5 cm3 Tc van geringe concentratie (10 mCi/cm3). Vervolgens deed men een 99tn proef met muizen. Bij een hoeveelheid van 1 cm3 bleek weinig Tc te zijn gebonden, hetgeen erop wijst, dat de minimaal te gebruiken hoeveelheid pertechnetaat ten minste ongeveer 2 cm3 dient ts zijn. Hen kan tot 50 mCi ^ m T c activiteit zonder uitwerking toevoegen. De r&uult&t&n VÖH de b i o l o g i s c h e p r o e f « e t muizan worden i n u n d o r a t a a n d e fcabal T v e t m s l d .
7 6 1 1 1 6
4
-29-
TABEL
T
I n v l o e d van hoeveelheid pertechnetaat op tln(ll)oxaTaat-natriuwiFytaat voor beenmergcmderzoek Proef met muizen x) % van t o t a l e
activiteit
Toegevoegd volume van garing© c o n c e n t r a t i e " m T c (cm3) Organen
2
4
.5
71,6
70,7
68,7
65,7
2,2
1,5
1,6
1,9
22,2
23,3
23,7
25,8
Ingewanden
2,6
2,6
3,6
3,8
Nlarun
0,9
1,2
1,7
1,8
Hart
0,0
0,1
0,1
0,1
0,5 86 %
0,6 >99 %
0,7 >99 %
1,0 >99 %
1
Lever Milt Lichaam
Longen 99m <£ Tc gebonden
x) Gemiddelde van 2 Kulzenj opneerotijd 1 uur. VOORBEELD XVI Men r e c o n s t i t u e s r d e een aantal fiolen met drooggevroren tin(ll)oxalaat-natriumfytaat kolloied, d a t volgens de w e r k w i j z e van Voorbeeld VII was b e r e i d mat 0 , 5 cm3 van een zoutoplossing waarna b i j verschillende drukken en gedurende verschillende tijden QQm i n de autoclaaf werd verhit. De produkten werden met Tc gemerkt, waarna na aan opneemt!jd van 1 uur een proef met muizen werd gedaan. Naarmate de druk en de temperatuur van de a u t o c l a a f hoger waren, was de opneming in het lichaam overeenkomstig hoger. In alle gevallen bleef meer dan 99% gebonden. De karakteristiek toegepaste geraiddeib drukken zijn ongeveer 1,12 atm* Bij een verblijf in de autoclaaf van ongeveer 2 uur verkreeg men dezelfde werking, d.w0z. een groter opneming door het lichaam. Een grote opneming door het lichaam w i j s t op asn verhoogde opneming door h e t beenmerg, wanneer geen vrij pertechnetaat aanwezig is. De resultaten van de proef met muizen worden in o n d e r s t e a n d e TABEL U vermeld.
7611164
-30»
TABEL U I n v l o e d van de duur van h e t verhitten i n de au t o c l a"af~êrTvan d "e" ""d r uk" op t i n (j l') oxalaat> natriumfytaat» Proef met muizen % van t o t a l e activiteit Tijd
Lever en
Nieren en
(uur)
milt
ingewanden
Oruk(atm)
Lichaam (organen verwijderd)
1 j)ö5 (121°C)
1
76,3
4,4
18,3
1,05
1
74,4
4,2
20,8
1,4
(126°C)
1
60,4
4,8
33,9
1,54
(127,8°C) 1
61,6
6,6
30,7
1,68
(124°C)
1
64,6
4,7
30,0
1,12
(122°C)
2
54,5
7,4
36,0
2
59,2
6,3
33,4
1,12
l
VOORBEELD MM 1..••• • •••• XVII rtmnua
i
Plen recon8titueerde v e r s c h e i d e n s f i o l e n met v o l g e n s de i n Voorbeeld VII b e s c h r e v e n w e r k w i j z e b e r e i d drooggevroren tin(ll)oxalaat-natriumfytaat k o l l o i e d met 0,5 cm3 van een z o u t o p l o s s i n g ,
:
waarna 2 uur b i j een druk van 1,05 atm in de autoclaaf werd verhit* Man deed een proef met muizen, waarvan de resultaten laten zien, dat h e t in de autoclaaf verhitte kolloied ten minste 8 dagen zou
i
kunnen worden gebruikt. De resultaten worden in onderstaande tabel V vermeld* TABEL V Proef mat in d» autoclaaf verhit x) tln(ll)«« öxalaat-naTrlïïmTytaat als mlddol^oot baanmergondarzbek"'(g'o'dursnde 8 dagen) """" Proef met muizen xx) %' van totale ' '" I—WIL»activiteit II1IIIH 1.1 I . I Tijd na v e r h i t t e n i n autoclaaf(dagen) Organen Lever
milt 7 6 1 1 1 6
1
4
5
6
7
8
66,8
55,4
61,8
64,9
59,7
54,3
1,4 4
: 1,6
1,4
. 1,8
1,9 ,
1,8 •
-%
-.31—
Tabel V (vervolg) Orgaan
4
5
32,8
29,6
1 26,7
Lichaam
7
8
27,4
30,8
34,4
6
Ingewanden
3,3
6,6 .
4,0
3,5
4,2
5,4
Nieren
1,2
2,6
2,0
1,8
2,6
3,0
Hart
0,1
0,2
0,1
0,1
0,1
0,2
Longen
0,5
0,7
1,0
0,6
0,7
0,8
x)
Gedurende 2 uur b i j 1,05 atnu i n de a u t o c l a a f
xx)
Gemiddelde van 2 muizen, opneemtijd 1 u u r
verhit
Chromatografi8che analyse - meer dan 99% gebonden» VOORBEELD XVIII Hen rsconstitueerde v e r s c h i l l e n d e f i o l e n met drooggevroren tin(II)oxalaat-natriumfytaat reagens, dat v o l g e n s de i n
Voorbeeld
V i l b e s c h r e v e n w e r k w i j z e waa b e r e i d met 0,5 cm3 van een zoutoplossing, waarna 2 uur b i j l , 0 5 atm. in de autoclaaf werd verhit» ffionsters
Ds
werden d a a r n a nogmaals drooggevroran sn beproefd door per-
technetaat toe te voegen en na een opneemtijd van 1 uur een p r o e f mat muizen te doen» De resultaten tonen aan, dat ds in de autoclaaf v e r h i t t e sn nogmaals drooggevroren monsters nog een bevredigend middel voor beenmergzonderzoek zouden z i j n j zij worden in onderstaande TABEL W vermeld. TABEL li> Proef met drooggevroren in de autoclaaf v~Brhlirtin (II )-oxalaat'-hatriumf y taat Orgaan
Proef met muizen % van totale activiteit
Lever Milt Lichaam
66,8 1,6 24,4
Ingewanden
4,4
Nieren
2,0
Hart
0,2
Longen
0,7
Chroaatografischa analyse
i G 1 1 1 fi A
/ 99 % gebonden»
-32-
VOORBEELD XIX Hen bereidde op de in Voorbeeld VII beschreven wijze sen aanmaak tin(II)oxalaat-natriumfytaat. De gehele oplossing van 250 cm3 werd daarna 2 uur in een hermetisch gesloten fiool onder een stikstof in een autoclaaf varhit» Deze oplossing werd naar serumfiolen overgebracht en drooggevroren» Het produkt werd vervolgens rast :3,0 cm3 " m T e gereconstitueerd en door middel van een proef met muizen na een opneemtijd van 1 uur en aan de hand van chromatografie beoordeeld» Uit demresultafcen blijkt, dat een en ander een bevredigende bsenmergdiagnosticum is? de resultaten worden in onderstaande tabel X vermeld»
TABEL X Proeven met in de autoclaaf in een grote F^Tviêlïïêld verhit tin(II)oxalaat-natriumfytaat Orgaan
van totale activiteit
Lever
73,8
Kilt
2,0 19,4
Lichaam Ingewanden
2,4
Nieren
1,2
Hart
0,1
Longen
1.0
Chromatografische analyse
^ 9 9 % gebonden
VOORBEELD XX Fiolen met volgens de in Voorbeeld VII beschreven werkwijze bereid drooggevroren tin(II)oxalaat-natriumfytaat werden respectievelijk 224 dagen bij 40°C en 225 dagen bij 70°C opgeslagen» Monsters van deze opgeslagen fiolsn werden zowel door chromatografische analyse als door proeven met muizen na een opneemtijd van 30 minuten beoordeeld. Door het lichaam werd van da bij 70°C opgeslagen monsters meer opgenomen en er was nog steeds meer dan 99%
Tc gebonden. De resultaten worden in onderstaande TABEL Y
7 6 1 1 1 6 4
—33—
vermeid. TABEL Y Versnelde houdbaarheldsproevsn met
tin (I I )oxalaat-nai'trï»mf y taat »'"
"
Proef met muizen % van totale activiteit
Orgaan
224 dagen opgeslagen bij 40 C
225 dagen opgeslagen bij 70 C
Rilt
3,9
68,6 1,6
Lichaam
5,0
26,2
Ingewanden
1.2
2,2
Kieren
0,5
1,2
Hart
0
0
Longen
0
0,2
Lsvsr
89,2
Chromatografische
">99 %
>99 % VOORBEELD XXI
Plen reconstitueerde monsters van het volgens de in Voorbeeld VII beschreven werkwijze bereide tin(ll)oxalaat-natriumfytaat met 0,5 cm3 van een zoutoplossing, waarna 2 uur bij 1,05 atm. in de autoclaaf werd verhit. Vervolgens werden de monsters door chromatografische analyse en door een proef met muizen (opneemtijd 1 uur) beoordeeld, nadat 3,0 cm3
Tc was toegevoegd.
Verschillende fiolen werden achtergehouden om 84 dagen daarna te worden onderzocht. Nadat het vooraf in de autoclaaf verhitte tin(ll)oxalast-natriumfytaat 84 dagen was opgeslagen geweest, waren de resultaten bevredigend vergeleken met die, welke werden verkregen met tin(ll)-fytaatreag8ns, dat na 4 dagen werd beproefd» De resultaten worden in onderstaande tabel Z vermeld*
7611164
-34-
TABEL Z Houdbaarheldsproef met vooraf in de^iTtocla^rYerhl t fyt*sat " ""*" Proef met muizen 5
% van totals activiteit Orgaan
Na 4 dagen opslag 55,4
54,4
Hilt
1,6
2,0
Ingewanden
6,6
5,4
Nieren
2,6
3.4
Hert
0,2
0,1
Longen
0,7
1.5
32,8
33,2
Lever
10
Na 84 dagen opslag
Geraamte VOORBEELD XXII 15
Flen bereidde op ds in Voorbeeld VII beschreven wijze monsters tin(Iï)oxalaat-natriumfytaat, behoudans dat ds natriurafytaatconcentratie 0,1-20 mg/cm3 bedroeg, voordat werd drooggevroren. Men beproefde monsters van het uiteindelijke preparaat met en zonder verhitten in de autoclaaf. Het percentage, dat door het
20
beenmerg wordt opgenomen, wordt vastgesteld door de door het lichaam opgenomen hoeveelheid na te gaan. Wanneer geen niet-geggm
bonden
Tc aanwezig is, wordt aangenomen, dat ds activiteit
in het beanderstelsel of in het beenmerg zit. De resultaten (1 uur opneemt!jd) van de gedane proeven wijzen erop, dat over de gehele 25
beproefde reeks niet meer door het lichaam werd opgenomen® De resultaten worden in onderstaande tabel 21 vermeld.
7 6 1 1 1 6 4
-35-
TABEL ZZ Invloed van het gehalte aan natriumfytaat op de opneming door het beenmerg»
% door lichaam opgenomen Natriurafytaat
in autoclaaf
niet in autoclaaf
conc» (mg/cm3)
verhit
verhit
0,1
4,6
11,6
1,0
8,0
26,8
a
2.5
15,8
20
4.6
15,0
Het zal deskundigen duidelijk zijn, dat boven gegeven voorbeelden van de uitvinding slechts ter toelichting dienen en niet om d a omvang hiervan te beperken»
7 6 1 1 1 6 4
-36»
C o n C1 U 3 1 B 8 1®
Stabiele, niet-radioactieve drager met een pH van ongeveer 99m 3 - 7 , welke drager, als hij met Tc Is gemerkt, voor leveronder-
zoek kan worden gebruikt, met het kenmerk, dat genoemde drager natriumfytaat en met oxalaat gecheleerde tin(ll)ionen omvat, waarbij ds gew» verhouding van genoemd fytaat i chelaat ten minste ongeveer ; {
1 i 1 is» 2.
Drager volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat genoemde
verhouding tenminste ongeveer 3 : 1 is» 3.
Drager volgens conclusie 2, met het kenmerk, dat genoemde
verhouding tenminste ongeveer 13 : 1 is* 4.
|
Drager volgens conclusie 2, «net het kenmerk, dat genoemde
verhouding ongeveer 3 : 1 - ongeveer 20 : 1 is en dat genoemde pH ongeveer 6 is* 5»
Stabiele, niet-radioactieve drageroplossing met een pH
van ongeveer 3 - 7 , welke oplossing na in een autoclaaf te zijn 99ns
verhit en met
Tc te zijn gemerkt, geschikt is ora voor beenmerg-
;
onderdoek te worden gebruikt, met het kenmerk, dat zij natriumfytaat, met oxalaat gecheleerde tin(ll)ionen en een waterhoudende oplossing omvat, waarbij de gewichtsverhouding van genoemd fytaat : genoemd chelaat ten minste ongeveer 1 : 1 is* 6*
Werkwijze voor het bereiden 99m van sen stabiele, niet-radioactieve drager» dis, als hij met Tc is gemerkt, voor leveronderzoek kan worden 99m gebruikt en die, als hij in een autoclaaf la verhit en mat
Tc is gemerkt, voor beenmergonderzoek geschikt
is, met het kenmerk, dat genoemde werkwijze de volgende trappen omvat: men lost een eerste vooraf bepaalde hoeveelheid natriumfytaat in een waterhoudende oplossing op, die geen meegesleepte zuurstof bevat, waardoor een eerste oplossing wordt verkregen? men lost een tweede, vooraf bepaalde hoeveelheid tin(II) oxalaat in een niefc-oxyderend zuur op, waardoor een tweede oplossing wordt verkregen, met dien verstande, dat de gewichtsverhouding tussen genoemde eerste en tweede hoeveelheid tenminste ongeveer 1 : 1
is,
men brengt eerstgenoemde oplossing met genoemds tweede oplossing in aanraking, waardoor een derde oplossing pntstaat; en 7 6 1 1 1 6
4
men brengt de pH van genoemde derde oplossing op ongeveer 4 - 7. 7»
Werkwijze volgens conclusie 6» met het kenmerk» dat genoemd
niot-oxyderend zuur uit waterstofchloridezuur» azijnzuur» zwavelzuur en fosforzuur wordt gekozen en dat genoemde verhouding ten minste ongeveer 3 * 1 is. 8.
Werkwijze volgens conclusie 7» met het kenmerk» dat ge-
noemde verhouding ten minste ongeveer 13 t 1 is. 9.
Werkwijze volgens condusie 7» met het kenmerk» dat ge-
noemde verhouding ongeveer 3 t 1 - ongeveer 20 % 1 is» terwijl genoemde pH ongeveer 6 is en genoemd niet-oxyderend zuur waterstofchloridezuur is. 10.
Werkwijze volgens conclusie 6» met het kenmerk» dat men
bovendien de derde oplossing op een bepaalde concentratie brengt» 11.
Werkwijze volgens conclusie 10» met hetkenmerk» dat men
genoemde derde oplossing bij een temperatuur onder ongeveer 30°C aan vrieadrooing onderwerpt om een vaste stof ts verkrijgen» 12*
Werkwijze volgens conclusie 11» met het kenmerk» dat
genoemde derde oplossing bij een temperatuur tussen ongeveer
o
o
30 C en ongeveer - 10 C aan vriesdroging wordt onderworpen. 13.
Werkwijze volgens conclusie 12» met het kenmerk, dat men
genoemde drooggevroren vaste stof opnieuw in een waterhoudende oplossing 14.
oplost. Werkwijze volgens conclusie 6» met het kenmerk» dat men
genoemde derde oplossing bij gen temperatuur van ongeveer 116 -
o ongeveer 143 C, gedurende een tijdsverloop van ongeveer 1 uur ongeveer 6 uur onder een druk van ongeveer 0,7 - ongeveer 3,0 atn. in een autoclaaf verhit» zodat een kolloied wordt gevormd. 15.
Werkwijze volgens conclusie 14, neb het kenmerk, dat genoemde
autoclaaftemperatuur ongeveer 132°C, genoemds verblijfstijd in de autoclaaf ongeveer 2 uur en genoemde autoclaafdruk 2,0 atm. is» 16.
Werkwijze volgens conclusie 13, met het kenmerk, dat deze
voorts omvat} dat men genoemde opnieuw opgeloste oplossing bij een temperatuur van ongeveer 116 - ongeveer 143°C, gedurende een tijdsverloop
761f
f
6 4
-38-
van ongeveer 1 - ongeveer 6 uur en bij sen druk van ongeveer 0,7 ongeveer 3,0 atm» in aen autoclaaf verhit, waardoor een kolloied OSltstsEfc» 17» 5
Werkwijze volgens conclusie 16, met het kenmerk, dat ge-
noemde autoclaaftemperatuur ongeveer 132°C is, genoemde verblijfstijd in de autoclaaf ongeveer 2 uur en genoemde autoclaafdruk ongeveer 2,0 atm. ie»
180
Werkwijze volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat ge-
noemde darde oplossing met een hoeveelheid zoutoplossing van Na 10
99a
TcO. in aanraking wordt gebracht, die voldoende is om een met 4
39m
Te-gemerkt rsdiodiagnosticu» te vormen, dat geschikt is om voer leveronderzoek te worden gebruikt» 19. 15
Werkwijze volgens conclusie 13, met het kenmerk, dat ge-
noemde cpnieuus opgeloste oplossing met een hoeveelheid zoutoplossing §9m
van Na
TcO. in aanraking wordt gebracht, die voldoende is om een 4
99m
met
Tc-gemerkt radiodiagnosticum te vormen, dat geschikt is om
voor leveronderzoek te worden gebruikt»
20
20» liierkwijze volgens conclusie 14, met het kenmerk, dat genoemd in de autoclaaf verhit kolloied met een hoeveelheid zout» oplossing van Na 99raTcO. in aanraking wordt gebracht, die voldoends 4 ggm is om een met Tc-gemerkt radiodiagnosticum te vormen, dat geschikt is om voor beenmergonderzoek te worden gebruikt»
25
21. Werkwijze volgens conclusie 16, met het kenmerk, dat genoemd in de autoclaaf verhit kolloied met een hoeveelheid zoutoplossing van Na 99mTcO. in aanraking wordt gebracht, dia voldoende 99m is om sen met Tc-gemerkt radiodiagnosticum te vormen, dat geschikt ia om voor beenmergonderzoek te worden gebruikt. 22»
Radiodiagnosticum dat geschikt is voor leveronderzoek en
aan pH van ongeveer 3 - ongeveer 7 heeft, net het kenmerk, dat 30
genoemd radiodiagnosticum natriumfytaat, met oxalaat gecheleerde tin(ll)ionen en een zoutoplossing van Na ' TcO^ omvat, waarin de gewichtsverhouding van genoemd fytaat : genoemd chelaat tenminste ongeveer 1 $ 1 is. 23.
35
99m Stabiel, niet radioactief kolloied, dat als hst met To
is gemerkt, geschikt is om voor beenmergonderzoek te worden gebruikt, 7 6 1 1f
64
«•39**
mat hat kenmerk, dat genoemd kolloied een in een autoclaaf verhit mengsel van natriumfytaat, met oxalaat gecheleerde tin(ll)ionen en een waterhoudende oplossing omvat, waarin de gewichtsverhouding van genoemd fytaat tot genoemd chelaat ten minste ongeveer 1 x 1
is,
welk colloied een deeltjesgrootte van minder dan ongeveer 1 micron
heeft» 24.
Radiodiagnostisch kolloied, dat geschikt is voor beon-
mergonderzoek en een pH van ongeveer 3 - ongeveer 7 heeft, met h s t kenmerk, dat genoemd kolloied natriumfytaat, met o x a l a a t gecheleer-
.
.
de tin(II)ionen en een zoutoplossing van Na
99m
TcO^ omvat, waarin de
gewichtsverhouding van genoemd fytaat tot genoemd chelaat ten minste ongeveer 1 i 1 is, welk kolloied een deeltjesgrootte van minder dan ongeveer 1 micron heeft.
7 61116 4
