SANGUI-VET® ÁLLATORVOSI KLINIKAI LABORATÓRIUM 1135 BUDAPEST, LEHEL ÚT 43. • TEL./FAX: (06-1) 239-4736, 329-7017/154 LELETÉRTELMEZÉS: 06-30/961-5812 • MINTASZÁLLÍTÁS: (06-1) 239-4736 SÜRGÔSSÉGI SZÁLLÍTÁS: 06-20/983-3822 NYITVATARTÁS: H–P: 8.00–21.00H-IG, VAS: 9.00–14.00H-IG (FOLYAMATOS MINTAFELDOLGOZÁSSAL)
Dr. Szilágyi Attila ♦ HEMATOLÓGIAI ♦ KLINIKAI
VIZSGÁLAT
(BIOKÉMIA)
KÉMIA
♦ SZEROLÓGIAI VIZSGÁLATOK (KUTYA, MACSKA) FELV, FIV, FIP, TOXOPLASMA, LYME-BORRELIOSIS, EHRLICHIA, ANA, RHEUMA-FAKTOR, STB. ♦ KLINIKAI
MIKROBIOLÓGIA
♦ PARAZITOLÓGAI
VIZSGÁLATOK
♦ ANYAGFORGALMI ♦ GYÓGYSZERSZINT
SANGUI-VET® ÁLLATORVOSI KLINIKAI LABORATÓRIUM 1135 BUDAPEST, LEHEL ÚT 43. TEL./FAX: (06-1) 239-4736, 329-7017/154 LELETÉRTELMEZÉS: 06-30/961-5812 MINTASZÁLLÍTÁS: (06-1) 239-4736 SÜRGÔSSÉGI SZÁLLÍTÁS: 06-20/983-3822
VIZSGÁLATOK MEGHATÁROZÁS
♦ HORMONVIZSGÁLATOK ♦ KRÓNIKUS
BETEGEK ÁLLAPOTFELMÉRÉSE, MÛSZERES ÉS LABORATÓRIUMI VIZSGÁLATOKKAL.
A laboratóriumi eredmények 24 órán belüli megadása! Sürgôsségi esetekben a vérvizsgálati eredmények megvárhatók.
NYITVATARTÁS: H–P: 8.00–21.00H-IG, VAS: 9.00–14.00H-IG (FOLYAMATOS MINTAFELDOLGOZÁSSAL) HONLAP: WWW.SANGUIVET.HU E-MAIL:
[email protected] [email protected]
SEGÉDLET A LABORATÓRIUMI EREDMÉNYEK ÉRTÉKELÉSÉHEZ
2003
TARTALOMJEGYZÉK
BEVEZETÔ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 4 MINTAVÉTEL, MINTAKÜLDÉS . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6 A MINTÁK LABORATÓRIUMBA VALÓ SZÁLLÍTÁSA . . . . . . 10 Laboratóriumi vizsgálati kérdések . . . . . . . . . . . . . . . . 12 Ascites . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 Hasi fájdalom . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14 Krónikus hasmenés . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16 Anaemia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 Polyuria, polydipsia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 Mellékvesekéreg hyperfunkció . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 Mellékvesekéreg hypofunkció . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 22 Oedema . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 26 Icterus, Alopecia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 28 Neurológiai tünetek, Haematuria-Haemoglobinuria . . . . . . 30 Hányás/Regurgitatio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31 Hypoxia, krónikus légzôszervi panaszok, Perzisztáló láz . . . 32 Krónikus hasmenés . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 33 Hematológiai rész . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 34 A rutin szerológiai vizsgálatok értékelése macskáknál, FeLV 42 Macskák immunhiányos betegsége (FIV) . . . . . . . . . . . . 43 Macskák fertôzô peritonitise (FIP) . . . . . . . . . . . . . . . . 44 Toxoplasma gondii-teszt, Ehrlichia canis . . . . . . . . . . . . 46 Babesosis, Lyme-borreliosis . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 47 Brucellosis teszt (kutya) Rheuma-faktor (kutya IgG, IgM) . . . . . . . . . . . . . . . . . 48 Antinukleáris Antitest titer (ANA-teszt) . . . . . . . . . . . . . 49 Parvovírus antigén kimutatása bélsárból (eb, macska, nyérc) Gyógyszerzsint monitorozás, Digoxin meghatározás . . . . . . 50 Phenobarbital, A C-reaktív protein (CRP) . . . . . . . . . . . . 51 Pajzsmirigy-funkció . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 52 Pajzsmirigy hormon ellenes antitestek, Progeszteron (P4) . . 54 Ösztrogén (ösztradiol-acetát), Kutya vemhességi teszt (Relaxin) . . . . . . . . . . . . . . . . 55 Az egyes szervi funkciókat jellemzô laboratóriumi paraméterek összefogalalása . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 56
B2
3
BEVEZETÔ
latot végzünk (hasi-szív UH, rtg) Az eredményeket 24 órán belül a kezelô állatorvosnak továbbítjuk fax, tel., e-mail útján. Ennek elônye, hogy egy idôben képet tudunk adni az adott betegség állapotáról, kezelésének lehetséges módozatairól.
Klinikai státusfelvétel lépései A színvonalas betegellátás érdekében, sok esetben nélkülözhetetlen egyes kiegészítô vizsgálatok elvégzése. A mûszeres vizsgálatok térhódításával (UH, EKG, CT, endoszkópia) párhuzamosan a laboratóriumi módszerek is fejlôdtek, mind a meghatározások gyorsaságát, mind a metodikákat illetôen. Az utóbbi években az állatorvosi laboratóriumi diagnosztika vizsgálati skálája is jelentôs mértékben bôvült és folyamatosan gyarapodik jelenleg is. A laboratóriumi vizsgálatok lehetôvé tették olyan elváltozások felderítését (pl. metabolikus zavarok), amely a klasszikus fizikális vizsgálati és képalkotó eljárásokkal közvetlenül nem diagnosztizálhatók. A laboratóriumi eredmények alapján számszerû adatokból megítélhetô egy-egy szerv funkcionális állapota. Egy adott szerv mûködésérôl akkor kapunk teljesebb képet, ha az adott szervre specifikus paraméterek eredményeit együtt értékeljük (un. „szerv-panelek”). Fontos hangsúlyozni, hogy a laboratóriumi eredményt, a részletes fizikális vizsgálat és (szükség esetén) a képalkotó eljárások által kapott információkat együttesen célszerû értékelni.
Klinikai vizsgálat
Laboratóriumi mintavétel Röntgen vizsgálat
Hasi és szív ultrahangos EKG vizsgálat vizsgálat (Echocard – dr. Vrabély Tamás)
Leletközlés
A laboratóriumi vizsgálat célja többféle lehet: • általános egészségfelmérô vizsgálat idôs állatnál, mûtét, vemhesítés stb. elôtt • szegényes fizikális lelet esetén, széleskörû laboratóriumi vizsgálat • adott szerv elváltozására utaló klinikai jelek esetén, szervspecifikus vizsgálat („szervpanel”) • a terápiát követô ellenôrzô laboratóriumi vizsgálat (prognózis megítélése). Az utóbbi években egyre nagyobb számban végzünk, un. statusfelvételt. Ez annyit jelent, hogy krónikus betegnél elôre egyeztetett – a tulajdonosnak is megfelelô – idôpontban vagy sürgôsségi esetben azonnal, részletes klinikai, laboratóriumi és mûszeres vizsgá-
4
5
MINTAVÉTEL
Az objektív eredményszolgáltatásnak elôfeltétele a minta szabályos, megfelelô eszközökkel történô vétele és az alvadásgátló helyes megválasztása. Ennek megkönnyítésére laboratóriumunk igény szerint mintavételi eszközökkel látja el a kollégákat. Az egyes vizsgálati irányoknak megfelelô alvadásgátlók a következôk:
A mintavételt követôen, a csöveket óvatosan forgassuk össze (minimum 10-szer!) az alvadásgátlóval, ezzel megakadályozzuk az alvadékképzôdést. Kanülbôl kerüljük a mintavételt, mert az alvadásgátló, infuzió stb. zavarja a vizsgálatokat, továbbá a Hematológiai eredményünk téves lehet. (pl. 2–3 nappal a kanülálást követôen az érintett érszakaszra fehérvérsejtek migrálódhatnak így a valósnál magasabb leukocytaszámot kaphatunk.) Hasonlóan hibás eredményre ve-
Hematológia (≈1 ml) Biokémia (≈2 ml) Véralvadás (1:9 arány) Szerológia (≈1 ml)
Bélsár parazitológia
Enziminhibítor /LiF/
Szérum
Na-citrát Csövön lévô jelig!
a.)
X X
X X
X
Gyógyszerszint (Digoxin, Barbiturát) Testûri folyadékgyülem Vérglükóz (≈1 ml)
Li-heparin
EDTA
Alvadásgátló
X
X X
X X Gyûjtött és friss minta egyidejû küldése (min. 20 g reprezentatív jellegû)
Mikrobiológia • Vizelet * Bélsár * Váladékok
6
Percutan hólyagpunkció min. 5 ml (steril fecskendôbe) Tranaszport táptalajba leoltva Tranaszport táptalajba leoltva
b.) A leggyakrabban használt mintavételi eszközök melyeket a laboratórium kérés esetén rendelkezésre bocsát.
7
zet, ha hematoma miatt beszûrôdött érszakaszon történik a mintavétel. A levett minta 4 °C-n egy napig tárolható. Szeparált vérplazma, mélyhûtôben –25 °C-n hosszabb ideig (max. 1 hét) is aggály nélkül eltartható. Hibás tárolás esetén az egyes enzimek aktivitása csökken, (felezési idô) ezért tévesen alacsonyabb értékeket kapunk. A glükózmeghatározáshoz kizárólag enziminhibítoros (NaF) vérvételi csöveket használjunk, és így másnap is objektív lesz a vércukor eredmény, mivel nem bomlik el. Ez az alvadásgátló enzimvizsgálatra NEM alkalmas, mivel nemcsak a glükóz-oxidázt, hanem más enzimeket is inaktivál, amelyeket mérni szeretnénk! A mikrobiológiai vizsgálatra vett mintákat transzport táptalajba leoltva szobahôn tartsuk max 48 óráig. Kis mennyiségû mintákat (kötôhártya, hüvely, stb. váladék) mindig transzport táptalajba leoltva érdemes vizsgálatra küldeni. Ha „érzékeny” kórokozóra van gyanúnk (pl. bélsárból Campylobacter jejuni tenyésztés) csak leoltott friss mintából érdemes elvégezni. Bôrkaparékok esetén több helyrôl vett szôrtüszôt is tartalmazó minta küldése tekinthetô reprezentatívnak,valamint cellux ragasztószalagos mintavétele is ajánlott. (Ragadozó atka fertôzöttség.)
A mintavételt követôen a minta pontos azonosítása érdekében az alábbiakat kérjük feltüntetni: • beküldô állatorvos neve, címe, tel., fax, e-mail száma • állat faja, kora, neme • a tulajdonos neve vagy kódszáma A laboratórium feladata, hogy a jelenleg rutinszerûen alkalmazott klinikai laboratóriumi vizsgálatok teljes körét kínálja fel az állatorvos kollégáknak. Speciális esetben lehetôség van, egyes ritkábban használatos vizsgálat elvégzésére is. (pl. barbiturát-szint beállítás epilepsziás esetekben, digoxin-szint meghatározás digitalizáláskor). A laboratórium által végzett vizsgálati irányok a következôk: Hematológia (mennyiségi és minôségi vérkép, sejtparaziták vizsgálata, retikulocytaszám stb.) Biokémia (egyes szervi funkciókra jellemzô enzim és metabolitok mennyiségi meghatározása) Szerológia (FeLV, FIV, FIP, ANA-teszt, Lyme-borreliosis, Ehrlichia canis stb., Rheuma-faktor stb.) Véralvadási vizsgálatok (APTI, PTI, TI, fibrinogén, FDP)
8
A Hematológiai vizsgálat keretében a mennyiségi vérkép meghatározása állatorvosi célra kifejlesztett (különféle állatfajokra kalibrált) automatán történik. (a.) A minôségi vérkép vizsgálatát mikroszkóposan, festett kenetek alapján végezzük, mivel ezidáig a kémiai úton elvégzett sejtdifferenciálás (neutrophil, lymphocyta stb.) állatorvosi vonalon nem tekinthetô hitelesnek, fôleg macskánál. (a.) Az állatokból származó minták hiteles kvalitatív vérképének meghatározása optikai lézeres sejtletapogatás (WOC) és az inpedancia (WIC) metodika kombinálásával lehetséges. 2004-tôl fogjuk bevezetni a neutrophil, lymphocyta, eosinophil, basophil, normobalstok, lyphoblastok, makrothrombocyta sejtek szétválasztását automatikusan végzô Cell-Dyn 3500-as hematológiai automatát (b.) kép). A biokémiai vizsgálatokat a nemzetközi ISO – szabványnak megfelelô Cobas Mira Plus (Hoffman-La Roˆche Diagnostic Division) biokémiai automatával végezzük. (Borító 2) A készülék óránként 140 biokémiai paraméter meghatározását teszi (a.) lehetôvé. A minta és a reagensadagolás automatikusan történik, amely kiküszöböli a kézi bemérésbôl adódó pontatlanságot. A kiugróan kóros minták esetében az analizátor automatikusan elvégzi a minták hígítását, ezzel is növelve a
9
meghatározás pontosságát. A gép mûködése lehetôvé teszi a sürgôsségi minták azonnali analízisét is. A laboratórium által megadott eredmények hitelességére nagy hangsúlyt kívánunk fektetni. A biokémiai paraméterek meghatározásakor kontrollszérumokat használunk kórosan alacsony, normál és kórosan magas tartományokban. Abban az esetben, ha az egyes paraméterek meghatározásakor mért értékek, a kontroll szérumokhoz mellékelt határértékeken belül találhatók, akkor a készülék és a metodika hiteles, a vizsgálati eredmények kibocsáthatóak. Errôl naprakész validálási jegyzôkönyvet vezet a laboratórium, melybe a megrendelôk is betekintést nyerhetnek. A laboratóriumi eredmények számítógépes nyilvántartó program segítségével archiválásra kerülnek, így késôbb akár évekre visszamenôleg is visszakereshetôk. Az eredmények közlése a mintaküldéstôl számítva 24 órán belül telefon, fax, e-mail útján, az írásos leletközlés a mintabegyûjtés keretében vagy postai úton történik minden esetben a kezelô állatorvosnak. A bakteriológiai eredmények 3 nap múlva közölhetôk (mikológiai tenyésztéses vizsgálat 7–10 napot vesz igénybe). A mikrobiológiai eredmények közlési idejét, az esetlegesen szükségessé váló dúsítási, passzálási vizsgálatok megnövelhetik. Ez a néha hosszúnak tûnô eredményszolgáltatás mindig a megrendelô érdekét szolgálja, mert sok esetben egy sor környezeti szennyezô flórából kell izolálni a valós kórokozót.
A minták laboratóriumba való szállítása Budapestrôl – A mintaátvétel a begyûjtéstôl függetlenül (pl. tulajdonos által beszállított minta) a hét minden napján 0–24 óráig lehetséges. (1135. Budapest Lehel út 43.) – A minta elszállítása Budapest területén az alábbi telefonszámon kérhetô hétfôtôl péntekig 8.00–21.00 óráig. : 239-4736. Amennyiben rendszeres a kapcsolatra lehet számítani az állatorvos és a laboratórium között az adott ellátóhely nyitvatartásához igazodó egyedi mintaszállítási konstrukciót ajánlunk fel. – Sürgôs esetben: amennyiben a tulajdonos személyesen hozza el a mintát, a vizsgálati eredmény megvárható. Hematológia és biokémiai nagy-rutin esetében kb. 40 perc.
10
A laboratóriumi eredményeket illetôen szakmai konzultációval készséggel állunk rendelkezésre 9–21 óráig az alábbi telefonszámon: Dr. Szilágyi Attila 06-30/961-5812. Amennyiben szükséges, a vizsgálatot a kérô állatorvosnak az adott esettel kapcsolatos aktuális irodalmi összefoglalót küldünk.
Budapesten kívülrôl Budapesten kívüli praxisból származó laboratóriumi minták is gyorsan és megbízhatóan feldolgozhatók, így segítséget jelenthet a diagnosztikában, kisállat és haszonállat praxisban egyaránt. Budapesten kívülrôl származó mintákat postai úton lehet eljuttatni a laboratóriumba. Tapasztalataink szerint erre a legalkalmasabb és leggyorsabb formátum az exszpresszként feladott csomag. (költsége jelenleg 390 Ft) Ebben az esetben a nagyobb postahivatalban 16 óráig feladott küldeményeket a posta másnap kiszállítja a laboratóriumunkba, ahol a feldolgozást azonnal elkezdjük és még aznap eredményt tudunk közölni. Feladó: Állatorvos neve, címe
EXPRESS
Sangui-Vet Állatorvosi Klinikai Laboratórium (Állatkórházi épület) BUDAPEST Lehel út 43. 1135
A mintaküldés során a vérképre irányuló vizsgálatot lényegesen nem zavarja a szállítás. A biokémiai paraméterek meghatározásakor azonban a haemolysis módosíthatja az egyes paraméterek számszerû értékét. Ennek kiküszöbölésére néhány eljárást ajánlunk: 2 ml-s steril fecskendôbe vesszük a vért úgy, hogy légmentes legyen. A kónuszát lezárjuk (tûvédô végét levágjuk és a fecskendô
11
kónuszára húzzuk, a dugattyút pedig letörjük, vagy ragtapasszal fixáljuk. Ezáltal nincs légtér a rázkódásra és nem történik hemolízis. a másik módszer, hogy szérumgyorsítót tartalmazó csôbe vesszük a vért. Ez polietilén gyöngyöket tartalmaz, melyekre a kialakuló fibrinháló kiválik és viszonylag hamar szérum fog kiválni. Ebbôl szívjuk steril 2 ml-es fecskendôbe a szérumot (kb. 1–2 ml elég), mely már postára adható. Forgalomba vannak szérum szeparátor zselével ellátott vérvételi csövek. Ha ebbe vesszük a vért és lecentrifugáljuk, akkor a zselé a sejtes fázis és a szérum közé vándorol a centripetális erô hatására. Ezt követôen, hiába rázzuk össze a zselé meggátolja a két fázis összekeveredését és ezzel végérvényesen meggátoltuk a vörösvérsejtek hemolízisét.
Eredményközlés: A rutin Hematológiai és biokémiai eredményeket még a feldolgozás napján közöljük a kérô állatorvosnak telefon, fax, e-mail formájában, ahogy kéri. Alapvetô törekvésünk a mintavételtôl számítva 24 órán belüli eredményszolgáltatás. A Budapesten kívülrôl származó minták esetében ez egy nappal kiegészül (express küldeményeknél). Javasoljuk valamely elektronikus adatrögzítô alkalmazását a leletek fogadásánál (autofax ISDN e-mail) mert ezekben az esetben a leggyorsabb az eredménytovábbítás, konkrét írásos leletet kap az állatorvos és elkerülhetô a „félrehallásból” eredô tévedés is. Minden héten szombaton az adott heti, eredeti leleteket postázzuk az állatorvos kollégáknak.
A helyi lehetôségeknek megfelelôen, a legoptimálisabb vérvételi eszközökkel látjuk el a vizsgálatot kérô kollégát. Kérés esetén a megmaradó fel nem használt szérumot minden esetben lefagyasztjuk és 14 napig tároljuk az esetlegesen felmerülô pótkérések teljesítése érdekében, elkerülendô az ismételt mintavételbôl adódó késedelmi idôt. Kéréstôl függetlenül 48 óráig tároljuk az eredeti mintavételi eszközöket (ellenôrzô vizsgálatok).
Laboratóriumi vizsgálati kérések Konkrét laboratóriumi paraméterek megjelölése a kérôlapon (pl. vérkép, ALT, kreatinin) A laboratórium által alkalmazott szervspecifikus vizsgálatok megjelölése (Pl. anaemia, teljes májfunció, mûtét elôtti rutin, diabetes kontroll stb.). Az számítógépes adatfeldolgozás és az automaták kapcsolata nem teszi lehetôvé a panelvizsgálatokon belül egyes paraméterek másra cserélését. Ebben az esetben a panelvizsgálat mellé kérhetünk pluszként egyéb paraméter meghatározását. Kórelôzményi és fizikális vizsgálati lelet írásos közlése után a laboratórium munkatársaira bízza a szükséges vizsgálatok elvégzését, megjelölve a vizsgálati költség értékhatárát. Ebben az esetben lépésrôl lépésre haladva dolgozzuk fel a mintát és a kóros eredmények irányában „bontjuk” ki a vizsgálatokat.
12
Cell-Dyn 3500 típusú hematológia automata által közölt kvalitatív vérkép eredmény. Eset: hypereosinopheliás szindróma macskában (krónikus enteritis) 1 neutrophil granulocyta, 2 eosinophil granulocyta.
13
A LABORATÓRIUMI VIZSGÁLAT IRÁNYAI A KLINIKAI TÜNETEK TÜKRÉBEN Az alábbiakban felsorolom, az egyes vezetô klinikai tünetek jelentkezésekor milyen laboratóriumi paraméterek meghatározását ajánljuk. Azonos számokkal láttuk el az egyes vizsgálati paramétereket és a hozzátartozó eredményekbôl levonható gyakorlati következtetéseket.
HASTÉRFOGAT MEGNAGYOBBODÁSA (beleértve az ascitest és az obesitast) SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK BETEGSÉG 1 Hematológia 2 Totál protein, albumin, össz globulin, albumin/ globulin hányados 3 Glükóz, koleszterin, triglicerid, ALT, ALKP, SIAP, nátrium, kálium
1 pyometra, peritonitis, akut/krónikus hasûri vérzés, arrodálódott hasûri neoplasmák, Cushing-szindróma, hepato/splenomegalia). 2 nephrosis- szindróma, FIP IgG, hydrometra, májcirrhosis, proteinvesztéses enteropathia onkotikus nyomás csökkenése oedémák). 3 diabetes mellitus, Cushing-szindróma hepatosisok, nephrosis-szindróma
4 FeLV-teszt
4 hepato, splenomegália
5 FIP-teszt
5 hasi folyadékgyülembôl is kérhetô, fôleg kachexiás stádiumban, mikor az ellenanyagképzés lecsökken.
6 Vizeletvizsgálat 7 Hasûri punktátum kémiai és citológiai vizsgálata 8 Karbamid, kreatinin, foszfor Egyéb mûszeres vizsgálat: Szív UH (DCMP, pericardium elváltozásai, cirrhosis hepatis)
14
Hároméves európai rövidszôrû macska FIP nedves forma feltételezett diagnózisával küldték klinikai vizsgálatra a laboratóriumba. A hasi folyadékgyülem analízise alapján a diagnózis hydrometra volt (Tartalma 4,8 liter!).
6 glomerulonephritis 7 peritonitis, pangásos eredet, hasûri daganat elkülönítése, húgyhólyag ruptura. Ascites esetén döntô többségben patognomisztikus a hasûri folyadékgyülem laboratóriumi lelete, így feltétlen ajánljuk a mintavételt (EDTÁS csôbe) és a feldolgozást! 8 vesefunkció postrenális azotaemia (retentio urinae-FLUTD)
Postoperatív állapot
15
HASI FÁJDALOM (defance) SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia 2 Lipáz, amiláz, glükóz Ca2+ 3 Karbamid, kreatinin kálcium, foszfor, HCO3– 4 Epesav, ALKP, GGT 5 Vizelet és üledék vizsgálat 6 Hasi folyadékgyülem vizsgálata még ha minimális is a mennyisége
1 peritonitis, pancreatitis, nephritis, gyulladások, lép, -májruptúra 2 pancreatitis, pancreas neoplasma 3 húgycsô obturáció következményes uraemia, akut veseelégtelenség 4 epevezetô elzáródás
Sarjadzó gombaelem krónikus hasmenésben szenvedô kutyából (Súlyos dysbacteriosissal.)
5 nephritisek, nephrosisok 6 lép-, bél-, májlebeny, rejtett here torsiók, húgyutak sérülései Egyéb parazita fajok.
KRÓNIKUS HASMENÉS
Fotók: Trichuris vulpis peték.
SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia
1 gyulladás, lymphosarcoma, eosinophil-sejtes enteritis
2 Totál protein, albumin Koleszterin, triglicerid
2 malabsorptio, fehérjevesztéses enteropathia
3 ALT, AST, ALKP, GGT, GLDH, össz-epesav
3 hepatosisok 4 uraemia
intestinális fekélyek
4 Karbamid, kreatinin, foszfor
5 krónikus recurrens pancreatitis, EPI-ben nem szignifikáns!
5 Lipáz, amiláz, kálcium
6 Isospora canis, Hammondia hammondii, Trichuris vulpis, Ancylostomatoma caninum stb.
6 Bélsár parazitológia 7 Bélsár bakteriológia
16
SANGUI-VET®
7 Salmonellosis, Campylobacter jejuni Isospora canis sporulált oocysta
17
A bélsárvizsgálatnál feltétlenül ajánljuk, a reprezentatív mintavételt, négynaponként három alkalommal gyûjtött bélsár összegyûjtését kérjük a tulajdonostól (szakaszos peteürítés miatt) és a beszállítás napján friss bélsár vizsgálata Entamoeba, Giardia kimutatásra). Sok esetben a gyakorlatban a parazitamentesség szempontjából jónak ítélt állatoknál meglepô eredményeket kaptunk! Növendék állatokban, véres nyálkás bélsárürítés mely periodikusan ismétlôdik, gondoljunk coccidiosisra is, mivel némely tenyészetben súlyos gondokat okoz, miközben corona, rota vagy egyéb vírusos vagy bakteriális kórképekre gondolnak. Bélsár bakteriológiai vizsgálata (ha érzékenyebb enterális kórokozóra van gyanúnk, transzport táptalajt feltétlenül használjunk pl. Campylobacter jejuni)
SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia
1 leukosisok, vérzô hasûri daganat, anaemia differenciálás, vvs. paraziták
2 Szérum vas, vaskötô kapacitás, transzferrin, reticulocyta-szám
3 haemostasis zavarai, DIC, toxikózis intravasalis haemolysis, krónikus hepatosisok
3 APTI, PTI, Thrombocytaszám, fibrinogén, FDP 4 Karbamid, kreatinin, foszfor, vizeletvizsgálat 5 Ozmotikus rezidencia Coomb’s teszt
ANAEMIA
6 Bélsárvizsgálat
Anaemiás állapotban a laboratóriumi diagnosztika háromféle irányban történik: • Akut és krónikus vérvesztéses → haemorrhágiás anaemia
2 anaemia differenciálás
4 krónikus veseelégtelenség erythropoetinképzés zavara 5 immunhaemolyiticus anaemiák 6 bélbeni fekélyképzôdés 7 hasûri vérzô daganat
7 Testi folyadékgyülem esetén a punktátum kémiai és citológiai vizsgálata
• Fokozott vörösvérsejt szétesés → haemolyticus anaemia
8 FeLV-teszt
• Csökkent vörösvérsejt produkció → hypoproliferatív anaemia (csontvelôi elváltozások)
A vértranszfúzió feltétlen indikációja ha a vörösvérsejtszám 2,0 T/l alá esik. Az állatorvosi terápia során anaemiás állapotokban a tartósított és szeparált vérkészítmények ma már rutinszerûen alkalmazhatók
További fontos kérdés: • Regeneratív-e az anaemia, (haemolyticus, haemorrhágiás) amikor a magvas vörösvérsejtek (NRBC) nagyobb számban megjelennek a perifériás vérben, reticulocytosis észlelhetô és (Reticulocyta Produkciós Index (RPI) >2) MCV-érték nô, RDW-érték nô. • Non-regeneratív anaemia RPI <2, MCV csökken, RDW csökken (csontvelôi tumorok, krónikus veNormál Regeneratív seelégtelenség, hypothyreosis, reticulocytaszám anaemia myeloszuppressziót okozó fertô≈ 1% 3–5% zések, gyógyszerek). 0.5% (r.aggregata)
18
> 1,5%
Plazmacentrifuga
A vérvétel napján készített friss fagyasztott plazma készítése, mely –30 °C-on 1 évig tárolható.
CPD-s teljes kutyavér 21 napig tárolható.
19
POLYURIA, POLYDIPSIA SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK BETEGSÉG 1 Hematológia 2 Karbamid, kreatinin, foszfor, albumin, koleszterin, kálium, nátrium 3 ALT, ALKP, SIAP, GGT, GLDH, epesav
Babesia canis okozta intravasalis haemolysis.
Babesia gibsoni („Kis babesia”) krónikus jellegû haemolitikus anaemiát okoz.
Babesia canis fertôzöttség, a képen kettô magvas vörösvérsejt is látható.
1 pyometra, pyelonephritis, és egyéb pyogén folyamatok, Cushing-kór Stressz leukogram→Lympho/eosinopenia, 2 nephritis, uraemia, Addison-kór, hyponatraemia→hemokoncentráció →praerenális azotaemia)
4 Glükóz, fruktóz-amin
3 hepatosisok, Cushing-szindróma (SIAP nagyobb mint a kiindulási ALKP aktivítás 50%-a)
5 Ionogram
4 diabetes mellitus
6 TSH/Thyroxin hányados
5 veseelégtelenség, pseudohyperparathyreodismus, lymphosarcoma
7 Vizeletvizsgálat + vizelettel ürülô GGT/ kreatinin hányados
6 hyperthyreosis 7 aktív-krónikus nephritis
Feltétlen ajánljuk ebben az esetben a teljes vizeletvizsgálatot. Lényeges hangsúlyozni, hogy az üledékvizsgálat alapvetô pédául egy aktív nephritis vagy egy krónikus nephritis elkülönítésében, nem elég „csak egy vizeletcsík belemártása a vizeletbe”.
a.) a.), Anaemia és resorptios icterus klinikai képe, b.) arrodált léptumor miatt (krónikus hasûri vérzés).
Erythrocytophagocytosis immunhaemolytikus anaemiában.
20
b.)
A fluktoz-amin meghatározása segít elkülöníteni a stressz hyperglycaemiát a diabetes mellitustól.
Az endokrin zavarok esetében az egyes biokémiai paraméterek csak tájékoztató útbaigazításul szolgálhatnak. A konkrét zavar okának felderítésére terheléses hormonvizsgálatokat célszerû alkalmazni. Az alábbiakban két fontos endokrinopáthiát tárgyalunk.
21
MELLÉKVESEKÉREG HYPERFUNKCIÓ (Cushing-kór) RUTIN VIZSGÁLATOK • Hematológia (lympho és eosinopenia) • AST, ALT ALKP/SIAP (hôstabil) • Glükóz • Koleszterin • Kortizol • Ionogram (Na+/K+)
KIEGÉSZÍTÔ VIZSGÁLATOK • HDDST (High dosis dexamethason suppressio test) • LDDST (Low dosis dexamethason suppressio test) • Vizelet Kortizol/kreatinin hányados
1. Magas dózisú dexamethason (0.1 mg/kg) szuppressziós (HDDST) teszt választ ad arra a kérdésre, hogy centrális azaz hypophysis eredetû-e (adenoma), vagy mellékvese eredetû a hyperfunkció. A mellékvese tumoros elváltozása esetén a dexamethason nem szuppresszálja (negatív feed-back) a kortizol szintet! Protokol: alapvérvétel kortizol szintre → 0,1 mg/kg dexamethason iv. adása → 4 és 8 óra múlva mintavétel (macska 4–6–8 órában)
Értékelés: • ha kortizol szint változás a kiindulási értékének <50%-a → HYPOPHYSIS EREDETÛ a tumor • ha a kortizol szint változás a kiindulási értékének >50% → MELLÉKVESE EREDETÛ a tumor (csökkent vagy nincs szuppresszió (alkalmazható az un. igen magas dóziusú (1 mg/kg) dexamethason adagolásával is). Macskáknál a vizsgálat nem javasolt. 2. Alacsony dózisú dexamethason (0,01 mg/kg) szuppressziós (LDDST) teszt válasz ad arra, hogy a mellékvesekéreg hyperfunkció a krónikus stresszhatásból eredôen van hyperfunkciós állapotban, vagy más, szervi betegség követkeménye. Mellékvesekéreg tumorok esetén az alacsony dózisú dexamethason szuppresszáló hatása eredménytelen marad. Protokol: alapvérvétel kortizol szintre → 0,01 mg/kg dexamethason iv. → 4 és 8 óra múlva mintavétel Értékelés: Élettani esetben az exogén dexamethason csökken a kortizol szint
ACTH szintet↓
normál válasz esetén a cortisol <1.5 µg/dl (macska <1. µg/dl) hyperadrenocorticismus esetén >2 µg/dl a változás az alapértékhez képest. Kortizol élettani értéke (eb,macska): 2–12 µg/dl (55–130 nmol/l) fluorometriás eljárással. Konverziós faktor: µg/dl nmol/1
Cushing-kór klinikai megjelenése egyoldali mellékvese adenoma miatt.
22
Jellegzetes bôrelváltozás Cushing-kór kövekeztében.
nmol/l = 27,6 µg/dl = 0,0362
3. ACTH stimulációs teszt Protokol: Alapvérvétel → 0,25 mg/állat tetracosactrin (im, iv) → 2 óra múlva vérvétel Kortizol meghatározásra Értékelés: A post ACTH. Kortizol mennyisége 2–3 szor nagyobb mint a kiindulási érték, akkor normál. A hypophysisdependens, hyperadrenocorticismusnál >20 µg/dl (550 nmol/l) túlzott válaszreakciót jelent. Mellékvesekéreg tumornál túlságosan nagy alapértéket mérünk. Hypoadrenocorticismusnál nincs stimuláció.
23
Mellékvesekéreg hypofunkció (Addison-kór) SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
• Kortizol-szint • ACTH stimuláció
• Total protein (↑↑) • Albumin • Karbamid (↑↑) • Kreatinin (⇔) • Foszfor
(+/–)
• Na/K <23
Az elváltozásra klinikailag jellemzô a nagymértékû haemokoncentráció és az abból eredô keringési zavarok (rtg.→microcardia, bradycardia, hypothermia→hideg iránti intolarencia), nagyfokú elesettség. Addison-krízis esetén véres bélsár (shock-bél) keringés heveny összeomlása jelentkezik.
Hypophysis funkciós teszt (xylazin stimulációs teszt). A növekedési hormon termelôdés hiánya felderítésére használhatjuk. Indulásként az alapérték megállapításához 2 ml EDTA-ás vér veszünk. Protokol: 100 µg/kg xylazin iv. → 20 perc múlva 2 ml EDTA-ás vér vétele → plazmaszeparálást követôen –20 °C tárolás. Szárazjégben történhet a mérés helyére (speciális laboratóriumba) való szállítás. Európában: Dr. P. J. Selman, Faculty of Vet. Medicine Univ. of Utrecht. Dept of Clinical Sci. of Companion Animals Biochemical Lab. PO 80154, 3508 TD Utrecht Netherlands. normálérték: 1–4 µgg/ml. Stimulációs csúcsérték 3,4–111 µg/ml.
24
Teendô: vizeletvétel-hólyagkiürítés → 12 órás vízmegvonás → vizeletvétel
$$ $$
• Hematológia (erôteljes haemokoncentráció, eosinophilia)
KIEGÉSZÍTÔ VIZSGÁLATOK
POLYURIA/POLYDIPSIA (lényeges laboratóriumi eltérések nélkül)
Pozitív eredmény (koncentrálás van)
Negatív eredmény (koncentrálás nincs) Adiuretin adásakor sem
Psychogén polydipsia
Renális diabetes insipidus
Részleges válasz az ADH hatásra, pozitív Hickey-Hare teszt*
Negatív vízmegvonási eredmény, pozitív válasz ADH-ra
Medullaris „washout”
Diabetes insipidus
* A teszttel elkülöníthetjük a pschyhogén polydipsiából adódó medulláris „kimosódási” szindrómát a diabetes insipidustól.
Protokol: – p.os 30 ml/kg dózisban vizet itatunk az állattal – 30 perc után kiürítjük a húgyhólyagot és a vizelet sûrûségét és volumenét lemérjük – iv. 2,5%-os sóoldatot applikálunk 30 ml/kg/perc cseppszámmal iv. – az infundálástól számítva 15 percenként katéterrel vizeletet nyerünk és mérjük a sûrûségét Értékelés: Diabetes és renális insipidusban nincsen válaszreakció a koncentrálást illetôen Vesemedulla koncentráció-grádiens csökkenésnél a sûrûség >1020 g/l
25
OEDEMA MEGJELENÉSE (perifériás és/vagy generalizált, testûri folyadékgyülemek) Klinikailag alapvetô annak eldöntése, hogy kardiális pangásos (DCMP, pericardiális gyülem) eredetû, vagy hypoproteinaemia miatti ödémakészség fokozódása (hepatikus, renális, enterális vesztés), vagy esetleg gyulladásos eredetû. Ha a szabad testüregekben a fiziológiásnál nagyobb mennyiségû folyadék található mindenképpen érdemes annak teljeskörû vizsgálatát elvégezni. SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK 1 Totál protein, albumin, globulin 2 Hematológia 3 Karbamid, kreatitnin, foszfor, kálcium, koleszterin, albumin, vizelet vizsgálat 4 Globulin (ELFO FIP-teszt
IgG frakció↑),
5 AST, ALT, GGT, ALKP, GLDH, epesav, ammónia, karbamid, nátrium, kálium • Testûri folyadékgyülem esetén – össz-sejtszám – Fehérjeösszetevôk (TP, Albumin, Globulin) – Enzimek (amiláz, lipáz abscedáló pancreatitis, epesav epehólyag arrodáció) –Metabolitok (kreatinin húgyhólyag ruptura, lehet részleges is!) – Üledék citológiai vizsgálata (exsudatum, neoplasticus sejtek keresése) – FIP-teszt (ELISA)
26
BETEGSÉG 1 nephrosis-szindroma, krónikus hasmenés – proteinvesztéses enteropathia 2 peritonitis, akut vagy krónikus testüregekbe való vérvesztés 3 glomerulonephritisnephrosis szindróma 4 Macskák fertôzô peritonise 5 májcirrhosis
Oedema készség fokozódás hypoproteinaemia következtében (vese-amyloidosis).
Végezetül fontos megemlíteni, hogy ritka kórképek mint a különféle szervi torsiók esetén is több kevesebb folyadékgyülem keletkezhet leginkább módosult transsudatum alakjában pl. rejtett here csavar, torsio lienis, májlebeny csavar, tüdôlebeny csavar, bélhelyzet változások.
27
ICTERUS SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia
1 haemolysis, vérparaziták
2 Ozmotikus rezisztencia, spherocyta kimutatás, Coomb’s-teszt
2 immunhaemolysis megállapítása
3 AST, ALT, ALKP, GGT, GLDH, epesav, bilirubin 4 Karbamid, kreatinin, foszfor 5 Totál protein, albumin 6 Hasûri folyadékgyülem esetén annak teljeskörû feldolgozása
Az endokrin dermatosisok esetén a biokémiai vizsgálatok irányadónak tekinthetôk. A diagnózis felállítása és a terápia a specifikus endokrinológiai vizsgálatok (T4, TSH-stimuláció, kortizol-szint, stb.) eredményei tükrében történik. Ez évtôl vérsavóból történô allergénspecifikus Ig-E tesztek is elérhetôek lesznek pl.scabies, bolha, háziporatka okozta dermatosisok felderítésében. b.)
a.) 3 hepaticus és posthepaticus icterus 4 haemolysist követô haemoglobin nephrosis megállapítása 5 hasûri vérzés esetén resorptios icterus 6 szeptikus eredet esetén mikrobiológiai tenyésztés
ALOPECIA SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia
1 Cushing- szindróma→stressz leukogram, hypothyreosis, allergózis
2 AST, ALT, ALKP, SIAP, koleszterin, triglicerid, glükóz
2 Cushing-szindróma, hypothyreois, hepato-cutan szindróma, diabetes mellitus
3 Kortizol
3 hyperadrenocorticismus
4 Thyroxin, canin-TSH meghatározás
4 hypothyreosis
b.) 4 hónappal a kezelés után
5 több helyrôl vett mély bôrkaparék szükséges ahhoz, hogy reprezentatív legyen a mintánk!
c.) Demodex canis
5 Bôrkaparék, parazitológia, mikrobiológiai vizsgálata
28
Különösen Scabies esetén lényeges a mély bôrkaparék minta.
a.) 10 hónapos tibeti mastiff generalizált demodicosis, pyoderma, hypothyreosisos háttérrel, melynek gyógyulásához hormon szubsztitúció is szükséges volt.
c.)
29
NEUROLÓGIAI TÜNETEK
HÁNYÁS/REGURGITATIO
BETEGSÉG
SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia ALT, AST, ALKP, össz-epesav, totál protein, albumin, koleszterin
1 hepaticus encephalopathia diabeteses kóma,
1 Hematológia
1 gyulladás és toxaemia, pyometra, peritonitis, anaemia, vírusinfekció leukopenia
2 Glükóz, fruktózamin, ozmolalitás
2 hyper/hypoglycaemia
SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
3 Karbamid, kreatinin, foszfor, kálcium, HCO3– 4 Liquor analízis 5 Szérum phenobarbitál meghatározás 6 Vizelet és üledék vizsgálat
2 Kreatinin, karbamid, foszfor
3 diabetes ketoacidózis
3 uraemiás kóma
4 Lipáz, amiláz, kálcium
4 pancreatitis
4 meningitis
5 Nátrium, kálium, klorid, kálcium
6 hepatosis
5 gyógyszerszint monitorozásnál 6 oxalát-nephrosis, ketoacidózis, glycosuria
HAEMATURIA-HAEMOGLOBINURIA
5 paralyticus ileus
6 AST, ALT, ALKP, GGT, össz-epesav, triglicerid, koleszterin
7 digoxin toxikózis (digitalizált betegnél a jellegzetes EKG elváltozás hívja fel gyakran a figyelmet rá)
7 Digoxin-szint meghatározás
8 mellékvesekéreg hypofunkció
8 Natrium/kálium, kortizol
BETEGSÉG
9 TSH/T4
1 Hematológia
1 anaemia, nephritis
2 Protrombin idô, Parciális thromboplastin idô, FDP
2 véralvadási zavarok
• Gyomorfal bioptátumból Helicobacter pylori kimutatás
SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
2 uraemia
3 Glükóz, fruktózamin
9omegalooesophagus, hypothyreosis miatt
3 glomeruláris elváltozások
3 Totál protein, albumin 4 Karbamid, kreatinin, foszfor 5 Vizelet és üledék vizsgálat, annak mikrobiológiai vizsgálata
4 vesefunkció (haemoglobin nephrosis) 5 FLUTD (percután hólyagpunctioval vett vizeletbôl) Spirocerca lupi pete (2 hónapig tartó tartós hányásos panaszok kórokozója volt 3 éves boxerben.)
30
31
HYPOXIA, KRÓNIKUS LÉGZÔSZERVI PANASZOK SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
BETEGSÉG
1 Hematológia
1 anaemia, gyulladások, eosinophil sejt-szaporulattal járó légzôszervi elváltozások, (eosinophil sejtes neumonia, methaemoglobinaemia)
2 CK, CK-MB (szívizomspecifikus CK), LDH, AST 3 Bélsárvizsgálat 4 Légúti váladékok mikrobiológiai vizsgálata 5 Bronchus-lavage citológiai vizsgálata
KRÓNIKUS HASMENÉS Krónikus hasmenés (>4 hét) gyakran jelentkezô probléma. Alapos anamnézis felvétele után a krónikus hasmenés protokollját érdemes követni pontról pontra, mely eldönti, hogy malabsorptiot követô ozmotikus hasmenésrôl, avagy gyulladásos eredetû exsudatív diarrhoe-ról van szó, vagy bakteriális endotoxin és konjugálatlan epesavak un. szekréciós hasmenéssel állunk szemben.
2 myocardium gyulladásos elváltozásai 3 lárvaizoláció Aelorostrongylus abstrusus fertôzöttség→inproduktív szamárköhögésszerû tünetek esetén 4 eosinophil sejtes infiltráció 5 paraziták okozta tüdôelváltozások.
1 Hematológia α-HBDH 2 Ozmotikus rezisztencia, a-HBDH, Coomb’s teszt, reticulocyta
BETEGSÉG
1 Hematológia
1 eosinophilia – eosinophil sejtes infiltrativ bélelváltozások
2 Bélsár parazitolgia
2 Trichuris, Isospora, Toxocara stb. 4 naponta vett 3 bélsárminta összegzô vizsgálata tekinthetô reprezentatívnak a szakaszosan ürülô parazita peték miatt) → Parazitológiai vizsgálatra kell egy 4 óránál nem régebbi friss bélsármintára is, Giardia, Entamöba kimutatásra.
3 Bélsár bakteriológia 4 Bélsár mikológiai vizsgálata
PERZISZTÁLÓ LÁZ SZÜKSÉGES VIZSGÁLATOK
SZÜKSÉGES VIZSGÁLAT
BETEGSÉG 1 infekciók, krónikus haemolysis, leukózisok 2 immunhaemolysis 3 gyulladásos folyamatok
5 Lipáz, amiláz, TLI, össz-epesavak Lipidabsopciós teszt 6 Karbamid, kreatinin, foszfor, amiláz
3 T. protein, albumin, globulin
4 recurrens pancreatitis
4 Lipáz, amiláz, kálcium, TLI
5 fertôzô betegségek
7 Bélbioptátumok szövettani vizsgálata
5 FIP, FIV, FeLV, Lyme-teszt, Ehrlichiosis, Dirofilariosis
6 myocarditis
8 TSH/Thyroxin
7 haemokultúra → aszeptikus 3 helyrôl vett szabályos mintavétel elengedhetetlen!
9 AST, ALT, ALKP, GGT, GLDH, epesavak
6 LDH, AST, CK, CK-MB 7 Mikrobiológia 8 Lép/máj ultrahang vezérelt aspirációs cytológiája
8 azok megnagyobbodása esetén
9 ANA-teszt
9 bizonyos autoimmun kórképek
10Thyroxin-hyperthermia
10 hyperthyreosis
32
10.FeLV-teszt (FeLV szervi manifesztáció (bélforma) esetén a szerológiai pozitivitás biztonsága 60%-os!)
3 E. coli, Salmonella, Campylobacter, stb. A transzporttáptalaj pl. Campylobacter gyanú esetén javasolt. 4 dysbacteriosis talaján létrejövô candidiasis 5 krónikus recurrens pancreatitis, EPI A zselatinemésztéses teszt eredményeit körültekintôen érdemes értékelni! 6 uraemiás bélfekélyek 7 specifikus bélgyulladások pl. lymphangiectasia, lymphoma 8 hyperthyreosis 9 krónikus hepatosisok
33
HEMATOLÓGIAI RÉSZ
Az állatorvosi laboratóriumi diagnosztikában ma már általánossá vált a gépi részecskeszámlálók használata. Ezek úgynevezett coulter elven mûködnek, ahol egy jó vezetôképességû hígító oldatban két elektróda között áramlanak a vér sejtes elemei, amelyek elektromosan rosszabb vezetôképességgel rendelkeznek. E vezetôképesség csökkenése impulzusváltakozást eredményez, aminek a száma a sejtek számával, nagysága a sejtek méretével arányos. A Hematológiai automaták alkalmazása („csak beadagolom a vért és kijön az eredmény”) számos csapdát rejt a mechanikus felhasználó számára. Sajnos az eladó cégek nem mindig világosítják fel a vevôket a szakmai részleteket illetôen, melyektôl a mérés hitelessége döntôen függ. Az állati vérek másképpen viselkednek az emberi vérre kifejlesztett hígító oldatban, más a sejt analizálási sebesség kutyánál, lónál és fôleg macskánál. Egy részleges haemolysis miatt sejtfragmentumok többszörösére emelhetik az össz fehérvérsejt számot. Ha egyszerûbb gépünk van, amely nem küld hibaüzenetet úgynevezett „flag”-eket, akkor már ki is ment egy hibás eredmény. Fontos tudni azt is, hogy a kémiai alapon történô sejtpopulációk szétválasztása ma nem megoldott állatorvosi vonalon. A legalább „3 part”-os (neutrophil, lymphocyta és az intermedier sejtek) elválasztás sehol a világon nem megoldott jelenleg. A humán célra kifejlesztett gépek állati vérekbôl NEM tudnak hiteles automatizált minôségi vérképet készíteni, tisztán kémiai elven alapuló sejtszétválasztással. Ez különösen a macskákra igaz. Ma még a kézi festett készítmények bírálata a mérvadó. De ez nem is hátrány, mert a különféle vérparaziták – melyekre az év nagy részében számítani kell – úgyis megköveteli a mikroszkópos vizsgálatot.
34
A hematokritérték meghatározása lehet centrifugálással (10 perc/10000 rpm) és történhet gépi számlálással, mely a vörösvérsejtszám (vvs.) szám és az átlagos vvs.térfogat (MCV) szorzata osztva 10-zel. Ha nem megfelelô hígítóoldatot használunk a gépi számláláshoz, vagy sokáig áll a vér szobahômérsékleten, vagy nem megfelelô az alvadásgátló, akkor a sejtek duzzadnak (MCV↑ nô·) és hamisan magas lesz a haematokrit érték.
Hematokritérték (Ht) * Dehydratio * Stressz (macska) * Sokk * Polycythaemia vera * Cardiális shunt * Krónikus alveolaris betegség * Vesetumor (erythropoetin↑) * Hyperthyreosis (macska) Normálérték Kutya: 0,38–0,5 l/l Macska: 0,3–0,45l/l Anaemia (gyakori) Haemolysis
A vérvételi stressz okozta lépkontrakció miatt átmenetileg magasabb lehet a hematokrit érték. Vörösvérsejtszám (RBC) Közvetlenül méri a készü* Dehydratio (gyakori) lék a thrombocytával egy csa* Sokk tornában. Ha a vérvételi csô * Abszolút polycythaemia falán mikroagglutinációt ta* Anabolikus szteroid adagolás pasztalunk (hidegagglutináció) Normálérték: Kutya: 4,5–7x1012/l autoimmun haemolyticus anaMacska: 5,5–8x1012/l emiában, akkor a vérmintát 37 * Anaemia °C-ra inkubáljuk és úgy mérjük, különben hamis eredményt kapunk. Ha magvas vörösvérsejt van a mintában nagyobb számban, akkor a gép eloszlási hisztogramján kis görbe fog megjelenni a vörösvérsejt görbe elôtt. Közvetlenül, a fehérvérsejt csatornában méri a készülék. Hamisan alacsony lesz az értéke, ha hiányos a haemolysis, hamisan magas lesz, ha lipaemiás a vér, vagy a Heintz-testecskéknek nagy a száma, vagy sok az erythroblast. Magas lesz továbbá methaemoglobinaemiában is.
Hemoglobin koncentráció (Hgb) * Dehydratio (gyakori) * Sokk * Abszolút polycytaemia Normálérték: Kutya: 120–180 g/l Macska: 85–155 g/l * Anaemia * Haemolysis
35
Igen fontos adat a mennyiségi vérképben,habár kevesen figyelnek rá. Ez az adat a vörösvérsejtek átlagos térfogatát jelöli femtoliterben.
MCV * Reticulocytosis * Nagy kifejlett RBC * Hyperthyreoidismus * Magvas vörösvérsejtek száma nô * Porphyria (sziámi macskánál) Normálérték: Kutya 63–75 fl Macska 40–53 fl Fe-hiány Piridoxin hiány Macska haemobartonellosis Fajtasajátosságok
• ha nô az értéke macrocytosisról (>77 fl Ca, >55 fe) van szó → erôltetett vérképzés van. Ezek a sejtekrészben reticulocyták vagy magvas vvs.-ek Makrocytosis van B12 és folsav hiány esetén is (chr. enteritisek, vérzô daganatok), újszülötteknél * ha csökken microcytosist (<50 fl Ca, <39 fl fe) jelez, tehát abnormálisan kicsik a vvs.-ek vashiányban, B6 vitamin hiány, krónikus vérvesztés – haemolysis krónikus babesiosis, haemobartonellosis, Ehrlichiosis. Akitánál fiziológiásan az MCV: 55–65 fl! Agarakban és whipettben az MCV: 77–85 fl! Macskánál 2 hónapos korig 90 fl. Törpe uszkárnál az MCV >80 fl, számos NRBC
MCHC Mérési pontatlanság Lipaemiás minta Intravasalis haemolysis Normálérték: Kutya: 32–36 g/dl Macska 30–36 g/dl Reticulocytosis (leggyakoribb) Fe-hiány (gyakori) Öröklött hypochromia (ritka) Magvas Vvs (ritka) Piridoxin hiány (nagyon ritka)
Az érték a vörösvérsejtek átlagos haemoglobin koncentrációját jelölik. Ha kisebb az értéke hypochromásiárol ha megfelelô normochromasiárol, ha magasabb hyperchromásiáról beszélünk. MCHC↓ okok: krónikus vérvesztés MCV↓ krónikus vashiány krónikus bakt. infekciók Malignus tumorok Portokaval shunt
36
MCHC↓ okok: protein hiány MCV↔ vashiány eleje
MCHC↓ okok: Akut vérvesztés MCHC↔ okok: vashiányos utáni 2–3 nap idôszak közepe MCV↑ MCV↓ Haemolysis FeLV-anaemia Piruvát-kináz deficiencia Akita inu (basset, beagle) Mérési hiba Stomatocytosis macskánál malamutokban thrombocyta 6 hónapos korig aggr. MCHC↔ okok: akut vérvesztés MCHC↔ okok: folsavhiány 1–3 napján (enteritisek) MCV↔ MCV↑ Vashiány kezdeti szaka kisebb vérzések Vvs.aplasia FeLV miatt Leukosisok Niacin hiány Más szervek krónikus betegségei (máj, vese, endokrin, chr. infekciók) MCHC↑ okok: mérési artefakt MVC↔ Heintz-body anaemia macskánál lipaemia, haemolysis Kutya Relatív % Fehérvérsejt szám (WBC) Neutrophil granulocyta – stab Eosinophil gr. Basophil gr. Lymphocyta Monocyta
{
Abszolút szám x 109/l
6–11 G/l
Macska Relatív %
7 Abszolút szám x 109/l
6–12 G/l
60–77
3–11,5
35–75
2,5–12,5
0–3 2–10 0–1 12–30 3–10
0–0,3 0,1–1,35 Ritka 1–4,8 0,15–1,35
0–3 2–12 0–1 20–55 1–4
0–0,3 0,1–1,5 Ritka 1,5–7 0,1–0,85
Példa: Az abszolút fehérvérsejtszám 1 liter vérben levô nentrophil granulocyta, lymphocyta stb. számát adja meg segít abban, hogy a relatív %-os kifejezése a minôségi vérképnek néha megtévesztô, hibás értékelését kiküszöböljük. Egy 3,1 G/l-es fehérvérsejt számú és 60%-os Ly., 30%-os neutrophil arány esetén nincs lymphocytosis, mivel a lymphocyták abszolút száma: 1,86 G/l, mely normálérték.
37
* * • * *
* * * *
*
* * * * * * * *
38
Fehérvérsejt Akut bakteriális fertôzés (neutrophiliával, vérkép balra tolódásával) Szteroid hatás (exogén vagy endogén) – Cushing-kór Lymphoproliferatív elváltozás (lymphosarcoma és lymphoid leukémia) lymphocytosis FIP (neutrophilia, vérkép jobbra tolódik) Szövetszétesés és tartós gyulladás – acut pancreatitis – rheumatoid arthritis – égés Vemhesség alatt (Neutrophil granulocyta növekszik) Myeloproliferativ rendellenesség (ritka) (Neutr.gran növekszik) Szisztémás lupus erythaematosus (neutrophilia bár a leucopenia is gyakori) Hyperthyroidismus (macskában) (neutr.gran. növekszik) Normálérték: Kutya: 6.0–11.0 G/l Macska: 6.0–12.0 G/l Vírusos infectio (szövôdmény nélkül) – Panleukopenia – FeLV (Ne.gran. és lymphocyta számot csökkentheti) – FIV (Lymphocytát csökkenti ritkábban Ne.gran.-t) – Szopornyica – Rubarth-kór – Parvovírusos fertôzés Bakteriális infectio korai szakasza – toxaemia, -septikaemia Anaphylaxia Toxicus gyógyszer és kémiai anyagok (pl.: daganat ellenes terápia) Csontvelô daganat – lympho és myelo proliferativ Szisztémás lupus erithematosus (neutropénia lymphopenia nélkül) Acut toxoplasmosis Leishmaniosis (leukopaenia) kutyában Endogén toxaemia (pl.: uraemia)
E M E L K E D É S
E M E L K E D É S
C S Ö K K E N É S C S Ö K K E N É S
* * * * * * * * * *
* * * *
*
Neutrophil granulocita Láz (közepes neutrophilia) Glükokortikoid vagy ACTH hatás Hyperadrenocorticismus (Cushing-kór) Myeloproliferatív betegségek Hyperthyreosis (fôleg macska) Akut gyulladásos folyamatok Haemolyticus vagy haemorrhágiás anaemia Granulocytás leukémia Oestrogén toxicosis Toxaemia Normálérték: kutya: 62–80 rel.% (3–11,5 G/l) macska: 55–75 rel.% (2–12,5 G/l) Bakteriális infectio csontvelôre kifejtett toxikus hatása Virusfertôzés akut szakasza (FeLV, FIV, Parvovírusos inf., Panleukopénia) Generalizált toxoplasmosis) Szabad testüregeket érintô pyogén folyamatok (perifériás véredényekbôl való migráció a testüregekbe). peritonitis generalisata Csökkent produkció (chr. gyulladás, septicus állapot kimerülési szaka)
Stab forma (balra tolt vérkép) Regeneratív balra tolt vérkép – Bakterilális infektio – Szövetszétesések – Regeneratív anaemia – Primer polycythaemia – Dirofilariosis Degeneratív Balra tolt vérkép – Szeptikus eredetû – Akut toxoplasmosis
39
• • • • • •
• • • • •
Eosinophil granulocyták Chronicus szövetszétesés Allergosisok Macskák disseminált eosinophil sejtes betegsége (ritka) Eosinophil leukaemia (nagyon ritka) Súlyos parazitozis (beleértve a szívférgességet is) Hyperadrenocorticismus Normálérték kutya: 2–6 rel% (0,1–1,2 G/l) macska: 3–5 rel% (0,4–0,6 G/l) Akut stresszhatás (adrenalinaemia) Krónikus stressz (glükokortikoid) Hyperadrenocorticismus (Cushing-kór) Szteroid/ACTH hatás Akut infekció/gyulladásos folyamat
Basophil garnulocyták Allergiás betegségek Lokalizált gennyes gyulladás Szívférgesség (Dirofilaria immitis) Basophil leukaemia (nagyon ritka) Hyperlipoproteinaemia (kutya) Normálérték kutya: 0–1 rel% macska: 0–1 rel% • Nincs diagnosztikai jelentôsége. • • • • •
40
E M E L K E D É S
C S Ö K K E N É S
E M E L K E D É S
E M E L K E D É S
• • • • • • • •
C S Ö K K E N É S
•
• • • •
Lymphocyta Postvaccinációs idôszakban (10 napig) Lymphoid lekaemia és lymphosarcoma (nem gyakori) FeLV, FIV viraemiás szakaszában Elhúzódó antigén stimuláció, krónikus infekció Ehrlichiosis Autoimmun kórképek Allergiás kórképek Hypoadrenocorticismus Normálérték kutya: 30–45 rel.% (1–4,8 G/l) macska: 30–45 rel.% (1,8–5,4 G/l) Szteroid hatás – Hyperadrenocorticismus – Stressz – ACTH Gyulladások akut szakasza Multiplex lymphosarcomatosis Immunszuppressziós terápia Generalizált demodicosis
Monocyta E M E L K E D É S
• Szteroid hatás – Hyperadrenocorticismus – ACTH – Stressz • Babesia canis fertôzés bevezetô szakasza • Acut és krónikus infekció (Baktérium, vírus, toxoplasma) • Immunmediált betegség (immunhaemolitikus icterus) • Egyéb szövetkárosodás vagy necrosis • Monocytás leukaemia és myelomonocytás leukaemia Normálérték kutya: 2–4 rel.% (0,1–1,4 G/l) macska: 1–3 rel.% (0,1–0,8 G/l) Csökkenésének nincs diagnosztikai jelentôsége.
41
A RUTIN SZEROLÓGIAI VIZSGÁLATOK ÉRTÉKELÉSE MACSKÁNÁL
Macskaleukosis (FeLV) Rutin eljárás az ELISA vizsgálattal történô screening szûrés, mely érzékenyen szûri ki az FeLV hordozó macskákat. A teszt a vírus szolubilis gp27-es antigénjének kimutatásán alapul, tehát a virémiás szakban lesz pozitív. A legszorosabb értelemben vett negativitás 68 hét különbséggel vett két minta egyöntetû negativitása esetén mondható ki. Fertôzöttség esetén az ELISA módszer öt héttel korábban ad pozitivitást, mint az indirekt IF-es vizsgálat. A leukosis teszt értékelése óvatosan történjen. Amennyiben a macska ELISA szeropozitív és tünetmentes és alacsony rizikótényezôjû helyen van, a vizsgálatot végezzük el IF és PCR módszerrel is, vagy ismételjük meg 6-8 hét múlva az ELISA tesztet. Az indirekt immunfluoreszcens vizsgálat az intracelluláris víruspartikulákat mutatja ki a keringô sejtekben. Perzisztens IF pozitivitás aktív FeLV fertôzöttséget jelez csontvelôi érintettséggel.
Interpretáció IF negatív/ELISA negatív
nem fertôzött, hordozás nincs túl korai még a fertôzôdés IF pozitív/ELISA pozitív a macska viraemiás ha az ismétlô vizsgálat (tünetmentesség esetén) is pozitív, akkor a 80%-os eséllyel három éven belül elhullás várható valamely FeLV manifesztációs formában (vérképzôszervi, thymus, bélforma, vese, gerincvelôi forma) IF pozitív/ELISA negatív (és késôbb az IF is negatívvá válik) a macska fertôzôdött, és immunizálódott is a vírus ellen.
42
IF negatív/ELISA pozitív
perzisztens hordozó állapot, idônkénti viraemiás szakokkal és 50%-ban várható az elhullás FeLV miatt. A macska leukózis elleni oltóanyagok (alegységvakcinák) egyáltalán NEM zavarják a szerodiagnosztikát! A nyálból és a könnybôl való vizsgálat biztonsága csak 60%-os. A lézeres cytometriás sejtanalízist jelenleg hazánkban nem végzik (flow cytometria). Egyes esetekben egerekbôl származó úgynevezett „mourin antigén” álpozitivitást okozhat.
Macskák immunhiányos betegsége (FIV) A diagnosztikai eljárás során ELISA módszerrel a gp24 vírus burokfehérje ellen termelt ellenanyagokat mutatjuk ki. Az eljárás jól használható a szûrôvizsgálatok során. Az ellenanyagok megjelenéséhez 9 hét szükséges. Ritkán a fertôzôdés letörési szakaszában az ellenanyagképzés a kimutathatóság alá csökkenhet. 12 hetes kor alatt a maternális ellenanyag zavaró tényezô lehet! Jellegzetes stomatitis FIV fertôzöttség esetén A FIV Western Blot, FIV-PCR módszer kutató laborokban érhetô el, melyek igen költségesek. A T sejtek közül a CD4 és CD8 sejt arányának meghatározása nyirokcsomó szövettani mintájából, vagy sejtszeparátumból szintén nem a rutin eljárás még. CD4:CD8 arány csökkenése rossz kórjóslatú a betegség lefolyásában. FIV fertôzöttségre gondoljunk: • krónikus stomatitiseknél (predilekciós helyek)
43
• Perzisztens leukopéniáknál • Terápiarezisztens légzôszervi, enterális, húgyszervi (FLUTD) panaszok esetén • Visszatérô dermatológiai kórképeknél • Hetekig tartó perzisztáló láz esetén
Macskák fertôzô peritonitise (FIP) A FIP az egyik járványtanilag legkevésbé kiszámítható fertôzô macskabetegség. Fellobbanására gyakorlatilag bármikor számíthatunk, ezért a védekezési és a diagnosztikai stratégiát több vonalon érdemes folytatni. FeCV-IF teszt nem specifikus eljárás a szûrô vizsgálatokban, mivel az enterális coronavírus keresztreakciót ad. Pozitivitás esetén ezért csak vélelmezhetjük de nem tekinthetô bizonyítottnak a vírus jelenléte (FIP) klinikai tünetek nélkül. FIP specifikus ELISA teszt elvégzése esetén specifikus patogén FIP vírus elleni u. 7B ellenanyagot mutatunk ki. Más zavaró tényezôvel nem kell számolni ami a keresztreakciót illeti. Hamisan negatív lehet az eredmény, ha kevés az ellenanyag és ez közvetlenül kötôdik az antigénnel, így a kis mennyisége miatt annak Macskák fertôzô peritolitise, exsudativ forma. kimutathatósága is lényegesen csökken.
Klinikai tünetek esetén a szerológiai vizsgálat mellett jellegzetes elváltozásokat találunk a • Vérképben (neutrophilia) • Hyperproteinaemia (a-Globulin frakció nô >35 g/l) • Amiláz aktivitás nô (makroamilázémia) • Jellegzetes hasûri exsudatum (nem mindig mézszerû, de mindig magas a globulin tartalma) (képillusztráció). Feline Coronavírus–PCR teszt gyors szûrôvizsgálatra ad lehetôséget bélsárból, vagy vérbôl és ezzel az enterális coronavírus ürítôk kiszûrhetôk, melyek az új állományba kerülnének. (FIP vírus is enterális corona vírus mutáns!) FIP-specifikus PCR teszt a mutáns coronavírus kimutatására alkalmas exsudativ folyadékgyülembôl (mell vagy has) és bélsárból. Az eljárással nem tudjuk kimutatni a vérben keringô vírusantigént, mert az igen csekély titerben van jelen.
Interpretáció Ha klinikai tünetek jelentkeznek, érdemes a szerológiai vizsgálat mellé, egyéb paraméterek (pleurális folyadék kémiai analízise!) eredményeit is figyelembe venni. Ha tünetmentes az állat és szeropozitív, a szeropozitivitás idejére biztonságosan el kell különíteni szeronegatív társaitól. Az áthangolódási idôszak alatt stresszmentes környezetet kell biztosítani és a klasszikus járványvédelmi szabályok betartására fel kell hívni a tenyésztô figyelmét (bélsártálcák naponta többszöri fertôtlenítése→enterovírus). Az áthangolódás minimális ideje 6–8 hét amelynek letelte után ismételt szûrés javasolt. Számos példa volt már ennél jelentôsen hosszabb ideig tartó tünetmentes de szeropozitív áthangolódási idôszakra is (11 hónap). Fontos hangsúlyozni, hogy szeropozitivitás esetén nem fog feltétlenül klinikai FIP (száraz vagy exsudativ forma) kialakulni! Fontos kiemelni továbbá, hogy a klinikai laboratóriumi leletek ellenére néha csak a kórszövettani eredmény ad megfelelô diagnosztikai választ a kérdésre.
értékelés: titer < 160 negatív titer = 320 pozitív (határérték) titer > 640 pozitív
44
45
IF, Western-blot és PCR technika már elérhetô Magyarországon. Endémiás területen az ellenanyagok titere >1:20 pozitivitást jelent. A diagnózist segíti a fehérvérsejtekben fôleg a monocytákban levô morulák azonosítása (IF, festett készítmény). A pozitív titerértékek évekig perzisztálhatnak.
Toxoplasma gondii-teszt A toxoplasma gondii kimutatására szérum ELISA, IF, Western-blot, Sabin-Feldman teszt és bélsárból történô flotáció eljárás használatos. IgM típusú ellenanyag megjelenése 14 napon belül jelenik meg, amely 12 hétig mutatható ki. IgG típusú ellenanyag megjelenése 3. héttôl várható és évekig magas szinten maradhat. Ezért önmagában egy magas IgG titer még nem jelent aktív fertôzöttséget. A szérum ELISA teszt a T. gondii specifikus antigének kimutatásán alapul, mely a szöveti cystákból intermittálóan szabadul ki. A pozitivitás aktív fertôzöttséget jelez.
Babesiosis Toxosoplasma gondii.
Kórokozó a makrophagokban.
Generalizált toxoplazmosis következtében kialakuló uveitis anterior macskában.
Ellenanyag szintek idôbeli változása.
Értékelés: pozitív antigén vagy ellenanyag teszt: fertôzöttséget jelent Friss keletû fertôzöttség esetén IgM >1:64 Régi keletû,vagy aktiválódott fertôzöttség esetén a savópár vizsgálat során 3–4 szeres IgG-szint titer emelkedés tapasztalható Pozitív flotációs vizsgálat (10x12 µm oocysták) Zoonózis veszélye, ha sporulálódik!
Ehrlichia canis (importált esetek) Klinikailag non regenerativ anaemia, leukopenia, thrombocytopénia, nyálkahártya vérzések, epistaxis, splenomegalia, perzisztáló láz, nyirokcsomó duzzanat, endémiás területi expozíció lehetôsége esetén gondoljunk rá.
46
b.
Hazánkban elérhetô IF-es teszt, mely a szérum antitestek kimutatására szolgál. Jelenleg igen költséges vizsgálati módszer. Elsôsorban krónikus babesiosis diagnosztikája jelent gondot festett készítményekben. Ajánlatos ilyen esetben a mikrocirkuláció területérôl vett mintát (pl. száj nyálkahártyán ejtett szúrásból származó vérmintából kenet) küldeni a laboratóriumba, vagy UH vezérelt lépaspirátum kenetet vizsgálni. Akut esetben jellegzetes a haematológai lelet, nevezetesen leukopenia, thrombocytopenia, monocytosis. Ezt követôen anaemia és a haemolízis miatt már erôteljes leukocytosis is tapasztalható (számos magvas vörösvérsejt mellett). Ha a fertôzôdés után a levett vérmintán hideg agglutinációt tapasztalunk immunhaemolitikus szövôdményre készüljünk fel a terápia során. A 2002-es évben laboratóriumunkban három esetben találkoztunk Babesia gibsoni fetôzöttséggel, melynél krónikus haemolysis volt a klinikai tünet. (b. kép)
Lyme-borreliosis Laboratóriumi interpretációja rendkívül nehéz a betegség jellege és számos klinikai manifesztációja miatt. A laboratóriumi leletet mindig a klinikai képpel összevetve célszerû értékelni. Jellegzetes Lyme-folt
• ELISA és IF-es vizsgálatkor egyéb spirocheták keresztreakciót adnak
47
• A definitiv diagnózist sokszor PCR teszttel, vagy Western immunoblot technikával kell kiegészíteni • A szerológiai áthangolódáshoz (ahhoz,hogy ellenanyagokat tudjunk kimutatni) minimum 14–21 nap szükséges, de lehet hosszabb idô akár több hét is. • Az emelkedô titer aktív fertôzôdésre utal
Antinukleáris Antitest titer (ANA-teszt) Az eljárás kóros immunmediált betegségek diagnosztikájának egyik paramétere, mely a DNS, vagy sejtfelszíni DNS ellen képzôdött autoellenanyag kimutatására szolgál.
Brucellosis teszt (kutya) • Gyors lemez agglutinációs teszt (RSAT) 2 hét múlva pozitív az inokulációt követôen. • Merkaptoetán lemez agglutinációs teszt (ME-SAT) specifikusabb mint az elôzô vizsgálat de 4 hét múlva lesz csak pozitív. • Csô agglutináció (TAT) 3–6 hét múlva pozitív, >1:200 titer aktív fertôzöttséget jelent, <1:100 nincs fertôzöttség. • Merkaptoetán csô agglutináció (ME-TAT) 5–8 hét múlva pozitív >1:100 aktív fertôzöttséget jelent. • Agar gél immunodiffúziós eljárás pozitivitásáho z 5–8 hét szükséges fertôzöttség esetén.
Rheuma-faktor (kutya IgG, IgM) Az RF-faktor autológ IgM és IgG típusú ellenanyagok jelenléte a keringésben melyek immunmediált erozív arthritis okoznak. Eljárás latex módszerrel gyári pozitív és negatív kontroll savókkal párhuzamosan történik. Az pozitivitás SLE esetén is tapasztalható. Az erozív elváltozásoknak sajátos rtg. képe van, melyet együttesen kell értékelni a laboratóriumi eredményekkel.
48
Systemas lupus erythematosus (SLE) kezelés elôtt és a kezelés harmadik hónapjában.
* pozitív a reakció krónikus gyulladásoknál * szisztémás lupus erythematosusnál * polymyositisnél * bizonyos gyógyszerek adagolása után (szulfonamidok, tetraciklinek, procainamid, griseofulvin,) Rheumatoid-arthritis kutyán (degeneratív forma).
normálérték kutya <1:10 macska <1:40
A tartós sulfonamid terápia álpozitivitást okozhat a teszt elvégzése során. A képen sulfonamid adagolás során kialakult úgynevezett, Toxikus epidermál necrolysis (TEN) látható.
49
Parvovírus antigén kimutatása bélsárból (eb, macska, nyérc) PCR módszert használunk. Mintaként friss bélsarat használjuk, de tudni kell, hogy a víruspartikulák legkorábban 48 óra múlva jelennek meg a bélsárral. Paralyticus ileus esetén ez az idô elhúzódhat és hamisan negatív eredményt kaphatunk.
GYÓGYSZERSZINT MONITOROZÁS Digoxin meghatározás Indikáció: Szív-ultrahang vizsgálattal igazolt csökkent kontraktilitás eseteiben. Supraventricularis tachycardiák, -arrhythmiák esetén hatására nô a myocardiális kontrakciók mértéke, szívfrekvencia csökken, a kardiális output növekszik. Dózis → P.os: 0,22 mg/m2/12 h. 0,0055–0,01 mg/kg/12 h. Iv. 0,0022–0,0044 mg/kg/12 h Ajánlás a testfelszínre történô adagolás: Eb. Macska Testtömeg (ttkg.) m2 Testtömeg m2 Testtömeg m2 0,5 0,06 16 0,63 0,5 0,06 1 0,1 17 0,66 1,0 0,1 2 0,15 18 0,69 1,5 0,134 3 0,2 19 0,71 2,0 0,163 4 0,25 20 0,74 2,5 0,184 5 0,29 22 0,78 3,0 0,208 6 0,33 24 0,83 3,5 0,231 7 0,36 26 0,88 4,0 0,252 8 0,4 28 0,92 4,5 0,273 9 0,43 30 0,96 5,0 0,292 10 0,46 35 1,07 5,5 0,316 11 0,49 40 1,17 6,0 0,33 12 0,52 45 1,26 13 0,55 50 1,36 14 0,58 55 1,46 15 0,6 60 1,55
50
Terápiás gyógyszerszint: Toxikus gyógyszerszint:
1,0–2,4 µg/ml >2,5 µg/ml (enterális panaszok, arrhythmia)
A terápiás dózis alkalmazása mellett a digoxin toxicitását növelik → (Furosemid, Verospiron, thyazidok (HYPOKALAEMIA) Quinidin (használatakor 50%-al csökkenteni a dózist) Benzodiazepinek (Seduxen), Erythromicin, tetracyclinek, verapamil Felszívódását csökkentik → Antacidok, cimetidin, metochlopramid (Cerucal) Gyógyszerszintmonitorozás→ A feltöltési idô (7. nap) után a gyógyszerbeadást követô 2–6. órában. mintaként elegendô 2 ml natív vér, mindig K-ion meghatározással!
Phenobarbital Epilepsziás betegek gyógyszeradagjának beállításához illetve a gyógyszeradag módosításakor fontos adat lehet számunkra a a vérszérum phenobarbitál szintje. A májbeli metabolizmusa (felezési idô) az idô elôrehaladtával arányosan nô, tehát az adagok módosítására szükség lehet. A minta haemolízis és lipaemiamentes szérum, melyet a gyógyszerbeadást követô 3–4 óra között kell venni a betegtôl. Terápiás gyógyszerszint kutyánál: 15–40 µg/ml
A C-REAKTÍV PROTEIN (CRP) * * * *
Az akut fázis fehérjék közé az alábbiak tartoznak: Fibrinogén Haptoglobin α-1 savas glikoproteid C-reaktív protein
51
Képzôdésük a májsejtekben cytokinek (IL-1, IL-2, TNF) hatására történik. Képzôdésük akut gyulladásos folyamatokban, valamint szöveti destrukció esetén nagymértékben fokozódik. Klinikai jelentôsége: * Gyulladásos folyamatok, szöveti nekrózisok korai felderítése * Postoperativ infekciók korai jelzése (pl. csontmûtétek), ahol a szeptikus szövôdmények valószínûek, idejekorán felhívja rá a figyelmet és elôbb kezdhetjük meg az antibiotikus terápiát. * Megkezdett antibiotikum terápia esetleges módosítása, vagy kiszélesítése A haematológai vérképváltozások sok tényezôtôl függhetnek, valamint egyes esetekben a fehérvérsejtszám nem ad hû képet az aktuális gyulladás meglétérôl illetve súlyosságáról (Pl. testüregekbe való migrálódás, kimerülési szak) Meghatározása szérumból vagy plazmából, ELISA, immun-ELFO, immundiffúziós, illetve immunturbidimetriás módszerekkel történhet. Laboratóriumunk ez utóbbit végzi. Fiziológiás értéke kutya:
<8 mg/l.
Pajzsmirigy-funkció Tetrajódthyronin (T4) A vérszérum magas T4 értéke a hyperthyreosisnak jó jelzôje, mely idôsebb macskáknál gyakori a hormonszint a 2–10 szeres értékeket is elérhet. Gyakran a pajzsmirigyállomány megnagyobbodásával is jár, mely fizikálisan is észlelhetô. A T4-szint csökkenése azonban nem feltétlenül jelent hypothyreosist. Az elsôdleges pajzsmirigymûködés elégtelensége (veleszületett, thyroiditis, atrophia, tumor) csökken a T4 mennyisége. Másodlagos bántalma a hypofízis TSH (pajzsmirigy stimuláló hormon) termelésének csökkenése miatt jelentkezik, vagy más szerv betegsége, esetleg gyógyszerek miatt is csökkenhet az értéke, ezért alacsonyabb értékeknél célszerû a funkcionális tesztekkel megbizonyosodni a valós helyzetrôl. TSH stimulációs teszt: A stimuláció során exogén serkentô hormont (bovine thyrotropin) adunk intravénásan, melyet feloldás után fagyasztva tárolhatunk 3 hónapig.
52
Protokol: 1. Alapvér vétele 2 ml szérum T4 szintre = T nulla idôpont 2. Ugyanazon a tûn keresztül beadunk TSH-t 0,5 U/kg mennyiségben 3. 6 óra múlva vérvétel T4 szintre = T hat órás minta (ha mód van rá 4 és 8 óra idôközzel is vehetünk mintákat mert ezzel teljesebb stimulációs görbét kaphatunk) Értékelés: A stimuláció után 2–3 szorosára emelkedik a T4 szint, ha a pajzsmirigy mint célszerv jól mûködik, még ha viszonylag alacsony T4 szintrôl indultunk is. A következô gyógyszerek növelik a T4 értékét: ösztrogénszármazékok, halothán, inzulin, csökkenti a T4 értékét: barbiturátok, glükokortikoidok, mitotán, phenitoin. Kutya Macska Normálérték: 19–51 nmol/l 13–39 nmol/l A stimulációs teszt hatására a T4 szint mégsem emelkedik 20 mmol/l fölé hypothyreosissal állunk szemben. A TSH stimulációs teszt viszonylag nehézkes és költséges eljárás, ezért jobban ajánlható a: Kutya TSH (Canine-TSH assay) mennyiségi meghatározása szérumból immunoradiometriás módszerrel, melyet szûrési jelleggel alkalmaz laboratóriumunk a hypothyreosisos betegek kiválogatásában. A módszer pontosságát növeli a T4 hormonnal való arány megállapítása, valamint a Canine Thyroid Control Module alkalmazása. Canine-TSH ng/ml Totál T4: TSH hányados Euthyreoid (normál)
0,1–0,45
36–173:1
Hypothyreoid
0,5–6,5
<34:1
A tartós glükokortikoid terápia csökkenti az értékét.
53
Pajzsmirigy hormon ellenes antitestek
Ösztrogén (ösztradiol-acetát)
A hypothyreosisos esetek jelentôs száma (40%) immunmediált pajzsmirigy betegség, amikor a szervezet a thyroglobulin, T3 vagy T4 ellenes autoantitesteket képez.
Az ösztrogén meghatároIvarzási ciklus Ösztradiol (pg/ml) zás klinikai alkalmazásának Anösztrus <10 legfôbb indikációja az Proösztrus 10–20 ösztrogén termelô tumorok Késôi proösztrus 50–100 felderítésében rejlik. Szukáknál mérhetô hormonszintek függnek a szaporodásbiológai ciklustól. Ezeket a tág határértékek miatt nem használják a rutin gyakorlatban.
Normálérték:
Anti-T3 antitest <10 U Anti-T4 antitest <20 U A hypothyreosisos betegség hátterében meglepôen nagy százalékban anti thyreoglobulin ellenes antitestek mutathatók ki. Általában az euthyreoid kutyák kb. 13%-ában is kimutathatók ezek az autoantitestek, melyek korai jelzôi a késôbben (évek múltán) kialakuló klinikai hypothyreosisnak.
Progeszteron (P4) meghatározás a termékenyítés idejének meghatározásában A szérum progeszteron szintje <2 ng/ml mindaddig,míg az LH csúcs be nem következik.Mivel az ovuláció két nappal késôbb történik, mint az LH csúcs megjelenése ezért a progeszteron szint alkalmas kutyák fedeztetésének optimális idejének megáltapítására. Értékelés: * 2–4 ng/ml közötti érték prooestrus-késôi prooestrus * 4–5 ng/ml közötti érték közelgô LH csúcsot jelez, két nap múlva bekövetkezik az ovuláció * 6–10 ng/ml közötti érték ovulációt jelez Fedeztetési idôpont! * >15 ng/ml fogamzási idôszak befejezôdött * a progeszteron szint NEM alkalmas a vemhesség megáltapítására (kutyában és macskában), fogamzás nélkül is magas az értéke helyette Relaxin meghatározását javasoljuk * >10 ng/ml nemcsak vemhesség alatt, hanem pyometra és álvemhesség alatt * >10 ng/ml koncentráció mérhetô a vemhesség végéig, majd csökken az értéke és az ellés elôtti 24 órában lecsökken 2 ng/ml alá.
54
Endokrin dermatosis (Hyperoestrogenismus rejtett here daganat következtében).
Petefészek cystás elváltozása következtében kialakuló hyperoestrogenismus. (Péra duzzanat, gynecomastia)
Kutya vemhességi teszt (Relaxin) A relaxin specifikus markere a bekövetkezett vemhességnek szukáknál. A nidatiot követôen 21 nap (ovuláció utáni 25. nap) múlva kimutatható a vérbôl. Álvemhességnél nem termelôdik, mivel a relaxint csak a magzatok termelik. Mintaként szérum,vagy plazma alkalmas.
55
A fruktóz-amin koncentráció meghatározásának jelentôsége • A vérglükóz mérése során a vérvétel pillanatában aktuális vércukorszintrôl kaphatunk információt, melyet a szervezet tápláltsági állapota, aktuális neurohormonális állapota így leggyakrabban a szállítás és vérvétel okozta adrenalinhatás miatt fellépô ún. „stressz- hiperglikémia" lényegesen módosíthat. Ez az állapot különösképpen macskáknál okozhat diagnosztikai nehézséget. A stresszérzékeny fajtatiszta macskák (main-coon, sziámi, burma stb.) a polyuriás/polydipsiás kórelôzmény esetén a vérglükóz mérésével nem tudjuk eldönteni, hogy az elváltozás hátterében esetleg diabetes mellitus áll, ugyanis a stressz-hiperglikémia esetén gyakran 12–18 mmol/l vércukor érték is adódhat teljesen egészséges állat esetében is. Ebben az esetben eddig vizeletet kértünk be a tulajdonostól, melyet otthoni nyugodt környezetben fogott fel a macskától, és annak a glükóz és ketontartalma alapján erôsítettük meg, vagy vetettük el az endokrin zavar következtében fellépô kóros anyagcsereváltozást. • Sok esetben a vérvétel az állat agresszivitása miatt csak altatott állapotban lehetséges. Ismert tény, az általánosan használt Xylasin sedativum vércukorszint emelô hatása. A fruktóz-amin meghatározással altatott állat glükózháztatásáról objektív retrospektív információt kaphatunk. • További elônye a diabetes mellitus inzulinterápia hatékonyságának monitorizálása. A méréssel ugyanis gyorsan és egyszerûen tájékozódhatunk az elmúlt idôszak (1–3 hét) történéseirôl. Nem kell hagyatkoznunk a tulajdonos beszámolóira, hogy rendesen adagolta-e az elôírt dózist, mindig és rendszeresen adagolta az inzulint, a diétás utasításokat követte-e. A vizsgálat és a vérvétel okozta stresszhatás miatti átmeneti vércukorszint emelkedéshez elôírt esetleg túlzott inzulinmennyiség applikálása esetén, otthoni környezetben hipoglikémiás állapothoz vezethet. • Jól ismert tény, hogy az állatorvoslásban a diabetes mellitust,csak meglehetôsen késôn nemritkán ketoacidozisos állapotban, sok szervi szövôdmény kíséretében (máj lipidosis, cataracta diabetica lentis, diabeteses nephro és/vagy neuropathia) kerül diagnosztizálásra, amikor a kezelési kilátások nem sok reménnyel kecsegtetnek. A fruktóz-amin mérését ennek kapcsán felvettük fel az idôsödô állatok egészségfelmérô- szûrési protokolljába, hogy idejekorán kerüljenek felderítésre az inzulinelválasztás csökkenésébôl adódó glükózháztartási zavarok. • A glükóz koncentrációja akut pancreatitisnél sok esetben meghaladja a fiziológiás értéket. A prognózis szempontjából jelentôs segítséget nyújthat, hogy a pancreatitis kialakulása a korábban már fennálló irregulált glükózháztartási zavar (hiperlipidémia) következtében alakult ki a mikrocirkulációs zavar következtében, avagy akut pancreatitisbôl adódó átmeneti hiperglikémia esete állt elô. A tulajdonosok felé nyújtott prognózis megítélésében segítséget nyújthat a tekintetben, hogy hosszútávú inzulinkezelésre, avagy átmenti kiegészítésre lesz majdan szükség. A glikált hemoglobin (GHb), amely a vércukor és a vvs.-ek hemoglobin molekulája között létrejövô irreverzibilis kapcsolat következtében jön létre
56
és megmarad mindaddig, amíg a vörösvérsejt él. A felezési idô függ az adott állatfaj vörösvérsejtjének életidejétôl, nevezetesen a vörösvérsejtek életidejével megegyezôen a megelôzô idôszak alatti tartós vércukorszintváltozásról nyújt információt (pl. macskáknál 68 nap). A glikált-hemoglobin koncentrációja (ill. %-os aránya) diabetes mellitus esetén mindig magasabb mint normolgikémiás állapotban. Meghatározása meglehetôsen munkaigényes (kromatográfiás, elektroforetikus, módosított-kolorimetriás), ezért használjuk az ugyan lényegesen drágább, de jól automatizálható fruktó-zamin meghatározás mérési módszerét. A fruktózamin, egy szérumprotein mely szintén nem inzulin dependens és nem enzimatikus glükóz-szérumfehérjék (80 %-ban albumin) kapcsolódásából jön létre. A fruktózamin lényegében „vérglükózszint memóriát jelent" az elmúlt idôszak vércukorszint változásáról ad gyors „összefoglaló jelentést" egy eredmény formájában. Diabeteses macskák, kutyák fruktózamin koncentrációjának értékelése: Nem kezelt >630 (µmol/l) Rosszul beállított betegek 400–630 (µmol/l) Jól beállított betegek (kontrollált) <400 (µmol/l) Laboratóriumunk normálértékei a következôk: Fruktóz-amin (µmol/l) Kutya 260–290 Macska 140–310
Az egyes szervi funkciókat jellemzô laboratóriumi paraméterek összefoglalása Általános Teljes Alap (eb) rutin (eb) májfunkció májfunkció Hematológia AST/GOT AST/GOT AST/GOT ALT/GPT ALT/GPT ALT/GPT Totál bilirubin ALKP ALKP Direkt bilirubin GLDH GGT ALKP TP GGT Alap (macska) Albumin GLDH Májfunkció Pancreas-Amiláz Össz Epesav AST/GOT Lipáz TP ALT/GPT Glükóz Albumin GGT Koleszterin Karbamid GLDH Karbamid Kreatinin Foszfor CK LDH
Vese Hasnyálmirigy funkció funkció Karbamid Pancreas-Amiláz Kreatinin Lipáz Foszfor Glükóz
Anaemia profil Haematológa TP Albumin Szérumvas Vaskötô kapaci. Karbamid Kreatinin Foszfor CK LDH • α-HBDH (LDH-1) Retikulocyta
57
Endokrin Általános zavarra utaló rutin macska biokémiai paraméterek Hematológia AST/GOT
ALKP SIAP (65 °C)
ALT/GPT GGT TP Albumin PancreasAmyláz Glükóz Karbamid Kreatinin Foszfor CK LDH + FeLV/ FIV-teszt
Triglicerid Koleszterin Glükóz ALT/GPT
Diabetes mellitus Fruktózamin Glükóz ALT/GPT
Mûtét elôtti rutin Hematológia ALT/GPT ALKP (GGT) Totál protein Albumin Glükóz Karbamid Kreatinin
Véralvadási panelvizsgálatok
Pajzsmirigy funkció
Vázizom/ Ionogram Szívizom
Hematológia Na+ Triglicerid Akt. parc. K+ Koleszterin thromb. idô Protrombin idô Kortizol Thyroxin (T–4) Fibrinogén TP Albumin
Poliuria/ Polidipsia (PU/PD) Hematológia AST/GOT ALT/GPT Fruktózamin ALKP SIAP (65 °C) GGT Karbamid Kreatinin Nátrium Kálium Glükóz
58
Mellékvese funkció
Tartós hasmenés
Testtömegcsökkenés
CK CK-MB
Na+ K+
LDH AST
Ca2+ Mg2+ Foszfor
Testûri foly. gyülemek
Haematol. Hematológia Össz sejtszám ALT/GPT ALT/GPT Totál protein p-Amiláz AST/GOT Albumin Lipáz ALKP Rivalta-próba T.protein Glükóz Kreatinin (has) Albumin p-Amiláz p-Amiláz Alb./Globulin Lipáz Üledék-cytológia Bélsár CK mikroszkópos vizsgálata Bakteriológia LDH Emésztés Bélsár mikroszkópos vizsgálata
Hematológia
Kutya
Macska Ló
Biokémia
Kutya
Macska Ló
Fehérvérsejt WBC G/l Vörösvérsejt RBC T/l Hematokrit Hct l/l Hemoglobin Hgb g/l MCV fl MCH pg MCHC g/dl Retikulocyta Neutrophil % Stab % Lymphocyta Monocyta % Eosinophil % Basophil %
6-11 4,5-7 0,32-0,45 120-180 63-75 19-24 32-36 <1% 62-80 0-5 30-45% 2-4 2-6 <1
6-12 5,5-8 0,25-0,4 85-155 40-53 13-17 30-36 <11% 55-75 0,5 30-45% 1-3 3-5 <1
Össz-epesav µmol/l GLDH IU/l GGT IU/l BSP ret. %/30 perc Ammónia µmol/l
<30 <10 <10 10 20-80
<30 <10 <10 10 60-110
<15 <10 11-44 T1/2:4 min 15-90
60-80 25-45 26-45 <8 2-4 <310
59-82 23-40 17-34 <10 2-4
7-10 5-11 32-45 80-190 37-5 13-19 31-38,6 Nincs 55-75 0-6 15-35% 2-7 1-4 <1
Abszolút fehérvérsejt szám G/l Neutrophil 3,72 Stab 0-0,3 Lymphocyta 1-4,8 Monocyta 0,1-1,4 Eosinophil 0,1-1,2
2-12,5 0-0,3 1,8-5,4 0,1-0,4 0,4-0,6
Véralvadás vizsgálat Thrombocyta G/l 200-800 Prothrombin Idô sec. <25 APTI sec <40
300-600 100-300 <25 <12 <40 <40
Terápiás gyógyszerszintek Digoxin ng/ml 0,8-2,5 Barbiturát mg/ml 15-40
1-2 -
BIOKÉMIA Májfunkció Kutya Macska AST (GOT) IU/l <50 <50 ALT (GPT) IU/l <60 <60 Totál bilirubin µmol/l <18 <16 Direkt bilirubin µmol/l <5 <7 ALKP IU/l 20-280 20-280 ALKP 65 °C (SIAP) Lelet függô
2,5-12 0-0,4 1-3,5 0,1-0,7 0,1-0,4
Ló <300 <20 <45 <6 <350 <35
Szérum fehérjék Totál protein g/l 60-80 Albumin g/l 25-45 Globulin g/l 27-44 C-reaktív Protein mg/l <8 Fibrinogén g/l 2-4 Fruktóz-amin µmol/l <290 Hasnyálmirigy funkció Alfa-amiláz IU/l 80-900 Lipáz IU/l <900
100-900 <900
Endokrin Glükóz mmol/l 3,8-6 Triglicerid mmol/l 0,6-1,2 T. koleszterin mmol/l 2,5-7,5
3,8-6 0,9-1,6 2-6,5
2,8-5,5 0,1-0,3 2,3-3,6
Vesefunkció Karbamid mmol/l Kreatinin µmol/l Foszfor mmol/l Kálium mmol/l Totál kálcium mmol/l
4,5-9 40-140 0,8-1,8 3,5-5,4 2,1-3,0
5-12,5 40-190 1,2-2,4 3,6-5,2 2,1-3,0
3,6-9 60-160 0,5-1,5 2,7-5,0 2,7-3,2
139-154 105-115 35-42 <3 0,8-1,2
145-156 17-123 98-108 <3 0,9-1,3
134-150 97-105 23-35 <4 0,5-1,1
12-18
10-20
>40 19-27
30-100 20-280 <60
<290 <450 <60
<90 <250 >100
Ionok Nátrium mmol/l Klorid mmol/l Vas µmol/l Laktát mmol/l Magnézium mmol/l Szelén (GSH-Px) U/ml vvs. Réz mmol/l Izom CK IU/l LDH IU/l αHBDH IU/l