Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
1. Penészgombák A penészgombák borászati szerepe Szent István Egyetem Borászati Tanszék
Dr. Magyar Ildikó
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
• fonalas egysejtű szervezetek (cönocita fonál) • levegőt igényelnek • sokféle tápanyagot tudnak hasznosítani • ivartalan szaporodás konídiumokkal vagy ivartalan spórákkal
1
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
Penicillium
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2005. október 5.
Rhysopus
2
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
Penészgombák pozitív szerepe 1. Botrytis cinerea nemesrothadás (aszúsodás) Tokaj-hegyalja, Sauternes, Rust stb.
2. Cladosporium cellare nemes pincepenész
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
3
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2005. október 5.
4
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
Botrytis cinerea
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
5
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
A botrítiszes fertőzés folyamata Process of invasion
2005. október 5.
A botrítiszes fertőzés folyamata Process of invasion
• (Bene-Magyar, 1999)
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
6
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
A botrítiszes fertőzés folyamata Process of invasion
2005. október 5.
Társult mikrobiota egyéb penészek
élesztőgombák (C. zemplinina)
ecetsavbaktériumok mindig felszaporodnak!!!
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
7
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
• Aszúsodás feltétele: – a botrítiszes fertőzés szőlőt teljes érésben érje – a fertőzés után hosszú, száraz periódus következzen
• A feltárt héjon keresztől elpárolgó nedvesség a gyökérzetből nem tud pótlódni a bogyó töpped, bekoncentrálódik!
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2005. október 5.
Nemesrothadás : a Botrytis cinerea penészgomba anyagcsere tevékenységének és a szőlő tőkén való töppedésének együttes eredménye • Csökken – termésmennyiség – a bogyó víztartalma – glükóz-frukróz arány – borkősav, almasav – pektin – asszimilálható N – szőlő fajtajelleg
• Növekszik – cukorkoncentráció – ásványi anyagok – glicerin – glükonsav, ecetsav – citromsav, galakturonsav, nyálkasav – botrítiszes poliszacharidok (glükán) – botrítiszes aromaanyagok – lakkáz enzim
8
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
Tokaji esszenciák fontosabb kémiai paraméterei különböző évjáratokban (Mád) Paraméter sűrűség redukáló cukor..g/l glükóz …g/l fruktóz ..g/l G:F arány glicerin ..g/l titrálható sav ..g/l illósav ..g/l borkősav ..g/l almasav ..g/l glükonsav ..g/l citromsav ..g/l tejsav ..g/l pH
1993 1.295 686 340 343 0.99 24.3 16.5 4.83 5.77 3.20 0.11 0.08 3.18
1999 575 261 302 0.86 29.5 21.8 1.11 7.74 12.5 5.04 0.69 0.89 3.1
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2000 1.287 708 335 382 0.88 30.7 14.7 0.49 4.44 7.42 3.88 0.99 3.14
Cladosporium cellare • Életfeltételei azonosak a jó borospince klímájával • A bor illó szerves anyagaiból táplálkozik • A bor érlelésében nincs közvetlen szerepe • Egyéb penészeket és baktériumokat visszaszorítja tiszta pincelevegő • A légtér páratartalmát szabályozza • Sajátos hangulati eleme a hegyaljai pincéknek
9
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
Penészgombák negatív szerepe • Rothadási folyamatok a szőlőn – – – –
Botrytis cinerea - szürkerothadás Penicillium expansum- zöld rothadás Vegyes rothadások
Termésmennyiség csökken, a minőség jelentősen romlik! • lakkáz enzim - barnulás, barnatörés • dohos, keserű ízanyagok, színanyag veszteség • ecetsavtartalom nő (baktériumok)
• Üzemi higiénia – károsak, kivétel Cladodporium cellare
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2005. október 5.
• Dugóíz – doh-, penész-, föld-, papír-, gyógyszer-íz és szag a palackozott borokban, amely a parafadugóból származik és a dugón is érezhető – oka: a parafa feldolgozás, dugógyártás során a penészgombák kellemetlen aromaanyagokat képezhetnek
• TCA (2,4,6 triklór-anizol) 1.5 ppt • Metil-izoborneol 30 ppt • TCP (2,4,6-triklór-fenol) • guajakol
10
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
Mikotoxin termelés
– a must, bor pH-ján minimális a kockázata a toxintermelésnek (patulin, ochratoxin-A) – de nem lehet figyelmen kívül hagyni
• Patulin:
– Sok Penicillium faj termeli – az erjedés alatt lebomlik, csak penészes szőlőlében fordulhat elő.
• Ochratoxin A (OTA)
– Aspergilus ochraceus, fekete Penicilliumok termelik – Mediterrán országokban gyakoribb – Az erjedés során csökken, de nem bomlik le teljesen – EU határérték: 2 ug/kg OTA
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2005. október 5.
PATULIN • 1943-ban Birkinshaw és munkatársai a Penicillium expansumból izolálták • savas közegben stabil • élettani hatásai: – ödémaképződés – idegrendszer működési zavar – tüdő-, agyvizenyő-, máj-, lép- és vesekárosodás – immunrendszer károsító
• Patulin termelő penészgombák: – – – – –
Penicillium Aspergillus Fusarium Byssochlamys Trichoderma
• előfordulás: – gyümölcsök (alma) – zöldségek
11
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
OCHRATOXIN-A • 1965-ben az Aspergillus ochraceus szűrletéből mutattak ki ochratoxinokat • élettani hatásai: – erős vese és májkárosító – potenciális terratogén és karcinogén
• OTA termelő penészgombák:
• Előfordulás:
– növényekben és növény alapú készítményekben • gabona, kávé, mogyoró, kakaó, bor, szőlőlé, sör
– emberi és állati szervezetekben
– Aspergillus – Penicillium
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
• emberi vér és anyatej • sertésvér, vese
AZ OTA EREDETE ÉS ELŐFORDULÁSA A BOROKBAN • Fajok – hidegebb éghajlaton • gabonafélékben Penicillium verrucosum • fűszerek, kávé és szőlőtermékek Aspergillus fajok
– mediterrán éghajlaton • fekete Aspergillusok – A.carbonarius – A. niger
• Földrajzi eloszlás: – az OTA mennyisége függ attól, hogy a borvidék milyen földrajzi szélességben fekszik – dél felé növekszik
12
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
A szőlő és bor OTA kontaminációjáért felelős gombák, különböző országokban (Koncz 2006)
Ország
Felelős fajok
Argentína
A. niger
Ausztrália
A. carbonarius
Brazília
2005. október 5.
Hivatkozások Da Rocha és munkatársai (2002); Magnoli és munkatársai (2003) Heenan és munkatársai (1998);
A. carbonarius
Aspergillus carbonarius
Leong és munkatársai (2004) Da Rocha ás munkatársai (2002)
A. niger Lataste és munkatársai (2004); Franciaország
A. carbonarius
Pechavy és munkatársai (2003); Sage és munkatársai (2002)
Görögország
A. carbonarius
Tjamos és munkatársai. (2004)
A. niger Magyarország
Izrael
A. niger
Varga és munkatársai (2005)
A. carbonarius
Mitchell és munkatársai (2004)
A. niger Olaszország
A. carbonarius
Battilani és munkatársai. (2003)
A. niger
Portugália
A. carbonarius
Abrunhosa és munkatársai (2001);
A. niger
Serra és munkatársai (2003)
A. ochraceus A. carbonarius Spanyolország A. ochraceus
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
Bau és munkatársai (2005) Belli és munkatársai (2004) Cabanes és munkatársai (2002)
13
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
0,7
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
0,5 0,4
(pH3,2; 20 oC, 2weeks)
0,3 0,2 0,1 0
Kontroll
Botrytis
Penicillium
Asp. ochraceus
0,7 0,6 0,5 0,4 0,3 0,2
Chardonnay
Sauvignon
Irsai Olivér
0
Aszú wine (after fermentation)
0,1
Aszú base (before fermentation)
OTA concentrations measured in different wines
OA ug/l
OA ug/l
• Nemzetközi adatok szerint az OTA a kész borok jelentős részében kimutatható kis koncentrációban. A rendszeres borfogyasztással akkumulálódhat a szervezetben, ezért szigorú határérték vonatkozik a borokra: 2 µg/l • A borok OTA koncentrációja északról délre haladva növekvő tendenciát mutat. A szőlőn előforduló OTA termeléséért melegebb országokban egyértelműen az un. fekete Aspergillusok (A. carbonarius, A. niger), hidegebb területeken pedig inkább Penicillium fajok felelősek.
OTA production of some mould on sterile grape musts
0,6
14
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
OTA-CONCENTRATIONS MEASURED IN TOKAJI WINES (HPLC) Kállay-Bene, 2000
Minta Tokaji ófurmint (Bene pincészet) Tokaji édes szamorodni ’97 Tokaji édes szamorodni ’96 Nyers aszú (Royal) Nyers aszú erjesztve RM321 (2/a) Nyers aszú erjesztve RA100 (3/c) TRW piros (2001-i palackozás) Tokaji 6p. aszú ’95 Tokaji 5p. aszú ’93 Tokaji aszú esszencia ’95
OTA (μg/l) 0,014 0 0,055 0 0 0 0,193 0 0,149 0
• A botrítiszes borokban nem magasabb az OTA koncentráció, mint más fehér borokban! • A vörösborok OTA koncentrációja magasabb a fehérboroknál (héjonáztatás) • Bár a hazai klíma nem kedvez az OTA termelődésnek, az OTA szennyezettséget nem teljesen elhanyagolható élelmiszerbiztonsági veszélyforrásnak kell tekinteni – Megelőzés: megfelelő szőlőtermesztési technológia – Csökkentés: borászati technológia eszközeivel (kémiai és biológiai eljárások)
Határérték: 2 g/L (EU) Comission Regulation 2006. (EC) No 401/2006
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
15
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
Az OTA csökkentés lehetőségei – megfelelő növényvédelem (CCP!) – penészes szőlő feldolgozásánál: • áztatás nélkül, gyors léelválasztás • bentonitos v. aktív szenes mustülepítés • bentonitos együtterjesztés
– a biológiai almasavbontás csökkenti a mennyiséget – a bor derítése bentonittal, PVPP-vel, aktív szénnel
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
2005. október 5.
KÉMIAI ELJÁRÁSOK
• • • • •
bentonit K-kazein aktív szén szilikagél szilikagél és aktív szén kombinációja
16
Budapesti Corvinus Egyetem, Borászati Tanszék
2005. október 5.
JOGI SZABÁLYOZÁS • A 466/2001/EK rendelet és módosításai szabályozzák az élelmiszerekben előforduló ochratoxin legmagasabb határértékét, amely borokban és/vagy más szőlőmust alapú italokban 2,0 µg/kg.
Magyar Ildikó A borászati mikrobiológia alapjai I.
17