VIZSGÁLAT NEHÉZFÉMEKRE NÖVÉNYI DROGOKBAN ÉS NÖVÉNYI DROGKÉSZÍTMÉNYEKBEN

2.4.27. Vizsgálat nehézfémekre növényi drogokban és növényi drogkészítményekben

Ph.Hg.VIII. - Ph.Eur.8.2.-1

07/2014:20427

2.4.27. VIZSGÁLAT NEHÉZFÉMEKRE NÖVÉNYI DROGOKBAN ÉS NÖVÉNYI DROGKÉSZÍTMÉNYEKBEN Figyelmeztetés: a zárt, nagynyomású roncsolóedények és a mikrohullámú laboratóriumi eszközök használata megköveteli a gyártó által mellékelt, biztonsági előírások és a használati utasítás alapos ismeretét. KÉSZÜLÉK A készülék általában a következő részekből áll: –

a politetrafluoretilén (PTFE), prefluoralkoxi (PFA)-polimer, kvarcüveg vagy üveg, 20–150 ml térfogatú roncsolóedények, légmentes zárást biztosító záróelemmel, a tartály belsejében uralkodó nyomás szabályozására szolgáló szeleppel, valamint a gáz kiengedésére alkalmas politetrafluoretilén-csővel,

–

olyan rendszer, amely biztosítja valamennyi lombik azonos torziós erővel történő, légmentes lezárását,

–

programozható mikrohullámú sütő (pl. 2450 MHz magnetronfrekvenciás, 1%-os fokozatonként 0 W és 1500±70 W között változtatható kimenő teljesítményű), valamint egy szabályozható sebességű szívóventillátorral, forgatható lemeztányér-rendszerrel és füstelszívó vezetékrendszerrel ellátott, politetrafluoretilén-borítású, mikrohullámú tér,

–

atomabszorpciós spektrométer (2.2.23), induktív csatolású plazma atom atomemissziós-spektrométer (2.2.57), vagy induktív csatolású plazma-tömegspektrométer (2.2.58).

VIZSGÁLAT A vizsgálatot atomabszorpciós spektrometriás (AAS) (2.2.23), induktív csatolású plazma atomemissziósspektrometriás (ICP-AES) (2.2.57), vagy induktív csatolású plazma-tömegspektrometriás (2.2.58) módszerrel végezzük. Az alább leírt mintaelőkészítési és mérési paraméterektől való eltérés megengedett, amennyiben azok megfelelnek a validálási követelményeknek, továbbá ha a mérés napján a rendszeralkalmassági vizsgálat is megfelelő. Mintaelőkészítés Használat előtt minden üvegárut és laboratóriumi eszközt R tömény salétromsav 10 g/l töménységű oldatával tisztítunk. Vizsgálati oldat. A vizsgálandó anyag előírt mennyiségét (kb. 0,50 g porított növényi drogot (1400) (2.9.12) roncsolólombikba mérjük, majd 4 ml R nehézfémmentes tömény sósavat és 6 ml R nehézfémmentes tömény salétromsavat adunk hozzá. A lombikot légmentesen lezárjuk. Hét roncsolólombikot – a vizsgálati oldattal –mikrohullámú sütőbe helyezünk. A roncsolást 3 lépésben hajtjuk végre, a következő program szerint: 15 percig 80%-os, 5 percig 100%-os, 20 percig 80%-os teljesítmény. Ezután a lombikokat levegőn, vagy vízben hagyjuk lehűlni. A lehűlt roncsolólombikokat kinyitjuk és a kapott tiszta, színtelen oldatokat 50 ml-es mérőlombikokba visszük át. A roncsolólombikokat 2×15 ml R nehézfémmmentes tömény salétromsavval átmossuk és a mosófolyadékokat is a mérőlombikokba öntjük, majd a mérőlombikokat R vízzel jelretöltjük. Szükség esetén alkalmazhatunk módosító szereket (pl. elektrotermikus atomizáció esetében R magnézium-nitrát 10 g/ml koncentrációjú oldatának 1,0 ml-ét és R ammónium-dihidrogén-foszfát 100 g/l töménységű oldatának 1,0 ml-ét.) „Vak” oldat. 4 ml R nehézfémmentes tömény sósav és 6 ml R nehézfémmentes tömény salétromsav és elegyét roncsolólombikban a vizsgálati oldattal azonos módon kezeljük.



ARZÉN, KADMIUM, RÉZ, NIKKEL ÉS ÓLOM MEGHATÁROZÁSA ELEKTROTERMIKUS ATOMIZÁCIÓS AAS (2.2.23) MÓDSZERREL Az arzén-, kadmium-, réz-, nikkel- és ólomtartalmat közvetlen kalibrációs módszerrel (2.2.23/I. módszer), vagy standard addiciós módszerrel (2.2.23, II. módszer) határozzuk meg, melyhez az egyes nehézfémek összehasonlító oldatait és a 2.4.27.-1. táblázatban feltüntetett műszerparamétereket alkalmazzuk. A “vak” oldat abszorbanciáját kivonjuk a vizsgálati oldatra kapott értékből. 2.4.27.-1. Táblázat – elektrotermikus atomizáziós AAS műszerparaméterek As

Cd

Cu

Ni

Pb

hullámhossz

nm

193,7

228,8

324,8

232

283,5

résszélesség

nm

0,5

0,5

0,5

0,2

0,5

lámpaáram

mA

10

6

7

10

5

fűtési hőmérséklet

°C

1400

800

800

800

800

atomizálás hőmérséklete

°C

2600

1800

2300

2500

2200

gázáramlási sebesség

l/perc

3

3

3

3

3

ARZÉN ÉS HIGANY MEGHATÁROZÁSA HIDEGGŐZ VAGY HIDRID ATOMZÁCIÓS (2.2.23) MÓDSZERREL Az arzén- és higany-tartalmat közvetlen kalibrációs módszerrel (2.2.23/I. módszer), vagy standard addiciós módszerrel (2.2.23, II. módszer) határozzuk meg, melyhez arzén- vagy higany-összehasonlító oldatokat és folyamatos áramlási rendszerű, automata hidrid-generátort használunk. A “vak” oldat abszorbanciáját levonjuk a vizsgálati oldatra kapott értékből. Arzén Mintaoldat. A vizsgálati oldat, illetve a fentebb leírtak szerint készített “vak” oldat 19,0 ml-éhez R káliumjodid 200 g/l töménységű oldatának 1 ml-ét adjuk. Az oldatot szobahőmérsékleten kb. 50 percig, vagy 70 °Con kb. 4 percig állni hagyjuk. Savas reagens. R nehézfémmentes tömény sósav. Redukáló reagens. R nátrium-[tetrahidro-borát(III)] 6 g/l-es oldata, mely R nátrium-hidroxid 5 g/l töménységű oldatával készült. A 2.4.27.-2. táblázatban feltüntetett műszerparamétereket alkalmazhatjuk. Higany Mintaoldat. A vizsgálati oldat, illetve a “vak” oldat, melyek készítését ld. fent. Savas reagens. R nehézfémmentes tömény sósav 515 g/l töménységű oldata. Redukáló reagens. R ón(II)-klorid 10 g/l töménységű oldata, amelyet R nehézfémmentes hígított sósavval készítünk. A 2.4.27.-2. táblázatban feltüntetett műszerparamétereket alkalmazhatjuk.



2.4.27.-2. Táblázat – hideggőz vagy hidrid atomizációs AAS műszerparaméterek As

Hg

hullámhossz

nm

193,7

253,7

résszélesség

nm

0,2

0,5

lámpaáram

mA

10

4

savas reagens áramlási sebessége

ml/perc

1,0

1,0

redukáló reagens áramlási sebessége

ml/perc

1,0

1,0

kvarc (fűtött)

kvarc (nem fűtött)

0,1

0,1

abszorpciós cella N2-gáz áramlási sebessége

l/perc

ARZÉN, KADMIUM, RÉZ, HIGANY, NIKKEL ÉS ÓLOM MEGHATÁROZÁSA ICP-AES (2.2.57) MÓDSZERREL Az arzén-, kadmium-, réz-, higany-, nikkel- és ólomtartalmat közvetlen kalibrációs módszerrel (2.2.23/I. módszer) határozzuk meg, melyhez az egyes nehézfémek összehasonlító oldatait, vagy az összes meghatározandó fémiont együttesen tartalmazó oldatot és a 2.4.27.-3. táblázatban feltüntetett műszerparamétereket alkalmazzuk. A “vak” oldat emisszióját levonjuk a vizsgálati oldatra kapott értékből. ARZÉN, KADMIUM, RÉZ, HIGANY, NIKKEL ÉS ÓLOM MEGHATÁROZÁSA ICP-MS (2.2.58) MÓDSZERREL Az arzén-, kadmium-, réz-, higany-, nikkel- és ólomtartalmat közvetlen kalibrációs módszerrel (2.2.23/I. módszer) határozzuk meg, melyhez az egyes nehézfémek összehasonlító oldatait, vagy a 2.4.27.-4. táblázatban javasolt analitikai izotópokat és egyéb tömegeket alkalmazzuk. A “vak” oldat emisszióját levonjuk a vizsgálati oldatra kapott értékből. RENDSZERALKALMASSÁG A mérés napján rendszeralkalmassági vizsgálatot kell végezni, hogy bebizonyítsuk a mintaelőkészítés és a mérőrendszer megfelelőségét. A mintaoldat megfelelőségének elfogadási követelménye: a kapott oldat tiszta legyen. A mérőrendszer megfelelőségének elfogadási követelménye: a kalibrációs görbe által meghatározott koncentráció-tartományon belüli standard oldat mért koncentrációja az adott fémre legfeljebb 20%-ban térhet el az elméleti értéktől. VALIDÁLÁSI KÖVETELMÉNYEK Az alkalmazott analitikai eljárást a megfelelő általános fejezetben (AAS (2.2.23), ICP-AES (2.2.57), ICPMS (2.2.58)) leírt módszerrel kell validálni. Ezen felül az alább leírt követelményeknek is meg teljesülniük kell. SPECIFIKUSSÁG



A módszer specifikussága annak bizonyítását jelenti, hogy a mintaelőkészítés és a mérési módszer a mérendő fém(ek) megbízható meghatározását teszi lehetővé, az elvárhatóan jelen levő egyéb komponensek (pl. vivőgáz, szennyezők, mátrix) mellett. Elfogadási követelmény: az eljárásnak képesnek kell lennie minden mérendő nehézfém egyértelmű meghatározására a várhatóan jelenlevő komponenesek mellett (beleértve egyéb nehézfémeket, mátrixkomponenseket és egyéb, interferenciót okozó anyagokat); a specifikusság igazolható legyen a meghatározandó fémre vonatkozó pontossági (accuracy) követelményeknek való megfeleléssel.

KALIBRÁCIÓS TARTOMÁNY A módszer linearitási tartományába essen mindegyik vizsgált fémion kalibrációs tartománya; a kalibrációs tartományon kívül eső fémkoncentrációjú oldatokat úgy kell hígítani, hogy a végső koncentráció a kalibrációs tartományba essen. Elfogadási követelmény: a visszanyerési követelményeknek való megfeleltetéssel adjuk meg a kalibrációs tartományt. TORZÍTÁSMENTESSÉG (ACCURACY) A torzítatlanságot bizonylattal ellátott referenciaanyag (CRM), vagy visszanyerési vizsgálat segítségével ellenőrizzük. Visszanyerési vizsgálat. A visszanyerés megadható a vizsgálati mintához ismert mennyiségű referenciaanyag hozzáadásával (a célkoncentráció 50–150%-os tartományában, legalább három koncentráció értéknél, még akkor is, ha a referencia anyag eredeti koncentrációja a várt értékkel egyezik); három párhuzamos mérést végzünk. Elfogadási követelmény. A hozzáadott standard visszanyerése mindegyik mért koncentrációnál, a mérések átlagára vonatkoztatva, 70–150% közé essen. ISMÉTELHETŐSÉG Vizsgálati minták: 6 független vizsgálandó minta egy megfelelő referenciaanyag hozzáadásával a megfelelő koncentrációban, vagy 3 eltérő koncentrációban, 3–3 párhuzamost mérve. Elfogadási követelmény: A relatív szórás (RSD) mindkét esetben nem lehet nagyobb a 2.4.27.-5. táblázatban feltüntetett értéknél. KÖZTES PONTOSSÁG Vizsgálni kell a véletlenszerű események (laboratóriumon belüli) hatását az analitika módszer pontosságára. A köztes pontosság bizonyításához elegendő az alábbi három kísérlet valamelyikének való megfelelés: ismételt mérés eltérő napokon, eltérő műszereken, vagy különböző analitikusok által végrehajtva. A háromból egy paraméter végrehajtása elegendő a köztes pontosság ellenőrzésére. Elfogadási követelmény: A relatív szórás (RSD) nem lehet nagyobb a 2.4.27.-5. táblázatban feltüntetett értéknél.

MAGHATÁROZÁSI HATÁR



Határozzuk meg a legkisebb koncentrációt az elfogadási követelményeknek megfelelve. Használjuk a visszanyerés vizsgálat eredményeit. Elfogadási követelmény: a maghatározási határértéknek a specifikációs határ alatt kell lennie. 2.4.27.-3. Táblázat – ICP-AES műszerparaméterek As

Cd

Cu

Hg

Ni

Pb

hullámhossz

nm

193,696/ 167,197/ 189,042

214,438/ 226,502/ 228,802

324,754/ 327,396/ 224,700

184,950/ 253,652/ 435,835

231,604/ 231,997/ 352,454

220,351/ 283,306/ 168,215

Ar, Monitorline

nm

430,010

430,010

430,010

430,010

430,010

430,010

Plazmaenergia

W

1200

1200

1200

1200

1200

1200

igen

igen

igen

igen

igen

igen

Csúcsalgoritmus háttérkorrekcióval

2.4.27.-4. Táblázat – ICP-MS mérésekhez javasolt analitikai izotópok és egyéb tömegek Izotóp

Elem

75

Arzén

106, 108, 111, 114

Kadmium

63, 65

Réz

202

Higany

60, 62

Nikkel

206, 207, 208

Ólom

2.4.27.-5. Táblázat A mérendő fém koncentrációtartománya (mg/kg)

Ismételhetőség (RSD) (%)

Köztes pontosság (RSD) (%)

0,01–1

20

32

>1

10

16

KIMUTATÁSI HATÁR (HATÁRÉRTÉKVIZSGÁLATOK ESETÉN ALKALMAZANDÓ) Meghatározzuk azt a legkisebb koncentrációt, amelyhez tartozó jel egyértelműen különbözik az "üres" oldat jelétől. Elfogadási követelmény: a kimutatási határ nem lehet nagyobb, mint a specifikációs határhoz tartozó koncentráció 0,1-szerese.

VIZSGÁLAT NEHÉZFÉMEKRE NÖVÉNYI DROGOKBAN ÉS NÖVÉNYI DROGKÉSZÍTMÉNYEKBEN

Recommend Documents