Uji Potensi sebagai Tabir Surya Secara in Vitro Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Tanaman Bangkal (Nauclea subdita)

P ro sid ing Sem ina r Na siona l & Wo rkshop “Pe rkemba ngan Te rki ni Sa in s Fa rma si & K l in i k 5” | Padang , 6 -7 No vembe r 2015

Uji Potensi sebagai Tabir Surya Secara in Vitro Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Tanaman Bangkal (Nauclea subdita) (In

Vitro Sunscreen Potency Test Of Ethyl Acetate Fraction From Stem Bark Of Bangkal (Nauclea subdita)) Dina Rahmawanty1, Zakiah1, Fadhillaturrahmah1 1Program

Studi Farmasi FMIPA Universitas Lambung Mangkurat

Corresponding email: [email protected] ABSTRAK Bangkal (Nauclea subdita) secara empiris digunakan sebagai kosmetika tradisional oleh masyarakat Kalimantan Selatan. Ekstrak etanol kulit batang bangkal telah diuji aktivitasnya sebagai antioksidan dan tabir surya. Penelitian ini bertujuan untuk menentukan potensi sebagai tabir surya dari fraksi etil asetat kulit batang bangkal (Nauclea subdita). Uji potensi sebagai tabir surya dari fraksi etil asetat kulit batang tanaman bangkal dilakukan secara in vitro dengan menentukan nilai SPF (Sun Protection Factor) menggunakan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 290-320 nm dengan metode Mansur. Hasil penelitian menunjukkan bahwa fraksi etil asetat kulit batang tanaman bangkal (Nauclea subdita) memiliki potensi sebagai tabir surya dengan nilai SPF berturut-turut sebesar 18, 21 dan 24 (proteksi ultra). Berdasarkan hasil penelitian tersebut dapat disimpulkan bahwa fraksi etil asetat kulit batang tanaman bangkal (Nauclea subdita) berpotensi untuk dimanfaatkan sebagai sebagai tabir surya alami. Kata Kunci: Kulit batang, Bangkal (Nauclea subdita), Tabir surya PENDAHULUAN

dimanfaatkan dalam industri produk tabir

Penggunaan tabir surya merupakan salah satu

surya.

upaya yang dapat dilakukan untuk melindungi

Masyarakat

kulit dari efek merugikan yang disebabkan oleh

memanfaatkan kulit batang tanaman bangkal

radiasi UV. Kemampuan suatu tabir surya dapat

(Nauclea subdita) secara tradisional sebagai

melindungi kulit dengan menunda eritema

bedak dingin. Bedak dingin ini berkhasiat untuk

dinyatakan dengan Sun Protection Factor (SPF)

melindungi kulit wajah dari radiasi ultraviolet

(Hassan et al., 2013). Nilai SPF menunjukkan

yang merupakan salah satu komponen utama

berapa kali perlindungan kulit dilipatgandakan

yang dipancarkan oleh sinar matahari (Hassan

sehingga aman di bawah sinar matahari tanpa

et al., 2013). Selain itu, dapat berkhasiat untuk

mengalami eritema (Rai & Srinivas, 2007). Tabir

menghaluskan permukaan kulit, memberi kesan

surya yang beredar di pasaran umumnya

putih (atau kekuningan), menghilangkan flek-

terbuat dari bahan kimia sintetik. Bahan alam

flek

tanaman

membersihkan sel-sel mati pada kulit wajah

asli

Indonesia

belum

banyak

hitam,

daerah

Kalimantan

mencegah

jerawat

Selatan

dan

(Soendjoto & Riefani, 2013).

278


METODE PENELITIAN

terdapat dalam ekstrak dan fraksi dari kulit

Pengumpulan dan Pengolahan Sampel

batang bangkal . Skrining fitokimia yang

Kulit batang bangkal diperoleh dari desa

dilakukan meliputi uji alkaloid, flavonoid, tanin,

Sinar Bulan Kecamatan Satui Kabupaten Tanah

antrakuinon, saponin, triterpen dan fitosterol.

Bumbu Provinsi Kalimantan Selatan. Kulit

Sebanyak 1 gram ekstrak etanol dilarutkan

batang bangkal dikumpulkan dengan cara

dengan etanol 70% dalam labu ukur 25 mL,

dikelupas kulit batang utama dengan ketebalan

sedangkan untuk fraksi etil asetat dilarutkan

2-6 mm, disortasi basah, dicuci bersih, dipotong-

dengan etil asetat sebanyak 25 mg dalam labu

potong dengan panjang 10 cm dan lebar 2-3 cm,

ukur 25 mL, lalu filtrat yang diperoleh

dikeringkan dengan oven pada suhu 50 oC

digunakan untuk skrining fitokimia.

selama 12 jam, disortasi kering, diserut,

A. Uji Steroid

dihaluskan dengan blender, lalu diayak dengan

1) Uji Libermann Burchard

ayakan mesh 25.

Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan

Ekstraksi dan Fraksinasi Ekstraksi

dilakukan

dengan kloroform kemudian disaring. Filtrat dengan

metode

yang

diperoleh

ditambahkan

asam

asetat

maserasi ultrasonikasi. Sebanyak 1 kg serbuk

anhidrat, lalu dipanaskan dan didinginkan.

simplisia diekstraksi dengan etanol 70% (1:5).

Ditambahkan asam sulfat pekat pada dinding

Sampel diaduk dengan magnetic stirrer pada

tabung secara perlahan-lahan, jika terbentuk

kecepatan 50 rpm selama 15 menit. Sonikasi

cincin coklat menandakan adanya fitosterol

dilakukan selama 30 menit pada suhu 50oC.

(Tiwari et al., 2011).

Kemudian dilakukan perendaman pada suhu

2) Uji Salkowski

kamar selama 1x24 jam. Hasil maserasi disaring

Sebanyak 50 mg sampel dilarutkan

dengan corong Buchner. Remaserasi dilakukan

dengan kloroform kemudian disaring. Filtrat

3x24 jam. Filtrat dipekatkan dengan rotary

yang diperoleh ditambahkan beberapa tetes

vacuum evaporator pada suhu 55oC sampai

asam sulfat pekat, lalu dikocok. Jika campuran

menjadi kental. Kemudian diuapkan dalam

berwarna kuning emas hasil positif triterpen

cawan porselin di atas waterbath hingga bobot


tetap.

B. Uji Saponin

Lima gram ekstrak etanol difraksinasi

1) Uji Froth

dengan corong pisah menggunakan pelarut yang

Sebanyak 2 mL sampel ke dalam tabung

memiliki kepolaran berbeda yaitu n-heksana

reaksi kemudian ditambahkan 10 mL akuades

dan etil asetat. Ekstrak kental disuspensikan

lalu

menggunakan akuades terlebih dahulu dengan

perubahan yang terjadi Jika terbentuk lapisan

perbandingan

busa setinggi 1 cm menandakan hasil positif

1:20,

kemudian

dilakukan

fraksinasi dengan pelarut n-heksana (1:20) dan etil asetat (1:20).

selama

15

menit.

Diamati

saponin (Tiwari et al., 2011). 2) Uji Foam

Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol dan Fraksi Etil Asetat Skrining

dikocok

Sebanyak 2 mL sampel dikocok dengan 2 mL air. Jika terbentuk busa yang bertahan

fitokimia

bertujuan

untuk

mengetahui senyawa metabolit sekunder yang

selama 10 menit menandakan hasil positif saponin (Tiwari et al., 2011). 279


C. Uji Flavonoid

F. Uji Antrakuinon

1) Uji Reagen Alkalin

Uji Antrakuinon dilakukan dengan cara

Sebanyak 2 mL sampel ditambahkan

melarutkan 2 mL sampel dengan 10 mL akuades

beberapa tetes larutan NaOH. Jika terbentuk

kemudian disaring, filtrat diekstrak dengan 5

larutan berwarna kuning yang akan memudar

mL

warnanya jika ditambahkan campuran asam,

ditambahkan dengan amonia lalu dikocok, bila

menandakan adanya flavonoid (Tiwari et al.,

terdapat warna merah hasil positif mengandung

2011).

antrakuinon(Marliana et al., 2005).

2) Uji Timbal Asetat

benzena.

Hasil

ekstrak

kemudian

Penentuan Nilai SPF

Sebanyak 1 mL sampel dimasukkan ke

Penentuan

nilai

metod

secara

invitro

sebagai

berikut:

dalam tabung reaksi ditambahkan dengan 1 mL

dilakukan

Pb Asetat 10% dan dikocok. Perubahan warna

sebanyak 25 mg fraksi etil asetat dilarutkan

larutan menjadi warna coklat kekuningan

dalam 5 mL etanol 70% p.a, diperoleh larutan

menandakan adanya flavonoid (Solihah et al.,

baku induk 5000 ppm. Kemudian dilakukan

2012).

pengenceran berbagai konsentrasi 50 ppm, 100

D. Uji Alkaloid

ppm, 150 ppm, 200 ppm, 250 ppm dan 300

1) Uji Dragendroff’s

dengan

SPF

ppm. Larutan seri kadar dibaca serapannya

Sebanyak 1 mL filtrat ditambahkan dengan

pada panjang gelombang antara 290-320 nm

3 tetes H2SO4 lalu ditambah 1 mL reagen

setiap interval 5 nm, blanko yang digunakan

Dragendroff’s (kalium bismut iodida) terbentuk

adalah etanol 70% p.a. Nilai SPF dihitung

endapan berwarna merah hasil positif alkaloid

dengan menggunakan persamaan matematis


Mansur et al. (1986), persamaan dapat dilihat

2) Uji Meyer’s

sebagai berikut:

Sebanyak 1 mL filtrat ditambahkan dengan 3 tetes H2SO4 lalu ditambah 1 mL reagen Meyer’s (kalium merkuri iodida) terbentuk endapan berwarna kuning menandakan adanya alkaloid (Tiwari et al., 2011). E. Uji Tanin

Keterangan: EE = Spektrum efek eritema

1) Uji Besi (III) Klorida

I = Intensitas spektrum sinar

Sebanyak 1 mL sampel ditambahkan

Abs = Serapan tabir surya

dengan 1 mL FeCl3 3%. Adanya endapan hijau kehitaman menandakan adanya tanin (Solihah et al., 2012). Sebanyak 2

Potensi atau tingkat kemampuan tabir surya dikelompokkan berdasarkan nilai SPF menurut

2) Uji Gelatin dengan

CF = Faktor koreksi

ketentuan FDA dapat dilihat pada tabelsebagai 2

mL

mL

sampel

larutan

ditambahkan

gelatin

1%

berikut:

yang

mengandung NaCl. Jika terbentuk endapan berwarna putih menandakan adanya tanin (Tiwari et al., 2011). 280


Tabel 1. Tingkat kemampuan tabir surya berdasarkan nilai SPF (Wilkinson et al., 1982) SPF 2-4 4-6 6-8 8-15 ≥ 15

Kategori Proteksi Tabir Surya Proteksi minimal Proteksi sedang Proteksi ekstra Proteksi maksimal Proteksi ultra

HASIL DAN DISKUSI

pada

Sampel yang digunakan pada penelitian

suhu

50oC

meningkatkan

yang

bertujuan

permeabilitas

untuk

dinding

sel

ini adalah kulit batang dari tumbuhan Bangkal

tumbuhan sehingga lebih permeabel dilewati

(Nauclea subdita). Dasar pemilihan sampel ini

oleh pelarut dan senyawa aktif dari serbuk

karena dimanfaatkan secara tradisional oleh

simplisia lebih cepat terlarut dalam pelarut

masyarakat Kalimantan Selatan sebagai bedak

(Depkes RI, 2000).

dingin yang dipercaya secara empiris dapat

Ekstrak

kental

yang

diperoleh

berkhasiat untuk melindungi kulit wajah dari

difraksinasi dengan pelarut yang memiliki

radiasi ultraviolet yang merupakan salah satu

kepolaran yang berbeda. Tingkat kepolaran

komponen utama yang dipancarkan oleh sinar

pelarut yang berbeda pada proses fraksinasi

matahari (Hassan et al., 2013).

akan mempengaruhi jenis dan kadar senyawa

Simplisia dihaluskan hingga

kulit

dengan

menjadi

menggunakan

batang

menggunakan

serbuk,

ayakan

kemudian

mesh

25.

bangkal

aktif yang terkandung (Widyawati et al., 2010).

blender

Pelarut yang digunakan yakni n-heksana, dan

diayak

etil asetat sehingga diperoleh fraksi n-heksana

Simplisia

dan

fraksi

etil

asetat.

Pelarut

n-heksana

diperkecil bentuknya menjadi serbuk bertujuan

digunakan untuk menarik senyawa nonpolar

agar memiliki luas permukaan yang besar. Luas

seperti

permukaan serbuk yang besar lebih mudah

sedangkan etil asetat untuk menarik senyawa

diadsorpsi

yang

pelarut

sehingga

dapat

minyak bersifat

atsiri,

lemak

semipolar

dan

seperti

resin, steroid,

meningkatkan laju disolusi (Sinko & Singh,

terpenoid dan flavonoid (Pranata, 2013). Fraksi

2011) sehingga menghasilkan hasil ekstraksi

etil asetat yang diperoleh yakni fraksi kering

yang optimal. Semakin kecil ukuran partikel,

berupa serbuk kering yang berwarna kuning

semakin besar luas bidang kontak antara

kecoklatan. Fraksi etil asetat kulit batang

padatan dan pelarut, serta semakin pendek jalur

bangkal dapat dilihat pada Gambar 1.

difusinya sehingga semakin banyak senyawa aktif yang tersari ke dalam pelarut. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi yang dimodifikasi dengan ekstraksi ultrasonik. Sonikasi dilakukan selama 30 menit

281


Gambar 1. Fraksi etil asetat kulit batang bangkal (Nauclea subdita) Skrining

fitokimia

bertujuan

untuk

skrining fitokimia golongan senyawa ekstrak

mengetahui golongan senyawa yang terdapat

etanol

kulit

batang

bangkal

mengandung

dalam ekstrak etanol dan fraksi etil asetat dari

alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, triterpen dan

kulit batang tanaman Bangkal(Nauclea subdita).

fitosterol. Fraksi etil asetat dari kulit batang

Skrining fitokimia yang dilakukan meliputi uji

bangkal mengandung flavonoid, fitosterol dan

alkaloid, flavonoid, tanin, saponin, steroid

triterpen. Hasil skrining fitokimia dapat dilihat

(triterpen dan fitosterol) dan antrakuinon. Hasil

pada tabel 2.

Tabel 2. Skrining fitokimia ekstrak etanol dan fraksi etil asetat kulit batang bangkal (Nauclea subdita) Golongan Senyawa Ekstrak Etanol Fraksi Etil Asetat Fitosterol + + Steroid Triterpen + + Flavonoid + + Alkaloid + Tanin + Saponin + Antrakuinon Keterangan : (+) : terdapat golongan senyawa (-) : tidak terdapat golongan senyawa Nilai Sun Protection Factor (SPF) digunakan

mengukur

kemampuan

sebagai parameter penentuan potensi tabir

berpotensi

sebagai

surya

menggunakan

melindungi kulit dari UV-B. UV-B memiliki

spektrofotometer UV-Vis. Penentuan nilai SPF,

energi yang dapat menembus lapisan paling luar

ditentukan dengan menggunakan persamaan

kulit (epidermis) yang efeknya dapat terlihat

matematis yang dikembangkan oleh Mansur et

secara langsung berupa eritema (Rai & Srinivas,

al. (1986). Berbagai konsentrasi larutan sampel

2007).

yang

diukur

dengan

fraksi etil asetat diukur serapannya pada panjang gelombang 290-320

yang

surya

dalam

Pengujian tingkat kemampuan atau potensi

Panjang

tabir surya secara invitro dengan penentuan

panjang

nilai SPF fraksi etil asetat kulit batang bangkal

gelombang UV-B. Percobaan dilakukan pada

pada konsentrasi 50 ppm, 100 ppm, 150 ppm,

panjang

200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan 350 ppm. Nilai

gelombang

tersebut

gelombang

nm.

tabir

senyawa

merupakan UV-B

karena

untuk

282


SPF menyatakan berapa kali daya tahan alami

sebanyak 10 kali daya tahan alami kulit

kulit seseorang dilipatgandakan sehingga aman

seseorang jika berada di bawah matahari.

di bawah matahari tanpa mengalami eritema

Kenaikan nilai SPF pada tiap konsentrasi fraksi

(Rai & Srinivas, 2007). Nilai SPF 10 menyatakan

dapat dilihat pada Gambar 2.

suatu

senyawa

dapat

melipatgandakan

Gambar 2. Grafik nilai SPF pada tiap konsentrasi fraksi etil asetat kulit batang bangkal (Nauclea subdita) Berdasarkan grafik pada gambar 2, dapat

ini dikarenakan kandungan flavonoid yang

dikelompokkan tingkat kemampuan tabir surya

terdapat pada fraksi etil asetat kulit batang

berdasarkan nilai SPF menurut ketentuan FDA

tanaman bangkal. Flavonoid memiliki gugus

(Wilkinson et al., 1982). Fraksi etil asetat kulit

kromofor berupa gugus aromatik terkonjugasi

batang bangkal dengan konsentrasi 50 ppm dan

yang dapat menyerap radiasi UV, terutama UV-B

100 ppm diperoleh nilai SPF berturut-turut 4

yang

dan 5 yang berada dalam rentang 4-6, termasuk

Penyerapan gugus kromofor terhadap UV-B

memiliki tingkat kemampuan proteksi sedang.

mampu mengurangi energi UV-B yang dapat

Fraksi etil asetat kulit batang bangkal dengan

menembus kulit sehingga dapat menunda efek

konsentrasi 150 ppm dan 200 ppm diperoleh

eritema (Wolf et al., 2001). Mekanisme golongan

nilai SPF berturut-turut 10 dan 11 yang berada

senyawa flavonoid berpotensi sebagai tabir

dalam rentang 8-15, termasuk memiliki tingkat

surya dianalogikan seperti mekanisme tabir

kemampuan proteksi maksimal. Fraksi etil

surya

asetat kulit batang bangkal dengan konsentrasi

penyerapan.

250 ppm, 300 ppm, dan 350 ppm diperoleh nilai

dapat

kimia

menyebabkan

yakni

efek

dengan

eritema.

mekanisme

Mekanisme tabir surya sebagai penyerap

SPF berturut-turut 18, 21, dan 24 berada dalam

adalah

terjadi

delokalisasi

elektron

yang

kategori lebih dari 15, termasuk memiliki

menyebabkan eksitasi elektron dari energi

tingkat kemampuan proteksi ultra.

rendah ke tingkat energi yang lebih tinggi.

Dari hasil tersebut menunjukkan bahwa

Eksitasi tersebut memerlukan energi, maka

fraksi etil asetat kulit batang bangkal berpotensi

elektron menyerap energi dari radiasi UV.

sebagai tabir surya. Potensi sebagai tabir surya

Ketika elektron kembali ke tingkat energi yang 283


lebih rendah maka elektron melepaskan energi

Kesimpulan yang dapat diperoleh dari

yang lebih rendah dari energi yang semula

penelitian ini adalah fraksi etil asetat kulit

diserap. Radiasi UV dengan energi yang lebih

batang bangkal menunjukkan potensi sebagai

rendah

tidak

tabir surya pada konsentrasi 50 ppm, 100 ppm,

menyebabkan efek eritema pada kulit (Wolf et

150 ppm, 200 ppm, 250 ppm, 300 ppm dan 350

al., 2001).

ppm dengan nilai SPF berturut-turut sebesar 4

akan

berkurang

atau

dan 5 (proteksi sedang); 10 dan 11 (proteksi KESIMPULAN

maksimal); 18, 21 dan 24 (proteksi ultra). DAFTAR PUSTAKA

Depkes RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Hassan, I., K. Dorjay, A. Sami, & P. Anwar. 2013. Suncreens and Antioxidant as Photo-Protective Measures: An Update. Our Dermatol Online. 4: 369-374. Mansur, J. S., M. N. R. Breder, M. C. A.Mansur, & R. D. Azulay. 1986. Determination of Sun Protection Factor by Ultraviolet Spectrophotometry. Anais Brasileiros de Dermatologia. 61 : 121-124. Marliana, S. D., V. Suryanti & Suyono. 2005. Skrining Fitokimia dan Analisis Kromatografi Lapis Komponen kimia Buah Labu Siam (Sechium edule Jacq. Swartz.) dalam Eksrak Etanol. Biofarmasi. 3: 26-31. Pranata, R. 2013. Uji Aktivitas Antioksidan Fraksi Kloroform Kulit Buah Naga Merah (Hylocereus lemairei Britton dan Rose) Menggunakan Metode DPPH (1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil). Skripsi, Fakultas Kedokteran, Universitas Tanjungpura, Pontianak. Rai, R. & C. R. Srinivas. 2007. Photoprotection. Indian Journal Dermatology, Venereology, and Leprology. 73: 73-79.

Sinko, P. J., & Singh, Y. 2011. Martin’s Physical Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 6th Edition. Baltimore, Lippicott Williams & Wilkins. Soendjoto, M. A. & M. K. Riefani. 2013. Bangkal (Nauclea sp.) Tumbuhan Lahan Basah Bedak Dingin. Warta Konservasi Lahan Basah. 21: 13 dan 18. Solihah, M.A., W.R.W.Ishak & N.A. Rahman. 2012. Phytochemical Screening and Total Phenolic Content of Malaysian Zea mays hair Extracts. International Food Research Journal. 19: 15321538. Tiwari, P., B. Kumar, M. Kaur, G. Kaur, & H. Kaur. 2011. Phytochemical Screening and Extraction: A Review. Internationale Pharmaceuticasciencia. 1: 98-106. Widyawati, P. S., C. H. Wijaya, P. S. Harjosworo & Dondin Sajuthi. 2010. Pengaruh Ekstraksi dan Fraksinasi terhadap Kemampuan Menangkap Radikal Bebas DPPH (1,1-Difenil-2Pikrilhidrazil) Ekstrak dan Fraksi Daun Beluntas (Pluchea Indica Less). Seminar Rekayasa Kimia dan Proses. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Wolf, R., D. Wolf, P. Morganti & V. Ruocco. 2001. Sunscreen. Clinics in Dermatology. 19: 252-459.

284

Uji Potensi sebagai Tabir Surya Secara in Vitro Fraksi Etil Asetat Kulit Batang Tanaman Bangkal (Nauclea subdita)

Recommend Documents