UJI AKTIVITAS SENYAWA BIOAKTIF KAPANG ENDOFIT BENALU TEH TERHADAP KAPANG Fusarium oxysporum DAN Colletotrichum capsici
SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mancapai Derajat Sarjana S-1
Oleh : MARIA YULIANTI 1101070073
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO 2015 i
ii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
iii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
iv Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
UJI AKTIVITAS SENYAWA BIOAKTIF KAPANG ENDOFIT BENALU TEH TERHADAP KAPANG Fusarium oxysporum DAN Colletotrichum capsici ABSTRAK Benalu teh (Scurrula oortiana) merupakan tumbuhan parasit yang diketahui berpotensi sebagai antimikroba. Namun terdapat kendala dalam pemanfaatannya sehingga perlu alternatif lain, salah satunya melalui pemanfaatan kapang endofit. Kapang endofit merupakan mikroorganisme yang terdapat di dalam sistem jaringan tumbuhan dan mampu menghasilkan berbagai senyawa bioaktif antara lain berupa senyawa antimikroba. Mikroba yang sering menyerang tanaman cabai antara lain dari jeis kapang, yaitu Fusarium oxysporum yang disebut penyakit layu fusarium dan Colletotrichum capsici yang disebut penyakit antraknosa. Tujuan penelitian yaitu menguji dan membandingkan luas zona hambat senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh dalam menekan pertumbuhan kapang F. oxysporum dan C. capsici. Penelitian telah dilakukan bulan Januari-April 2015 di Laboratorium Terpadu, Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimen yang dilakukan dengan metode uji Kirby-Bauer. Rancangan percobaan yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL), dengan 3perlakuan dan 3 kali ulangan.Perlakuan berupa fungisida (kontrol +), isolat BKS1(A), dan isolat BR-L(A). Data berupa luas zona hambat senyawa dari kapang endofit terhadap kapang uji (F. oxysporum dan C.capsici). Data dianalisis menggunakan Analisis of Variance (ANOVA) dengan tingkat kepercayaan 95% dan uji lanjut Duncan Multiple Range Test (DMRT) dengan tingkat kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa luas zona hambat berbeda nyata pada setiap perlakuan. Senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh isolat BK-S 1 (A) mampu menghambat pertumbuhan kapang F. oxysporum dan C. capsici, sedangkan isolat BR-L(A) tidak mampu menghambat. Penghambatan kapang C. capsici oleh isolat BK-S 1 (A) lebih tinggi dibandingkan kontrol, sedangkan terhadap F. oxysporum lebih rendah dibandingkan kontrol. Hasil uji fitokimia dengan metode KLT, isolat BKS1(A) menunjukan adanya kandungan senyawa golongan alkaloid, flavonoid dan saponin, sedangkan isolat BR-L(A) mengandung senyawa golongan flavonoid dan saponin.
Kata kunci: benalu teh, Colletotrichumcapsici,Fusarium oxysporum, kapang endofit, senyawa bioaktif
v Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
THE TEST OF ACTIVITIES ON THE BIOACTIVE COMPOUND OF ENDOPHYTE WORMS IN THE TEA EPIPHYTE TO THE WORMS OF Fusarium oxysporum AND Colletotrichum capsici
ABSTRACT Tea epiphyte (Scurrula oortina) is a parasitic plant potential to be animicrobe, but it has an obstacle in its use. It needs another option, one of them is through the of endophyte worms. The endophyte worms are organsmscontained in the plants’ tissue and it can produce bioactive compounds among of which is antimicrobe compound. One of the microbes frequently attacking chilli plants is worm kinds, i.e. Fusarium oxyspurum which cause fusarium wither disease, and Colletotrichum capsici which cause anthtraxnosa disease. The objectives of the study are to examine and to compare the inhibition zone of bioactive compound of endophyte worms in the tea epiphyte in resisting the growth of the two worms. This had been done in JanuaryApril 2015 in the UMP’s Integrated Labs. This was an experiment study employing Kirby-Bauer test. The treatments are fungicide (control +), isolate of BK-S 1 (A), and isolate BR-L(A). Data are the area of inhibition zone of the endophyte worms to the tested worms (F. oxyspurum and C. capsici). The analysis was done using Analysis of Variance (ANOVA) at a reliability level of 95% and an additional test of Duncan Multiple Range Test (DMRT) at a reliability level 95%. Based on the analysis, the area of inhibiting zone is significant in each treatment. The bioactive compoundof endophyte worms of the tea epiphyte, isolate of BK-S 1 (A) can inhibit both worms, meanwhile the isolate of BR-L(A) canot do. The inhibition on C. capsici worm by the isolate BK-S 1 (A) is higher than the control, but the inhibition on F. oxyspurum is lower. From the phytocemical test using KLT method, the isolate of BK-S 1 (A) indicates that presence of the compound of alkaloid, flavonoid, and saponin classes, meanwhile the isolate of BR-L(A) containes the flavonoid and saponin classes. Keyword: bioactive compounds, Colletotrichum capsici, endophyte worms, Fusarium oxyspurum, tea epiphyte
vi Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
PERSEMBAHAN
Dengan mengucap rasa syukur Alhamdulilah kehadirat Allah SWT yang telah memberikan limpahan rahmat, hidayah serta karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan SKRIPSI ini dengan baik. Sholawat serta salam semoga tetap tercurah kepada Rasulullah SAW beserta para sahabat, keluarganya serta umatnya yang senantiasa istiqomah. Skripsi ini penulis persembahkan kepada: 1.
Papah dan mamah tercinta yang dengan tulus mendoa’kan, memberi semangat dan dukungan baik secara material maupun spiritual kepada penulis.
2.
Pembimbing yang selalu senantiasa sabar membimbing dari awal penyusunan sampai akhir.
3.
Pembaca yang budiman.
vii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
MOTTO
1.
Biarlah kita kehilangan sesuatu karna Allah, tapi jangan sampai kita kehilangan Allah karena sesuatu.
2.
Pikirkan hal-hal yang paling hebat, dan engkau akan menjadi yang terhebat. Tetapkan akal pada hal tertinggi, dan engkau akan mencapai yang tertinggi.
3.
Kegagalan hanya terjadi bila kita menyerah dan tiadanya keyakinanlah yang membuat orang takut menghadapi tantangan.
4.
‘‘Dan janganlah kamu mengikuti apa yang kamu tidak mempunyai pengetahuan tentangnya. Sesungguhnya pendengaran, penglihatan, dan hati, semuanya itu akan diminta pertanggungjawabannya.’’ (QS. Al- Israa’: 36)
5.
‘‘Makhluk di atas bumi yang paling utama adalah manusia, bagi manusia yang paling
utama
adalah
hatinya.
Seorang
guru
sibuk
menyempurnakan,
memperbaiki, membersihkan, dan mengajarkannya dekat kepada Allah. Maka mengajarkan ilmu merupakan ibadah dan merupakan pemenuhan tugas dengan khalifah Allah. Bahkan merupakan tugas kekhalifahan Allah yang paling utama (Imam Al- Ghazali).
viii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
UCAPAN TERIMA KASIH
Assalamu’aliakum Wr .Wb Pertama-tama marilah senantiasa kita panjatkan puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan berbagai kenikmatan pada kita semua, semoga kita dapat menjadi hamba-NYA yang dapat bersyukur.Shalawat dan salam semoga selalu tercurah kepada Rasulullah SAW, keluarga, sahabat dan pengikutnya yang selalu istiqomah dijalnnya. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Mikrobiologi, Prodi Biologi dan Laboratorium Biologi Farmasi UMP telah dilaksanakan selama kurang lebih 4 bulan yaitu dimulai bulan Januari 2015 dan berakhir pada bulan April 2015 telah berjalan dengan baik. Tujuan penelitian yaitu menguji dan membandingkan luas zona hambat senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh dalam menekan pertumbuhan kapang Fusarium oxysporum dan Colletotrichum capsici. Drs. Heri Maryanto, M. Si. sebagai pembimbing I dan Dini Siswani Mulia, S. Pi., M.Si sebagai pembimbing II. Dalam penyusunan SKRIPSI penulis tidak terlepas dari bantuan dan bimbingan dari berbagai pihak, maka pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada ; 1.
Drs. Ahmad, M.Pd selaku Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
2.
Drs. Arief Husin, M. Si. selaku Ketua Progran Studi Pendidikan Biologi, Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.
3.
Seluruh rekan-rekan yang memberikan motivasi dan semangat untuk tidak menyerah ketika gagal.
4.
Sahabat
dan
teman-teman
seperjuangan
PRODI
BIOLOGI
UMP
ANGKATAN 2011 yang selalu memberikan semangat.
ix Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
5.
Semua pihak yang telah membantu dalam pelaksanaan Penelitian di Laboratorium Mikrobiologi, Prodi Biologi dan Laboratorium Biologi Farmasi UMP. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat dan memberikan masukan positif serta
menambah pengetahuan bagi pembaca. Penulis menyadari bahwa hanya keterbatasan yang disajikan, dengan segala kerendahan hati, saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan guna perbaikan penyusunan skripsi yang akan datang. Wassalamu’alaikum Wr.Wb Purwokerto, 05 Agustus 2015
Penulis
x Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
DAFTAR ISI Halaman UCAPAN TERIMA KASIH .................................................................... ix DAFTAR ISI .............................................................................................. xi DAFTAR TABEL ..................................................................................... xv DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xvi DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. xvii BAB I.
PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang..................................................................... 1
1.2
Rumusan Masalah ............................................................... 5
1.3
Tujuan Penelitian ................................................................. 5
1.4
Manfaat Penelitian ............................................................... 6
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Deskripsi Benalu Teh (Scurrula oortina ..................................... 7 2.1.1 Klasifikasi Banalu The .................................................... 7 2.1.2 Morfologi Banalu The ..................................................... 7 2.1.3 Kandungan Senyawa Benalu Teh ................................... 9 2.1.4 Manfaat Benalu Teh ........................................................ 10 2.2 Kapang Endofit ............................................................................ 11 2.2.1 Deskripsi Kapang Endofit ............................................... 11 2.2.2 Klasifikasi dan Karakteristik Kapang Endofit ................ 13 2.2.2.1 Isolat BK-S 1 (A) (Zopfiella curvata) ................ 13
xi Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
2.2.2.2 Isolat BR-L(A) (Humicola fuscoarta) .............. 14 2.2.3 Kandungan Senyawa Kapang Endofit............................. 15 2.2.4 Manfaat Kapang Endofit ................................................. 16 2.3 Senyawa Bioaktif ......................................................................... 17 2.4 Kapang Uji ................................................................................... 19 2.4.1 Kapang Fusarium oxysporum ......................................... 19 2.4.2 Kapang Colletotrichum capsici ....................................... 21 BAB III. METODE PENELITIAN 3.1 Waktu dan Tempat Penelitian...................................................... 24 3.2 Alat dan Bahan Penelitian ........................................................... 24 3.2.1 Alat .................................................................................. 24 3.2.2 Bahan ............................................................................... 24 3.3 Rancangan Percobaan .................................................................. 25 3.4 Cara Kerja .................................................................................... 25 3.4.1 Pembuatan Media ............................................................ 25 3.4.1.1 Pembuatan Media PDA (Potato Destroce Agar) ................................................................... 25 3.4.1.2 Pembuatan Media PDA (Potato Destroce Broth) .................................................................. 26 3.4.2 Kultur Kapang Endofit Benalu Teh ................................ 26 3.4.3 Purifikasi Kapang Fusarium oxysporum dan Colletotrichum capsici .................................................... 26
xii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
3.4.4 Produksi Senyawa Bioaktif Kapang Endofit untuk Antifungi ......................................................................... 27 3.4.5 Uji Kandungan Senyawa Bioaktif Kapang Endofit Menggunakan Metode KLT (Kromatografi Lapis Tipis) ............................................................................... 27 3.4.6 Uji aktivitas senyawa bioaktif kapang endofit ................ 29 3.5 Menghitung Luas Zona Hambat ........................................... 30 3.6 Analisis Data ........................................................................ 30 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian.................................................................... 31 4.1.1 Purifikasi Kapang Endofit Benalu Teh Isolat BK-S 1 (A) dan BR-L(A)............................................. 31 4.1.2 Purifikasi Kapang Fusarium oxysporum dan Colletotrichum capsici ............................................... 33 4.1.3 Hasil Produksi Senyawa Bioaktif Kapang Endofit Benalu Teh ................................................................. 36 4.1.4 Analisis Penapisan Fitokimia Supernatan Kapang Endofit Benalu Teh (Scurrula oortina) ...................... 37 4.1.5 Hasil Pengujian Senyawa Bioaktif Kapang Endofit Benalu Teh terhadap Pertumbuhan Kapang Fusarium oxysporum dan Colletotrichum capsici ........ 40
xiii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
4.2 Pembahasan .......................................................................... 43 4.2.1 Uji Fitokimia Senyawa Bioaktif Kapang Endofit Benalu Teh (Scurrula oortina) Isolat BK-S 1 (A) dan BR-L(A) dengan Metode KLT ....................... 43 4.2.2 Kemampuan Senyawa Bioaktif Kapang Endofit Benalu Teh terhadap Pertumbuhan Kapang Fusarium oxysporum dan Colletotrichum capsici .. 44 BAB V. SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan .............................................................................. 49 5.2 Saran .................................................................................... 50 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 51 LAMPIRAN ............................................................................................... 56
xiv Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1
Hasil penapisan fitokimia supernatan kapang endofit benalu teh (Scurrula oortina) Isolat BK-S 1 (A) (Zopfiella curvata) dengan metode KLT ............................. 38
Tabel 4.2
Hasil penapisan fitokimia supernatan kapang endofit benalu teh (Scurrula oortina) Isolat BR-L(A) (Humicola fuscoarta) dengan metode KLT ........................ 38
Tabel 4.3
Hasil pengukuran luas zona hambat senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh terhadap pertumbuhan Fusarium oxysporum ........................................................... 42
Tabel 4.4
Hasil pengukuran luas zona hambat senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh terhadap pertumbuhan Colletrotichum capsici......................................................... 42
xv Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
DAFTAR GAMBAR
Gambar 4.1
Hasil purifikasi kapang endofit benalu teh isolat BK-S 1 (A) (Zopfiela curvata) .............................................. 32
Gambar 4.2
Hasil purifikasi kapang endofit benalu teh isolat BR-L(A) (Humicola fuscoarta) ........................................... 33
Gambar 4.3
Hasil purifikasi kapang Fusarium oxysporum .................... 34
Gambar 4.4
Hasil purifikasi kapang Colletrotichum capsici .................. 35
Gambar 4.5
Hasil Produksi supernatan kapang endofit benalu teh ........ 36
Gambar 4.6
Hasil penapisan fitokimia supernatan kapang endofit benalu teh (Scurrula oortina) .............................................. 39
Gambar 4.7
Hasil uji aktivitas senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh dan kontrol Masalgin terhadap pertumbuhan kapangFusarium oxysporum dan Colletrotichum capsici .................................................................................. 41
Gambar 4.8
Diagram perbandingan luas zona hamabat senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh dalam menekan pertumbuhan kapang Fusarium oxysporum dan Colletrotichum capsici......................................................... 43
xvi Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1
Hasil pengukuran diameter dan luas zona hambat senyawa bioaktif kapang endofit benalu teh terhadap Fusarium oxysporum dan Colletrotichum capsici ............... 56
Lampiran 2
Analisis data luas zona hambat terhadap kapang Fusarium oxysporum dengan SPSS..................................... 58
Lampiran 3
Analisis data luas zona hambat terhadap kapang Colletrotichum capsici dengan SPSS .................................. 60
Lampiran 4
Foto hasil penelitian............................................................. 62
xvii Uji Aktivitas Senyawa..., Maria Yulianti, FKIP UMP, 2015
