Lampiran 1. Spesifikasi Peralatan dan Bahan No.
Nama Alat Merek/Tipe 1. Mortar dan Vintage Pestle
Kegunaan Menghaluskan bahan
Tempat Lab. Mikologi dan Fitopatologi
2. Autoklaf
Hirayama, model Sterilisasi alat dan HVE-50 bahan
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
3. Gelas ukur
Iwaki TE-32 Pyrex 50 ml
Mengukur volume larutan
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
4. Labu Iwaki TE-32 Erlenmeyer Pyrex 250 ml
Menampung larutan
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
5. Tabung reaksi
Kultivasi kapang
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
Kerja aseptis
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
Kultivasi kapang
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
-
Meletakkan tabung reaksi
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
9. Beaker glass
Iwaki-Pyrex TE 32, 1000 ml
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
10. Hot Plate Stirer
Ika Labortechnic
Tempat pembuatan medium, menampung larutan Menghomogenkan suatu larutan dengan pengadukan Kerja aseptis
Mengambil atau memindahkan koloni ke suatu medium Memanaskan bahan
Lab. Mikologi dan Fitopatologi
Iwaki TE-32 Pyrex 15 ml
6. Laminar Air Flow 7. Cawan petri
-
Petriq, 10 cm
8. Rak tabung
11. Sprayer
-
12. Jarum ose
-
Lab. Mikologi dan Fitopatologi Lab. Mikologi dan Fitopatologi
bio.unsoed.ac.id 13. Kompor
14. Kamera digital 15. Timbangan analitik
Hitachi
Canon Digital IXUS 80 IS -
Dokumentasi Menimbang sampel atau bahan
28
Lab. Mikologi dan Fitopatologi Lab. Mikologi dan Fitopatologi
Lampiran 1. (lanjutan) No.
Nama Bahan 1 Tempe Dage
Spesifikasi -
Kegunaan Sebagai sampel
2 PDA
-
Medium kultivasi jamur
3 SA
-
Medium uji
4 SMA
-
Medium uji
5 RA
-
Medium uji
6 Agar
AA
7 Alkohol
70 %
8 Spirtus
-
9 Plastik wrape 10 Akuades
Klin Pak -
11 Alumunium foil 12 Tissue
Klin Pak Paseo
13 Karet gelang
-
14 Kertas bekas
-
15 Kapas
Darma Husada
16 Label
-
17 Plastik
Joyo Boyo 2 kg
18 Antibiotik
Chloramphenicol
bio.unsoed.ac.id
29
Pemadat Kerja aseptis Kerja aseptis dan sebagai pengisi pembakar Bunsen Membungkus medium Pelarut Nenutup larutan Membersihkan alat dan bahan yang telah dipakai Mengikat tabung reaksi yang akan disterilisasi Membungkus alat yang akan di sterilisasi Menyumbat medium Memberi tanda pada sampel Membungkus bahan dan medium yang akan di sterilisasi Mencegah kontaminasi bakteri
Lampiran 2. Data Pengukuran Diameter Zona Jernih 2.1. Pengukuran Diameter Zona Jernih pada Medium SA No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Kode Isolat A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3
Diameter Koloni (cm) 3 4,5 7,5 2 5 4 2
Diameter Zona Jernih (cm) 4,5 6 8 6 4
2.2. Pengukuran Diameter Zona Jernih pada Medium SMA No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Kode Isolat A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3
Diameter Koloni (cm) 1 2,5 1 6 6 2 6
Diameter Zona Jernih (cm) 4 3 4 6,5 2,5 9
2.3. Pengukuran Diameter Zona Jernih pada Medium RA No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7.
Kode Isolat A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3
Diameter Koloni (cm) 1 1 1 1 2 1 1,5
Diameter Zona Jernih (cm) 4 1,5 1,5 2 2,5 2
bio.unsoed.ac.id
30
Lampiran 3. Gambar Makroskopis Koloni Kapang pada Medium PDA
Gambar 3.1. Isolat A 1Gambar 3.2. Isolat A 2
Gambar 3.3. Isolat A 3
Gambar 3.4. Isolat B1
Gambar 3.5. Isolat C1
Gambar 3.6. Isolat C2
bio.unsoed.ac.id
31
Gambar 3.7. Isolat C3
Lampiran 4. Gambar Mikroskopis Sel Kapang ( Perbesaran 40x10 )
a
a
a
a
b b
Gambar 4.1. Isolat A 1
b
Gambar 4.2. Isolat A 2
b
Gambar 4.3. Isolat A 3
a
Gambar 4.4. Isolat B1
a a
b
b b
bio.unsoed.ac.id Gambar 4.5. Isolat C1 Keterangan :
Gambar 4.6. Isolat C 2
= 200 µm ; a = sporangium
Gambar 4.7. Isolat C3
; b = sporangiofor
32
Lampiran 5. Gambar Pengamatan Uji Enzimatis Kapang
Gambar 5.1. Kapang Mampu Gambar 5.2. Kapang Tidak Mampu Menghasilkan Enzim AmilaseMenghasilkan Enzim Amilase
Gambar 5.3. Kapang Mampu Gambar 5.4. Kapang Tidak Mampu Menghasilkan Enzim Protease Menghasilkan Enzim Protease
Gambar 5.5. Kapang Mampu Gambar 5.6. Kapang Tidak Mampu Menghasilkan Enzim Lipase Menghasilkan Enzim Lipase Keterangan :
zona jernih bio.unsoed.ac.id
33
Lampiran 6. Performansi Dage yang Dihasilkan
Gambar 6.1. Dage dengan Gambar 6.2. Dage denganGambar 6.3. Dage dengan Inokulum A1 Inokulum A2 Inokulum A3
Gambar 6.4. Dage dengan Gambar 6.5. Dage dengan Gambar 6.6. Dage dengan Inokulum B1 Inokulum C1 Inokulum C2
bio.unsoed.ac.id
Gambar 6.7. Dage dengan Inokulum C3
34
Lampiran 7. Data Hasil Analisis Proksimat Dage dengan Isolat Asal Ajibarang, Karanglewas dan Sokaraja 7.1.Hasil Analisis Karbohidrat Dage Kode Isolat A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3
1 24,81 21,43 23,56 25,65 20,83 25,30 27,35
(%) 2 24,61 21,39 23,61 25,73 20,79 25,43 27,13
3 24,71 21,47 23,66 25,81 20,87 25,56 27,24
Jumlah
Rata-rata
74,13 64,29 70,83 77,19 62,49 76,29 81,72
24,71 21,43 23,61 25,73 20,83 25,43 27,24
Jumlah
Rata-rata
7.2. Hasil Analisis Lemak Dage (%) Kode Isolat
1
2
3
A1
4,17
4,13
4,15
12,45
4,15
A2
3,66
3,65
3,67
10,98
3,66
A3
3,89
3,88
3,87
11,64
3,88
B1
3,83
3,81
3,82
11,46
3,82
C1
4,06
4,07
4,05
12,18
4,06
C2
4,50
4,52
4,54
13,56
4,52
C3
3,77
3,75
3,73
11,25
3,75
Jumlah
Rata-rata
14,58
4,86
16,98
5,66
7.3. Hasil Analisis Protein Dage
Kode Isolat
(%) 1
2
3
A1
4,87
4,85
4,86
A2
5,66
A3
6,70
6,72
6,74
20,16
6,72
B1
6,80
6,83
6,86
20,49
6,83
C1
7,44
7,40
7,48
22,32
7,44
C2
4,28
4,29
4,30
12,87
4,29
C3
4,64
4,60
4,62
13,86
4,62
bio.unsoed.ac.id 5,64 5,68
35
Lampiran 8. Perhitungan ANOVA Pengaruh Pemberian Inokulum Berbeda Terhadap Kadar Proksimat Dage 8.1. Perhitungan ANOVA Kadar Karbohidrat Perlakuan A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3 Jumlah
1 24,81 21,43 23,56 25,65 20,83 25,3 27,35 168,93
Ulangan 2 24,61 21,39 23,61 25,73 20,79 25,43 27,13 168,69
Jumlah 3 24,71 21,47 23,66 25,81 20,87 25,56 27,24 169,32
74,13 64,29 70,83 77,19 62,49 76,29 81,72 506,94
FK = 506,942 21 JK = (24,812+24,612+24,712+21,432+..........+27,242) - FK JKP = (74,132+64,292+.......+81,722) - FK 3 JKG = JK – JKP
bio.unsoed.ac.id
36
Analisis Ragam Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat Bebas 6 14 20
Jumlah Kuadrat 98,125 0,102 98,227
Kuadrat F hitung Tengah 16,354 2240,288** 0,007
F table 5% 2,85
Keterangan : ** : perlakuan pemberian inokulum yang berbeda berpengaruh sangat nyata terhadap kadar karbohidrat dage
Uji Lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT) LSD=t(0,05);14√2KTG/r 0,069761498 0,149638414
Kode Isolat C1 A2 A3 A1 C2 B1 C3
Rata-rata 20,83 20,83 21,43 23,61 24,71 25,43 25,73 27,24
0 0,6 2,78 3,88 4,6 4,9 6,41
21,43 0 2,18 3,28 4 4,3 5,81
Kode Isolat 23,61 24,71
0 1,1 1,82 2,12 3,63
25,43
25,73
27,24
0 bio.unsoed.ac.id 0,72 1,02 2,53
0 0,3 1,81
0 1,51
0
Keterangan : Notasi a-g pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang sangat nyata (α<0,05) pada Uji BNT
37
Notasi 5% a b c d e f g
8.2. Perhitungan ANOVA Kadar Lemak Perlakuan A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3 Jumlah
1 4,17 3,66 3,89 3,83 4,06 4,5 3,77 27,88
Ulangan 2 4,13 3,65 3,88 3,81 4,07 4,52 3,75 27,81
Jumlah 3 4,15 3,67 3,87 3,82 4,05 4,54 3,73 27,83
12,45 10,98 11,64 11,46 12,18 13,56 11,25 83,52
FK = 83,522 21 JK = (4,172+4,132+4,152+3,662+..........+3,732) - FK JKP = (12,452+10,982+.......+11,25 2) - FK 3 JKG = JK – JKP
bio.unsoed.ac.id
38
Analisis Ragam Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat Bebas
Jumlah Kuadrat
Kuadrat Tengah
F hitung
6 14 20
1,553 0,003 1,556
0,2589 0,0002
1132,562**
F tabel 5% 2,85
Keterangan : ** : perlakuan pemberian inokulum yang berbeda berpengaruh sangat nyata terhadap kadar lemak dage
Uji Lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT) LSD=t(0,05;14) √2KTG/r 0,0114 0,024453 Kode Isolat
rata-rata 3,66
A2 C3 B1 A3 C1 A1 C2
3,66 3,75 3,82 3,88 4,06 4,15 4,52
3,75
Kode Isolat 3,88
3,82
4,06
4,15
4,52
0 0,09 0,16 0,22 0,4 0,49 0,86
0 0,07 0,13 0,31 0,4 0,77
0
0 bio.unsoed.ac.id
0,06 0,24 0,33 0,7
0,18 0,27 0,64
0 0,09 0,46
0 0,37
Keterangan : Notasi a-g pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang sangat nyata (α<0,05) pada Uji BNT
39
0
Notasi 5% a b c d e f g
8.3. Perhitungan ANOVA Kadar Protein Perlakuan A1 A2 A3 B1 C1 C2 C3 Jumlah
1 4,87 5,66 6,7 6,8 7,44 4,28 4,64 40,39
Ulangan 2 4,85 5,64 6,72 6,83 7,4 4,29 4,6 40,33
Jumlah 3 4,86 5,68 6,74 6,86 7,48 4,3 4,62 40,54
14,58 16,98 20,16 20,49 22,32 12,87 13,86 121,26
FK = 13,862 21 JK = (4,872+4,852+4,862+5,662+..........+4,622) - FK JKP = (14,582+16,982+.......+13,86 2) - FK 3 JKG = JK – JKP
bio.unsoed.ac.id
40
Analisis Ragam Sumber Keragaman Perlakuan Galat Total
Derajat Bebas 6 14 20
Jumlah Kuadrat 27,504 0,008 27,512
Kuadrat Tengah 4,5840 0,0006
F hitung 8227,667**
F table 5% 2,85
Keterangan : ** : perlakuan pemberian inokulum yang berbeda berpengaruh sangat nyata terhadap kadar protein dage
Uji Lanjut Beda Nyata Terkecil (BNT) LSD=t(0,05);14√2KTG/r 0,019272482 0,041339474 Kode Isolat
rata-rata
C2 C3 A1 A2 A3 B1 C1
4,29 4,62 4,86 5,66 6,72 6,83 7,44
4,29 0 0,33 0,57 1,37 2,43 2,54 3,15
4,62
4,86
0 0,24 1,04 2,1 2,21 2,82
Kode Isolat 5,66
0 0,8 1,86 1,97 2,58
Notasi 5% 6,72
6,83
7,44
0
bio.unsoed.ac.id 1,06 1,17 1,78
0 0,11 0,72
Keterangan : Notasi a-g pada kolom yang sama menunjukkan perbedaan yang sangat nyata (α<0,05) pada Uji BNT
41
0 0,61
0
a b c d e f g
Lampiran 9. Komposisi Medium 9.a. Medium PDA (Ekowati et al., 2014) : Kentang (tanpa kulit, dipotong-potong) .......................................................... 200 g Air suling ......................................................................................................... 1000 ml Dimasak selama setengah jam, lalu disaring untuk diambil ekstraknya, kemudian ditambah air suling hingga mencapai volume 1000 ml Agar ................................................................................................................. 15 g Dextrose .......................................................................................................... 20 g 9.b. Medium Uji Potensi Amilolitik, Proteolitik dan Lipolitik Uji amilolitik menggunakan medium Starch Agar (SA) Komposisi medium SA menurut Fardiaz (1993) : Tripton ............................................................................................................. 10 g Ekstrak khamir ................................................................................................ 10 g K2HPO4 ........................................................................................................... 5 g Pati terlarut ...................................................................................................... 3 g Agar ................................................................................................................. 15 g Air ................................................................................................................... 1000 ml Setelah koloni tumbuh ditetesi larutan iodium (lugol) yang terdiri dari iodine 1 g, kalium iodin 2 g dan air destilata 300 ml. Uji proteolitik menggunakan medium Skim Milk Agar (SMA) Komposisi medium SMA menurut Fardiaz (1993) : Tripton ............................................................................................................. 5 g Ekstrak khamir ................................................................................................ 1,5 g Dekstrosa ......................................................................................................... 1 g
bio.unsoed.ac.id
Agar ................................................................................................................. 15 g Air destilata ..................................................................................................... 1000 ml pH ..................................................................................................................... 7 Susu skim bubuk ............................................................................................. 20 %
42
Uji lipolitik menggunakan medium Rhodamine Agar (RA) Komposisi medium RA menurut Hou & Johnston (1992) modifikasi : Umbi kentang .................................................................................................. 88 g Dekstrose ......................................................................................................... 8,8 g Agar ................................................................................................................. 6,6 g Akuades ........................................................................................................... 500 ml Gum arab ......................................................................................................... 4,5 g Rhodamin B .................................................................................................... 0,05 g Olive oil ........................................................................................................... 5 ml
bio.unsoed.ac.id
43
BIODATA PENULIS Penulis lahir pada tanggal 3 Maret 1992 di Kota Purworejodan diberi nama Tri Nir Malayanti. Penulis dilahirkan sebagai anak ketigadari BapakMarsono dan Ibu Samikem dengan tiga bersaudara. Pernah bersekolah di Sekolah Dasar Negeri Ketiwijayan 1998-2004, Sekolah Menengah Pertama di SMPN 7 Purworejo 2004-2007 dan Sekolah Menengah Atas di SMAN 2 Purworejo2007 – 2010. Lulus dari SMA, penulis melanjutkan pendidikan di Universitas Jenderal Soedirman dengan progam studi Biologi tahun angkatan 2010 sampai akhir tahun 2014.Pengalaman organisasi antara lain pernah tergabung dalam UPI (Unit Penelitian Ilmiah) dan Biology English Society (BESt).
bio.unsoed.ac.id
44
bio.unsoed.ac.id
45
bio.unsoed.ac.id
46