Thymi herba
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.4 - 1
04/2009:0865
THYMI HERBA Kerti és spanyol kakukkfű levél és virág
DEFINÍCIÓ A drog a Thymus vulgaris L., a Thymus zygis L., vagy e két faj keverékének előzetesen megszárított hajtásáról leválasztott levele és virága. Tartalom: −
illóolaj: legalább 12 ml/kg (szárított drogra vonatkoztatva),
−
timol- és karvakroltartalom összesen (mindkettő C10H14O; Mr 150,2): az illóolaj legalább 40%-a.
SAJÁTSÁGOK Erősen aromás, timolra emlékeztető illatú.
AZONOSÍTÁS A Thymus vulgaris levele általában 4–12 mm hosszú és legfeljebb 3 mm széles, ülő vagy nagyon rövid levélnyéllel rendelkezik. A levéllemez merev, ép szélű, lándzsás-tojásdad és mindkét oldalán szürkén vagy zöldesszürkén szőrös; a levélszél a fonáki oldal irányában jól láthatóan begöngyölt. A főér a színi oldalon besüllyedt, a fonáki felszínen erőteljesen kidomborodó. A csésze zöld, csöves, gyakran lila foltok láthatók rajta; a cimpák 2 ajakra különülnek, melyek közül a felső visszahajlik és a végén 3 lebenyt visel, az alsó hosszabb és 2 szőrös foggal rendelkezik. Elvirágzás után a csészetorok hosszú, merev szőrökből kialakuló koszorúval záródik le. A csészénél körülbelül kétszer hosszabb párta száraz állapotban általában barnás színű és kissé kétajkú. A Thymus zygis levele általában 1,7-6,5 mm hosszú és 0,4–1,2 mm széles; alakja tűszerűtől szálas-lándzsásig terjed, a levélszélek jól láthatóan begöngyöltek a fonáki oldal irányában. A levéllemez mindkét felszíne zöld vagy zöldesszürke, a főér néha lila. A levélszéleken, főleg az alsó harmadában hosszú, fehér szőrök vannak. A szárított virágok nagyon hasonlítanak a Thymus vulgaris virágához.
Thymi herba
A. A párta külső epidermiszén felülnézetben látható fedőszőr, melynek egy sejtje kollabált (Aa), valamint egysejtű fejjel rendelkező nyeles mirigyszőr (Ab) B.
Virágporszem 6 csírakapuval (melyekből csak 3 látszik a képen)
C.
A párta alsó részének epidermisze, mirigyszőrrel (Ca)
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.4 - 2
E.
A párta felső részének külső epidermisze felülnézetben, diacitikus sztómaapparátussal (Ea) és mirigyszőrrel (Eb)
F.
A csésze epidermisze felülnézetben, fedőszőrrel
A. – F. A fedőszőrök apró, kalcium-oxalát összetételű tűkristályokat tartalmaznak.
D. Mirigypikkely felülnézetben 0865.-1. ábra. –Thymi herba drogporának virágrészekre vonatkozó szövettani jellemzői vonalas rajzokon (lásd Azonosítás B. pontja)
Thymi herba
A. A szini epidermisz felülnézetben, gyöngyfüzér-szerűen (gödörkésen) vastagodott falú sejtekkel (Aa), diacitikus sztómaapparátussal (Ab) és bibircses fedőszőrökkel (Ac), valamint az alatta előtűnő paliszád-parenchímával (Ad) B. és E. Az epidermisz keresztmetszete egysejtű, fogszerű fedőszőrökkel (Ba, Ea) és kétsejtű, könyökszerűen görbült fedőszőrrel (Bb) C. Kétsejtű, ízelt fedőszőr
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.4 - 3
vastagodott falú sejtekkel (Da), mirigypikkellyel (Db), illetve egysejtű fejjel rendelkező mirigyszőrrel (Dc), valamint az alatta előtűnő paliszádparenchímával (Dd) F. Többsejtű fedőszőr a levéllemez alapjáról (T. zygis) G. Epidermisz keresztmetszete két- (Ga) és háromsejtű (Gb) fedőszőrökkel (T. zygis) A. - G. A fedőszőrök apró, kalcium-oxalát összetételű tűkristályokat tartalmaznak.
D. A szini epidermisz felülnézetben, gyöngyfüzér-szerűen (gödörkésen) 0865.-2. ábra. – Thymi herba drogporának lomblevél részeire vonatkozó szövettani jellemzők, vonalas rajzokon (lásd Azonosítás B. pontja) B. A drogot elporítjuk (355). Mindkét faj drogpora szürkészöld vagy zöldesbarna színű. A drogport mikroszkóp alatt, R klorál-hidrát-oldatban vizsgáljuk. A levelek epidermiszét
Thymi herba
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.4 - 4
gyöngysorszerűen (gödörkésen) vastagodott, hullámos falú sejtek és diacitikus sztómaapparátusok (2.8.3) alkotják. Számos mirigypikkely látható, melyek mindegyike 12 (8+4) kiválasztó sugársejtből épül fel, s kutikulájuk a szekréció miatt általában hólyagszerűen felemelkedő, gömb alakú vagy ovális borítást képez. A mirigyszőrök egysejtű nyéllel és gömbös vagy ovális feji résszel rendelkeznek. A levelek színi oldalán mindkét fajnál általánosan előfordulnak fedőszőrök; ezek sejtfala bibircses, alakjuk hegyes foghoz hasonló. A fonáki felszínen látható szemölcsös fedőszőrök több típusba sorolhatók: egysejtű, egyenes illetve két- vagy háromsejtes és enyhén, gyakran könyökszerűen görbült (Thymus vulgaris), továbbá két- vagy háromsejtes, többé-kevésbé egyenes (Thymus zygis) fedőszőrök fordulnak elő. A csésze töredékei számos egysoros fedőszőrrel borítottak, melyek 5 vagy 6 sejtből állnak és kutikulájuk kissé ráncos. A párta darabjai számos, gyakran kollabált sejtű, egysoros fedőszőrt és általában 12-sejtű mirigypikkelyt hordoznak. Virágporszemek igen ritkán figyelhetők meg, gömb alakúak és simák, 6 rés alakú csírakapuval rendelkeznek, átmérőjük mintegy 35 μm. Thymus zygis drogpora számos vastag rostköteget is tartalmaz, melyek a nagyobb erekből és a szár törmelékeiből származnak. C.
Vékonyréteg-kromatográfia (2.2.27). Vizsgálati oldat. 1,0 g porított drogot (355) 5 ml R diklórmetánnal 3 percig rázogatunk. A kivonatot kb. 2 g R vízmentes nátrium-szulfáton keresztül megszűrjük. Összehasonlító oldat. 5 mg R timolt és 10 μl R karvakrolt 10 ml R diklórmetánban oldunk. Lemez: R VRK szilikagél F254 lemez. Kifejlesztőszer: R diklórmetán. Felvitel: 20 μl, sávok formájában. Kifejlesztés: 15 cm fronttávolságig. Szárítás: levegőn. „A” előhívás: 254 nm-es ultraibolya fényben. „A” értékelés: az összehasonlító oldat és a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő zónák sorrendje alább látható. A lemez teteje ___________
___________ Erőteljes kioltási zóna
Timol: kioltási zóna
Kioltási zóna (timol)
___________
___________
Kioltási zónák Összehasonlító oldat
Összehasonlító oldat
„B” előhívás: A lemezt − 200 mm2-ére 10 ml oldatot számolva − R ánizsaldehid−oldattal bepermetezzük, és 100−105 °C-on 10 percig melegítjük. „B” értékelés: az összehasonlító oldat és a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő zónák sorrendje alább látható. A vizsgálati oldat kromatogramjának alsó harmadában
Thymi herba
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.4 - 5
további zónák is jelentkezhetnek. A timol és a karvakrol zónáinak intenzitása a vizsgált speciestől függ.
A lemez teteje ___________
___________
Timol: barnásrózsaszínű zóna
Barnásrózsaszínű zóna (timol)
Karvakrol: halvány ibolyaszínű zóna
Halvány ibolyaszínű zóna (karvakrol)
___________
___________
________ Szürkésrózsaszínű zóna Ibolyaszínű zóna (cineol és linalol) Szürkésbarna zóna (borneol) Ibolyáskék zóna Intenzív ibolyaszínű zóna Összehasonlító oldat
Összehasonlító oldat
D. A „Timol és karvakrol” vizsgálat során nyert kromatogramot értékeljük. Értékelés: a vizsgálati oldat kromatogramján megjelenő jellemző csúcsok, retenciós idejüket tekintve, egyezzenek meg az összehasonlító oldat kromatogramján látható csúcsokkal. VIZSGÁLATOK Idegen anyagok (2.8.2). Szár: legfeljebb 10%; egyéb idegen anyag: legfeljebb 2%. A szár átmérője legfeljebb 1 mm, hossza legfeljebb 15 mm lehet. Nem tartalmazhat a levélalapnál hosszú szőrőkkel rendelkező, illetve egyéb részein enyhén molyhos leveleket (Thymus serpyllum L.). Víztartalom (2.2.13): legfeljebb 100 ml/kg. 20,0 g porított drogot (355) vizsgálunk. Összes hamu (2.4.16): legfeljebb 15,0%. Sósavban nem oldódó hamu (2.8.1): legfeljebb 3,0%. TARTALMI MEGHATÁROZÁS Illóolaj (2.8.12). 30,0 g drogot mérünk be, 1000 ml-es gömblombikot használunk; a desztilláló folyadék 400 ml R víz. 2−3 ml/perc-es sebességgel, 2 órán át desztillálunk; a mérőcsőbe nem töltünk R xilolt. Timol és karvakrol. Gázkromatográfiás vizsgálat (2.2.28): normalizációs módszert alkalmazunk.
Thymi herba
Ph.Hg.VIII. – Ph.Eur.6.4 - 6
Vizsgálati oldat. Az „Illóolaj” vizsgálat során nyert illóolajat egy kevés R vízmentes nátriumszulfáton keresztül megszűrjük, majd − a desztilláló készüléket és a vízmentes nátrium-szulfátot átöblítve − R hexánnal 5,0 ml-re hígítjuk. Összehasonlító oldat. 0,20 g R timolt és 50 mg R karvakrolt R hexánnal 5,0 ml-re oldunk. Oszlop: −
anyaga: kvarcüveg,
−
méretei: l = 30−60 m, Ø = 0,25 mm,
−
állófázis: R makrogol 20000 (filmvastagság 0,25 μm).
Vivőgáz: R kromatográfiás célra szánt nitrogén, vagy R kromatográfiás célra szánt hélium. Áramlási sebesség: 1 − 2 ml/perc. Mintaáram-eloszlási arány: 1:100. Hőmérséklet:
Oszlop
Idő (perc)
Hőmérséklet (°C)
0 − 45
40 → 220
Injektor
190
Detektor
210
Detektálás: lángionizációs detektorral. Injektálás: 0,2 μl. Elúciós sorrend: az összehasonlító oldat készítésénél megadott sorrend. Regisztráljuk az anyagok retenciós idejét. Rendszeralkalmasság: összehasonlító oldat: −
csúcsfelbontás: legalább 1,5, a timol és a karvakrol között.
Az összehasonlító oldat kromatogramjából megállapított retenciós idők alapján azonosítjuk a vizsgálati oldat kromatogramján az összehasonlító oldat összetevőit. Meghatározzuk a timol és a karvakrol százalékos mennyiségét. A hexán csúcsát nem vesszük figyelembe.
