ThinPrep Pap test a Imaging system Iva Kinkorová Luňáčková
XXII. Cytologický den Brno 2014
Boj proti Ca děložního hrdla 1. celoplošná vakcinace mladých děvčat
2. organizovaný skríning (adresné výzvy)
Kvalita diagnostických postupů !
Pap test - skríning karcinomu děložního hrdla
George Papanicolaou 1883-1962
1943 - „ Diagnosis of uterine cancer by the vaginal smear “ 1954 - „ Atlas of Exfoliative Cytology “
Konvenční Pap stěr
odběr - fixace - barvení - odečet pod mikroskopem
LIQUID BASED CYTOLOGY Odběr cytologie do tekutého média Cytologie v tenké vrstvě
LBC - odběr do tekutého média •
ThinPrep
Imaging system
•
SurePath
FocalPoint procesor
•
CellPrep Plus
•
NovaPrep
•
Turbitec
1996 - ThinPrep Pap Test
2003 - ThinPrep Imaging systém
FDA certifikace (>170 studií)
bezpečný test
unikátní mezi ostatními LBC
signifikantně více efektivní
jediný test s prokázanou ↑detekcí žlazových lézí
Imager 2003 ↑ ASC-US+ sensitivity ↑ HSIL specifity
Nový způsob získání materiálu
broom, brush, plastová spatule
přenos do tekutého média
NE ! dřevěná spatula
Fixační roztok - PreservCyt
okamžitá a dokonalá fixace bb. odstraní hlen a krev lépe viditelné kontury jaderné membrány přehledná struktura chromatinu
Zlepšení kvality preparátů
dokonalá fixace buněk rovnoměrná distribuce bb. bb. v tenké vrstvě , bez překrývání méně artefaktů
Redukce obtížně hodnotitelných stěrů Konvenční stěr
ThinPrep Pap test
Redukce prokrvácených stěrů
Buněčnost na skle - C až 250 000 bb. LBC 60 - 75 000 bb.
Zbytkový buněčný materiál
Nové možnosti 1 odběr = více vyšetření 6 týdnů
HPV test ( ASCUS 30 let, LSIL postmenopauzálně, kontrola po LEEP, vyřazení z dispenzarizace )
( DNA Hybrid capture II , mRNA Aptima HPV Assay )
Imunohistochemie - p16/ki67
metylace TSG - PreCursor M kit, (triage HR HPV+)
Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorhoe - PCR
Cytoimunohistochemie p16/ki 67 - duální barvení Kombinace průkazu HR HPV inf. + proliferační marker Pozitivní nález - vyšší riziko léze CIN2+ Triage pro ASCUS/LSIL
Výhody LBC
vyšší záchytnost suspektních bb.
snížení počtu neuspokojivých stěrů
doplňková vyšetření
větší množství bb. do laboratoře
bb. v tenké vrstvě bez překrývání
čisté pozadí, přehlednost
Imager - počítačová analýza obrazu (automatický skríning)
abnormální bb. - větší jádra, extra kopie DNA - vyhledá „největší a nejtmavší“ objekty
analyzuje objekty digitální optickou denzitometrií
nevyhodnocuje „lidským“ přístupem ( barva, tvar, N/C poměr )
NEUMÍ INTERPRETOVAT !
Imager s vloženými skly v kazetách k označení suspektních míst
Automatický mikroskop s rychlou navigací pomocí elektronických souřadnic
sklo LBC
Čárový kód
Značky pro automatický mikroskop
Buněčný terčík 120 ZP
ThinPrep Imaging System
22
označí
zorných polí pro cytotechnology
automatický mikroskop
Dvojitý skríning
Vybraná zorná pole
suspektní bb.
uspokojivý
endocervikální komponenta
mikroorganismy
infekční agens
x
neuspokojivý odběr
Automatický mikroskop
standardní optika
program uživatelských preferencí - směr skríningu - rychlost - Autoscan mode - rychlá navigace
elektronické značky
Překryv zorných polí - Autoscan
Řízený pohyb mikroskopu zaručuje shlédnutí 100 % buněk Překryv - min 30 %,
med 40% , max 50 %
Fyzické odlišnosti Manuální
skríning - pohyb skla s
minimálním pohybem očí
FOV
skríning - vyžaduje pohyb očí v
celém rozsahu pole
Pracovní schéma dvojitý skríning Imager všechny preparáty identifikace 22 ZP Cytotechnolog Automatický mikroskop 22 zorných polí
Normální nález
Archiv
Suspektní nebo abnormální skla
Cytotechnolog AutoScan
Patolog Definitivní klasifikace
Výhody ThinPrep Imaging systému
označení suspektních míst
další ↑ detekce susp. bb. ( x manuální skríning)
vyšší senzitivita a specifita
22 zorných polí ( udržení pozornosti, ↑ přesnosti, ↑ produktivita )
Miller et al.2007: Improved LSIL and HSIL detection with the ThinPrep Imaging system
82,063 manuálně vs. 84,473
Imager
stabilní populace beze změn v průběhu studie
statisticky signifikantní ↑ detekce s Imagerem
HSIL o 42 % , LSIL o 37,6 %
bioptické verifikace - nárůst není důsledkem falešně pozitivních dg.
50 % redukce falešně negativní frakce ( LSIL + )
Imager - označí suspektní místa
HSIL
Limitace konvenčního stěru = falešně negativní výsledky
možné chyby
odběr/zpracování vzorku
vlastní skríning
Příčiny falešně negativních výsledků ( FNV ) • Chyby při odběru / zpracování - 2/3 FNV
bb. nejsou sebrány na odběrový nástroj
bb. nejsou přeneseny na sklíčko
bb. nejsou dostatečně uchovány
ThinPrep Pap test
Příčiny falešně negativních výsledků ( FNV ) •
Chyby při skríningu - 1/3 FNV vyhledávání - atypické bb. přítomny, ale nenalezeny
interpretace - bb. nejsou správně zhodnoceny
ThinPrep Imaging systém
ThinPrep Pap test s Imaging systémem Akreditovaná metoda ČIA dle ČSN EN ISO 15 189
1.9. 2011 - 26.10. 2014 →
90 589 vyš.
HR HPV test z LBC
(1.1.2013 - 31.12.2013)
2913 x
•
celkem
•
1113 x pozitivní ( 38,21% )
•
současně
x
dodatečně
Bez endocervikálních bb. •
CL -
5,3
%
•C
- 6,1 %
Srovnání závěrů u vyšetření typu CL a C 2013 100,00%
95,01%
90,00% 83,70% 80,00%
70,00%
60,00%
50,00%
C CL
40,00%
30,00%
20,00%
7,53%
10,00% 1,54%
0,22%
1,68%
0,00% Bez neopl. intraepit. změn a malignit
LSIL (včetně HPV)
H SIL
Srovnání závěrů u vyšetření typu CL a C 2013 6,00%
4,90%
5,00%
4,00%
3,00%
C 2,51%
CL
2,00%
1,72%
1,00% 0,39% 0,17%
0,21%
0,00% ASC-US
ASC-H (nelze vyloučit HSIL)
Atypie žláz. buněk (nespecifikovány)
Popis zadání porovnání cytologických závěrů konvenční cytologie (C) a ThinPrep Pap
testu s Imaging systémem (LBC) stanovených před histologickou diagnózou CIN III / HSILv konizátu děložního hrdla sledované období 1.9.2011 - 1.9.2013 (2 roky) počet CIN III v konizátu v databázi Bioptické laboratoře s předchozí
cytologií na stejném pracovišti - LBC celkem 404 x a C celkem 1022 x závěry cytologických vyšetření dle kategorií Bethesda systému 2001
seřazeny do 2 tabulek samostatně pro LBC a konvenční C s udáním celkového počtu a percentuálního vyjádření zastoupení jednotlivých cytologických závěrů
Srovnání cytologických závěrů LBC a C před histologicky verifikovanou CIN III / HSIL v konizátu děložního hrdla
Závěr LBC
Počet
%
Závěr C
Počet
%
NILM
3
0,74%
NILM
60
5,87%
ASCUS
6
1,49%
ASCUS
115
11,25%
ASC - H
57
14,11%
ASC - H
256
25,05%
LSIL
82
20,30%
LSIL
187
18,30%
233 57,67%
HSIL
HSIL
362 35,42%
HSIL invaze?
5
1,24%
HSIL invaze?
8
0,78%
karcinom
0
0,00%
karcinom
1
0,10%
AGUS - NOS
8
1,98%
AGUS - NOS
28
2,74%
AGUS - NEO
6
1,49%
AGUS - NEO
4
0,39%
Jiné
3
0,74%
Jiné
1
0,10%
404
100,00%
1022
100,00%
Počet CIN III
Počet CIN III
Výsledky závěr cytologie HSIL před dg. CIN III v konizátech byl stanoven
u LBC v 57,67% oproti konvenční C v 35,42% případů jedná se o statisticky významný rozdíl s p-hodnotou <0,0001 dle
Chí-kvadrát testu závěr cytologie s doporučením histologického ověření byl u LBC v 60,4%
oproti konvenční C v 36,69% případů klinicky nevýznamné závěry typu NILM a ASCUS u LBC tvořily <
3%,
u konvenční C tvořily 17% prokázali jsme vyšší senzitivitu i specifitu LBC Thinprep Pap test s počítačovou
analýzou Imaging system pro detekci HG léze děložního hrdla typu CIN III oproti konvenční cytologii C
www.biopticka.cz
www.gynekolog.cz
Statistika shody současně odebrané konvenční C a LBC, kde LBC závěr HSIL s následně ověřenou diagnózou D06.9
Závěr cytologie
Počet
%
NILM
1
2,86%
ASCUS
3
8,57%
ASC - H
7
20,00%
LSIL
3
8,57%
HSIL
20
57,14%
AGUS - NOS
1
2,86%
Celkový počet
35
100,00%
Konvenční stěr
x
ThinPrep Pap test
Zlepšení sensitivity vyšetření
konvenční cytologie
60 - 70 %
ThinPrep Pap test
až
90 %
www.gynekolog.cz
Stanovisko Společnosti českých patologů ČLS JEP k otázce cervikální cytologie z tekutého média (Liquid Based Cytology – LBC) ve vztahu k Národnímu programu screeningu cervikálního karcinomu Cytologie z tekutého média (LBC) představuje alternativu ke klasickému vyšetření nátěru z cervikálních buněk označovanému v mezinárodním písemnictví včetně normativního CP (conventional preparation).
Česká společnost patologů se domnívá, že:
vyšetření LBC představuje v individuálním případě rovnocennou alternativu k CP pro zjištění přednádorového stavu na děložním hrdle nabízí navíc v indikovaných případech možnost dalších vyšetření, zejména testu na přítomnost vysoce rizikových virů bez nutnosti další návštěvy gynekologa s ohledem na probíhající Národní program screeningu cervikálního karcinomu, jehož finanční krytí je zajištěno v úrovni CP, považuje SČP ČLS JEP za zásadní, aby pacientkám byla vždy nabídnuta v rámci programu bezplatně možnost vyšetření metodou CP, LBC jako alternativa v kategorii nadstandardu s úhradou. V zájmu Národního screeningového programu musí laboratoře vyšetřující metodou LBC zajistit ve spolupráci s centrem sběru a analýzy dat, aby byla tato vyšetření adekvátně do programu hlášena.
Dotazy ?
