TEKNIK IDENTIFIKASI PEYAKIT CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA SECARA VISUAL,CEPAT DAN SEDERHANA MUTIA E. DWIASTUTI Aneka Kursus Gratis dalam rangka BITE, 4-6 Agustus 2016
www.litbang.pertanian.go.id
PROGRAM KURSUS CVPD NO
TAHAPAN
METODE PELATIHAN
waktu
1.
Penyampaian materi
Metode ajar/ penyuluhan dan diskusi
45 menit
2.
Identifikasi gejala Demonstrasi peserta mengidentifikasi CVPD dan difisiensi gejala terhadap bahan tanaman jeruk unsur hara yang sudah disediakan panitia
25 menit
3.
Identifikasi yodium
4.
5.
pati Peserta mempraktekkan uji pada reagen 30 menit dan bahan tanaman jeruk yang sudah disediakan panitia serta mendiskusikan hasil ujinya. Identifikasi molekuler Peserta membandingkan dengan uji 15 menit dengan PCR sederhana pati yodium uji
Penyediaan kit uji pati Bagi peserta yang yodium mendapatkannya
tertarik
bisa 5 menit
www.litbang.pertanian.go.id
PENDAHULUAN
Liberibacter asiaticum
CVPD , silent killer disease
Endemik 10 m -1000 m dpl 1990 jeruk Batu dan Bali punah : kerugian 23 M/th 1997 : 100% keprok tejakula terinfeksi, lagi. 1997 Kalbar (bebas > 31% infected) 65.000 org petani jeruk terancam perekonomian nya
www.litbang.pertanian.go.id
PENDAHULUAN
Transmisi CVPD: 1) Benih dan mata tempel sakit
www.litbang.pertanian.go.id
PENDAHULUAN
Transmisi CVPD 2). hama vektor
Diaphorina citri Kuw.
www.litbang.pertanian.go.id
TAXONOMI Kingdom
:
Bacteria
Phylum
:
Proteobacteria
Class
:
Alphaproteobacteria
Order
:
Rhizobiales
Family
:
Rhizobiaceae
Genus
:
Species
:
Liberibacter - Candidatus Liberibacter africanus ( Jagoueix et al.1994) syn Liberibacter africanus / africanum - Candidatus Liberibacter asiaticus ( Jagoueix et al.1994) syn Liberibacter asiaticus / asiaticum - Candidatus Liberibacter americanus ( Teixeira et al.1994) syn Liberibacter americanus /
americanum
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD A. Teknik Identifikasi berdasarkan Gejala Serangan CVPD Lapang 1. Kelainan gejala harus diamati pada keseluruhan tanaman dalam kebun, amati pada tanaman degenerasi tapi tanpa luka pada batang atau akar
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD A. Teknik Identifikasi berdasarkan Gejala Serangan CVPD Lapang 2. Temukan Gejala khas CVPD pada daun
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD 1. Infeksi pada tanaman muda : Temukan gejala kuncup berkembang lambat, pertumbuhannya daun kecil.
mencuat ke atas,
www.litbang.pertanian.go.id
PENDAHULUAN Pada tanaman dewasa temukan gejala pada daun, periode pertunasan, buah
CVPD (Citrus Vein Phloem Degeneration)/ HLB (Huanglungbin)
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD Pada gejala berat, : daun menguning sebagian atau seluruhnya, terjadi pengerasan tulang daun primer dan sekunder, daun menjadi lebih kaku dan menebal (vein crocking)
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD Pada tanaman dewasa, kadang ditemukan gejala greening sektoral : blotching cabang tertentu , tunas air lebih banyak dari tanaman normal di luar musim pertunasan, daun pada menjorok ke atas, cabangcabang meranggas
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI PENYAKIT CVPD buah lebih kecil, tidak simetris, buah red nose (warna orange pada pangkal buah ) terutama di tempat yang terlindung dari sinar. Buah terserang bijinya abortus dan rasanya asam .
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD : KEBERADAAN SERANGGA VEKTOR
www.litbang.pertanian.go.id
AGENS HAYATI D. CITRI
Agens hayati : entomopatogen
Hirsutella citriformis, B. bassiana dan M.anisopliae
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD DENGAN WAWANCARA gejala khas tidak ditemukan?????
Wawancara petani, budidaya yang dilakukan Pupuk cukup? Pangkas berat sampai batas sehat Pupuk mikro dan makro seimbang sesuai kebutuhan Amati pertunasan berikutnya, ada gejala sama CVPD tidak bergejala/ sehat bukan penyakit menular (CVPD)
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI KEBERADAAN TANAMAN INANG LAIN YANG PEKA Sub famili Aurantioideae : Aurantieae
spesies Aeglopsis chevalieri Swingle
Atalantia (syn. Severinia) buxifolia (Poir.) Oliv. Balsamocitrus dawei Stapf Citrus spp. Limonia acidissima L. Murraya exotica L. Murraya paniculata. Pamburus missionis (Wight) Swingle Swinglea glutinosa (Blanco) Merr.
Triphasia trifolia (Burm. f.) P. Wilson Aurantioideae: Clauseneae
Clausena anisata (Willd.) Benth. Clausena indica Oliv. Clausena lansium (Lour.) Skeels
Rutoideae: Diosmeae
Calodendrum capense (L. f.) Thunb
Rutoideae: Toddaliinae
Vepris lanceolata (Lam.) G. Don
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD DENGAN METODE PCR [POLYMERASE CHAIN REACTION ]. Gejala pada benih jeruk yang belum ditanam biasanya agak sulit karena masa inkubasi penyakit cukup lama antara 4 – 8 bulan setelah inokulasi. Cara pengamatan secara langsung terhadap gejala, vektor, wawancara dan tanaman inang tidak jelas juga, maka perlu didampingi alat bantu identifikasi. Alat bantu tersebut berupa pemeriksaan lebih rinci dan akurat dengan 1. METODE PCR [POLYMERASE CHAIN REACTION ], penggandaan DNA patogen 2. Metode dengan tanaman indikator 3. Metode uji pati yodium 4. Elektron mikroskop Dan metode lainnya
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI CVPD DENGAN UJI PATI YODIUM Alat bantu tersebut berupa pemeriksaan penumpukan amilum dengan UJI PATI YODIUM atau dengan METODE PCR [POLYMERASE CHAIN REACTION ]. Teknik ini sangat sederhana dan murah sekali (hanya memerlukan biaya Rp 350,- saja. Sangat murah bila dibanding dengan uji PCR dengan biaya Rp 125.000 – Rp 250.000), berguna untuk membantu deteksi cepat di lapang. Teknik yang ditemukan oleh Schneider 1968, di uji lagi oleh Kawano, 2006 dan diacu secara Nasional oleh Kementerian Pertanian Australia pada tahun 2014 sampai sekarang. Akurasi, ketepatan teknik identifikasi pati yodium, kira-kira 75-80%
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI DENGAN UJI PATI YODIUM
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI DENGAN UJI PATI YODIUM No
Lokasi
Perbandingan hasil analisa CVPD
Iodine test Tongkah Tongkah Bukit Bukit Bukit Bukit Bukit Bukit Bukit Bukit Melas Melas Beganding Beganding Simpang empat Simpang empat Simpang Empat
Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative positive positive Negative Negative positive positive Positive, Negative Positive, 4 Negative
Anatomy testamylum Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative positive positive Negative Negative positive positive Positive
PCR
Positive
Positive
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17
Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa Desa
18
Desa Brastepu
5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 2 3 1
Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative Negative positive positive Negative Negative positive positive Positive
19
Desa Brastepu
1 Positive, 4 Negative
Positive
Positive
20
Desa Brastepu
1 Positive, 4 Negative
Positive
Positive
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI DENGAN UJI PATI YODIUM
Hasil uji PCR
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Pedoman Untuk mengatasi kerancuan ini gejala, antara CVPD dan defisiensi hara : Unsur-unsur hara mikro tersebut adalah Zn, Fe, Mn, Cu, B, dan Mo serta unsur hara makro N dan Mg. Gejala klorosis pada daun kekurangan unsur hara biasanya mempunyai pola teratur, terserang CVPD, pola klorosisnya tidak teratur
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK
- Zn
- Fe
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK
- Mn
- Mg
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK -B
- Mo
www.litbang.pertanian.go.id
TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK
- Cu
- Cu
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL
Semua peserta mengisi formulir yang disediakan untuk praktek identifikasi Panitia menyediakan 3 door prize buku untuk peserta terbaik dalam identifikasi visual Peserta mengisi gejala apa dari tiap slide yang ditayangkan Begitu slide berakhir, peserta dimohon dapat menggeser formulir pada peserta sebelah kirinya untuk dicocokkan
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL
1.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 2.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 3.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 4.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 5.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 6.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 7.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 8.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL
9.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 10.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 11.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 12.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 13.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 14.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 15.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 16.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 17.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 18.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 19.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 20.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL 21.
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL
SELESAI
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK TEKNIK IDENTIFIKASI GEJALA CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK SECARA VISUAL JAWABAN
1
8
2
9
3
10
4
11
5
12
6
13
7
`4
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Panitia menyiapkan 20 nomor sampel berbeda di ruang sebelah Tiap peserta diberi kesempatan untuk praktek dalam waktu tidak lebih dari 10 menit satu nomor sampel digunakan untuk 3 peserta, dengan mengambil daun yang berbeda Peserta diminta mengisi lembar jawaban, : nama, gejala .... Dan hasil reaksi uji pati yodium Peserta yang mengerjakan dengan benar tentang gejala dan hasil reaksi uji pati akan mendapat souvenir/ door prize
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Kumpulkan sampel daun dari berbagai gejala CVPD, Difisiensi dan gejala penyakit lain
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Gores tulang daun dengan terpilih dengan kertas abrasif (120 mesh) yang sudah dipotong sebanyak 20 kali gores dengan tekanan yang sama
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Masukkan tiap sampel daun yang telah digores dalam plastik dan tambahkan dengan H2O 100 ml kemudian ratakan pada bagian daun. Satu sampel satu plastik. Tambahkan 30-50 ul Iodine dalam plastik
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Amati segera cairan dalam plastik masing-masing. Cairan dalam sampel daun yang terinfeksi CVPD akan biru kehitaman. Merupakan reaksi adanya pati amilase yang berwarna biru dengan pengecatan iodne dan pengecatan amylopektin berwarna ungu dengan iodine. Cairan dalam sampel sehat atau bergejala difisiensi hara tidak akan berubah warna, (tetap jernih/putih).
www.litbang.pertanian.go.id
PRAKTEK UJI PATI YODIUM UNTUK IDENTIFIKASI CVPD DAN DEFISIENSI UNSUR HARA PADA TANAMAN JERUK Iodine kit Kit siap pakai untuk identifikasi CVPD Bisa digunakan untuk 100 sampel Akurasi 75-80% Waktu pengujian sangat singkat (10 menit) Langsung digunakan di lapang Biaya sangat murah (Rp 350,/ sampel uji PCR dengan biaya Rp 125.000 – Rp 250.000/ sampel),
www.litbang.pertanian.go.id