SKRIPSI
XEMPELAJARI PROSES PEkBUATAN CINCAU HITAM (1LiesonapalzrsfrisBL) INSTAN DAN PENGARUHNYA TERHADAP
PRODUKSI RADIKAL BEBAS MAKROFAG MENCIT SEBAGAI INDIKATOR IMUNOSTIMULAN SECARA in vitro
01eh FAHRIAL F02495061
1999
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAK GIZI FAKULTAS TEKIIOLOGI PERTAN1.W INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR
Fahrial. F02495061. Mempelajari Proses Pembuatan Cincau Hitam (!tlesonu palustris BL) Instan dan Pengaruhnya Terhadap Daya Cerna Sel hlakrofag Mencit Sebagai Indikator Immunostimulan Secara irz vitro. Di bawah bimbingan Dr. Ir. Fransiska Zakaria, MSc dan Ir. Endang Prangdimurti, MSi.
Tanaman cincau hitam merupakan tanaman yang banyak terdapat di Indonesia. Tanaman ini digunakan untuk membentuk gel cincau hitam dengan pengolahan bersama sejumlah pati dan abu qi. Gel cincau hitam disukai karena tekstur dan cita rasanya yang khas dan biasanya disajikan dengan cara memotong gel tersebut menjadi berbentuk kubus dan dihidangkan dengan larutan sirup encer dengan atau tanpa penambahan buah-buahan. Seperti produk gel pada umumnya gel cincau hitam mudah mengalami sineresis sehingga waktu simpannya cukup rendah karena itu perlu dibuat secara instan agar dapat dikonsumsi kapanpun dan dimanapun. Teknologi yang dapat dikembangkan adalah dengan cara mengerinskan ekstrak tanaman cincau hitam dengan menggunakan pengering drum. Secara tradisional cincau hitam memiliki khasiat biologis yaitu dapat digunakan sebagai obat batuk dan obat diare, khasiat ini perlu dikaji secara ilmiah. Pada penelitian ini ingin dikaji aspek khasiat biologis dari cincau hitam terhadap produksi radikal bebas makrofag Jika suatu ekstrak tanaman dapat memacu peningkatan radikal bebas makrofag maka tanaman tersebut memiliki sifat imunostimulan. Dalam penelitian ini dibagi menjadi dua tahap, tahap yang pertama bertujuan untuk memproduksi bubuk cincau hitam instan. Sedangkan tahap yang kedua bertujuan untuk melihat pengaruh ekstrak tanaman cincau hitam terhadap produksi radikal bebas sel makrofag peritoneal mencit sebagai indkator sifat imunostimulan. Metode yang digunakan dalam pembuatan cincau hitarn instan adalah dengan cara mengekstrak tanaman cincau hitam dengan air dan soda abu. Filtrat dari hasil ekstraksi tersebut dikeringkan dengan pengering drum sehingga dihasilkan bubuk cincau hitam. Bubuk yang dihasilkan ini dengan sejumlah pati dapat membentuk gel cincau hitam. Metode yang digunakan dalam pengujian ekstrak tanaman cincau hitam terhadap produksi radikal bebas merupakan modifikasi dari metode Terawaki et. a1 (1997). Ekstrak yang digunakan ada dua macam yaitu ekstrak yang dibuat dari tanaman kering cincau hitam dan yang kedua adalah ekstrak yang dibuat dari bubuk cincau hitam hasil penelitian tahap pertama. Metode penelitian ini secara ringkas dapat digambarkan sebagai berikut. Sel makrofag diambil dari peritoneal mencit setelah distimulir oleh thioglycollate. Kultur makrofag (2 X lo6 sellml) diinhvbasi dengan ekstrak cincau hitam (500, 1000, 1500,2000,2500 ppm) atau lipopolisakarida 10 pg/ml sebagai kontrol positif. Setelah dimkubasi selama 20 jam pada suhu 37 OC, 5% COz, supematan dengan dan tanpa lisat sel direaksikan dengan dihidrorodhamine
1 2 3 Emisi yang dihasilkan dibaca pada panjang gelombang emisi 530 nm dan panjang gelombang eksitasi 488 nm mempergunakan spektrofluorometer. Hasil yang diperoleh dari pembuatan bubuk cincau hitam instan menunjukkan bahwa bubuk yang dihasilkan memiliki kadar air 9.41% @k) dan rendemen 12.5 % dari berat tanaman keringnya. Perbandingan bubuk cincau hitam dengan pati yang optim~undalam pembuatan gel cincau hitam adalah 1 : 2 yang memiliki kekuatan gel 461955 ~ ! c mdan ~ nilai sineresis 0.905 %. Uji pembedaan terhadap gel cincau hitam yang berasal dari bcbuk chcau hitam dengan perbandingan optimum terhadap gel cincau hitam komersil memberikan hasil bahwa hanya parameter wama yang tidak berbeda nyata sedangkan parameter yang lain seperti tekstur, aroma dan rasa berbeda nyata (p<0.05) berdasarkan uji sidik ragam. Pengujian ekstrak tanaman cincau hitam dan ekstrak bubuk cincau hitam terhadap produksi radikal bebas memberikan hasil untuk ekstrak dari bubuk cincau hitam, produksi radikal yang terbesar dihasilkan dari ekstrak dengan kosentrasi 2500 pprn yaitu (39,13 mM) dan yang terendah adalah ekstrak dengan konsentrasi 500 pprn (27.69 mM). Sedangkan untuk ekstrak cincau hitam yang langsung berasal dari tanaman keringnya jumlah radikal bebas yang tertinggi adalah ekstrak dengan konsentrasi 2500 pprn (46.00 mM) dan yang terendah adalah ekstrak dengan konsentrasi 500 pprn yaitu 37.99 mM Pengujian pengamh ekstrak cincau hitam terhadap produksi radikal bebas makrofag mencit memberikan hasil bahwa ekstrak cincau hitam yang diekstrak dari tanamannya lebih baik dari pada ekstrak cincau hitam yang berasal dari bubuknya, berdasarkan uji sidik ragam ~ 0 . 0 5dan uji lanjutnya. Uji Duncan menunjukkan bahwa perlakuan konsentrasi ekstrak tidak berpengaruh secara nyata terhadap produksi radikal bebas kecuali untuk sampel dengan konsentrasi 500 pprn dan sampel dengan konsentrasi 2500 pprn (-60.05). Produksi radikal bebas makrofag yang dikultur dengan ekstrak cincau hitam baik ekstrak yang berasal dari tanaman cincau hitam maupun ekstrak yang berasal dari bubuk cincau hitam pada umumnya lebih besar dari LPS walau tidak berbeda nyata secara statistik, sedangkan untuk kontrol negatif (blanko) ekstrak cincau dari bubuk cincau hitam tidak berbeda nyata pada konsentrasi 2500 ppm, sedan&an untuli ekstrak cincau hitam dari tanamannya semua tingkat konsentrasi berbeda nyata. Hasil yang diperoleh tersebut menunjukkan bahwa bubuk cincau hitam dapat digunakan sebagai bahan dasar pembuatan gel cincau hitam. Sedangkan pada uji biologis hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa ekstrak tanaman dan bubuk cincau hitam yang dihasilkan dapat meningkatkan produksi rakkal bebas makrofag. Hal ini membuktikan bahwa cincau hitam mempunyai aktivitas imunostimulan.
NIEMPELAJARI PENGARUH EKSTRAK CnrCAUHITANI (Mesonu palustris BL) DAN ClNCAU HITAM INSTAN TERHADAP
PRODUKSI RAbIKAL BEBAS MAKROFAG MENClT SEBAGAI INDMATOR WNOSTIiNULAN SECARA in sitro
Oleh : FAHRIAL F02495061
Sebagai salah satu syarat untuk memeueroleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANI.4N Pada Jurusan Teknoloni Pannan Dan Gizi Fakultas T e h o l o ~ Pertanian
1999 JljRUSAN TEKNOLOGI PANGAX DAN GI21 FAKULTAS TEKXOLOGI PERTANIAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR
INSTITUT PERTANIAN BOGOA FAKLnTAS TEKNOLOGI PERTANIAN MEMPELAJARI PROSES PENIBUATAN CINCAU HITAM (Mesonapalustr~sBL) INSTAN DAN PENGARUFINYA TERHADAP
PRODUKSI RADIKAL BEBAS MAKROFAG MENCIT SEBAGAI INDIKATOR IMUNOSTIMULAN SECARA in vitro
SKRIPSI Sebagai salah satu syarat untuk memeperoleh gelar SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN Pada Jurusan Teknologi Pangan clan Gizi Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor
Oleh : FAHRIAL F02495061 Dilahirkan di Karawang , 7 Juli 1976 Tanggal lulus : 3 1 Desember 1999
KATA PENGANTAR Rismillahirromanirrohiim Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah S.W.T, karena atas segala rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Shalawat dan salam, semoga tetap tercurah kepada junjungan kita Nabi Besar Muhammad SAW, keluarganya, sahabamya dan pengikutnya yang senantiasa istiqomah hingga akhir jaman. Penulisan skripsi merupakan syarat keldusan bagi mahasiswa program sarjana di Institut Pertanian Bogor.
Skripsi ini merupakan bagian akhir dari
banyaknya kenangan manis yang penulis alami selama menjalankan kuliah di Institut Pertanian Bogor. Tidak lupa penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak atas ddxngan dan bantuannya sehingga skripsi ini dapat selesai tepat pada wakcunya.
Akhir kata penulis menyadari skripsi ini jauh dari sempurna akan tetapi penulis berharap semoga skripsi ini dapat dimanfaatkan bagi pihak-pihak yang membutuhkannya.
'
AIhamdulillahirrobbiI 'alamin
Bogor, 10 Februari 2000
Penulis
I . Aba Ali dan Ummi Jakiah beserta seluruh kelugga; kakak, adik dan nenek tercinta atas segala kasih sayangnya.
2. Dr. Ir. Fransiska Zakaria, MSc., selaku dosen pembimbing I, yang telah dengan sabar membimbing dan mengkoreksi seluruh pekerjaan penulis sehingga sknpsi ini dapat disusun dengan baik. 3. Ir. Endang Prangdimurti, MSi., selaku dosen pembimbing 11, yang telah
dengan sabar membimbing dan mengkoreksi seluruh pekerjaan penulis sehingga sknpsi ini dapat disusun dengan baik.
4. Ir. Nugraha Edi Suyatma, yang berkenan menjadi dosen penguji dan berkenan mengoreksi kekurangan pada penyusunan skripsi ini. 5: Maya Safrina Suraningsih yang telah memberikan dukungan moril yang
sangat berarti bagi penulis.
6. Rekan-rekan satu kost di Bukit Asri Ciomas Indah; Asep, M a , Nana, Thamrin, Yayan, dan Yudi, terima kasih atas segala bantuannya. 7. Lisia, Melly, Niang, Yuni terima kasih atas persaudaraannya.
8. Indah, Umi, Naning, Reni, Susan, Tasya terima kasih atas persahabatan dan skripsinya.
9. Rekan-rekan satu angkatan TPG 32; Taufik, Ikhlas, Tanti, Fifi, Gindo, Dewi, Sista, Anto, Suratman, Wiga, Ai, Suharno, Basuki, Boim serta seluruh rekan TPG yang tidak mungkin disebutkan satu per satu, terima kasih atas persahabatannya yang tulus.
10. Rekan satu pejuangan dan satu penelitian; Sugiman, B. Widiastuti dan Muhammad Salam, terima kasih atas segalanya.
11. Semua pihak yang telah membantu selama penelitian sampai penyusunan skripsi ini.
Bogor, Februari 2000
Penulis
DAFTAR IS1 Halaman KATA PENGANTAR ....................................................................................
i
DAFTAR IS
..........................................
iv
DAFTAR TABEL...........................................................................................
vi
DAFTAR GA&lB.iR ......................................................................................
vi i
DAFTAR LAMPLlt4N ..................................................................................
vlu
I.
PENDAHULUAN
. .. B. Tujuan Penel~t~an ........................................................................
A Latar Belakang ...........................................................................
II.
1 2
TINJAUAN PUSTAKA A. Tanaman Cincau Hitam ..............................................
. C. C.
3
B AbuQi .........................................................................................
4
Gel ................................................................................................
5
Gel Cincau Hitam ........................................................................
7
D. Cincau Hitam Dan Kesehatan ....................................................
. F. hlakrofag ...................................................................................... G. Kultur Sel .....................................................................................
E Alat Pengering Drum (Dmm Dryer) ..........................................
IU.
...
8 9 10 17
METODOLOGI PENELITIAN
A. Bahan dan Alat ............................................................................
.
19
1 Bahan ....... .-...............................................................................
19
2. Alat ...........................................................................................
20
. .. ........................................................................ C. Metode Penel~t~an
B Waktu dan Tempat Penelitian ................................................... 1. Pembuatan Bubuk Cincau Hitam .........................................
. b. Pembuatan gel cincau hitam ..........................................
a Ekstraksi dan pembuatan bubuk cincau hitam ..............
20 20 20 20 22
2. PengujianProduksi Radikal Bebas Makrofag .....................
..
a. Persiapan sampel nji .......................................................... b. Persiapan media kultur .................... . . ............................. c. Isolasi sel makrofag dari mencit ............. :................. . ......
d. Kultur sel makrofag ... ... ... ... ... . . . ................................. e. Penentuan k u n a standar penentnan jumlah Radikal D. Rancangan Percobaan ... ... ... ... ... ... ... .. . . .. ... .. . .. . .. . .. . ... ... .
..
E. Prosedur Analls~s... ... ... ... ... ... ...... ... ... ... ... ... ... ... ... ... .... IV.
HASIL DAN PEMBAE4SAN A. Pembuatan Bubnk Cincau Hitam B. Pengaruh Perbandingan Pati Terhadap Kekuatan Gel .......... C. Pengaruh Perbandingan Pati Terhadap Sineresis ................... D. Uji Pembedaan Gel Cincau Hitam Instan Dengan Gel Cincau Komersial .......................................................................
E. Pembuatan K u n a Standar Penetapan Jnmlah Radikal Bebas F. Pengujian Pengaruh Ekstrak Cincau Hitam Terhadap
Produksi Radikal Bebas Makrofau ..""
V.
"""""
...........................
KESIMPULAN D4N SARAN A. Kesimpulan .................................................................................. B. Saran .......................................................................................
DAFTAR PUSTAKA .......................................... ...........................................
