UJI AKTIVITAS ANTITUMOR EKSTRAK METANOL BENALU TEH (Scurulla atropurpurea) PADA KULIT MENCIT (Mus musculus) YANG DIINDUKSI 7,12-DIMETILBENZ(α)ANTRASEN (DMBA) SECARA IN VIVO
SKRIPSI
Oleh: AFRILIA MAMLU’ATUL ‘ULUMI NIM. 09620031
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013
UJI AKTIVITAS ANTITUMOR EKSTRAK METANOL BENALU TEH (Scurulla atropurpurea) PADA KULIT MENCIT (Mus musculus) YANG DIINDUKSI 7,12-DIMETILBENZ(α)ANTRASEN (DMBA) SECARA IN VIVO
SKRIPSI
Diajukan Kepada: Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang Untuk Memenuhi Salah Satu Persyaratan Dalam Memperoleh Gelar Sarjana Sains (S. Si)
Oleh: AFRILIA MAMLU’ATUL ‘ULUMI NIM. 09620031
JURUSAN BIOLOGI FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG 2013
MOTTO
Karena Sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan (al-Insyiroh: 5)
SKRIPSI INI KU PERSEMBAHKAN UNTUK: Ayahanda M.Naf’an dan Ibunda Umi Hanik yang telah melimpahkan samudra kasih sayang serta untaian doa ditiap sujud dan malamnya. Pada adinda M.Musaddad yang selalu memberikan motifasi dan dukungan. Pada Yuli Mira Syafriati dan Lelina Mestika Sari yang selalu ada disaat aku membutuhkannya. Terima kasih pada Muhammad Fahad yang telah mensuport, memberi warna hari-hariku dan mendengarkan keluh kesahku dalam berbagai hal. Terimakasih pada teman seperjuanganku Neng Ona yang selalu membantuku, adel,ayul,arum, yang temenin hari-hariku, bang Pahmi,Hamid,bang Rico,Epin,Emon,Ayum,tante Heni,bang Pir, mz Bekti yang selalu memberi semangat ketika down hingga aku bangkit, serta teman-teman perjuanganku (angkatan 09) yang lain yang telah melewati hari-hari indah bersama djurusan kita “Biologi”.
TERIMAKASIH
KATA PENGANTAR
Assalamualaikum Wr. Wb Puji syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, atas segala limpahan rahmat taufiq dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana (S.Si). Sholawat serta salam semoga tetap tercurahkan kepada Nabi Muhammad SAW beserta keluarga dan sahabatnya yang telah mengawali upaya menegakkan cita-cita Islam di muka bumi ini. Penulis menyadari banyak pihak yang telah berpartisipasi dan membantu dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini. Untuk itu, iringan doa dan ucapan terima kasih yang sebesar-besarnya penulis sampaikan. Terutama kepada: 1. Prof. Dr. H. Mudjia Rahardjo, M.Si selaku Rektor Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang. 2. Dr. drh. Hj. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si selaku Dekan Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang. 3. Dr. Evika Sandi Savitri. M,P selaku Ketua Jurusan Biologi Universitas Islam Negeri (UIN) Maulana Malik Ibrahim Malang. 4. Kholihah Holil, M.Si selaku Ketua Laboratorium dyang telah mengizinkan penggunaan fasilitas laboratorium selama penelitian berlangsung.
5. Kholihah Holil, M.Si selakuDosen Pembimbing akademik yang telah sabar membimbing dan memberi arahan kepada saya sehingga skripsi ini dapat terselesaikan. 6. Umaiyatus Syarifah, M.A selaku Dosen Pembimbing agama yang telah memberikan bimbingannya kepada saya selama mengerjakan skripsi ini. 7. Dr. Retno Susilowati, M.Si selaku penguji utama dan Dr. drh. Bayyinatul Muchtaromah, M.Si selaku ketua penguji yang telah memberikan saran dan masukannya guna perbaikan proposal dan skripsi. Penulismengharapkansemogaskripsi
ini
memberikan
khasanah
pengetahuan untuk kemajuan pendidikan.Penulis juga berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi penulis khususnya dan bagi pembaca umumnya.Amin. Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Malang, 17 September 2013
Penulis
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL PERNYATAAN KEASLIAN PENELITIAN HALAMAN PERSETUJUAN HALAMAN PENGESAHAN HALAMAN MOTTO HALAMAN PERSEMBAHAN KATA PENGANTAR ............................................................................................. i DAFTAR ISI .......................................................................................................... iii DAFTAR TABEL .................................................................................................. vi DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ viii ABSTRAK ............................................................................................................. ix BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang ..................................................................................................1 1.2. Rumusan Masalah .............................................................................................8 1.3. Tujuan ...............................................................................................................9 1.4. Hipotesis ...........................................................................................................9 1.5. Manfaat penelitian ..........................................................................................10 1.6. Batasan Masalah .............................................................................................10 BAB II KAJIAN PUSTAKA 2.1. Benalu Teh ......................................................................................................13 2.1.1. Tinjauan Umum Benalu Teh ....................................................................13 2.1.2. Kandungan dan Manfaat Benalu Teh ......................................................15 2.2. Kanker .............................................................................................................20 2.2.1. Deskripsi Kanker .....................................................................................20 2.2.2. Kanker Kulit.............................................................................................21 2.2.3. Penyebab Kanker .....................................................................................22 2.2.4. Stadium Pembentukan Kanker .................................................................24 2.3. Senyawa Pemicu Kanker (Karsinogen) DMBA (7,12-dimetilbenz(α)antrasen) .........................................................................................................................26 2.4. Kulit ................................................................................................................28 2.4.1. Struktur dan Fungsi Kulit.........................................................................28 2.4.2. Histologi Kulit .........................................................................................29 2.4.2.1. Epidermis ........................................................................................30 2.4.2.2. Dermis ............................................................................................31 2.4.2.3. Hipodermis .....................................................................................31
2.4.3. Histologi Kulit yang Terkena Kanker ......................................................32 2.5. Biologi Mencit ................................................................................................34 2.6. Ekstraksi ..........................................................................................................37 2.7. AktifitasAntikankerEkstrakMetanolBenaluTehTerhadapKejadianKankerKulit Mencit Yang Diinduksi DMBA .....................................................................49 BAB III METODOLOGI PENELITIAN 3.1. RancanganPenelitian .......................................................................................44 3.2. VariabelPenelitian ...........................................................................................44 3.3. TempatdanWaktuPenelitian ............................................................................45 3.4. InstrumenPenelitian ........................................................................................45 3.4.1. Alat ...........................................................................................................45 3.4.2. Bahan .......................................................................................................46 3.5. KegiatanPenelitian ..........................................................................................46 3.5.1. TahapPersiapan ........................................................................................47 3.5.1.1. PersiapanHewanCoba .....................................................................47 3.5.1.2. PembagianKelompokdanPerlakuan ................................................47 3.5.1.3. Pembuatan ekstrak ..........................................................................50 3.5.1.4. UjiFitokimia ...................................................................................51 3.5.1.5. Pembuatanlarutan Na-CMC 0,5% ..................................................51 3.5.2. TahapPerlakuan........................................................................................51 3.5.2.1. PemeliharaanHewanCoba...............................................................51 3.5.2.2. PemberianSenyawaKarsinogen (DMBA) ......................................52 3.5.2.3. PemberianEkstrakBenaluTeh (Scurrulaatropurpurea) .................52 3.5.3. TahapPengamatandanPerhitungan ...........................................................52 3.5.3.1. PerhitunganBeratBadanMencit.......................................................52 3.5.3.2. PengamatandanperhitunganKejadianTumor ..................................52 3.5.3.3. PengambilanSampel, PembuatandanPengamatanPreparatHistopatologiJaringanKulit ....53 3.5.3.3.1. PengambilanSampelUntukPengukuran Volume NoduldanPengamatanGambaranHistopatologiKulitMencit (Musmusculus).........................................................................53 3.5.3.3.2. PembuatanPreparatHistopatologiKulitMencit (Musmuculus) Yang TerkenaTumor ...............................................................53 3.5.3.4. PengamatanPreparatHistopatologiJaringanKulit yang TerkenaTumor ................................................................................56 3.6. Analisa Data ....................................................................................................56 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Pengaruh Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurpurea) sebagai Antitumor pada Histologi Kulit Mencit (Mus musculus) yang diinduksi DMBA ...................................................................................................................... 57 4.2. Aktivitas Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurpurea) pada Kejadian tumor Kulit Mencit (Mus musculus) yang diinduksi DMBA ..........67 4.3. Perubahan Berat Badan Mencit yang Diberi Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurea) setelah diinduksi DMBA ........................................73
BAB V PENUTUP 5.1. Kesimpulan .....................................................................................................77 5.2. Saran ...............................................................................................................77 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................79 LAMPIRAN-LAMPIRAN.....................................................................................87
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Karakteristik Kuersetin ..........................................................................18 Tabel 2.2 Karakteristik DMBA ..............................................................................27 Tabel 2.3 Data Biologi Mencit ...............................................................................36 Tabel 3.1 Jadwal Kegiatan Penelitian ....................................................................45 Tabel 3.2 Pembagian Kelompok Perlakuan ...........................................................47 Tabel 4.1 Ringkasan ANAVA Pengaruh Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurea) Sebagai Antitumor terhadap Ketebalan Lapisan Kulit Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi DMBA ...................................66 Tabel 4.2 Ringkasan Hasil Uji Duncan Pengaruh Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurea) Sebagai Antitumor terhadap Ketebalan Lapisan Kulit Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi DMBA pada α 1% ..........................................................................................................66 Tabel 4.3 Aktivitas Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurea) pada Kejadian Tumor Kulit Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi DMBA ...............................................................................................................68 Tabel 4.4 Berat Badan Mencit Saat Penginduksian DMBA ..................................75 Tabel 4.5 Berat Badan Mencit Saat Pemberian Ekstrak Benalu Teh .....................76
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Tanaman Benalu Teh .........................................................................15 Gambar 2.2 Struktur Kimia Senyawa yang Terkandung dalam Benalu Teh .........16 Gambar 2.3 Tahapan-tahapan dalam proses karsinogenesis ..................................25 Gambar 2.4 Mencit yang terkena kanker kulit .......................................................26 Gambar 2.5 Mencit yang terkena kanker kulit yang diinduksi DMBA .................28 Gambar 2.6 Histologi kulit normal ........................................................................30 Gambar 2.7 Histopatologi Mencit yang Terkena Kanker ......................................34 Gambar 2.8 Mencit (Mus musculus) .....................................................................35 Gambar 2.9 Aktivasi dimerisasi ligan-AhR memetabolisme enzim dan gen pada fase I dan II .......................................................................................40 Gambar 2.10 Jalur metabolism DMBA .................................................................41 Gambar 2.11 Aktivasi BAX sehingga menstimulasi pelepasan sitokrom C ..........42 Gambar 3.1 Kegiatan Penelitian ............................................................................46 Gambar 4.1 Aktivitas ekstrak metanol benalu teh pada ketebalan lapisan kulit mencit yang diinduksi DMBA ..........................................................57 Gambar 4.2 Ketebalan lapisan kulit mencit yang diberi ekstrak metanol benalu teh dengan dosis bertingkat yang sebelumnya diinduksi DMBA ...........58 Gambar 4.3 Histopatologi kulit mencit yang diberi ekstrak metanol benalu teh dengan dosis bertingkat yang sebelumnya diinduksi DMBA ...........61 Gambar 4.4 Mencit yang memiliki nodul ..............................................................68 Gambar 4.5 Kondisi mencit ketika diinduksi DMBA dan diberi ekstrak metanol benalu teh ..........................................................................................72 Gambar 4.6 Perubahan berat badan mencit yang diberi ekstrak metanol benalu teh setelah diinduksi oleh DMBA...........................................................74
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Rata-rata perubahan berat badan mencit yang diberi ekstrak metanol benalu teh setelah diinduksi oleh DMBA .........................................87 Lampiran 2. Aktivitas ekstrak metanol benalu teh pada rata-rata ketebalan lapisan kulit mencit yang diinduksi DMBA..................................................87 Lampiran 3. Uji Fitokimia Ekstrak Metanol Benalu Teh ......................................87 Lampiran 4. Perhitungan SPSS ANOVA dan Uji Duncan Pengaruh Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurpurea) Sebagai Antitumor Terhadap Histologi Kulit Mencit (Mus musculus) yang diinduksi DMBA ..............................................................................................88 Lampiran 4.a. Uji Normalitas ............................................................................88 Lampiran 4.b. Uji Homogenitas ........................................................................88 Lampiran 4.c. Uji ANAVA ...............................................................................88 Lampiran 4.d. Uji Duncan .................................................................................89 Lampiran 5.PetaKonsepPenelitian .........................................................................90 Lampiran 6. Gambar kegiatan penelitian ...............................................................91 Lampiran 6.a. Kegiatan pembuatan ekstrak ......................................................91 Lampiran 6.b. Kegiatan perlakuan ....................................................................92 Lampiran 6.c. Kegiatan pembedahan ................................................................93
ABSTRAK
‘Ulumi, Afrilia Mamlu’atul. 2013. Uji Aktivitas Antitumor Ekstrak Metanol Benalu Teh (Scurulla atropurpurea) pada Kulit Mencit (Mus musculus) yang Diinduksi 7,12-Dimethilbenz(α)Antrasen (DMBA) Secara Invivo Tugas akhir/skripsi. JurusanBiologiFakultasSainsdanTeknologiUniversitas Islam NegeriMaulana Malik Ibrahim Malang.Pembimbing Biologi:Kholifah Holil, M.Si.; Pembimbing Agama:Umaiyatus Syarifah, MA Kata kunci: Benalu teh(Scurulla atropurpurea), Kejadian tumor kulit, DMBA, mencit Benaluteh (Scurrulaatropurpurea Bl. Dans) adalahtumbuhanparasitdarifamiliLoranthaceae yang tumbuhpadapohontehsebagaitumbuhaninangnya.Scurrullaatropurpureasecaratradisionalt elahdikenalberfungsisebagai alternatif obat berbagai macam penyakit salah satunyasebagai anti tumor, karena tumbuhan ini mangandung senyawa aktif golongan flavonoid yaitu kuersetin sebagai penekan tumor.Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antitumor ekstrak metanol benalu teh (Scurulla atropurpurea) pada kulit mencit (Mus musculus) yang diinduksi 7,12-dimethilbenz(α)antrasen (DMBA) secara invivo. PenelitianinibersifateksperimentalmenggunakanRancanganAcakLengkap (RAL) dengan4 perlakuan 6 kali ulangan.Beberapa perlakuan tersebut diantaranyaadalahmencit yang diinduksi DMBA 25μg/100μl aseton yang diikuti dengan pemberian ekstrak metanol benalu teh dosis 0mg/KgBB (K+), 750mg/KgBB(P1), 1500mg/KgBB(P2), dan2250mg/KgBB(P3).Hewancoba yang digunakanadalahmencitjantangalurBalb/c,berumur 4-6 minggudanberat 15-20 gram.Parameter yang diamatiadalahpreparathistologijaringankulit yang terkenatumorditandaidenganadanya displasia danketebalan lapisan kulit, kejadiantumor yang meliputiinsidensitumor, volume nodul, luas permukaan lukadan kerontokan bulu,serta perubahan beratbadanmencit.Data ketebalan lapisan kulit yang diperoleh dianalisis dengan ANAVA satu arah.Apabilaterdapatperbedaansangat nyatamakadilanjutkandenganuji duncan (α 1%). Aktivitas antitumor ekstrak metanol benalu teh (Scurulla atropurpurea) padakulit mencit (Mus musculus) yang diinduksi DMBA dapat mempengaruhi ketebalan lapisan kulit, kejadian tumor meliputi insidensi tumor, mengurangi volume nodul,luas permukaan luka dan kerontokan bulu, serta perubahan berat badan mencit. Dosis ekstrak benalu teh yang efektif pada penurunan ketebalan lapisan kulit mencit adalah 750mg/KgBB.
ABSTRACT
'Ulumi, AfriliaMamlu'atul. 2013. Anti-tumor Activity Test of The Methanol Extracts on Tea Parasite (Scurullaatropurpurea) in Skin Mice (Musmusculus) induced 7.12Dimethilbenz (a) Antrasen (DMBA) In vivo. final project / thesis. Department of Biology, Faculty of Science and TechnologyIslamic State University Maulana Malik Ibrahim of Malang. Biology Lecturer : KholifahHolil, M.Si; Religious Lecturer : UmaiyatusSyarifah, MA
Keyword: Tea parasite (Scurrula atropurpurea), incidence of skin, DMBA, Mice Tea parasite (Scurrula atropurpurea BI. Dans) is plant from the family Loranthaceae that grow on the tea tree as their host plants. Scurrulla atropurpurea has traditionally been known to function as an alternative remedy various diseases one of them as anti tumor because this plants contain active compounds of flavonoid quercetin as a tumor suppressor. This study aims to determine the antitumor activity of the methanol extract on tea parasite (Scurulla atropurpurea) in the skin of mice (Mus musculus) induced 7.12-dimethilbenz (a) antrasen (DMBA) in vivo. This is an experimental study using a completely randomized design (CRD) with 4 treatments 6 replications. Some of these treatments include DMBA-induced mice 25ug/100ul acetone followed by methanol extract of tea parasite dose Omg / KgBW (K +), 750mg/KgBB (Pl), 1500mg/KgBB (P2), and 2250mg/KgBB (P3) . Experimental animals used were male mice strain Balb / c, 4-6 weeks old and weighing 15-20 grams. Parameters measured were preparations tissue histology of tumors characterized by the presence of dysplasia and skin layer thickness, the incidence of tumors including tumor incidence, nodule volume, fur loss and wound broad, as well as changes in body weight of mice. Skin layer thickness data were analyzed by one-way ANOVA. If there is a very real difference then followed by Duncan test (a1%). Antitumor activity of methanol extract of tea parasite (Scurulla atropurpurea) in the skin of mice (Mus musculus) the induced DMBA can affect skin layer thickness, the incidence of tumors include tumor incidence, reducing the volume of the nodules, fur loss and wound surface area, and body weight changes in mice. Dose of parasite extracts were effective at decreasing the thickness of the epidermal layer of the skin of mice was 750mg/KgBB.
