SKRIPSI EFEK PROTEKSI EKSTRAK TEH HIJAU (Camellia sinensis) SEBAGAI ANTIOKSIDAN TERHADAP KADAR MALONDIALDEHID (MDA) PLASMA DARAH TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus strain wistar) YANG DIINDUKSI SODIUM SELENITE
OLEH FEELIN FATWA TITIHARJA 201110330311084
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS MUHAMADIYAH MALANG 2015
LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN HASIL PENELITIAN Telah disetujui sebagai hasil penelitian untuk memenuhi persyaratan Pendidikan Sarjana Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang Tanggal : 10 Juli 2015 Pembimbing I
dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK Pembimbing II
dr. Rahmiyah Fadilah Mengetahui, Fakultas Kedokteran Dekan,
dr. Irma Suswati, M.Kes
ii
Karya Tulis Akhir oleh Feelin Fatwa Titiharja ini telah diuji dan dipertahankan di depan Tim Penguji pada tanggal 10 Juli 2015.
Tim Penguji
dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK
Ketua
dr. Rahmiyah Fadilah
Anggota
dr. Heru Priyo H, Sp.Rad
Anggota
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu‟alaikum Wr. Wb. Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat serta taufiknya sehingga penyusun dapat menyelesaikan usulan penelitian yang berjudul “EFEK PROTEKSI
EKSTRAK
ANTIOKSIDAN
TEH
TERHADAP
HIJAU
(Camellia
KADAR
sinensis)
SEBAGAI
MALONDIALDEHID
(MDA)
PLASMA DARAH TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus strain wistar) YANG DIINDUKSI SODIUM SELENITE” dengan baik. Usulan penelitian ini disusun untuk diajukan sebagai salah satu persyaratan untuk menyelesaikan tugas akhir program sarjana Fakultas Kedokteran Universitas Muhammadiyah Malang. Penulis mengucapkan terimakasih kepada : 1. dr. Irma Suswati, M. Kes. selaku Dekan Fakultas Kedokteran UMM. 2. dr. Sulistyo Mulyo Agustini, Sp.PK. selaku Dosen Pembimbing I yang telah membantu, membimbing, dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan usulan penelitian ini. 3. dr. Rahmiyah Fadilah selaku Dosen Pembimbing II yang telah membantu,
membimbing,
dan
mengarahkan
penulis
dalam
menyelesaikan usulan penelitian ini. 4. dr. Heru Priyo H, Sp.Rad. selaku Dosen Penguji yang telah membantu,
membimbing,
dan
menyelesaikan usulan penelitian ini.
iv
mengarahkan
penulis
dalam
v
5. Kedua orang tua penulis, Merduatiningsih
yang
Hardjono, S.T. dan Ibunda Titik
selalu
mendukung
penulis
dalam
menyelesaikan usulan penelitian ini. 6. Teman-teman satu angkatan FK UMM, Kakak tingkat FK UMM, dan pihak lain yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu. Penulis menyadari bahwa tak ada gading yang tak retak, masih banyak terdapat kekurangan dalam susunan usulan penelitian ini. Untuk membuat usulan penelitian ini menjadi lebih baik, penulis selalu mengharapkan kritik dan saran dari para pembaca. Akhir kata, terimakasih atas perhatiannya. Semoga usulan penelitian ini dapat bermanfaat bagi kita semua. Amin Yaa Robbal „Alamin. Wassalamu‟alaikumWr. Wb.
Malang, 15 Agustus 2015 Penulis
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL.................................................................................................. i LEMBAR PENGESAHAN ....................................................................................... ii LEMBAR PENGUJIAN ............................................................................................ iii KATA PENGANTAR ............................................................................................... iv ABSTRAK ................................................................................................................. vi ABSTRACT ............................................................................................................... vii DAFTAR ISI .............................................................................................................. viii DAFTAR TABEL ..................................................................................................... xii DAFTAR GAMBAR ................................................................................................ xiii DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................................. xv BAB 1 PENDAHULUAN ......................................................................................... 1 1.1. Latar Belakang .................................................................................................... 1 1.2. Rumusan Masalah .............................................................................................. 3 1.3. Tujuan Penelitian ................................................................................................ 3 1.3.1. Tujuan Umum............................................................................................ 3 1.3.2. Tujuan Khusus ........................................................................................... 3 1.4. Manfaat Penelitian .............................................................................................. 4 1.4.1. Manfaat Akademik ................................................................................... 4 1.4.2. Manfaat Klinis .......................................................................................... 4 1.4.3. Manfaat Masyarakat……………………………………………………. 4
viii
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ................................................................................ 5 2.1. Malondialdehid (MDA) ..................................................................................... 5 2.1.1. Malondialdehid (MDA) sebagai Produk Peroksidasi Lipid………….. ... 7 2.2. Radikal Bebas.................................................................................................... 7 2.2.1. Definisi Radikal Bebas............................................................................. 7 2.2.2. Tipe Radikal Bebas Dalam Tubuh ........................................................... 8 2.2.3. Produksi radikal bebas dalam tubuh manusia ......................................... 10 2.2.4. Reaksi Perusakan Oleh Radikal Bebas.................................................... 11 2.3. Teh Hijau ............................................................................................................ 14 2.3.1. Taksonomi Teh Hijau .............................................................................. 15 2.3.2. Morfologi Tanaman ................................................................................. 15 2.3.3. Kandungan Teh Hijau .............................................................................. 15 2.3.4. Teh Hijau Sebagai Agen Preventif Radikal Bebas .................................. 17 2.3.4.1. Mekanisme Antioksidan Ekstrak Teh Hijau ................................. 18 2.4. Mekanisme Sodium Selenite Sebagai Radikal Bebas ......................................... 20 2.5. Pengukuran Kadar Radikal Bebas ...................................................................... 21 BAB 3 KERANGKA KONSEP DAN HIPOTESIS .................................................. 22 3.1. Kerangka Konsep ............................................................................................... 22 3.2. Hipotesis ............................................................................................................ 24 BAB 4 METODOLOGI PENELITIAN..................................................................... 25 4.1. Rancangan Penelitian .......................................................................................... 25 4.2. Tempat dan Waktu Penelitian ............................................................................. 25 4.3. Populasi dan Sampel.................................................................................. ......... 25
ix
4.3.1. Populasi ..................................................................................................... 25 4.3.2. Sampel ....................................................................................................... 25 4.3.3. Replikasi .................................................................................................... 26 4.3.3.1. Teknik Pengambilan Sampel ..................................................... 26 4.3.4. Karakteristik Sampel Penelitian ................................................................ 27 4.3.4.1. Kriteria Inklusi ........................................................................... 27 4.3.4.2. Kriteria Ekslusi ........................................................................... 27 4.4. Variabel Penelitian........................................................................... ................... 27 4.4.1. Variabel Bebas ......................................................................................... 27 4.4.2. Variabel Tergantung ................................................................................. 27 4.5. Definisi Operasional................................................................. .......................... 28 4.5.1. Ekstrak Teh Hijau .................................................................................... 28 4.5.2. Kadar Malondialdehide (MDA) Plasma Darah Tikus ............................. 28 4.5.3. Tikus Putih ............................................................................................... 28 4.5.4. Sodium Selenite ....................................................................................... 28 4.6. Instrumen Penelitian ........................................................................................... 29 4.6.1. Bahan Penelitian....................................................................................... 29 4.6.2. Alat Penelitian .......................................................................................... 29 4.7. Cara Kerja ........................................................................................................... 30 4.7.1. Ekstraksi Teh Hijau .................................................................................. 30 4.7.2. Perlakuan Hewan Coba ............................................................................ 30 4.7.2.1 Teknik Pemberian Sonde Lambung Tikus ................................. 30 4.7.2.2 Proses Anastesi dan Pembedahan Hewan Coba ......................... 34
x
4.7.3. Prosedur Analisis MDA Plasma .............................................................. 34 4.8. Alur Penelitian ................................................................................................... 35 4.9. Metode Analisis Data ......................................................................................... 36 BAB 5 HASIL PENELITIAN DAN ANALISIS DATA .......................................... 37 5.1 Hasil Pemeriksaan dan Analisa Data Kadar MDA .............................................. 38 BAB 6 PEMBAHASAN ............................................................................................ 40 BAB 7 KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................................... 43 7.1 Kesimpulan .......................................................................................................... 43 7.2 Saran ..................................................................................................................... 43 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................ 45 LAMPIRAN ............................................................................................................... 51
xi
DAFTAR TABEL Tabel 2.1 Radikal Bebas Biologis .............................................................................. 10 Tabel 2.2 Sumber Penghasil Radikal Bebas .............................................................. 11 Tabel 5.1 Rerata Kadar MDA Darah Tikus (ng/ml) .................................................. 38
xii
DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Sistem Oksigen Reaktif .......................................................................... 12 Gambar 2.2 Daun Teh Hijau (Camellia sinensis) ...................................................... 16 Gambar 4.1 Tabel Konversi Dosis ............................................................................. 34 Gambar 5.1 Diagram batang rata-rata kadar MDA.................................................... 38
xiii
DAFTAR SINGKATAN CMC-Na
Carboksi Metil Celulosa - Natrium
Cu
Cuprum
DNA
Deoxyribonucleic acid
EGCG
Epigallocathecin gallate
Fe
Ferrum
H2O
Dihidrogen monoksida
H2O2
Hydrogen peroxide
HSD Tukey
Honest Significance Test Tukey
Kemenkes RI
Kementerian Kesehatan Republik Indonesia
LD50
Lethal Dose 50%
MDA
Malondialdehyde
NaCl
Natrium Chloride
O2
Oxygen
-OH
Hydroxyl radical
PPOK
Penyakit Paru Obstruktif Kronik
PUFA
Poly Unsaturated Fatty Acid
ROI
Reactive Oxygen Intermediate
ROS
Reactive Oxygen Species
Se
Selenium
SOD
Superoksida dismutase
TBA
Thiobarbituric acid
TCA
Tricarboxylic acid
xiv
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Analisis Data .......................................................................................... 51 Lampiran 2 Dokumentasi Penelitian .......................................................................... 57 Lampiran 3 Biaya dan Jadwal Penelititan .................................................................. 61 Lampiran 4 Hasil Uji MDA Serum ............................................................................ 63 Lampiran 5 Surat Keterangan Determinasi Teh Hijau............................................... 64 Lampiran 6 Surat Keterangan Penelitian ................................................................... 65 Lampiran 7 Lembar Konsultasi Tugas Akhir ............................................................ 66
xv
DAFTAR PUSTAKA Amelia Rara, 2012, Perbandingan Uji Efektivitas Ekstrak Teh Hijau (Camellia Sinensis) sebagai Antibakteri Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli Secara In Vitro, Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Pembangunan Nasional Veteran Arkhaesi N, 2008, Kadar Malondialdehid (MDA) Serum Sebagai Indikator Prognosis Keluaran Pada Sepsis Neonatorum, diakses 03 Desember 2014 10:41 PM, http://eprints.undip.ac.id/18343/1/Nahwa_Arkhaesi.pdf. Aylindina, Nur, 2007, Pengaruh Pemberian Teh Hijau Terhadap Aktivitas Radikal Bebas Pada Hepar Mencit Diabetes, Malang: Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Malang Benazir, I Maria, 2011, Tingkat Pengetahuan Mahasiswa Fakultas Kedokteran Universitas
Sumatera
Utara
Tentang
Pengaruh
Radikal
Bebas
Terhadap Timbulnya Penyakit, Medan: Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera
Utara,
http://repository.usu.ac.id/handle/123456789/25716
diakses 03 Desember 2014 10:41 PM. Biswas, 2006, Oxidant Induced Injury of Eritrocyte-Role of Green Tea Leaf and Ascorbis acid. Mol. Cell Biochemistry. 276. ȅ Chandra, V Lobo, A Patil, A Phatak, 2010, Free radicals, antioxidants and functional foods: Impact on human health. Journal of Pharmacogn Rev Ed Jul-Dec 2010.
45
46
Chase, Brad. 2012, The Health and Benefits of Green Tea. Journal of Progressive Health. Dahlan, M Sopiyudin, 2013, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan. Jakarta: Salemba Medika. Dewi, Kartika, 2008, Pengaruh Ekstrak Teh Hijau (Camellia Sinensis var. Assamica) Terhadap Penurunan Berat Badan, Kadar Trigliserida dan Kolesterol Total Pada Tikus Jantan Galur Wistar, Bandung: Jurnal Kedokteran Maranatha Vol 7/ No. 2/ Feb 2008, hal. 155-162. Dian, Sundari, 2009, Toksisitas Akut (LD50) dan Uji Gelagat Ekstrak Teh Hijau pada Mencit, Jakarta: Media Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Vol XLX no. 4 Effendi Dedi S, Syakir M, Yusron M, Wiratno, 2010, Budidaya dan Pasca Panen Teh. Bogor: Pusat Penelitian dan Pengembangan Perkebunan Federer WT, 1967, Experimental design, theory and application, New Delhi: Oxford and IBH Publ. Co, Ramsey SC, Galeano. Gupta, Halder N, Srivastava S, Trivedi D, Joshi S, Varma SD, 2010, Advances in pharmacological strategies for the prevention of cataract development. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2683438/ , Indian Journal of Ophtalmology May-Jun 57 (3), diakses 03 Desember 2014 11:25 PM. Guyton AC, Hall JE. 2007. Metabolisme Lipid, dalam Irawati, Dian Ramadhani (ed), Buku Ajar Fisiologi Kedokteran, Edisi 11, EGC, Jakarta. Pp 882 – 893. Harmita, Maksum Radji, 2008, Buku Ajar Analisis Hayati Edisi 3, Jakarta: EGC.
47
Herawati, Anita, 2012, Peran Terapi d-alfa tokoferol Terhadap Kadar Glukosa Darah dan Kadar MDA pada Tikus Diabetes Melitus Tipe 1 Hasil Induksi MLD-STZ, Malang: Veterinaria Medika Vol 5 no. 3 Jawi I Made, D N Suprapta, I N Arcana, A W Indrayani, A A N Subawa, 2011, Efek Antioksidan Ekstrak Air Umbi Ubi Jalar Ungu (Ipomoea batatas L) Terhadap Darah dan Berbagai Organ pada Mencit yang Diberikan Beban Aktivitas Fisik Maksimal, Denpasar: Fakultas Kedokteran Universitas Udayana. Kadri, Husnil, 2010, Pengaruh Pemberian Minyak Buah Merah Terhadap Kadar Glukosa darah dan Malondialdehid Serum Mencit yang Diinduksi Aloksan, Majalah Kedokteran Andalas Vol 34 no. 1 Katzung, Betram G, 2011, Farmakologi Klinik dan Terapi. Jakarta: EGC Kyselove Zuzana, 2010, Different experimental approaches in modelling cataractogenesis: An overview of selenite-induced nuclear cataract in rats, Bratislava: Interdisciplinary Toxicology. 2010; Vol. 3(1): 3–14. Mahmood et al. 2010, Outcomes of 3% Green Tea Emulsion on Skin Sebum Production in Male Volunteers. Bosnian Journal Of Basic Medical Sciences 2010; 10 (3): 260-264. Malole, Sri Utami Pramono, 1989, Penggunaan Hewan-hewan Percobaan di Laboratorium, Jawa Barat: Institut Pertanian Bogor Hal. 104-102 Marsalina M. 2010. Pengaruh Pemberian Ekstrak Air Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa l.) terhadap Kadar Kolesterol Total Darah dan Berat Badan
48
Tikus Putih (Rattus norvegicus). Skripsi. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Surakarta. Pp. 68 – 70. Misra H, D Mehta, BK Mehta, M Soni, DC Jain, 2008, Study of Extraction and HPTLC-UV Method for Estimation of Caffeine in Marketed Tea (Camellia sinensis) Granules, International Journal of Green Pharmacy: 47-51. Notoatmodjo S., 2005, Metodologi Penelitian Kesehatan, Jakarta: Adi Mahasatya. Paget & Barnes, 1964, Evaluation of Drug Activities, New York: Academic Press Perricone Nicholas, 2007, The Perricone Prescription, Jakarta: Serambi Powers SK, Jackson MJ, 2008, Exercise-Induced Oxidative Stress: Cellular Mechanism and Impact on Muscle Force Production. Physiol Rev 88, hal.1243-1276. Putranti, Hippolyta A P, 2007, Pengaruh Pemberian Teh Hijau Terhadap Kadar Kolesterol LDL dan HDL pada Tikus Putih, Malang: Majalah Kesehatan FKUB Vol 3 no. 1 Rahmantini, 2010, Pengaruh Pemberian Vitamin C Terhadap Kadar MDA Serum pada Lansia, Padang : Jurnal Kedokteran Andalas 29. Rita W Susana, N W O.A.C.Dewi, N M Puspa, I M Dira S, I.A.R. Astiti A, 2014, Aktivitas Antioksidan Senyawa Flavonoid Ekstrak Etanol Biji Terong Belanda
(Solanum
Betaceum,
Syn)
Dalam
Menghambat
Reaksi
Peroksidasi Lemak Pada Plasma Darah Tikus Wistar, Denpasar: Cakra Kimia Indonesian E-Journal of Applied Chemistry Volume 2, Nomor 1, Ed Mei 2014.
49
Rohdiana, Dadan, 2005, Aktivitas Pengangkapan Radikal Polifenol dalam Daun Teh, Bandung: Majalah Farmasi Indonesia Vol 1 Rohdiana, Dadan, 2009, Teh Ini Menyehatkan Telaah Ilmiah Populer, Bandung: Alfabeta, CV. Silalahi J, 2006, Antioksidan dalam Diet dan Karsinogenesis, Cermin Dunia Kedokteran, 153, hal 42-47. Suhirman, Ma’mun, 2006, Teknik Pembuatan Simplisia dan Ekstrak Purwoceng, Jawa Tengah: Laporan Pelaksanaan Penelitian Tanaman Obat Sukina, Balaka, 2011, Pengaruh Fraksi Etil Asetat Daun Teh Hijau Terhadap Kadar Malondialdehid dan Aktivitas Enzim Superoksida Dismutase Eritrosit Tikus Putih Strain Wistar yang Dipapar Pumblum, Surabaya: Perpustakaan Universitas Airlangga Sumpio, et al. 2006, Green tea, the "Asian paradox," and cardiovascular disease. PubMed.gov. New Haven: Department of Vascular Surgery, Yale University School of Medicine, New Haven, CT 06520-8062, USA. Sutherland, 2006. Mechanism of Action of Green Tea Cathecin. Journal of Nutritional Biochemistry 17 (2006) 291-306. Syamsul Arief, 2007, Radikal Bebas, Surabaya: Ilmu Kesehatan Anak Fakultas Kedokteran Universitas Airlangga, diakses 10 November 2014 08:50 AM, http://old.pediatrik.com/buletin/06224113752-x0zu6l.pdf Wan, Xiaochun, Daxiang Li, 2008, Green Tea and Black Tea: Tea and Tea Products. United States of America: CRC Press.
50
Wibowo, T. 2009. Pengaruh Pemberian Seduhan Kelopak Rosella (Hibiscus sabdariffa) Terhadap Kadar Trigliserida Darah Tikus Putih (Rattus norvegicus). Skripsi. Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Suarakarta. Surakarta. Pp. 63 – 70. Winarsi, Hery, 2007, Antioksidan alami & radikal bebas : potensi dan aplikasinya dalam kesehatan, Yogyakarta : Kanisius, hal 189 Yuliani, 2012, Efek protektif ekstrak etanol herba Pegagan (centella asiatica (l.) Urban) terhadap Pembentukan katarak tikus wistar yang Diinduksi sodium Selenite. Jurnal Ilmiah Kefarmasian Universitas Ahmad Dahlan vol. 2 no.1 hal. 31-40.
