SKRIPSI AYU MEGA YUSTANIA
EFEKTIVITAS BENZIL ALKOHOL 2% v/v SEBAGAI PENGAWET SEDIAAN INJEKSI DIFENHIDRAMIN HIDROKLORIDA DOSIS GANDA (Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus)
PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2016
Lembar Pengesahan
EFEKTIFITAS BENZIL ALKOHOL 2% v/v SEBAGAI PENGAWET SEDIAAN INJEKSI DIFENHIDRAMIN HIDROKLORIDA DOSIS GANDA (Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus) SKRIPSI Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang 2016
Oleh : AYU MEGA YUSTANIA NIM : 201110410311063
Disetejui Oleh :
Pembimbing I
Pembimbing II
Drs. Sugiyartono, MS., Apt NIP 19541004 198103 1 003
Dian Ermawati, M.Farm., Apt NIP UMM 11209070481
Lembar Pengujian
EFEKTIFITAS BENZIL ALKOHOL 2% v/v SEBAGAI PENGAWET SEDIAAN INJEKSI DIFENHIDRAMIN HIDROKLORIDA DOSIS GANDA (Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus) SKRIPSI Telah diuji dan dipertahankan di depan tim penguji Pada Tanggal 6 Februari 2016 Oleh : AYU MEGA YUSTANIA NIM : 2011104103111063 Tim Penguji :
Penguji I
Drs. Sugiyartono, MS., Apt NIP 19541004 198103 1 003
Penguji III
Drs. Achmad Inoni, Apt. NIDN 0020124205
Penguji II
Dian Ermawati, M.Farm., Apt NIP UMM 11209070481
Penguji IV
Arina Swastika M., S.Farm., Apt.
KATA PENGANTAR Puji syukur Alhamdulillah penulis panjatkan kehadirat Allah SWT yang telah memberika rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul : EFEKTIVITAS BENZIL ALKOHOL 2% v/v SEBAGAI
PENGAWET
SEDIAAN
INJEKSI
DIFENHIDRAMIN
HIDROKLORIDA DOSIS GANDA (Terhadap Bakteri Staphycoccus aureus). Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar sarjana farmasi pada program studi fakultas ilmu kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang. Pana penulisan skripsi ini tentu tidak lepas dari kekurangan cobaan, dan hambatan yang di temui. Atas doa, bimbingan, bantuan, dukungan, dan kerjasamanya penulisan skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1.
Drs. Sugiyartono, MS., Apt selaku Pembimbing I dan Dian Ermawati, M.Farm., Apt selaku Pembimbing II yang selalu memberi bimbingan serta waktunya selama penelitian dan penulisan skripsi ini.
2.
Drs. H. Achmad Inoni, Apt dan Arina Swastika Maulita, S.Farm.,Apt Selaku Dosen Penguji yang selalu memberikan nasehat, saran selama penelitian dan penulisan skripsi ini.
3.
Kedua Orang tua, kakak, dan adik saya atas doa, bimbingan, didikannya, dan semangat serta jasa-jasa yang telah diberikan untuk saya.
4.
Wido Dwi Arifiya Zaen yang tidak henti nya memberi semangat, cinta dan kasih sayang selama pengerjaan skripsi ini.
5.
Para dosen pengajar Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah mendidik saya selama hingga menjadi seorang sarjana farmasi.
6.
Para staf Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah membantu saya selama berada di Universitas Muhammadiyah Malang.
7.
Para staf laboran yang telah membantu dalam penelitian skripsi ini.
8.
Teman-teman seperjuangan saya dalam penelitian dan penulisan skripsi Dewi Puspitasari, Annisa Lutfiana W, Richa Elfira atas bantuan, serta kerjasamanya dalam penelitian dan penulisan skripsi atas.
9.
Sahabat perjuangan sarjana farmasi Rohimatus Sa’diyyah, Dessyatul kholifah, Binti Durotun N, Baiq Febriyolla Shinta Rahayu, Pratika Nurantari Timur, Linda Khusnul Magdhalina dan Zuariah Mukaromah, Hanan. Teman-teman
angkatan
2011
Program
Studi
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah Malang terutama farmasi B atas bantuan dan kerjasamanya selama menempuh sarjana farmasi. 10.
Sahabat rumah Ayu Yunita Wardhani, Nur Laily Hidayati, Siti Sitatun S, dan Ira Perdani Wati terimakasih atas perhatian nya selama ini. Semoga atas doa, bimbingan, bantuan, dukungan, dan kerjasamanya
diterima oleh Allah SWT sebagai amal perbuatan yang baik. Selain itu Skripsi ini masih jauh dari sempurna apabila ada kritik dan saran penulis terima dengan senang hati guna kesempurnaan skripsi ini. Semoga skripsi ini bermanfaat untuk perkembangan formulasi injeksi, dan para pembaca.
Malang, 14 Februari 2016
Ayu Mega Yustania 201110410311063
DAFTAR ISI Halaman LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................
ii
LEMBAR PENGUJIAN .....................................................................................
iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................
iv
RINGKASAN .....................................................................................................
vi
ABSTRAK .......................................................................................................... vii DAFTAR ISI ......................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .............................................................................................. xiii DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xv DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xvi BAB I PENDAHULUAN...................................................................................
1
1.1
Latar Belakang .............................................................................................................
1
1.2
Rumusan Masalah .......................................................................................................
3
1.3
Tujuan Penelitian ........................................................................................................
3
1.4
Manfaat Penelitian ......................................................................................................
3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ........................................................................ 2.1
4
Tinjauan Tentang Sediaan Injeksi ........................................................................
4
2.1.1 Definisi Sediaan Injeksi ..........................................................
4
2.1.2 Karakteristik dan Persyaratan Sediaan Injeksi........................
5
2.1.3 Keuntungan Pemberian Obat Secara Parental ........................
5
2.1.4 Kelemahan Pemberian Obat Secara Parenteral ......................
6
2.1.5 Bahaya (resiko) yang dapat terjadi selama dan sesudah pemberian sediaan parenteral .................................................
6
2.1.6 Bentuk Sediaan Injeksi ...........................................................
7
2.1.7 Wadah Sediaan Injeksi ...........................................................
8
2.2
Tinjauan Difenhidramin Hidroklorida ...............................................................
8
2.3
2.2.1 Tinjauan Sifat Fisika Kimia Difenhidramin Hidroklorida .............. 8 2.2.2 Tinjauan Farmakologi Difenhidramin Hidroklorida ........................ 9 Tinjauan Pengawet ..................................................................................................... 11 2.3.1 Definisi Pengawet ............................................................................................ 11
2.4
2.3.2 Deskripsi Benzil Alkohol .............................................................................. 2.3.3 Stabilitas dan Kondisi Penyimpanan ....................................................... 2.3.4 Inkompaktibilitas ............................................................................................ 2.3.5 Toksisitas ............................................................................................................ 2.3.6 Mekanisme Kerja ............................................................................................. 2.3.7 Kadar Toksik ...................................................................................................... Tinjauan Tentang Mikrobiologi ............................................................................
12 13 13 13 14 14 15
2.5
2.4.1 Faktor – Faktor yang Mempengaruhi Pertumbuhan Mikroorganisme .............................................................................................. 2.4.2 Sumber – Sumber Kontaminasi Organisme ......................................... 2.4.3 Mikroorganisme Percobaan ........................................................................ Tinjauan Sterilisasi .....................................................................................................
15 17 19 20
2.6
2.5.1 Alasan Melakukan Sterilisasi ...................................................................... 20 2.5.2 Macam – Macam Sterilisasi .......................................................................... 20 Tinjauan Sterilitas ....................................................................................................... 22 2.6.1 Prosedur Umum ............................................................................................... 22
2.6.2 Metode Uji Sterilitas ............................................................... 24 2.6.3 Media Untuk Uji Sterilitas ...................................................... 25 2.6.4 Kontrol Uji Sterilitas .............................................................. 27 2.6.5 Penafsiran Hasil Uji Sterilitas ................................................. 28 2.7
Tinjauan Uji Efektivitas Pengawet Antimikroba ........................................... 28
2.8
2.7.1 Kategori Produk ............................................................................................... 2.7.2 Mikroba Uji ......................................................................................................... 2.7.3 Media ..................................................................................................................... 2.7.4 Pembuatan Inokula ......................................................................................... 2.7.5 Prosedur .............................................................................................................. 2.7.6 Metode Perhitungan Mikroba .................................................................... 2.7.7 Kriteria Efektivitas Antimikroba ............................................................... Teknik Aseptik .............................................................................................................
29 29 30 30 32 33 34 35
2.8.1 Ruang Kerja ....................................................................................................... 2.8.2 Peralatan ............................................................................................................. 2.8.3 Personalia ........................................................................................................... BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ............................................................................................... 3.1 Uraian Kerangka Konseptual .................................................................................
35 37 38 40 40
3.2
Keranka Konseptual Uji Efektivitas Sediaan Injeksi .................................... 42
BAB IV METODE PENELITIAN ....................................................................................................... 43 4.1 Desain Penelitian ........................................................................................................ 43 4.2
Lokasi Penelitian ......................................................................................................... 43
4.3
Waktu Penelitian ......................................................................................................... 43
4.4
Sterilisasi Alat dan Bahan ........................................................................................ 43
4.4.1 Alat ......................................................................................................................... 43 4.4.2 Bahan ................................................................................................................... 44 4.4.3 Sterilisasi Alat .................................................................................................... 44
4.5
Identifikasi Bahan Penelitian ........................................................... 44
4.5.1 Benzil Alkohol ................................................................................................... 4.5.2 Difenhidramin Hidroklorida ....................................................................... 4.6 Sterilisasi Ruangan ..................................................................................................... 4.7 Preparasi Sediaan ....................................................................................................... 4.7.1 Formulasi ............................................................................................................ 4.7.2 Prosedur Kerja ..................................................................................................
4.8
Uji Sterilitas Sediaan Injeksi............................................................ 49 4.8.1 Penyiapan Unit LAFC ...................................................................................... 4.8.2 Kontrol Lingkungan LAFC ............................................................................ 4.8.3 Kontrol Lingkungan Suhu dan Kelembapan di luar LAFC .............. 4.8.4 Penyimpanan Media ....................................................................................... 4.8.5 Pemeriksaan Pendahuluan .......................................................................... 4.8.6 Perlakuan ............................................................................................................
4.9
44 45 45 45 45 45
49 49 49 49 50 51
Uji Efektivitas Pengawet ................................................................. 51 4.9.1 Kontrol Lingkungan LAFC .......................................................................... 4.9.2 Kontrol Lingkungan Suhu dan Kelembapan di LAFC ....................... 4.9.3 Penyiapan Media .............................................................................................. 4.9.4 Perlakuan ............................................................................................................
52 53 53 55
4.10 Skema Kerangka Operasional .......................................................... 56 BAB V HASIL PENELITIAN ........................................................................... 57 5.1
Hasil Uji Kontrol Lingkungan pada LAFC ..................................... 58 5.1.1 Hasil Uji Kontrol Lingkungan Didalam dan Luar LAFC pada Pembuatan Sediaan Injeksi ................................. 58 5.1.2 Hasil Uji Kontrol Lingkungan LAFC pada Uji Inaktivasi Pengawet Sediaan Injeksi ...................................... 60 5.1.3 Hasil Uji Kontrol Lingkungan pada LAFC pada Uji Sterilitas Sediaan Injeksi ........................................................ 61 5.1.4 Hasil Uji Kontrol Ruangan LAFC pada Uji Efektifitas Sediaan Injeksi ....................................................................... 62
5.2
Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat dan Media Kasamino (Kontrol Positif) ............................................................................... 62
5.3
Hasil Uji Sterilitas Media Tioglikolat dan Kasamino (Kontrol Negatif) ......................................................................................... 63
5.4
Hasil Uji Inaktivasi Pengawet Benzil Alkohol pada Sediaan Injeksi
......................................................................................... 64
5.5
Hasil Uji Sterilitas Sediaan Injeksi Zink Sulfat ............................... 65
5.6
Hasil Uji Efektivitas Pengawet Benzil Alkohol 2% v/v .................. 66
BAB VI PEMBAHASAN .................................................................................. 68 BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN........................................................... 72 7.1 Kesimpulan ........................................................................................ 72 7.2 Saran…… ......................................................................................... 72 DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 73
DAFTAR TABEL Tabel II. 1
Halaman Pengawet yang Lazim Digunakan dalam Formulasi Sediaan Parental............................................................................................... 12
II.2
Jumlah Volume dan Media untuk Bahan Cair ................................... 24
II.3
Kategori Produk ................................................................................. 29
II.4
Kondisi Kultur Preparasi Inokula....................................................... 31
II.5
Kriteria Mikroba yang diuji .............................................................. 35
II.6
Klasifikasi Ruangan Bersih (Akers, 2005)......................................... 37
IV.1
Tabel Pengambilan Sampel ................................................................ 52
V.1
Hasil Uji Kontrol Ruangan LAFC dengan Media Agar Nutrein pada Pembuatan Sedian Injeksi.......................................................... 59
V.2
Hasil Uji Kontrol Lingkungan LAFC Sebelum dan Selama Uji Inaktivasi Pengawet dengan Media Agar Nutrein ............................. 60
V.3
Hasil Uji Kontrol Ruangan LAFC dengan Media Agar Nutrein pada Uji Sterilitas Sedian Injeksi ....................................................... 61
V.4
Hasil Uji Kontrol Ruangan LAFC dengan Media Agar Nutrein pada Uji Efektivitas Pengawet Sedian Injeksi ................................... 62
V.5
Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat dan Kasamino (Kontrol Positif) ................................................................................................ 63
V.6
Hasil Uji Fertilitas Media Tioglikolat dan Kasamino (Kontrol Negatif) .............................................................................................. 64
V.7
Hasil Uji Inaktivasi Pengawet pada Sediaan Injeksi .......................... 65
V.8
Hasil Uji Sterilitas Sediaan Injeksi .................................................... 66
V.9
Jumlah Awal Rata-Rata Mikroba Uji dalam cfu per ml pada Uji Efektivitas Pengawet Benzil Alkohol 2% v/v .................................... 67
V.10 Hasil Jumlah Mikroba dalam cfu per ml pada Uji Efektivitas Pengawet Benzil Alkohol 2% v/v ...................................................... 67
DAFTAR GAMBAR Gambar
Halaman
2.1
Struktur Kimia Difenhidramin HCL .................................................... 8
2.2
Struktur Benzil Alkohol ....................................................................... 13
3.1
Skema Kerangka Konseptual ............................................................... 42
4.1
Letak Media Agar dalam Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) ............ 48
4.2
Skema Letak Media Agar dalam Unit LAFC Saat Uji Efektivitas ...... 53
4.3
Skema Kerangka Operasional .............................................................. 56
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran
Halaman
1.
Daftar Riwayat Hidup ............................................................................. 75
2.
Surat Anti Plagiat.................................................................................... 76
3.
Perhitungan Bahan .................................................................................. 77
4.
Perhitungan Bakteri ................................................................................ 78
5.
Sertifikat Bahan Aktif ............................................................................. 79
6.
Sertifikat Pengawet ................................................................................. 80
7.
Sertifikat Bakteri dan Jamur ................................................................... 85
8
Skema Pembuatan Sediaan Injeksi ......................................................... 88
9.
Skema Kerja Uji Inaktivasi Pengawet .................................................... 89
10. Skema Kerja Uji Sterilitas Sediaan Injeksi Difenhidramin Hidroklorida 90 11. Skema Kerja Pengenceran Bakteri ......................................................... 91 12. Skema Kerja Uji Efektivitas Pengawet................................................... 92 13. Kontrol Pembuatan Sediaan ................................................................... 93 14. Kontrol Uji Inaktivasi ............................................................................. 95 15. Kontrol Uji Sterilitas............................................................................... 97 16. Kontrol Uji Efektivitas ........................................................................... 99 17. Hasil Uji Fertilitas dan Uji Sterilitas ...................................................... 101 18. Hasil Uji Inaktivasi ................................................................................. 102 19. Hasil Uji Sterilitas................................................................................... 105 20. Jumlah Awal Mikroba ............................................................................ 107 21. Hasil Uji Efektivitas ............................................................................... 109 22. Alat dan Bahan ....................................................................................... 112
DAFTAR SINGKATAN APD
: Alat Pelindung Diri
ATCC
: American Type Culture Collection
ATP
: Adenosine triphosphate
cfu
: Colony Form Unit
Depkes RI
: Departemen Kesehatan Republik Indonesia
FDA
: Food And Drugs Administration
HEPA
: High Efficiency Particulate Air
LAFC
: Laminar Air Flow Cabinet
MPN
: Most Probable Number
NA
: Nutrient Agar
NaCl
: Natrium Chloride
pH
: Potential of Hydrogen
TSA
: Trypticase Soy Agar
USP
: United State Pharmacopoeia
UV
: Ultraviolet
WHO
: World Health Organization
DAFTAR PUSTAKA Agoes, Goeswin. 2009. Pengembangan Sediaan Farmasi. Edisi Revisi dan Perluasan. Bandung: Penerbit ITB Akers, M.J., 2005. Parenteral Preparations. Remington’S Pharmaceutical The Science and Practice in Pharmacy !"!" Edition. Pennsylvania : Lippincott Williams & Wilkins. Halaman : 815 Anonim. 2008. United State Pharmacopoeia. Edisi ke-32, Rockville : USP Convention, Inc. Ansel, H.C., 2005. Pengantar Sediaan Farmasi (Penerjemah Farida Ibrahim). Edisi keempat, Jakarta : Penerbit Universitas Indonesia, hal 399, 404 – 405, 411 – 418, 423, 426, 433. Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia. 2014. Pedoman Cara Pembuatan Obat yang Baik. Jilid ke-2, Jakarta : Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia. Edisi ke-4, Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2009. Pedoman Dasar Dispensing Sediaan Steril. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 2014. Farmakope Indonesia. Edisi ke-5, Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia Goldman, E., Green, L.H., 2009. Practical Handbook of Microbiology. Edisi ke-2, Boca Raton : CRC Press Taylor & Francis Group Guun’s and Cooper., 1975. Dispensing For Pharmaceutical Student. Twelfth Edition. Pitman Medical, pp : 300 – 549. Hugo, W.B., Russel, A.D., 1998. Pharmaceutical Microbiology. Edisi ke-6, Oxford : Blackwell Science Jawetz, E., Melnick J.L, Adelberg E.A., 2005. Review of Medical Microbiology, 14th edition. Lange Medical Publications, Los Altos-California, pp 284 – 425. Kar, Ashutosh, 2008. Pharmaceutical Microbiology. New Delhi : New Age International Publishers Katzung, Betram.G., 1998. Farmakologi Dasar dan Klinik, edisi VI. Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC, hal : 271
Kumar, Surinder, 2012. Textbook of Microbiology. Edisi ke-1, New Delhi : Jaypee Brothers Medical Publishers Lukas, Stefanus, 2006. Formulasi Steril. Yogyakarta : Andi Publisher Nair B; Int J Toxicol 20, NLM (National Library of Medicine), concentration toxic of Benzyl alcohol , Bethesda (Maryland) 20894, USA (United State of America), suppl 3 :23-50 (2001) Pratiwi Sylvia T., 2008. Mikrobiologi Farmasi. Jakarta: Erlangga, hal. 2. Sweetman, S.C. 2009. Martindale Pharmaceutical Press.
Thirty-Sixth
Edition.
London
:
Rowe, C. Raymond, dkk. 2009. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Edisi ke-6, London : Pharmaceutical Press Turco, S., 1979. Sterile Dosage Forms. 2nd Edition. Philadelphia : LEA & FEBIGER, hal 11. Voight, R. 1995. Buku Ajar Teknologi Farmasi. Edisi kelima. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press Waluyo, Lud. 2010. Teknik dan Metode Dasar dalam Mikrobiuologi. Malang : UMM Press World Health Organization. 2007. Quality Assurance of Pharmaceutical : A Compendium of Guidelines and Related Materials. Vol. 2, Good Manufacturing Practices and Inspection. Edisi ke 2, Avenue Appia : WHO Press
