PENGARUH INTENSITAS CAHAYA TERHADAP KANDUNGAN KAROTENOID Chlorella sp

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

SKRIPSI

PENGARUH INTENSITAS CAHAYA TERHADAP KANDUNGAN KAROTENOID Chlorella sp.

Oleh: AGUS PARIAWAN LAMONGAN – JAWA TIMUR

FAKULTAS PERIKANAN DAN KELAUTAN UNIVERSITAS AIRLANGGA SURABAYA 2014

Skripsi

PENGARUH INTENSITAS CAHAYA TERHADAP KANDUNGAN KAROTENOID Chlorellasp.

AGUS PARIAWAN


SKRIPSI


sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Perikanan pada Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga

Oleh : AGUS PARIAWAN NIM. 141011010

Menyetujui, Komisi Pembimbing,

Skripsi

Pembimbing Pertama

Pembimbing Kedua

Sudarno, Ir., M.Kes.

Rahayu Kusdarwati, Ir., M.Si.

NIP. 19550713 198601 1 001

NIP. 19591022 198601 2 001


AGUS PARIAWAN


SKRIPSI


sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Perikanan pada Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga

Oleh : AGUS PARIAWAN NIM. 141011010

Telah diuji pada Tanggal : 17 Juli 2014

KOMISI PENGUJI SKRIPSI Ketua

: Moch. Amin Alamsjah, Ir., M.Si., Ph.D

Anggota

: Dr. Endang Dewi Masithah, Ir., MP. Sapto Andriyono, S. Pi., M.T. Sudarno, Ir., M. Kes. Rahayu Kusdarwati, Ir., M.Si.

Surabaya, Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Dekan,

Prof. Dr. Hj. Sri Subekti, drh., DEA. NIP. 19520517 197803 2 001

Skripsi


AGUS PARIAWAN


Yang bertanda tangan di bawah ini, saya : N a m a N I M

: Agus Pariawan : 141011010

Menyatakan dengan sebenarnya bahwa skripsi yang berjudul : PENGARUH INTENSITAS CAHAYA TERHADAP KANDUNGAN KAROTENOID Chlorella sp. adalah benar hasil karya saya sendiri. Hal-hal yang bukan karya saya dalam skripsi tersebut diberi tanda citasi dan ditunjukkan dalam daftar pustaka. Apabila dikemudian hari terbukti pernyataan saya tidak benar, maka saya bersedia menerima sanksi akademik yang berlaku di Universitas Airlangga, termasuk berupa pencabutan gelar kesarjanaan yang telah saya peroleh. Demikian surat pernyataan yang saya buat ini tanpa ada unsur paksaan dari siapapun dan dipergunakan sebagaimana mestinya. Surabaya, 20 Juli 2014 Yang membuat pernyataan, Materei Rp. 6.000,-

Agus Pariawan ---------------------NIM.141011010

Skripsi


AGUS PARIAWAN


RINGKASAN AGUS PARIAWAN. Pengaruh Intensitas Cahaya terhadap Kandungan Karotenoid Chlorella sp. Dosen Pembimbing: Sudarno, Ir., M.Kes. dan Rahayu Kusdarwati, Ir., M.Si.

Karotenoid adalah pigmen tumbuhan yang terdiri dari 40 atom karbon per molekul (Tetraterpenoid). Karotenoid berfungsi untuk memberi warna pada ikan dan juga bermanfaat bagi kesehatan manusia. Chlorella sp. didominasi oleh warna hijau (chlorophyll), selain itu Chlorella sp. juga mengandung karotenoid lutein. Intensitas cahaya mampu meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY). Dengan meningkatnya level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) maka phytoene yang merupakan penyusun karotenoid juga meningkat. Meningkatnya phytoene dapat mempengaruhi menyebakan

meningkatnya naiknya

produk

karotenoid

yang

fotosintesis.

disintesis.

Cahaya

dapat

Cahaya

dapat

menyebakan

meningkatkan ATP yang dihasilkan pada fotosintesis, sehingga mempercepat metabolisme sel. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh intensitas cahaya yang berbeda terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. serta untuk mengetahui intensitas cahaya yang mampu menghasilkan karotenoid paling tinggi. Penelitian ini menggunakan metode eksperimen (percobaan) dengan rancangan acak lengkap. Terdapat empat perlakuan pencahayaan (A=500 lux, B=3.700 lux, C=7.400 lux dan D=11.700 lux) dan 5 ulangan sehingga terdapat 20 satuan percobaan. Hasil penelitian menunjukan bahwa kandungan karotenoid tertinggi terdapat pada perlakuan C (0,298080 µg/ml), disusul perlakuan B (0,255392 µg/ml) kemudian perlakuan D (0,220056 µg/ml). Kandungan karotenoid terendah terdapat pada perlakuan A (0,207552 µg/ml). Hasil analysis of variance (ANOVA) menunjukkan bahwa setiap perlakuan intensitas cahaya memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. (p<0,05).

SUMMARY iv Skripsi


AGUS PARIAWAN


AGUS PARIAWAN. Effect of Light Intensity on the Carotenoid Content of Chlorella sp. Advisor: Sudarno, Ir., M.Kes. and Rahayu Kusdarwati, Ir., M.Si.

Carotenoids are plant pigments which consists of 40 carbon atoms per molecule (Tetraterpenoid). Carotenoids function are for pigmentation of fishes, furthermore it also beneficial to human health. Chlorella sp. dominated by green pigment (chlorophyll), but its so had carotenoid lutein. Light intensity increase of carotenoid hydroxylase mRNA levels (CH) and phytoene synthase (PSY). Increased of mRNA levels of carotenoid hydroxylase (CH) and phytoene synthase (PSY) simultaneous increased of phytoene. The inclined of phytoene stimulate carotenoid synthesized. High light intensity stimulate increase of photosynthesis product. Hight light intensity stimulate increase of Adenosin Triphospat (ATP), so it increased of metabolism rate. The purpose of this study was to determine the effect of different light intensities on the carotenoid content of Chlorella sp. and to determine light intensity is capable of producing the highest carotenoid. This study used an experimental method with a completely randomized design. There are four light treatments (A = 500 lux, B = 3700 lux, C = 7400 lux and D = 11700 lux) and five replications so that there are 20 experimental units. The results showed that the highest carotenoid content found in treatment C (0.298080 g/ml), followed by treatment B (0.255392 g/ml) and than treatment D (0.220056 g/ml). Lowest carotenoid content contained on treatment A (0.207552 g/ml). Results of analysis of variance (ANOVA) showed that the light intensity of each treatment were significantly different effect on carotenoid content of Chlorella sp. (P <0.05).

v

Skripsi


AGUS PARIAWAN


KATA PENGANTAR

Segala Puji dan Syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Pengasih dan Penyayang, oleh karena rahmat-Nya penulis telah menyelesaikan penulisan skripsi ini. Penulis menyadari bahwa penulisan ini tidak terlepas dari dukungan moril dan materil dari semua pihak. Melalui kesempatan ini, dengan kerendahan hati, perkenankan penulis menghaturkan terima kasih yang sebesarbesarnya kepada : 1. Dosen Pembimbing, Bapak Sudarno, Ir., M.Kes dan Ibu Rahayu Kusdarwati, Ir., M.Si, yang telah memberikan saran dan nasehat yang berguna bagi penulis selama penyusunan skripsi ini. 2. Dosen penguji, Bapak Moch. Amin Alamsjah, Ir., M.Si., Ph.D, Ibu Dr. Endang Dewi Masithah, Ir., MP. dan Bapak Sapto Andriyono, S.Pi., M.T., yang telah memberi banyak masukan demi kesempurnaan skripsi ini. 3. Dekan Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga, Ibu Prof. Dr. Hj. Sri Subekti, drh., DEA. 4. Ibunda dan Ayahanda tercinta, Ngadiso dan Partik yang senantiasa memberikan semangat dan dukungan do’a selama penyusunan skripsi ini. 5. Teman-teman angkatan 2010 yang senantiasa memberi semangat dan dukungan penulis untuk menyelesaikan penyusunan skripsi ini. 6. Teman-teman SKI BEM FPK UA, teman-teman PPSDMS, kawan-kawan kontrakan Umar dan BEM FPK UA 2013 yang telah memberikan semangat.

vi Skripsi


AGUS PARIAWAN


7. Teman-teman yang dengan sukarela meminjamkan laptopnya untuk penulisan skripsi ini. 8. Semua pihak yang telah membantu dalam pelaksanaan penelitian dan penyelesaian skripsi ini. Semoga Allah Yang Maha Pengasih dan Penyayang melimpahkan berkahNya, atas segala bantuan dan kebaikan yang telah diberikan oleh semua pihak kepada penulis

Surabaya, Juli 2014

Penulis

vii Skripsi


AGUS PARIAWAN


DAFTAR ISI

Halaman RINGKASAN .................................................................................................. iv SUMMARY ..................................................................................................... v KATA PENGANTAR ....................................................................................... vi DAFTAR ISI .................................................................................................... viii DAFTAR TABEL............................................................................................. x DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xi DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xii I. PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ................................................................................... 1 1.2 Perumusan Masalah ........................................................................... 3 1.3 Tujuan ................................................................................................. 4 1.4 Manfaat .............................................................................................. 4 II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Klasifikasi Chlorella sp....................................................................... 5 2.2 Struktur dan morfologi Chlorella sp. .................................................. 6 2.3 Habitat ................................................................................................. 7 2.4 Pertumbuhan Chlorella sp................................................................... 8 2.5 Media Kultur ....................................................................................... 10 2.6 Intensitas Cahaya ................................................................................ 11 2.7 Karotenoid ........................................................................................... 13 2.8 Faktor-faktor Pembentuk Karotenoid ................................................. 16 III KERANGKA KONSEP 3.1 Kerangka Konseptual ......................................................................... 20 3.2 Hipotesis............................................................................................. 23

viii Skripsi


AGUS PARIAWAN


IV METODOLOGI 4.1 Tempat dan Waktu .............................................................................. 24 4.2 Materi Penelitian 4.2.1 Peralatan Penelitian ................................................................... 24 4.2.2 Bahan Penelitian ........................................................................ 24 4.3 Metode Penelitian 4.3.1 Rancangan Penelitian ................................................................ 25 4.3.2 Prosedur Kerja ........................................................................... 26 4.3.3 Parameter ................................................................................... 31 4.3.4 Analisa Data ............................................................................... 31 V HASIL DAN PEMBAHASAN 5.1 Hasil .................................................................................................... 32 5.1.1 Kandungan Karotenoid ............................................................. 32 5.1.2 Populasi Chlorella sp. ............................................................... 34 5.1.3 Analisis Korelasi Eksponensial Kandungan Karotenoid dengan Kepadatan populasi Chlorella sp. ............................................. 36 5.1.4 Kualitas Air ............................................................................... 36 5.2 Pembahasan ......................................................................................... 37 VI SIMPULAN DAN SARAN 6.1 Kesimpulan ......................................................................................... 46 6.2 Saran .................................................................................................... 46 DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 47 LAMPIRAN ..................................................................................................... 51

ix Skripsi


AGUS PARIAWAN


DAFTAR TABEL

Tabel

Halaman

2.1 Kandungan Walne ...................................................................................... 11 5.1 Hasil rata-rata kandungan karotenoid Chlorella sp.................................... 32 5.2 Hasil rata-rata kepadatan populasi Chlorella sp. ....................................... 35 5.3 Kisaran nilai kualitas air............................................................................. 37

x Skripsi


AGUS PARIAWAN


DAFTAR GAMBAR

Gambar

Halaman

2.1. Chlorella sp. .............................................................................................. 5 2.2 Intensitas cahaya (Illuminance)................................................................. 12 2.3 Steradian dan solid angel .......................................................................... 12 .......................................................................................................................... 2.4. Struktur beberapa karotenoid .................................................................... 14 3.1. Kerangka konseptual penelitian ................................................................ 22 4.1. Denah penempatan perlakuan ................................................................... 25 .......................................................................................................................... 4.2. Diagram alir penelitian .............................................................................. 26 5.1 Grafik kandungan karotenoid Chlorella sp. .............................................. 33 5.2 Grafik pertumbuhan Chlorella sp.. ........................................................... 35 5.3

Analisis korelasi eksponensial kandungan karotenoid dengan kepadatan populasi Chlorella sp.. .............................................................................. 36

5.4 Pengaruh suhu terhadap rekasi enzim ....................................................... 43

Skripsi


AGUS PARIAWAN


DAFTAR LAMPIRAN xi Lampiran

Halaman

1. Kandungan karotenoid Chlorella sp. (µg/ml). ............................................. 51 2. Kepadatan populasi Chlorella sp. (per unit percobaan) ............................... 52 3. Kisaran suhu per hari, kisaran salinitas per hari dan kisaran pH per hari ............................................................................... 53 4. SPSS kandungan karotenoid ........................................................................ 54 5. SPSS kepadatan populasi Chlorella sp. selama 6 hari ................................. 57 6. Gambar kegiatan penelitian ......................................................................... 63

xii Skripsi


AGUS PARIAWAN


I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Karotenoid adalah pigmen tumbuhan yang terdiri dari 40 atom karbon per molekul (Tetraterpenoid) (Britton et al, 2008 dalam Biolab Medical Unit, 2010). Lebih dari 750 struktur karotenoid ditemukan di alam yaitu pada tumbuhan darat, algae, bakteri termasuk cyanobacteria dan bakteri fotosintesis, archaea, jamur dan hewan (Britton et al., 2004 dalam Takaichi, 2011). Karotenoid berfungsi untuk memberi warna pada kulit ikan (Britton, 1976 dalam Siegler, 1998). Pewarnaan sangat penting bagi hewan akuakultur seperti pewarnaan merah dan kuning pada ikan, pewarnaan pada daging ikan salmon, pada eksoskeleton dan otot epitelium udang maupun lobster serta pada karapas krustacea lain (Sigurgisladottir et al.,1997 dalam Bjerkeng, 2000). Pewarnaan akan meningkatkan nilai ekonomis ikan di pasar. Karotenoid juga bermanfaat bagi kesehatan manusia. Karotenoid mampu meningkatkan respon imun serta mampu mereduksi resiko kanker, penyakit jantung dan katarak (Amstrog, 1997 dalam Rodriguez-Amaya and Kimura, 2004). Terdapat dua macam karotenoid yang digunakan dalam budidaya perairan yaitu sintetik dan alami. Turunan karotenoid alami diantaranya zeaxanthin, lutein, α-caroten, β-caroten, cryptoxanthin dan lain-lain, sedangkan untuk karoten sintetik hanya ada β-caroten. Selama proses pembuatan karoten sintetis digunakan pelarut petrokimia dan pelarut organik komplek lainnya, yang mana ini menyebabkan residu pada ikan. Karotenoid sintetik juga sangat mahal dan

Skripsi


AGUS PARIAWAN


2 penggunaannya dalam formula pakan ikan sangat terbatas sesuai dengan spesies masing-masing. (Gupta et al., 2007). Chlorella sp. merupakan produsen dalam rantai makanan makhluk hidup yang kaya gizi (Merizawati, 2008). Chlorella sp. adalah organisme kosmopolit. Alga ini mampu tumbuh pada salinitas 0 – 35 ppt. Chlorella sp. masih dapat bertahan hidup pada suhu 40oC. Rentang suhu antara 25o-30oC merupakan suhu yang optimal untuk pertumbuhan (Alim dan Kurniastuty, 1995 dalam Merizawati, 2008). Chlorela sp. dengan sifatnya yang seperti di atas sangat cocok untuk dikembangan di Indonesia. Chlorella sp. didominasi oleh warna hijau (chlorophyll), selain itu Chlorella sp. juga mengandung karotenoid lutein (Shi et al., 2002 dalam Geetha et al., 2010). Dalam proses fotosintesis, karotenoid dan klorofil dibutuhkan oleh rantai peptida untuk membentuk pigmen protein komplek pada membran tilakoid (Neilson and Durnford, 2010 dalam Takaichi, 2011).

Karotenogenesis pada

Haematococcus pluvialis diinduksi dengan penambahan NaCl (0,2 dan 0,8 %), perlakuan intensitas cahaya yang tinggi (150 µmol/m2/s atau 11.700 lux) dan pengurangan nitrogen (Cifuentes et al., 2003). Pada kondisi lingkungan yang memicu stres (intensitas cahaya yang tinggi, radiasi UV dan kurangnya nutrisi), beberapa

Chlorophyceae

(Heamatococcus,

Chlorella

dan

Scenedesmus)

mengakumulasi ketokarotenoid, canthaxanthin dan astaxanthin. Karotenogenesis ini disintesis oleh kombinasi β-carotene hydroxylase gene (CrtR-b) dan β-karoten ketolase (CtrW, BKT) (Lemione and Schoefs, 2010 dalam Takaichi, 2011).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


3 Enzim yang berpengaruh dalam biosintesis karotenoid yaitu phytoene synthase (PSY), phytoene desaturase (PDS), ζ-carotene desaturase (ZDS), lycopene cyclase (LCYB), β-carotene ketolase dan carotenoid hydroxylase (CH) (Cunningham and Gantt, 1998 dalam Steinbrenner and Linden, 2001). Intensitas cahaya mampu meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) (Steinbrenner and Linden, 2001). Dengan meningkatnya level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) maka phytoene yang merupakan penyusun karotenoid juga meningkat. Meningkatnya phytoene dapat mempengaruhi meningkatnya karotenoid yang disintesis. Cahaya dapat menyebabkan naiknya produk fotosintesis Wveatherly, 1962 dalam Servaites and Geiger, 1974).

(Peel and

Cahaya dapat

menyebabkan meningkatkan Adenosine Triphosphate (ATP) yang dihasilkan pada fotosintesis (Plaut and Reinhold, 1969 dalam Servaites and Geiger, 1974).

Berdasarkan latar belakang tersebut, perlu dilakukan penelitian tentang pengaruh intensitas cahaya terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp.

1.2

Perumusan Masalah 1. Apakah intensitas cahaya yang berbeda, berpengaruh terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp.? 2. Berapakah intensitas cahaya yang mampu menghasilkan karotenoid paling tinggi?

Skripsi


AGUS PARIAWAN


4 1.3 Tujuan

Penelitian ini bertujuan untuk

1. Mengetahui pengaruh intensitas cahaya yang berbeda terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. 2. Mengetahui intensitas cahaya yang mampu menghasilkan karotenoid paling tinggi.

1.4 Manfaat Adapun manfaat dari penelitian ini adalah dapat memberikan informasi tentang pengaruh intensitas cahaya yang berbeda terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. serta nilai intensitas cahaya yang mampu menghasilkan karotenoid paling tinggi. Informasi ini nantinya bisa digunakan oleh masyarakat luas pada umumnya dan khususnya sektor privat untuk pedoman budidaya Chlorella sp. sebagai produsen karotenoid. Diharapkan hasil penelitian ini dapat dikembangkan lebih lanjut.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Klasifikasi Chlorella sp. Menurut Bougis (1979) dalam Merizawati (2008) Chlorella sp. termasuk dalam : Filum Kelas Ordo Famili Genus Spesies

: Chlorophyta : Chlorophyceae : Chlorococcales : Chlorellaceae : Chlorella : Chlorella sp.

Gambar 2.1. Chlorella sp. (Sumber: http://ccala.butbn.cas.cz, diakses Desember 2013)

Alga hijau atau Chlorophyta, merupakan yang terbesar diantara semua filum alga. Mereka digolongkan sebagai alga hijau karena warna hijau yang merupakan gabungan pigmen klorofil a dan b, karoten (α, β dan γ) dan beberapa xantophylls (Goodwin, 1974 dalam Happey-Wood, 1988). Diantara semua alga, Chlorophyta adalah yang paling dekat hubungannya dengan tanaman tingkat tinggi. Hal ini berdasarkan kemiripannya dalam pigmen fotosintesis, penyimpanan tepung dan struktur organel kloroplas (adanya tumpukan lamella fotosintesis seperti grana dan zona intergrana) (Bisulputra, 1974 dalam Happey-Wood, 1988).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


6 2.2 Struktur dan morfologi Chlorella sp. Chlorella sp. adalah salah satu jenis mikroalga yang mengandung klorofil serta pigmen lainnya untuk melakukan fotosintesis. Kata Chlorella berasal dari bahasa latin yaitu ”Chloros” yang berarti hijau dan ”ella” yang berarti kecil. Chlorella sp. merupakan pakan dasar biota yang ada di perairan termasuk ikan. Chlorella sp. merupakan produsen dalam rantai makanan makhluk hidup yang kaya akan gizi. Bentuk sel Chlorella sp. bulat atau bulat telur, merupakan alga bersel tunggal (uniseluler) dan kadang - kadang bergerombol (Merizawati, 2008). Warna hijau pada alga ini disebabkan selnya mengandung klorofil a dan b dalam jumlah yang besar selain itu juga mengandung karoten dan xantofil (Volesky, 1970 dalam Rostini, 2007). Diameter sel Chlorella sp. berkisar antara 2−8 mikron. Dinding selnya keras terdiri dari selulosa dan pektin. Sel ini mempunyai protoplasma yang berbentuk cawan. Chlorella sp. dapat bergerak (motil) tetapi sangat lambat sehingga pada pengamatan seakan-akan tidak bergerak (non motil) (Merizawati, 2008). Kelimpahan

fitoplankton

didefinisikan

sebagai

jumlah

individu

fitoplankton persatuan volume. Fitoplankton merupakan tumbuhan yang paling banyak ditemukan di perairan, tetapi karena ukurannya mikroskopis sehingga sulit dilihat tanpa alat bantu penglihatan. Konsentrasinya bisa mencapai ribuan hingga jutaan sel per liter air. Jumlah individu fitoplankton berlimpah pada lokasi tertentu, sedangkan pada lokasi lain di perairan yang sama jumlahnya sedikit (Merizawati, 2008). Distribusi fitoplankton di perairan yang tidak

Skripsi


AGUS PARIAWAN


7 homogen ini disebabkan oleh arus, unsur hara, dan aktifitas pemangsaan (Merizawati, 2008). Absorbansi Chlorella sp. diukur menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang ultraviolet dan cahaya tampak. Dari hasil pengukuran diperoleh bahwa Chlorella sp. memiliki nilai absorbansi yang tinggi untuk panjang gelombang 687 nanometer dan 490 nanometer (Merizawati, 2008).

2.3 Habitat Chlorella sp. dapat tumbuh di semua tempat (kosmopolit), kecuali pada tempat yang sangat kritis bagi kehidupan. Alga ini mampu tumbuh pada salinitas 0-35

ppt.

Salinitas

10-20

ppt

merupakan

salinitas

optimum

untuk pertumbuhannya. Chlorella sp. masih dapat bertahan hidup pada suhu 40oC. Rentang

suhu antara 25o–30oC merupakan suhu yang optimal untuk

pertumbuhan. Chlorella sp. bereproduksi secara aseksual dengan pembelahan sel dan pemisahan autospora dari sel induknya (Alim dan Kurniastuty, 1995 dalam Merizawati, 2008). Kebanyakan spesies Chlorella mampu tumbuh menggunakan fotosintetik atau pada kondisi dimana tidak terdapat cahaya dengan mengambil bahan organik secara langsung dari mediumnya. Selain itu, beberapa spesies Chlorella dapat tumbuh baik pada air tawar maupun air laut (Hoff and Snell, 1989 dalam Shah et al., 2003). Chlorella secara umum merupakan genus air tawar, namun beberapa spesies mampu beradaptasi pada suhu dan salinitas dengan rentang yang lebar serta dapat dikultur pada air laut yang diperkaya dengan pupuk (Wilkerson, 1998 dalam Shah et al., 2003).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


8

Ordo chlorococcales kurang memiliki daya mengapung dan tidak memiliki flagella sehingga membuatnya tidak dapat bergerak secara aktif. Oleh karena itu Chlorococcales tergantung pada turbulensi air yang mempertahankannya tetap tersuspensi. Pada saat stratifikasi suhu stabil, sel atau koloni cenderung mengendap. Ketika rata-rata pertumbuhan sel yang bertahan pada zona eupotik lebih besar daripada rata-rata populasi yang hilang karena pengendapan, maka kondisi itu disebut dengan pertumbuhan yang ditunjukan oleh kenaikan populasi fitoplankton. Pertumbuhan pada alga tergantung pada perubahan yang seimbang antara fotosintesis (terwujud dengan peningkatan sel) dan proses metabolisme (respirasi dan sedimentasi pada populasi) (Happey-Wood, 1988). Penyebaran populasi tergantung pada turbulensi air pada zona epilimnion. Bantuk sel dan keberadaan getah (perekat cair) akan cenderung mengurangi hilangnya populasi karena sedimentasi (Happey-Wood, 1988).

2.4 Pertumbuhan Chlorella sp. Pertumbuhan fitoplankton dalam kultur dapat ditandai dengan bertambah besarnya ukuran sel atau bertambah banyaknya jumlah sel yang secara langsung akan berpengaruh terhadap kepadatan fitoplankton (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Pada awal kultur, sel beradaptasi dengan medium baru, bersiap untuk mulai tumbuh dan bersiap memulai pembelahan sel. Fase ini disebut lag fase, yang lamanya tergantung pada kepadatan inokulum, spesies alga. Sel alga kemudian membela dengan cepat sehingga populasinya meningkat secara logaritmik. Ini disebut fase pertumbuhan eksponensial. Fase eksponensial kemudian diikuti dengan fase stasioner. Pada fase stasioner pembelahan sel

Skripsi


AGUS PARIAWAN


9

menurun dan sudah tidak ada lagi penambahan kepadatan sel. Fase stasioner kemudian diikuti oleh fase senescent, yang mana kepadatan sel menurun (Creswell, 2010). Hal yang paling menarik dan paling penting untuk diperhatikan dalam ekologi fitoplankton air tawar yaitu antara pertumbuhan dan kematian terjadi secara serentak bersama-sama yang ditengahi (dibatasi) oleh pasokan nutrisi, pertukaran tropik dan pengadukan (mixing) faktor fisik pada sistem (Reynolds et al., 1982 dalam Sandgren, 1988). Sandgren (1988) menyatakan bahwa kebanyakan fitoplankton air tawar menggabungkan diri menjadi fase istirahat untuk bertahan sebagai strategi hidupnya. Beberapa percobaannya menyebutkan “Packaging Plans” merupakan solusi revolusioner atas masalahnya terhadap kondisi stress dan habitat planktonik yang berubah secara berkala (Sandgren, 1988). Alga nonmotil mampu mengalami pertumbuhan jika kondisi cahaya dan turbulensi air dalam kondisi seimbang yang menyebabkan peningkatan kepadatan populasi lebih tinggi daripada proses kematian atau sedimendasi (Happey-Wood, 1988). Sze (1993) menyatakan bahwa pertumbuhan populasi fitoplakton tergantung pada selisih antara sel baru yang dihasilkan dengan rata-rata sel yang mati. Sel baru yang diproduksi, sebagian besar tergantung pada cahaya dan ketersediaan nutrisi. Sutomo (2005), menyatakan bahwa pola pertumbuhan Chlorella sp. memiliki karakteristik yang sama dengan Chaetoceros gracilis dan Tetraselmis sp.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


10

Chlorella sp. mempunyai daya adaptasi yang cukup cepat dan juga mempunyai pola pertumbuhan dengan dua puncak populasi. Secara umum pertumbuhan mikroalga akan menurun setelah mencapai puncak I dan kemudian naik kembali sampai mencapai puncak II. Pertumbuhan mikroalga akan turun kembali setelah mencapai puncak II. Puncak kepadatan Chlorella sp. umumnya dicapai relatif lambat yaitu pada hari ke 9 atau lebih, kecuali hasil penelitihan Sutomo tahun 1990 pada percobaan ke 2 yang dicapai pada hari ke 5. Pencapaian puncak kepadatan yang lebih cepat ini disebabkan karena kepadatan awal pelakuan yang lebih tinggi. Volume air media pemeliharaan berpengaruh terhadap puncak kepadatan maksimal sel Chlorella sp. Volume air yang lebih besar akan menghasilkan kepadatan sel maksimal yang lebih rendah dan sebaliknya (Sutomo, 2005).

2.5 Media Kultur Air laut merupakan medium komplek yang terdiri beragam senyawa organik. Mengkultur alga hanya dengan menggunakan air laut kadang-kadang bisa juga dilakukan. Penambahan medium artifisial untuk optimalisasi hasil budidaya menjadi penting karena tanpa penambahan beberapa nutrisi dan trace metal, hasil budidaya biasanya sangat rendah (Harrison and Berges, 2004). Tetelepta (2011) menggunakan medium Walne untuk mengkultur Chlorella sp. Medium Walne terdiri dari beragam senyawa (Tabel 2.1.). Menurut Fulks and Main (1991) dalam Shah et al. (2003), tipe kultur dapat dibagi menjadi dua yaitu indoor / kultur terkontrol dan outdoor / kultur terbuka. Terdapat perbedaan pendekatan dalam kultur mikroalga yaitu batch

Skripsi


AGUS PARIAWAN


11

culture, semi-continues culture dan continues culture. Batch culture merupakan metode yang paling konsisten dan dapat diandalkan. Pada metode batch culture, mikroalga dikultur pada sebuah wadah dan semuanya dipanen keseluruhan ketika populasinya hampir mencapi kepadatan maksimal.

Tabel 2.1. Kandungan Walne Stok Trace metal Solution (TMS)

Bahan ZnCl2 CoCl2.6H2O (NH4)6Mo7O24.4H2O CuSO2.5H2O

Kebutuhan Kegunaan 2,1 g Per 100 ml 2g 0,9 g 2g

Vitamin Solution

Vitamin B12 Vitamin B1 (Thiamine.HCl) Vitamin H (Biotin)

10 mg 10 mg 200 µg

Per 100 ml

Nutrient Solution

FeCl3.6H2O MnCl2.4H2O H3BO3 EDTA (DisodiumSalt) NaH2PO4.2H2O NaNO3 TMS

1,3 g 0,36g 33,6 g 45 g 20 g 100 g 1 ml

Per Liter

Sumber : Walne (1970)

2.6 Intensitas Cahaya Intensitas cahaya atau illuminance adalah sebuah ukuran fotometri flux per unit area atau flux density yang terlihat. Illuminance atau intensitas cahaya dinyatakan dalam lux (lumen per meter persegi) atau foot-candel (lumen per foot kuadrat) (Ryer, 1998).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


12

Gambar 2.2. Intensitas cahaya (Illuminance) (Ryer, 1998).

Pada gambar diatas (Gambar 2.2.), bola lampu menghasilkan 1 kandela. Kandela adalah unit dasar pengukuran cahaya. Juga bisa didefinisikan 1 kandela sumber cahaya memancarkan 1 lumen per steradian ke segala arah. Steradian adalah sudut padat (solid angel) yang didapat dari inti bola yang memotong sebuah area persegi pada titik radiusnya. Nilai steradian pada sebuah sinar sama dengan proyeksi area dibagi kuadrat jarak (Ryer, 1998).

Gamber 2.3. Steradian dan solid angel (Ryer, 1998). Intensitas cahaya erat hubunganya dengan hukum kuadrat terbalik, yaitu hubungan antara intensitas cahaya dengan sumber cahaya dan jarak. Ini berarti

Skripsi


AGUS PARIAWAN


13

intensitas cahaya bervariasi tergantung jarak penampang dengan sumber cahaya (Ryer, 1998).

2.7 Karotenoid Karotenoid adalah pigmen tanaman dengan 40 atom karbon per molekul (tetraterpenoids) (Britton et al. 2008 dalam Biolab Medical Unit, 2010). Karotenoid yang berikatan dengan oksigen dikenal dengan sebutan xanthophylls, sedangkan yang tidak berikatan dengan oksigen dikenal dengan karoten. Pada tumbuhan, karotenoid bertindak sebagai pigmen tambahan saat fotosintesis dan juga berfungsi untuk melindungi dari radikal bebas yang dilepaskan dari chloroplast selama fotosintesis (Miller et al., 1996 dalam Biolab Medical Unit, 2010). Karotenoid juga melindungi tanaman dari foto-oksidatif perusak melalui disipasi suhu (siklus xanthophyll). Proses ini terjadi ketika eksesif cahaya meningkatkan pH tilakoid, yang mana aktivitas enzim violaxanthin de-epoxidase (VDE), mengkonversi violaxanthin menjadi zeaxanthin. Molekul zeaxanthin dan foton mengubah konformasi di light harvesting complexes (LHC), membantu disipasi suhu (Baroli and Nigoyi, 2000 dalam Stange and Flores, 2012 ). Karotenoid yang umumnya ditemukan pada alga coklat adalah β-karoten, yakni karotenoid yang tidak memiliki atom oksigen dalam strukturnya (Blunt dkk., 2006 dalam Biranti dkk., 2009). Golongan senyawa karoten sudah dikenal memiliki aktivitas antitumor yang baik (Clevidence dkk., 1997 dalam Biranti dkk., 2009). Pada proses fotosintesis, karotenoid dan klorofil keduanya dibutuhkan oleh rantai peptida untuk membentuk pigmen protein komplek pada membran tilakoid (Neilson and Durnford, 2010 dalam Takaichi, 2011).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


14

Lebih dari 750 struktur karotenoid ditemukan di alam yaitu pada tumbuhan darat, algae, bakteri termasuk cyanobacteria dan bakteri fotosintesis, archaea, jamur dan hewan (Britton et al., 2004 dalam Takaichi, 2011). Berbagai jenis karotenoid yang ditemukan dari spesies algae telah dipelajari. Struktur beberapa karotenoid penting dalam algae diilustrasikan pada Gambar 2.4.

Gambar 2.4. Struktur Beberapa Karotenoid (Takaichi, 2011)

Skripsi


AGUS PARIAWAN


15

Di antara struktur tersebut, sekitar 30 jenis mungkin memiliki fungsi dalam fotosintesis, dan lainnya berfungsi untuk akumulasi karotenoid atau karotenogenesis. Beberapa karotenoid hanya ditemukan di beberapa divisi atau kelas algae, karena itu, karotenoid dan klorofil juga dapat digunakan sebagai penanda kemotaksonomi (Rowan, 1989 dalam Takaichi, 2011). Karotenoid telah banyak ditemukan pada alga. Fucoxanthin ditemukan pada algae coklat dan diatom. 19'-acyloxyfucoxanthin ditemukan pada Haptophyta dan Dinophyta. Peridinin hanya ditemukan pada dinoflagellata. Alloxanthin, crocoxanthin dan monadoxanthin ditemukan pada Cryptophyta. Diadinoxanthin dan diatoxanthin ditemukan pada Heterokontophyta, Haptophyta, Dinophyta dan Euglenophyta (Takaichi, 2011). Karotenoid berfungsi untuk memberi warna pada kulit ikan (Britton, 1976 dalam Siegler, 1998). Pewarnaan sangat penting bagi hewan akuakultur seperti pewarnaan pada daging ikan salmon, eksoskeleton dan otot epitelium udang, lobster dan kaparas krustacea lain, integumen merah dan kuning pada ikan (Sigurgisladottir et al.,1997 dalam Bjerkeng, 2000). Karotenoid juga bermanfaat bagi kesehatan manusia. Karotenoid mampu meningkatkan respon imun dan mereduksi resiko kanker, penyakit jantung dan katarak (Amstrog, 1997 dalam Rodriguez-Amaya and Kimura, 2004). Pada kondisi lingkungan yang memicu stress (cahaya yang tinggi, radiasi UV dan kurangnya nutrisi), beberapa Chlorophyceae (Heamatococcus, Chlorella dan

Scenedesmus)

mengakumulasi

ketokarotenoid,

canthaxanthin

dan

astaxanthin. Karotenogenesis ini disintesis oleh kombinasi β-karoten hidroxilase

Skripsi


AGUS PARIAWAN


16

gene (CrtR-b) dan β-karoten ketolase (CtrW, BKT) (Lemione and Schoefs, 2010 dalam Takaichi, 2011). Enzim yang berpengaruh dalam biosintesis karotenoid yaitu phytoene synthase (PSY), phytoene desaturase (PDS), ζ-carotene desaturase (ZDS), lycopene cyclase (LCYB), β-carotene ketolase, dan carotenoid hydroxylase (CH) (Cunningham and Gantt, 1998 dalam Steinbrenner and Linden, 2001). Menurut Steinbrenner and Linden (2001), Intensitas cahya mampu meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY).

2.8 Faktor-faktor Pembentuk Karotenoid 2.8.1 Cahaya Pada proses fotosintesis, cahaya diserap oleh pigmen dan dikonversi menjadi energi kimia ATP dan NADPH, yang mana digunakan untuk mensintesis bahan organik dari karbondioksida. Cahaya yang digunakan untuk proses fotosintesis berada pada rentang spektrum elektromagnetik 400-700 nm, yang biasa disebut photosynthetically active radiation (PAR). Sebuah pigmen secara selektif mengabsorbsi panjang gelombang PAR tertentu. Pigmen utama pada semua alga adalah klorofil A, tetapi proses absorsinya juga dibantu oleh pigmen lain (pigmen asesoris). Pigmen asesoris mengabsorbsi panjang gelombang PAR yang berbeda dan mentransfer energi cahaya ke klorofil A. Pigmen fotosintetik berasosiasi dengan protein dalam membran tilakoid untuk membentuk light harvesting complexes. Masing-masing fotosistem terdiri dari ratusan pigmenprotein

komplek kemudian menyalurkan energi ke pusat reaksi (terdiri dari

klorofil A khusus berikatan dengan unit protein). Dua tipe fotosistem bekerja

Skripsi


AGUS PARIAWAN


17 bersama-sama untuk mereduksi NADP+ menjadi NADPH dan mengkonversi ADP menjadi ATP. Fotosistem I hanya terdiri dari klorofil a saja, sedangkan fotosistem II terdiri dari klorofil a dan pigmen asesoris. Alga dapat mengatur aliran elektron pada fotosistem I dan fotosistem II untuk merespon cahaya di lingkungan sekitarnya sehingga efisiensi fotosintesis tetap terjaga (Chow et al., 1990 dalam Sze, 1993). Cahaya yang dipancarkan oleh sinar matahari berfungsi dalam proses fotosintesis, tetapi hanya panjang gelombang tertentu yang dimanfaatkan untuk proses fotosintesis tersebut, masing-masing jenis cahaya berbeda pengaruhnya terhadap proses fotosintesis terkait dengan jenis pigmen penangkap cahaya. Semakin banyak cahaya yang diserap pada saat fotosintesis maka spektrum karotenoid semakin terlihat yaitu peningkatan dan penampakan warna jingga (Pamungkas dan Kurniady, 2006). Menurut Cifuentes et al. (2003), karotenogenesis paling baik pada H. pluvialis dipicu oleh intensitas cahaya yang tinggi. Hal ini hampir sama dengan hasil penelitian Harker et al. (1996b) dalam Cifuentes et al. (2003) yang menyatakan bahwa faktor utama yang paling penting pada karotenogenesis alga yaitu intensitas cahaya yang tinggi. Lebih spesifik Cifuentes et al. (2003) menyatakan bahwa intensitas cahaya terbaik untuk memicuh karotenogenesi H. pluvialis adalah 150 µmol/m2/s yang sebelumnya dikultur pada nitrat dengan intensitas 35 µmol/m2/s. Kandungan karotenoid meningkat dari 1,7 menjadi 4,88 mg/liter dan dari 10 menjadi 25 pg/sel ini sangat signifikan bila dibandingkan dengan perlakukan yang lain (salinitas dan pengurangan Nitrogen).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


18

Enzim yang berpengaruh dalam biosintesis karotenoid yaitu phytoene synthase (PSY), phytoene desaturase (PDS), ζ-carotene desaturase (ZDS), lycopene cyclase (LCYB), β-carotene ketolase, dan carotenoid hydroxylase (CH) (Cunningham and Gantt, 1998 dalam Steinbrenner and Linden, 2001). Intensitas cahya mampu meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) (Steinbrenner and Linden, 2001). Dengan meningkatnya level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) maka phytoene yang merupakan penyusun karoten juga meningkat. Meningkatnya phytoene dapat memempengaruhi meningkatnya karotenoid yang disintesis.

2.8.2 Salinitas

Penambahan NaCl dapat menyebabkan kematian (mortalitas 45%), tetapi pada sel yang hidup (survive) terjadi peningkatan warna merah. Kenaikan total karotenoid per sel dan kadar astaxantin per berat bersih terjadi ketika dikombinasi dengan intensitas cahaya tinggi ( 85 µmol/m2/s). Hal ini menunjukan bahwa NaCl merupakan faktor pemicu karotenogenik pada alga jenis H. pluvialis (Cifuentes et al., 2003). Harker et al. (1995) dalam Cifuentes et al. (2003) telah mempelajari keefektifan penambahan NaCl pada karotenogenesis H. pluvialis strain CCAP 34/7 dan menyatakan bahwa peningkatan astxanthin saat panen terjadi saat mereka mengkobinasikan kadar NaCl yang lebih rendah dengan intensitas cahaya yang sangat tinggi ( 1600-1700 µmol/m2/s). Menurut Sarada et al. (2002) dalam Cifuentes et al. (2003) menyatakan bahwa umur kultur sangat penting untuk

Skripsi


AGUS PARIAWAN


19

memicu produksi astaxanthin pada kultur yang distreskan dengan pemicu salinitas. Kultur yang lebih muda (umur dua sampai delapan hari) sangat sensitif terhadap penambahan NaCl, sedangkan kultur yang lebih tua ( umur 12-16 hari) resisten dan mengakumulasi lebih banyak astaxanthin ketika NaCl ditambahkan dengan sodium acetate dan setelah masa inkubasi panjang ( selama 20 hari). Pada penelitian yang dilakukan Cifuentes et al. (2003) menunjukan bahwa level karotenoid yang diakumulasi dengan perlakuan menggunakan salinitas lebih rendah bila dibandingkan dengan perlakuan yang lain.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


III KONSEPTUAL PENELITIAN DAN HIPOTESIS

3.1 Kerangka Konseptual Karotenoid berfungsi untuk memberi warna pada kulit ikan (Britton, 1976 dalam Siegler, 1998). Pewarnaan sangat penting bagi hewan akuakultur seperti pewarnaan merah dan kuning pada ikan, pewarnaan pada daging ikan salmon, pada eksoskeleton dan otot epitelium udang maupun lobster serta pada karapas krustacea lain (Sigurgisladottir et al.,1997 dalam Bjerkeng, 2000). Pewarnaan akan meningkatkan nilai ekonomis ikan di pasar. Karotenoid juga bermanfaat bagi kesehatan manusia. Karotenoid mampu meningkatkan

respon imun dan

mereduksi resiko kanker, penyakit jantung dan katarak (Amstrog, 1997 dalam Rodriguez-Amaya and Kimura, 2004). Ada banyak faktor yang mempengaruhi pembentukan karotenoid pada Haematococcus pluvialis yaitu dengan penambahan NaCl (0,2 and 0,8 %), pengurangan nitrogen dan intensitas cahaya yang tinggi (150 µmol/m 2/s atau 11.700 lux) (Cifuentes, 2003). Pada lingkungan yang tidak sesuai seperti cahaya yang tinggi, radiasi UV dan nutrisi yang tidak sesuai, beberapa Chlorophyceae, seperti Haematococcus, Chlorella dan Scenedosmus, mengakumulasi karotenoid, canthaxanthin dan astaxanthin, yang disintesis oleh kombinasi β-carotene hydroxylase gene (CrtR-b) dan β-karoten ketolase (CtrW, BKT) (Lemione and Schoefs, 2010 dalam Takaichi, 2011). Enzim yang berpengaruh dalam biosintesis karotenoid yaitu phytoene synthase (PSY), phytoene desaturase (PDS), ζ-carotene desaturase (ZDS), lycopene cyclase (LCYB), β-carotene ketolase, dan carotenoid hydroxylase (CH) (Cunningham and Gantt, 1998 dalam Steinbrenner and Linden,

Skripsi


AGUS PARIAWAN


21

2001). Menurut Steinbrenner and Linden (2001), Intensitas cahya mampu meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY). Cahaya dapat menyebakan naiknya produk fotosintesis (Peel and Wveatherly, 1962 dalam Servaites and Geiger, 1974). Cahaya dapat menyebakan meningkatkan ATP yang dihasilkan pada fotosintesis (Plaut and Reinhold, 1969 dalam Servaites and Geiger, 1974). Naiknya ATP akan memicuh semakin cepatnya laju metabolisme dan akan mempengaruhi metabolisme karotenoid dalam sel alga. Peri et al. (2009) menyatakan bahwa intensitas cahaya memiliki hubungan positif terhadap kecepatan fotosintetik dan konduksi stomata. Kecepatan fotosintetik menurun dengan menurunya intensitas cahaya, begitu pula sebaliknya. Berdasarkan referensi di atas, maka pada penelitian ini kami mencoba mengkultur Chlorella sp. yang diberi perlakuan dengan intensitas cahaya yang berbeda untuk mengetahui pengaruhnya terhadap kandungan karotenoid pada Chlorella sp. Parameter kualiatas air, seperti salinitas dan pH di diseragamkan sebelum proses kultur. Chlorella sp. dibudidayakan pada medium Walne cair dan diamati pertumbuhan populasinya setiap hari. Setelah panen algae dilakukan ekstraksi dilanjutkan dengan pengamatan kandungan karotenoid. Dari pengamatan tersebut akan didapat data kandungan karotenoid Chlorella sp.yang kemudian dapat dianalisis dan disimpulkan hasilnya.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


22

Diperoleh dengan

Karotenoid

Bermanfaat bagi Kesehatan

Sintetis Alami

Antioksidan Sumber

Antikanker

karotenogenesis

Buah

Rodhophyta

Dunaliela

Alga

Sayuran

Chlorophyta

NaCl

N

Intensitas Cahaya

Chlorella Kultur Chlorella

Nutrisi

cahaya

suhu

pH

Intensitas Cahaya

Meningkatkan kecepatan fotosintesis ATP Proses metabolisme

Meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY).

Phytoene meningkat

Produksi Karotenoid meningkat Gambar 3.1. Kerangka konseptual penelitian

Skripsi


AGUS PARIAWAN


23

3.2 Hipotesis H1

:Intensitas cahaya yang berbeda, akan memberikan pengaruh terhadap

kandungan karotenoid Chlorella sp. H1

Skripsi

: Intensitas cahaya tertentu mampu menghasilkan karotenoid paling tinggi.


AGUS PARIAWAN


IV METODOLOGI

4.1 Tempat dan Waktu Kegiatan penelitian ini telah dilakukan di Laboratorium Basah dan Laboratorium Kering Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga Surabaya pada bulan Mei-Juni 2014.

4.2 Materi Penelitian 4.2.1 Peralatan Penelitian Alat-alat yang digunakan antara lain: tabung kaca, selang aerator, aerator, Erlenmeyer, gelas ukur, neraca digital dengan ketelitian 0,1 gram, pipet, mikroskop

binokuler,

haemacytometer,

spektrofotometer,

lampu

TL,

refraktometer, kertas pH , lux meter, autoclave, rak, papan penyekat, hand counter, kabel, cover glass, terminal listrik, steker listrik, gunting, tabung reaksi dan sentrifus. 4.2.2 Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah inokulan Chlorella berasal dari koleksi Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau (BBPBAP) Jepara, medium Walne, air laut, steryofoam, benang, lakban, plastik gelap, koran/kertas bungkus ( pembungkus saat proses autoclave), metanol, dietil eter, KOH (Kalium Hidroksida), alkohol, sabun, tisu dan aquades.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


25

4.3 Metode Penelitian 4.3.1 Rancangan Penelitian Metode penelitian digunakan untuk memecahkan suatu masalah yang dapat dilakukan dengan pengumpulan data melalui pengamatan, survei, ataupun melalui percobaan (Kusriningrum, 2008). Penelitian ini menggunakan metode eksperimen (percobaan) dengan rancangan acak lengkap. Terdapat empat perlakuan pencahayaan (500, 3.700, 7.400 dan 11.700 lux) dan 5 ulangan sehingga terdapat 20 satuan percobaan. Terdapat beberapa variabel dalam penelitian ini diantaranya: Variabel bebas

: intensitas cahaya yang berbeda

Variabel terikat : Kandungan karotenoid Chlorella sp. Variabel kontrol : nutrisi, pH, salinitas dan aerasi. Denah penempatan perlakuan pada penelitian dibawah ini adalah sebagai berikut: Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D

: 500 lux ( Myers, 1944) : 3.700 lux (Myers, 1944) : 7.400 lux ( Cifuentes, 2003) : 11.700 lux (Cifuentes, 2003)

A (500 lux) B (3.700 lux) C (7.400 lux) D (11.700 lux)

A2

A4

A1

A3

A5

B3

B5

B2

B4

B1

C4

C1

C3

C5

C2

D2

D1

D4

D5

D3

Gambar 4.1. Denah Penempatan Perlakuan

Skripsi


AGUS PARIAWAN


26

Persiapan kultur alga Sterilisasi peralatan dan bahan Chlorella sp. diinokulasikan pada media dengan intensitas cahaya berbeda

A

B

C

D

Perhitungan pertumbuhan alga (menghitung jumlah sel) Pencatatan hasil jumlah sel

Panen dan analisa kandungan karotenoid Analisa Data Gambar 4.2. Diagram Alir Penelitian

4.3.2 Prosedur Kerja A. Persiapan Medium kultur yang digunakan adalah medium Walne yang diperoleh dari Balai Besar Pengembangan Budidaya Air Payau (BBPBAP) Jepara. Terdapat 20 satuan percobaan sehingga dibutuhkan 20 tabung kaca. Setiap tabung kaca diisi 500 ml medium cair (0,5 ml Walne solution dan 499,5 ml air laut steril). Perlakuan pencahayaan diperoleh dengan lampu TL yang penempatannya diatur pada ruang kultur. Intensitas cahaya dipengaruhi oleh jarak lampu dengan tabung kultur. Penentuan jarak ini dilakukan dengan bantuan lux meter. Sensor

Skripsi


AGUS PARIAWAN


27

lux meter dimasukkan ke dalam tabung dan jarak antara tabung dengan sumber lampu diatur sehingga didapat intensitas yang diharapkan sesuai perlakuan. Posisi tabung diberi tanda sehingga kedudukannya terhadap sumber cahaya tidak berubah. Tanda diberikan di bagian alas tempat tabung kultur. Ruang kultur dipersiapkan dengan membuat sekat dan penutup. Kerangka kotak tempat kultur terbuat dari kayu, bagian atap dan alasnya terbuat dari kayu triplek dan sisi-sisinya terbuat dari bahan steryofoam kecuali bagian pintu yang terbuat dari plastik gelap (trash bag) supaya fleksibel untuk membuka dan menutup. B. Sterilisasi Peralatan dan Bahan Sterilisasi didefinisikan sebagai sebuah proses untuk menjamin semua kehidupan mikroba tidak aktif. Steril merupakan suatu syarat yang harus diperhatikan dan dipenuhi dalam budidaya alga. Kondisi ini dapat dicapai melalui desinfektan volatile (mudah menguap) dan non volatile, metode uap yaitu dengan menggunakan autoclave dan metode pemanasan udara dengan oven atau mesin pengering (Masithah dkk., 2012). Sterilisasi dilakukan untuk membunuh kontaminan yang dapat menggangu pertumbuhan Chlorella sp. Sterilisasi dalam kultur Chlorella sp. skala laboratorium terdiri atas sterilisasi ruang, peralatan dan bahan penelitian. Beberapa peralatan yang perlu disterilkan diantaranya adalah tabung kaca, selang aerasi, batu aerasi dan pipet. Bahan yang perlu disterilisasi yaitu medium air laut dan medium Walne.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


28

Sterilisasi ruangan diawali dengan membersihkan ruang kultur lalu dilakukan penyemprotkan alkohol 70% beberapa kali sampai merata. Ruang kultur ditutup rapat dan lampu tetap dinyalakan unyuk menjaga kesterilan ruangan. Sterilisasi peralatan diawali dengan pencucian menggunakan detergen dan air hingga bersih kemudian di dikeringkan. Peralatan kemudian dibungkus dengan kertas, pada bagian mulut pipet ditutup dengan menggunakan kapas yang dibungkus dengan gauze (kain kasa). Peralatan kemudian disetrilisasi dengan autoclave pada suhu 121oC dengan tekanan 1 kg/cm2 selama 15 menit. Sebelum digunakan peralatan perlu dikeringkan terlebih dahulu. Sterilisasi medium dilakukan dengan memasukan medium ke dalam Erlemeyer atau tabung kaca yang steril kemudian Erlemeyer atau tabung kaca ditutup dengan menggunakan kapas dan gauze. Kapas dan gauze pada Erlemeyer atau tabung kaca dibungkus dengan aluminium foil. Erlemeyer atau tabung kaca yang berisi medium disetrilisasi dengan autoclave pada suhu 121oC dengan tekanan 1 kg/cm2 selama 15 menit.

C. Inokulasi Chlorella sp. selanjutnya dikultur dalam wadah kultur berupa tabung kaca 800 ml. Kepadatan inokulum yang diujikan dalam penelitian ini adalah 100.000 sel/mL. Kondisi lingkungan diawal kultur diusahakan sama, yaitu pH 8,5 dan salinitas 30 ppt dengan mendapatkan aerasi selama 24 jam/hari (Tetelepta, 2011).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


29

Menurut Satyantini dan Masithah (2008), penghitungan jumlah bibit plankton yang diperlukan untuk kultur menggunakan rumus :

V1 

N 2 V 2 N1

Keterangan: V1 = Volume bibit untuk penebaran awal (ml) N1 = Kepadatan bibit plankton (unit/ ml) V2 = Volume media kultur yang dikehendaki (ml) N2 = Kepadatan bibit plankton yang dikehendaki (unit/ ml)

D. Pengukuran Pertumbuhan Chlorella sp. Pertumbuhan kultur Chlorella sp. diukur dengan menghitung kepadatan selnya setiap hari. Pengukuran dilaksanakan setiap pagi hari pukul 08.00 WIB. Pengambilan sampel dilakukan dengan menggunakan pipet. Penghitungan kepadatan sel dilakukan dengan bantuan haemacytometer dan hand counter serta dilakukan di bawah mikroskop cahaya binokuler dengan pembesaran 400 kali. Selanjutnya data diformulasikan dengan rumus small block untuk mengetahui kuantitas kepadatan sel. Pengamatan terhadap kepadatan sel kultur dilakukan selama 6 hari. Menurut

Aujero

(1982)

dalam

Saputro

(2010),

penghitungan

menggunakan metode “Small Block” sebagai berikut : Pertama, sel fitoplankton dihitung mulai dari sisi kiri kotak ke arah kanan kotak dan menghitung sel yang berada di dalam garis atau yang mendekati garis batas bagian dalam kotak. Kedua, penghitungan pada blok A, B, C, D, E dijumlahkan. Ketiga, kepadatan fitoplankton (sel/mL) dihitung dengan menggunakan rumus penghitungan “Small Block”.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


30

Kepadatan fitoplankton (sel/mL) = nA + nB + nC + nD + nE 5 x 4 x 10-6 Keterangan : nA, nB, nC, nD: jumlah sel fitoplankton pada blok A, B, C, D dan E 5 : jumlah blok yang dihitung -6 4 x 10 : luas kotak kecil (A, B, C, D atau E) (Sumber : Aujero, 1982 dalam Saputro, 2010)

E. Penghitungan Kandungan Karotenoid Penghitungan karotenoid dilaksanakan setelah 6 hari budidaya. Sample kemudian dibawa ke laboratorium kering FPK UNAIR untuk dilakukan proses ekstraksi. Pengukuran kadar karotenoid menggunakan metode yang berasal dari Davies (1976) dalam Pramusinta (2012). Sebanyak 10 mL hasil kultur Chlorella sp. disentrifus pada kecepatan 3000 rpm selama 15 menit. Hasil supernatan sentrifus dibuang dan pellet Chlorella sp. yang berada di dasar tube diekstraksi dengan 5 ml metanol dan 5 ml dietil eter. Karotenoid pada fraksi metanol dengan bantuan larutan NaCl ditambahkan ke dalam dietil eter. Gabungan fraksi eter disaponifikasi dengan 2 ml metanol-KOH (konsentrasi akhir basa 5%), diinkubasi selama 12 sampai 16 jam pada suhu ruang. Kelebihan basa pada filtrat dihilangkan dengan menambahkan air. Fase dietil eter kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang 452 nm. Karotenoid (µg/ml) = 3,68 A452 dengan: A = Absorban ( serapan pada panjang gelombang maksimum sampel)

Skripsi


AGUS PARIAWAN


31

4.3.3 Parameter 4.3.3.1 Parameter Utama Parameter utama yang diamati adalah kandungan karotenoid Chlorella sp. yang dilihat dari analisa karotenoid setelah fase panen. 4.3.3.2 Parameter Pendukung Parameter pendukung penelitian ini adalah kepadatan sel alga dan kualitas air yaitu suhu, pH dan salinitas. 4.3.4 Analisa Data Data hasil percobaan dapat dianalisis dengan analisis ragam atau analysis of variance (ANOVA). Dalam analisis ragam terdapat nilai F hitung dan juga F tabel. Nilai F hitung dibandingkan dengan F tabel sehingga dapat disimpulkan ada tidaknya pengaruh perlakuan yang diberikan. Apabila terdapat pengaruh perlakuan yang diberikan, maka unutk menentukan perlakuan mana yang berbeda dengan yang lain perlu dilakukan uji perbandingan berganda (Kusriningrum, 2008). Uji perbandingan berganda yang digunakan yaitu Uji Jarak Berganda Duncan (Duncan’s Multiple Range Test).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


V HASIL DAN PEMBAHASAN

5.1 Hasil Hasil pengamatan penelitian berupa data kandungan karotenoid dan kepadatan populasi Chlorella sp. Hasil tersebut digunakan untuk mengetahui pengaruh intensitas cahaya terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. Hasil pengamatan penelitian berupa populasi Chlorella sp. digunakan untuk mengambil korelasi hubungan antara populasi Chlorella sp. dengan kandungan karotenoid Chlorella sp. Parameter kualitas air berupa kisaran pH, suhu dan salinitas selama penelitian ditampilkan sebagai data pendukung untuk melengkapi pembahasan.

5.1.1 Kandungan Karotenoid Hasil pengamatan penelitian berupa kandungan karotenoid Chlorella sp. pada hari keenam yang dikultur dengan intensitas cahaya berbeda disajikan pada Lampiran 1. Hasil rata-rata kandungan karotenoid Chlorella sp. disajikan pada Tabel 5.1. Tabel 5.1. Hasil rata-rata kandungan karotenoid Chlorella sp. Perlakuan

Kandungan Karotenoid (µg/ml)

A

0,207552b

B

0,255392ab

C

0,298080a

D

0,220056b

Keterangan : Superskrip berbeda dalam satu kolom menunjukkan ada perbedaan yang nyata (p<0,05). Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D

Skripsi

: 500 Lux : 3.400 Lux : 7.400 Lux : 11.700 Lux


AGUS PARIAWAN


33

Data kandungan karotenoid Chlorella sp. kemudian dianalisis dengan analysis of variance (ANOVA). Hasil analysis of variance (ANOVA) menunjukkan bahwa setiap perlakuan intensitas cahaya memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. (p<0,05). Analisis dilanjutkan menggunakan uji jarak berganda Duncan dengan derajat kepercayaan 0,05. Hal ini untuk menentukan perlakuan mana yang berbeda dengan yang lain. Hasil uji jarak berganda Duncan memperlihatkan bahwa perlakuan C berbeda nyata (p<0,05) dengan perlakuan A dan D. Perlakuan A tidak berbeda nyata (p>0,05) dengan perlakuan D. Nilai ulangan setiap perlakuan dirata-rata sehingga didapat nilai rata-rata kandungan karotenoid Chlorella sp. setiap perlakuan. Grafik kandungan karotenoid Chlorella sp ditampilkan pada Gambar 5.1.

Gambar 5.1. Grafik kandungan karotenoid Chlorella sp. (µg/ml). Keterangan : Perlakuan A Perlakuan B

Skripsi

: Intensitas 500 Lux : Intensitas 3700 Lux

Perlakuan C Perlakuan D


: Intensitas 7400 Lux : Intensitas 11700 Lux

AGUS PARIAWAN


34

Grafik di atas memperlihatkan bahwa kandungan karotenoid tertinggi terdapat pada perlakuan C (0,29808µg/ml). Kandungan karotenoid terendah terdapat pada perlakuan A (0,207552 µg/ml).

5.1.2 Populasi Chlorella sp. Hasil pengamatan penelitian berupa penghitungan kepadatan populasi Chlorella sp. (per unit percobaan) ditampilkan pada Lampiran 2. Grafik pertumbuhan Chlorella sp. ditampilkan pada Gambar 5.2. Data yang diperoleh selama penelitian kemudian dianalisis dengan analysis of variance (ANOVA). Hasil analysis of variance (ANOVA) menunjukkan bahwa setiap perlakuan intensitas cahaya memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kapadatan populasi Chlorella sp. (p<0,05). Analisis dilanjutkan menggunakan uji jarak berganda Duncan dengan derajat kepercayaan 0,05. Hal ini untuk menentukan perlakuan mana yang berbeda dengan yang lain. Hasil kepadatan populasi Chlorella sp. dapat dilihat pada Tabel 5.2. Hasil uji jarak berganda Duncan menunjukan bahwa perlakuan A tidak berbeda nyata dengan perlakuan D namun berbeda nyata dengan perlakuan B dan C. Perlakuan B tidak berbeda nyata dengan perlakuan C namun berbeda nyata dengan perlakuan A dan D. Perlakuan C tidak berbeda nyata dengan perlakuan B namun berbeda nyata dengan perlakuan A dan D. Perlakuan D tidak berbeda nyata dengan perlakuan A namun berbeda nyata dengan perlakuan B dan C.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


35

Tabel 5.2. Hasil rata-rata kepadatan populasi Chlorella sp.

Perlakuan A

Rata-rata kepadatan populasi Chlorella sp. (sel/ml) 0,34b

B

5,5067a

C

8,0417a

D

0,6067b

Keterangan : Superskrip berbeda dalam satu kolom menunjukkan ada perbedaan yang nyata (p<0,05). Perlakuan A : Intensitas 500 Lux Perlakuan B : Intensitas 3700 Lux Perlakuan C : Intensitas 7400 Lux Perlakuan D : Intensitas 11700 Lux

Gambar 5.2. Grafik pertumbuhan Chlorella sp. Puncak populasi tertinggi terdapat pada perlakuan C (14,62x106 sel/ml) yang terjadi pada hari kelima. Puncak populasi terendah terdapat pada perlakuan A yang terjadi pada hari pertama dengan kepadatan (0,69x106 sel/ml).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


36

5.1.3 Analisis Korelasi Eksponensial Kandungan Karotenoid dengan Kepadatan populasi Chlorella sp. Analisis korelasi eksponensial dilakukan untuk mengetahui hubungan antara kandungan karotenoid dengan kepadatan populasi Chlorella sp.

Gambar 5.3 Grafik korelasi eksponensial kandungan karotenoid dan kepadatan populasi Chlorella sp.

Grafik korelasi eksponensial antara kandungan karotenoid dan kepadatan populasi Chlorella sp. terdapat pada Gambar 5.3. Hasil analisis menunjukan adanya hubungan antara kandungan karotenoid dengan kepadatan populasi Chlorella sp. yang ditunjukan dengan R2=0,861.

5.1.4 Kualitas Air Pertumbuhan Chlorella sp. salah satunya dipengaruhi oleh kualitas air. Pengukuran kualitas air (suhu, pH dan salinitas) dilakukan setiap hari selama masa pemeliharaan. Kisaran nilai kualitas air secara umum selama masa

Skripsi


AGUS PARIAWAN


37

pemeliharaan dapat dilihat pada Tabel 5.3. Kisaran nilai kualitas air yang lebih detail (kisaran suhu per hari, kisaran salinitas per hari dan kisaran pH per hari) terdapat pada Lampiran 3.

Tabel 5.3. Kisaran nilai kualitas air

Kisaran Nilai Kualitas Air (suhu, salinitas, pH) Perlakuan

Suhu (oC)

Salinitas (ppt)

pH

A

29-33

24-41

7-8

B

33-35

25-58

8-9

C

34-36

27-68

7-10

D

39-42

22-60

7-9

5.2 Pembahasan Urutan kandungan karotenoid Chlorella sp. dari yang tertinggi adalah perlakuan C disusul kemudian perlakuan B, lalu perlakuan D sampai yang terendah yaitu perlakuan A. Urutan rata-rata kepadatan populasi Chlorella sp. dari yang tertinggi yaitu perlakuan C disusul kemudian perlakuan B, D sampai yang terendah yaitu perlakuan A. Ini menunjukan ada hubungan yang relevan antara kandungan karotenoid dengan kepadatan populasi Chlorella sp. Hubungan ini dipertegas dari analisis korelasi linier antara kandungan karotenoid dengan kepadatan populasi, yang menyatakan terdapat hubungan diantara keduanya (R2=0,8327). Hasil analysis of variance (ANOVA) terhadap kandungan karotenoid menunjukkan bahwa setiap perlakuan intensitas cahaya memberikan pengaruh

Skripsi


AGUS PARIAWAN


37

yang berbeda nyata terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. (p<0,05). Ini berarti intensitas cahaya berpengaruh terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. Semakin tinggi intensitas cahaya maka kandungan karotenoid yang dihasilkan akan semakin tinggi. Hal ini karena pada kondisi intensitas cahaya tinggi, enzim bekerja secara optimal untuk menghasilkan karotenoid. Karotenogenesis ini disintesis oleh kombinasi β-carotene hydroxylase gene (CrtR-b) dan β-karoten ketolase (CtrW, BKT). Intensitas cahaya mampu meningkatkan level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) (Steinbrenner and Linden, 2001). Dengan meningkatnya level mRNA carotenoid hydroxylase (CH) dan phytoene synthase (PSY) maka phytoene yang merupakan penyusun karoten juga meningkat. Meningkatnya phytoene dapat mempengaruhi meningkatnya karotenoid yang disintesis. Simkin et al. (2003) dalam Kurniawan (2010) menyatakan bahwa biosintesis karotenoid dipengaruhi oleh adanya gen psy-1 kemudian gen psy-1 yang akan menyandi enzim phytoen synthase. Adanya enzim tersebut akan mengawali biosintesis karotenoid. Johnson and An (1991) dan Albrecht and Sandman (1994) dalam Kurniawan (2010) mengemukakan bahwa cahaya merupakan salah satu faktor penting dalam biosintesis karotenoid. Menurut Bramley (2002) dalam Kurniawan (2010) peran cahaya tersebut adalah untuk meningkatkan aktivitas enzim yang berperan dalam biosintesis karotenoid.

Cahaya dapat menyebakan naiknya produk fotosintesis (Peel and Wveatherly, 1962 dalam Servaites and Geiger, 1974). Cahaya dapat menyebakan meningkatkan ATP yang dihasilkan pada fotosintesis (Plaut and Reinhold, 1969

Skripsi


AGUS PARIAWAN


39

dalam Servaites and Geiger, 1974). Naiknya ATP akan memicuh semakin cepatnya laju metabolisme dan akan mempengaruhi metabolisme karotenoid dalam sel alga. Peri et al. (2009) menyatakan bahwa intensitas cahaya memiliki hubungan positif terhadap kecepatan fotosintetik bersih dan konduksii stomata. Kecepatan fotosintetik menurun dengan menurunya intensitas cahaya begitu sebaliknya. Terlihat dari data kandungan karotenoid bahwa semakin tinggi intensitas cahaya semakin tinggi pula kandungan karotenoid yang didapatkan kecuali pada perlakuan D. Jika dibandingkan antara perlakuan A (500 lux) dengan perlakuan D (11.700 lux) terlihat bahwa kandungan karotenoid perlakuan A lebih rendah dari pada perlakuan D meskipun tidak berbeda nyata. Hubungan suhu dan karotenoid menyebabkan perlakuan D lebih rendah dibanding perlakuan C. Muhtadi (1992) dalam Satriyanto dkk. (2012) mengatakan bahwa terdapat pengaruh suhu terhadap oksidasi karotenoid. Dijelaskan bahwa karotenoid belum mengalami kerusakan pada pemanasan 60 oC tetapi reaksi oksidasi karotenoid dapat berjalan lebih cepat pada suhu yang relatif tinggi. Erawati (2006) dalam Satriyanto dkk. (2012) menyatakan semakin tinggi temperatur maka akan terjadi peningkatan laju reaksi menyebabkan total karoten yang dihasilkan juga semakin besar. Setelah mencapai titik tertentu peningkatan temperatur justru akan merusak pigmen itu sendiri dan akan menurunkan total karoten.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


40

Kandungan karotenoid pada perlakuan D lebih rendah dari perlakuan C juga dikarenakan kepadatan populasi Chlorella sp. perlakuan D lebih rendah dibanding perlakuan C. Akumulasi sel Chlorella sp. akan mempengaruhi akumulasi akhir karotenoid yang dihasilkan. Dengan begitu perlakuan C yang jumlah selnya lebih banyak mampu mengoptimalkan penyerapan cahaya dibandingkan dengan perlakuan yang lain sehingga Chlorella sp. pada perlakuan C bisa mengakumulasi karotenoid lebih banyak. Hasil analysis of variance (ANOVA) terhadap kepadatan populasi Chlorella sp. menunjukkan bahwa setiap perlakuan intensitas cahaya memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kepadatan populasi Chlorella sp. (p<0,05). Ini berarti intensitas cahaya berpengaruh terhadap kepadatan populasi Chlorella sp. Hal ini karena intensitas cahaya merupakan faktor yang sangat penting untuk memaksimalkan konversi dari energi cahaya menjadi biomasa alga (Edwards et al.,2006 dalam Choochote et al., 2012). Dalam penelitiannya (Choochote et al., 2012), terlihat bahwa intensitas cahaya 5000 lux menghasilkan kepadatan tertinggi (3,88x 108 sel/ml) dibandingkan perlakuan 4000 lux dan 3000 lux. Sel yang tumbuh di bawah kondisi intensitas cahaya tinggi mampu menghasilkan kepadatan yang tinggi (Choochote et al., 2012). Seperti halnya menurut Hu et al. (1998) dalam Choochote et al. (2012) yang menyatakan bahwa terdapat

peningkatan

kepadatan

sel

Chlorococccum

littorale

dengan

meningkatnya intensitas cahaya menggunakan sebuah fotobiorekator pipih.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


41 Untuk perlakuan D (11.700 lux) dimana memiliki intensitas yang tinggi namun memiliki kepadatan yang lebih rendah dari perlakuan C dan B. Hal ini karena intensitas cahaya berpengaruh pada suhu dan salinitas sehingga perlakuan D (11.700 lux) memiliki kendala dalam pertumbuhan yang berakibat pada rendahnya kepadatan populasi akhirnya. Menurut Alim dan Kurniastuty (1995) dalam Merizawati (2008), Chlorella sp. adalah organisme kosmopolit yang mampu tumbuh pada salinitas nol sampai dengan 35 ppt. Chlorella sp. masih dapat bertahan hidup pada suhu 40oC. Pengaruh intensitas cahaya seperti yang disebutkan oleh Choochote et al. (2012) bahwa intensitas cahaya mampu menghasilkan kepadatan yang tinggi, terbukti dalam penelitian ini. Terlihat bahwa perlakuan A dan D yang sama-sama dalam kondisi ekstrem (keduannya tidak berbeda nyata dalam pertumbuhan) namun perlakuan D menunjukan hasil mampu mencapai kepadatan populasi yang lebih tinggi dibanding perlakuan A.

Semakin tinggi intensitas, maka semakin tinggi suhu karena cahaya sebagai gelombang elektromagnetik memiliki energi yang dilepaskan yang menimbulkan panas. Intesitas cahaya merupakan jumlah flux per unit area. Menurut Ryer (1998), flux adalah ukuran rata-rata aliran energi (energi photon). Energi photon dipengaruhi oleh panjang gelombang. Dalam penelitian ini, panjang gelombang dianggap sama, namun karena intensitasnya berbeda menyebakan besarnya flux per unit area juga berbeda. Hal ini yang mengakibatkan adanya perbedaan suhu. Eppley and Sloan (1966) dalam Goldman and Carpenter (1974) menyatakan bahwa efek cahaya dan suhu pada

Skripsi


AGUS PARIAWAN


42 rata-rata pertumbuhan alga adalah saling berhubungan. Eppley and Stricland (1968) and Middlebooks and Porcella (1971) dalam Goldman and Carpenter (1974) telah mendiskusikan pentingnya interaksi antara intensitas cahaya, suhu dan konsentrasi nutrisi pada rata-rata pertumbuhan alga. Suhu yang tinggi dapat mempengaruhi metabolisme sel. Ini berefek pada pertumbuhan, seperti pendapat Reynolds (1988), bahwa rata-rata pertumbuhan tergantung pada temperatur. Dalam metabolisme, enzim berfungsi sebagai biokatalisator dan sangat dibutuhkan keberadaannya. Enzim merupakan biokatalisator yang mampu mempercepat jalannya reaksi tanpa ikut bereaksi. Salah satu sifat enzim yaitu sangat peka terhadap faktor-faktor yang menyebabkan denaturasi protein misalnya suhu. Enzim bekerja maksimum pada suhu 40oC (Worthington Biochemical Corporation, 1972). Pengaruh suhu terhadap reaksi enzim terlihat pada Gambar 5.4. Gambar 5.4. tersebut memperlihatkan bahwa reaksi enzim terus meningkat sejalan dengan peningkatan suhu hingga pada titik tertentu, setelah melalui batas toleransi, suhu yang terus naik akan menyebabkan reaksi enzim menurun dan bahkan mampu merusak enzim. Jika enzim rusak maka metabolisme terganggu, hal ini berpengaruh pada pertumbuhan dan juga menghambat pembentukan karotenoid seperti halnya pada perlakuan D (11700 lux).

Skripsi


AGUS PARIAWAN


43

Gambar 5.4. Pengaruh suhu terhadap reaksi enzim (Worthington Biochemical Corporation, 1972)

Kisaran kualitas air terutama suhu dan salinitas berada dalam kondisi fluktuatif bahkan ada yang memperlihatkan kondisi ekstrem. Percobaan pada laboratorium oleh Lund (1949) dalam Reynolds (1988) menunjukkan bahwa beberapa spesies menunjukkan respon yang berbeda terhadap suhu. Foy et al. (1976) dalam Reynolds (1988) menambahkan bahwa beberapa spesies memliki sensitivitas yang berbeda terhadap intensitas cahaya dan fotoperiode. Menurut Reynolds (1988), kajian ini untuk menekankan bahwa hasil rata-rata pertumbuhan tergantung pada beberapa proses pokok, yang mana masing-masing respon fluktuatif pada temperatur (suhu) luar. Transpor intraseluler, asimilasi fotosintesis dan nutrisi lain serta penyusunan material sel baru, tergantung pada temperatur, khususnya ketika proses perakitan organel. Pada proses ini fotosintesis sangat tergantung pada cahaya. Faktor lingkungan yang mendukungan pertumbuhan Chlorella sp. adalah suhu air, suhu ruangan, salinitas dan pH (Isnansetyo dan Kurniastuty, 1995). Hasil

Skripsi


AGUS PARIAWAN


44

pengukuran suhu air selama penelitian berkisar antara 29-40oC. Tingginya suhu disebabkan oleh intensitas cahaya yang tinggi pada perlakuan C (7.400 lux) dan D (11.700 lux). Salinitas pada media pemeliharaan Chlorella sp. berkisar antara 2260 ppt. Fast (1983) dalam Satyantini (2006) mengklasifikasikan air berdasarkan salinitasnya, yang mana salah satunya yaitu kelompok hypersaline. Hypersaline adalah air yang memiliki salinitas diatas 40 ppt. Air payau mempunyai salinitas kurang dari 25 ppt sementara air hipersalinitas memiliki salinitas lebih dari 40 ppt. Salinitas bervariasi tergantung antara penguapan dan presipitasi, serta besarnya pencampuran antara air permukaan dan air kedalaman. Salinitas air dapat mencapai maksimum jika penguapan melampaui presipitasi. Salinitas cenderung tinggi apabila penguapan sangat tinggi sedangkan aliran air terbatas (Universitas Diponegoro, 2007). Oxtoby et al. (2001) menyatakan bahwa setiap larutan memiliki titik jenuh, begitu pula kadar garam. Titik tercapainya keadaan jenuh larutan sangat dipengaruhi oleh beberapa faktor lingkungan, seperti suhu, tekanan dan kontaminasi. Secara umum kelarutan suatu zat sebanding terhadap suhu.

Salinitas media pemeliharaan mengalami peningkatan disebabkan karena suhu semakin naik sebagai akibat dari intensitas cahaya yang tinggi. Secara sederhana ada dua hal penting yang berpengaruh terhadap salinitas yaitu evaporasi dan presipitasi (Pinnet, 1992 dalam Huboyo dan Zaman, 2007). Evaporasi akan meningkat seiring dengan meningkatnya temperatur (Huboyo dan Zaman, 2007). Nilai pH pada media pemeliharaan Chlorella sp. selama penelitian adalah 7-9.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


45

Menurut Nielsen (1955) dalam Prihantini et al. (2005) menyatakan bahwa pH yang sesuai dengan pertubuhan Chlorella sp. berkisar antara 4,5-9,3.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


VI KESIMPULAN

6.1 Kesimpulan Kesimpulan penelitian ini adalah : 1. Intensitas cahaya memberikan pengaruh yang berbeda nyata terhadap kandungan karotenoid Chlorella sp. 2. Cahaya dengan intensitas 7.400 lux dapat menghasilkan karotenoid yang tertinggi sebesar 0,298080 µg/ml. 6.2 Saran Perlu dilakukan penelitian lebih jauh terkait kultur semi-massal Chlorella sp. menggunakan tabung fotobioreaktor dengan memanfaatkan cahaya matahari untuk menghasilkan karotenoid.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


DAFTAR PUSTAKA

Biolab Medical Unit. 2010. Carotenoid. BIOLAB. Ltd. London, England. P. 1. Biranti, F., M. Nursid dan B. Cahyono. 2009. Analisis Kuantitatif β-karotenoid dan Uji Aktivitas Karotenoid dalam Alga Coklat Turbinaria decurrens. Jurnal Sains & Matematika (JSM). Jakarta. Vol. 17 No.2. hal. 90. Bjerkeng, B. 2000. Carotenoid Pigmentation of Salmonid Fishes - Recent Progress. AKVAFORSK, Institute of Aquaculture Research AS, Sunndalsøra, Norway. p. 71. Cifuentes A. S., M.A Gonzalez, S. Vargas, M. Hoeneisen and N. Gonzalez. 2003. Optimization of Biomass, Total Carotenoids and Astaxanthin Production in Haematococcus pluvialis Flotow Strain Steptoe (Nevada, USA) under Laboratory Conditions. Chile. Biol Res 36. pp. 343-357. Choochote, W., K. Paiboonsin, S. Ruangpan and A. Pharuang. 2012. Effects of Urea and Light Intensity on the Growth of Chlorella sp. The 8th International Symposium on Biocontrol and Biotechnology. Bangkok p.130-131. Creswell, L. 2010. Phytoplankton Culture for Aquaculture Feed. SRAC Publication No.5004. Florida. USA. p.2. Geetha, B.V., R.Navasakthi and E. Padmini. 2010. Investigation of Antioxidant Capacity and Phytochemical Composition of Sun Chlorella -An Invitro Study. Journal of Aquaculture Research & Development. Tamilnadu, India. P. 1 Goldman, J. C. and E. J. Carpenter. 1974. A Kinetic Approach to the Effect of Temperature on Algal Growth. Woods Hole Oceanographic Institution. Woods Hole. Massachusetts Vol. 19 (5). p. 756. Gupta, S.K., A.K. Jha, A.K Pal and G. Venkateshwarlu. 2007. Use of Natural Karotenoids for Pigmentation in Fishes. Natural Product Radiance, Vol.6(1). pp. 46-49. Happey-Wood, C. M. 1988. Ecology of Freshwater Planktonic Green Algae. In: C. D. Sandgren (Eds.). Growth and Reproductive Strategies of Freshwater Phytoplankton. Cambridge University Press. Cambridge. pp. 175, 218219. Harrison, P. J. and J. A. Berges. 2004. Marine Culture Media. Academic Press. pp. 21-22.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


48

Huboyo, H. S. dan B. Zaman. 2007. Analisis Sebaran Temperatur dan Salinitas Air Limbah PLTU-PLTGU Berdasarkan Sistem Pemetaan Spasial (Studi Kasus: PLTU-PLTGU Tambak Lorok Semarang). Jurnal PRESIPITASI. Vol. 3 No.2. Semarang. hal. 44. Isnansetyo, A. dan Kurniastuty. 1995. Teknik Kultur Phytoplankton dan Zooplankton. Kanisius. Yogyakarta. hal. 34-85. Kurniawan, M., M. Izzati, dan Y. Nurchayati. 2010. Kandungan Klorofil, Karotenoid dan Vitamin C pada Beberapa Spesies Tumbuhan Akuatik. Buletin Anatomi dan Fisiologi. Semarang. vol. XVIII, No.1. 34 hal. Kusriningrum R.S. 2008. Perancangan Percobaan. Airlangga University Press. Surabaya. hal. 1,11,77. Masithah, E.D, W. H. Satyantini, M. A. Alamsjah, Prayogo dan S. Andriyono. 2012. Penuntun Praktikum Budidaya Pakan Alami. Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 20-39. Merizawati. 2008. Analisis Sinar Merah, Hijau, dan Biru (RGB) untuk Mengukur Kelimpahan Fitoplankton (Chlorella sp.). Skripsi Program Studi Ilmu dan Teknologi Kelautan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian Bogor. 87 hal. Myers, J. 1944. The Growth of Chlorella pyrenoidosa Under Varius Cunture Conditions. Plant Physiology. Austin, Texas. p. 579. Oxtoby, D.W, H.P. Gilis, dan N.H Nachtrieb. 2001. Prinsip-Prinsip Kimia Modern. Edisi ke-4. Jilid 1. Diterjemahkan oleh S.S. Achmadi. Erlangga. Jakarta. hal 346-347. Pamungkas, W. A dan Y. E. Kurniady. 2006. Optimasi Proses Ekstraksi Pigmen Karotenoid dari Spirulina platensis. Jurusan Teknik Kimia. Fakultas Teknik. Universitas Diponegoro. Semarang. 33 hal. Peri, P. L., G. M. Pastur and M. V. Lencinas. 2009. Light Intensities and Water Status of Two Main Nothofagus Species of Southern Patagonian Forest, Argentina. Journal of Forest Science, 55, 2009 (3). Santa Croz. Argentina. P.105, 107. Pramusinta, G. 2012. Pengaruh Pemberian Pupuk Cair Limbah Ikan Lemuru Terhadap Kandungan Karotenoid Spirulina platensis. Skripsi. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga. Surabaya. 57 hal. Prihantini, N. B., B. Putri dan R. Yuniati. 2005. Pertumbuhan Chlorella spp. dalam Medium Ekstrak Tauge (MET) dengan Variasi pH Awal. MAKARA, SAINS, VOL.9, N0. 1. Depok. hal. 2.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


49

Reynolds, C. S. 1988. Fungtional Morphology and The Adaptive Strategies of Freshwater Phytoplankton. Cambridge University Press. Cambridge. 405 p. Rodriguez-Amaya, D. B. and M. Kimura. 2004. HarvestPlus Handbook for Carotenoid Analysis. HarvestPlus. Washington, DC. pp. 2-3. Rostini, I. 2007. Kultur Fitoplankton (Chlorella sp. dan Tetraselmis chuii) Pada Skala Laboratorium. Universitas Padjadjaran Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan. Jatinangor. 10 hal. Ryer, A. 1998. Light Measurement Handbook. Technical Publications Dept. International Light, Inc. 17 Graft Road Newburyport, MA. USA. pp. 2932. Sandgren, C. D. 1988. The Ecology of Chrysophyte Flagellates: Their Growth and Perennation Strategies As Freshwater Phytoplanton. In: C. D. Sandgren (Eds.). Growth and Reproductive Strategies of Freshwater Phytoplankton. Cambridge University Press. Cambridge. pp. 1-2. Saputro, H. 2010. Pemanfaatan Blotong Kering sebagai Pupuk untuk Peningkatan Pertumbuhan Populasi Dunaliella salina. Skripsi. Fakultas Perikanan dan Kelautan. Universitas Airlangga. Surabaya. 64 hal. Satriyanto, B., S. B. Widjanarko dan Yunianta. 2012. Stabilitas Warna Ekstrak Buah Merah (Pandanus conoideus) Terhadap Pemanasan Sebagai Sumber Potensial Pigmen Alami. Jurnal Teknologi Pertanian. Malang. Vol. 3 No. 2 . 158 hal. Satyantini, W. H. 2006. Diktat Kuliah Dasar-Dasar Akuakultur. Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga. Surabaya. 5 hal. (tidak diterbitkan) Satyantini, W. H. dan E. D. Masithah. 2008. Diktat Penuntun Praktikum Budidaya Pakan Alami. Fakultas Perikanan dan Kelautan Universitas Airlangga. Surabaya. hal. 28 – 49. Seigler, D. S. 1998. Tetraterpenes or Carotenoids. Springer. US. pp. 486-505. Servaites, J. C. and D. R. Geiger. 1974. Effects of Light Intensity and Oxygen on Photosynthesis and Translocation in Sugar Beet. Plant Physiol. 54. Ohio. P. 575. Shah, M. M. R., M. J. Alam and M. Y. Mia. 2003. Chlorella sp.: Isolation, Pure Culture and Small Scale Culture in Brackish-water. Bangladesh J.Sci. Ind. Res. Khulna. Bangladesh. 38 (3-4). pp. 165-166.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


50 Stange, C. and C. Flores. 2012. Carotenoids and Photosynthesis - Regulation of Carotenoid Biosyntesis by Photoreceptors In Advances in Photosynthesis Fundamental Aspects. InTech. Rijeka, Croatia. p.77. Steinbrenner, J. and H. Linden. 2001. Regulation of Two Carotenoid Biosynthesis Genes Coding for Phytoene Synthase and Carotenoid Hydroxylase during Stress-Induced Astaxanthin Formation in the Green Alga Haematococcus pluvialis. Plant Physiol. American Society of Plant Biologists. America. Vol. 125. pp. 811-815. Sutomo. 2005. Kultur Tiga Jenis Mikroalga (Tetraselmis sp., Chlorella sp. dan Chaetoceros gracilis) dan Pengaruh Kepadatan Awal Terhadap Pertumbuhan C. gracilis di Laboratorium. Jurnal Oseanografi dan Limnologi di lndonesia. No. 37. hal. 43 – 58. Sze, P. 1993. A Biology of The Algae. Second Edition. wm. C. Brown Communications. Inc. Dubuque. USA. p. 3. Takaichi, S. 2011. Carotenoids in Algae: Distributions, Biosyntheses and Functions. Mar. Drugs. Kawasaki 211-0063, Japan. 9. pp. 1101-1118. Tetelepta, L. D. 2011. Pertumbuhan Kultur Chlorella spp. Skala Laboratorium Pada Beberapa Tingkat Kepadatan Inokulum. Prosiding Seminar Nasional: Pengembangan Pulau-Pulau Kecil. 199 hal. Universitas Diponegoro. 2007. Buku Ajar Mata Kuliah Oseanografi Fisika. Program Studi Ilmu Kelautan Jurusan Ilmu Kelautan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Diponegoro. Semarang. hal. 10-13. Walne, P. R. 1970. Studies on the Food Value of Nineteen Genera of Algae to Juvenile Bivalves of the Genera Ostrea, Crassostrea, Mercenaria, and Mytilis. Fish. Invest. 26. pp. 1-62. Worthington Biochemical Corporation. 1972. Introduction to Enzymes. Worthington Publishing. New Jersey. pp.1,14,15.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


Lampiran 1. Kandungan Karotenoid Chlorella sp. (µg/ml)

ULANGAN A 1 2 3 4 5 Keterangan: Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D

Skripsi

B 0,19504 0,22448 0,19504 0,21712 0,20608

PERLAKUAN C 0,27600 0,19872 0,23920 0,27600 0,28704

D 0,33856 0,29072 0,20976 0,36432 0,28704

0,24288 0,20976 0,21344 0,23920 0,19500

: 500 Lux : 3.400 Lux : 7.400 Lux : 11.700 Lux


AGUS PARIAWAN


52

Lampiran 2. Kepadatan populasi Chlorella sp. (per unit percobaan) Unit Percobaan HARI 1 HARI 2 HARI 3 HARI 4 HARI 5 HARI 6 A1 0,50 0,30 0,90 0,20 0,05 0,05 A2 0,90 0,60 0,70 0,20 0,05 0,05 A3 0,35 0,45 0,50 0,10 0,10 0,10 A4 0,65 0,55 0,70 0,35 0,60 0,60 A5 1,05 0,40 0,55 0,70 0,25 0,25 B1 0,75 2,70 6,60 6,60 8,25 8,30 B2 0,45 3,45 2,25 1,15 4,95 4,50 B3 0,30 5,45 8,60 10,70 15,30 14,45 B4 0,65 5,15 4,40 1,15 6,45 5,80 B5 0,80 4,50 5,96 1,45 11,35 10,60 C1 0,85 6,20 3,20 5,20 3,15 1,85 C2 0,55 3,45 2,95 5,45 6,80 4,70 C3 0,30 1,60 6,25 8,20 7,25 5,40 C4 0,80 6,35 8,90 20,10 24,35 15,85 C5 0,55 2,00 10,35 5,45 31,55 17,40 D1 0,25 0,30 0,55 0,40 1,55 1,55 D2 0,35 0,55 0,50 1,15 1,60 1,60 D3 0,40 0,75 0,55 0,75 0,80 0,80 D4 0,70 0,90 0,50 0,60 1,50 1,50 D5 0,40 0,30 0,40 0,10 0,05 0,05

Keterangan: Perlakuan A Perlakuan B Perlakuan C Perlakuan D Satuan

Skripsi

: 500 Lux : 3.400 Lux : 7.400 Lux : 11.700 Lux : sel/ ml


AGUS PARIAWAN


53

Lampiran 3. Kisaran suhu per hari, kisaran salinitas per hari dan kisaran pH per hari Tabel kisaran suhu per hari

Perlakuan Hari 1 A 29 B 34 C 36 D 40

Kisaran Suhu Per Hari hari 2 hari 3 hari 4 hari 5 hari 6 32-33 32-33 32 32 32 34-35 33 33 34 34 35 34 34 34 34 39-42 38-39 39 40 40

Tabel kisaran salinitas per hari

Perlakuan A B C D

Hari 1 27-32 27-35 28-32 27-30

Kisaran Salinitas Per Hari Hari 2 Hari 3 Hari 4 Hari 5 26-35 24-30 28-38 27-40 25-35 26-38 28-45 29-53 29-35 28-45 27-48 27-56 25-30 28-34 30-47 22-47

Hari 6 27-41 25-58 27-68 32-60

Tabel kisaran pH per hari

Perlakuan Hari 1 Hari 2 A 8 8 B 8 8 C 7-9 8 D 8 8

Skripsi

Kisaran pH Per Hari Hari 3 Hari 4 Hari 5 Hari 6 7-8 8 7-8 7-8 9 8 8-9 8-9 8-9 8-9 8-10 7-9 8 7-9 7-9 7-9


AGUS PARIAWAN


54

Lampiran 4. SPSS kandungan karotenoid

Oneway Descriptives KAROTENOID

N

A

5

B

5

C

5

D

5

Total

20

Std. Deviation

Mean .207552 00 .255392 00 .298080 00 .220056 00 .245270 00

.013165968 .036485859 .059166802 .020402267 .049436198

Std. Error .005888 000 .016316 972 .026460 198 .009124 171 .011054 270

95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound

Minimu m

Maximu m

.19120429

.22389971

.195040

.224480

.21008882

.30069518

.198720

.287040

.22461471

.37154529

.209760

.364320

.19472324

.24538876

.195000

.242880

.22213315

.26840685

.195000

.364320

Test of Homogeneity of Variances KAROTENOID Levene Statistic 2.537

df1

df2 3

Sig. .093

16

ANOVA KAROTENOID

Between Groups

Sum of Squares .025

Df 3

Mean Square .008 .001

Within Groups

.022

16

Total

.046

19

F 6.087

Sig. .006

Post Hoc Tests Homogeneous Subsets KAROTENOID Duncan Subset for alpha = .05 PERLAKUAN A

N 5

1 .20755200

D

5

.22005600

B

5

.25539200

C

5

2

.25539200 .29808000

Sig.

.068 .085 Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Skripsi


AGUS PARIAWAN


55

Summarize Case Processing Summary(a) Cases Included KAROTENOID * PERLAKUAN

N

Excluded

Percent 20

N

100.0%

Total

Percent 0

N

.0%

Percent 20

100.0%

a Limited to first 100 cases.

Case Summaries(a)

PERLAKUAN

A

1

KAROTENOID .195040

2

.224480

3

.195040

4

.217120

5 Total

.206080 N Mean Std. Deviation

B

5 .20755200 .013165968

Minimum

.195040

Maximum

.224480

1

.276000

2

.198720

3

.239200

4

.276000

5 Total


C

5 .25539200 .036485859

Minimum

.198720

Maximum

.287040

1

.338560

2

.290720

3

.209760

4

.364320

5 Total


Skripsi

5 .29808000 .059166802

Minimum

.209760

Maximum

.364320


AGUS PARIAWAN


56

D

1

.242880

2

.209760

3

.213440

4

.239200

5 Total


Total

5 .22005600 .020402267

Minimum

.195000

Maximum

.242880

N Mean Std. Deviation

20 .24527000 .049436198

Minimum

.195000

Maximum

.364320


Skripsi


AGUS PARIAWAN


57

Lampiran 5. SPSS kepadatan populasi Chlorella sp. selama 6 hari

Oneway Descriptives KEPADATAN POPULASI Chlorella sp.

N

A

Std. Deviation

Mean

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean Lower Upper Bound Bound

Minimum

6

.3400

.20258

.08270

.1274

.5526

.09

.67

B

6

5.5067

3.22970

1.31852

2.1173

8.8960

.59

9.26

C

6

8.0417

5.53101

2.25802

2.2372

13.8461

.61

14.62

D

6

.6067

.25033

.10220

.3440

.8694

.42

1.10

24

3.6238

4.48829

.91617

1.7285

5.5190

.09

14.62

Total

Test of Homogeneity of Variances KEPADATAN POPULASI Chlorella sp Levene Statistic 10.330

df1

df2 3

Sig. .000

20

ANOVA KEPADATAN POPULASI Chlorella sp

Between Groups

Sum of Squares

Df

Mean Square

257.695

3

85.898

Within Groups

205.634

20

10.282

Total

463.329

23

F 8.354

Sig. .001

Post Hoc Tests Homogeneous Subsets KEPADATANPOPULASIChlorella Duncan Subset for alpha = .05 PERLAKUAN A

6

1 .3400

D

6

.6067

B

6

C

6

Sig.

N

2

5.5067 8.0417 .887

.186

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 6.000.

Skripsi

Maximu m


AGUS PARIAWAN


58

Summarize Case Processing Summary(a) Cases Included N

PERLAKUAN * KEPADATANPOP ULASIChlorella

Excluded

Percent 24

N

100.0%

Total

Percent 0

N

.0%

Percent 24

100.0%


Case Summaries(a)

KEPADATAN POPULASI Chlorella

.09

PERLAKUAN A

1 Total

N

1

Mean

1.0000

Minimum

A

Maximum

A

Std. Deviation

.

Variance .21

1 Total

. A

N

1

Mean

1.0000

Minimum

A

Maximum

A

Std. Deviation

.

Variance .30

1 Total

. A

N

1

Mean

1.0000

Minimum

A

Maximum

A

Std. Deviation

.

Variance .31

1 Total

. A

N

1

Mean

Skripsi

1.0000

Minimum

A

Maximum

A

Std. Deviation

.

Variance

.


AGUS PARIAWAN


59

.42

1 Total

D N

1

Mean

4.0000

Minimum

D

Maximum

D

Std. Deviation

.

Variance .46

1 2 Total

. A D

N

2

Mean

2.5000

Minimum

A

Maximum

D

Std. Deviation

2.12132

Variance .50

1 Total

4.500 D

N

1

Mean

4.0000

Minimum

D

Maximum

D

Std. Deviation

.

Variance .56

1 Total

. D

N

1

Mean

4.0000

Minimum

D

Maximum

D

Std. Deviation

.

Variance .59

1 Total

. B

N

1

Mean

2.0000

Minimum

B

Maximum

B

Std. Deviation

.

Variance .60

1 Total

. D

N

1

Mean

Skripsi

4.0000

Minimum

D

Maximum

D

Std. Deviation

.

Variance

.


AGUS PARIAWAN


60

.61

1 Total

C N

1

Mean

3.0000

Minimum

C

Maximum

C

Std. Deviation

.

Variance .67

1 Total

. A

N

1

Mean

1.0000

Minimum

A

Maximum

A

Std. Deviation

.

Variance 1.10

1 Total

. D

N

1

Mean

4.0000

Minimum

D

Maximum

D

Std. Deviation

.

Variance 3.86

1 Total

. C

N

1

Mean

3.0000

Minimum

C

Maximum

C

Std. Deviation

.

Variance 4.21

1 Total

. B

N

1

Mean

4.25

B

Maximum

B

Std. Deviation

.

Variance

.

1 Total

2.0000

Minimum

B N

1

Mean

Skripsi

2.0000

Minimum

B

Maximum

B

Std. Deviation

.

Variance

.


AGUS PARIAWAN


61

6.00

1 Total

N

B 1

Mean

2.0000

Minimum

B

Maximum

B

Std. Deviation

.

Variance 6.33

1 Total

. C

N

1

Mean

8.73

C

Maximum

C

Std. Deviation

.

Variance

.

1 Total

3.0000

Minimum

B N

1

Mean

9.04

B

Maximum

B

Std. Deviation

.

Variance

.

1 Total

2.0000

Minimum

C N

1

Mean

9.26

C

Maximum

C

Std. Deviation

.

Variance

.

1 Total

3.0000

Minimum

B N

1

Mean

13.79

B

Maximum

B

Std. Deviation

.

Variance

.

1 Total

2.0000

Minimum

C N

1

Mean

Skripsi

3.0000

Minimum

C

Maximum

C

Std. Deviation

.

Variance

.


AGUS PARIAWAN


62

14.62

1

C

Total

N

1

Mean

3.0000

Minimum

C

Maximum

C

Std. Deviation

.

Variance Total

.

N

24

Mean

2.5000

Minimum

A

Maximum

D

Std. Deviation Variance

1.14208 1.304


Skripsi


AGUS PARIAWAN


63

Lampiran 6. Gambar kegiatan penelitian

a

b

c

e

f

h

i

l

m

Ket: a.Proses Autoclave b. Setting intensitas cahaya c.Mempersiapkan kuvet d.Mengamati dengan Mikroskop e. Mengoperasikan Spektrofotometer f.Membaca serapan spektrofotometer g.tampilan Chlorella sp. di mikroskop

Skripsi

d

g

j

n

k

o

h.Kultur C i. Kultur D j. Kultur B k. Kultur A l. Ruang kultur 1 m. Ruang kultur 2 n. Proses ekstraksi o.Tabung reaksi dan sampel


AGUS PARIAWAN


Skripsi


AGUS PARIAWAN

PENGARUH INTENSITAS CAHAYA TERHADAP KANDUNGAN KAROTENOID Chlorella sp

Recommend Documents