Ověření technologie – stromy u silnic – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2011 Řešitel: Symbiom, s.r.o; Správa a údržba silnic Pardubického kraje Metodika: Ve spolupráci se Správou a údržbou silnic Pardubického kraje byly vybrány 3 druhy vysazených dřevin nacházejících se na 2 lokalitách, na kterých byla ověřena technologie Inject Systém. Jednalo se o lokalitu silnice III. třídy mezi Lanškrounem a Jakubovice a silnice III. třídy mezi Lubníkem a Tatenicemi. Stromy byly ošetřeny technologií počátkem června a to 3 vpichy při tlaku 150 bar a dávkou 1L odpovídajícího injektážního produktu. V říjnu byly stromy fotografovány a byly také odebrány vzorky listů, dokumentující vliv ošetření na zdravotní stav stromů. Po opadu listů bylo provedeno měření ročních přírůstků celého stromu a byl zjištěn celkový roční přírůstek a průměrný přírůstek na větev. Statistické zhodnocení variant probíhalo pomocí ANOVA v programu Statistica 7 testem – LSD multiple comparison test (P<0,05). Úsečky v grafech znázorňují směrodatnou odchylku. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné. Ošetřeny byly tyto druhy stromů: Třešeň ptačí: 15 ks ošetřeno technologií Inject (Symbivit INJECT) , 15 ks kontrola Bříza bělokorá: 7 ks ošetřeno technologií Inject (Ectovit INJECT), 7 ks kontrola Lípa srdčitá: 15 ks ošetřeno technologií Inject (Ectovit INJECT), 15 ks kontrola V případě Ectovit INJECT byly použity tyto izoláty: Laccaria proxima, Hebeloma velutipes, Paxillus involutus a Amanita rubescens, ve formě spor pak Scleroderma citronum a Pisolithus tinctorius. V roce 2012 byla v květnu zjištěna mykorhizní kolonizace u všech variant pokusu. K analýze kořenů byly odebrány kořeny ze čtyř kusů stromů od varianty.
Výsledky: V prosinci byly změřeny jednoroční přírůstky celých stromů a byl zjištěn celkový roční přírůstek a průměrný přírůstek na větev pro jednotlivé varianty a druhy stromů. V případě ošetřených stromů byl patrný rozdíl v porovnání s kontrolou v zabarvení listů obrázky níže. Dále u každého druhu stromů byl statisticky průkazný rozdíl alespoň u jednoho parametru. V případě lípy byl zjištěn průkazný rozdíl v parametru celkový roční nárůst výhonů. V případě břízy byl průkazný parametr roční nárůst výhonu a v případě třešní byly průkazné oba měřené parametry. Celkový průměrný roční nárůst výhonů lípy (cm) b
1500
Průměrný roční nárůst výhonu lípy (cm) a
10 8
1000
a
6
a
4
500
2 0
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Celkový průměrný roční nárůst výhonů břízy (cm) 6000
Inject
Průměrný roční nárůst výhonu břízy (cm) 40 b
a
4000 a
30
a
20
2000
10
0
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Celkový průměrný roční nárůst výhonů třešně (cm) b
Průměrný roční nárůst výhonu břízy (cm) 32
800
b
24
600
16
400 200
Inject
a
a
8
0
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Inject
Injektáž třešní v červnu 2011
Vliv technologie (ošetřené stromy vlevo, kontrola vpravo)
Vliv technologie na lípu (ošetřená varianta vlevo, kontrola vpravo)
Vliv technologie (ošetřený strom vpravo, kontrola vlevo)
Vliv technologie na břízu (ošetřená varianta vlevo, kontrola vpravo)
Vliv technologie na třešeň (ošetřená varianta vlevo, kontrola vpravo)
V květnu 2012 byla zjištěna mykorhizní kolonizace. U všech třech druhů stromů byla prokázána významnost ošetření injektážním produktem. V případě lípy a břízy byly zjištěny vysoké mykorhizní kolonizace v případě kontrolní varianty způsobené pravděpodobně kolonizací dřevin již ve školce přirozeně se vyskytujícími mykorhizními druhy. Průměrná kolonizace kontrolní varianty třešně představovala 15,0% a průměrná kolonizace ošetřené varianty 37,5%. Průměrná kolonizace kořenů kontrolní varianty lípy představovala 75,3% a průměrná kolonizace ošetřené varianty 85,3%. Průměrná mykorhizní kolonizace třešně (%)
Průměrná mykorhizní kolonizace lípy (%) b
50
80
40
b a
60
30 20
100
a
40 20
10
0
0 Kontrola
Inject System
Kontrola
Inject
V případě varianty lípy která byla ošetřena injektážní technologií byly nejvíce zastoupeny rody Laccaria sp., Paxillus involutus a Tomentela sp., které dohromady zaujímali zhruba 55% celkové kolonizace. V případě kontrolní varianty lípy byly nejvíce zastoupeny rody Tomentela sp., Laccaria sp, a Inocybe sp., které dohromady zaujímali zhruba 65% celkové kolonizace. Průměrné kolonizace variant v případě břízy byly podobné úrovni jako v případě lípy. Rozdíl mezi ošetřenou a kontrolní variantou byl 10,8 % Průměrná mykorhizní kolonizace břízy (%) 100
b a
80 60 40 20 0 Kontrola
Inject System
V případě varianty břízy která byla ošetřena injektážní technologií byly nejvíce zastoupeny druhy a rod Paxillus involutus, Scleroderma citronům a Hebeloma sp., které dohromady zaujímali zhruba 59% celkové kolonizace. V případě kontrolní varianty břízy byly nejvíce zastoupeny rody Cortinarius sp., Tomentela sp. a Scleroderma citrinum, které dohromady zaujímali zhruba 61% celkové kolonizace.
Odběr kořenů – lípy (vlevo), břízy (uprostřed) a třešně (vpravo)
Závěr: Technologie Inject Systém byla úspěšně vyzkoušena na stromech podél silnic s průkazným pozitivním vlivem na jejich růst a mykorhizaci dřevin.
Ověření technologie – Oslo – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2011 - 2012 Řešitel: Symbiom, s.r.o Metodika: Ve spolupráci se Správou města Osla byla technologie v dubnu 2011 vyzkoušena v ulicích Osla, konkrétně ulici Bygdoy alle a přilehlých ulicích. Ošetřeny byly následující stromy v dávce, produktem a množstvím: 16ks jírovec – Symbivit INJECT, 4 vpichy na strom, dávka 2l na vpich 17ks lípa – Symbivit INJECT + Ectovit INJECT v poměru 1:1, 5 vpichů na strom, dávka 2l na vpich Dále byl k ošetřeným stromům vybrán odpovídající počet kontrolních stromů, které budou sloužit jako srovnávací pro porovnání vlivu technologie. Na podzim roku 2012 proběhlo měření stromů. V případě lípy bylo změřeno 6ks od varianty a v případě jírovce bylo změřeno 5ks od varianty. Na jaře 2012 byly konce větví sledovaných stromů označeny stahovací páskou pro snadné určení jednoletých přírůstků. Statistické zhodnocení variant probíhalo pomocí ANOVA v programu Statistica 7 testem – LSD multiple comparison test (P<0,05). Úsečky v grafech znázorňují směrodatnou odchylku. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné. Výsledky: Během dvou dnů bylo v dubnu 2011 v Oslu ošetřeno celkem 33 stromů technologií Inject System. Některé stromy nebylo možné ošetřit podle standardního schématu, neboť byly kromě cca 50 cm od kmene stromu kompletně obehnány asfaltovým chodníkem. V tomto případě byly injektážní vpichy provedeny tak aby byly co nejvíce od kmene stromu. Výsledky v případě ročních přírůstků u jírovce nebyly statisticky průkazné na rozdíl od lípy, kde rozdíl mezi průměrným přírůstkem ošetřené varianty a kontroly činil 17,7 cm.
Testování mikroinjektážní technologie a produktu Rhodovit INJECT – rododendrony (aplikátor č. 2) Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2011 - 2012 Řešitel: Symbiom, s.r.o Metodika: Technologie ošetření mikro-injektážním přístrojem byly ověřena při ošetření kontejnerovaných rododendronů. Při pokusu byl použit ruční aplikátor č. 2 ,kterým byl aplikován ke kořenům rostlin injektážní přípravek Rhodovit INJECT. Celková dávka byla 60 ml produktu aplikovaná pomocí dvou vpichů k rostlině. Objem kontejneru byl 1 litr. Ošetřeno aplikátorem bylo 18 ks rododendronů a 18 ks sloužilo jako kontrolní varianta. Pokus byl založen 23.9.2011 a vyhodnocení růstových parametrů a mykorhizní kolonizace proběhlo v srpnu 2012. K vyhodnocení mykorhizní kolonizace byly odebrány vzorky z 5 kusů z varianty. Statistické zhodnocení variant probíhalo pomocí ANOVA v programu Statistica testem – LSD multiple comparison test (P<0,05). Úsečky v grafech znázorňují směrodatnou odchylku. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné. Výsledky: Aplikace injektážního produktu Rhodovit INJECT prokázala pozitivní vliv na růst kontejnerovaných rododendronů. Z růstových parametrů byl stanoven celkový přírůstek výhonů. Rozdíl mezi průměrnou hodnotou přírůstku kontrolní a ošetřené varianty je 20,3 cm. Již během růstu byl zřejmý vliv ošetření, kdy ošetřené rostliny měly zelenější barvu listů a začaly dříve kvést jak je patrné z dokumentující fotografie.
Kontrolní (vlevo) a ošetřené rododendrony mikroinjektážní technologií (vpravo)
Také u parametru mykorhizní kolonizace byl prokázán pozitivní efekt ošetřených rostlin vůči kontrole. Rozdíl mezi průměrnou hodnotou kolonizace kontrolní a ošetřené varianty je 30%.
Průměrný přírůstek rododendronů (cm) b
100 80
a
Průměrná kolonizace rododendronů (%) b
60 50 40
60
30 40
a
20
20
10 0
0 Kontrola
Rhodovit INJECT
Kontrola
Rhodovit INJECT
Závěr: Použití mikro-injektážní technologie bylo úspěšně vyzkoušeno a byly prokázány růstové efekty a mykorhizace ošetřených rostlin.
Ověření technologie – Rododendrony (aplikátor č. 2) – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2011 - 2012 Řešitel: Symbiom, s.r.o Metodika: Technologie ošetření mikro-injektážním přístrojem byly ověřena při ošetření kontejnerovaných rododendronů. Při ověření byl použit poupravený ruční aplikátor č. 2, kterým byl aplikován ke kořenům rostlin injektážní přípravek Rhodovit INJECT. Celková dávka byla 150 ml produktu aplikovaná pomocí deseti vpichů tak, aby byl rovnoměrně ošetřen celý kořenový systém v kontejneru, který byl 10 litrů. Ošetřeno aplikátorem bylo 10 ks rododendronů a 10 ks sloužilo jako kontrolní varianta. Pokus byl založen 31.10. 2011 a přes zimní měsíce byly rostliny kultivovány ve vyhřívaném skleníku. V květnu 2012 byl pokus vyhodnocen. Byly zjištěny přírůstky větví rostlin a náhodně vybráno 5 ks rostlin od varianty, kde byla zjištěna průměrná mykorhizní kolonizace. Stanovení kolonizace probíhalo vyhodnocením 100 laterálních kořínků z rostliny, které byly barveny pomocí kyselého fuchsinu. Statistické hodnocení bylo provedeno v programu Statistica 7 pomocí Fischer-LSD testu. Výsledky: Ošetření rostlin injektážním produktem prokázalo průkazný pozitivní efekt na růst rododendronů. Rozdíl mezi průměrným přírůstkem větví rododendronů kontrolní varianty a ošetřené varianty představoval 154,7 cm. Dále byl pozorován dřívější nástup kvetení ošetřené varianty před kontrolní variantou – srovnání viz obrázky níže.
Průměrný přírůstek rododendronů (cm) 500
b
400 a
300 200 100 0 Kontrola
Rhodovit Inject
Kontrola
Ošetřená varianta
Rovněž v parametru mykorhizní kolonizace byl prokázán statisticky významný rozdíl. Rozdíl mezi průměrnou kolonizací kontrolní varianty a ošetřenou variantou představoval 26,0%.
Průměrná kolonizace ERM (%) 40 b
35 30 25 20 15 10 5 0
a Kontrola
Rhodovit Inject
Závěr: Aplikace injektážního produktu pomocí mikro-injektážní technologie prokázala pozitivní vliv na růst a mykorhizaci ošetřených rostlin.
Ověření technologie – golf Brae Burn – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2011 Řešitel: ViaTerra LLC Metodika: Technologie účinnosti injektážního produktu Symbivit INJECT byla ověřena při aerifikačním ošetření golfového greenu v Brae Burn v USA. Injektážní produkt byl smíchán s křemičitým pískem v poměru 1:1 a byl aplikován při jarní aerifikaci. Sledovaná plocha byla rozdělena na dvě části, z nichž jedna byla ošetřena produktem a druhá sloužila jako kontrolní. Ošetřená plocha představovala plochu zhruba 550 m2. Výsledná dávka produktu na plochu byla 90g na m2. Po aplikaci byl povrch vykartáčován. Během sledovaného období nebyl trávník přihnojován. Před aplikací byly odebrány 4 vzorky ze sledované plochy a bylo provedeno stanovení mykorhizní kolonizace, sledována byla i přítomnost houby Pythium. Po 4 měsících po aplikaci byly z varianty odebrány 4 vzorky a byla vyhodnocena mykorhizní kolonizace a biomasa kořenů. Výsledky: Analýza vzorků před aplikaci: Vzorek 1: velmi málo spor, většina z nich náleží pravděpodobně buď houbě Pythium nebo odumřelé AM houbě se svraštělou cytoplasmou. Žádné známky arbuskul, vezikul nebo hyf. AM kolonizace: 0%. Vzorek 2: Vysoká hustota spor, z nichž většina náleží pravděpodobně buď Pythium nebo odumřelé AM houbě se svraštělou cytoplasmou. Žádné známky arbuskul, vezikul nebo hyf. Těžká infekce Pythium v mnoha tkáních. AM kolonizace: <10%. Vzorek 3: Žádné spory, abuskuly, vehikuly nebo hyfy. AM kolonizace: 0%. Vzorek 4: Žádné spory, abuskuly, vehikuly nebo hyfy. AM kolonizace: 0%.
Výsledky po aplikaci:
Průměrná kolonizace kořenů (%)
Průměrná sušina kořenů (g)
b
40
b
1,5
30 1 20
a
a
0,5
10 0
0 kontrola
Symbivit Inject
kontrola
Symbivit Inject
kontrola Symbivit Inject kontrola
Symbivit Inject
Závěr: Použití injektážního produktu ověřilo účinnost produktu a prokázalo účinnou kolonizaci trávníku i nárůst kořenové biomasy.
Průměrný přírůstek jírovec (cm) 140 120
a
a
Průměrný přírůstek lípa (cm) 80
b a
60
100 80
40
60 40
20
20 0
0 Kontrola
Injektáž jírovců v ulici Bygdoy alle
Měření přírůstků jírovce
Inject Systém
Kontrola
Injektáž lip
Inject Systém
Injektáž lip
Měření přírůstků lípy
Závěr: Technologie Inject System byla úspěšně vyzkoušena v ulicích města Osla a byl prokázán pozitivní efekt ošetření v případě lípy.
Ověřovací experiment technologie – žlutoroh jeřábolistý – Datum realizace pokusu: 2011 - 2012 Řešitel: Symbiom, s.r.o; Hanka Mochov s.r.o. Metodika: Vyvinutý endomykorhizní produkt Symbivit INJECT byl aplikován pomocí vyvinutého ručního manuálního aplikátoru č.1 k zasazeným rostlinám žlutorohu jeřábolistého v lokalitě Mochov. Rostliny byly vypěstovány ze semene a po 2 vegetační sezony pěstovány v květináčích. Poté byly vysazeny na písčitou lokalitu v blízkosti obce Mochov. Celkem bylo vysazeno 3500 sazenic žlutorohů. Byly založeny 3 varianty pokusu: 1. 200 kusů sazenic ošetřeno 2 vpichy, každý po 30g Symbivit INJECT 2. 200 kusů sazenic ošetřeno 4 vpichy, každý po 30g Symbivit INJECT 3. 200 kusů sazenic nebylo ošetřeno a bude sledováno jako kontrola Sazenice byly zasazeny v druhé polovině srpna, ošetření injektážním produktem proběhlo na přelomu srpna/září. Do směsi endomykorhizních hub byly přimíchány 3 izoláty získané od partnera Simbiotec z Portugalska adaptované na aridní oblasti. V září 2012 byl zjištěn celkový roční nárůst větví (vzhledem ke keřovitému charakteru rostlin) a byl proveden odběr vzorku kořenů pro zjištění mykorhizní kolonizace variant. Na zjištění kolonizace bylo odebrány vzorky kořenů z 5 kusů z varianty. Statistické zhodnocení variant probíhalo pomocí ANOVA v programu Statistica 7 testem – LSD multiple comparison test (P<0,05). Úsečky v grafech znázorňují směrodatnou odchylku. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné. Výsledky: Proměřením rostlin v září 2012 byla zjištěn průměrná celková přírůstek větví ošetřené a kontrolní varianty, která prokázala pozitivní vliv použité technologie na vzrůst ošetřených rostlin. Rozdíl mezi průměrnou velikostí ošetřené varianty a kontrolní varianty 21,4 cm.
Průměrné roční přírůstky žlutorohu (cm) 180
Průměrná kolonizace žlutorohu (%) b
a
70 60
150
50
120
b a
40
90
30
60
20
30
10
0
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Inject
Rovněž kolonizace ošetřených rostlin prokázala úspěšnost použité technologie při mykorhizaci vysazených rostlin i přes vysokou míru kolonizace kontrolních rostlin vlivem přirozené mykorhizy v prostředí.
Vysazené žlutorohy v září 2012
Závěr: Ošetření inektážním produktem Symbivit INJECt pomocí aplikátoru č.1 prokázalo pozitivní vliv na růst a mykorhizaci ošetřených rostlin.
Ověření technologie – slivoň (Francie) – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2011 - 2012 Řešitel: Inoplant, Francie Úvod: Starší stromy často trpí stresem, protože rostou ve špatných půdních podmínkách, kam patří malý objem půdy, půda s nízkou úrodností, nedostatek vody či půdní zhutnění. Také staré sadové stromy mají tendenci degenerovat kvůli utužení půdy. To vedlo k vývoji půdních injektáží s aplikací mykorhizních hub které mají za cíl zlepšení růstu ošetřených rostlin. Tyto technologie zahrnují použití hydraulického tlaku na injekci tekutých roztoků obsahující mykorhizní houby samotné, nebo spojené hnojivy pod povrch půdy do kořenové zóny. To také vede ke zkypření půdy. Nicméně, existuje málo vědeckých důkazů o účinnosti této technologie při zlepšování růstu a zdravotního stavu stromů. Appleton a kol. (2003) ukázal, že půdy kde byla provedena injektáž AM houby kolem kořenů červeného javoru byla zjištěno zvýšení kořenové kolonizaci AM houby, ale po šesti měsících, nebyl zjištěn žádný zjevný pozitivní vliv na růst stromů. Nicméně Rao a kol. (2006) uvádí zvýšenou délku kmenů stromu jilmu po injekci s houbami AM. Cílem tohoto experimentu bylo zjistit, zda injekce arbuskulárních mykorhizních hub (AM) obsažených v přípravku Symbivit INJECT v půdě kolem stromů může být přínosná, pokud jde o kořenové kolonizace injektovanými AM houbami a růst dřevin. Materiál a metody: Ošetření bylo provedeno ve švestkovém sadu (odrůda Mirabelle) v Forcelles-Saint-Gorgon, nedaleko Nancy (Francie). Stromy v sadu jsou 23 let staré, trpí stresem a jejich růst se téměř zastavil. Před provedením injektáže byly odebrány kořeny pro zjištění počáteční úrovně mykorhizace v říjnu 2011. Byly založeny 3 varianty pokusu. První varianta představovala ošetření injektážní technologií produktem Symbivit INJECT v dávce 1 litr připravené směsi na vpich a v počtu 3 vpichy na strom. Druhá varianta představovala pouze ošetření aerací (injektáž bez produktu) a třetí varanta představovala kontrolu.
V červenci 2012, byl vyhodnocen růst stromů a byly odebrány vzorky listů a kořenů pro vyhodnocení. Ve variantě bylo vždy na každém stromě změřeno 9 mladých výhonů, na kterých byla zjištěna celková délka a byl spočítán jejich průměr. Dále bylo odebráno 6 listů z každého stromu které byly smíchány dohromady v rámci varianty. Byla zjištěna jejich čerstvá a suchá hmotnost a byl stanoven relativní obsah vody pomocí vzorce: (čerstvá hmotnost - suchá hmotnost) / suchá hmotnost. Kořeny byly obarveny v methyl modři podle Grace and Stribley (1991) a intenzita kolonizace kořenů AM houbami (M%) byla stanovena podle Trouvelota a kol. (1986). Data byla analyzována pomoci ANOVA a průměry byly porovnány aby byl zjištěn statisticky významný rozdíl (LSD). Údaje kořenové kolonizace byly před analýzou arc-sinusem transformovány. Úsečky v grafech znázorňují směrodatnou odchylku. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné. Výsledky: Vyhodnocením variant bylo zjištěno, že došlo k výraznému nárůstu koruny, v případě kdy byly stromy ošetřeny injektážním produktem. Průměrná čerstvá hmotnost a relativní obsah vody v listech byly také zvýšen u ošetřených stromů injektážním produktem (tabulka 2). Úroveň kolonizace se oproti původnímu stavu v roce 2011 snížila, dále nebyl prokázán statisticky významný rozdíl mezi variantami. To bylo pravděpodobně způsobeno suchým počasím na jaře. Byl sice patrný trend vyšší mykorhizace u varianty ošetření injektážním produktem ale vlivem velkého rozptylu hodnot nebyl průkazný. se také neliší s porovnáním kolonizace před povedením injektáže. V červenci 2012 je patrný trend poklesu kolonizace na nižší úroveň ve všech variantách slivoní. Nicméně, průměrná intenzita kořenového kolonizace AM houbami byla vyšší ve variantě injektáže AM houbami ve srovnání s kontrolní stromy, ačkoli tento rozdíl nebyl statisticky významný. Tato tendence může vysvětlit pozitivní významný vliv na růst stromů ošetřených AM houbami.
Varianta
Délka výhonu (cm)
Průměr výhonu (cm)
Průměrná čerstvá váha listu (g)
Průměrná suchá váha listu (g)
Relativní obsah vody
Kontrola
6.5 ± 2.0 a
1.0 ± 0.3 a
0.287
0.125
1.298
Aerace
5.9 ± 1.0 a
1.1 ± 0.1 a
0.286
0.128
1.227
AM-injektáž
10.1 ± 1.3 b
1.4 ± 0.2 a
0.327
0.126
1.593
Výsledky růstových parametrů sledovaných slivoní
M%˝
Průměrná mykorhizní kolonizace slivoň, říjen 2011
40˝ 30˝
M%˝
Průměrná mykorhizní kolonizace slivoň, červenec 2012
20˝
a
a
20˝
10˝
10˝
5˝
0˝
a
15˝ a
0˝ aerace
AM injektáž
aerace
AM injektáž
Varianty slivoní, stav před a 9 měsíců po aplikaci
Říjen 2011, aerace
Červenec 2012, aerace
Říjen 2011, AM injektáž
Červenec 2012, AM injektáž
Závěr: Experiment provedený ve švestkovém sadu prokázal pozitivní výsledky na růstové parametry ošetřených stromů. Bibliografie: Appleton B, Koci J, French S, Lestyan M, Harris R (2003) Mycorrhizal fungal inoculation of established street trees. J Arboric 29: 107-110 Grace C, Stribley DP (1991) A safer procedure for routine staining of vesicular-arbuscular mycorrhizal fungi. Mycol Res 95: 1160-1162 Rao B, Marx DH, Jeffers B (2006) Response of oaks and elm to soil inoculations with mycorrhizal fungi and rhizobacteria in a nursery. Arboriculture and Urban Forestry 32: 62-66 Trouvelot A, Kough JL, Gianinazzi-Pearson V (1986) Mesure du taux de mycorhization VA d’un système radiculaire. Recherche de méthodes d’estimation ayant une signification fonctionnelle. In: Gianinazzi-Pearson V, Gianinazzi S (eds) Physiological and Genetical Aspects of Mycorrhizae. INRA Press, Paris, pp 217-221
Ověření technologie – ovocné stromy (Skierniewice) – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2010 - 2011 Řešitel: Symbiom, s.r.o Metodika: Technologie ošetření injektážním přístrojem byla ověřena při ošetření ovocných dřevin a keřů v sadu institutu INSAD ve Skierniewici v Polsku. Pokus byl založen 11. - 13.5.2010. Byl použit přípravek Symbivit INJECT v dávce 1,5 l na vpich pro stromy a 2 l na vpich pro keře. Stromy byly ošetřeny 3 vpichy, keře 2 vpichy. K ošetřené variantě byla vždy ustanovena i kontrolní varianta. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné. Byly založeny tyto varianty: 1) Třešeň – var. BÜRLAT, podnož B1/2, zasazena 2004, 10 stromů ošetřeno, 10 kontrolních stromů 2) Slivoň – var. SHIRO, podnož B2/5, zasazena 2004, 11 stromů ošetřeno, 11 kontrolních stromů 3) Černý rybíz – 10 keřů ošetřeno, 10 kontrolních keřů Výsledky: V průběhu roku 2011 byly vyhodnoceny výsledky tak, jak dozrávalo ovoce na jednotlivých druzích stromů. Ve všech případech bylo prokázáno, že aplikace přípravku Symbivit INJECT působí pozitivně na výnos plodu a kromě slivoní i na růstové parametry stromů (keřů).
Průměrná sklizeň – třešeň (kg) 1,6
b
Průměrný obvod kmene – třešeň (cm) 60 50
1,2
b a
40 0,8
30 a
20
0,4
10 0
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Průměrná sklizeň – slivoň (kg) 2,5 2
a
b
Průměrný obvod kmene – slivoň (cm) 50
1,5
30
1
20
0,5
10
a
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Průměrná sklizeň – černý rybíz (kg) 1,6 b
1,2
a
40
0
Inject
Průměrná plocha – černý rybíz (m2) b
1 0,8
a
Inject
a
0,6
0,8
0,4 0,4
0,2
0
0 Kontrola
Inject
Kontrola
Inject
Ošetřené třešně
Ošetřené slivoně
Ošetřené černé rybízy
Závěr: Ošetření injektážním produktem prokázalo pozitivní vliv použité technologie na výnos ošetřených plodin.
Ověření technologie – jabloň, hrušeň, vinná réva (Rýhovací aplikátor) – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2012 Řešitel: Symbiom, s.r.o Metodika: Technologie ošetření injektážním produktem pomocí rýhovacího aplikátoru byla ověřena při ošetření ovocných dřevin v sadu a vinici ve Valticích. Tyto plochy vlastní Střední odborná škola vinařská a Střední odborné učiliště zahradnické, která spolupracovala při zakládání a vyhodnocení pokusu. Rýhovacím strojem byly ošetřeny tyto plodiny: hrušeň, jabloň, červená (Zweigeltrebe) a bílá (Ryzlink rýnský) odrůda vinné révy. Ke každé plodině byla založena varianta: 1) 200 g Symbivit INJECT na 1m prokypření 2) 100 g Symbivit INJECT na 1m prokypření 3) pouze prokypření 4) kontrola Aplikace produktu v případě jabloní a hrušní probíhala z obou stran ošetřeného řádku, tedy výsledná dávka byla dána součtem prokypření obou stran. V případě vinné révy bylo prokypření pouze z jedné strany. Počet ošetřených dřevin: Jabloň: kontrola: 43 ks; prokypření: 46 ks; dávka 0,1 kg: 44 ks; dávka 0,2 kg: 45 ks Hrušeň: kontrola: 36 ks; prokypření: 32 ks; dávka 0,1 kg: 26 ks; dávka 0,2 kg: 29 ks Vinná réva (Zweigeltrebe): kontrola: 62 ks; prokypření: 60 ks; dávka 0,1 kg: 56 ks; dávka 0,2 kg: 23 ks Vinná réva (Ryzlink rýnský): kontrola: 61 ks; prokypření: 66 ks; dávka 0,1 kg: 57 ks; dávka 0,2 kg: 61 ks Sledované kvantitativní parametry byly u jabloně a hrušně – průměrná hmotnost plodu, kdy bylo z každé varianty náhodně sebráno 100 plodů a zjištěna hmotnost. V případě vinné révy byla stanovována hmotnost 100 ks bobulí, které byly náhodně sebrány z dané varianty, počet opakování byl 20 měření na variantu. Kvalitativní parametry plodů byly sledovány podle druhu plodiny. V případě jablek byla sledována hodnota pH, veškeré titrovatelné kyseliny, kyselina jablečná, cukernatost. V případě hrušek byla sledovány parametry cukernatost a pevnost slupky. V případě vinné révy to byly refraktometrické stupně, stupně normovaného moštoměru, kyseliny (veškeré titrovatelné), pH, vypočítaný obsah asimilovatelného dusíku.
Rozdrcením a odstředěním byla získána šťáva z plodů při pěti opakování na variantu a analyzována na vybrané parametry. Ze získaných pěti výsledků byla stanovena průměrná hodnota a variabilita vyjádřena směrodatnou odchylkou. Analýza byla provedena v Ústavu posklizňové technologie zahradnických produktů Zahradnické fakulty Mendlovy univerzity. Statistické zhodnocení variant probíhalo pomocí ANOVA v programu Statistica 7 testem – LSD multiple comparison test (P<0,05). Úsečky v grafech znázorňují směrodatnou odchylku. Sloupce dané varianty označené stejnými písmeny nejsou statisticky rozdílné Pokus byl založen 26.3. 2012 a byl vyhodnocen v září 2012. Výsledky: Vyhodnocení výsledků v případě jabloně prokázalo pozitivní vliv technologie na výnos a to u všech variant v porovnání s kontrolou. Nejvyšší výnos představovala varianta 100 g produktu na metr ošetření. Průměrná hmotnost plodu jabloně (g) 240 220
b
b
b
200
a
Varianta
pH
K jablečná (%) z veškerých kyselin
Sacharóza (°Bx)
kontrola
3,80±0,07c
0,42±0,08b
15,3±1,2ab
Dávka 100 g
3,62±0,02a
0,52±0,06ab
15,5±0,7a
Dávka 200 g
3,77±0,04bc
0,46±0,04ab
15,1±0,2ab
3,69±0,13
0,59±0,18
13,2±2,1b
Prokypření
180
ab
a
Kvalitativní parametry plodů jabloní
160 140 120 100 dávka 0,1
dávka 0,2
prokypřený
kontrola
Kvalitativní analýzou byla statisticky prokázána nejvyšší hodnota pH kontrolní varianty v porovnání s nejvýnosnější variantou – dávkou 100 g. Dále pak byla zjištěna nejnižší hodnota kyseliny jablečné v kontrolní variantě. Kyselina jablečná přispívá ke kyselé chuti zelených jablek a její obsah klesá se zvyšující zralostí ovoce. V případě hrušní a vinné révy odrůdy Zweigeltrebe nebyl prokázán žádný statisticky významný rozdíl ve velikostech plodů ošetřených variant a kontrolní varianty. Průměrná hmotnost plodu hrušní (g) 180 170 160
a
a a
150
a
140
Varianta
pevnost (N)
Cukernatost (°Rf)
kontrola
56,5±13,3a
14,7±0,6a
Prokypření
48,7±15,8a
15,1±0,6ab
Dávka 100 g
57,2±21,0a
15,3±1,4ab
Dávka 200 g
39,8±6,5a
15,9±1,0b
Kvalitativní parametry plodů hrušní
130 120 110 100 dávka 0,1
dávka 0,2
prokypřený
kontrola
Kvalitativní analýzou hrušek byla statisticky prokázána nejvyšší hodnota cukernatosti v dávce 200 g produktu v porovnání s kontrolní variantou. V případě pevnosti slupky, nedošlo ke statistickému prokázání rozdílu, ale byl sledován trend v případě dávky 200 g odpovídající nejméně pevné slupce. Průměrná hmotnost 100 bobulí révy ZW (g) 210 200 190
a a
a a
180
Varianta
°RS
°NM
kyseliny [g/l]
pH
FAN mg/l
kontrola
20,6
19,6
8,69
3,26
243,3
Prokypření
21,6
20,7
9,73
3,27
167,2
Dávka 100 g
22,4
21,7
7,51
3,52
197,7
Dávka 200 g
22,6
21,9
8,37
3,49
258,5
Kvalitativní parametry bobulí vína ZW
170 160 150 dávka 0,1
dávka 0,2
prokypřený
kontrola
Kvalitativní analýzou vinné révy ZW bylo zjištěno že varianty ošetřené injektážním produktem mají vyšší cukernatost a nejvyšší hodnotu pH v porovnání s kontrolní a prokypřenou variantou.
Založené varianty jabloň
Založené varianty hrušeň, detail půdy po prokypření
Založené varianty vinné révy (ZW vlevo, RR vpravo)
Založené varianty vinné révy ZW před sklizní
Založené varianty vinné révy RR před sklizní
Závěr: Technologie ošetření injektážním produktem pomocí hloubkového kypřiče – byla ověřena při ošetření ovocných dřevin v sadu a vinici ve Valticích, kde byl prokázán pozitivní efekt v případě výnosu i kvalitativních parametrů plodů.
Ověření technologie – slivoň (Tlumačov) – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2010 - 2011 Řešitel: Symbiom, s.r.o Metodika: Technologie ošetření injektážním přístrojem byly ověřena při ošetření slivoní v sadu soukromého pěstitele nedaleko obce Tlumačov na Zlínsku. Pokus byl založen 9.6. 2010. Byl použit přípravek Symbivit INJECT v dávce 1,5 l na vpich. Byly vyzkoušeny 2 parametry – tlak vzduchu rozrušujícího půdní profil a počet vpichů. Tlak byl volen 100 nebo 50 bar a injektovány byly 3 nebo 6 vpichů. Byly založeny tyto varianty: 1) 10 stromů bylo ošetřeno tlakem 100 bar a injektováno 3 vpichy (3V-100) 2) 10 stromů bylo ošetřeno tlakem 100 bar a injektováno 6 vpichy (6V-100) 3) 10 stromů bylo ošetřeno tlakem 50 bar a injektováno 3 vpichy (3V-50) 4) 10 stromů bylo ošetřeno tlakem 50 bar a injektováno 6 vpichy (6V-50) 5) 12 stromů bylo neošetřeno a představují kontrolní variantu (kontrola) Stromy byly označeny podle variant a vzhledem k času založení, kdy v době injektáže v roce 2010 byly již velké plody na stromě, byl pokus vyhodnocen až v roce 2011. Z každé varianty byly vybrány tři stromy ze kterých byly kompletně otrhány všechny plody které byly zváženy. Byla zjištěna čerstvá hmotnost. Dále byly sebrány plody ze všech stromů ve variantě v celkovém množství zhruba 5 kg na variantu a byly podrobeny kvalitativní obsahové analýze. U jednotlivých variant švestek byla zvážena hmotnost 50 bobulí (g), poté byly švestky zhomogenizovány, pulpa sedimentována a z daného vzorku byla stanovena cukernatost (°Brix), obsah veškerých titrovatelných kyselin (g.l-1), asimilovatelného dusíku (mg.l-1) a pH. Dále pomocí HPLC stanoven rozbor konkrétních cukrů a kyselin (g.l-1), kyselina šikimová (mg.l-1). Výsledky: Z výsledků celkových čerstvých hmotností sklizených plodů je zřejmý statisticky průkazný rozdíl mezi oběma variantami se šesti vpichy v porovnání s kontrolní variantou. Statisticky významný rozdíl v použití rozdílných tlaků se neprokázal.
Průměrná čerstvá hmotnost plodů (kg) 100
b
80
b ab
60
a
a
3V-50
kontrola
40 20 0 6V-100
3V-100
6V-50
Z detailní kvalitativní analýzy vyplývá, že kontrolní varianta vykazovala nejnižší hmotnost plodů ze všech zkoumaných variant (618,3 g). Po zhomogenizování plodů byla vzniklá pulpa u kontrolní varianty také vizuálně nevyzrálá (olivově zelená), než ostatní varianty. Cukernatost byla rovněž nejnižší (3,2 °Brix). Analýzami vzorků kapalinovou chromatografií se potvrdil i nejnižší obsah glukózy (63,38 g.l-1) a fruktózy (25,32 g.l-1).
Varianta
Hmotnost Cukernatost Sacharosa 50 plodů (g) (°Brix) (g.l-1)
Glukóza (g.l-1)
Fruktóza (g.l-1)
3V-50
659,6
4,1
16
81,34
37,19
3V-100
676,5
4,1
13
79,47
33,45
6V-50
635,1
3,8
18
81,34
36,78
6V-100
622,8
3,9
10
79,63
32,92
kontrola
617,5
3,2
11
63,38
25,32
Vybrané kvalitativní parametry sledovaných variant
Při stanovení veškerých titrovatelných kyselin a pH nebyly pozorovány příliš markantní rozdíly. Kontrolní varianta naopak vykazovala nejvyšší hodnoty asimilovatelného dusíku (288,2 mg.l-1), což mohlo být způsobeno nevyzrálostí suroviny. Asimilovatelný dusík je důležitý při výživě kvasinek, nízký obsah asimilovatelného dusíku má za následek snížení průběhu kvašení. Čím vyšší cukernatost, tím klesá množství amonných iontů. Hodnoty kyseliny šikimové byly u kontrolní varianty nejnižší (18,83 mg.l-1). Tato kyselina je důležitým prekursorem aromatických aminokyselin, ze kterých se odvozují fenolické látky.
Kontrolní strom (vlevo), slivoň ošetřená injektážní technologií (vpravo)
Pohled na kontrolní řádky (vlevo) a řádky ošetřené injektážní technologií varianta 6V-100 (vpravo)
Závěr: Použití injektážní technologie prokázalo pozitivní vliv na kvantitativní a kvalitativní parametry ošetřených slivoní. Ze získaných výsledků lze konstatovat, že kontrolní varianta vykazovala v mnoha základních parametrech nejnižší hodnoty oproti ostatním variantám.
Ověření technologie – olivovník, mandlovník, vinná réva – Datum realizace pokusu: vegetační sezóna 2012 Řešitel: Biotechnology Center Borj Cedria-CBBC, Tunisko Metodika: Cílem pokusu bylo prokázat vliv injektážního přípravku Symbivit INJECT při inokulaci kontejnerovaných sazenic vinné révy, olivovníku, mandlovníku a citrusu. Pokus byl založen ve spolupráci s biotechnologickým centrem Borj Cedria-CBBC v Tunisku. Vlastní pokus byl realizován ve školce Mabrouka. Cílové rostliny byly vybrány na základě druhů, které se nejčastěji pěstují v Tunisku. Jedná se o olivovník, který představuje zhruba 2/3 obdělávané plochy na ploše 1,7 miliónu hektarů. Další významná plodina je mandlovník, který zaujímá plochu 190 000 hektarů a vinná réva na čtvrtém místě která po datlové palmě zaujímá plochu 30 000 hektarů. Byly použity tyto kultivary a počty: 1) vinná réva (odrůda Italia): 21 ks ošetřeno, 21 ks kontrola 2) olivovník (odrůda Chumlali): 25 ks ošetřeno, 25 ks kontrola 3) mandlovník (odrůda Mazetto): 25 ks ošetřeno, 25 ks kontrola Aplikace produktu měla být provedena aplikátorem č. 1, ale bohužel se nepodařilo včas získat povolení pro dovoz a tak byly rostliny ošetřeny ručně pomocí kolíku. Dávkováno bylo 30g na rostlinu a to tak, že byla dávka rozdělena do 4 aplikačních děr. Rostliny byly pěstovány ve 2l květináčích v substrátu složeném z 50% rašeliny a 50% písku. Byly pěstovány v běžných podmínkách s ostatními rostlinami. Po 4 měsících proběhlo vyhodnocení rostlin, kdy bylo na rostlinách sledováno: délka kmínku, čerstvá váha kořenů, čerstvá a suchá hmotnost nadzemní části z 20 rostlin z každé varianty. Výsledky: Proměřením vinné révy byl zjištěn pozitivní efekt ošetření injektážním mykorhizním přípravkem Symbivit INJECT ve všech sledovaných parametrech kromě svěží hmotnosti kořenů. Největší rozdíl byl pozorován u délky kmínku.
Průměrná délka kmínku vinné révy (cm) 120
b
100 80 60
a
Vinná réva
Prům. délka kmínku (cm)
Ošetřené rostliny
104,3
Kontrolní rostliny
51,8
Svěží hmotnost nadzemní části (g)
b
a
Suchá hmotnost listů (g)
Prům. svěží hmotnost kořenů (g)
96,3
b
54,4
b
38,9
a
66,3
a
41,5
a
38,5
a
Zjištěné parametry vinné révy
40 20 0 Kontrola
Symbivit INJECT
V případě olovníku byl prokázán pozitivní vliv inokulace na všechny zjišťované parametry, tj. délku kmínku, svěží hmotnost kořenů a svěží hmotnost listů. Průměrná délka kmínku olivovníku (cm) 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
Olivovník
Prům. délka kmínku (cm)
Prům. svěží hmotnost kořenů (g)
Ošetřené rostliny
85,13 b
34 b
Kontrolní rostliny
72,19
b a
a
13,9 a
Svěží hmotnost nadzemní části (g) 93,2
b
37,5 a
Zjištěné parametry olivovníku
Kontrola
Symbivit INJECT
Také v případě mandlovníku byl prokázán průkazný pozitivní vliv na růst rostlin v parametrů délka kmínku. Další parametry rostlin nebyly stanoveny. Průměrná délka kmínku mandlovníku (cm) 60 b
50 40
a
30 20 10 0 Kontrola
Symbivit INJECT
Závěr: Ošetření produktem Symbivit INJECT prokázalo pozitivní vliv na růstové parametry vybraných druhů rostlin. Největší rozdíly byly zaznamenány u délky kmínku vinné révy, olivovníku a mandlovníku.
Rozdíl v růstu rostlin olivovníku (vlevo ošetřená, vpravo kontrola)
Rozdíl v růstu rostlin vinné révy (vlevo ošetřená, vpravo kontrola)
