Odběry krve Tělní tekutina, nejčastěji odesílaný materiál k vyšetření, podává přesné informace o stavu vnitřního prostředí. Obecné zásady odběru krve: – obvykle ráno nalačno – předem označené zkumavky – štítek lepit spirálovitě – k odběru jehly dostatečného průsvitu – dobře vyplněná žádanka + uvést někdy některé léky, které N užívá Chyby při odběru krve: – hemolýza – znečištěná jehla, mokrá zkumavka, prudké nasávání/vstřikování krve do zkumavky, třepání se zkumavkou, krev v lednici, odebraná krve na radiátoru nebo slunci – delší dobu zaškrcená končetina – pozdní dodání do laboratoře – záměna zkumavek – nesterilní odběr Vyšetřujeme: – plnou krev – plazmu – nutný protisrážlivý prostředek, krev je nutno rotací promíchat! – sérum – srážlivá krev. Krevní koláč se oddělí od séra, proto rychle do laborky Dle místa odběru: – venózní – kapilární – arteriální Protisrážlivé prostředky: 1) Wintrobova směs – směs šťavelanu amonného a draselného rozpuštěné v destilované vodě + přidáno 40% formalin. Roztok se odpařuje a na stěnách vytváří bílé krystalky šťavelanů 2) heparin – pro stabilizaci 5 ml krve stačí 0,02-0,04ml koncentrace 5000j/1ml 3) citronan sodný – 3,8% 4) K2 EDTA (etylendiamin, tetracelová sůl) – 0,1ml na 2ml krve. Tenký film na stěnách zkumavky (vznikne vysrážením dvojdraselné soli) Srážlivá krve – ve zkumavkách krasten = plastová zrníčka, která způsobí, že nedojde k uvolnění fibrinu a tím k hemolýze. V jedné zkumavce cca 3-5 zrníček. NETŘEPAT!!! Zkumavky: – skleněné (sterilní jsou se zátkou – plastové – skleněné kapiláry – odběrové systémy – Vacuette-Vacutainer ….
Hematologická vyšetření A) imunohematologické a izoserologické vyšetření - určení krevní skupiny a Rh faktoru - venozní krev + speciální žádanka - křížová zkouška velká = ERY dárce + plazma příjemce = ověření, zda-li N nemá protilátky, které by reagovaly na ERY příjemce a udělaly by hemolýzu malá = ERY příjemce + plazma dárce = zda-li darovaná plazma neobsahuje protilátky B) hemokoagulační Quickův test (protrombinový čas): - nesráživá krev
- fyziologická hodnota – 11-15 s - léčba kumariny = prodlouženo INR: – poměr mezi časem vyšetřované plazmy a časem kontrolní plazmy – fyziologická hodnota – 0,8-1,2 – zvýšený při léčbě kumariny - 2-3 aPTT (aktivovaný Parciální Tromboplastinový Test) – vyšetření činnosti faktorů IX, XI, XII – nesrážlivá krev – norma – 30-40s – při léčbě heparinem - prodloužený čas Krvácivost – srážlivost: – Dukeův test – přímo v laboratoři nebo ambulanci. Vpich do ušního lalůčku, sleduje se za jak dlouho se zastaví krvácení, každých 30s se stírá kapka krve filtračním papírem. Testuje funkci TROM – fyziologická hodnota = 2-7 minut Trombinový čas – testuje poslední fázi koagulace, prodloužené při léčbě heparinem a snížené koncentraci fibrinogenu – 5 ml krve nesrážlivé Rekalcifikační test: – do stříkačky – 0,2 ml 3,8% citronanu sodného + 1,8ml krve – přestříknout do zkumavky a rychle do laborky – na žádance přesný čas odběru – při terapii heparinu Fibrinogen: – hladina fibrinogenu v plazmě – nesrážlivá krev – fyziologicky 2-4g/l D-dimer: – fibrindegradační produkty – rozpadem fiibrinu – přítomnost sraženiny v těle – trombus, embolie C) hematologické vyšetření Krevní obraz: – informace o množství a charakteru krevních elementů a tekuté složky krve – RBC (ERY) – M 4,2-5,8 x 1012/l, Ž 3,5-5,18 x 1012/l – WBC (LEU) – 4,5-11 x 109/l – PLT (TROM) – 150-300 x 109/l – Hb – M 130-170 g/l, Ž 120-160 g/l – Hct – M 0,37-0,50, Ž 0,34-0,47 – diferenciální rozpočet LEU – agranulocyty (monocyty – makrofágy=nespecifická buněčná imunita; lymfocyty – B (protilátky = specifická látková imunita) a T (specifická buněčná imunita) – cytotixické, helpery, supresorové) – granulocyty ( neutrofily – nespecifická buněčná imunita; eosinofily – alergici; bazofily – mastocyty = příznaky alergické reakce uvolněním histaminu z buněk) – nesrážlivá krev Sedimentace ERY (FW – Fahrea a Westergreena): – M 1-13 mm/h, Ž 1-20 mm/h – penízkovatění ERY = tvorba agregátů – zvýšeno při infekcích, graviditě
– sníženo - polyglobulie LE buňky: – 5 ml do zkumavky s krastinem a 20minut třepat – protilátky proti kolagenním vláknům pojiva – autoimunní choroby (lupus erytomatodes) Vyšetření sternální punkce a trepanobiopsie: – cytologické a histologické vyšetření
Biochemická vyšetření A) ionty: – Na, K, Cl, Mg, Fe, Ca, Cu, P, I, HCO – srážlivá krev Resopční křivka Fe: – vyšetření hladiny plasmatického Fe po zátěži – na lačno po užití preparátu železa – nalačno srážlivá krev, první odběr před podáním léku, 2. a 3. za 1-3 hodiny po užití léku – M – 12-27 μmol/l, Ž – 10-24 μmol/l B) metabolity: – urea (bílkoviny), kreatinin (svalový kreatinin – zásobárna energie a nebílkovinného N), kyselina močová – bilirubin – normálně do 17 μmol/l C) bílkoviny: - celková bílkovina – ne manžety pro odběr krve nebo cvičení paží. Koncentrace závislá na poloze N při odběru – u dospělého 65-85 g/l - CRP – aktivita zánětu. Při AIM, revmatických chorobách, fyziologicky do 10 mg/l - imunoglobuliny - ELFO – kvantitativní posouzení bílkovin - srážlivá krev D) enzymy: Transaminázy: - enzymy vázané na buňky jater a myokardu – ALT (alaninaminotransferáza) – jaterní buňka a jejím poškozením se nadměrně vyplavuje – AST (aspartátaminotransferáza) – buňky myokardu, jejím poškozením se vyplavují zvýšeně – LD (laktátdehydrogenáza) – na jaterní i myokardiální buňce – onemocnění jater a IM – CK (kreatinkináza) – ve svalové buňce – poškození svalu (i i.m. injekce) = zvýšení v séru – CK-MB – myokardiální frakce - specifická jen pro myokard – AMS (pankreatická amyláza) – v S a U – fosfatáza – enzymy pro metabolismus sloučenin s kyselinou fosforečnou – ALP (alkalická fosfatáza) – vychytávaná jaterním parenchymem, vylučováno do žluči – ACP (kyselá fosfatáza) – kosti a ca prostaty – srážlivá venózní krev E) lipidy: – stanovuje hladinu MK, srážlivá krev, nalačno – cholesterol – 3,1-5,8 mmol/l – lipidové spektrum – TAG – do 1,8 g/l F) glukóza: Glykemie: OGTT (Orální Glukozo Toleranční test): – krev nalačno, poté vypije 75g glukózy, další náběry za 1 a 2 hodiny Glykovaný hemoglobin:
– glukoza navázaná na Hb, hodnocení glykemie retrospektivně 6-8 týdnů – 2-3 ml krve nesrážlivé Glykosylovaný protein: – glukoza vázaná na krevní bílkovinu, zpětně hladinu glykemie v průběhu 12 dnů – 5 ml srážlivé krve G) hormony: – T3, T4, TSH, freeT4 – kortizol – FSH – dg. poruch m. cyklu – HCG – potvrzení a monitorování gravidity – 5-10 ml srážlivé krve H) tumorové markery: – hladiny antigenů, které tvoří maligně přeměněné buňky – AFP (alfafetoprotein) – ca jater – CEA (karcinoembryonální antigen) – malignity GIT, plic, ovárií – CA 15-3 – ca prsu – CA 50 – tumory GIT – C 19-9 – zhoubné onemocnění tlustého střeva, žaludku a pankreatu – CA 125 – průkaznost nádorů ovária – CA 72-4 – průkaznost maligních onemocnění žaludku, pankreatu, tlustého střeva – PSA – prostata – 5-10 ml srážlivé krve CH) léky: – monitoring léčby – hladina digoxinu (1-1,5 ml srážlivé krve), fenobarbitalu I) toxiny: – např. alkohol – ne dezinfekci s obsahem alkoholu nebo eteru – předem vyhřátá zkumavka až po gumovou zátku, nakonec se zalije voskem – vždy 2 zkumavky J) krevní plyny (ASTRUP): – vyšetření ABR – krevní plyny – pO2, pCO2 – pH – nárazníkový systém – BE (base excess) – množství zásad, bází, které je třeba ubrat nebo dodat na 1l vyšetřované tekutiny, aby se pH normalizovalo – kladná hodnota = přidat kyseliny, aby pH kleslo k normě; záporná = kolik přidat zásad, aby se pH zvedlo k normě – kapilární krev – heparinizovaná kapilára, nesmí obsahovat vzduch, transport do laboratoře ve vodorovné poloze – arteriální krev – speciální odběrová souprava – stříkačka obsahuje heparin, nesmí být bubliny, krev se promíchá otáčením
Mikrobiologické vyšetření Potvrzení etiologie infekčního prostředí. Hemokultivace: – průkaz mikrobů v krvi
– – – –
speciální odběrové nádoby místo odběru dokonale očistit alkoholem stěr místa vpichu před dezinfekcí ihned do laborky
Serologické vyšetření Stanovení hladiny protilátek v séru. BWR (Bordet-Wassermannova reakce) – syfilis WR (Widalova reakce) – protilátky proti původci břišního tyfu PBR (Paul-Bunnelova reakce) – infekční mononukleoza Revmatoidní testy: – ASLO (antistreptolyzinový titr O) – streptokok – LFR (latex fixační reakce) – revmatismus – CRP – zánětlivý proces anti HIV HbsAg – protilátky proti původci HVB
Odběry moče Zásady odběru moče: – důkladná hygiena genitálu – předem označené nádoby – žádanka Chyby při odběru: – nedodržení zásad techniky odběru – špinavé nádoby, bakteriální kontaminace, nesprávné uložení na OJ při sběru moče, nedostatečná hygiena, nepřesná doba odběru, nepřesné množství – nepřesné odečtení množství – léčiva – dle ordinace L vysadit
Fyzikální vyšetření – množství, barva, zápach, pěna, zákal, pH, hustota, příměsi – pěna – žlutá až hnědožlutá = zvýšená hladina bilirubinu, bezbarvá pěna = bílkovina nebo glukoza v moči – pH – 5-7 – ovlivněno potravou
Biochemické vyšetření – chemický a mikroskopický rozbor moče – bílkovina, glukoza, ketolátky, žlučová barviva, krevní barvivo, AMK, AMS, kreatinin, anorganické látky, dusíková bilance, osmolalita, hormony, léky Močový sediment: – odběr první ranní moče – pomocí diagnostických proužků, pomocí činidel, mikroskopická analýza – moč se centrifuguje, pak se hodnotí ERY, LEU, soli (šťavelan sodný, uhličitany, soli kyseliny močové), epitelie – patologické je – válce, kvasinky, bakterie, zmnožení ERY, LEU Hamburgerův sediment Bilanční sběr moče na odpady iontů, urey, kyseliny močové, bílkoviny, kreatininu, glykosurie: – sběr 24 hodin, ráno se N vymočí do WC, pak do dalšího rána sbírá do určené nádoby. Ukončíme sběr, promícháme, změříme a změříme hustotu
– odesíláme zkumavku + žádanku Bence-Jonesova bílkovina: – normálně se nevyskytuje, způsobeno poruchou syntézy imunoglobulinů – neúplné moleky mají nízkou molekulární hmotnost a tím přechází do moče. – První ranní moč cca 50ml + zkumavka srážlivé krve Odběr moči na kyselinu vanilmandlovou (VMK): – metabolit katecholaminů – 3 dny před vyšetřením vyloučit kakao, kávu, čokoládu, čaj, ovoce, vanilkové pečivo, ne léky s kofeinem, adrenalin, ne STRES – 3.den sbírá moč po dobu 24 hodin – 4.den se promíchá, změří množství a odebere vzorek cca 50ml + na žádanku napsat množství Sběr moče na 17-OH ketosteroidy (17-OHCS): – vylučování hormonů nadledvin, jejich metabolitů – vysadit 2-3 dny léky – po 24 hodinách promíchat, odeslat vzorek, na žádance diuréza Sběr moče na estriol: – v graviditě, při podezření na hypotrofii plodu – 24 hodin, promíchat a odeslat vzorek – na ádance výška a váha, celková diuréza, délka gravidity v týdnech Toxikologie: – pracovníci v rizikových procesech, odebírá se na konci pracovní doby v druhé polovině týdne Clearance kreatininu: – zjišťuje glomerulární filtraci – funkční vyšetření ledvin – clearance endogenního kreatininu – stanovuje se na podkladě koncentrace kreatininu v moči a v séru – sběr 24 hodin, ráno promíchat, odebrat množství + zkumavka krve na kreatinin, na žádanku výška a váha N
Další dělení vyšetření: – kvalitativní – pouze přítomnost určité látky – moč chemicky a sediment, diagnostické papírky – kvantitativní – množství určité látky – sběry moče za určité časové období a sleduje se množství té které dané látky – Hamburgerův sediment, sběry moče na VMK, kreatininovou clearance …..
Mikrobiologické vyšetření Bakteriologické vyšetření: – střední proud moče x cévkovaná moč, suprapubická punkce Citlivost na ATB: – pro potvrzení citlivosti ATB léčby