Nosocomialis infekciókat okozó baktériumok tipizálásának jelentősége a kórházi járványok felderítésében Pászti Judit OEK Fágtipizálási és molekuláris epidemiológiai osztály
Tipizálás - általában Bakteriológiai tipizálási eljárások: előzetesen izolált és identifikált baktérium fajok speciesen belüli differenciálására szolgáló eljárások, melyek segítségével két vagy (több), azonos specieshez tartozó baktérium izolátum összehasonlítható. Fenotipizálás
Genotipizálás
Molekuláris tipizálás –molekuláris epidemiológia alkalmazása • Meghatározható baktérium speciesek egyes klónjainak elterjedése időben és térben; • Elkülöníthetők járványosan és endémiásan előforduló baktérium klónok; Monitoring, • fertőzés terjedésének módjának és útjának nyomonkövetése; • Multirezisztens és fokozott virulenciájú „veszélyes törzsek” azonosítása, figyelem felhívása; Időben-térben elhúzódó „sporadikus” esetek Retrospektív vizsgálat
Járvány kialakulása során beteg, hordozó, környezet „real time” vizsgálat
speciesekre, genetikai klónokra, valamint „rizikó osztályokra” vonatkozóan
A tipizálási módszerek kritériumai • Stabilitás • Tipizálhatóság, diszkriminativitás • Epidemiológiai adatokkal való összhang (sporadikus-járványos) • Reprodukálhatóság • Teszt anyag minimum mennyisége (n=100)
A megfelelés kritériumai • Flexibilitás (széles species spektrum kis módosítással) • Gyorsaság • Műszer-reagens igény • Kivitelezhetőség • Ár • Számítógépes értékelés – adatbázis építés
A járványügyi tipizálás szintjei • Lokális szint: kórház, egyes részlegek, hosszú ápolási intézmény, egészségügyi otthon, stb. fenotípusos jegyek (pl. sajátos antibiotikum rezisztencia kép); • Országos szint – tipizáló laboratóriumok, referencia laboratóriumok – adatbázisok-klónok azonosítása • Globális szint – nemzetközi munkacsoportok és adatbázisok – nemzetközileg szélesen terjedő klónok azonosítása – „alert” rendszerek
Tipizálási módszerek DNS alapú módszerek
PCR alapú módszerek RAPD AP-PCR (ERIC1;2) Pl. Enterobacter spp.
Nem-PCR alapú módszerek Plazmid tipizálás PFGE Klebsiella spp. S.aureus, MRSA, Pseudomonas spp., Acinetobacter spp., E. coli, Citrobacter sp., Streptococcus spp.
Szekvencia alapú módszerek SLST (egy locus) MLST (háztartási gének) S. pyogenes, N. meningitidis, S. aureus, Klebsiella spp.,
Módszerek •RAPD analízis: tetszőleges rövid primerek használata véletlenszerű (előre nem ismert) DNS szakaszok amplifikációjához nem túl szigorú PCR feltételek mellett. ERIC primerek; •PFGE: a teljes genom makrorestrikciós profilvizsgálata gélelektroforézissel, speciális, váltakozó irányú elektromos erőtér használatával; •MLST: meghatározott számú háztartási gén (lassan változó gének, melyek nincsenek kitéve a szelekciós nyomásnak) allél variációi alapján szekvencia típusok (ST) meghatározása.
Tipizálási módszerek
Molecular concepts associated with genetic variability
A. van Belkum et al.: Guidelines for the validation and application of typing methods for use in bacterial epidemiology, Journal compilation 2007 Clinical Microbiology and Infectious Diseases, CMI, 13 (Suppl. 3), 1–46.
Módszerek összehasonlítása Módszer
Diszkrimi Tipizál nativítás hatóság (%)
Reprodukál Idő hatóság
Költség
PFGE
jó
100
jó
2-4nap
átlagos
Ribotipizálás
alacsony
100
jó
3-4nap
átlagos
RAPD
átlagos
70-80
alacsony
<1nap
alacsony
AFLP
jó
100
jó
2-3nap
átlagos
MLST
Nagyon jó*
100
jó
2-3nap
magas
Szerotipizálás
átlagos
60-70
közepes
<1nap
alacsony
*: species függő
Vizsgálataink területe - PFGE •Acinetobacter spp.
•Serratia marcescens
•Enterobacter spp.
•koaguláz negatív Staphylococcus
•Enterococcus spp.
•Streptococcus pyogenes
•Escherichia coli
•Streptococcus pneumoniae
•Legionella spp.
•Stenotrophomonas maltophilia….
•Pseudomonas spp. Klebsiella spp – nemzeti adatbázis MRSA– nemzeti adatbázis
Vizsgálataink területe – Szekvencia meghatározás •Staphylococcus aureus törzsek spa gén tipizálása, MLST •Klebsiella pneumoniae törzs MLST vizsgálata •Streptococcus pyogenes törzs emm gén tipizálása •Neisseria meningitidis PorA gén variábilis régióinak (VR1, VR2 és VR3 ) szekvenálása •ESBL rezisztencia gének azonosítása Enterobacteriaceae törzseknél •Klebsiella spp. •Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter cloacae, Proteus mirabilis •Antibiotikum rezisztencia típus meghatározása (több, mint 60 különböző rezisztencia determináns meghatározása)
A kórházi járványok felderítése, • • • •
a járvány láncolatának nyomonkövetése, forrás azonosítás; „kórházi flóra” monitorozása; virulens klónok elterjedtségének vizsgálata; antibiotikumokkal szembeni rezisztencia és egyéb virulenciát fokozó markerek terjedésének nyomonkövetése korszerű országos adatgyűjtés és feldolgozás;
molekuláris epidemiológiai (tipizálási) vizsgálatok nélkül nem valósíthatók meg! Időben (térben) elhúzódó „sporadikus” esetek Járvány kialakulása Retrospektív vizsgálat során beteg, hordozó, környezet „real time” vizsgálat
virulens klónok monitorozása „rizikó osztályok”
MBL (metallo-béta-laktamáz), termelő nosocomialis kórokozók • MBL: enzimek csoportja, amelynek tagjai képesek hidrolizálni a penicillineket, cephalosporinokat és karbapenemeket;
• Integronok hordozhatják ezeket a géneket – szerkezetükben, lokalizációjukban variabilitás • In vitro igazolt a konjugációval történő átvitel – horizontális terjedés lehetőségének bizonyítása • Megfigyelhető terjedése világszerte • Kapcsolódó multirezisztencia – panrezisztencia
Pseudomonas aeruginosa (O11 és O12 szerotípus) – Libisch B. et al Aeromonas hydrophila – Libisch B. et al Acinetobacter baumannii Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis
Multirezisztens Pseudomonas aeruginosa PFGE Kórházi (ITO) csaptelepek monitorozásából (szűrővel és szűrő nélküli használat) származó P. aeruginosa törzsek PFGE vizsgálata (OKI Vízbakteriológiai osztállyal)
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-2.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
100
95
90
85
9812-3
80
75
9812-3
. 2 82
1 09/119x/3 52 /M4 +
0f
Ps120/20 08
01
Psa020
. vízminta
.9 9
4 4/11 9x/35 2/1214/M 4/C1 8+
NB32 nb 3
Ps143/20 08
O6
Psa022
. beteg
. 5 65 /02 /08
Nt
43n
Ps116/20 08
O1 0
Psa018
. vízminta
. 2 57 /08
Nt
18k
Ps63/2 00 8
010
Psa018
. vízminta
. 8 86
Nt
0f
Ps118/20 08
Nt
Psa021
. beteg
. 5 84 /02 /08
2 1/35 2
1c
Ps111/20 08
O1 0
Psa016
. vízminta
. 5 84 /01 /08
1 00x21/119x
1c
Ps64/2 00 8
010
Psa016
. vízminta
. 5 74 /03 /08
1 00x119x
18x
Ps73/2 00 8
010
Psa016
. vízminta
. 5 70 /02 /08
2 1/11 9x
18x
Ps79/2 00 8
010
Psa016
. vízminta
. 5 80 /03 /08
1 00x119x
1x
Ps90/2 00 8
010
Psa016
. vízminta
. 5 80 /01 /08
1 00x119x
1c
Ps57/2 00 8
010
Psa016
. vízminta
. 9 17
3 52+
NB33 d
Ps132/20 08
01
Psa019
. beteg
. 1 81 8/1 /08
7 /352
0f
Ps66/2 00 8
01
Psa015
. vízminta
.5 1
1 00x31/352/C 188
0f
Ps107/20 08
01
Psa015
. beteg
. 4 16
1 00xC188+
0f
Ps76/2 00 8
01
Psa015
. vízminta
. 8 91
1 214/C18
0f
Ps131/20 08
01
Psa015
. beteg
. 1 18 /03 /08
( 68 )/352
0f
Ps55/2 00 8
01
Psa015
. vízminta
. 5 71 /01 /08
7
0f
Ps92/2 00 8
01
Psa015
. vízminta
. 4 14 /24
7 /352/C 188+
0f
Ps81/2 00 8
01
Psa015
. beteg
. 4 16 /24
3 52+
0f
Ps77/2 00 8
(O1)
Psa015 ( A)
. beteg
. 5 94 /1
7 3+
23nb3
Ps110/20 08
Polyaggl. Psa017
. beteg
Multirezisztens Acinetobacter spp. törzsek retrospektív vizsgálata - PFGE
H>0.0% S>0.0%) [0.0%- 100.0%]
100
95
90
85
80
acinetoúj
. Ac4/09-01
KAIBO
trachea
AC001
. 2009-01-26
. Ac13/09-01
KAIBO
bronchus
AC001
. 2009-02-09
. Ac3/09-01
KAIBO
trachea
AC001
. 2009-02-09
. Ac22/08-07
Intenzív
vér
AC001
. 2008-06-11
. Ac24/08-07
Intenzív
?
AC001
. 2008-06-26
. Ac28/08-07
Intenzív
m ellk as punk.
AC001
. 2008-07-21
. Ac25/08-07
Intenzív
?
AC001
?.
. Ac30/08-07
Sebészet
seb
AC001
. 2008-07-16
. Ac33/08-10
Urológia
seb
AC001
. 2008-09-23
. Ac21/08-07
Intenzív
vér
AC001
. 2008-07-25
. Ac2/08-01
Anaszteziológia
agykamra drain
AC001
. 2007-10-02
. Ac5/08-01
Sebészet
seb
AC001
. 2007-10-17
. Ac4/08-01
Nefrológia
trachea
AC001
. 2007-10-11
. Ac1/08-01
Anaszteziológia
vizelet
AC001-A1
. 2007-09-19
. Ac3/08-01
Kardiológia
vér
AC001-A1
. 2007-10-08
. Ac6/08-01
Nefrológia
seb
AC001-A2
. 2007-11-12
. Ac31/08-10
KAIBO
seb
AC004
. 2008-09-22
. Ac34/08-10
Érsebészet
seb
AC005
. 2008-09-26
. Ac2/2007
Független
trachea
AC006
. 2007
Legionella pneumophila PFGE vizsgálat eredményei Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-2.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
Vizsgálati módszer: kromoszóma restrikciós enzim emésztést követő PFGE (pulzáltatott mezejű gél elektroforézis).
100
« . 1251/1/1
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
« . 1258/2/1
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
« . 1251/1/2
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
« . 1254/2/2
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
« . 1253/2/2
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
« . 1258/1/08
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
« . 198
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó (vendég)
l . 1256/1/1
.3
Lpn002 Galcsik Fogadó
l . 1250/1/1
.3
Lpn002 Galcsik Fogadó
t . 732/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
t . 723/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
t . 725/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
t . 726/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
t . 716/2/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
t . 734/2/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
t . 711/2/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp.,
Lpn001
90
80
Legionella_9812
ESET 2
Lpn002
N=27
70
60
Legionella_9812
ESET 1
Köszönöm a figyelmet
Elérhetőségek:
[email protected] www.oek.hu
Nosocomialis infekciókat okozó baktériumok tipizálásának jelentősége a kórházi járványok felderítésében Pászti Judit OEK Fágtipizálási és molekuláris epidemiológiai osztály 1
Tipizálás - általában Bakteriológiai tipizálási eljárások: előzetesen izolált és identifikált baktérium fajok speciesen belüli differenciálására szolgáló eljárások, melyek segítségével két vagy (több), azonos specieshez tartozó baktérium izolátum összehasonlítható. Fenotipizálás
Genotipizálás
2
Molekuláris tipizálás –molekuláris epidemiológia alkalmazása • Meghatározható baktérium speciesek egyes klónjainak elterjedése időben és térben; • Elkülöníthetők járványosan és endémiásan előforduló baktérium klónok; Monitoring, • fertőzés terjedésének módjának és útjának nyomonkövetése; • Multirezisztens és fokozott virulenciájú „veszélyes törzsek” azonosítása, figyelem felhívása; Időben-térben elhúzódó „sporadikus” esetek Retrospektív vizsgálat
Járvány kialakulása során beteg, hordozó, környezet „real time” vizsgálat
speciesekre, genetikai klónokra, valamint „rizikó osztályokra” vonatkozóan 3
A tipizálási módszerek kritériumai • Stabilitás • Tipizálhatóság, diszkriminativitás • Epidemiológiai adatokkal való összhang (sporadikus-járványos) • Reprodukálhatóság • Teszt anyag minimum mennyisége (n=100) 4
A megfelelés kritériumai • Flexibilitás (széles species spektrum kis módosítással) • Gyorsaság • Műszer-reagens igény • Kivitelezhetőség • Ár • Számítógépes értékelés – adatbázis építés 5
A járványügyi tipizálás szintjei • Lokális szint: kórház, egyes részlegek, hosszú ápolási intézmény, egészségügyi otthon, stb. fenotípusos jegyek (pl. sajátos antibiotikum rezisztencia kép); • Országos szint – tipizáló laboratóriumok, referencia laboratóriumok – adatbázisok-klónok azonosítása • Globális szint – nemzetközi munkacsoportok és adatbázisok – nemzetközileg szélesen terjedő klónok azonosítása – „alert” rendszerek 6
Tipizálási módszerek DNS alapú módszerek
PCR alapú módszerek RAPD AP-PCR (ERIC1;2) Pl. Enterobacter spp.
Nem-PCR alapú módszerek Plazmid tipizálás PFGE Klebsiella spp. S.aureus, MRSA, Pseudomonas spp., Acinetobacter spp., E. coli, Citrobacter sp., Streptococcus spp.
Szekvencia alapú módszerek SLST (egy locus) MLST (háztartási gének) S. pyogenes, N. meningitidis, S. aureus, Klebsiella spp.,
7
Módszerek •RAPD analízis: tetszőleges rövid primerek használata véletlenszerű (előre nem ismert) DNS szakaszok amplifikációjához nem túl szigorú PCR feltételek mellett. ERIC primerek; •PFGE: a teljes genom makrorestrikciós profilvizsgálata gélelektroforézissel, speciális, váltakozó irányú elektromos erőtér használatával; •MLST: meghatározott számú háztartási gén (lassan változó gének, melyek nincsenek kitéve a szelekciós nyomásnak) allél variációi alapján szekvencia típusok (ST) meghatározása. 8
Tipizálási módszerek
Molecular concepts associated with genetic variability
A. van Belkum et al.: Guidelines for the validation and application of typing methods for use in 9 bacterial epidemiology, Journal compilation 2007 Clinical Microbiology and Infectious Diseases, CMI, 13 (Suppl. 3), 1–46.
Módszerek összehasonlítása Módszer
Diszkrimi Tipizál nativítás hatóság (%)
Reprodukál Idő hatóság
Költség
PFGE
jó
100
jó
2-4nap
átlagos
Ribotipizálás
alacsony
100
jó
3-4nap
átlagos
RAPD
átlagos
70-80
alacsony
<1nap
alacsony
AFLP
jó
100
jó
2-3nap
átlagos
MLST
Nagyon jó*
100
jó
2-3nap
magas
Szerotipizálás
átlagos
60-70
közepes
<1nap
alacsony
*: species függő
10
Vizsgálataink területe - PFGE •Acinetobacter spp.
•Serratia marcescens
•Enterobacter spp.
•koaguláz negatív Staphylococcus
•Enterococcus spp.
•Streptococcus pyogenes
•Escherichia coli
•Streptococcus pneumoniae
•Legionella spp.
•Stenotrophomonas maltophilia….
•Pseudomonas spp. Klebsiella spp – nemzeti adatbázis MRSA– nemzeti adatbázis
11
Vizsgálataink területe – Szekvencia meghatározás •Staphylococcus aureus törzsek spa gén tipizálása, MLST •Klebsiella pneumoniae törzs MLST vizsgálata •Streptococcus pyogenes törzs emm gén tipizálása •Neisseria meningitidis PorA gén variábilis régióinak (VR1, VR2 és VR3 ) szekvenálása •ESBL rezisztencia gének azonosítása Enterobacteriaceae törzseknél •Klebsiella spp. •Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter cloacae, Proteus mirabilis •Antibiotikum rezisztencia típus meghatározása (több, mint 60 különböző rezisztencia determináns meghatározása) 12
A kórházi járványok felderítése, a járvány láncolatának nyomonkövetése, forrás azonosítás; • „kórházi flóra” monitorozása; • virulens klónok elterjedtségének vizsgálata; • antibiotikumokkal szembeni rezisztencia és egyéb virulenciát fokozó markerek terjedésének nyomonkövetése • korszerű országos adatgyűjtés és feldolgozás;
molekuláris epidemiológiai (tipizálási) vizsgálatok nélkül nem valósíthatók meg! Időben (térben) elhúzódó „sporadikus” esetek Járvány kialakulása Retrospektív vizsgálat során beteg, hordozó, környezet „real time” vizsgálat
virulens klónok monitorozása „rizikó osztályok” 13
MBL (metallo-béta-laktamáz), termelő nosocomialis kórokozók • MBL: enzimek csoportja, amelynek tagjai képesek hidrolizálni a penicillineket, cephalosporinokat és karbapenemeket;
• Integronok hordozhatják ezeket a géneket – szerkezetükben, lokalizációjukban variabilitás • In vitro igazolt a konjugációval történő átvitel – horizontális terjedés lehetőségének bizonyítása • Megfigyelhető terjedése világszerte • Kapcsolódó multirezisztencia – panrezisztencia
Pseudomonas aeruginosa (O11 és O12 szerotípus) – Libisch B. et al Aeromonas hydrophila – Libisch B. et al Acinetobacter baumannii Klebsiella pneumoniae 14 Proteus mirabilis
Multirezisztens Pseudomonas aeruginosa PFGE Kórházi (ITO) csaptelepek monitorozásából (szűrővel és szűrő nélküli használat) származó P. aeruginosa törzsek PFGE vizsgálata (OKI Vízbakteriológiai osztállyal)
Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-2.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
100
95
90
85
9812-3
80
75
9812-3
. 2 82
1 09/119 x/3 52 /M4 +
0f
Ps1 20 /20 08
01
Psa02 0
. vízmin ta
.9 9
4 4/1 1 9x/35 2/121 4/M 4/C1 8+
NB3 2nb 3
Ps1 43 /20 08
O6
Psa02 2
. be teg
. 5 65/02 /08
Nt
43 n
Ps1 16 /20 08
O1 0
Psa01 8
. vízmin ta
. 2 57/08
Nt
18 k
Ps6 3/2 00 8
01 0
Psa01 8
. vízmin ta
. 8 86
Nt
0f
Ps1 18 /20 08
Nt
Psa02 1
. be teg
. 5 84/02 /08
2 1/3 5 2
1c
Ps1 11 /20 08
O1 0
Psa01 6
. vízmin ta
. 5 84/01 /08
1 00x21/119 x
1c
Ps6 4/2 00 8
01 0
Psa01 6
. vízmin ta
. 5 74/03 /08
1 00x119 x
18 x
Ps7 3/2 00 8
01 0
Psa01 6
. vízmin ta
. 5 70/02 /08
2 1/1 1 9x
18 x
Ps7 9/2 00 8
01 0
Psa01 6
. vízmin ta
. 5 80/03 /08
1 00x119 x
1x
Ps9 0/2 00 8
01 0
Psa01 6
. vízmin ta
. 5 80/01 /08
1 00x119 x
1c
Ps5 7/2 00 8
01 0
Psa01 6
. vízmin ta
. 9 17
3 52+
NB3 3d
Ps1 32 /20 08
01
Psa01 9
. be teg
. 1 818/1 /08
7 /35 2
0f
Ps6 6/2 00 8
01
Psa01 5
. vízmin ta
.5 1
1 00x31/352 /C 18 8
0f
Ps1 07 /20 08
01
Psa01 5
. be teg
. 4 16
1 00xC1 88+
0f
Ps7 6/2 00 8
01
Psa01 5
. vízmin ta
. 8 91
1 214 /C18
0f
Ps1 31 /20 08
01
Psa01 5
. be teg
. 1 18/03 /08
( 68 )/352
0f
Ps5 5/2 00 8
01
Psa01 5
. vízmin ta
. 5 71/01 /08
7
0f
Ps9 2/2 00 8
01
Psa01 5
. vízmin ta
. 4 14/24
7 /35 2/C 188+
0f
Ps8 1/2 00 8
01
Psa01 5
. be teg
. 4 16/24
3 52+
0f
Ps7 7/2 00 8
(O 1)
Psa01 5 (A)
. be teg
. 5 94/1
7 3+
23 nb3
Ps1 10 /20 08
Po lyag gl. Psa01 7
. be teg
15
Multirezisztens Acinetobacter spp. törzsek retrospektív vizsgálata - PFGE
Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-2.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
100
95
90
85
80
75
70
acinetoúj
65
60
acinetoúj
. Ac4/09-01
KAIBO
trachea
AC001
. 2009-01-26
. Ac13/09-01
KAIBO
bronchus
AC001
. 2009-02-09
. Ac3/09-01
KAIBO
trachea
AC001
. 2009-02-09
. Ac22/08-07
Intenzív
vér
AC001
. 2008-06-11
. Ac24/08-07
Intenzív
?
AC001
. 2008-06-26
. Ac28/08-07
Intenzív
mellk as punk.
AC001
. 2008-07-21
. Ac25/08-07
Intenzív
?
AC001
?.
. Ac30/08-07
Sebészet
seb
AC001
. 2008-07-16
. Ac33/08-10
Urológia
seb
AC001
. 2008-09-23
. Ac21/08-07
Intenzív
vér
AC001
. 2008-07-25
. Ac2/08-01
Anaszteziológia
agykamra drain
AC001
. 2007-10-02
. Ac5/08-01
Sebészet
seb
AC001
. 2007-10-17
. Ac4/08-01
Nefrológia
trachea
AC001
. 2007-10-11
. Ac1/08-01
Anaszteziológia
vizelet
AC001-A1
. 2007-09-19
. Ac3/08-01
Kardiológia
vér
AC001-A1
. 2007-10-08
. Ac6/08-01
Nefrológia
seb
AC001-A2
. 2007-11-12
. Ac31/08-10
KAIBO
seb
AC004
. 2008-09-22
. Ac34/08-10
Érsebészet
seb
AC005
. 2008-09-26
. Ac2/2007
Független
trachea
AC006
. 2007
16
Legionella pneumophila PFGE vizsgálat eredményei Dice (Opt:1.00%) (Tol 1.0%-2.0%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%]
Vizsgálati módszer: kromoszóma restrikciós enzim emésztést követő PFGE (pulzáltatott mezejű gél elektroforézis).
100
« . 1251/1/1
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
. alagsor, söntés m eleg
« . 1258/2/1
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
. 37. szoba, fürdőszob
« . 1251/1/2
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
. alagsor, söntés m eleg
« . 1254/2/2
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
. 31. szoba, fürdőszob
« . 1253/2/2
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
. 31. szoba, fürdőszob
« . 1258/1/08
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó
. 37. szoba, fürdőszob
« . 198
.1
Lpn001 Galcsik Fogadó (vendég)
. trachea
l . 1256/1/1
.3
Lpn002 Galcsik Fogadó
. 31. szoba, fürdőszob
l . 1250/1/1
.3
Lpn002 Galcsik Fogadó
. kazánház, falikút m el
t . 732/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. IV. em elet, kp-i férfi m
t . 723/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. 316. kórterem - zuha
t . 725/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. 316. kórterem - zuha
t . 726/1/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. 316. kórterem - zuha
t . 716/2/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. 315. kórterem - zuha
t . 734/2/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. 118. kórterem - m osd
t . 711/2/08
1
Lpn004 Miskolc (Egészségügyi Kp., H aematológia)
. Alagsor, 002-es diplo
Lpn001
90
80
Legionella_9812
ESET 2
Lpn002
N=27
70
60
Legionella_9812
ESET 1 17
Köszönöm a figyelmet
Elérhetőségek:
[email protected] 18 www.oek.hu