május 18 Fogorvosok számára kötelező szinten tartó tanfolyam I. (PTE KK Fogászati és Szájsebészeti Klinika ) 08:30 10:00 08:30 ‐ 10:00
Regisztráció Regisztráció
09:00 ‐ 09:45
A nyál jelentősége a mindennapi fogorvosi praxisban Dr. Nagy Ákos
09:45 ‐ 10:30
Protézis alapanyagok tulajdonságai és f ld l á k új l h tő é i P f D S bó feldolgozásuk új lehetőségei Prof. Dr. Szabó Gyula
10:30 ‐ 11:15
A gyógyszer okozta íny hiperpláziák komplex kezelése, különös tekintettel a szervtranszplantáltak ellátására Prof Dr szervtranszplantáltak ellátására. Prof. Dr. Gera István
11:15 ‐ 12:00
Az orális lichen planus pathomechanizmusa és klinikai megjelenése Dr. Bán Ágnes
12:00 ‐ 12:45
A parodontológiai kezelés és határai az általános praxisban Dr. Tóth Vilmos
12:45 ‐ 13:00
Ebédszünet
13 00 13:45 13:00 ‐ 13 45
A hazai felnőtt lakosság szájállapota h i f l ő l k á ájáll felmérési tapasztalatok alapján Dr. Hermann Péter
13:45 ‐ 14:30
Fogászati finanszírozás helyzete és várható változásai Dr. Gerle János változásai Dr Gerle János
A nyál jelentősége a mindennapi fogorvosi praxisban fogorvosi praxisban Mintavétel, felhasználási lehetőségek , g Pécs 2011. május 18.
Járulékos lebeny
Ductus excretorius
Glandula parotis
Glandula sublingualis
Glandula submandibularis
A nyál összetétele A nyál összetétele • Víz – 99%
• Szervetlen ionok • Szerves molekulák
Na +
6 - 80 mmol/L
Cl -
17 - 30 mmol/L
K+
20 - 30 mmol/L
Ca
1 - 2 mmol/L
P
2 - 23 mmol/L
HCO3+
2 - 80 mmol/L
Szerves molekulák Mennyiség
Fő funkció
Összfehérje
1400-2000 mg/l
Prolin-gazdag proteinek
1000-1400 mg/l
Caries protektív hatás
109 mg/l
Antimikrobiális hatás
na
Antimikrobiális hatás
Sialoperoxidase
3 mg/l
Antimikrobiális hatás
Secretoros IgA
194mg/l
Antimikrobiális hatás
IgG
14 mg/l
Antimikrobiális hatás
IgM
2 mg/l
Antimikrobiális hatás
na
Caries protektív hatás
~ 42-60mg/l
Ízérzés elősegítése
Histatinok
na
Antimikrobiális hatás
Cystatinok
na
g Szöveti integráció
380 mg/l
Emésztés
na
Emésztés
U Urea
2-6 mmol/l /
S Savak semlegesítése íé
Glükóz
0.05 mmol/l
„plaque táplálása”
Aminosavak
1-2 mmol/l
?
Lizozim Lactoferrin
Statherin Gustin
Amiláz Lipáz (linguális mirigy eredetű)
Nyálszekréció kétlépcsős hipotézise Ductus
Acinus
Másodlagos á dl d ductalis l modosulás d lá Primer szekrétum é Hypotoniás Izotoniás HCO3¯
K+
Concentration
Cl- HCO3¯
Na+
mEq/l
Saliva Saliva Na+
H2O
Cl-
HCO3¯ HCO3¯
Na+
Cl-
K+
Na+ K+ H2O Cl-
K+
Plazma
Flow ml/min
A rendelői nyálgyűjtés lehetőségei A rendelői nyálgyűjtés lehetőségei •
Nyálgyűjtés osztályozása Nyálgyűjtés osztályozása
A ‐ Kevert nyál gyűjtése ‐ Tiszta nyál gyűjtése adott Ti t ál űjté d tt mirigyből B ‐ Alapszekrétum gyűjtése ‐ Stimulált szekrétum gyűjtése
• • • a. b. c. d d.
A beteg elhelyezkedése: ülő A beteg elhelyezkedése ülő helyzet, enyhén előrehajtott fej, nyitott szem A gyűjtést néhány perc A gyűjtést néhány perc nyugalmi helyzetet követően 5‐6 percig folytatjuk y / Az eredményt ml/min‐ben kapjuk Passzív, drenálásos , módszer Köptetéses módszer Aspirációs módszer Abszorpciós módszer Abszorpciós módszer
Kevert nyál gyűjtése Kevert nyál gyűjtése Drenálás és köptetéses módszer és köptetéses módszer a szájfenéken összegyűlő nyálat a páciens percenként kalibrált páciens percenként kalibrált csőbe üríti Aspirációs módszer a termelődő nyálat a szájfenékről folyamatosan gyűjtjük vákuum segítségével egy kalibrált csőbe í é é l k lib ál őb
Kis volumenű minták gyűjtése Periotron készülék alkalmazásának módszere ‐ a kisnyálmirigyek szekrétumát vagy a crevikuláris folyadékot méri folyadékot méri ‐ a készülék a térfogatot meghatározza és az a készülék a térfogatot meghatározza és az eredmény kalibráció után mikroliter/min értékben meghatározható
A minták előkészítése és tárolása A minták előkészítése és tárolása • • • • •
200 µ L natív nyál 200 L tí ál 200 µL 2x mintapuffer (5 perc forralás) 4 perc centrifugálás 13.000 rpm (Bromfenolkék festés) Tárolás 80 Tárolás – 80 oC
Dr. Szántó Ildikó ábraanyagából
A minták feldolgozása g • ELFO futtatás • Gél kimetszés g • Proteomikai meghatározás
Kontroll gél
Tumoros gél
Dr. Szántó Ildikó ábraanyagából
Matrix Assisted Laser Desorption/Ionisation Time Time Of Flight Mass spectometry Tanaka 1988 Rapid Communications in Mass Spectrometry 2 (8): 151–153.
(Nobel‐díj 2002)
Karas és Hillenkamp 1985 Anal Chem 57: 2935 Anal. Chem. 57: 2935–9 9.
Nature Reviews Cancer 3 267‐275 (April 2003)
Nyál proteomika Nyál proteomika • Fogalomtár – Genomika – transzkriptomika p –p proteomika DNS RNS fehérje Honnan jutnak a nyálba ezek a molekulák? Honnan jutnak a nyálba ezek a molekulák? nyálmirigyből a szekréció során hámsejtekből vérből szájüregi mikroorganizmusokból
1000 különböző fehérje fehérje, amelyből mintegy 300 humán fehérjét humán fehérjét sikerült elkülöníteni JDentRes 2007, 1129‐33
Az információk lehetséges felhasználása • Az USA az ezredfordulón több, jelentős kutatási alapot hozott létre l h lé • Ennek is köszönhetően a „nyál diagnosztika” keresés 37.000 találatot eredményez • Tudományos y áttekintő cikkek – review‐k : 100 felett Az irodalomban leggyakrabban említett felhasználási lehetőségek felhasználási lehetőségek
Az információk lehetséges felhasználása
Oral Diseases (2002) 8, 69–76
Az információk lehetséges felhasználása
Szűrés és korai tumor diagnózis A A tüdő, emlő, vastagbél és ovárium üdő lő bél é ái tumorok tumorok több, mint 60% tumorok több, mint 60%‐ több mint 60%‐ 60%‐át csak át csak metasztatikus vagy/és inoperábilis vagy/és gy/ inoperábilis p szakban sikerül diagnosztizálni!
Korai tumor diagnózis orai tumor diagnózis ‐ Főleg Főleg nyálmirigy, fej nyálmirigy, fej‐nyak, nyak, szájüreg szájüreg és garat‐gége lokalizáció AmJSurg 168:429‐32, ClinCancerRes2004 8442 50 ClinCancerRes2004,8442‐50
‐ emlő carcinoma ‐ máj, epehólyag, tüdő, prosztata, ovárium és további szervek Nature Reviews Cancer 3, 267‐275 2003
Az információk további lehetséges felhasználása • Gyógyszer és drog monitorozás – Hormonszint mérés – fertilitás – Élvezeti szerek Élvezeti szerek – Doppingszerek
The Leader in New Technology Development Accuracy Data
Table 1
Comparison of Positive Drug Prevalence Rate by Oral Fluid Testing to Federally Mandated And General Workforce Urine Drug Testing Programs
Drug Category
Positivity Prevalence
Drug Testing Index:
Drug Testing Index:
Rate: Oral Fluid
Federally Mandated (DOT)
General Workforce
Drug Testing
Urine Drug Testing
Urine Drug Testing
Jan-Oct 2001
Jan-Dec 2001
Jan-Dec 1002
(N=77,218)
(N>1,000,000)
(N>5,200,000)
THC
3.22
1.72
3.17
Cocaine
1.12
0.6
0.69
Opiates
0.23
0.26
0.29
PCP
0.03
0.05
0.02
Amphetamines
0.47
0.29
0.29
Total (%)
5.06
2.92
4.46
A nyál jelentősége a fogorvosi gyakorlatban • • • •
Cariológia Parodontológia Fogpótlástan Implantológia
• Szék melletti (chairside) diagnosztika
Az információk lehetséges felhasználása • Brendan és mtsai mintegy 15 fehérjét izoláltak krónikus parodontitisben szenvedő páciensek kevert nyugalmi nyálából ‐ köztük kiemelten a S100 proteinek családjába tartozó S100A8/A9/A6 fehérjét – amelyeknek jelenléte és mennyisége szoros összefüggésben áll a betegséggel. •
Journal of Clinical Periodontology (37) 3, 241–247, March 2010
Fogpótlástan Hyposalivation, xerostomia and the complete denture Turner M The Journal of the American Dental Association February 1, 2008 vol. 139 no. 2 146‐150
Irodalmi áttekintés 1950‐2007
A fogorvosi praxis szempontjából érdekes „chairside” tesztek • HBV HBV tesztek vérből és plazmából t t k é ből é l ából • OraQuick HCV Rapid Antibody Test ‐ P080027 • Orasure Oraquick HIV Teszt HIV Teszt • A szájüregi tesztekről gyakran gondolják, hogy nyál tesztek, j g gy g j , gy y , pedig antitesteket gyűjtünk egy kefe segítségével a szájüreg nyálkahártyájának felszínéről. • A tesztek eredményét általában 20 perc alatt megkapjuk. A tesztek eredményét általában 20 perc alatt megkapjuk Pozitív szájüregi tesztet általában plazma/vér teszttel szokás megerősíteni, bár a tesztek validitása 98‐99% körül van. •
http://www.livestrong.com/article/26537‐hiv‐testing‐ // / / process/#ixzz1MdNBVWYL
http://www.fda.gov/downl oads/BiologicsBloodVaccine s/BloodBloodProducts/App rovedProducts/PremarketA dP d /P k A pprovalsPMAs/UCM091917 .pdf
Köszönöm a figyelmet! gy