Kurkumin sebagai... fe. R Purba & M. Martosupono)

Kurkumin sebagai... fE. R Purba & M. Martosupono)

stabil dan dapat menerima elektron atau radikal hidrogen menjadi suatu senyawa yang secara diamagnetic stabil. Lebih lanjut bahwa kemampuan radikal DPPH untuk direduksi atau distabilisasi oleh antioksidan diukur dengan menggunakan penurunan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm. Elektron yang tidak berpasangan pada DPPH memiliki kemampuan penyerapan yang kuat pada panjang gelombang 517 nm dengan warna ungu. Perubahan warna ungu menjadi kuning terjadi karena DPPH berubah menjadi DPPH-H. Antioksidan berperan mendonorkan atom H sehingga terbentuk DPPH-H tereduksi. Kapasitas penangkapan radikal bebas ditunjukkan dengan presentase berkurangnya warna ungu dari DPPH [21]. Oleh karena itu DPPH biasa digunakan untuk mengkaji kapasitas penangkapan radikal bebas. Berikut ini adalah kapasitas penangkapan radikal bebas dengan metode Kim [21]. Larutan ekstrak kurkumin dipersiapkan dengan melarutkannya pada berbagai konsentrasi menggunakan pelarut kloroform : methanol (2:1) dicampur dengan 1 ml larutan DPPH 0,2 mM dalam methanol. Campuran diinkubasikan selama 30 menit kemudian diukur pada panjang gelombang 517 nm. Penurunan absorbansi menunjukkan peningkatan kemampuan penangkapan radikal DPPH. Kemampuan penangkapan radikal DPPH dihitung dengan persamaan: Ag

A-y

kemampuan penangkapan radikal (%) = 100---x 100 ÿ"0

dimanaÿ o = absorbansi dari control dan A] = absorbansi dari sampel. S

.

2 Penentuan Potensi Suatu Senyawa sebagai Antioksidan atau Daya Reduksi dengan Metode Oyaizu

Daya reduksi merupakan indikator potensi suatu senyawa dapat berfungsi sebagai antioksidan [21]. Daya reduksi diukur dari kemampuan suatu senyawa antioksidan 3+ untuk mengubah ion ferri (Fe ) menjadi ion ferro (Fe2+) melalui reaksi reduksi. Ion ferro merupakan prooksidan yang aktif dengan mengkatalisis dekomposisi hidroperoksida menjadi radikal bebas. Sigh dkk. [37] menambahkan bahwa daya reduksi berkaitan dengan kemampuan senyawa antioksidan mendonasikan atom hidrogennya. Senyawa yang mempunyai daya reduksi dapat berperan sebagai antioksidan karena dapat menstabilkan radikal dengan mendonorkan elektron atau atom hidrogen sehingga senyawa radikal berubah menjadi lebih stabil.

Daya reduksi ditentukan dengan metode Oyaizu yang diperbaharui oleh Gulcin dkk.. Larutan ekstrak kurkumin dibuat dalam berbagai konsentrasi yang diuji menggunakan pelarut buffer fosfat. Larutan ekstrak sebanyak 0,1 ml ditambah dengan 0,25 ml buffer fosfat (0,2 M; pH 6,6) dan 0,25 ml kalium ferrisianida 1%. Campuran diinkubasi pada suhu 50% selama 20 menit kemudian ditambahkan 0,25 ml asam trikloroasetat dan disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 1700 ° rpm dan suhu 25 C, 20 menit. Setelah itu ditambahkan 0,25 ml asam trikloroasetat, disentrifugasi 10 menit pada kecepatan 1700 rpm dan suhu 25°C. sebanyak 0,25 supernatan dicampur dengan akuades dan 0,05 ml ferri klorida 0,1%.

Fakultas Sains dan Matematika UKSW Salatiga, 13 Juni 2009

615

Presiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains IV. No. 3:607-621

pagidon, uni, kunyi, unyik, nuyik. Kunyit juga mempunyai istilah asing yaitu turmeric.

Manfaat kunyit sudah dikenal selama ribuan tahun untuk dikonsumsi baik sebagai bumbu masak maupun obat tradisional seperti jamu. Kunyit bermanfaat sebagai antioksidan dan antibakteri, yang dapat mengobati kolesterol dan trigeserol, menyembuhkan radang lambung akut dan kronis mengatasi rematik dan encok, mengobati diabetes melitus dan mencegah kanker usus serta mencegah sekaligus mengobati katarak dan berbagai penyakit lainnya. Kunyit mengandung minyak atsiri yang dapat memberi efek and mikroba dan kurkumin sebagai anti inflamasi, meningkatkan kerja organ pencernaan [14 15, 44], Rostiana dkk. [31] menyatakan bahwa kunyit mengandung kurkuminoid dan minyak atsiri sedangkan menurut Sidik (1988), aktifitas biologis kunyit berspektrum luas diantaranya antioksidan, antibakteri dan hipokolesteremik mempunyai sifat kolagogum (peluruh empedu), sehingga dapat meningkat-kan penyerapan vitamin A D, E dan K [34], ,

,

,

,

,

Kunyit sebagai antioksidan sedang marak diteliti karena banyak kegunaannya terutama untuk kesehatan tubuh kita terutama dalam menangkal radikal bebas. Tanpa disadari dalam tubuh kita secara terus menerus terbentuk radikal bebas melalui peristiwa metabolisme sel normal peradangan, kekurangan gizi dan akibat respons terhadap pengaruh dari luar tubuh: polusi ultraviolet, asap rokok, dan lainlain. Oleh karena itu, tubuh memerlukan suatu substansi penting yaitu antioksidan yang dapat membantu melindungi tubuh dari serangan radikal bebas dengan meredam dampak negatif senyawa ini. Aktifitas antioksidan terdiri dari beberapa mekanisme diantaranya mencegah reaksi berantai mencegah pembentukan peroksida, mencegah pengambilan atom hydrogen, mereduksi dan menangkap radikal [21, 38] ,

,

Berdasarkan sumbernya antioksidan dibedakan menjadi 2 kelompok. Kelompok antioksidan alami (antioksidan hasil ekstraksi bahan alam) dan antioksidan sentetik (antioksidan yang diperoleh dari hasil sintesa reaksi kimia). Antioksidan alami kebanyakan diisolasi dari sumber alami seperti tumbuhan [29]. Antioksidan alami tersebar di beberapa bagian tanaman seperti pada kayu, kulit kayu, akar, daun, buah, bunga biji, dan serbuk sari [30], Antioksidan sintetik dibuat dan disintesa oleh manusia dan antioksidan ini sangat banyak jenisnya. Namun tidak semua antioksidan dianjurkan untuk makanan. ,

,

,

,

2

.

Antioksidan Pelindung Kesehatan

Tanpa disadari dalam tubuh kita secara terus menerus terbentuk radikal bebas melalui peristiwa metabolisme sel normal peradangan, kekurangan gizi, dan akibat respon terhadap pengaruh dari luar tubuh: polusi ultraviolet, asap rokok, dan lainlain. Oleh karena itu, tubuh memerlukan suatu substansi penting yaitu antioksidan yang dapat membantu melindungi tubuh dari serangan radikal bebas dengan ,

,

,

608

Fakultas Sains dan Matematika UKSW Salatiga, 13 ]uni 2009

Kurkumin sebagai... fE. R Purba & M. Martosuponol

meredam dampak negatif senyawa ini. Dari asal terbentuknya, antioksidan ini dibedakan menjadi dua yakni intraseluler dan ekstraseluler ataupun makanan. Sistem antioksidan tubuh sebagai mekanisme perlindungan terhadap serangan radikal bebas, sebenarnya secara alami telah ada dalam tubuh. Penggolongan antioksidan berdasarkan fungsinya dibedakan menjadi 5 yaitu: 1 Antioksidan primer Antioksidan primer berfungsi untuk mencegah terbentuknya radikal bebas baru karena antioksidan tersebut dapat merubah radikal bebas yang ada menjadi molekul yang stabil. Antioksidan primer ini bekerja untuk mencegah pembentukan senyawa radikal bebas baru dengan cara mengubah radikal bebas yang ada menjadi molekul yang berkurang dampak negatifnya, sebelum radikal ini sempat bereaksi. Contoh antioksidan ini adalah enzim SOD yang berfungsi sebagai pelindung hancurnya sel-sel dalam tubuh serta mencegah proses peradangan karena radikal bebas. Enzim SOD sebenarnya sudah ada dalam tubuh kita. Namun bekerjanya membutuhkan bantuan zat-zat gizi mineral seperti mangan, seng, dan tembaga. Selenium (Se) juga berperan sebagai antioksidan. Jadi, jika ingin menghambat gejala dan penyakit degeneratif, mineral-mineral tersebut hendaknya tersedia cukup dalam makanan yang dikonsumsi setiap hari. BHA dan BHI yang merupakan antioksidan sintetik termasuk dalam antioksidan primer [25]. .

2

.

Antioksidan sekunder

Antioksidan sekunder berfungsi sebagai senyawa penangkap radikal bebas serta mencegah terjadinya reaksi berantai sehingga tidak teijadi kerusakan yag lebih besar. Contoh antioksidan sekunder: vitamin E, vitamin C, beta karoten,

likopen, bilirubin, dan albumin. Senyawa-senyawa tersebut mempunyai 3

.

4

.

5

.

mekanisme antioksidan sekunder Antioksidan tersier

Antioksidan tersier merupakan senyawa yang memperbaiki sel-sel dan jaringan yang rusak karena serangan radikal bebas. Contoh enzim yang memperbaiki DNA pada inti sel adalah metionin sulfoksi dan reduktase. Adanya enzimenzim perbaikan DNA ini berguna untuk mencegah penyakit kanker dan degeneratif lainnya. Oxygen scavenger Antioksidan yang termasuk oxygen scavenger mengikat oksigen sehingga tidak mendukung reaksi oksidasi. Chelators dan seguesstrants Chelators dan seguesstrants merupakan senyawa antioksidan yang mengikat logam yang mampu mengkatalis reaksi oksidasi.

Berdasarkan asalnya, antioksidan dibedakan lagi menjadi 2 kelompok, yaitu kelompok antioksidan sintetik dan alami.


609

Presiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains IV No. 3:607-621 .

Antioksidan sintetik dibuat dan disintesa oleh manusia. Antioksidan ini banyak sekali jenisnya. Namun tidak semua antioksidan sintetik dianjurkan untuk makanan. Ada lima antioksidan yang penggunaannya meluas dan menyebar ke seluruh dunia yaitu Butil Hidroksi Anisol (BHA), Butil Hidroksi Toluen (BHT), propel galat, Tert-Butil Hidroksi Quinon (TBHQ) dan tokoferol. Antioksidan tersebut merupakan ,

antioksidan alami yang telah diproduksi secara sintetis utnuk tujuan komersial [9]. BHA larut dalam lemak dan tidak larut dalam air, berbentuk padatan putih dan dijual dalam bentuk tablet atau serpih bersifat volatile sehingga berguna untuk aditif sebagai materi pengemas [9, 11]. Sementara itu, BHT hampir sama dengan BHA dan akan bermanfaat sinergis bila digunakan bersama-sama dengan BHA, bentuknya kristal padat berwarna putih dan dapat digunakan secara luas karena murah. Profil galat mempunyai karakteristik sensitive terhadap panas terdekomposisi pada titik cairnya yaitu 148°C dapat membentuk komplek warna dengan ion metal, sehingga kemampuan antioksidannya rendah. Selain itu profil galat memiliki sifat berbentuk kristal padat putih, sedikit tidak larut dalam lemak tetapi larut air, serta memberi efek sinergis dengan BHA dan BHT [9]. TBHQ dikenal sebagai antioksidan paling efektif untuk lemak dan minyak, khususnya ,

,

,

minyak tanaman karena memiliki kemampuan antioksidan yang baik pada penggorengan tapi rendah pada pembakaran. Tokoferol merupakan antioksidan alami yang dapat dibuat juga secara sintesik. Tokoferol memiliki karakteristik berwarna kuning terang cukup larut dalam lipida karena memiliki rantai C yang panjang [6]. . ,

Antioksidan alami, menurut Pratt dan Hudson [29] kebanyakan diisolasi dari bahan dasar alami seperti dari tumbuhan. Senyawa antioksidan dari tumbuhan bersifat senyawa fenolik atau polifenolik yang dapat berupa golongan flavanoid turunan asam sinamat kumarin, tokoferol dan asam-asam organik polifungsional [30], golongan flafanoid memiliki aktifitas antioksidan meliputi flavon, flavanol isoflavon katekin, flavonol, dan kalkon. Selain itu, juga ada senyawa yang relatif banyak, namun belum dimanfaatkan yaitu golongan pigmen. Pigmen merupakan senyawa yang memberikan warna kuning sampai merah dan karotenoid, hijau biru dari klorofil, kuning dari kurkuminoid dan merah sampai ungu dari antosianin. Senyawa tersebut sangat banyak jumlahnya dan dapat terlihat oleh mata sehingga akan lebih mudah untuk mengisolasinya. ,

,

,

,

,

,

Senyawa antioksidan sebagai agen protektif yang menginaktivasi spesies oksigen reaktif berperan penting dalam mengurangi terjadinya kerusakan sel. Seiring dengan kemajuan ilmu pengetahuan dan teknologi akhir-akhir ini banyak dikembangkan antioksidan sintetis. Meski demikian, penelitian Ford dkk. (1980) dalam [40], menunjukkan bahwa antioksidan sintetik ternyata dapat meracuni binatang percobaan dan juga bersifat karsinogenik. Penambahan bahan-bahan antioksidan sintetik seperti tetra-butil-4-hidroksianisol (BHA) dan tetra-butil-4- hidroksitoluen (BHT), serta antioksidan alami seperti alfa-tokoferol ke dalam makanan untuk ,

meningkatkan

610

kualitas

makanan

banyak

digunakan

terutama

untuk



mempertahankan terjadinya oksidasi lemak dan minyak [16] Namun demikian, beberapa penelitian terakhir mengindikasikan bahwa pemakaian antioksidan sintetik dapat menimbulkan aktivitas sel-sel tumor dan senyawa karsinogenik [17 18, 45]. Oleh karena itu penggunaan antioksidan sintetik saat ini juga mulai dibatasi. Sebagai tindak lanjutnya industri makanan dan obat kemudian beralih mengembangkan antioksidan alami. Antioksidan alami seperti vitamin E vitamin C, polifenol, kurkuminoid, dan karotenoid banyak terdapat dalam makanan, termasuk buah-buahan dan sayuran. Sehingga kebiasaan untuk kembali pada bahan-bahan alamipun masih menjadi alternatif yang paling aman bagi kesehatan manusia. .

,

,

,

3

.

Kurkumin sebagai Agen Antioksidan

Kurkumin adalah konstituen utama pada spesies kurkuma. Senyawa tersebut merupakan diketon simetris yang gugus karbonilnya terkonjugasi oleh cincin fenolik. Sejak lama akar dari berbagai spesies kurkuma seperti Curcuma longa dan Curcuma xanthorrhiza digunakan dalam pengobatan tradisional di India, tanaman tersebut dimanfaatkan untuk mengatasi penyakit anoreksia batuk, rematik, sinusitis, dan luka yang diakibatkan oleh diabetes. Sementara pada pengobatan tradisional di Thailand dan Cina, spesies tersebut digunakan untuk mengatasi acne vulgaris, nyeri perut, dan icterus. Kurkumin juga dimanfaatkan sebagai zat tambahan untuk memberikan warna dan aroma pada makanan [43]. ,

Kurkumin adalah fraksi dari kurkuminoid yang mengandung banyak khasiai Kurkumin dan turunannya merupakan zat aktif yang mempunyai aktifitas biologis berspektrum iuas. Serbuk kering rhizome (turmerik) mengandung 3 - 5 % kurkumin dan dua senyawa derivatnya dalam jumlah yang kecil yang ketiganya sering disebut sebagai kurkuminoid. Selain itu minyak atsiri 2 - 5% yang terdiri dari seskuiterpen dan turunan fenilpropana turmeron (aril turmeron, alpha turmeron, dan beta turmeron), kurlon kurkumol, atlanton, bisabolen, seskuifellandren, zingiberin, arilkurkumen, humulen, rabinosa, fruktosa, glukosa, pati, tannin, dan mineral yaitu magnesium besi, mangan, kalsium, natrium, kalium, timbal, seng, kobalt, aluminium [7].

Gambar 1: Struktur kimia kurkumin [l 7-bis-(4 hidroksi-3,-metoksifenil)hepta1 6-diena-3 5-dion] ,

-

,

,

,

.

Fakultas Sains dan Matematika UKSW Salatiga, 13 )uni 2009

611

Presiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains IV No. 3:607-621 ,

Kurkuminoid tersusun atas 3 macam senyawa yaitu kurkumin yang merupakan kandungan utamanya serta demetoksi kurkumin dan bisdemetoksi kurkumin. Kurkumin merupakan diketon simetrik yang gugus karbonilnya terkonjugasi oleh ,

,

cincin fenolik.

Berdasarkan penelitan Chearwae dkk [10], analisa KLT ekstrak kasar kurkuminoid dengan menggunakan fase gerak kloroform: etanol: asam asetat dengan perbandingan 94 : 5 : 1 (v/v/v) juga menghasilkan 3 spot utama berwarna oranye. Spot yang terakhir kali terelusi (paling non polar) yaitu spot (A) demetoksikurkumin (B) dan bisdemetoksikurkumin (C) Jika dianalisa berdasarkan kepekatan warna dan luas spot pada plat KLT kurkumin merupakan pigmen yang paling dominan yang terdapat pada kunyit. .

.

,

Kurkumin

Demetoksikurkumin Bisdemetoksikurkumi

Gambar 2: Hasil KLT ekstrak kasar kurkuminoid (fase gerak kloroform: methanol = 95 : 5 (v/v) Hasil analisa KLT ekstrak kasar kurkuminoid .

menghasilkan 3 spot utama dengan Rf sebagai berikut : (A) 0,7759; (B) 0,6034; (C) 0,4828.

Analisa spektra UV-Tampak dilakukan dalam pelarut metanol dengan panjang gelombang antara 350-550 nm. Tidak digunakan konsentrasi tertentu dalam analisa ini namun hanya untuk mengetahui serapan maksimum masing-masing fraksi pigmen dalam metanol.

Tabel 1: _

Perbandingan analisa spektra UV-Tampak dalam metanol antara hasil penelitian dan penelitian Bong [8]. __

„.

.

.

..

Pigmen Kurkuminoid

/ maksimum (nm) ---i-1Bong .

___

Kurkumin Demetoksikurkumin B isdemetoksikurkumin _

_

_

423 93 417,00

428

419,01

420

,

417

_

612-Fakultas Sains dan Matematika UKSW Salatiga 13 Juni 2009 ,

Kurkumin sebagai... fE. R Purba & M. Martosuponol

Hasil analisa spektra ekstrak kasar dalam methanol menghasilkan serapan maksimum pada 423, 02 nm. Serapan maksimum fraksi A dalam metanol pada 423 93 nm, lalu fraksi B pada 417 nm, dan fraksi C pada 419,01 nm. ,

417.00

ÿ

I 5-!

_

"

423.02 423.S3

419.01

3 13\ v

*

3

c a

a o

JS C 5-

C3

-

"

353

I

i

400

4:0

SSO

Panjang gelombang (nm)

Gambar 2: Spektra ekstrak kasar kurkuminoid (-), fraksi A (-), B (-) dan C (~) dalam etanol pada 350-550 nm. Biosintesis kurkumin dari Curcuma longa pertama kali dipelajari oleh Roughley dan Whiting [32] melalui kondensasi ferulic acid CoA dengan turunan asam malonat yang kemudian menghasilkan kurkumin. Kondensasi tersebut diikuti dengan proses siklisasi, reduksi, dan dehidrasi. Kurkumin dapat disintesis dari 2,4pentannediona dan vanilin dengan memerlukan beberapa reagen khusus untuk mencegah terjadinya kondensasi aldol. Karena gugus pusat CH2 dari 2,4pentanedione bersifat lebih asam dibandingkan gugus CH3 dari posisi 1 dan 5, hasilnya adalah kondensasi gugus pusat CH2 dalam 2,4-pentanedione dengan anilin yang menghasilkan 3-benzilidene-2,4-pentanedione tersubstitusi. Untuk mencegah terjadinya reaksi ini Pabon [28] menggunakan komplek borium 2,4-pentanedione untuk reaksi kopling dengan vanilin. Setelah reaksi pengasaman komplek kurkuminborium terdekomposisi menjadi kurkumin saja. Pada proses ini banyak analog kurkumin terbentuk [26],

Fakuitas Sains dan Matematika UKSW Salatiga, 13 ]uni 2009-

613

Presiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains IV. No. 3:607-621

4

.

Mekanisme Antioksidan pada Kurkumin

Kurkuminoid mempunyai mekanisme antioksidan hampir sama dengan antosianin karena kedua senyawa tersebut mempunyai gugus fenolik yang merupakan gugus penting sebagai zat antioksidan. Mekanisme antioksidannya mempunyai dua fungsi. Fungsi utamanya adalah dalam pemberian atom hidrogen. Senyawa antioksidan (AH) dapat memberikan atom hidrogen secara cepat ke radial lipida (R*, ROD*) atau mengubahnya ke bentuk lebih stabil sementara turunan radikal antioksidan (A*) tersebut memiliki keadaan lebih stabil dibanding radikal lipida. Fungsi kedua merupakan fungsi sekunder antioksidan yaitu memperlambat laju autooksidasi dengan berbagai mekanisme di luar mekanisme pemutusan rantai autooksidasi dengan pengubahan radikal ke bentuk lebih stabil [22]. ,

,

R*

+ AH

RH + A*

(Radikal Lipida) ROO* + AH + ROH + A*

Radikal-radikal antioksidan (A*) yang terbentuk pada reaksi tersebut relatif stabil dan tidak mempunyai cukup energi untuk dapat bereaksi dengan molekul lipida lain membentuk radikal lipida baru lagi. Radikal-radikal antioksidan dapat saling bereaksi membentuk produk non radikal. Apabila penambahan konsentrasi antioksidan besar, maka akan berpengaruh pada laju oksidasi konsentrasi yang lebih tinggi tersebut dapa menyebabkan aktifitas antioksidan untuk golongan fenolik lenyap, bahkan dapat berubah menjadi prooksidan. Mekanisme dari keterangan ini adalah

AH + 02 A* + HOO* AH + ROOH * RO* + H20 + A*

Pengaruh jumlah konsentrasi pada laju oksidasi tergantung pada struktur antioksidan, kondisi lingkungan dan sampel yang akan diuji. Penghambatan oksidasi lipida oleh antioksidan melalui lebih dari satu mekanisme tergantung pada kondisi reaksi dan sistim makanan. Ada empat kemungkinan mekanisme penghambatan tersebut yaitu (a) pemberian hydrogen, (b) pemberian electron, (c) penambahan lipida pada cincin aromatic antioksidan, dan (d) pembentukan kompleks antara lipida dan cincin aromatik antioksidan. Studi lebih lanjut mengamati bahwa ketika atom hidrogen labil pada suatu antioksidan tertentu diganti dengan deuterium, antioksidan tersebut menjadi stabil. ,

5

5

Metode Penentuan Antioksidan dalam Kurkumin

.

.

1 Kapasitas Penangkapan Radikal Bebas dengan Metode Kim

Pengujian kapasitas penangkapan radikal bisa diukur dengan menggunakan suatu senyawa radikal . Senyawa radikal yang biasa digunakan dalam berbagai penelitian tentang antioksidan adalah DPPH (l,l-diphenyl-2-picrylhydrazyl) yang sifatnya

614

Fakultas Sains dan Matematika UKSW Salatiga, 13 ]uni 2009


stabil dan dapat menerima elektron atau radikal hidrogen menjadi suatu senyawa yang secara diamagnetic stabil. Lebih lanjut bahwa kemampuan radikal DPPH untuk direduksi atau distabilisasi oleh antioksidan diukur dengan menggunakan penurunan absorbansi pada panjang gelombang 517 nm. Elektron yang tidak berpasangan pada DPPH memiliki kemampuan penyerapan yang kuat pada panjang gelombang 517 nm dengan warna ungu. Perubahan warna ungu menjadi kuning terjadi karena DPPH berubah menjadi DPPH-H. Antioksidan berperan mendonorkan atom H sehingga terbentuk DPPH-H tereduksi. Kapasitas penangkapan radikal bebas ditunjukkan dengan presentase berkurangnya warna ungu dari DPPH [21]. Oleh karena itu DPPH biasa digunakan untuk mengkaji kapasitas penangkapan radikal bebas. Berikut ini adalah kapasitas penangkapan radikal bebas dengan metode Kim [21]. Larutan ekstrak kurkumin dipersiapkan dengan melarutkannya pada berbagai konsentrasi menggunakan pelarut kloroform : methanol (2:1) dicampur dengan 1 ml larutan DPPH 0,2 mM dalam methanol. Campuran diinkubasikan selama 30 menit kemudian diukur pada panjang gelombang 517 nm. Penurunan absorbansi menunjukkan peningkatan kemampuan penangkapan radikal DPPH. Kemampuan penangkapan radikal DPPH dihitung dengan persamaan: Ag

A-y

kemampuan penangkapan radikal (%) = 100---x 100 ÿ"0

dimanaÿ o = absorbansi dari control dan A] = absorbansi dari sampel. S

.

2 Penentuan Potensi Suatu Senyawa sebagai Antioksidan atau Daya Reduksi dengan Metode Oyaizu

Daya reduksi merupakan indikator potensi suatu senyawa dapat berfungsi sebagai antioksidan [21]. Daya reduksi diukur dari kemampuan suatu senyawa antioksidan 3+ untuk mengubah ion ferri (Fe ) menjadi ion ferro (Fe2+) melalui reaksi reduksi. Ion ferro merupakan prooksidan yang aktif dengan mengkatalisis dekomposisi hidroperoksida menjadi radikal bebas. Sigh dkk. [37] menambahkan bahwa daya reduksi berkaitan dengan kemampuan senyawa antioksidan mendonasikan atom hidrogennya. Senyawa yang mempunyai daya reduksi dapat berperan sebagai antioksidan karena dapat menstabilkan radikal dengan mendonorkan elektron atau atom hidrogen sehingga senyawa radikal berubah menjadi lebih stabil.

Daya reduksi ditentukan dengan metode Oyaizu yang diperbaharui oleh Gulcin dkk.. Larutan ekstrak kurkumin dibuat dalam berbagai konsentrasi yang diuji menggunakan pelarut buffer fosfat. Larutan ekstrak sebanyak 0,1 ml ditambah dengan 0,25 ml buffer fosfat (0,2 M; pH 6,6) dan 0,25 ml kalium ferrisianida 1%. Campuran diinkubasi pada suhu 50% selama 20 menit kemudian ditambahkan 0,25 ml asam trikloroasetat dan disentrifugasi selama 10 menit dengan kecepatan 1700 ° rpm dan suhu 25 C, 20 menit. Setelah itu ditambahkan 0,25 ml asam trikloroasetat, disentrifugasi 10 menit pada kecepatan 1700 rpm dan suhu 25°C. sebanyak 0,25 supernatan dicampur dengan akuades dan 0,05 ml ferri klorida 0,1%.


615

r Prosiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains IV. No. 3:607-621

[16] Higashi-Okai, K., M. Taniguchi, Y. Okai, 2000, Potent Antioxidative Activity of Non-polyphenolic Fraction of Green Tea (Camelia sinensis) - Association with Pheophytins a and b, Journal ofSci FoodAgric.; 80:117-120. [17] Imaida, K., S. Fukushima, T. Shira, T. Masui, T. Ogiso, N. Ito, 1984, Promoting Activities of Butylated Hydroxiyanisole Butylated Hydroxytoluene and Sodium Lascorbate on Forestomach and Urinary Bladder Carcinogenesis Initiated with Methylnitroso-urea in F 344 Male Rats Gann\ 75: 769-775. [18] Ito, N., S. Fukushima, A. Hagiwara, M. Shibata, T. Ogiso, 1983, Carcinogenecity of Butylated Hydroxyanisole in F 344 Rats J. Natl. Can. ,

,

,

Inst.\ 70: 343-349.

[19] Jayaprakasha, G. K., L. Jagan Mohan Rao, K. K. Sakariah, 2005, Chemistry and Biological Activities of C. longa Trends in Food Science and Technology ,

16, 533-548.

[20] Jovanovic, S. V., C. W. Boone, S. Steenken, M. Trinoga, R.B. dan Kasley, 2001, How Curcumin Works Prefentially with Water Soluble Antioxidants, J. Am. Chem. Soc.; 123:3064-3068.

[21] Kim, O. S., 2005, Radical Scavenging Capacity and Antioxidant Activity of the Vitamer Fraction in Rice Bran J. FoodSci. 70; 3:208-213. ,

[22] Limantara, L. & P. Rahayu, 2008, Sains dan Teknologi Pigmen Alami, Prosiding Sains dan Teknologi Pigmen Alami Seminar Nasional Pigmen 2008 Hotel Grand Wahid Salatiga, 5 September 2008. [23] Majithiya, J. B., A. .N. Parmar, R. Balaraman, 2004, Effect of Curcumin on Triton WR 1339 Induced Hypercholesterolemia in Mice Indian J Pharmacol, ,

-

,

36:381-384.

[24] Moreno, C. S., 2002, Review: Methods Used to Evaluate the Free Radical Scavenging Activity in Foods and Biological Systems Food Science and Technology International 8; 3:121-137. ,

[25] Nugrahadi, S. & L. Limantara, 2008, LIKOPEN: Antioksidan Alifatik yang Efektif, Prosiding Sains dan Teknologi Pigmen Alami Seminar Nasional Pigmen 2008 - Hotel Grand Wahid Salatiga 5 September 2008. [26] Nurfina, A., 1994, The Synthesis of Some Symmetrical Curcumin Derivatives and The Study of Their Anti-inflammatory Activities as well as StructureActivity Relationships Ph.D. Thesis, Gadjah Mada University, Yogyakarta. [27] Osawa, T., Y. Sugiyama, M. Inayoshi, S. Kawakishi, 1995, Antioxidative Activity of Tetrahydro-curcuminoids Biosci. Biotech. Biochem; 59:1609,

,

,

,

1612.

[28] Pabon, H. J. J., 1964, A Synthesis of Curcumin and Related Compounds, Rec. Trav. Chim. 83:379-386.

[29] Pratt, D. E., dan B. J. F. Hudson, 1990, Natural Antioxidant Not Exploitated Comercially, In B. J. F. Hudson (Ed.) Food Antioxidant, Elsevier Applied ,

Science, London.

[30] Pratt, D. E., 1992, Natural Antioksidanfrom Plant Material (Ed.), B.J.F. Hudson, Food Antioxidant Elsevier Applied Sciece, London. ,

620



90 //

---

so vzÿH.---

§ 60 -

,

.

...

...

--

jÿ

-

m 0

0.01

0.03

Konsentrasi HCI(M)

Gam bar 3: Diagram aktivitas antioksidan kurkumin (2,0729 X 10-5 M) tanpa dan dengan penambahan asam.

Untuk mengetahui aktivitas antioksidan kurkumin digunakan pengujian dengan metode DPPH. Pengujian dengan metode DPPH didasarkan pada pengukuran kemampuan antioksidan yang diuji dalam menangkap radikal bebas stabil 1,1difenil-2-pikrilhidrazil [24]. Hasil analisa aktivitas antioksidan dengan menggunakan metode DPPH menunjukkan kurkumin memiki aktivitas antioksidan yang cukup besar yaitu sebesar 87,1045 % dengan konsentrasi 2,0729 * 10-5 M. Bila dibandingkan dengan aktivitas antioksidan pigmen alami lainnya yaitu klorofil a, kurkuminoid masih jauh lebih besar. Aktivitas antioksidan klorofil a dengan konsentrasi setengahnya 1 * 10-5 M, yaitu sebesar 10,05 %. Kurkumin merupakan senyawa yang memiliki potensi yang besar dalam perannya sebagai antioksidan. Jayaprakasha dkk. [19] menyatakan bahwa gugus hidroksil dan metoksil pada cincin fenil dan substituen 1 3 diketon memiliki peran yang sangat signifikan dalam kemampuan kurkumin sebagai antioksidan. Aktivitas antioksidan meningkat dengan meningkatnya gugus hidroksil pada cincin fenil pada posisi orto dengan gugus metoksi. Sementara itu, menurut Jovanovic dkk. [20], aktivitas antioksidan kurkumin disebabkan oleh kemampuan donor atom hidrogen oleh p-diketon untuk ,

,

menetralkan radikal bebas. 7

.

Kurkuminoid dalam Sediaan Obat

Dalam perkembangannya kurkuminoid telah dikembangkan dalam dunia obatobatan, walaupun umumnya berupa obat tradisional seperti jamu. Kenyataan ini karena kurkuminoid terbukti memiliki berbagai fungsi yang mendukung kesehatan. Kurkuminoid diketahui memiliki aktifitas sebagai antioksidan, anti-inflamatori, digestif, antibakteri, antimutagenik, antifungi, antiteratogenik, anti tumor, dan antikarsinogenik [4, 10, 36]. Kurkuminoid juga berfungsi mengatasi katarak, anti asma, anti colitis, anti fibrosis, mencegah kerusakan kulit akibat sinar UV, mencegah pengembangan kanker kulit, perut, kolon, prostat, duodenum dan hati, hipoglisemik/antidiabetik, hipolepidemik, anoreksia, batuk, rematik, sinusitis, anti


617

Presiding Seminar Nasional Sains dan Pendidikan Sains IV, No. 3:607-621

protozoa, anti HIV, hipokolesterol [2, 4, 12, 23, 35, 39]. Kurkuminoid juga mampu menurunkan kadar kolesterol, mengatasi masalah sirkulasi tubuh,penyakit hati, dermatologi dan membersihkan darah [23, 27]. Kurkuminoid juga dimanfaatkan sebagai pewarna kuning pada industri makanan, kosmetik dan tekstil serta sebagai senyawa pemberi aroma dan obat-obatan [2, 13 23]. ,

Selain dalam dunia kesehatan industri kurkuminoid juga dikembangkan dalam bentuk bumbu masakan instan atau pewarna makanan. Beberapa contoh produk kurkuminoid yang telah beredar di pasaran disajikan dalam Tabel 2. ,

Tabel 2: Contoh produk kurkuminoid. Nama Produk

Kemasan

Produsen

Super Curcumin with Biopherine

kapsul kapsul kapsul kapsul pil

Life Extension

Curcumi

Chlorocure Nutri-Pak

Curcumin and Honey

NOW Nutrend

Nutraceutical Company Khang Minh Trading And Sevice Company Ltd.

Sumber: Limantara dan Rahayu [22],

Selain mempUttyai aktifitas fisiologis sebagai antioksidan kurkumin berfungsi sebagai antiinflamasi [41] antibakteri [21], antijamur [33], antihepatotoksik (antiliver) [5], antikolesterol dan antikanker [1] dan antiplatelet agregasi (pembekuan darah yang menyebabkan stroke). Kurkumin juga memiliki imunomodulator yang dapat meningkatkan daya tahan tubuh terhadap serangan penyakit. Kurkumin juga dapat mengatasi katarak, anti asma, anti colitis, antifibrosis, mencegah kerusakan kulit akibat sinar UV mencegah pengembangangan kanker kulit, kolon, prostat, duodenum dan hati, hipoglisemik/antidiabetik, hipolepidemik anoreksia, batuk, rematik, sinusitis, anti HIV, hipokolesterol [3,-4 12, 23, 35, 39]. Selain dimanfaatkan dalam sediaan obatobatan, kurkumin juga dimanfaatkan dalam pewarna makanan kosmetik, dan tekstil [2,13,23]. ,

,

,

,

,

,

8

.

Penutup

Seiring dengan bertambahnya pengetahuan yang terkait dengan aktifitas antioksidan alami dari kurkumin yang dilengkapi dengan metode penentuan antioksidannya kiranya dapat membawa kita bersama untuk lebih meniperdayakan keanekaragaman sumber daya alam hayati Indonesia yang sangat luar biasa ini. Melihat masih banyak manfaat yang dapat digali dari kurkumin ini maka diperlukan penelitian mengenai hal lain yang lebih mendalam selain untuk mengidentifikasi jenis senyawa antioksidannya. ,

618




,

,

Inst.\ 70: 343-349.


16, 533-548.




-

,

36:381-384.



,

,

,

1612.



Science, London.


620




,

,

Inst.\ 70: 343-349.


16, 533-548.




-

,

36:381-384.



,

,

,

1612.



Science, London.


620


Kurkumin sebagai... fE. R Purba & M. Martosuponol _

_

[31] Rostiana, O., A. Hadat, Taryono, 1989, Evaluasi dan Pemanfaatan Plasma Nuftah Kunyit, Simposium Tanaman Industri Pusat Penelitian dan Pengembangan Tanaman Industri, Bogor. [32] Roughley, P. J. & D. A. Whiting, 1973, Experiments in The Biosynthesis of Curcumin, J. Chem. Soc. Perkin. 1:2379-2388. [33] Rukayadi, Y., D. Yong, J. K. Hwang, 2006, In Vitro Anticandidal Activity of Xanthorizol Isolated from Curcuma Xanthorrhiza Roxb, Journal of Antimicrobial Chemotherapy:; 57:1231-1234. [34] Sangat, H. & Rumantyo, 1989, Etnobotani Kunyit (Curcuma domestica Val), Kongres Nasional Biologi IX, Universitas Andalas, Padang. [35] Scartezzini, P. & E. Speroni, 2000, Review on Some Plants of Indian Traditional Medicine with Antioxidant Activity, J Ethnoparmacol; 71:23-43. [36] Sharma. R. A. et al., 2001, Effects of Dietary Curcumin on Glutathione Strnsferase and Malondialdehyde-DNA Adducts in Rat Liver and Colon Mucosa: Relationship with Drug Levelsl, Clinical cancer research; 7:14521458.

[37] Singh D., P. Marimuthu, C. S. De Heluani, C. Catalan, 2005, Antimicrobial and Antioxidant Potentials of Essential Oil Acetone Extract of Myristica Fragrans Houtt. (aril part), J. ofFoodSci. 70; 2:M141-M148. [38] Su, Y. L. et al., 2004, Antioxidant Activity of Tea Theaflavins and Methylated

Catechin in Canola Oil, JAOCS31; 3:269-274.

[39] Suryanarayana, P., K. Krishnaswamy, G. B. Reddy, 2003, Effect of Curcumin on Galactose induced Cataractogenesis n Rats, Molecular Vision, 9:223-230. [40] Takashi, M. & S. Takayuki, 1997, Antioxidant Activities of Natural Compounds In Plants, J! Agriculture Food Chem:, 45:1819- 1822. [41] Tohda, C., N. Nakayama, F. Hatanaka, K. Komatsu, 2006, Comparison of Anti-imflamatory Activities of Six Curcuma Rhizomes: A Possible Curcuminoid-Independent Pathways Mediated by Curcuma Phaeocaulis Extract, Original Article 3; 2:255-260. [42] Trully, M. S. P. & K. H. Timotius, 2007, Pengaruh Penambahan Asam Terhadap Aktivitas Antioksidan Kurkumin, Thesis Magister Biologi, Universitas Kristen Satya Wacana, Salatiga. [43] Van der Goot, H., 1995. The Chemistry and Qualitative Structure-activity Relationships of Curcumin dalam Pramono, S., Jenie, U.A., Sudibyo, RS., Gunawan, D. (1995), Curcumin Pharmacochemistry, Proceedings of the international symposium on curcumin pharmacochemistry (ISCP), Aditya

Media, Yogyakarta. [44] Winarto, W. P., 2003, Khasiat dan Manfaat Kunyit, Agromedia Pustaka, Jakarta.

[45] Witschi, H., D. Williamson, S. Lock, 1997, Enhancement of Urethane Tumorigenesis in Mouse Lung by Butylated Hyhroxytoluene, J. Natl.Can. Inst.; 58: 301-305.


621

Kurkumin sebagai... fe. R Purba & M. Martosupono)

Recommend Documents