Keterangan Cover Depan: Moluska di lereng selatan Gunung Slamet (Foto: T. Bagus Putra Prakarsa)
BIOTROPIC
The Journal of Tropical Biology Vol. 1, No.2, Agustus 2017 ISSN 2580 - 5029
Penanggung jawab Prof. Dr. H.Moh. Sholeh
Chief Editor Tatag Bagus Putra Prakarsa
Editorial Board Risa Purnama Sari Yuanita Rachmawati Esti Tyastirin Romyun Alvi Khoiriyah Eko Teguh Pribadi
Mitrabestari Ir. Maharadatunkamsi, M.Sc. (Puslit Biologi, LIPI) Sudaryanto, M.Si. (Universitas Udayana, Bali) Indro Prastowo, M.Biotech (Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta)
Subscription Program Studi Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Negeri Sunan Ampel Surabaya Jl. A. Yani 117 Surabaya 60237 Indonesia Website: http://jurnalsaintek.uinsby.ac.id/index.php/biotropic Email:
[email protected]
PENGANTAR EDITOR
Biotropic, the journal of tropical biology merupakan jurnal biologi yang diterbitkan oleh Program Studi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Islam Sunan Ampel Surabaya. Biotropic diterbitkan secara berkala dua kali dalam satu tahun (Februari dan Agustus). Ruang lingkup Biotropic mencakup kajian keilmuan bidang biologi tropis yang terkait dengan Ekologi, Zoologi, Botani, Microbiologi, BIologi Molekuler, Biospeleologi, Konservasi, dan bidang kajian biologi lainya. Biotropic volume 1 nomor 2 tahun 2017 ini menyajikan 6 publikasi, yang meliputi naskah mengenai Genetika, Arthropoda, Reptil, dua naskah mengenai bakteri. Kami mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah berkontribusi dalam penerbitan jurnal ini. Semoga kedepan kualitas Biotropic semakin baik dan terus meningkat dari edisi-edisi sebelumnya.
Surabaya, Agustus 2017 Editor
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1 No 2, Agustus 2017 ISSN 2580 - 5029
DAFTAR ISI CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition Yuanita Rachmawati, Ganies Riza Aristya , Budi Setiadi Daryono 1 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh Andi Joko Purnomo, Anisa Anggraeni, Rini Kusuma Astuti, Agustina Budi Lestari, Galuh Ajeng Antasari 9 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis Risa Purnamasari 16 Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri Tatag Bagus Putra Prakarsa, Kurnia Ahmadin 31 Perilaku Reptilia Ketika Gerhana Matahari Parsial di PASTY Yogyakarta Henro Kusumo EP Moro, Hanifah N., Tanzilla R., Lestariningsih, F.
37
Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa Izza Hananingtyas 41
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1. No 2. Agustus 2017 ISSN 2580-5029
CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition Yuanita Rachmawati*1, Ganies Riza Aristya2 , Budi Setiadi Daryono2 1 Universitas 2
Islam Negri Sunan Ampel of Surabaya,
Genetic Laboratory, Biologi Faculty, Universitas Gadjah Mada.
* e-mail:
[email protected]
ABSTRACT CmBGI is the enzymatic genes encoding β-glucosidase that involved in Abscisic Acid (ABA) metabolism of Cucumis melo L. β-glucosidase promotes the accumulation of glucose, fructose, and sucrose, and it might act as a regulator that mediates melon fruit ripening both climacteric and nonclimacteric. ABA mediates adaptive responses to abiotic and biotic stresses. Agricultural Balitbang in 1997 showed that there were approximately 158.600 ha of degraded land scattered in three zones of agroecosystems in Yogyakarta (DIY). One of them is Dlingo Bantul area which has a karst type critical land area. Karst provides stress to the certain plant growth. One way to conserve critical land is making this area for agriculture. Cultivar TACAPA and TA were superior melons that have been developed by Genetic Laboratory of Biology Faculty UGM. This preliminary research was conducted to examine molecular characterization of CmBGI gene expression in cultivar TACAPA and TA which are planted in normal condition medium and in critical land medium treatment. Total RNA was extracted from leaf tissue then Reversed Transcriptase (RTPCR) to collect cDNA library. cDNA was amplified using specific primer. Spectrophotometry was conducted in λ260 nm and electrophoresis run in 1.5% agarose gel. Control of band chosen was Cm-Actin. CmBGI gene concentration of TACAPA and TA in normal condition medium are in succession 578.5 and 579.4 µg/ml then for critical land medium treatment 743.4 and 773.5 µg/ml. CmBGI band was showed both of TACAPA and TA as ± 1258 bp. Cm-actin was showed band of DNA as ± 445 bp. CmBGI gene concentration in critical land medium treatment which is given greater stress on melons are higher than normal condition. This suggests that the CmBGI gene is expressed more in cultivar TACAPA and TA melons when they are grown under stress condition. Keywords: Gene expression, CmBGI, β-glucosidase, stress condition, TACAPA and TA.
PENDAHULUAN CmBGI
is
development, the
enzymatic
seed
maturation,
genes
dormancy, and germination as discussed
involved in ABA metabolism of Cucumis
by (Ren, et.al., 2010; Li, et.al., 2012; Sun,
melo L. The phytohormone abscisic acid
et.al., 2013). ABA mediates adaptive
(ABA) has been reported that plays an
responses to abiotic and biotic stresses
important role in plant growth, fruit
ABA induces or regulates corresponding
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
gene expressions in the biochemical and physiological
processes
during
Researches on the role of the gene
plant
encoding β-glucosidase of various crops
development (Barthe, 2000). It is known
have been widely studied. β-glucosidase 1
that plants mediate adaptive responses to
(AtBG1)
physiological and environmental changes
thaliana, where it catalyzes the release of
by fluxing the endogenous ABA level,
ABA-GE back into active ABA in order to
which is controlled by the process of
rapidly adjust ABA levels as discussed by
biosynthesis and catabolism.
(Lee, et.al., 2006). These findings suggest
was
found
in
Arabidopsis
ABA synthesis process in plant. ABA in
a complex regulation mechanism for ABA
higher plants is formed from xanthoxin
accumulation. During grape ripening, the
via ABA-aldehyde by two oxidation
expression of VvBG1 remains at high
reactions. The cis-isomers of violaxanthin
levels from coloration to fruit ripening,
and neoxanthin are cleaved to a C15
which indicates that ABA, produced by
product, xanthoxin and a C25 metabolite
VvBG1, plays an important role in
(Li, et.al., 2012; Sun, et.al., 2013). Active
regulating the levels of ABA during the
ABA can be either degraded to some
later stages of ripening (Sun, et.al., 2013).
inactive structures in higher plants,
In addition, the level of ABA in plants is
through an irreversible pathway starting
susceptible to the effect of environmental
with 8’-hydroxylation and catalyzed by
stress (Castellarin, 2007). Nowadays, the
ABA
or
study of the molecular development
ABA-
mechanisms in climacteric fruits has
glucosylester (ABA-GE), catalyzed by ABA
made great progress. Therefore it has
glucosyltransferase
as
been suggested that ABA may participate
The
in the regulation of watermelon ripening.
conjugation is the simple process of ABA
However, it still remains unclear how the
to either ABA-glucosyl ester (-GE) or
ABA levels are regulated by BG transcript
ABA-glucosyl ether (-GS). ABA-GE and
levels during watermelon development
ABA-GS have been isolated from several
and ripening, and what the roles of β-
plant species as discussed by (Xu, et.al.,
glucosidase are during the process of
2002) The glucosyl-transferase (GTase)
water-melon ripening.
stored
8’-hydroxylase in
discussed
the
by
(CYP707As),
bound
form
(ABA-GTase)
(Barthe,
2000).
can transfer nucleoside diphosphate-
Indonesian Agricultural Research and
activated sugars to receptors of low
Development (Balitbang) in 1997 showed
molecular weight substrates.
that there were approximately 158.600 2
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
ha of degraded land scattered in three
♂ PI 371795 which is resistant to
zones of agro-ecosystems in Yogyakarta
powdery mildew. TACAPA melon have
(DIY). One of them is Dlingo Bantul area
superior as discussed by (Aristya, 2006)
which has a karst type critical land area.
characteristics which is resulted from the
Karst is an area that has specific
breeding of its parent characteristics, in
characteristics of relief and drainage
examples the flattened shape with fine
because the degree of dissolution of
net, green yellowish flesh, sweet taste,
limestone
and resistant to powdery mildew as
rock
undergoes
intensive
weathering (Nahdi, dkk., 2012).
The
discussed
elsewhere
(Aristya,
2009;
drainage system is very unique because it
Daryono dan Qurrohman, 2009; Qurrohman,
is dominated by subsurface water which
2011). While melon TA is the result of a
mostly go to the underground layer in the
cross between TACAPA with Action 434.
rainy season. This condition causes the
Melon TACAPA and TA are superior
water cannot be retained on the surface
melons which are developed by Biology.
and
straight
into
the
ground.
In this study, we conducted an
Characteristics of highly specific karst
analysis
of
CmBGIgene
expression
ecosystem can cause biological problems,
encoding β-glucosidase that contributes
especially the plants that can live in this
to the regulation of phytohormones ABA.
region is a plant that has a high
Gene expression was quantitatively and
adaptability to drought, and high pH as
qualitatively analyzed between melons
discussed by (Nahdi, dkk., 2012). Karst
which were grown in normal condition
provides stress to the certain plant
compared to melons which were grown
growth.
in normal critical land medium.
TACAPA is one of climacteric melons which developed from the plant breeding
MATERIAL AND METHOD
process. It is resulted from the crossing
Experiments were conducted in 2014
between ♀ Action 434 which is a
in the greenhouse of KP4 UGM. Melon
commercial melon with a sweet taste and
cultivar TACAPA and TA were used in
Table 1. Specific primers used for amplification of genes from melon Name Oligonucleotides Accession CmBGI-F 5’-ACAGAGACCCACCCATCTACATAACAGA-3’ JQ268078 CmBGI-R 5’-TCGACGTAGGTTATACCAAATCGCA-3’ Cm-Actin 5’-CATGTTCACCACCACTGCCGA-3’ AB640865 Cm-Actin 5’-TGGCTGGAATAGAACTTCTGGGC-3’
3
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
these experiments. These melons were
results using spectrophotometry at λ 260
developed by genetics laboratory of
nm.
Biology
Faculty
Gadjah
Mada
Data Table 2 shows that the RNA
Molecular
scale
concentration results for the melons
genetics
grown in critical land medium treatment
laboratory of Biology Faculty, FALITMA
are lower than melons grown in normal
laboratory of Biology Faculty, and LPPT
condition. It occurs in both of cultivars
UGM.
TACAPA and TA.
University
of
(UGM).
experiments
conducted
at
Melon TACAPA and TA planted on 2
cDNA library concentration results
different growing mediums. Normal soil
obtained
medium containing soil mixed with
process shows different results. Melons
fertilizer. Critical land medium contain
growth in critical land medium treatment
karst
from
are having more cDNA libraries than
Aroforestry II Critical land area of
compared to normal condition. As like as
Yogyakarta, Dlingo Bantul. Coordinates
cDNA library concentration results, the
land acquisition lies in BT: 110o27'56.2"
concentration results of the CmBGI gene
LS: 07o55'58.7" with Elevation: 230.
in critical land medium treatment which
soil
type
Molecular
that
data
taken
were
analyzed
qualitatively by looking at the band that
after
reverse
transcription
is given greater stress on melons are higher than normal condition.
formed in the process of electrophoresis. CmBGI genes will show a DNA band at
RESULT AND DISCUSSION
1258 bp. CmActin control genes will show
RNA isolation was performed to
a DNA band at 445 bp. Quantitative
compare CmBGI gene expression in Cucumis melo L. which are grown in
Table 2. Genes concentration of melon cultivar TACAPA and TA Genes Concentration (µg/ml) Control Critical Land TACAPA TA TACAPA TA Genome 186.7 108.2 131.3 102.3 cDNA 1031.5 1295.7 2524.9 2715.9 PCR Product CmBGI (25ρmol) 578.5 579.4 743.4 773.5
molecular data analysis done by looking
normal
condition
with
critical
land
at the concentration of the isolated RNA
medium treatment. Dlingo Critical land
(mRNA), cDNA, and CmBGI genes PCR
give stress on both the melon cultivars 4
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
TACAPA and TA. The results showed that
In this study the concentration of
the concentration of RNA isolation, cDNA
cDNA generated on cultivar TACAPA and
libraries, and the results of PCR (gene
TA melons are much larger when
CmBGI) are different between melons
compared to the results of RNA isolation.
grown in normal condition with critical
This is due to in the process of reverse
land medium treatment (see Table 2).
transcription, RNA are amplified and
Results
of
PCR
specific
copied into cDNA when OligodT primer
primers were run on 1.5% agarose gel
initiates elongation process. In addition,
electrophoresis.
OligodT primer itself is DNA sequence.
PCR
using results
in
the
electrophoresis process including: CmBGI
CmBGI gene concentration resulted
genes of cultivars TACAPA and TA which
from the PCR process of each cultivar
are grown either in normal condition or
TACAPA and TA indicates that the melon
critical land medium treatment; Cucumis
cultivars grown on critical land medium
sativus RNA isolation result and then
treatment gives results greater than
carried out reverse transcription to
melons grown in normal condition. This
obtain cDNA library, cDNA obtained are
suggests
amplified by using CmBGI gene-specific
expressed more when grown in stress
primers (as a negative control 1); Cucumis
condition.
melo L. DNA isolation result, then
glucosidase enzymes that regulate ABA.
amplified by using gene-specific primers
This regulation are shown in a role of the
CmBGI (as a negative control 2).
releasing of the bond between the ABA-
that
the
CmBGI
CmBGI gene
gene
encodes
is β-
Figure.1. PCR profiles of TACAPA and TA melon. M - molecular marker (Vivantis, 1 kb), T cultivar TACAPA, TA - cultivar TA, K1(-) negative control of CmBGI in Cucumis sativus, K2(-) negative control of CmBGI from DNA isolation result of Cucumis melo L., C.1 - CmBGI gene of Melon in a control medium, CL.1 - CmBGI gene of Melon in a critical land medium, C (-) negative control of CmBGI in Cucumis sativus and CmBGI from DNA isolation of Cucumis melo L., C.2 - CmActin gene of Melon in a control medium, CL.2 - CmActin gene of Melon in a critical land medium 5
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
glucosylester (ABA-GE) and ABA-glucosyl
Cucumis melo L.. While the negative
ether
ABA
control 2, Cucumis melo L. template for
as
amplification from DNA isolation process,
discussed by [8]. The conjugation is the
also showed no CmBGI gene expression.
simple process of ABA to either ABA-
This is due to the gene is specific for DNA
glucosyl ester (GE) or ABA-glucosyl ether
sequences
(-GS). If the bond has been detached, the
expression (from the isolated RNA).
(-GS).
Catalyzed
glucosyltransferase
by
(ABA-GTase)
ABA will be active.
derived
from
mRNA
To determine quantitatively the
CmBGI gene encodes an enzyme that
CmBGI gene expression, it is required a
regulates hormone ABA. According to
more comprehensive techniques such as
(Chernys et.al.,2000; Zhu, et.al.,2002) ABA
Real Time PCR.
mediates adaptive responses to abiotic and biotic stresses. It is known that plants mediate
adaptive
to
CmBGI gene concentration in critical
physiological and environmental changes
land medium treatment which is given
by fluxing the endogenous ABA level,
greater stress on melons are higher than
which is controlled by the process of
normal condition. This suggests that the
biosynthesis and catabolism. The level of
CmBGI gene is expressed more in cultivar
ABA in plants is susceptible to the effect
TACAPA and TA melons when they are
of
grown under stress condition. Running
environmental
responses
CONCLUSION
stress
(Castellarin,
et.al.,2007)
negative control
Results of running gene on 1.5%
electrophoresis
Cucumis sativus
gel
showed
that
in in
agarose gels showed that CmBGI genes of
cucumber, CmBGI gene is not expressed.
each cultivar are expressed both of
This is due to primer used are proven to
normal
critical
land
be specific for Cucumis melo L. While the
However,
the
negative control 2, Cucumis melo L.
thickness of band ± 1258 bp formed also
template for amplification from DNA
different, which is shows qualitatively of
isolation process, also showed no CmBGI
expressed genes.
gene expression. Real time PCR is needed
medium
condition
and
treatment.
Running negative control of Cucumis sativus showed that in cucumber, CmBGI
to
measure
the
gene
expression
quantitatively.
gene is not expressed. This is due to primers used are proven to be specific for 6
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
ACKNOWLEDGEMENT Our gratitude goes to the Ministry of Research and Technology of Indonesia (KEMENRISTEK) through the research grants from INSINAS program that have been given for this team. DAFTAR PUSTAKA Ren J, Sun L, Wu JF, Zhao SL,Wang CL, WangYP. 2010. Cloning and expression analysis of cDNAs for ABA8’-hydroxylase during sweet cherry fruit maturation and under stress conditions. J Plant Physiol;167:1486–1493. Li Q, Ping L, Liang S, Yanping W, Kai J, Yufei S, Shengjie D, Pei C, Chaorui D, Ping L. 2012. Expression analysis of β-galactosidase that regulate abscisic acid homeostatis during watermelon (Citrulus lanatus) development and under stress condition. J Plant Physiol:169:78-85. Sun Y, Pei C, Chaorui D, Pang T, Yanping W, Kai J, Yin H, Qian L, Shengjie D, Yan W, Hao L, Liang S, Ping L. 2013. Transcriptional regulation of gene encoding key enzymes of ABA metabolism during melon (Cucumis melo L.) fruit development and ripening. J Plant Growth Regulation 2013:32:233-244. Chernys JT, Zeevaart JAD. 2000. Characterization of the 9-cisepoxycarotenoid dioxygenase gene family and the regulation of abcisic acid biosynthesis in avocado. J Plant Physiol:124:343-353. Zhu JK. 2002. Salt and drought stress signal transduction in plants. Annu Rev Plant Biol:53:247-273.
Koyama K, Sadamatsu K, Goto-Yamamoto N. 2010. Abscisic acid stimulated ripening and gene expression in berry skins of the Cabernet Sauvignon grape. Funct Integr Genomics:10:367-381. Barthe P, Garello G, Bianco-Trinchant J, Ie Page-Degivry MT. 2000. Oxygen availability and ABA metabolism in Fagus sylvatica seeds. Plant Growth Regul:30:185–191. Xu ZJ, Nakajima M, Suzuki Y, Yamaguchi I. 2002. Cloning and characterization of the abscisic acid-specific glucosyltransferase gene from Adzuki bean seedlings. J Plant Physiol:129:12851295. Lee KH, Piao HL, Kim HY, Choi SM, Jiang F, Hartung W. 2006. Activation of glucosidase via stress-induced polymerization rapidly increases active pools of abscisic acid. J Cell:126:1109-1120. Castellarin SD, Pfeiffer A, Sivilotti P, Degan M, Peterlunger E, Di Gaspero G. Transcriptional regulation of anthocyanin biosynthesis in ripening fruits of grapevine under seasonal water deficit. J Plant Cell Environ 2007:30:1381-1399. Nahdi, M. S. 2012. Konservasi Ekosistem Lahan Kritis Berbasis Kearifan Masyarakat di Kawasan Imogiri Yogyakarta. Disertasi Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Aristya, G. R. 2006. Skrining dan Pewarisan Sifat Ketahanan Tanaman Melon (Cucumis melo L.) terhadap Powdery Mildew (Jamur Tepung). Skripsi Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta..
7
Biotropic 2017. 1. (2): 1 – 8 CmBGI Gene Expression encoding β-glucosidase in melon (Cucumis melo L.) under stress condition
Aristya, G. R. 2009. Pewarisan dan Pemetaan Penanda Sequence Characterized Amplified Region (SCAR) Terpaut Gen Penyandi Ketahanan Powdery Mildew [Podosphaera xanthii (Castag.) Braun et Shiskoff)] Pada Tanaman Melon (Cucumis melo L.). Tesis Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Daryono BS, Qurrohman MT. 2009. Pewarisan Sifat Ketahanan Melon (Cucumis melo L.) Terhadap Powdery Mildew (Podosphaera xantii (Castag.) Braun et Shishkoff). J Perlindungan Tanaman Indonesia:15:1-6. Qurrohman MT. 2011. Analisis Keterpautan Gen Ketahanan terhadap Powdery Mildew pada Tanaman Melon (Cucumis melo L.) Hasil Test Cross dengan Penanda Sequence Characterized Amplified Region (SCAR). Tesis Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.
8
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1. No 2. Agustus 2017 ISSN 2580-5029
Potensi Bakteri Penambat Nitrogen dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh Andi Joko Purnomo1, Anisa Anggraeni1, Rini Kusuma Astuti1, Agustina Budi Lestari1, Galuh Ajeng Antasari1 1 BSG
(Biospeleology Studien Gruppen), Kelompok Studi Biospeleologi, Jurusan Pendidikan Biologi FMIPA UNY, Yokyakarta, Indonesia
*
[email protected] ABSTRAK: Gua Anjani merupakan salah satu gua horizontal yang terletak pada kawasan karst Menoreh, Purworejo, Jawa Tengah.Gua memiliki ekosistem spesifik dengan berbagai organisme pembentuk ekosistem gua, salah satunya bakteri penambat nitrogen.Bakteri penambat nitrogen merupakan bakteri yang berperan dalam penyediaan nitrogen pada tanah karena bakteri tipe ini mampu menambat nitrat dengan mengoksidasi ion ammonium pada tanah sehingga dapat terikat dengan kuat pada komponen-komponen humus yang menyebabkan nitrat tidak mudah terbilas keluar tanah (Schlegel, 1994). Bakteri penambat N lebih banyak dijumpai pada daerah rhizosfir, sedangkan paku epifit banyak ditemukan di mulut gua. Dalam penelitian ini, peneliti akan mengkarakterisasi bakteri penambat nitrogen dan penghasil hormone IAA, menghitung kelimpahannya dan menganalisis kemampuan bakteri tersebut dalam menambat nitrogen sehingga dapat dijadikan salah satu landasan untuk mengembangkan dan memanfaatkan bakteri ini secara lebih lanjut . Bakteri ini akan diisolasi dari sampel tanah yang ada di Gua Nguwik di Kawasan Karst Menoreh, Purworejo, JawaTengah. Berdasarkan penelitian didapatkan hasil pengukuran fiksasi nitrogen pada media NB dengan panjang gelombang 420 nm, pada jam ke 24 didaptkan hasil, isolat T1 memiliki rerata 0,416, G2 sebesar 0,408, dan R2 sebesar 0,402. Kemudian pengukuran pada jam ke 48 didapatkan hasil rerata untuk T1 sebesar 0,457, G2 sebesar 0,635 dan R2 sebesar 0,628. Kemudian dari hasil pengukuran terhadap kepadatan sel pada media NFM diketahui bahwa pada jam ke 24, isolat T1 memiliki rerata 1,605, G2 sebesar 1,682 dan R2 sebesar1,679. Kemudian pada jam ke 48 didapat rerata T1 sebesar 1,764, G2 sebesar 1,725 dan R2 sebesar 1,773. Kata Kunci: Bakteri penambat nitrogen, Gua Anjani, hormone IAA, paku epifit, rhizosfer
PENDAHULUAN Karst adalah suatu kawasan yang
Bentang alamnya yang unik merupakan sisi luar (eksokarst) dan di bawah
memilki karakteristik relief dan drainase
permukaannya
yang khas, terutama disebabkan oleh
gua.
(endokarst),
termasuk
derajat pelarutan batu batuannya yang
Gua memiliki lingkungan yang unik
intensif (Ford dan Williams, 1989).
dan rentan terhadap perubahan, kondisi
Biotropic 2017. 1. (2): 9– 15 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh
yang khusus ini menjadikan gua memilik
penghasil zat pengatur tumbuh. Hampir
ekosistem yang spesifik (Rahmadi Cahyo,
seluruh isolat bakteri penambat N yang
2008). Ekosistem gua yang spesifik
diisolasi dari tanah masam, terbukti
dicirikan dengan keragaman habitat, yang
sebagai penambat nitrogen bebas dari
seragam dalam kegelapan, kelembaban
udara
yang tinggi, variasi temperatur yang kecil
fitohormon Indol Acetic Acid (IAA) dan
mendekati 9 rata-rata tahunan lokal dan
Gibrelic Acid.
serta
mampu
menghasilkan
hampir tidak adanya aliran udara. Salah
Dalam tanah bakteri penambat N
satu organisme yang ikut membentuk
lebih banyak dijumpai pada daerah
ekosistem di dalam gua adalah mikroba
rhizosfir dari pada daerah non-rhizosfir
yang ada di dalam tanah.
sedangkan paku epifit banyak ditemukan
Bakteri
penambat
nitrogen
di mulut gua. Kondisi rhizosfir yang
merupakan bakteri yang berperan dalam
optimal
penyediaan nitrogen pada tanah karena
penambat N akan menyebabkan N yang
bakteri tipe ini mampu menambat nitrat
ditambatnya
dengan mengoksidasi ion ammonium
Lingkungan
pada tanah sehingga dapat terikat dengan
mempengaruhi
kuat pada komponen-komponen humus
penambat
yang menyebabkan nitrat tidak mudah
senyawa karbon (C) yang dibutuhkan.
terbilas keluar tanah (Schlegel, 1994).
Dalam
Hasil bahwa
penelitian, mikroba
(Azospirillum
sp,
menunjukkan penambat
N
Azotobacter
sp,
bagi
pertumbuhan semakin rhizosfir
bakteri maksimal.
yang
sangat
kehidupan
N
adalah
penelitian
mengkarakterisasi
ini,
bakteri
ketersediaan peneliti
bakteri
akan
penambat
nitrogen dan penghasil hormone IAA, menghitung
kelimpahannya
Aerosomonas sp. dan Aspergillus sp.)
menganalisis
kemampuan
bakteri
memiliki
tersebut
menambat
nitrogen
kemampuan
ganda
dalam
dalam
dan
penambatan nitrogen bebas dari udara
sehingga dapat dijadikan salah satu
sekaligus
sebagai
pemantap
agregat
landasan untuk mengembangkan dan
Penelitian
Wedhastri
(2002),
memanfaatkan bakteri ini secara lebih
menyimpulkan bahwa dari beberapa
lanjut. Bakteri ini akan diisolasi dari
strain hasil isolasi dan seleksi mikroba
sampel tanah yang ada di Gua Nguwik di
penambat N (Azotobacter) mempunyai
Kawasan Karst Menoreh, Purworejo, Jawa
kemampuan ganda dalam menambat
Tengah. Adapun tujuan penelitian ini
nitrogen
adalah
tanah.
dari
udara,
juga
sebagai
untuk
mengetahui
karakter 10
Biotropic 2017. 1. (2): 9– 15 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh
morfologi koloni bakteri yang dapat
reagen salwski, NA (Nutrient Agar), NB
menambat nitrogen dari sampel rizosfer
(Nutrient Broth) Media Nitrogen free
paku epifit dari mulut Gua Anjani di
Mannitol (NFM), alkohol, akuades.
Kawasan Kars Menoreh, Purworejo, Jawa
Pengambilan data dan Pengolahan
Tengah, mengetahui karakter morfologi
data
koloni bakteri yang dapat menambat
Pengambilan beberapa sampel paku
nitrogen dari sampel rizosfer paku epifit,
dilakukan secara acak dengan teknik
mengetahui
penambat
septik menggunakan skalpel steril, dan
nitrogen dan penghasil hormone IAA
disatukan dalam plastik klip.Kemudian
yang memiliki kepadatan sel tertinggi,
diberi label. Sampel dimasukkan dalam
serta
fiksasi
media NFM cair dan dishaker selama 24-
nitrogen dan produksi hormon IAA dari
48 jam. Sampel kemudian diencerkan
bakteri sampel rizosfer paku epifit dari
menggunakan NaCl fisiologis dengan taraf
mulut Gua Anjani di Kawasan Kars
pengenceran 10-4 hingga 10-6. Isolasi
Menoreh, Purworejo, Jawa Tengah.
bakteri penambat nitrogen dilakukan
isolat
bakteri
mengetahui
aktivitas
dengan METODE
menggunakan
medium
pertumbuhan NFM. Bakteri diinkubasi
Penelitian ini dilaksanakan pada
selama 48 jam, dan diamati koloni yang
bulan Juli hingga September 2014 dengan
tumbuh..Isolat tersebut dikarakterisasi
tempat
bakteri
yang meliputi morfologi koloni dan
Nguwik
fenotipik sel.
patogen
pengambilan yang
ada
sampel di
Gua
Kawasan Karst Menoreh, Purworejo, Jawa Tengah
kemudian
mengidentifikasi patogen, menghitung
mengisolasi karakter
tingkat
patogenitas
dan
bakteri dan
kelimpahannya
di
Laboratorium mikrobiologi FMIPA UNY.
Uji fiksasi N diudara dilakukan berdasarkan metode Ikhwan (2006). Kemampuan
penambatan
N2
diukur
dengan menghitung N2 yang terlarut dalam
air
dalam
bentuk
NH4
menggunakan spektrofotometer dengan
Alat alat yang digunakan dalam
panjang gelombang 420 nm dan dengan
penelitian ini adalah kain kassa, kapas,
penambahan reagen salkowski. Isolat-
kertas payung, kertas cakram, botol
isolat bakteri endofit ditumbuhkan pada
kultur. Bahan yang digunakan ialah
media NB cair dan di inkubasi dalam
rhizosfer yang diisolasi dari tumbuhan
shaker inkubator selama 24 jam.
paku epifit di daerah ulut gua anjani, 11
Biotropic 2017. 1. (2): 9– 15 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh
Pengukuran
kepadatan
bakteri
koloniround, elevasinya konveks dan ia
dilakukan dengan menanam isolat pada
merupakan bakteri anaerob fakultatif.
media NFM cair dan menshaker serta
Dalam
menginkubasinya dalam suhu ruang.
karakterisasi
Isolat kemudian diukur menggunakan
untuk mengetahui jenisbakteri secara
spektrofotometer
lebih lanjut tidak memungkinkan, dan
panjang
gelombang
hal
ini
hanya
dilakukan
dikarenakan
pengujian
600 nm.
dalam tujuan pun hanya karakterisasi
Teknik analisis data
saja yang dituju.
Teknik analisis data menggunakan
Hasil pengujian kepadatan sel pada
analisis deskriptif untuk data karakter
media NFM hari ke 0 dengan panjang
fenotipik bakteri penambat nitrogen,
gelombang 600 nm, diketahui bahwa
kepadatn sel bakteri penambat nitrogen
isolat J1 memiliki rerata kepadatan sel
dan penghasil hormon IAA.
1,42,isolat T1 sebesar 1,555, isolat R2 1,595, dan isolat G2 sebesar 1,580.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Sehingga dapat dikatakan isolat T1, R2,
Hasil penelitian yang dilakukan
dam G2 merupakan 3 isolat bakteri yang
disajikan dalam tabel berikut.
memiliki rerata kepadatan sel terbesar.
Tabel 1. Fiksasi nitrogen dan kepadatan sel
Ketiga isolat ini disebut isolate terpilih yang nantinya akan diukur setiap harinya baik kepadatan sel maupun aktivitas fiksasi nitrogennya.
Berdasarkan hasil pegamatan total keseluruhan
isolat
bakteri
yang
didapatadalah 4 koloni bakteri dengan karakter yang sama. isolat ini dilabeli J1, T1, R2,dan G2. Dari hasil pengujian,
Gambar 1. Hasil pengukuran fiksasi nitrogen pada media NB dengan panjang gelombang 420 nm
diketahui bahwa isolat bakteri penambat nitrogen memiliki karakteristik warna transparan, dengan tepian entire, bentuk
Hasil pengukuran fiksasi nitrogen pada
media
NB
dengan
panjang 12
Biotropic 2017. 1. (2): 9– 15 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh
gelombang 420 nm, menghasilkan hasil
jam ke 48 didapat rerata T1 sebesar
yaitu pada jam ke 24, isolat T1 memiliki
1,764, G2 sebesar 1,725 dan R2 sebesar
rerata 0,416, G2 sebesar 0,408, dan R2
1,773. Dan jika digambarkan dalam grafik
sebesar 0,402. Kemudian pengukuran
maka:
pada jam ke 48 didapatkan hasil rerata untu T1 sebesar 0,457, G2 sebesar 0,635 dan R2 sebesar 0,628. Dari grafik tersebut, dapat dilihat bahwa
aktivitas
fiksasi
nitrogen
munculsetelah jam ke 24 penanaman bakteri, dan dari ketiga isolat yang digunakan
ketiganya
cenderung
Gambar 2. Hasil pengukuran terhadap kepadatan sel pada media NFM
mengalami sedikit penurunan aktivitas
Dari
grafik
terlihat
bahwa
dalam memfiksasi nitrogen. Penurunan
kepadatan sel tertinggi seimbang antara
ini dimungkinkan karena bakteri sudah
isolate G2 dan R2. Dimana kedua isolat ini
mulai memasuki fasekematian sehingga
terus mengalami peningkatan kepadatan
kemampuan bakteri dalam memfiksasi
selpada jam ke 48. Sementara isolat T
nitrogen menjadi turun. Aktivitas fiksasi
memiliki kepadatan sel terendah. Untuk
nitrogen sendiri menurut Marschner
mengetahui kemampuan bakteri dalam
(1986) menyatakan bahwa bakteri akan
menghasilkan hormon IAA maka hasil
mengaktifkan enzim nitrogenase untuk
pengukuran
memfiksasi
memfiksasi
dan
mereduksi
Nudara
aktivitas
bakteri
nitrogen
dalam
kemudian
menjadi gugus NH2 yang kemudian
dibandingkan dalam kurva standar IAA,
dirangkai dengan rantai karbon menjadi
yaitu
sebagai
berikut:
senyawa amina atau asam amino yang merupakan
komponen
dasar
dalam
pembentukan protein dan pembentukan organel sel yang lain. Kemudian dari hasil pengukuran terhadap kepadatan sel pada media NFM diketahui bahwa pada jam ke 24, isolat T1
Gambar 3. Perbandingan aktivitas bakteri dalam memfiksasi nitrogen dalam kurva standar IAA
memiliki rerata 1,605, G2 sebesar 1,682 dan R2 sebesar 1,679. Kemudian pada 13
Biotropic 2017. 1. (2): 9– 15 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh
Dari hasil tersebut dapat terlihat bahwa terdapat
penyimpangan
pada
kurvafiksasi nitrogen terhadap kurva standar IAA. Hal tersebut menunjukkan bahwa
bakteri
kurang
mampu
memproduksi IAA ekstra selular secara optimal. Kecilnya produksi IAA ekstra selular
kemungkinan
karena
secara
genetik bakteri dari rihizosfer tersebut kurang mampu mensintesa IAA ekstra selular.
Untuk
menghasilkan
IAA
ekstraselular dalam jumlah yang banyak. IAA sendiri disintesis sebagai metabolit sekunder yang dihasilkan dalam kondisi pertumbuhan bakteri suboptimal atau saat tersedia prekursor asam amino triptofan (Lucyanie, 2009). KESIMPULAN Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan, disimpulkan beberapa hal sebagai berikut. Isolat bakteri dari sampel rizosfer paku epifit dari mulut Gua Anjani, Purworejo, Jawa Tengah diperoleh 4 isolat yang memiliki karakter morfologi koloni yang sama. Isolat yang memiliki nilai kepadatan sel tertinggi adalah T1,G2,dan R2.Aktifitas bakteri menghasilkan hormon IAA berbanding lurus dengan kepadatan sel bakteri, dan kemampuan penambat nitrogen. DAFTAR PUSTAKA
Aryantha, I..P., Dian, P.L., dan P.D.P Nurmi. 2004. Potensi Isolat BakteriPenghasil Iaa Dalam Peningkatan Pertumbuhan Kecambah Kacang HijauPada Kondisi Hidroponik. Mikrobiol Indones. 9: 43-46. Bashan, Y., and G. Holguin. 1998. Proposal for The Division of Plant GrowthPromoting Rhizobacteria into Two Classifications Biocontrol PGPB(Plant Growth-Promoting Bacteria) and PGPB. Soil Biol Biochem. 30:1225-1228. Ford, D. and P. William. 1992.Karst Geomorphology and Hydrology. Chapmanand, H., London, I., and K. Kyuma. 2004. Paddy Soil Science.Kyoto University Press and Trans PacificPress. Ladha, J. K. and P. M. Reddy. 1995. Extension of Nitrogen fixation to rice:necessity and possobillities. Geo Journal 35:363-372. Lucyanie, D. 2009. Pengaruh Penambahan Bahan Organik yang MengandungTriptofan (TRP) terhadap Produksi Asam Indol Asetat (AIA) olehAzospirillum spp. Strain Lokal.Skripsi. Bandung: ITB. Marschner 1986 dalam Tarigan, Ratnasari., Jamilah, IT., Elimasni. 2014. SeleksiBakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA (Indole AceticAcid) Dari Rizosfer Tanah Perkebunan Kedelai (Glycine Max L.).Sumatera: Universitas Sumatera Utara. Rahmadi , C . 2007. Arthropoda Gua Karst Maros (Sulawesi) dan Gunung
14
Biotropic 2017. 1. (2): 9– 15 Potensi Bakteri Penambat Nitrogen Dan Penghasil Hormon IAA Dari Sampel Rhizosfer Paku Epifit Di Mulut Gua Anjani, Kawasan Karst Menoreh
Sewu(Jawa):melintas garis Wallace. Fauna Indonesia 7. Salisbury, B., Frank., dan C.W. Rosse. 1992. Fisisologi Tumbuhan Jilid 2. ITB:Bandung. Sastrapradja, S. 1979. Jenis Paku Indonesia. Jakarta: Balai Pustaka.Schlegel, H.G. dan Schmindt, K. 1994.Mikrobiologi Umum. Gajah MadaUniversity Press.Yogyakarta. Wedhastri, S. 2002. Isolasi dan seleksi Azotobacter spp. Penghasil FaktorTumbuh dan Penambat Nitrogen dari Tanah Masam. J Ilmu Tanah Ling.3: 45-51.
15
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1. No 2. Agustus 2017 ISSN 2580-5029
Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis Risa Purnamasari1* 1 Prodi
Biologi Fsaintek UIN Sunan Ampel Surabaya Jl. A. Yani no.117 Surabaya
*Email:
[email protected] ABSTRAK Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui peran polisakarida krestin (PSK) dengan waktu pemberian yang berbeda terhadap hitung jenis leukosit mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis. Penelitian ini menggunakan 30 ekor mencit betina dewasa jenis Mus musculus strain BALB/C, berumur 8-10 minggu, berat badan berkisar 25-30 g. Polisakarida krestin (PSK) diisolasi dari Coriolus versicolor yang diperoleh dari alam. Infeksi menggunakan Mycobacterium tuberculosis strain H37Rv (ATCC 27294 T). Hewan percobaan dikelompokkan menjadi 6 kelompok sebagai berikut: kelompok I, hanya diberi akuades; kelompok II, hanya pemberian PSK; kelompok III, hanya dengan infeksi Mycobacterium tuberculosis; kelompok IV, pemberian PSK sebelum infeksi Mycobacterium tuberculosis; kelompok V, pemberian PSK sesudah infeksi Mycobacterium tuberculosis; kelompok VI, pemberian PSK sebelum dan sesudah infeksi Mycobacterium tuberculosis. Pemberian PSK dilakukan selama 7 hari berturut-turut melalui gavage. Infeksi Mycobacterium tuberculosis dilakukan sebanyak 2 kali dengan selang waktu 1 minggu melalui intraperitoneal. Hitung jenis leukosit dilakukan dengan mengelompokan masing-masing jenis leukosit dalam 100 sel leukosit pada apusan darah, dan data hasil pengamatan dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis, kemudian untuk mengetahui signifikansi dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney. Secara keseluruhan penelitian menunjukkan presentase jenis leukosit dengan jumlah tertinggi adalah neutrofil. Pada kelompok VI presentase monosit dan neutrofil meningkat melebihi normal, sedangkan presentase limfosit menurun, dan presentase basofil dan eosinofil tidak mengalami perubahan. Kesimpulan penelitian ini adalah PSK meningkatkan jumlah leuksosit mencit jenis neutrofil dan monosit pada waktu sebelum dan sesudah infeksi Mycobacterium tuberculosis Kata Kunci: Polisakarida Krestin, Coriolus versicolor, Leukosit Mencit, Mycobacterium tuberculosis
PENDAHULUAN
Mukty, 2009). Sampai saat ini, penyakit
Tuberkulosis (TB) paru adalah suatu
tuberkulosis paru masih menjadi masalah
penyakit menular yang disebabkan oleh
serius di seluruh negara di dunia.
bakteri Mycobacterium tuberculosis. Di
Sepertiga penduduk dunia telah terpapar
Indonesia,
bakteri ini dengan gambaran klinis yang
penyakit
penyakit infeksi
ini
merupakan
terpenting
setelah
sangat bervariasi dari gejala ringan
eradikasi penyakit malaria (Alsagaff dan
hingga tuberkulosis paru yang berat.
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
Pada tahun 1995, diperkirakan ada 9 juta
menginfeksi makrofag didalam paru-
pasien dengan penyakit tuberkulosis dan
paru, kemudian makrofag yang terinfeksi
3 juta kematian akibat tuberkulosis
tersebut menghasilkan kemokin yang
diseluruh dunia. Diperkirakan terdapat
dapat menghambat aktivasi dari monosit
95%
dan neutrofil. Ketika makrofag mulai
kasus
tuberkulosis
dan
98%
kematian akibat tuberkulosis didunia,
membesar
terjadi pada negara-negara berkembang.
seketika itu pula imunitas seluler mulai
Sekitar 75% pasien TB adalah kelompok
terbentuk, granuloma tersebut mulai
usia produktif, yaitu pada uasia 15-50
dikelilingi oleh fibroblast dan limfosit.
tahun (Aditama dkk, 2007). Penularan
Namun, jika tubuh memiliki sistem
penyakit
terjadi
imunitas yang baik maka pembentukan
dimana
granuloma tersebut tidak akan terjadi
bakteri tuberkulosis dapat masuk sampai
(Smith, 2003). Beberapa penelitian yang
ke alveolus dan kemudian mengalami
dilakukan
proses yang dikenal sebagai fokus primer.
imunomodulator
Pada
tambahan untuk penderita tuberkulosis
melalui
tuberkulosis saluran
stadium
sering
pernafasan,
permulaan,
setelah
membentuk
granuloma
menggunakan sebagai
pembentukan fokus primer akan terjadi
(Koendhori,
beberapa
yaitu
adalah obat yang dapat mengembalikan
penyebaran
dan memperbaiki sistem imun yang
limfogen, dan penyebaran hematogen.
fungsinya terganggu atau untuk menekan
Keadaan ini hanya berlangsung beberapa
yang
saat. Penyebaran akan berhenti bila
(Baratawidjaja, 2006). Dasar pemikiran
jumlah bakteri yang masuk sedikit dan
penggunaan
telah
adanya kenyataan bahwa dari sepertiga
penyebaran
kemungkinan, bronkogen,
terbentuk
daya
tahan
tubuh
2008).
terapi
fungsinya
terhadap bakteri tuberkulosis (Alsagaff
populasi
dan Mukty, 2009).
Mycobacterium
Karakteristik Mycobacterium
dinding tuberculosis
Imunomodulator
berlebihan
imunomodulator manusia
adalah terpapar
tuberculosis
hanya
sel
sepersepuluhnya yang sakit. Hal ini
bersifat
menunjukan sistem imun bekerja cukup
patogen, karena memiliki kemampuan
efektif
untuk
melawan
infeksi
TB
untuk meningkatkan apoptosis makrofag
(Koendhori, 2008). Polisakarida Krestin
pada sel inang (Sablinska et al., 1998).
adalah ekstrak jamur Coriolus versicolor
Pada beberapa penelitian menunjukan
dari kelompok Basidiomycetes. PSK telah
bahwa Mycobacterium tuberculosis dapat
banyak digunakan sebagai obat penyakit 17
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
kanker, leukemia, dan tumor di Jepang
dengan berikatannya β-glukan dengan
(Ooi dan Liu, 2000).
CR3
Polisakaridakrestin komponen
utama
mempunyai
berupa
β-glukan
dengan rantai utama β-1,4 serta rantai
pada
makrofag
menginduksi
makrofag untuk mensekresikan sitokin yang mempengaruhi perkembangan stem cell leukosit (Ross dan Ross, 2004).
samping β-1,3 dan β-1,6 yang terikat
Berdasarkan
kemampuan
pada protein membran (Cui dan Chisti,
dimiliki
2003). β-Glukan ini dapat menginduksi
imunomodulator, maka penelitian ini
proliferasi sel-sel mononuklear (Chan et
difokuskan untuk mengetahui peranan
al., 2009). Pengaruh hemopoiesis dari β-
polisakarida krestin dari jamur Coriolus
glukan
versicolor pada mencit yang diinfeksi
berupa
peningkatan
jumlah
polisakarida
krestin
yang
leukosit darah perifer dan selularitas
Mycobcterium
tuberculosis
sumsum tulang, serta peningkatan jumlah
hitung jenis leukosit mencit.
sebagai
terhadap
sel progenitor granulosit, dan makrofag (Ross,
2005).
Polisakarida
krestin
METODE Penelitian ini menggunakan 30 ekor
diketahui berfungsi sebagai biological respone modifier dan imunomodulator
mencit betina dewasa jenis
yang
musculus strain BALB/C, berumur 8-10
dapat
meningkatkan
resistensi
terhadap penyakit (Chu et al., 2002). β-glukan yang berasal dari Coriolus versicolor
diketahui
mempunyai
Mus
minggu, berat badan berkisar 25-30 gram yang diperoleh dari Fakultas Farmasi Universitas Airlangga. Jamur Coriolus
kemampuan menstimulasi proliferasi dan
versicolor
diferensiasi hemopoietic stem cell melalui
Banyuwangi, Blitar, Lamongan, Lumajang,
aktivasi sistem komplemen. β-glukan
dan Mojokerto Selanjutnya dilakukan
mengaktifkan sistem komplemen dengan
pemurnian
untuk
mendapatkan
berikatan dengan iC3b yang terdapat
polisakarida
krestin.
Mycobacterium
pada
tuberculosis strain H37Rv
(ATCC
Complement receptor type 3 (CR3) dari
27294T)
Bagian
stem
Mikrobiologi RS. Dr. Soetomo. Larutan
stem cell
cell akan
menginduksi
yang
selanjutnya
terkativasi stem
cell
sehingga untuk
PSK
diperoleh
diperoleh
dibuat
dengan
dari
dari
daerah
menggunakan
berproliferasi dan berdiferensiasi. CR3
amonium sulfat sebanyak 3,5 g ditambah
yang merupakan reseptor dari β-glukan,
akuades 50 ml serta bubuk jamur 1 g
juga ditemukan pada makrofag. Sehingga
kemudian
dicampur
menjadi
satu. 18
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
Larutan distirer selama 2 jam pada suhu
hanya pemberian PSK saja. Kelompok III
4°C
berisi 5 ekor mencit betina, sebagai
selama
±
1
jam
selanjutnya
disentrifus 9000 rpm selama 12 menit
kontrol
pada suhu 4°C. Setelah itu diambil
Mycobacterium
peletnya dan ditambahkan saline 12 ml.
Kelompok IV berisi 5 ekor mencit betina
Kemudian
konsentrasi
dengan pemberian PSK sebelum infeksi
polisakaridanya menggunakan phenol-
Mycobacterium tuberculosis. Kelompok V
sulphuric acid assay. Dosis PSK yang
berisis 5 ekor mencit betina dengan
digunakan adalah 500 μg/ekor (Vetvicka
pemberian
et al., 2002). Pemberian PSK dan infeksi
Mycobacterium
Mycobcterium tuberculosis pada hewan
kelompok VI berisi 5 ekor mencit betina
coba dilakukan dengan cara sebagai
dengan pemberian PSK sebelum dan
berikut:
sesudah
diukur
mencit
ditempatkan
pada
kandang plastik yang tertutup kawat kasa,
dengan
dan
dengan
infeksi
tuberculosis
PSK
sesudah
saja.
infeksi
tuberculosis.
infeksi
Dan
Mycobacterium
tuberculosis.
sistem
Untuk mengetahui masing-masing
penerangan 12 jam terang dan 12 jam
kelompok perlakuan dapat dilihat pada
gelap.
tabel 1.
Mencit
ventilasi
negatif,
diaklimatisasi
selama
seminggu, selanjutnya dikelompokkan
Pemberian PSK dilakukan selama
Tabel 1. Kelompok perlakuan Kelompok Pemberian PSK Infeksi Mycobacterium perlakuan (hari ke 1-7) tuberculosis (hari ke 8, 15) I II + III + IV + + V + VI + + Keterangan: (+) menunjukkan adanya perlakuan, (-) menunjukan tanpa perlakuan,hanya diberi saline saja.
menjadi enam kelompok. Masing-masing
tujuh
hari
kelompok perlakuan berisi 5 ekor mencit
secara
per
betina.
500µg/ml/ekor.
Pemberian PSK (hari ke 22-29) + + +
berturut-turut oral
dilakukan
dengan
dosis
Infeksi Mycobacterium
Kelompok I berisi 5 ekor mencit
tuberculosis dilakukan sebanyak 2 kali
betina, sebagai kontrol, hanya diberi
dengan selang waktu 1 minggu melalui
saline saja. Kelompok II berisi 5 ekor
intra
mencit betina, sebagai kontrol positif,
108 bakteri per ml atau setara dengan 0,5
peritoneal
dengan
konsentrasi
19
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
Mc Farland setara dengan 108
CFU/ml
bakteri
1,5 x
Untuk pewarnaan digunakan larutan
secara
Giemsa 10%, diteteskan sampai rata
intraperitoneal.
menutupi preparat apus dan ditunggu kurang
Tahap pembuatan sediaan apusan darah
Pembuatan sediaan apusan darah
lebih
30
menit.
Setelah
pewarnaan, preparat apus dicuci dengan menggunakan aquades sampai bersih dan
mencit dilakukan dengan cara sebagai
dikering
berikut: Menyediakan objek glass bebas
1992).
anginkan
(Gandasoebrata,
lemak maupun kotoran dengan cara dibersihkan dengan sedikit metil alkohol. Darah
mencit
diambil
melalui
Tahap perhitungan jenis leukosit
Jumlah dari masing-masing jenis
intracardiac kemudian darah diteteskan
leukosit
pada jarak kurang lebih 2-3 mm dari
menghitung jenis sel leukosit (monosit,
ujung objek glass dengan bantuan kaca
limfosit,
penghapus yang sebelumnya diletakkan
dalam 100 sel leukosit yang didapat dari
didepan tetesan darah. Kemudian dibuat
menghitung satu atau lebih sediaan
sediaan
dengan
apusan darah dan diamati dibawah
secepat
mikroskop dengan perbesaran 400x.
hapusan
menggeser
kaca
darah penghapus
diperoleh neutrofil,
dengan eosinofil,
cara basofil)
mungkin dengan sudut antara objek glass dengan kaca penghapus 30-45º sehingga diperoleh sediaan hapusan darah yang Setelah diperoleh sediaan apusan kemudian
Berdasarkan hasil pengamatan pada berbagai
tipis dan merata . darah,
HASIL DAN PEMBAHASAN
difiksasi
dengan
kelompok
perlakuan,
didapatkan jumlah leukosit jenis monosit yang dapat dilihat pada tabel 2.
metanol selama 10 menit dan dikering
Hasil analisis uji Mann-Whitney pada
anginkan di dara. Untuk pewarnaan
leukosit jenis monosit dari kelompok
digunakan
larutan
10%,
kontrol (I) memiliki perbedaan yang
diteteskan
sampai
menutupi
signifikan (P<0,05) dengan kelompok
preparat apus dan ditunggu kurang lebih
perlakuan II dengan nilai signifikansi
30 menit. Setelah pewarnaan, preparat
P=0,018,
apus
menggunakan
kelompok perlakuan III dengan nilai
aquades sampai bersih dan dikering
signifikansi P=0,016, berbeda signifikan
anginkan (Gandasoebrata, 1992). dara.
dengan kelompok perlakuan IV dengan
dicuci
dengan
Giemsa rata
berbeda
signifikan
dengan
20
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
nilai
signifikansi
P=0,008,
berbeda
nilai
signifikansi
P=0,013,
berbeda
signifikan dengan kelompok perlakuan V
signifikan dengan kelompok perlakuan V
dengan nilai signifikan P=0,007 dan
dengan nilai signifikansi P=0,031 dan
berbeda signifikan dengan kelompok
berbeda signifikan dengan kelompok
perlakuan VI dengan nilai signifikansi
perlakuan VI dengan nilai signifikansi
P=0,008. Pada kelompok perlakuan II,
P=0,008. Jumlah monosit pada kelompok
memiliki
jumlah
monosit
yang
perlakuan IV, berbeda tidak signifikan
Tabel 2. Rerata jumlah hitung monosit ± SD dan hasil analisis Mann-Whitney pada berbagai kelompok perlakuan Replikasi Monosit (%) I II III IV V VI 1 6,0 8,0 8,0 11,0 10,0 14,0 2 6,0 8,0 9,0 10,0 9,0 12,0 3 6,0 8,0 9,0 10,0 9,0 13,0 4 7,0 8,0 8,0 9,0 9,0 12,0 5 8,0 9,0 8,0 13,0 10,0 11,0 a b b c c Rerata 6,60 8,20 8,40 10,60 9,40 12,40 cd ± 0,894 ± 0,447 ± 0,548 ± 1,517 ± 0,548 ± 1,140 Keterangan :angka yang diikuti dengan huruf yang berbeda menunjukan ada beda yang signifikan. I: sebagai kontrol, hanya diberi saline saja, II: sebagai kontrol positif, hanya pemberian PSK saja, III: sebagai kontrol negatif, dengan infeksi Mycobacterium tuberculosis saja, IV: pemberian PSK sebelum infeksi Mycobacterium tuberculosis, V: pemberian PSK sesudah infeksi Mycobacterium tuberculosis, VI: pemberian PSK sebelum dan sesudah infeksi Mycobacterium tuberculosis
berbeda tidak signifikan (P>0,05) dengan
(P>0,05) dengan kelompok perlakuan V
kelompok perlakuan III dengan nilai
dengan
signifikansi
berbeda tidak signifikan (P>0,05) dengan
P=0,513,
namun
nilai
signifikansi
P=0,119,
menunjukkan perbedaan yang signifikan
kelompok perlakuan VI dengan nilai
(P<0,05) dengan kelompok perlakuan IV
signifikansi P=0,072. Jumlah monosit
dengan
pada kelompok perlakuan V menunjukan
nilai
signifikansi
P=0,009,
berbeda signifikan dengan kelompok
perbedaan
perlakuan V dengan nilai signifikansi
dengan Dari Tabel 2. hasil analisis data
P=0,014 dan berbeda signifikan dengan
dengan menggunakan uji Kruskal-Wallis
kelompok perlakuan VI dengan nilai
menunjukan ada beda nyata (P<0,05)
signifikansi P=0,007. Jumlah monosit
jumlah
pada kelompok perlakuan III memiliki
perlakuan,
perbedaan
lanjutan dengan menggunakan uji Mann-
yang
signifikan
(P<0,05)
dengan kelompok perlakuan IV dengan
yang
limfosit
signifikan
antar
kemudian
(P<0,05)
kelompok
dilakukan
uji
Whitney. 21
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
Hasil analisis uji Mann-Whitney pada
signifikan
dengan
kelompok
leukosit jenis limfosit pada kelompok
perlakuan VI dengan nilai signifikansi
kontrol (I) memiliki perbedaan yang
P=0,007. Jumlah limfosit pada kelompok
signifikan (P<0,05) dengan kelompok
perlakuan III memiliki perbedaan yang
perlakuan II dengan nilai signifikansi
signifikan (P<0,05) dengan kelompok
P=0,016,
perlakuan IV dengan nilai signifikansi
berbeda
signifikan
dengan
kelompok perlakuan III dengan nilai
P=0,008,
berbeda
signifikan
signifikansi P=0,008, berbeda signifikan
kelompok perlakuan V dengan nilai
dengan kelompok perlakuan IV dengan
signifikansi
P=0,009
dan
dengan berbeda
Tabel 3. Rerata jumlah hitung neutrofil ± SD dan hasil analisis Mann-Whitney pada berbagai kelompok perlakuan Replikasi Neutrofil (%) I II III IV V VI 1 65,0 66,0 60,0 69,0 67,0 72,0 2 66,0 66,0 58,0 68,0 68,0 74,0 3 65,0 69,0 54,0 71,0 68,0 72,0 4 66,0 65,0 54,0 71,0 67,0 73,0 5 67,0 65,0 57,0 67,0 65,0 73,0 Rerata 65,80 b 66,20 b 56,60 a 69,20 bc 67,20 bc 72,00 c ± 0,837 ± 1,643 ± 2,608 ± 1,789 ± 0,837 ± 1,000 Keterangan :angka yang diikuti dengan huruf yang berbeda menunjukan ada beda yang signifikan
nilai
signifikansi
P=0,007,
berbeda
signifikan dengan kelompok perlakuan VI
signifikan dengan kelompok perlakuan V
dengan nilai signifikansi P=0,008. Jumlah
dengan nilai signifikansi P=0,008 dan
limfosit pada kelompok perlakuan IV
berbeda signifikan dengan kelompok per
memiliki
perbedaan
yang
signifikan
lakuan VI dengan nilai signifikansi
(P<0,05) dengan kelompok perlakuan V
P=0,007. Jumlah limfosit pada kelompok
dengan nilai signifikansi P=0,008, dan
perlakuan II memiliki perbedaan yang
berbeda signifikan dengan kelompok
signifikan (P<0,05) dengan kelompok
perlakuan VI dengan nilai signifikansi
perlakuan III dengan nilai signifikansi
P=0,007. Jumlah limfosit pada kelompok
P=0,008,
dengan
perlakuan V memiliki perbedaan yang
kelompok perlakuan IV dengan nilai
signifikan (P<0,05) dengan kelompok
signifikansi P=0,007, berbeda signifikan
perlakuan VI dengan nilai signifikansi
dengan kelompok perlakuan V dengan
P=0,007. Hal ini menunjukan bahwa
nilai signifikansi P=0,042, dan berbeda
pemberian
PSK
Mycobcterium
tuberculosis,
berbeda
signifikan
tanpa
infeksi pemberian 22
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
PSK sebelum dan atau sesudah infeksi
berbeda signifikan dengan kelompok
Mycobcterium tuberculosis, mempunyai
perlakuan IV dengan nilai signifikansi
pengaruh terhadap penurunan jumlah
P=0,011, dan berbeda signifikan dengan
limfosit mencit,
kelompok perlakuan VI dengan nilai
infeksi
Sedangkan pemberian
Mycobcterium
tuberculosis
meningkatan jumlah limfosit mencit. Rerata
dari
jumlah
signifikansi P=0,008. Jumlah neutrofil pada kelompok perlakuan II memiliki
hitung
perbedaan
yang
signifikan
(P<0,05)
neutrofil dapat dilihat pada tabel 3. Hasil
dengan kelompok perlakuan III dengan
analisis data dengan menggunakan uji
nilai
Kruskal-Wallis menunjukan ada beda
signifikan dengan kelompok perlakuan IV
nyata (P<0,05) jumlah neutrofil antar
dengan
kelompok
kemudian
berbeda signifikan dengan kelompok
dengan
perlakuan VI dengan nilai signifikansi
dilakukan
perlakuan, uji
lanjutan
menggunakan uji Mann-Whitney. leukosit
jenis
nilai
P=0,008,
signifikansi
berbeda P=0,034,
P=0,008, namun berbeda tidak signifikan
Hasil analisis uji Mann-Whitney pada
signifikansi
neutrofil
pada
dengan kelompok perlakuan V dengan nilai
signifikansi
P=0,337.
Hal
ini
kelompok kontrol (I) tidak berbeda
menunjukan bahwa pemberian PSK tanpa
signifikan (P>0,05) dengan kelompok
infeksi
perlakuan II dengan nilai signifikansi
pemberian
P=0,951, dan tidak berbeda signifikan
sebelum dan sesudah infeksi bakteri
dengan kelompok perlakuan dengan nilai
Mycobcterium tuberculosis mempunyai
signifikansi P=0,106, namun berbeda
pengaruh terhadap peningkatan jumlah
signifikan dengan kelompok perlakuan III
neutrofil mencit. Sedangkan pemberian
dengan
infeksi Mycobcterium tuberculosis saja
nilai
signifikansi
P=0,008,
Mycobcterium PSK
tuberculosis,
sebelum,
sesudah,
Tabel 4 Rerata jumlah hitung eosinofil ± SD dan hasil analisis Mann-Whitney pada berbagai kelompok perlakuan Replikasi Eosinofil (%) I II III IV V VI 1 3,0 3,0 3,0 4,0 4,0 4,0 2 4,0 4,0 5,0 5,0 2,0 4,0 3 5,0 4,0 4,0 3,0 5,0 6,0 4 3,0 3,0 3,0 4,0 6,0 6,0 5 4,0 4,0 4,0 3,0 3,0 3,0 a a a a a Rerata 3,80 3,00 3,80 2,80 3,40 3,40 a ± 0,837 ± 0,707 ± 0,387 ± 0,447 ± 0,894 ± 0,548
23
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
mempunyai
pengaruh
terhadap
penurunan jumlah neutrofil pada mencit.
kemudian dilakukan uji lanjutan dengan menggunakan uji Mann-Whitney.
Rerata dari jumlah hitung eosinofil dan basolif disajikan pada tabel 4 dan tabel 5.
Hasil analisis uji Mann-Whitney pada leukosit jenis basofil pada semua
Dari Tabel 4. hasil analisis data
kelompok perlakuan tidak menunjukan
dengan menggunakan uji Kruskal-Wallis
ada beda yang signifikan, hal tersebut
menunjukan ada beda nyata (P<0,05)
menunjukan
bahwa
jumlah
berpengaruh
terhadap
eosinofil
perlakuan,
antar
kemudian
kelompok
dilakukan
uji
lanjutan dengan menggunakan uji MannWhitney.
tidak
peningkatan
ataupun penurunan jumlah leukosit jenis basofil. Polysaccharide-krestin
Hasil analisis uji Mann-Whitney
PSK
merupakan
ekstrak dari jamur Coriolus versicolor,
pada leukosit jenis eosinofil pada semua
memiliki
kelompok perlakuan tidak menunjukan
imunomodulator yang bersifat stimulator
ada beda yang signifikan, hal tersebut
sehingga
menunjukan
bahwa
imunokompeten
berpengaruh
terhadap
PSK
tidak
potensi dapat
sebagai
mengaktifkan untuk
sel
meningkatkan
peningkatan
sistem imunitas tubuh (Jang et al., 2009).
ataupun penurunan jumlah leukosit jenis
Untuk mengetahui aktivitas PSK terhadap
eosinofil.
sistem
Dari Tabel 5. hasil analisis data dengan menggunakan uji Kruskal-Wallis
imunitas
penelitian
ini
tubuh
maka
dilakukan
pada infeksi
Mycobacterium tuberculosis pada mencit
Tabel 5 Rerata jumlah hitung basofil ± SD dan hasil analisis Mann-Whitney pada berbagai kelompok perlakuan Replikasi Basofil (%) I II III IV V VI 1 1,0 0,0 1,0 1,0 0,0 1,0 2 0,0 0,0 0,0 0,0 1,0 0,0 3 1,0 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0 4 1,0 1,0 1,0 0,0 0,0 0,0 5 0,0 0,0 0,0 1,0 0,0 0,0 a a a a a Rerata 0,60 0,20 0,40 0,40 0,20 0,20 a ± 0,548 ± 0,447 ± 0,548 ± 0,548 ± 0,447 ± 0,447 Keterangan :angka yang diikuti dengan huruf yang sama menunjukan tidak ada beda yang signifikan
menunjukan ada beda nyata (P<0,05)
sebanyak dua kali dengan selang waktu
jumlah basofil antar kelompok perlakuan,
satu minggu, infeksi pertama dilakukan 24
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
pada
hari
ke-8
dan
infeksi
kedua
diferensiasi hemopoietic stem cell melalui
dilakukan pada hari ke-15. Pemberian
aktivasi
PSK dilakukan
mengaktifkan sistem komplemen dengan
selama satu minggu
berturut-turut. karbohidrat
karbohidrat
komplemen.
Glucan
berikatan dengan iC3b yang terdapat
Polisakarida krestin mengandung 34-35%
sistem
tersebut
dan
dalam
mengandung
pada
stem
cell
yang
selanjutnya
Complement receptor type 3 (CR3) dari stem
cell
akan
terkativasi
senyawa β-glukan sebesar 90-93%, (Cui
menginduksi
dan Chisti, 2003). Menurut Hong et al.
berproliferasi dan berdiferensiasi. CR3
(2004), Beta (β)-glukan yang dimasukkan
yang merupakan reseptor dari β-glukan,
ke dalam tubuh melalui oral memiliki
juga ditemukan pada makrofag. Sehingga
resistensi terhadap asam sehingga bila
dengan berikatannya β-glukan dengan
masuk ke dalam lambung strukturnya
CR3
tidak akan berubah. Beta (β)-glukan yang
makrofag untuk mensekresikan sitokin
ada dalam usus akan melakukan kontak
yang mempengaruhi perkembangan stem
dengan makrofag yang ada pada dinding
cell leukosit.
usus dibantu oleh sel M (microfold) yaitu
stem
sehingga
pada
cell
makrofag
Didalam
menginduksi
sirkulasi
β-glukan
sel yang terspesialisasi dan terdapat pada
berikatan
ileum. Sel M akan mengambil β-glukan
reseptor CR3 yang merupakan reseptor
melalui pinositosis dan membawanya
gabungan
melalui dinding usus dimana beberapa
daerah
sel makrofag, dan sel imun lainnya
bertanggung jawab untuk mengikat jenis
menunggu. Kemudian β-glukan yang
komplemen, yang larut protein darah
difagosit oleh makrofag akan didegradasi
dikenal sebagai C3 (atau iC3b). C3 akan
menjadi fragmen-fragmen, dan diangkut
melekat pada antibodi spesifik yang
menuju sumsum tulang dimana fragmen-
kemudian berikatan dengan patogen
fragmen β-glukan hasil degradasi akan
yang ditargetkan dan mengopsoninnya.
dilepaskan.
Daerah
Menurut Ross dan Ross (2004),
dengan
untuk
dimana
mempunyai
pengikat.
kedua
makrofag
Daerah
pada
pada dua
pertama
reseptor
CR3
mengikat ke karbohidrat pada sel-sel ragi
didalam sumsum tulang fragmen β-
atau
glukan
makrofag untuk mengenali jamur ragi
yang
versicolor
berasal diketahui
dari
Coriolus
mempunyai
kemampuan menstimulasi proliferasi dan
jamur
sebagai "nonself"
yang
memungkinkan
(Hong et al., 2004).
Dengan adanya kedua ikatan tersebut 25
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
mampu meningkatkan proses fagositosis
nonspesifik yang dengan cepat mampu
dari makrofag dan sel granulosit dalam
mengenali dan merespon suatu patogen,
infeksi tuberkulosis.
dan penting untuk mengendalikan infeksi
Dapat diketahui berdasarkan hasil
bakteri. Oleh karena itu, dalam penelitian
hitung jenis leukosit jumlah paling besar
ini diduga pemberian PSK sebelum dan
adalah leukosit jenis neutrofil, hal ini
sesudah
sesuai dengan pernyataan Jang et al.
tuberculosis
(2009) bahwa pemberian PSK memiliki
meningkatkan
potensi sebagai imunomodulator yang
neutrofil akibat infeksi Mycobacterium
bersifat
tuberculosis.
stimulator
sehingga
dapat
infeksi
Mycobacterium
paling
efektif
jumlah
mengaktifkan sel imunokompeten untuk
Pemberian
meningkatkan sistem imunitas tubuh,
Mycobacterium
dan
berfungsi
sebagai
pendorong
menurut
bahwa
Baratawidjaja
(2006),
PSK
neutrofil
sebagai
pertahanan
sebagai
tubuh
(repons
imun
pembentukan
pertama spesifik)
berfungsi
non untuk
neutrofil
dalam
leukosit
jenis
sebelum
infeksi
tuberculosis
diduga
pencegahan
atau
meningkatnya
jenis
leukosit
kearah
terhadap
adanya
infeksi
mempertahankan respon inflamasi akut
Mycobacterium tuberculosis dan akan
pada tubuh. Diduga pemberian PSK dapat
lebih
meningkatkan produksi neutrofil yang
sesudah
berfungsi
mempertahankan
tuberculosis
respons inflamasi akut dalam tubuh,
pengobatan
dalam hal ini neutrofil sedang melakukan
Mycobacterium tuberculosis. Polisakarida
aktifitas fagositosis, sehingga aktifitas
krestin
dari bakteri tidak dapat menginfeksi
mempersiapkan
tubuh hingga menimbulkan inflamasi
kekebalan tubuh menghadapi penyakit
kronik.
yang akan masuk tubuh. Pietro (2003)
untuk
Secara PSK
sebelum
Mycobacterium
keseluruhan dan
pemberian
sesudah
tuberculosis
infeksi dapat
meningkatakan jumlah sel imunitas non
meningkat
dengan
infeksi yang
pemberian
Mycobacterium
berperan
terhadap diduga
sebagai infeksi
membantu
dan
meningkatkan
menyatakan bahwa β-gukan lebih efektif untuk
pencegahan
dan
pengobatan
terhadap penyakit yang berhubungan dengan ketahanan sistem imun tubuh.
spesifik yaitu sel neutrofil, sesuai dengan pernyataan Chan et al. (2009), bahwa PSK berpengaruh
terhadap
sistem
imun 26
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
KESIMPULAN
Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta
Berdasarkan hasil penelitian dapat ditarik kesimpulan bahwa : Polisakarida berpengaruh
krestin
terhadap
(PSK)
peningkatan
jumlah leukosit mencit jenis neutrofil dan monosit, tidak berpengaruh terhadap jumlah
eosinofil
menurunkan
dan
jumlah
basofil, limfosit
dan akibat
infeksi dari Mycobacterium tuberculosis. Pemberian
polisakarida
krestin
(PSK) pada waktu sebelum dan sesudah infeksi dari Mycobacterium tuberculosis berpengaruh jumlah
terhadap
leukosit
jenis
peningkatan neutrofil
dan
monosit, tidak berpengaruh terhadap jumlah
eosinofil
dan
basofil,
dan
menurunkan jumlah limfosit mencit. DAFTAR PUSTAKA Aditama, C. Y., S. Kamso., C. Basri., dan A. Surya., 2007, Pedoman Nasional Penanggulangan Tuberkulosis, Edisi 2, Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Adrian, P., 2009, Mempelajari Sistem Imun pada Manusia, http://ardian 079.blogspot.com/2009/11/blogpost.html. akses 12-10-09 Alsagaff, H., dan A. Mukty, 2009, DasarDasar Ilmu Penyakit Paru, Airlangga University Press, Surabaya, Hal 73-108 Baratawidjaja, K. G., 2006, Imunologi Dasar, Edisi 7, Penerbit Fakultas
Biketov, S., V. Potapov., E. Ganina., K. Downing., B. D. Kana., and A. Koprelyants., 2007, The role of resuscitation promoting factors in pathogenesis and reactivation of Mycobacterium tuberculosis during intra-peritoneal infection in mice, BMC Infectious Diseases, 7 : 146152 Chan, G. C., K. C. Wing., dan M. Daniel., 2009, The Effects of β-glucan on Human Immune and Cancer Cells, Journal Hemato Oncology, 2 : 25-31 Chaves, F., B. Tierno., dan D. Xu., 2006, Neutrophil Volume Distribution Width A New Automated Hematologic Parameter for Acute Infection, Arch Pathol Lab Med, 130 : 378380 Cheng, F. K., 2008, General review of polysaccharopeptides (PSP) from C. versicolor: Pharmacological and Clinical studies. http://www.google.co.id /search?hl=id&q=psp+Cheng=Telus uri&meta, akses 22-10-09 Chu, K., S. Ho., D. Pharm., dan A. Chow., 2002, Coriolus versicolor: A Medicinal Mushroom with Promising Immunotherapeutic Values http://lifestreamgroup.com/docum ent/Medicinal_mushroom.pdf. akses 02-01-10 Cui,
J dan Y. Chisti., 2003, Polysaccharopeptides of Coriolus vercicolor : Physological Activity, Uses, And Production, Elsevier science, Biotechnology advance 21, 109-122 27
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
Cui, J., K. T. Goh., R. H. Archer., dan H. Sigh., 2007, Characterisation and Bioactivity of Protein-Bound Polysaccharide From Submerged Culture Fermentation of Coriolus versicolor Wr-74 and ATCC20545, Journal of Industrial Microbiology and Biotechnology 34, 393-402 Hong, F., Y. Jun., T. B. Jarek., J. Daniel., D. Richard., R. Gary., X. X. Pei., K. Nai., Cheung., dan G. D. Ross., 2004, Mechanism by which orally administered beta-1,3-glucans enhance the tumoricidal activity of antitumor monoclonal antibodies in murine tumor models, Journal Immunology, 173:797-806 Jang, S. A., K. Park., J. D. Lim., S. Kang., K. H. Yang., S. Pyo., dan E. H. Sohn., 2009, The Comparative Imunomodulatory Effects of βglucan From Yeast, Bacteria, and Mushroom on the Functionof Macrophages, Journal of Food Science and Nutrition, 14 : 102-108 Kikkert, R., I. Bulder., E. R. Groot., L. A. Arden., and M. A. Finkelman., 2007, Journal of Endotoxin Research, 13 : 3-11 Koendhori, E. B., 2008, Peran Ethanol Extract Propolis terhadap Produksi Interferon γ, Interleukin 10 Dan Transforming Growth Factor β1 Serta Kerusakan Jaringan Paru Pada Mencit yang Diinfeksi Dengan Mycobacterium tuberculosis, Disertasi, Program Pasca Sarjana, Universitas Airlangga Surabaya Loho, T., 2006, Tanda Inflamasi dan Infeksi, http://repository.ui.ac.id/contents/
koleksi/11/f47f4c5ec6c11e69d547 9cfb7d4d953568fbe756.pdf. akses 02-01-10 Mao,
X. W., 2001, Evaluation of Polysaccharopeptide Effects against C6 Glioma in Combination with Radiation, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pub med, akses 19-10-09
Misnadiarly, A. S., 2006, Tuberkulosis dan Mycobacterium Atipik, Dian Rakyat, Jakarta Ooi,
V. E., dan F. Liu., 2000, Immunomodulation and Anticancer activity of Polisaccharide-Protein Complexes, National Library of Medicien, CurrMedChem,http://www.ncbi.nl m.nih.gov/pubmed/10702635, akses 3-09-09
Pang, Z. J., Y. Chen., dan M. Zhou., 2000, Polysaccharide Krestin enhance manganese Superoxide Dismutase Activity and mRNA Expressio in Mouse peitoneal Macrophages. American Journal Chinese Medicine, 28 : 331-341 Pedrinaci, S., I. Algara., dan F. Garrio., 1999, Protein-bound polysaccharide (PSK) induces cytotoxic activity in the NKL human natural killer cell line. International Journal Clinic Laboratory Research, 135-140 Pietro,
P., 2003, Composition for preventif and or Treatment of Lipid Metabolism Disorders and Allergic Form, http://freepatentonlin.com/20030 017999. html, diakses tanggal 19-01-2010
28
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
Pratama, Y. S., 2009, Deskripsi Pola Literatur Penanggulangan Penyakit Tuberkulosis, Skripsi, Fakultas Kedokteran, Universitas Indonesia Rice, P. J., J. L. Kelley., G. Kogan., H. E. Ensley., J. H. Kalbflelsh., I. W. Browder., dan D. L. Williams., 2002, Human Monocyte Scavenger Receptors are Pattern Recognition Receptors for (1-3)-β-D-glucans, Journal of Leukocyte Biology, 72 : 140-146 Ross, G. D., dan T. J. D. Ross., 2004, Effect of Beta Glucan on Stem Cell Recruitment and Tissue Repair, http://www.fteepatensonline.com /20070042930.html. akses 02-0110 Ross, G. D. 2005. Cancer Therapy Using Beta Glucan and Antibodies. http://www.freepatentsonline.com /EP1539194.html. akses 02-01-10 Sablinska, B. K., S. Keane., H. Kornfeld., dan G. H. Remold., 1998, Pathogenic Mycobacterium tuberculosis Evades Apoptosis of Host Macrophages by Release of TNF-(Alpha), The Journal of Immunology, 161 : 2636-2641 Smith,
I., 2003, Mycobacterium tuberculosis Pathogenesis and Molecular Determinants of Virulence, Clinical Microbiology Reviews, 16 : 463-496
Tagliasacchi, D., dan G. Carboni., 1997, Lets Observe The Blood Cell, http://www.md.huji.ac.il/gabi/blo od/bloodmain.html. akses 4-10-09 Taylor, P. R., G. D. Brown., D. M. Reid., J. A. Willment., L. M. Pomanes., I. Gordon., dan S. Y. C. Wong., 2002,
The β-Glucan Receptor, Dectin-1, Is Predominantly Expressed on the Surface of Cell of the Monocyte/ Macrophage and Neutrophil Lineages, The Journal of Immunology, 169 : 3876-3882 Todar, K., 2008, Todar’s Online Texbook of Bacteriology, University of Wisconsin-Madison Departement of Bacteriology Tsukagoshi, S., Y. Hashimoto., G. Fujii., H. Kobayashi., K. Nomoto., dan K. Orita., 1994, Krestin (PSK). Cancer Treatment Reviews, 11 : 131-155 Vetvicka, V., T. Kiyomi., M. Rosemade., B. Paulin., K. Bill., dan O. Gary., 2002, Orally-Administered Yeast β-1,3 glucan Prophylactically Protects Against Anthrax Infection and Cancer in Mice, Journal American Nutraceutical Assosiation, 5 : 2-10 Williams, D. L., 1997, Overview of (1-3)-βD-Glucan Immunobiology, Mediators of Inflamation vol 6, Rapid Science Publishers, Johnson City, USA Wong, C. K., P. S. Tse., E. L. Wong., P. C. Leung., K. P. Fung., dan C. W. Lam., 2004, Immunomodulatory effects of Yun Zhi and Danshen capsules in healthy subjects- a randomised, double-blind, placebo-controlled crossover study, Int Immunopharmacol, 4 : 321-332 Zhou, M., Y. Chen., Q. Ouyung., S. Liu., Z. J. Pang., dan J. Wan., 1998, The Effect of Terty-butyl Hydroperoxide on Peritoneal Makrophages and The Potective Effect of Protein bound Polysaccharide Administred Intraperitoneal and Oraly, National Library of Medicen,CurrMedChem. Access on 29
Biotropic 2017. 1. (2): 16 – 30 Polisakarida Krestin dari Jamur Coriolus versicolor terhadap hitung Jenis Leukosit Mencit yang diinfeksi Mycobacterium tuberculosis
November 5 2009.
.
30
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1. No 2. Agustus 2017 ISSN 2580-5029
Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri Tatag Bagus Putra Prakarsa1*, Kurnia Ahmadin2 1 Prodi 2 BSG
Biologi F.Saintek UIN Sunan Ampel Surabaya
(Biospeleology Studien Gruppen) Kelompok Studi Biospeleologi, Biologi- UNY Yogyakarta
* Email:[email protected]
Abstrak Penelitian ini bertujuan untuk mengungkap keanekragaman Arthropoda di kawasan karst Gunung Sewu khususnya di wilayah kabupaten Wonogiri. Penelitian ini merupakan penelitian ekologi komunitas dengan metode Nature Snapshot Experiment (NSE). Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Agustus 2016, bertempat di 3 gua di kawasan karst Gunung Sewu, yang masuk dalam wilayah administrasi Kabupaten Wonoggiri Jawa Tengah. Arthropoda gua yang ditemukan terdiri dari Heteropoda sp., Charon grayi, Theliphonus sp., AsamiidaeF, Philoscia sp.,CambalopsidaeF, Geophilus sp., Scutigera sp., TenebrionidaeF, Rhaphidophora dammermani, dan FormicidaeF. Habitat gua Sodong dan Potro Bunder membentuk kelompok tersendiri berdasarkan nilai indeks similaritas Jaccard. Kondisi kerusakan lingkungan gua mendasari pemilihan habitat oleh kelelawar. Sehingga dua gua yang mengelompok hanya dihuni lebih sedikit spesies dibandingkan dengan habitat gua Song Gilap. Kata Kunci: Diversitas, Arthropoda, Gua, Karst Gunung Sewu
PENDAHULUAN Kawasan
atau disebut juga sebagai gua. Organisme karst
Gunung
sewu
di dalam gua dikelompokan menjadi
merupakan kawasan karst terluas di
organisme
Pulau Jawa. Kawasan karst tersebut
Organisme
membentang
menjadi
di
3
kabupaten
yang
terestrial terestrial
dan
akuatik.
dikategorikan
menjadi trogloxene, troglobite,
meliputi kabupaten Gunung Kidul DI.
dan troglophile, organisme akuatik di
Yogyakarta, kabupaten Wonogiri Jawa
kategorikan menjadi stygoxen, stygobite,
tengah, dan kabupaten Pacitan Jawa
dan stygophile (Culver dan White,2005;
Timur. Kawasan karst memiliki kekayaan
Fereira dan Horta, 2001).
biodiversitas di permukaan (eksokarst)
Diversitasdi
dan di bawah permukaan (endokarst)
gua-gua
Wonogiri
selama ini belum banyak dkaji khususnya
Biotropic 2017. 1. (2): 31 – 36 Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri
Arthropoda gua. Studi sampai saat ini
Penelitian ini merupakan penelitian
masih terpusat di sebagain besar gua-gua
ekologi
di Gunung Kidul
NaturalSnapshot Experiment (NSE). Skala
Pacitan.
dan beberapa gua di
Diperkirakan
jenis
penelitian
di
spasial yang digunakan adalah skala
Wonogiri sebagai bagian Kawasan karst
populasi lokal dan skala temporal yang
Gunung
digunakan adalah skala satu generasi
Sewu
gua-gua
dengan
menyimpan
banyak
biodiversitas yang menarik untuk dikaji. Di samping itu,
kawasan karst terus
(Diamond, 1986). Prosedur
Penelitian
ini
terbagi
menghadapi pengrusakan yang sangat
menjadi dua tahap yaitu koleksi lapangan
masif.
Hal ini dihawatirkan banyak
dan penanganan laboratorium. Koleksi
spesies
yang
dan
Arthropoda yang relatif besar dilakukan
dimungkinkan terdapat spesies yang
dengan tangkap langsung, Arthropoda
balum
terlebih
yang ukuran kecil disampling dengan
dahulu. Penelitian ini bertujuan untuk
pitfall trap. Pitfall trap menggunukan
mengetahui diversitas Arthropoda gua di
botol flacon berisi larutan atractant
kawasan karst Gunug Sewu yang masuk
sekaligus
dalam wilayah administrasi Kabupaten
arthropoda tanah mendekat dan masuk
Wonogiri.
(McEwen, 1997; Michael, 1984). Botol ini
terancam
teridentifikasi
punah
punah
pengawet
yang
menarik
ditanam dilantai gua yang dilakukan METODE
berdasarkan
zonasi
gua.
Di
zona
Penelitian ini dilaksanakan pada
mulut/terang, zona remang, dan zona
bulan Juni – Agustus 2012, di 3 guadi
gelap total di tanam masing-masing 3
kawasan karst Gunung Sewu, yang masuk
pitfall traps. Penyusunan pitfall dilakukan
dalam wilayah administrasi Kabupaten
dengan modifikasi metode line transek.
Wonogiri Jawa Tengah. Lokasi penelitian
Penanganan
disajikan dalam tabel 1.
langkah lanjutan yang berupa identifikasi
Tabel 1. Gua lokasi penelitian
spesies yang dikoleksi dari lapangan.
No.
Nama Gua
1
Song Gilap
2
Sodong
3
Potro Bunder
Koordinat (GPS) S 08o03’03.1” E 110o46’46.5” S 08o02’25.7” E 110o46’56.3” S 08o02’39.4” E 110o46’48.9”
laboratorium
merupakan
Penamaan spesies Arthropoda mengacu pada kunci identifikasi Boror et al. (1994), Ruppert et al. (2004), Weygoldt (2000), danSpelda (2015), Hubungan antar metode
gua
dianalisis UPGMA
menggunakan (unweighted 32
Biotropic 2017. 1. (2): 31 – 36 Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri
pairgroupmethod
using
arithmetic
Tiga kategori tersebut meliputi troglobite.
averages) (Sneath dan Sokal 1973).
trogloxene, dan troglophile. Troglobite yaitu biota gua yang hidupnya telah menetap di gua dan telah mengalami proses adaptasi dengan kondisi gua yang
Tabel 2. Arthropoda di gua-gua Wonogiri Spesies *
Song Gilap
Gua Sodong
P.Bundr
√
√
√
Tx
√
√
-
Tl
√
-
-
Tl
√
√
-
Tl
-
√
-
Tl
√
√
√
Tl
√
-
-
Tl
√
-
-
Tl
-
-
Tl
-
-
Tl
√
√
Tx
ArachnidaC AraneaeO Heteropoda sp. AmblypygiO Charon grayi Uropygi Theliphonus sp. Opiliones AsamiidaeF MalacostracaC IsopodaO Philoscia sp. DiplopodaC ColobognathaO CambalopsidaeF ChilopodaC GeophilomorphaO Geophilus sp. ScutigeromorphaO Scutigera sp. InsectaC ColeopteraO
√ OrthopteraO Rhaphidophora dammermani √ HymenopteraO FormicidaeF √ Ket: * : Nama Spesies atau nama takson terendah yang diketahui Tx : Trogloxene Tl : Troglophile Tb : Troglobite
TenebrionidaeF
HASIL DAN PEMBAHASAN
Kel
gelap total. Biota ini ditemukan di zona
Organime terestrial penghuni gua
gelap total dan tidak ditemukan di habitat
dibedakan menjadi 3 kategori menurut
lain. Troglophile yaitu biota gua yang
adaptasi pada habitat yang ditempatinya.
menetap di gua namun ditemukan juga di
33
Biotropic 2017. 1. (2): 31 – 36 Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri
luar gua, belum mengalami modifikasi
Hubungan ketiga ekosistem gua
khusus. Trogloxene yaitu biota tamu di
tersebut
suatu gua. Gua ditempati secara periodik.
dendogram
(Culver dan White,2005). Arthropoda
similaritas Jaccard pada gambar 1.
yang ditemukan di gua-gua Wonogiri disajikan dalam Tabel 2. Arthropoda
berdasarkan
indeks
Sodong
dan
Potro
Bunder
membentuk kelompok tersendiri dengan
kawasan karst Gunung Sewu yang masuk
nilai indeks similaritas Jaccard 0,5 (50%)
dalam
dan baru bersatu dengan gua Song Gilap
terdiri
dari
gua
bentuk
Berdasarkan dendogram tersebut, gua
ketiga
dalam
di
wilayah
di
disajikan
Kabupaten 11
Wonogiri
spesies
dari
5
kelas.Arthropoda yang dijumpai di ketiga gua
di
Wonogiri
morfologinya
jika
hanya
dilihatdari
terdiri
dari
kelompok trogloxene dan troglophile.
pada nilai indeks similaritas 0,45 (45%). Terdapat beberapa spesies yang hanya di jumpai di satu gua saja. Theliphonus sp, Geophilus sp.,Scutigera sp.,Tenebrionidae,
danRhaphidophora
Diversitas Arthropoda tertinggi di
dammermanihanya terdapat di gua Song
gua Song gilap, diikuti gua Sodong, dan
gilap. Spesies Philoscia sp.dari Ordo
paling rendah gua Potro Bunder. Kondisi
Isopoda hanya dijumpai di gua Sodong.
lingkungan gua sangat mempengaruhi
Arthropoda di dalam gua dibedakan
diversitas Arthropoda yang ada di dalam
menjadi
kosistem
kelompok perombak (Rahmadi, 2002).
gua,
karena
keberadaan
kelompok
predator
organisme mengikuti naluri dan efisiensi
Kelompok
penggunaan energi untuk memanfaatkan
konsumen kedua hingga top predator.
area mangsa yang tersedia (Tristiani et al.
Kelompok
2003, Campbell et al. 2007). Hal tersebut
kelompok
dapatdilihat darikondisi ekosistem gua
organik (guano) dan berperan sebagai
Song
banyak
konsumen pertama, karena di dalam gua
terganggu dan mengalami kerusakan jika
tidak ada produsen, kecuali area yang
dibandingkan dengan kedua gua lainya.
masih mendapatkan cahaya matahari
Gua Potro Bunder merupakan gua dengan
atau mendapatkan aliran air dari luar gua
intensitas gangguan tinggi dan ekosistem
(inlet). Peran produsen sebagai penyedia
yang mengalami kerusakan terparah, jika
materi dan energi untuk konsumen-
dibandingkan dengan kedua gua lainya.
konsumen
gilap
masih
belum
predator
dan
perombak yang
di
material-material
menempati merupakan
memakan
material
atasnya
digantikan
organik,
khususnya 34
Biotropic 2017. 1. (2): 31 – 36 Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri
Gambar 1.Dendogram pengelompokan habitat kelelawar berdasarkan indeks similaritas Jaccard
guano (kotoran kelelawar). Kelompok
KESIMPULAN
perombak dalam ekosistem gua memiliki
Arthropoda di gua Song Gilap,
peran ganda, selain sebagai perombak
Sodong, dan Potro Bunder tediri dari 11
material organik mereka juga berperan
spesies. Spesie-spesies tersebut meliputi
sebagai
Heteropoda sp., Charon grayi, Theliphonus
konsumen
langsung
pertama
memanfaatkan
yang
material
sp.,
AsamiidaeF,
organik di bawah.Kelompok perombak
sp.,CambalopsidaeF,
terdiri
Scutigera
dari
Philosciidae
Cambalopsidae,Geophilus
(Isopoda), sp.,
R.damermani.Kelompok
Predator
meliputi
Heteropoda
Theliphonus
sp.,Asamiidae
Scutigera (Hymenoptera).
dan
sp.,C.grayi, (Opiliones),
sp.,danFormicidae Atrhropoda
Philoscia Geophilus
sp.,
Rhaphidophora
sp.,
TenebrionidaeF, dammermani,
dan
FormicidaeF. Habitat gua Sodong dan Potro Bunder tersendiri
membentuk kelompok
berdasarkan
similaritas Jaccard.
nilai
indeks
Kondisi kerusakan
menjadi
lingkungan gua mendasari pemilihan
takson yang dominandan penyumbang
habitat oleh kelelawar. Sehingga dua gua
biodiversitas
terbesar di dalam gua
yang mengelompok hanya dihuni lebih
(Vermaullen
dan
sedikit spesies dibandingkan dengan
Whitten,
1999;
Denharveng dan Bedos, 2000). Ekosistem
gua
sangat
habitat gua Song Gilap. rentan
dengan gangguan. Sedikit saja aktivitas manusia di dalam guaakan memeberikan gangguan terhadap ekosistem di dalam gua. Gangguan terhadap eosistem gua akan langsung berimbas pada kerusakan habitat Arthropoda gua.
DAFTAR PUSTAKA Boror, DJ., Triplehorn, CA., dan NF. Johnson. 1994. Johnson. Pengenalan Pelajaran Serangga. Ed. 6. Gadjah Mada University Press, Yogyakarta Campbell, P., Schneider, CJ.,. Zubaid, A., Adnan, AM., and TH. Kunz. 2007. 35
Biotropic 2017. 1. (2): 31 – 36 Diversitas Arthropoda Gua di kawasan Karst Gunung Sewu, Studi gua-gua di Kabupaten Wonogiri
Morphological and ecological correlates of coexistence in malaysian fruit bats (Chiroptera: Pteropodidae). Journal of Mammalogy 88(1): 105-118. Culver, D. and W. White. 2005. Encyclopedia of caves: Elsevier Academic Press, Burlington, MA. Denharveng, L. and A. Bedos. 2000. The Cave Fauna of East Asia: Origin, Evolution, and Ecology in Wilkens, H., Culver, D.C., and W.F. Humpreys. (ed). Ecosystem in the World vol, 30: Subterranean Ecosystem. Elsevier, Amterdam: 603-631. Diamond, J. 1986. Overview: Laboratory Experiment, Field Experiments, and Natural Experiment. In Diamond, J. and T.J. Case (eds). Community Ecology. Harper and Row Publisher Inc, New York. Fereira, RL. and LCS. Horta. 2001. Natural and Human Impact on Invertebrate Communities in Bazilian Caves. Rev. Brazil Biol. 61 (1): 7 – 17. McEwen P. 1997. Sampling, handling and rearing insect, In Dent DR & Walton MP(eds) Methods in Ecological & Agricultural Entomology. University Press, Cambridge.
functional evolutionary aproach. Seventh ed. Thomson Learning, Singapore. Spelda, J. 2015. SysMyr: Systematic Myriapoda Database. didownload padaJuni 2016. www.catalogueoflife.org. Sneath PHA,, and RR., Sokal, 1973. NumericalTaxonomy. San Francisco: Freeman. Tristiani, H., Murakami, O., and H. Watanabe. 2003. Ranging and nesting behavior of the ricefield rat Rattus argentiventer (Rodentia: Muridae) in West Java, Indonesia. Journal of Mammalogy 84(4): 12281236. Vermaullen, J. and T. Whitten. 1999. Biodiversity and Cultural Property in the ManagementofLimestones Resources. The World Bank, Washington. Weygold, P. 2000. Whip (Chelicerata: Amblypygi) Biology, Morphology, Systematics. Apollo Stenstrup, Denmark.
Spider Their and Books,
Michael,P. 1984. Ecological Methods for fields & Laboratories Investigation. McGraw-Hill Publ.Co. Ltd. New Delhi Rahmadi, C. 2002. Keanekaragaman Fauna Gua, Gua Ngerong Tuban, Jawa Timur, Tinjauan khusus pada Arthropoda. Zoo Indonesia-Jurnal Fauna Tropica. 29: 19 – 27. Ruppert, EE., Fox, RS., and RD. Barnes. 2004. Invertebrate Zoology, a 36
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1. No 2. Agustus 2017 ISSN 2580-5029
Perilaku Reptilia Ketika Gerhana Matahari Parsial di PASTY Yogyakarta Henro Kusumo EP Moro1*, Hanifah N1, Tanzilla R.1, Lestariningsih1 1Prodi
Pendidikan Biologi, FKIP Universitas Ahmad Dahlan, Yogyakarta, Indonesia
*Email: [email protected] ABSTRAK Perilaku Reptilia di Pasar Aneka Satwa & Tanaman Hias Yogyakarta diamati ketika peristiwa gerhana matahari parsial pada 9 Maret 2016. Faktor lingkungan seperti intensitas cahaya, suhu, dan kelembaban udara diamati dan dicatat. Perilaku Kura-Kura, Biawak, dan Ular diamati dengan metode focal point sampling. Ular cenderung memiliki pergerakan yang terbatas, sedangkan biawak dan kura-kura diam sejenak. Perbedaan perilaku reptilia ketika gerhana matahari sebagian ditentukan oleh jenisnya dan faktor lain yang berbeda-beda. Kata Kunci: Reptilia, Gerhana matahari sebagian, PASTY
PENDAHULUAN Gerhana
2003), zooplankton (Gerasopoulos et al., Matahari
merupakan
peristiwa unik yang tidak selalu terjadi
2008), dan burung (Kumar, 2014). Pola
tingkah
laku
reptilia
setiap tahun.Pada 9 Maret 2016 pukul
merupakan perilaku yang terorganisir
07.25 di Yogyakarta terjadi gerhana
dengan fungsi tertentu karena reptilia
matahari
termasuk kelompok hewan poikiloterm.
parsial
(81,46%)
(Anonim,
2015). Organisme baik itu manusia,
Perilaku
tumbuhan, dan satwa memiliki respon
menghangatkan diri, dilakukan dengan
perilaku berbeda terhadap peristiwa
berjemur
langsung
langka
laporan
matahari.
Untuk
lainnya
mereka memanfaatkan kegiatan seperti
dilaporkan pada lebah (Roonwal, 1957),
pindah kedaerah yang teduh (Bridges,
ikan (Jennings et al., 1998), hewan ternak
2001). Perilaku dapat berupa aksi tunggal
seperti kuda, ayam, dan anjing (Bozic,
atau berurutan yang terintegrasi dan
tentang
tersebut. perilaku
Beberapa satwa
adaptasi
reptilia di
bawah
mendinginkan
untuk sinar diri
biasanya muncul sebagai respon terhadap
Biotropic 2017. 1. (2): 37– 40 Perilaku Reptilia Ketika Gerhana Matahari Parsial di PASTY Yogyakarta
stimulus
dari
lingkungannya.
Setiap
aktivitas
menurut
Sudjana
spesies memiliki karakteristik tersendiri
hasilnya
disajikan
(Ensminger, 1980; Curtis, 1983). Perilaku
(Ploger & Yasukawa, 2003).
dengan
(1992), ethogram
seekor satwa (reptilia) dipengaruhi oleh dua faktor, yaitu faktor dari dalam
HASIL DAN PEMBAHASAN
(hormon dan sistem saraf) dan faktor
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa
dari luar (cahaya, suhu dan kelembaban).
pada masing-masing kelompok reptilia
Tingkah laku bersifat bawaan (genetis)
tidak
dapat berubah oleh lingkungan dan
muncul.
begitu
banyak
perilaku
yang
proses belajar satwa (Hafez, 1968).
Ketiga reptilia memiliki ciri khas
Penelitian ini bertujuan mengamati dan
masing-masing, seperti : biawak dan ular
membandingkan perilaku reptilia ketika
cenderung berdiam di tanah, sedangkan
gerhana matahari sebagian.
kura-kura berkubang di air. Biawak memiliki pergerakan kaki dan pindah
METODE
tempat, dibandingkan ular karena tidak
Perilaku satwa khususnya reptilia
memiliki kaki, maupun kura-kura karena
diamati di PASTY (Pasar Satwa Dan
cenderung memilih berkubang. Perilaku
Tanaman Hias Yogyakarta) yang memiliki
grooming ditunjukkan biawak dan kura-
dome besar berisi tiga jenis reptilia, yakni
kura, namun perbedaanya perilaku kura-
Kura-kura
kura
Brazilia
scriptaelegans),
(Trachemys
Biawak
dibandingkan
dengan
perilaku
(Varanus
biawak adalah perilaku kura-kura dalam
salvatore) dan Ular (Phyton morulus)
bentuk kelompok dengan mendorong dan
(Anonim, 2011). Pengamatan dilakukan
saling bersentuhan antara sesamanya.
pada tanggal 8 - 10 Maret 2016 pukul
Kura-kura juga menunjukkan perilaku
06.20 - 08.20 WIB. Metode pengambilan
digesti ketika berkubang.
data dilakukan dengan focal animal sampling (pengamatan perilaku yang menggunakan sebagai
satu
obyek
individu pengamatan
satwa dan
60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
08-Mar-16 09-Mar-16 10-Mar-16
menggunakan teknik pencatatan perilaku satwa tersebut pada interval waktu tertentu) (Ploger & Yasukawa, 2003).
Gambar1.EthogramUlar
Rekapitulasi data dan analisis data setiap 38
Biotropic 2017. 1. (2): 37– 40 Perilaku Reptilia Ketika Gerhana Matahari Parsial di PASTY Yogyakarta
Perilaku
60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
lain
yang
menarik
dibandingkan antara biawak dan kura08-Mar-16
kura, yakni berkubang dan grooming.
09-Mar-16
Biawak cenderung
10-Mar-16
mengurangi
berkubangnya.
60% 50% 40% 30% 20% 10% 0%
ketika
gerhana matahari sedangkan kura-kura justru
Gambar2.Ethogram Biawak
berkubang
aktivitas
Biawak
grooming
setelah
sedangkan
kura-kura
memulai
hari
gerhana,
menunjukkan
aktivitas tersebut ketika gerhana terjadi. 08-Mar-16 09-Mar-16 10-Mar-16
KESIMPULAN Perbedaan perilaku reptilia ketika gerhana matahari sebagian ditentukan oleh jenisnya dan faktor lain yang berbeda-beda. Ular cenderung memiliki
Gambar3. Ethogram Kura-kura
Berdasarkan ethogram (Gambar 1,2,3) terlihat adanya perilaku menonjol pada
masing-masing
gerhana
(9
Maret
muncul
perilaku
jenis. 2016)
kura-kura
grooming
(kontak
pindah tempat, sedangkan biawak tidak menunjukkan perubahan perilaku yang menonjol. Perilaku yang dapat dibandingkan dari ketiga jenis adalah : diam, pindah tempat, dan pergerakan kepala. Sekali lagi kura-kura memiliki perilaku paling habitatnya
diantara
ketiganya
cenderung
berkubang (Bridges, 2001).
di
biawak dan kura-kura diam sejenak.
Ketika
dengan sesama), ular sama sekali tidak
berbeda
pergerakan yang terbatas, sedangkan
karena air
dan
DAFTAR PUSTAKA Anonim. 2011. Kajian Modernisasi Pengelolaan Pasar Tradisional Berbasis Modal Sosial. Executive Summary. Puslitbang Sosial Ekonomi Lingkungan. Kementrian Pekerjaan Umum. Jakarta. Anonim. 2015. Total Solar Eclipse of 2016 Mar9.http://eclipse.gsfc.nasa.gov /solar.html, didownload Januari 2015. diakses 19 Desember 2015. . Bozic N. 2003. Total Solar Eclipse on August 11TH 1999: Observed at Kelebija. Publ. Astron. Obs. Belgrade 75(1): 105 – 109.
39
Biotropic 2017. 1. (2): 37– 40 Perilaku Reptilia Ketika Gerhana Matahari Parsial di PASTY Yogyakarta
Bridges, V., Kopral, C., dan R. Johnson. 2001. The Reptile and Amphibian Communities in the United States. Centers for Epidemiology and Animal Health, Fort Collins.
Roonwal, M.L. 1957. Behaviour of The Rock Bees, Apis Dorsata Fabr., During a Partial SolarEclipse in India. Prociding Natural Inst.Sci. India Vol.22B No. 5.
Curtis,
Sudjana, M.A. 1992. Metode Statistika. Penerbit Tarsito. Bandung.
S.E. 1983. Environmental management in Animal Agriculture. The Iowa State University Press. Iowa.
Ensminger, M.E. 1980. Poultry Science (Animal Agriculture Series). 2-nd edition. The Interstate Printers and Publisher Inc. Danville. Illionis. Gerasopoulos E. 2008.The total solar eclipse of March 2006: overview. Atmos. Chem. Phys. Discuss.vol : 8, 5205–5220. Copernicus Publications on behalf of the European Geosciences Union. Hafez, E.S. 1968. Adaptation of Domestic animals. Lea and Febinger. Philadelpia. Jennings S., Rodrigo H. Bustamante, Ken Collins, and Jenny Mallinson. 1998. Reef Fish Behavior During a Total Solar Eclipse at Pinta Island.Journal of Fish Biology 53(1): 683-686. Kumar and S. Santhosh. 2014. Why Birds/Animals Fly/Run Away to Solar Eclipse?. Current Advances in Environmental Science. CAES Volume 2 Issue 1, Feb. 2014 PP. 11-14 www.vkingpub.com © American V-King Scientific Publishing. Ploger, B.J. and K. Yasukawa. 2003. Exploring Animal Behaviour in Laboratory and Field. Academic Press. San Diego.
40
BIOTROPIC The Journal of Tropical Biology Vol 1. No 2. Agustus 2017 ISSN 2580-5029
Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa Izza Hananingtyas1* 1Prodi
Biologi, Fakultas Sains dan Teknologi, UIN Sunan Ampel Surabaya
*Email: [email protected] ABSTRAK Logam berat dalam lingkungan perairan akibat pembuangan limbah industri di sepanjang wilayah pantai utara dapat menjadi sumber racun bagi kehidupan perairan. Berdasarkan data penelitian dari Badan Penelitian dan Pengembangan Provinsi Jawa Tengah diketahui adanya kandungan logam berat di perairan Laut Jawa, memungkinkan adanya kotaminasi pada ikan laut hasil Laut Jawa yang didistribusikan ke masyarakat. Hal ini menyimpang dari peraturan pemerintah yang mengatur dan melindungi keamanan pangan yaitu PP Nomor 28 tahun 2004 tentang Keamanan, Mutu, dan Gizi Pangan. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dan mengukur kadar logam berat Pb dan Cd pada ikan tongkol di Pantai Utara Jawa. Penelitian ini bersifat deskriptif dengan pendekatan cross sectional study. Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh ikan tongkol (Euthynnus sp). Sampel penelitian ini diambil secara purposive sampling yaitu 10 ekor ikan tongkol yang berasal dari daerah Kendal, Rembang, Tuban, Batang, dan Jepara. Hasil penelitian ini berdasarkan Peraturan BPOM tahun 2009 dan SNI 7387 tahun 2009 tentang Batas Maksimum Cemaran Logam Berat pada Makanan, dari 10 sampel terdapat 4 sampel (40%) melebihi batas maksimum cemaran Pb pada ikan (< 0,3 mg/kg) dengan kadar antara 0,420-0,610 mg/kg dan 6 sampel (60%) melebihi batas maksimum cemaran Cd pada ikan (<0,1 mg/kg) dengan kadar antara 0,100-0,300 mg/kg. Kata Kunci: logam berat, timbal, kadmium, Euthynnus sp.
PENDAHULUAN
dapat
terakumulasi
melalui
rantai
Logam berat merupakan logam
makanan, semakin tinggi tingkatan rantai
toksik yang berbahaya bila masuk ke
makanan yang ditempati oleh suatu
dalam tubuh melebihi ambang batasnya
organisme, akumulasi logam berat di
(Ashraf, 2006). Logam berat menjadi
dalam tubuhnya juga semakin bertambah.
berbahaya
disebabkan
proses
Dengan
bioakumulasi.
Bioakumulasi
berarti
merupakan
demikian
manusia
konsumen
puncak,
yang akan
peningkatan konsentrasi unsur kimia
mengalami proses bioakumulasi logam
tersebut dalam tubuh makhluk hidup
berat yang besar di dalam tubuhnya
sesuai piramida makanan. Logam berat
(BBLH
Jateng,
2010).
Logam
berat
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
menimbulkan
negatif
dalam
peraturan pemerintah yang mengatur
hidup
seperti
dan melindungi keamanan pangan yaitu
mengganggu reaksi kimia, menghambat
Peraturan Pemerintah Nomor 28 tahun
absorbsi
2004 tentang Keamanan, Mutu, dan Gizi
kehidupan
efek makhluk
dari
nutrien-nutrien
yang
esensial (Ashraf, 2006). Badan
Pangan. Hal ini menjadi kepentingan
Penelitian
dan
peneliti untuk memilih ikan tongkol
Pengembangan Provinsi Jawa Tengah
(Euthynnus sp.) yang berasal dari Pantai
pada
Utara Jawa untuk diteliti.
tahun
2006
diketahui
bahwa
kandungan logam berat (Hg, Cd, Cu, Cr,
Tujuan umum penelitian ini adalah
Pb, Ni, Zn, dan As) di wilayah pantai utara
untuk
Jawa
sebagian
kandungan logam berat Pb dan Cd pada
besar logam-logam berat tersebut telah
ikan tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai
melebihi ambang batas baku mutu yang
Utara Jawa. Sedangkan tujuan khususnya
ditetapkan
RI
adala mengukur dan membandingkan
maupun otoritas dari manca negara
kadar logam berat Pb dan Cd pada ikan
(Budiharo, 2007). Adanya kandungan
tongkol yang ada di Pantai Utara Jawa
logam berat (Pb, Cd, Hg) di perairan Laut
dengan batas maksimum logam berat
Jawa, memungkinkan adanya kotaminasi
dalam makanan yang ditetapkan oleh
pada ikan laut hasil produksi Laut Jawa.
Peraturan Badan Pengawas Obat dan
Sebagaimana
telah
Makanan
logam
timbal,
Tengah
menunjukkan
oleh
berat
otoritas
Negara
diketahui
bahwa
kadmium,
dan
mengetahui
tahun
dan
2009
dan
mengukur
Standar
Nasional Indonesia tahun 2009, serta
merkuri merupakan logam yang memiliki
menentukan
toksisitas yang sangat tinggi dan banyak
pencemaran logam berat pada ikan
dihasilkan oleh sebagai limbah industri.
tongkol
Keberadaan logam di lingkungan yang
metode HACCP (Hazard Analysis Critical
melebihi batas aman merupakan indikasi
Control Point).
dari
pencemaran
kegiatan
lingkungan
manusia
industri-industri
seperti
yang
berat
pada
kegiatan
menghasilkan
ikan
laut
sumber
(Euthynnus sp.) berdasarkan
dari
limbah logam berat. Adanya kontaminasi logam
kemungkinan
yang
METODE Jenis Peneltian Penelitian ini bersifat deskriptif dengan pendekatan cross sectional study.
didistribusikan ke masyarakat sebagai konsumen
ini
menyimpang
dari 42
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
Populasi dan Sampel Populasi
Hasil pengukuran kadar logam
dalam
penelitian
ini
berat timbal (Pb) dan kadmium (Cd)
adalah seluruh ikan tongkol (Euthynnus
pada ikan tongkol di Pantai Utara Jawa
sp) yang berasal dari Pantai Utara Jawa.
tercantum dalam tabel 1 sebagai berikut:
Sampel penelitian ini diambil secara purposive sampling yaitu 10 ekor ikan
Tabel 1. Kadar Logam Berat Pb, Cd, Hg pada
tongkol yang berasal dari daerah Kendal,
Ikan Tongkol Pengam bilan Sampel
Rembang, Tuban, Batang, dan Jepara.
Seperangkat
peralatan
kimia
No Sam pel
Kadar Pb (mg/kg)
Kadar Cd (mg/kg)
Tahap I
Instrumen Penelitian laboratorium
Asal Ikan
analitik
untuk
mengukur kadar kandungan Pb dan Cd pada ikan tongkol. Komputer digunakan untuk mengolah dan menganalisis data hasil penelitian. Metode Analisa Data Analisis data dilakukan secara
Kendal 1 0,570 * 0,240 * Rembang 2 0,420 * 0,220 * Tuban 3 0,610 * 0,240 * Batang 4 0,100 0,260 * Jepara 5 0,560 * 0,300 * Tahap II Kendal 6 0,100 0,008 Rembang 7 0,100 0,100 * Tuban 8 0,100 0,050 Batang 9 0,100 0,060 Jepara 10 0,100 0,080 Rata0,2760 0,156 rata (*) : Melebihi batas maksimum cemaran logam berat pada makanan berdasarkan Peraturan BPOM tahun 2009 dan Standar Nasional Indonesia (SNI: 7387 – 2009)
Hasil rata-rata kadar logam berat
deskriptif yaitu memberikan diskripsi
timbal (Pb) dan
tentang sampel yang diteliti melalui data
daerah dapat dihitung rata-rata seluruh
sampel
Hasil
asal ikan (Kendal, Jepara, Rembang,
pemeriksaan diuraikan dengan statistic
Batang dan Tuban) pada pengambilan
deskriptif, yaitu dalam bentuk table untuk
sampel pertama menunjukkan rata-rata
menggambarkan
identifikasi
kadar logam berat pada ikan tongkol
kandungan logam berat Pb dan Cd pada
(Euthynnus sp.) yaitu sekitar 0,452 mg/kg
ikan tongkol (Euthynnus sp.), kemudian
logam timbal dan 0,252 mg/kg logam
ditinjau
kadmium. Pada pengambilan
sebagaimana
dari
mempengaruhi
adanya.
hasil
faktor-faktor hasil
yang
kadmium (Cd) dari 5
sampel
identifikasi
kedua rata-rata kadar logam berat pada
kandungan logam berat Pb, Cd, dan Hg
ikan tongkol (Euthynnus sp.) yaitu sekitar
pada ikan tongkol (Euthynnus sp.).
0,1 mg/kg logam timbal, 0,060 mg/kg
HASIL DAN PEMBAHASAN 43
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
logam kadmium, dan 0,176 mg/kg logam
adanya kandungan Pb pada sampel
merkuri.
pengambilan pertama dapat dipengaruhi
Timbal (Pb)
oleh rendahnya salinitas perairan pada
Pemeriksaan kadar logam berat
saat pengambilan ikan tongkol oleh
timbal (Pb) pada ikan tongkol (Euthynnus
nelayan. Ikan tongkol
sp.) di Pantai Utara Jawa menunjukkan
kosmopolitan dapat hidup di perairan
hasil
hasil
yang relatif dangkal dan bersalinitas lebih
pemeriksaan kadar logam berat timbal
rendah (Rompas, 2010). Air laut dengan
pada ikan tongkol tertinggi sebesar 0,61
salinitas
mg/kg dan terendah 0,1 mg/kg dengan
menurunkan
rata-rata 0,2760 mg/kg dan standar
menyebabkan penghambatan kompleks
deviasi 0,23220 mg/kg. Berdasarkan
klorida, sehingga konsentrasi logam berat
Peraturan Badan Pengawas Obat dan
bebas akan meningkat (Peraturan BPOM,
Makanan (BPOM) Republik Indonesia
2009). Disamping itu juga adanya arus
tahun
dan gerakan pasang surut air laut pada
yang
2009
bervariasi.
dan
Pada
Standar
Nasional
yang
sifatnya lebih
rendah ion
ini
klorida
saat
rata-rata kadar logam berat timbal (Pb)
mempengaruhi
pada
termasuk
logam pada air laut. Apabila pada saat
kategori aman, yaitu batas maksimum
pasang nelayan mengambil ikan maka
cemaran timbal (Pb) sebesar 0,3 mg/kg.
keadaan air laut pada saat itu dapat
Akan tetapi sebenarnya terdapat 40%
dimungkinkan
sampel (4 dari 10 sampel) tersebut
logam berat yang tinggi dari cemaran
mengandung logam timbal (Pb) di atas
limbah yang dibuang di muara dan
batas maksimum yang diperkenankan
daerah sungai. Adanya pasang surut ini
(>0,3 mg/kg), sehingga perlu ditelusuri
menggerakkan
kembali sumber kontaminannya.
horizontal, sehingga terjadi pencampuran
tongkol
masih
Tingginya kandungan logam Pb
ikan
yang
Indonesia (SNI:7387) tahun 2009, secara ikan
pengambilan
akan
tingginya
air
laut
massa
juga
kandungan
mengandung
air
secara
(Peraturan BPOM, 2009)
pada pengambilan pertama di perairan
Adanya kandungan Pb dalam ikan
laut wilayah ikan yang dapat dipengaruhi
tongkol asal Tuban yang melebihi batas
oleh salinitas, arus dan gerakan pasang
yang
surut, selain itu juga dapat dikarenakan
adanya pencemaran Pb di perairan laut
terjadi pencemaran logam Pb pada ikan
Kota Tuban. Hal ini dimungkinkan karena
saat proses distribusinya. Selain itu
adanya kontaminasi dari limbah industri
diperbolehkan,
mengindikasikan
44
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
di sekitar wilayah Tuban, terutama
kematian bagi biota perairan. Konsentrasi
industri
Pb yang mencapai 188 mg/l dapat
minyak
lepas
pantai
yang
memungkinkan limbahnya mencemari
membunuh ikan-ikan (Warlina, 2004).
perairan Laut Tuban, karena mengingat
Berdasarkan data terakhir
dari
terdapat industri minyak lepas pantai di
Badan Lingkungan Hidup Provinsi Jawa
wilayah perairan laut Tuban.
Tengah diketahui beberapa kualitas air
Berdasarkan penelitian Budiharjo
laut wilayah Pantai Utara Jawa Tengah
(2007) perusahaan minyak menghasilkan
Kota Semarang diketahui kadar Pb di
limbah minyak dalam bentuk lumpur dari
perairan kota Semarang pada tahun 2009
berbagai kegiatan produksi (Sivaperumal,
dan kota Batang pada tahun 2004 telah
2007). Jenis limbah yang dihasilkan dari
tercemar logam Pb melebihi batas aman
industri minyak lepas pantai adalah oil
untuk
sludge. Oil sludge merupakan limbah sisa
sedangkan untuk daerah Jepara dan Pati
minyak
saluran
pada tahun 2010 belum melebihi batas
pembuangan. Oil sludge terdiri dari
aman (Yulianto, 2010). Dari data di atas
minyak (hydrocarbon), air, abu, karat
ada perbedaan dengan data kandungan
tangki, pasir, dan bahan kimia lainnya.
Pb yang diukur pada ikan tongkol yang
Kandungan dari hydrocarbon antara lain
berasal dari kota Jepara yang didapatkan
benzene, toluene, ethylbenzene, xylenes
hasil pengukuran kandungan Pb sebesar
dan logam berat seperti timbal (Pb).
0,56 mg/kg, kandungan Pb dalam ikan
Komposisi logam berat limbah oil sludge
tongkol ini lebih besar dari kandungan Pb
tersusun atas, yaitu : arsen, barium,
dalam perairan di Pantai Kota Jepara
boron, kromium , kadmium, merkuri,
yang menunjukkan hasil 0 mg/l. Adanya
timbal, dan zaikun (Wulandari, 2008).
kandungan Pb dalam ikan tongkol dari
yang
masuk
ke
Senyawa Pb yang ada dalam badan perairan dapat ditemukan dalam bentuk
biota
laut
yaitu
0,05
mg/l,
kota Jepara ini perlu dikaji ulang sumber kontaminan Pb dalam ikan tersebut.
ion-ion divalen atau ion-ion tetravalen.
Adanya kandungan logam berat Pb
Ion logam tetravalen ini mempunyai daya
pada ikan tongkol, dapat terakumulasi di
racun yang lebih tinggi bila dibandingkan
dalam tubuh ikan yang membahayakan
dengan ion Pb divalen. Badan perairan
keamanan pangan. Hal ini menunjukkan
yang telah terkontaminasi senyawa atau
adanya penyimpangan dari Peraturan
ion-ion Pb dan melebihi konsentrasi yang
Pemerintah Nomor 28 Tahun 2004
semestinya,
tentang Keamanan, Mutu dan Gizi Pangan,
dapat
mengakibatkan
45
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
dimana bahan pangan yang beredar harus
kadmium (Cd) pada ikan tongkol telah
memenuhi ketentuan bebas dari cemaran
melebihi
biologis, kimiawi, maupun fisik. Timbal
logam kadmium pada makanan (ikan
merupakan suatu logam toksik yang
olahan)
bersifat kumulatif, dimana toksisitasnya
sebesar 0,1 mg/kg. Terdapat 60% sampel
dapat
pada
(6 dari 10 sampel) mengandung logam
terpapar
kadmium (Cd) di atas batas maksimum
berpengaruh
kesehatan melebihi
manusia batas
negatif yang
amannya.
Food
and
yang
batas yang
maksimum
cemaran
diperkenankan
diperkenankan,
yaitu
sehingga
Agricultural Organization / World Health
ditelusuri
Organization (FAO/WHO) menyatakan
kontaminannya dan perlu kewaspadaan
bahwa toleransi asupan perminggu /
dalam pola konsumsinya.
provisional
tolerable
sumber
intake
Adanya perbedaan kadar Cd pada
(PTWI) untuk logam timbal dalam tubuh
sampel ikan tongkol pengambilan tahap
manusia adalah 25 µg/kg berat badan, ini
pertama
berarti
mg/g
dimungkinkan karena adanya beberapa
timbal/minggu untuk orang dengan berat
faktor. Pengambilan pada tahap pertama
60 kg.(15) Kandungan Pb dalam ikan
dengan hasil kadar Cd yang melebihi
tongkol yang beredar di Pasar Rejomulyo
batas
dikategorikan masih dalam batas aman,
kemungkinan lokasi penangkapan ikan
asalkan pola konsumsi masyarakat sesuai
laut berada pada sumber pencemaran
dengan PTWI yang telah ditetapkan oleh
logam berat, adanya waktu yang berbeda
FAO/WHO.
dalam pengambilan sampel menyebabkan
Kadmium (Cd)
akumulasi
setara
Kadar
weekly
kembali
perlu
dengan
logam
1500
kadmium
dan
tahap
maksimum,
yang
kedua,
ini
dikarenakan
berbeda
karena
(Cd)
akumulasi logam pada ikan dipengaruhi
tertinggi pada ikan tongkol sebesar
oleh faktor lingkungan. Faktor lingkungan
0,30 mg/kg dan terendah 0,05 mg/kg
yang mempengaruhi adanya percepatan
dengan
rata-rata
akumulasi logam yaitu seperti: salinitas,
standar
deviasi
0,156
mg/kg
0,9684
dan
mg/kg.
arus dan gerakan pasang surut air laut.
Berdasarkan Peraturan Badan Pengawas
Berdasarkan penelitian Wulandari
Obat dan Makanan (BPOM) Republik
(2008), kandungan logam berat pada
Indonesia
pada
tahun
2009
dan
Standar
ikan
dapat
dipengaruhi
oleh
Nasional Indonesia (SNI:7387) tahun
salinitas, arus dan gerakan pasang surut
2009, secara rata-rata kadar logam berat
air laut.(8) Olah karena itu, tingginya 46
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
kandungan
logam
minggu
industri yang berdiri di sekitar wilayah
pertama di perairan laut wilayah ikan
pantura Jawa Tengah. Adapun industri
dapat dipengaruhi oleh salinitas, arus dan
yang banyak memakai kadmium untuk
gerakan pasang surut. Kandungan Cd
proses electroplating (pelapisan elektrik)
pada
serta
sampel
Cd
tahap
pada
pertama
dapat
galvanisasi
karena
kadmium
dipengaruhi oleh rendahnya salinitas
memiliki
keistimewaan
perairan pada saat pengambilan ikan
Kadmium
banyak
tongkol oleh nelayan. Air laut dengan
pembuatan alloy, pigmen warna pada cat,
salinitas yang rendah akan menurunkan
keramik, plastik, stabilizer plastik, katode
ion
untuk Ni-Cd pada baterai, bahan fotografi,
klorida
penghambatan
yang
menyebabkan
kompleks
nonkorosif.
digunakan
dalam
klorida,
pembuatan tabung TV, karet, sabun,
sehingga konsentrasi logam berat bebas
kembang api, percetakan tekstil, dan
akan
pigmen untuk gelas dan email gigi
meningkat.
Adanya
arus
dan
gerakan pasang surut air laut pada saat
(Peraturan BPOM, 2009).
pengambilan ikan juga mempengaruhi
Pola konsumsi ikan tongkol secara
tingginya kandungan logam berat dalam
berlebih dapat meningkatkan resiko efek
tubuh ikan. Apabila pada saat pasang
negatif kesehatan pada manusia. Logam
nelayan mengambil ikan maka keadaan
berat dapat menimbulkan efek negatif
air laut pada saat itu dapat dimungkinkan
dalam kehidupan makhluk hidup seperti
mengandung tinggi logam berat dari
mengganggu reaksi kimia, menghambat
cemaran limbah yang dibuang di muara
absorbsi
dan daerah sungai. Adanya pasang surut
esensial(Ashraf,
ini menggerakkan massa air secara
dapat menimbulkan gangguan terhadap
horizontal, sehingga terjadi pencampuran
kesehatan karena mampu menghalangi
(Palar, 2009).
kerja
Adanya kontaminasi Cd dalam
dari
enzim
nutrien-nutrien
yang
2006).
berat
sehingga
Logam
mengganggu
metabolisme tubuh, menyebabkan alergi,
tubuh ikan tongkol, mengindikasikan
bersifat
adanya pencemaran logam berat Cd di
karsinogen bagi manusia maupun hewan
perairan Laut Jawa. Adanya pencemaran
(Ginting, 2009)
Cd di perairan Laut Utara Jawa Tengah dapat
diakibatkan
karena
mutagen,
teratogen
atau
Keracunan kadmium (Cd) secara
adanya
epidemis pernah terjadi di Kota Toyama,
pembuangan limbah yang tidak ramah
Jepang pada tahun 1970 yang dilaporkan
lingkungan dari proses kegiatan industri-
sebagai penyakit itai-itai, yaitu dengan 47
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
gejala keluhan sakit pinggang selama
kemungkinan
beberapa tahun dan akhirnya terjadi
kontaminasi
osteomalacia atau pelunakan tulang dan
kontaminan. Sumber kontamian yang
fraktur
memungkinkan
tulang
punggung
pada
disebabkan
oleh
beberapa
sumber
dari
diduga
berasal
penderitanya (Kusnputrant, 1995). Begitu
kontaminasi
yang
pula dengan timbal (Pb) yang memiliki
lingkungan
perairan
tingkat toksisitas yang tinggi setelah Cd.
tersebut
hidup
Adanya paparan Pb dalam tubuh manusia
sumber
pangannya
dapat mengganggu sistem hemopoetik,
makanannya dan kontaminasi pada saat
sistem
sistem
kegiatan penangkapan ikan, pengawetan,
gastrointestinal, sistem kardiovaskuler,
pengemasan, hingga kegiatan distribusi
dan sistem reproduksi (Ginting, 2009).
ikan sampai ke konsumen.
syaraf,
sistem
ginjal,
terjadi
dari dalam
dimana
yang
ikan
mempengaruhi dalam
rantai
Adanya kandungan logam berat
Menurut Rompas (2010) sebagian
(Pb dan Cd) pada ikan tongkol dapat
besar logam berat masuk ke dalam tubuh
diidentifikasi dan dianalisis bahaya atau
organisme air melalui rantai makanan
kemungkinan adanya resiko bahaya yang
dan dapat juga masuk melalui jaringan
menyebabkan masalah pangan melalui
biota,
metode HACCP (Hazard Analysis Critical
(Notoatmodjo,
Control
penelitian
Point).
HACCP
biasanya
seperti
insang
dan
2005).
kulit
Berdasarkan
Sivaperumal
(2006)
digunakan di industri-industri pangan,
menyatakan adanya kandungan logam
akan tetapi penilaian HACCP pada produk
berat (Pb dan Cd) pada ikan dapat
ikan
dikaitkan
di
pasar
juga
penting
untuk
dengan
adanya
kegiatan
dilakukan. Hal ini berkaitan dengan
industri di wilayah lingkungan perairan
penilaian mutu dan kualitas ikan sebagai
tempat
bahan mentah dari suatu industri olahan
Berdasarkan
pangan sebelum ikan tersebut masuk ke
Perindustrian Provinsi JawaTengah, bila
industri, sehingga mutu dan kualitas
dilihat dari karakteristik limbahnya yang
keamanannya dari hulu hingga hilir
memungkinkan menyumbangkan limbah
kegiatan industri dapat terjaga dengan
logam berat ke badan air dan perairan
baik.
pantai utara adalah industri garment, ban
ikan
hidup
(Palar,
2008)
data
dari
Dinas
Adanya kontaminasi logam berat
luar mobil, pembangkit listrik, kerajianan
(Pb dan Cd) dalam tubuh ikan tongkol
kuningan, dan perakitan sepeda motor.
yang berada di Pantai Utara Jawa ini
Adanya kandungan logam berat pada 48
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
perairan Laut Utara Jawa Tengah inilah
yang
tercemar
oleh
limbah
yang dapat mengkontaminasi sumber
disepanjang pantai utara Jawa.
industri
pakan ikan tongkol yang berada di perairan dimana ikan tongkol tersebut hidup. KESIMPULAN Kadar rata - rata logam berat timbal (Pb) pada ikan tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa sebesar 0,276 mg/kg masih
di
bawah
batas
aman
yang
ditetapkan oleh Peraturan BPOM RI tahun 2009
dan
SNI
7387
tahun
2009,
walaupun terdapat 40% sampel (4 dari 10 sampel) memiliki kadar logam berat Pb di atas standar maksimum yang diperbolehkan (< 0,3 mg/kg). Kadar kadmium
rata-rata (Cd)
logam
pada
ikan
berat tongkol
(Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa sebesar batas
0,156 mg/kg aman
yang
telah melebihi
ditetapkan
oleh
Peraturan BPOM RI tahun 2009 dan SNI 7387 tahun 2009, terdapat 60% sampel (6 dari 10 sampel) memiliki kadar logam berat Cd di atas standar maksimum yang Kemungkinan sumber pencemaran berat
(Euthynnus
sp.)
pada
ikan
berdasarkan
Ashraf. 2006. Levels Of Selected Heavy Metals in Tuna. The Arabian Journal for Science and Engineering, Vol.31, No.31. Badan Lingkungan Hidup Provinsi Jawa Tengah. 2010. Laporan Kualitas Perairan Provinsi Jawa Tengah tahun 2001 sampai dengan 2010. Semarang. Budiharo. 2007. Studi Pengaruh Bulking Agents pada Proses Bioremediasi Lumpur Minyak. Jurnal Purifikasi. Vol.8. N0.1. Darmono. 2001. Lingkungan Hidup dan Pencemaran. Universitas Indonesia, Jakarta. Ginting. 2009. Pemanfaatan Limbah (Oil Sludge) sebagai Bahan Utama dalam Pembuatan Konstruksi Paving Block. Tesis. Kusnoputranto, H. 1995. Pengantar Toksikologi Lingkungan. Jakarta: Direktorat Jendral Pendidikan Tinggi. Notoatmodjo. 2005. Metodologi Penelitian Kesehatan. Jakarta : Rineka Cipta. Palar,
diperbolehkan (< 0,1 mg/kg). logam
DAFTAR PUSTAKA
tongkol metode
HACCP (Hazard Analysis Critical Control Point) berasal dari sumber pakan ikan yang terkontaminasi lingkungan perairan
H. 2008. Pencemaran dan Toksikologi Logam Berat. Jakarta: Rineka Cipta.
Peraturan Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia Nomor HK.00.06.1.52.4011 tahun 2009 tentang Penetapan Batas Maksimum Cemaran Mikroba dan Kimia dalam Makanan. 49
Biotropic. 2017. 1. (2): 41-50 Studi Pencemaran Kandungan Logam Berat Timbal (Pb) dan Kadmium (Cd) pada Ikan Tongkol (Euthynnus sp.) di Pantai Utara Jawa
Rompas. 2010. Toksikologi Kelautan. Jakarta: Sekretariat Dewan Kelautan Indonesia. Sivaperumal. 2007. Heavy Metal Concentration in Fish, Shellfish, and Fish Products from Internal Market of India vis-à-vis Internasional Standards. Food Chemistry 102 (2007) 612-620. Wulandari. 2008. Pola Sebaran Logam Berat Pb dan Cd di Muara Sungai Babon dan Seringin di Semarang. Jurnal Ilmu Kelautan. Vol.13(14):203-208. Warlina. 2004. Pencemaran Air: Sumber, Dampak dan Penangguilangannya. Pasca Sarjana IPB, Bogor. Yulianto. 2006. Penelitian Tingkat Pencemaran Logam Berat di Pantai Utara Jawa Teangah. Semarang: Badan Penelitian dan Pengembangan Provinsi Jawa Tengah. Diakses pada 10 Desember 2010) .
50