ISOLASI DAN HIDROLISIS KARBOHIDRAT

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

“ISOLASI DAN HIDROLISIS KARBOHIDRAT”

OLEH: ANNUURUNNISA G1A 008 015

PROGRAM STUDI BIOLOGI FAKULTAS MIPA UNIVERSITAS MATARAM

2010

http://arunnie.blogspot.com

Page 1

ISOLASI DAN HIDROLISIS KARBOHIDRAT

A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM Tujuan

:

Mengidentifikasi sifat-sifat umum berbagai jenis karbohidrat dengan uji kuantitatif (menentukan kadar pati) dan uji kualitatif (reaksi peragian, reaksi molish, dan reaksi benedict).

Hari/tanggal

:

Selasa, 9 November 2010

Tempat

:

Laboratorium Kimia Dasar Lantai III Fakultas MIPA Universitas Mataram

B. LANDASAN TEORI Karbohidrat adalah senyawa organik terdiri dari unsur karbon, hidrogen, dan oksigen. contoh; glukosa C6H12O6, sukrosa

C12H22O11, sellulosa (C6H10O5)n. Rumus

umum karbohidrat Cn(H2O)m. Karena komposisi yang demikian, senyawa ini pernah disangka sebagai hidrat karbon, tetapi sejak 1880, senyawa tersebut bukan hidrat dari karbon. Nama lain dari karbohidrat adalah sakarida, berasal dari bahasa Arab "sakkar" artinya gula. Karbohidrat sederhana mempunyai rasa manis sehingga dikaitkan dengan gula. Melihat struktur molekulnya, karbohidrat lebih tepat didefinisikan sebagai suatu polihidroksialdehid atau polihidroksiketon. Contoh glukosa; adalah suatu polihidroksi aldehid karena mempunyai satu gugus aldehid dan 5 gugus hidroksil. Banyak karbohidrat merupakan polimer yang tersusun dari molekul gula yang terangkai menjadi rantai yang panjang serta dapat pula bercabang-cabang, disebut polisakarida, misalnya pati, kitin, dan selulosa (Ebbing, 2001). Karbohidrat

digolongkan

berdasarkan

struktur

cincin

sikliknya

,yaitu

furanosa,karbohidrat dengan struktur cincin siklik segi lima (jumlah atom C=5) dan piranosa,karbohidrat dengan struktur cincin siklik segi enam (jumlah atom C=6). Digolongkan berdasarkan monomer penyusunnya yaitu monosakarida,oligosakarida,dan polisakarida. Monosakarida merupakan gula sederhana yang terdiri dari satu unit polihidroksi aldehid atau keton dan tidak dapat di hidrolisis lagi.Oligosakarida adalah kelompok karbohidrat yang terdiri atas 2-10 monosakarida. Disakarida,Trisakarida dan seterusnya sesuai dengan jumlah satuan monosakarida termasukk dalam kelompok ini. http://arunnie.blogspot.com

Page 2

Contohnya sukrosa,maltosa,laktosa dan selobiosa. Polisakarida adalah karbohidrat dalam bentuk polimer dari satuan monosakarida dengan rantai sangat panjang.Polisakarida berfungsi sebagai komponen struktural dan cadangan makanan bagi makhluk hidup.Contoh pati, selulosa, hemiselulosa, gilikogen dan asam hialuronat (Fessenden, 1994). Banyak cara yang dapat digunakan untuk menentukan banyaknya karbohidrat dalam suatu bahan yaitu antara lain dengan cara kimiawi, cara fisik, cara enzimatik dan cara kromatografi. Penentuan karbohidrat polisakarida maupun oligosakarida memerlukan perlakuan pendahuluan yaitu hidrolisa terlebih dahulu sehingga diperoleh monosakarida. Untuk keperluan ini maka bahan dihidrolisa dengan asam atau enzim pada suatu keadaan yang tertentu (Pege, 1997). Karbohidrat sangat beraneka ragam sifatnya. misalnya sukrosa (gula pasir) dan kapas, keduanya adalah karbohidrat. Salah satu perbedaan utama antara berbagai tipe karbohidrat ialah ukuran molekulnya. Monosakarida (sering disebut juga gula sederhana) adalah suatu karbohidrat yang tersederhana, mereka tak dapat terhidrolisis menjdi molekul karbohidrat yang lebih kecil. monosakarida dapat diikat secara bersama-sama untuk membentuk dimer, trimer, dan sebagainya dan akhirnya polimer. dimer-dimer tersebut adalah disakarida. Sukrosa adalah suatu disakarida yang dapat dihidrolisis menjadi satusatuan fruktosa. monosakarida dan diskarida larut dalam air dan umumnya terasa manis. Karbohidrat yang tersusun dari dua sampai delapan satuan monosakarida dirujuk sebagai oligosakarida (yunani, oligo= beberapa). Jika lebih dari delapan satuan monosakarida diperoleh dari hidrolisis maka karbohidrat itu disebut polisakarida. contoh polisakarida adalah pati, yang dijumpai dalam gandum dan tepung jagung dan selulosa penyusun yang bersifat serat dari tumbuhan dan komponen utama dari kapas (Coulson, 2004). Pati atau selulosa

H2O, H+

banyak satuan glukosa

Gula sederhana dan zat-zat yang dengan hidrolisis menghasilkan sederhana disebut karbohidrat . aslinya nama karbohidrat digunakan karena komposisi kebanyakan gula , pati dan selulosa berpadaan dengan hidrat hipotesis dari karbon. Pada umumnya semua karbohidrat disebut sakarida yang terdiri dari monosakarida yang tidak dapat dihidrolisis, disakarida yang dapat dihidrolisis menjadi dua molekol monosakarida dan polisakarida yang membentuk banyak molekol monosakarida dengan hidrolisis (Keenan, 1999). Uji kuantitatif dilakukan dengan menentukan kadar pati dari isolate amilum pada umbi. Uji kualitatif dilakukan dengan berbagai reaksi kmia yaitu reaksi peragian, reaksi molisch, dan reaksi bennedict. Percobaaan peragian dilakukan untuk menentukan gula http://arunnie.blogspot.com

Page 3

yang dapat difermentasikan. Pada percobaaan, gula yang diuji adalah maltosa. Maltosa adalah gula disakarida. Pada proses disakarida, contohnya maltosa, maltosa akan dihidrolisis menjadi dua molekul glukosa terlebih dahulu dengan enzim zymase yang terdapat pada ragi. Reaksi hidrolisis maltosa yang menghasilkan dua molekul glukosa adalah sebagai berikut:

Setelah hidrolisis berlangsung, selanjutnya glukosa yang terbentuk akan mengalami proses fermentasi. Reaksi fermentasi berlansung menurut persamaan berikut: C6H12O6 → 2C2H5OH + 2CO2 + 2 ATP (Energi yang dilepaskan:118 kJ per mol) Hasil dari fermentasi adalah adanya gelembung-gelembung CO2 dan bau alkohol. Maltosa memberikan hasil yang positif dalam pengujian ini. Hal ini berarti bahwa maltosa adalah salah satu karbohidrat yang dapat difermentasikan (Harrow, 1946). Uji molisch, merupakan uji untuk memeriksa atau mengetahui pembentukan furfural pada beberapa jenis karbohidrat. Pentosa hamper secara kuantitatif terdehidrasi menjadi furfural, sedangkan dengan dehidrasi heksosa – heksosa manghasilkan hidroksi metal furfural. Pereaksi molisch terdiri atas larutan α naftol dalam alkohol. Apabila pereaksi ini ditambahkan pada larutan glukosa misalnya ditambahkan H2SO4 pekat hati hati, akan terbentuk dua lapisan zat cair. Pada batas antara kedua lapisan itu akan terjadi warna ungu karena terjadi reaksi pondensasi antara furfural dengan α naftol (Poedjiadi, 1994). Pereaksi bennedict merupakan larutan yang mengandung CuSO4, Na2CO3, dan Na-sitrat. Glukosa dapat mereduksi ion Cu+ dari CuSO4 menjadi ion Cu+ yang selanjutnya mengendap sebagai Cu2O. larutan Na2CO3 dan Na-sitrat menjadikan pereaksi bennedict bersifat basa lemah. Endapan yang terberntuk dapat berwarna hijau, kuning, atau merah bata. Warna endapan tergantung konsetrasi yang diuji. Pereaksi bennedict banyak digunakan untuk memeriksa kadar glukosa dalam urin daripada pereaksi fehling. Hal ini disebabkan karena di dalam darah terdapat juga asan urat dan keratin. Kedua senyawa ini dapat mereduksi pereaksi fehling, namun tidak dapat mereduksi pereaksi bennedict. Selain itu pereaksi fehling kurang peka dibandingkan dengan bennedict. Pereaksi bennedict lebih mudah digunakan karena terdiri hanya dari satu macam larutan (Anonim, 2010). http://arunnie.blogspot.com

Page 4

C. ALAT DAN BAHAN 1. Alat -

Tabung reaksi

-

Rak tabung reaksi

-

Gelas ukur

-

Gelas kimia

-

Bunsen

-

Penangas air

-

Penjepit

-

Corong pisah

-

Gelas beker

-

Rak tabung reaksi

-

Blender

-

Pipet tetes

-

Pipet volume

-

Rubber bulb

-

Timbangan analitik

-

Penyaring Buchner

2. Bahan -

Ubi kayu (Manihot esculenta Crantz)

-

Aquadest

-

Alkohol 95%

-

Larutan 20% suspensi ragi roti

-

Larutan karbohidrat

-

Larutan buffer fosfat (pH: 6,6 – 6,8)

-

Larutan glukosa

-

Larutan fruktosa

-

Larutan laktosa

-

Larutan 10% alfa naftol

-

Larutan H2SO4 pekat

-

Reagen Benedict

-

Kertas saring

-

Tissue

-

Kertas label


Page 5

D. SKEMA KERJA 1. Isolasi Amilum dari Umbi – Umbian

Ubi kayu

-

dikupas

-

ditimbang 100 gr

-

ditambah aquadest 200 mL

-

diblender (selama 30 detik)

Ubi kayu yang telah halus

-

residu disaring dengan kertas saring

Residu

-

ditampung dalam gelas ukur 500 mL

-

ditambah aquadest 200 mL

-

dikocok

-

dibiarkan mengendap hingga jenuh

-

disaring dengan kertas saring

Lar. keruh + endapan I


-

ditambah 200 mL aquadest

-

dikocok

-

dibiarkan mengendap hingga jenuh

-

disaring larutan jernih di bagian atas

Page 6

Endapan II

-

ditambah 100 mL alkohol 95%

-

disaring dengan penyaring Buchner

Pati basah

-

dikeringkan pada suhu kamar

Pati kering -

ditimbang

-

dicatat hasil

Hasil

2. Uji Kualitatif Karbohidrat a. Reaksi Peragian

Tabung reaksi -

5 mL larutan 20 % suspensi ragi roti

-

5 mL larutan karbohidrat

-

5 mL larutan buffer fosfat (pH 6.6-6.8)

Campuran - didiamkan selama 1 jam

Timbul gelembung CO2 jika ada reaksi peragian http://arunnie.blogspot.com

Page 7

b. Reaksi Molisch Tabung reaksi I

- 2 mL larutan glukosa - 2 tetes larutan 10% alfa naftol - dialirkan 2 mL H2SO4 melalui dinding tabung Campuran (terbentuknya cincin ungu menunjukkan adanya karbohidrat)

Tabung reaksi II

- 2 mL larutan fruktosa - 2 tetes larutan 10% alfa naftol - dialirkan 2 mL H2SO4 melalui dinding tabung Campuran (terbentuknya cincin ungu menunjukkan adanya karbohidrat)

Tabung reaksi III

- 2 mL larutan laktosa - 2 tetes larutan 10% alfa naftol - dialirkan 2 mL H2SO4 melalui dinding tabung Campuran (terbentuknya cincin ungu menunjukkan adanya karbohidrat) http://arunnie.blogspot.com

Page 8

c. Reaksi Benedict Tabung reaksi I

- 5 mL reagen Benedict - 8 tetes (0,5 mL) larutan glukosa - panaskan diatas bunsen selama ± 1 menit

Campuran (Reaksi +: terjadi warna hijau, kuning, merah atau endapan merah bata)

Tabung reaksi I

- 5 mL reagen Benedict - 8 tetes (0,5 mL) larutan fruktosa - panaskan diatas bunsen selama ± 1 menit

Campuran (Reaksi +: terjadi warna hijau, kuning, merah atau endapan merah bata)

Tabung reaksi I

- 5 mL reagen Benedict - 8 tetes (0,5 mL) larutan laktosa - panaskan diatas bunsen selama ± 1 menit

Campuran (Reaksi +: terjadi warna hijau, kuning, merah atau endapan merah bata) http://arunnie.blogspot.com

Page 9

E. HASIL PENGAMATAN No 1.

Langkah Kerja

Hasil Pengamatan

Isolasi Amilum dari Ubi Kayu  100 gr ubi kayu ditambah 200 ml  Tekstur menjadi halus dan berwarna aquadest diblender selama 30 dtk. putih kekuningan dan keruh.  Larutan ubi disaring dengan kertas  Larutan keruh ditampung saring, ditampung, ditambah  Endapan tertinggal pada kertas saring aquadest, dikocok dan dibiarkan berwarna putih kekuningan mengendap.  Larutan jenuh didekantasi,  Larutan yang telah didekantasi agak ditambah 200 ml aquadest, dikocok bening, sedangkan endapannya dan dibiarkan mengendap kemudian berwarna putih kekuning-kuningan. disaring.  Residu tertinggal pada kertas saring  Larutan jernih diatas didekantasi  Diperoleh larutan hasil filtrate dan lagi kemudian disaring kembali. endapan yang kini berwarna lebih putih dan bersih.  Endapan ditambah 100 ml alcohol  Endapan hasil penyaringan dengan 95%, kemudian disaring dengan Buchner berwarna putih bersih, dan penyaring Buchner. bertekstur lembut.  Patipun diperoleh  Pati kemudian dikeringkan, setelah  Pati + kertas saring kering ditimbang ditempatkan pada Kertas saring kertas saring. Berat pati

= 19,66 gram = 1,02 gram = 19,66 – 1,02 = 18,64 gram

 Kadar amilum=18,64gr/100gr x 100% = 18,64% 2.

Uji Kualitatif Karbohidrat  Reaksi Peragian 5ml lar. 20% suspensi ragi roti +  Ragi roti berwarna kekuningan dan 5ml lar. karbohidrat + 5ml lar. berbau tak sedap, lar. karbohidrat buffer fosfat (pH 6.6-6.8). berwarna putih dan keruh, lar. buffer berwarna bening.  Campuran menjadi keruh dan berwarna putih kekuningan, dan baunya tak sedap. Campuran dibiarkan selama ± 1 jam (amati apakah timbul gelembung  Timbul gelembung CO , hal ini 2 CO2 atau tidak?) menunjukkan adanya reaksi peragian.


Page 10

 Reaksi Molisch 2 ml larutan glukosa + 2 tetes  Awalnya semua larutan berwarna larutan 10% α naftol; dimasukkan bening, saat glukosa dicampur dengan kedalam tabung reaksi, dialirkan larutan 10% α naftol, belum tampak melalui dinding tabung reaksi 2 ml perubahan, namun setelah H2SO4 H2SO4 pekat secara perlahan. pekat ditambahkan warna larutan mulai berubah dan menjadi agak keruh. Amati apakah terbentuk cincin  Terdapat partikel-partikel berwarna ungu pada bidang batas dua cairan hitam yang melayang dipermukaan tersebut?? larutan.  Terbentuk cincin berwarna ungu (menunjukkan adanya karbohidrat). 2 ml larutan fruktosa + 2 tetes  Awalnya semua larutan berwarna larutan 10% α naftol; dimasukkan bening, saat fruktosa dicampur dengan kedalam tabung reaksi, dialirkan larutan 10% α naftol, belum tampak melalui dinding tabung reaksi 2 ml perubahan, namun setelah H2SO4 H2SO4 pekat secara perlahan. pekat ditambahkan warna larutan mulai berubah dan menjadi agak Amati apakah terbentuk cincin keruh. ungu pada bidang batas dua cairan  Terdapat partikel-partikel berwarna tersebut?? hitam yang tersebar dalam larutan, dan warnanya berubah kemerahan.  Terbentuk cincin berwarna ungu (menunjukkan adanya karbohidrat). 2 ml larutan laktosa + 2 tetes  Laktosa berwarna putih keruh, saat larutan 10% α naftol; dimasukkan laktosa dicampur dengan larutan 10% kedalam tabung reaksi, dialirkan α naftol, belum tampak perubahan, melalui dinding tabung reaksi 2 ml namun setelah H2SO4 pekat H2SO4 pekat secara perlahan. ditambahkan warna larutan mulai berubah dan menjadi agak keruh. Amati apakah terbentuk cincin  Terdapat partikel-partikel berwarna ungu pada bidang batas dua cairan hitam yang tenggelam dalam larutan. tersebut??  Terbentuk cincin berwarna ungu, namun letaknya agak kedasar tabung (menunjukkan adanya karbohidrat).  Reaksi Benedict 5 ml Reagen Benedict + 8 tetes  Lar. glukosa berwarna bening, (0.5ml) lar. glukosa dimasukkan sedangkan reagen Benedict berwarna kedalam tabung reaksi kemudian biru. Campuran berwarna biru muda dipanaskan dengan bunsen selama ± dan bening. 1 menit.


Page 11

Amati apakah terjadi perubahan warna menjadi hijau, kuning,  Setelah dipanaskan larutan berubah merah, orange, atau terbentuk warna menjadi kehijauan (hal ini endapan merah bata (menunjukkan menunjukkan bahwa terjadi reaksi reaksi +) positif terhadap Benedict) 5 ml Reagen Benedict + 8 tetes (0.5ml) lar. fruktosa dimasukkan  Lar. Fruktosa berwarna bening, kedalam tabung reaksi kemudian sedangkan reagen Benedict berwarna dipanaskan dengan bunsen selama ± biru. Campuran berwarna biru muda 1 menit. dan bening. Amati apakah terjadi perubahan warna menjadi hijau, kuning,  Setelah dipanaskan larutan berubah merah, orange, atau terbentuk warna menjadi hijau di bagian atas endapan merah bata (menunjukkan (hal ini menunjukkan bahwa terjadi reaksi +) reaksi positif terhadap Benedict) 5 ml Reagen Benedict + 8 tetes (0.5ml) lar. laktosa dimasukkan  Lar. laktosa berwarna putih agak kedalam tabung reaksi kemudian keruh, sedangkan reagen Benedict dipanaskan dengan bunsen selama ± berwarna biru. Campuran berwarna 1 menit. biru muda dan sedikit keruh. Amati apakah terjadi perubahan  Setelah dipanaskan larutan berubah warna menjadi hijau, kuning, warna menjadi kehijauan di bagian merah, orange, atau terbentuk atas, dan tampak sedikit endapan endapan merah bata (menunjukkan merah didasarnya (hal ini reaksi +) menunjukkan bahwa terjadi reaksi positif terhadap Benedict)


Page 12

F. ANALISIS DATA 1. Isolasi Amilum dari Umbi-Umbian > Berat Ubi Kayu

= 100 gram

> Berat Pati yang diperoleh + Kertas Saring

= 19,66 gram

> Berat Kertas Saring

= 1,02 gram

> Berat Pati

= 19,66 gram – 1,02 gram = 18,64 gram

> Kadar Pati (Amilum) dalam Ubi Kayu

=

BeratPati x100% BeratUbiKayu

=

18,64 gram x100% 100 gram

= 18,64 % 2. Uji Kualitatif Karbohidrat a. Reaksi Peragian C6H12O6 → 2C2H5OH + 2CO2 + 2 ATP (Energi yang dilepaskan:118 kJ per mol)

b. Reaksi Molisch


Page 13

c. Reaksi Benedict Glukosa CH2OH O H H H OH OH HO OH H H

H+

O H

CH2OH H + O H H H OH OH OH HO H H

H

CH2OH H O H H H OH OH C HO O H H

CH2OH H O H H + H OH OH C HO O H H H

CH2OH H O H H OH OH C O HO O H H

2+

Cu ion tartrat

+

Cu2O

+

merah

3 H2O

Fruktosa H

HOH2C

O

O

OH

H

HO

H

H

OH

H

H

O

HO H

CH2OH

H OH H

CH2OH

H

ion tartrat

+

HO C CH2OH OH H

OH

HOH2C

Cu2+

HO C

O H

H

OH H

OH

OH

HOH2C

OH

H

H

HOH2C +

O H

CH2OH

H

+

HOH2C

+

HO CH2

Cu2O merah

H OH H

OH

Laktosa HO

CH2OH O H H H OH

H H

OH

H O

CH2OH O H H OH OH OH H H

CH2OH O H HO H H OH O H OH H

H

H

CH2OH OH H H H+ H OH OH O H H H

CH2OH O H HO Cu2+ H H OH ion tartrat O H OH H


O

CH2OH O H HO H H OH O H OH H

HO H

CH2OH OH O H H OH OH C O H

CH2OH O H H H OH OH

H

+

H

H O

CH2OH H + O H H OH OH OH H H CH2OH OH O H OH OH C H H H

Cu2O merah

H

Page 14

G. PEMBAHASAN

Karbohidrat adalah senyawa organik terdiri dari unsur karbon, hidrogen, dan oksigen. contoh; glukosa C6H12O6, sukrosa

C12H22O11, sellulosa (C6H10O5)n. Rumus

umum karbohidrat Cn(H2O)m. Karena komposisi yang demikian, senyawa ini pernah disangka sebagai hidrat karbon, tetapi sejak 1880, senyawa tersebut bukan hidrat dari karbon. Nama lain dari karbohidrat adalah sakarida, berasal dari bahasa Arab "sakkar" artinya gula. Karbohidrat sederhana mempunyai rasa manis sehingga dikaitkan dengan gula. Melihat struktur molekulnya, karbohidrat lebih tepat didefinisikan sebagai suatu polihidroksialdehid atau polihidroksiketon. Contoh glukosa; adalah suatu polihidroksi aldehid karena mempunyai satu gugus aldehid dan 5 gugus hidroksil. Banyak karbohidrat merupakan polimer yang tersusun dari molekul gula yang terangkai menjadi rantai yang panjang serta dapat pula bercabang-cabang, disebut polisakarida, misalnya pati, kitin, dan selulosa (Ebbing, 2001). Pada praktikum kali ini yakni mengenai isolasi dan hidrolisis karbohidrat kita bertujuan untuk Mengidentifikasi sifat-sifat umum berbagai jenis karbohidrat dengan uji kuantitatif (menentukan kadar pati) dan uji kualitatif (reaksi peragian, reaksi molish,dan reaksi benedict). Percobaan pertama yakni mengisolasi amilum dari singkong/ubi kayu (Manihot esculenta Crantz). Dari hasi pengamatan, setelah pencucian terakhir dengan menggunakan alkohol 95% dan disaring dengan penyaring Buchner, diperolehlah pati sebesar 18,64 gram, sehingga jika kita melakukan perhitungan kadar pati/amilum dalam 100 gram ubi kayu, maka diperolehlah kadar pati sebesar 18,64%. Pati (starch) atau amilum merupakan polisakarida yang terdapat pada sebagian besar tanaman, terbagi menjadi dua fraksi yaitu amilosa dan amilopektin. Pati sebagai komponen utama karbohidrat yang pada suhu tinggi dapat mengalami hidrolisis. Meningkatnya suhu akan meningkatkan kecepatan hidolisis pati. Pada suhu tinggi pati dapat mengalami pemecahan – pemecahan menjadi senyawa-senyawa sederhana seperti glukosa, maltosa dan dekstrin. Selain pada suhu tinggi, hidrolisis juga dapat dilakukan dengan asam (H2SO4) maupun dengan basa (NaOH). Komponen karbohidrat lainnya yaitu sukrosa juga mengalami hidrolisis pada kadar air rendah. Hidrolisis pati dapat juga dipengaruhi oleh pH, konfigurasi anomerik dan ukuran cincin glukosil. Glikosidis lebih mudah terhidrolisis pada kondisi asam daripada kondisi basa dan cenderung stabil. Karbohidrat cenderung tidak stabil pada suasana asam, khususnya pada suhu tinggi. Perbedaan nilai anomerik hidrolisis β-D-glikosidis adalah lebih kecil dari pada α-Dhttp://arunnie.blogspot.com

Page 15

anomer, perbedaan ini disebabkan variasi struktural dan perbedaan pada derajat gabungan antara oligo dan polisakarida. Cincin furanosa jauh lebih mudah dihidrolisis daripada cincin firanosa, walaupun hidrolisa firanosa adalah gabungan molekul, hidrolisis furanosa dianggap sebagai bimolekuler karena entropi negatifnya diaktifkan. Percobaan selanjutnya yaitu uji kualitatif karbohidrat. Untuk percobaan ini, dilakukan tiga pengujian yakni dengan reaksi peragian, reaksi Molisch, dan reaksi Benedict. Pengujian pertama yakni dengan reaksi peragian, adanya gelembung CO2 yang terbentuk diakhir percobaan nantinya akan menunjukkan bahwa reaksi peragian memang benar terjadi. Pada percobaan ini, yang akan kita fermentasikan adalah latutan karbohidrat. Kita mengetahui bahwa karbohidrat merupakan polisakarida yang tersusun atas banyak monomer sakarida, salah satu diantaranya adalah glukosa. Reaksi peragian (sering juga disebut reaksi fermentasi) akan memecah glukosa dan mengubahnya menjadi dua molekul alkohol dan melepaskan energi dalam bentuk ATP kurang lebih sebesar 118 kJ/mol. Selain itu dihasilkan pula hasil sampingan berupa dua molekul CO2. Ringkasnya, reaksi peragian tersebut berlangsung menurut persamaan di bawah ini: C6H12O6 → 2C2H5OH + 2CO2 + 2 ATP Molekul CO2 yang terdapat dalam produk pada proses reaksi di atas itulah yang kita amati di akhir proses percobaan ini. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa setelah didiamkan selama kurang lebih satu jam, terlihat gelembung-gelembung CO2 di dasar tabung. Hal ini membuktikan bahwa proses fermentasi (reaksi peragian) telah berlangsung. Pengujian kedua yakni dengan Reaksi Molisch. Uji Molisch adalah uji kimia kualitatif untuk mengetahui adanya karbohidrat. Uji Molisch dinamai sesuai penemunya yaitu Hans Molisch, seorang alhi botani dari Australia. Uji ini didasari oleh reaksi dehidrasi karbohidrat oleh asam sulfat membentuk cincin furfural yang berwarna ungu. Reaksi positif ditandai dengan munculnya cincin ungu di permukaan antara lapisan asam dan lapisan sample. Sampel yang diuji dicampur dengan reagent Molisch, yaitu α-naphthol yang terlarut dalam etanol. Setelah pencampuran atau homogenisasi, H2SO4 pekat perlahan-lahan dituangkan melalui dinding tabung reaksi agar tidak sampai bercampur dengan larutan atau hanya membentuk lapisan. H2SO4 pekat (dapat digantikan asam kuat lainnya) berfungsi untuk menghidrolisis ikatan pada sakarida untuk menghasilkan furfural. Furfural ini kemudian bereaksi dengan reagent Molisch, α-naphthol membentuk cincin yang berwarna ungu. Ada tiga sampel yang digunakan dalam percobaan ini, yakni glukosa, fruktosa dan laktosa. Ketiga sampel ini menunjukkan hasil possitif, karena dari hasil pengamatan ketiga sampel tersebut membentuk cincin warna ungu, dimana hal ini http://arunnie.blogspot.com

Page 16

membuktikan bahwa memang benar sampel tersebut mengandung karbohidrat. Glukosa membentuk dua lapisan, dengan lapisan di bagian atas berwarna putih keruh dengan partikel-partikel hitam yang melayang di permukaanya, serta di bagian bawah lapisan berwarna bening, dan cincin berwarna ungu tersebut terbentuk diantara kedua lapisan ini. Hal yang sama ditunjukkan oleh fruktosa, sedangkan untuk fruktosa hanya berbeda sedikit yakni cincin ungu yang terbentuk terletak agak ke bagian dasar tabung. Pengujian terakhir, yakni menggunakan reaksi Benedict. Selain reaksi Molisch, pengujian karbohidrat dapat pula dilakukan dengan reaksi Benedict. Benedict terdiri dari campuran Na2Co3 + CuSO4 + Natrium sitrat. Reaksi Benedict akan menyebabkan larutan sampel yang awalnya berwarna biru berubah menjadi orange, kuning, hijau atau terbentuk endapan berwarna merah bata. Perubahan ini menandakan bahwa sampel tersebut mengandung karbohidrat. Sama halnya dengan reaksi Molisch di atas, dalam percobaan ini kita juga menggunakan tiga sampel, yakni glukosa, fruktosa, dan laktosa. Sampel pertama yang digunakan yakni glukosa, merupakan larutan berwarna bening dan setelah ditambahkan reagen Benedict, larutan berubah warna menjadi biru. Setelah pemanasan dengan menggunakan bunsen selama kurang lebih satu menit, warnanya kembali mengalami peubahan menjadi kehijauan. Hal yang sama ditunjukkan oleh fruktosa, sedangkan untuk sampel laktosa, yang warnanya sedikit lebih keruh dibandingkan dengan dua sampel sebelumnya, setelah ditambahkan reagen Benedict larutannya menjadi berwarna biru keruh, ketika pemanasan selesai dilakukan, larutan kembali berubah warna menjadi kehijauan dan terdapat endapan merah bata di dasar tabung. Hal ini menunjukkan bahwa memang benar sampel tersebut mengandung karbohidrat, karena glukosa yang merupakan monomer penyusun karbohidrat memiliki gugus pereduksi yang mampu mereduksi pereaksi Benedict. Ion Cu2+ akan direduksi menjadi Cu+ dan akan mengendap sebagai Cu2O. Proses reaksi lengkapnya dapat dilihat pada bab analisis data di atas. Jadi endapan berwarna merah yang terlihat di dasar tabung tadi merupakan endapan Cu2O, sehingga terbukti bahwa ketiga sampel di atas mengandung karbohidrat.


Page 17

H. KESIMPULAN

Dari hasil praktikum kali ini dapat ditarik beberapa kesimpulan, yakni: 

Karbohidrat adalah senyawa organik terdiri dari unsur karbon, hidrogen, dan oksigen. contoh; glukosa C6H12O6, sukrosa C12H22O11, sellulosa (C6H10O5)n. Rumus umum karbohidrat Cn(H2O)m.



Melihat struktur molekulnya, karbohidrat lebih tepat didefinisikan sebagai suatu polihidroksialdehid atau polihidroksiketon. Karbohidrat dikelompokkan menjadi empat kelompok penting yaitu monosakarida, disakarida, oligosakarida, dan polisakarida.



Dari hasil percobaan isolasi pati di atas diperoleh kadar pati (amilum) dalam 100 gram ubi kayu adalah sebesar 18,64%.



Terjadinya reaksi fermentasi (reaksi peragian) ditandai oleh terbentuknya gelembung-gelembung CO2 dan proses reaksinya berlangsung menurut persamaan berikut: C6H12O6 → 2C2H5OH + 2CO2 + 2 ATP



Pada percobaan uji kualitatif karbohidrat menggunakan reaksi Molisch, adanya karbohidrat ditandai dengan terbentuknya cincin ungu.



Uji Molisch didasari oleh reaksi dehidrasi karbohidrat oleh H2SO4 membentuk cincin furfural yang berwarna ungu. Reaksi positif ditandai dengan munculnya cincin ungu di permukaan antara lapisan asam dan lapisan sample.



Sedangkan uji kualitatif karbohidrat menggunakan reaksi Benedict, adanya karbohidrat ditunjukkan oleh perubahan warna larutan sampel dari biru menjadi kuning, orange, hijau atau terbentuk endapan merah bata di dasar tabung.



Glukosa yang merupakan monomer penyusun karbohidrat memiliki gugus pereduksi yang mampu mereduksi pereaksi Benedict (campuran Na2Co3+CuSO4+Natrium sitrat). Ion Cu2+ direduksi menjadi Cu+ dan akan mengendap sebagai Cu2O.

I. SARAN Diharapkan kepada praktikan agar lebih serius lagi dalam praktikum, agar hasil yang diperoleh dapat maksimal, dan kepada kakak-kakak Co.Ass harap pengarahan dan bimbingannya lebih ditingkatkan. Terima kasih.


Page 18

DAFTAR PUSTAKA

Anonim. 2010. Polimer Bahan Alam (http://gurumuda.com/bse/polimer-alam#more13171) diakses pada tanggal 20 November 2010, 01:17 am. Coulson, E. H., and Ingle, Richard. 2004. Nuffield Chemistry: Handbook for Pupils. USA: Prentice Hall – Longman Group Limited, Inc. Ebbing, Darrell D. 2001. General Chemistry. USA: Haughton, Muffin Company. Fessenden, Ralph J., Joan S. Fessenden. 2003. Kimia Organik Jilid 1 Edisi Ke-4 (Terjemahan). Jakarta: Erlangga. Fessenden, Ralph J., Joan S. Fessenden. 2003. Kimia Organik Jilid 2 Edisi Ke-4 (Terjemahan). Jakarta: Erlangga. Harrow, Benjamin. 1946. Textbook of Biochemistry. London: W. B. Saunder Company. Keenan. 1999. Kimia untuk Universitas (Terjemahan). Jakarta: Erlangga. Pege, D. S. 1997. Prinsip-Prinsip Biokimia Edisi Ke-2 (Terjemahan). Jakarta: Erlangga. Poedjiadi, A. 1994. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: University of Indonesia Press.


Page 19

ISOLASI DAN HIDROLISIS KARBOHIDRAT

Recommend Documents