GEN-LAB Hírlevél
2014 II. szám
KINETEX BIPHENYL: a legújabb családtag Habár az elválasztási feladatok jelentős részét a jól bevált C18-as fázison meg tudjuk oldani, akad olyan kihívás, ahol érdemesebb 'alternatív' szelektivitású töltetek felé fordulni. A legújabb Kinetex Biphenyl ilyenkor szolgálhat mentőövként. Ez a fordított fázisú töltet ötvözi a core-shell technológia előnyeit, illetve egy olyan egyedi szelektivitást, amit egy C18-as kolonna nem tud nyújtani, különösképpen aromás vegyületek esetén. Megbízható, robusztus, és 100% víztűrő fázis. A Kinetex Biphenyl szelektivitása három fő kölcsönhatáson alapul: 1. Aromás π-π kölcsönhatás 2 Hidrofób kölcsönhatás (a biphenyl fázis kevésbé hidrofób, mint a C18, viszont a C8 és Phenyl-Hexyl tölteteknél magasabb a hidrofóbicitás) 3. Gyenge ionos és dipol-dipol kölcsönhatás – a fenil gyűrűknek köszönhetően.
s ir li Áp
Tökéletes választás, ha olyan mintánk van, amire a C18-as fázis szelektivitása nem megfelelő, illetve ha olyan poláris, bázikus anyagot kell elválasztanunk, ami nem kötődik meg a C18-as oszlopokon. Jelenleg 2.6u és 5u-os elérhető, de hamarosan dimenzióban is.
l -1 tő 2
szemcsemérettel érkezik 1.7u-os
Szteroidok KINETEX BIPHENYL oszlopon
Oszlop: Kat.szám: Elúció: Eluens A:
Kinetex™ 2.6μm Biphenyl 100 Å, LC Column 50 x 4.6mm 00B-4622-E0 gradiens H2O
Eluens B: ACN Gradiens Profil: Idő (min) Pct A 0 80 6 40 Áramlási seb: 1.85 mL/min Hőmérséklet: 30°C Detektálás: UV-Vis Abs.-Variable Minta:
1 2 3 4 5 6 7 8 9
Pct B 20 60 Wave.(UV)
Estriol Hydrocortisone Prednisone Cortisone Corticosterone B-Estradiol Cortisone Acetate 17-Hydroxyprogesterone 21-Hydroxyprogesterone
10 Deoxycorticosterone
1
Szteroidok különböző KINETEX fázisokon Oszlopok:
Dimenziók: Eluens A: Eluens B: Gradiens: Áramlási seb: Hőmérséklet: Detektálás: Minta:
Kinetex 2.6μm Kinetex 2.6μm Kinetex 2.6μm Kinetex 2.6μm 50 x 4.6mm H2O
Bipheny C18 XB-C18 Phenyl-Hexyl
ACN 20%-->60% B 6perc alatt 1.85 mL/min 30°C UV@220nm 1. 2. 3. 4. 5.
Estriol Hydrocortisone Prednisone Cortisone Corticosterone
6. β-Estradiol
7. Cortisone Acetate 8. 17-Hydroxyprogesterone 9. 21-Hydroxyprogesterone 10. Deoxycorticosterone
Hatalmas akciókkal indulunk!!!
Ha személyesen szeretne meggyőződni arról, hogyan tudná kihasználni a Kinetex Biphenyl előnyeit, kérjen tesztoszlopot!
2
Teljesítmény növelése HPLC oszlopokon Optimális teljesítmény elérése teljesen porózus oszlopon Egy hosszabb (250 mm), nagyobb szemcseméretű (5 mm) analitikai oszlopról egy rövidebb (150 mm), ugyanolyan átmérőjű (4,6 mm) kisebb szemcseméretű (3 mm) analitikai oszlopra való áttérés esetén:
1.
1. 2.
1. Teljesen porózus, 250*4,6 mm-es, 5 mm-os oszlop Rs=2,0 2. Teljesen porózus, 150*4,6 mm-es, 3 mm-os oszlop Rs=2,0
2. oszlopon: Felbontás nem változik Teljesítmény 1,7-szeresére nő
3
Optimális teljesítmény elérése Kinetex (core-shell) oszlopon Egy hosszabb (250 mm), nagyobb szemcseméretű (5 mm) teljesen porózus oszlopról egy rövidebb (150 mm), ugyanolyan átmérőjű (4,6 mm) kisebb szemcseméretű (2,6 mm) Kinetex héjszerkezetes oszlopra való áttérés esetén:
2.
1. Teljesen porózus, 250*4,6 mm-es, 5 mm-os oszlop Rs=2,0 2. Kinetex, 150*4,6 mm-es, 2,6 mm-os oszlop Rs=2,65
2. oszlopon: Felbontás 1,3-szorosára nő Teljesítmény 1,7-szeresére nő Áramlási sebességet 3-szorosára növelve a teljesítmény 5-szörösére nő
Teljesítmény növelése HPLC oszlopokon (folyt II.) Optimális teljesítmény elérése Kinetex (core-shell) oszlopon Egy hosszabb (250 mm), nagyobb szemcseméretű (5 mm) teljesen porózus oszlopról egy rövidebb (100 mm), ugyanolyan átmérőjű (4,6 mm) kisebb szemcseméretű (2,6 mm) Kinetex héjszerkezetes oszlopra való áttérés esetén:
1.
Optimális teljesítmény elérése Kinetex (core-shell) oszlopon Egy hosszabb (250 mm), nagyobb szemcseméretű (5 mm) teljesen porózus oszlopról egy rövidebb (50 mm), ugyanolyan átmérőjű (4,6 mm) kisebb szemcseméretű (2,6 mm) Kinetex héjszerkezetes oszlopra való áttérés esetén:
1.
2. 2.
1. Teljesen porózus, 250*4,6 mm-es, 5 mm-os oszlop Rs=2,0 2. Kinetex, 100*4,6 mm-es, 2,6 mm-os oszlop Rs=2,17
2.oszlopon: Felbontás 1,1-szeresére nő Teljesítmény 2,5-szörösére nő Áramlási sebességet 3-szorosára növelve a teljesítmény 7,5-szörösére nő 4
1. Teljesen porózus, 250*4,6 mm-es, 5 mm-os oszlop Rs=2,0 2. Kinetex, 50*4,6 mm-es, 2,6 mm-os oszlop Rs=1,53
2.oszlopon: Felbontás 0,77-szeresére nő Teljesítmény 5-szörösére nő Áramlási sebességet 3-szorosára növelve a teljesítmény 15-szörösére nő
Teljesítmény növelése HPLC oszlopokon (folyt III.) Hogyan hozzuk ki a maximumot az elválasztásunknál?
Kolonna: Teljesen porózus C18(2) 250*4,6 mm, 5 mm Elúció típusa: Gradiens A eluens: 0,1 % hangyasav/víz B eluens: 0,1 % hangyasav/acetonitril Gradiens profil: Lépés Idő (perc) A B 1. 0 95 5 2. 2,79 95 5 3. 36,15 5 95 4. 36,38 95 5 5. 50,93 95 5 Áramlási sebesség: 1 mL/perc Oszlop hőmérséklet: 45°C Detektálás: UV - 254 nm (25°C) Nyomás: 106 bar
16-szoros teljesítmény növekedés
Komponensek: 1. Pyridine 2. Acetaminophen 3. Quinine 4. Acebutolol 5. Chlorpheniramine 6. Triprolidine 7. Prednisolone 8. 4-Chlorobenzoic acid 9. 4-Chlorocinnamic acid 10. Diazepam 11. Diflunisal 12. Hexanophenone
Kolonna: Kinetex C18 50*4,6 mm, 2,6 mm Part No: 00B-4462-E0 Elúció típusa: Gradiens A eluens: 0,1 % hangyasav/víz B eluens: 0,1 % hangyasav/acetonitril Gradiens profil: Lépés Idő (perc) A B 1. 0 95 5 2. 0,20 95 5 3. 2,47 5 95 4. 2,48 95 5 5. 3,47 95 5 Áramlási sebesség: 2,94 mL/perc Oszlop hőmérséklet: 45°C Detektálás: UV - 254 nm (25°C) Nyomás: 300 bar Komponensek: 1. Pyridine 2. Acetaminophen 3. Quinine 4. Acebutolol 5. Chlorpheniramine 6. Triprolidine 7. Prednisolone 8. 4-Chlorobenzoic acid 9. 4-Chlorocinnamic acid 10. Diazepam 11. Diflunisal 12. Hexanophenone
5
Teljesítmény növelése HPLC oszlopokon (folyt IV.) Hogyan hozzuk ki a maximumot az elválasztásunknál?
Kolonna: Teljesen porózus C18(2) 250*4,6 mm, 5 mm Elúció típusa: Gradiens A eluens: 0,1 % hangyasav/víz B: 0,1 % hangyasav/acetonitril Gradiens profil: Lépés Idő (perc) A 1. 0 95 2. 2,79 95 3. 36,15 5 4. 36,38 95 5. 50,93 95
B 5 5 95 5 5
Áramlási sebesség: 1 mL/perc Oszlop hőmérséklet: 45°C Detektálás: UV - 254 nm (25°C) Nyomás: 106 bar
25-szörös teljesítmény növekedés
Komponensek: 1. Pyridine 2. Acetaminophen 3. Quinine 4. Acebutolol 5. Chlorpheniramine 6. Triprolidine 7. Prednisolone 8. 4-Chlorobenzoic acid 9. 4-Chlorocinnamic acid 10. Diazepam 11. Diflunisal 12. Hexanophenone
Kolonna: Kinetex C18 50*4,6 mm, 2,6 mm Part No: 00B-4462-E0 Elúció típusa: Gradiens A eluens: 0,1 % hangyasav/víz B: 0,1 % hangyasav/acetonitril Gradiens profil: Lépés Idő (perc) A 1. 0 95 2. 0,14 95 3. 1,59 5 4. 1,60 95 5. 2,23 95 Áramlási sebesség: 4,6 mL/perc Oszlop hőmérséklet: 45°C Detektálás: UV - 254 nm (25°C) Nyomás: 485 bar Komponensek: 1. Pyridine 2. Acetaminophen 3. Quinine 4. Acebutolol 5. Chlorpheniramine 6. Triprolidine 7. Prednisolone 8. 4-Chlorobenzoic acid 9. 4-Chlorocinnamic acid 10. Diazepam 11. Diflunisal 12. Hexanophenone
6
B 5 5 95 5 5
Teljesítmény növelése HPLC oszlopokon (folyt V.)
Használja a Kinetex 2,6 mm és a Kinetex 5 mm-os kalkulátort, amellyel egy teljesen porózus HPLC oszlopról tud módszert transzferálni egy Kinetex héjszerkezetes oszlopra
Így növelhető a hatékonyság, felbontás, csökkenthető az analízis idő, ezáltal költséghatékonyabb módszert tud létrehozni
Elérhetőség: www.phenomenex.com/Kinetex/TechnicalResources
7
5 egyszerű lépés a kolonna minőségbiztosítási bizonylatok letöltéséhez
1.
www.phenomenex.com bejelentkezés/regisztráció Jelentkezzen be a Phenomenex honlapjára!
2.
MyDashboard
Kattintson a MyDashboard ikonra! 3.
My Support
Válassza a lehetőségek közül a My Support fület! HPLC/UHPLC CQA and CofA
4.
Keresse a kolonna minőségi bizonylatok lehetőséget! 5.
Kat. szám Serial Lot. No.
A megfelelő helyre írja be a kolonna cikkszámát és széria számát!
8
5 egyszerű lépés a roQ QuEChERS minőségbiztosítási bizonylatok letöltéséhez
1.
www.phenomenex.com bejelentkezés/regisztráció Jelentkezzen be a Phenomenex honlapjára!
2. MyDashboard
Kattintson a MyDashboard ikonra! 3.
My Support Válassza a lehetőségek közül a My Support fület! 4. roQ QuEChERS Kits (CofA)
Keresse a roQ minőségi bizonylatok lehetőséget! 5. Kat. szám Serial Lot. No.
A megfelelő helyre írja be a kolonna cikkszámát és széria számát!
9
A hónap HPLC alkalmazásai Organic acids on Synergi Hydro-RP 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Oxalic acid Tartaric acid Glycolic acid Formic acid Pyruvic acid Malonic acid Acetic acid Maleic acid Citric acid
Column: Synergi™ 4 µm Hydro-RP 80 Å, LC Column 250 x 4.6 mm, Ea Part No:00G-4375-E0 Dimensions:250 x 4.6 mm ID Elution Type:Isocratic Elution A:20mM Potassium phosphate pH 2.9 Gradient Profile: Step No. Time (min) Pct A 1 0 100 Flow Rate:0.7 mL/min Col. Temp: ambient Detection: UV-Vis Abs.-Variable Wave.(UV) @ 220 nm (22°C) Note:SecurityGuard™ Guard Cartridge System extends column lifetime. - SecurityGuard Cartridges, AQ C18 4 x 3.0mm, 10/Pk Part No.: AJ0-7511 - Holder Part No.: KJ0-4282
Sugars and Organic Acids Juice on Rezex ROA Column: Rezex™ ROA-Organic Acid H+ (8%), LC Column 300 x 7.8 mm Part No:00H-0138-K0 Dimensions:300 x 7.8 mm ID Elution Type:Isocratic Elution A:1.6 mM Heptafluorobutyric acid in water Gradient Profile: Step No. Time (min) Pct A 1 0 100 Flow Rate:0.6 mL/min Col. Temp: ambient Detection: Conductivity @ (22°C) 1 Malic acid 2 Succinic 3 Lactic acid 4 Acetic acid 5 Propionic acid 6 i-Butyric 7 Butyric acid 8 Glucose 9 Fructose 10 Erythritol 11 Glycerol 12 Ethanol 13 n-Propanol
10
A hónap GC alkalmazásai BTEX in Under Six Minutes on ZB-WAX Column:Zebron™ ZB-WAX, GC Cap. Column 30 m x 0.32 mm x 0.50 µm Part No:7HM-G007-17 Phase:Polyethylene Glycol (PEG) Dimensions:30 meters x 0.32 mm x 0.5 µm Oven Profile:60°C to 75°C at 15°C/min to 90°C at 3°C/min for 3 min Carrier Gas:Constant Flow Helium, 2 mL/min Injection:split 20:1 0.2 µL @ 250°C Detection: Flame Ionization (FID) (300°C)
1 Pentane 2 Heptane 3 Methylene chloride 4 Benzene 5 Decane 6 Toluene 7 Ethylbenzene 8 p-Xylene 9 m-Xylene 10 Dodecane 11 o-Xylene
Amines on Zebron ZB-SemiVolatiles 1 N-Nitrosodimethylamine 2 Pyridine 3 2-Picoline 4 N-Nitrosomethylethylamine 5 N-Nitrosodiethylamine 6 Aniline 7 N-Nitrosopyrrolidine 8 N-Nitrosodi-n-propylamine 9 N-Nitrosomorpholine 10 o-Toluidine 11 N-Nitrosopiperidine 12 alpha,alpha-Dimethylphenethylamine 13 4-Chloroaniline 14 N-Nitrosodi-n-butylamine
11
15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28
p-Phenylenediamine 2-Nitroaniline 3-Nitroaniline 1-Naphthylamine 2-Naphthylamine 4-Nitroaniline Diphenylamine 4-Aminobiphenyl Methapyrilene Benzidine o-Tolidine p-Dimethylaminoazobenzene 2-Acetylaminofluorene 3,3'-Dichlorobenzidine
Column:Zebron™ ZB-SV, GC Cap. Column 30 m x 0.25 mm x 0.25 µm Part No:7HG-G027-11 Phase:5% Phenyl-Arylene 95% Dimethylpolysiloxane (Enviro-Inert) Dimensions:30 meters x 0.25 mm x 0.25 µm Oven Profile:40 °C for 0.5 min to 260 °C @ 40 °C/min to 295 °C @ 6 °C/min to 325 °C @ 25 °C/min for 2 min Carrier Gas:Constant Flow Helium, 1.4 mL/min Injection:Split 10:1 1 µL @ 280°C Detection: Mass Selective (MSD) (340°C) Note:Analytes @ 25ppm in Dichloromethane Pulsed Split injection @ 25 p.s.i. Liner: AG0-8499 (Single Taper with Wool) Septum: AG0-4697 (PhenoRed™-400) Inlet Base Seal: AG0-8620 (Easy Seals™)
Fecskendők A fecskendők a kromatográfiás mérések kiindulási pontját képezik, lévén, hogy maga a tényleges elválasztási folyamat is a befecskendezéssel veszi kezdetét, ekkor jut be ugyanis a mintánk a kromatográfiás rendszerbe. Különösen nagy jelentőséggel bír ez a gyógyszeranalitikánál gyakran használt nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás (UHPLC) mérések estében, ahol hosszú élettartamú és nagy teljesítőképességű fecskendőkre van szükség, különösképp ha az inertség alapkövetelménynek számít. Az előbbiek mellett – figyelembe véve, hogy rendkívül kis mennyiségek beméréséről van szó – követelmény lehet a minimális mértékű minta áthordás és az alacsony szintű adszorpció.
A Főbb technikai Paraméterek A hegy különböző típusai
A gyártók számos különböző típusú tűvel ellátott fecskendőt kínálnak az alkalmazásoknak megfelelően. Néhány hasznos kitételt érdemes megemlíteni a kiválasztással kapcsolatban a felhasználásukat illetően. Manuális GC injektálás: Hagyományosan a 2-es típusú tű (Point Style 2) a legalkalmasabb a szeptumon való áthatolásra, úgy hogy az minimális letöredezést okozzon.
12
Manuális HPLC injektálás: A legtöbb manuális injektorszelep a 22-es kaliberű, 3-as típusú tűvel felszerelt fecskendők méretéhez lett kialakítva. Felszívás: Bármely típus hatékony ebből a szempontból, de ha a legutolsó cseppet is szeretnénk elérni az üvegből, érdemes a 3as, vagy az AS típusú tűt alkalmazni.
A fecskendő végződésének típusai
Microliter fecskendők:
Gastight (légmentes) fecskendők:
Az ilyen típusú fecskendők kicsapódásra, kristályosodásra nem hajlamos, szerves, vagy üveggel nem kötődő minták esetén használhatók.
A Gastight típusú fecskendők kiválóan alkalmazhatók mind folyadék, mind gázok esetében. A polimer tömítés szivárgásmentes használatot tesz lehetővé.
Ideális körülmények között az elhasználódás minimális és az élettartam csaknem végtelen, de ha heterogén oldatokkal dolgozunk, minden egyes használat után alaposan mossuk ki a fecskendőt.
Az anyaga általában véve PTFE, de más anyagból is előfordul a felhasználástól függően. Különösen a vizes és a kevésbé illékony minták esetében, mivel kisebb eséllyel keletkezik kicsapódás és keresztszennyeződés.
A tűk méretei
13
Fotópályázat 2014 Kedves Olvasóink! Rengeteg fénykép érkezett a 2014.04.02-án véget érő kromatográfiás fotópályázatunkra. Ezúton szeretnénk megköszönni részvételüket és azt, hogy olyan odaadóan készítették el képeiket a Phenomenex plüss zebrával. Az első három helyezettet egy-egy digitális fényképkerettel díjazzuk, de a többiek se csüggedjenek, hiszen minden résztvevőnek küldünk egy kis meglepetést.
I. helyezett
Eredményhirdetés! Bemutatjuk a díjazott fotókat:
II. helyezett
Rendkívül igényes és kreatív fotók érkeztek az idei pályázatra. Gondolhatják milyen nehéz dolga volt a zsűrinek! A fotók olyan jól sikerültek, hogy szeretnénk megosztani Önökkel a többi képet is, honlapunkra résztvevőnként egy-egy fotót töltöttünk fel. különdíjas
III. helyezett
A többi szintén nagyon jól sikerült fotót honlapunkon (www.gen-lab.hu/hírek) megtekinthetik!
I. helyezett: Suba János II. helyezett: Rácz Gergely Szilveszter III. helyezett: Polgár László Különdíjas: Dusa Péter
Nagyon köszönjük megtisztelő részvételüket idei kromatográfiás fotópályázatunkon! Reméljük sikerült egy kis jókedvet csempészni a kromatográfiás hétköznapokba, és ezúton biztatjuk Önöket, hogy következő fotópályázatunkra is nevezzenek! 14
