VIZELETÜLEDÉK VIZSGÁLAT JELENTŐSÉGE ÉS AUTOMATIZÁLÁSI LEHETŐSÉGE iQ 200 ANALIZÁTORON
Dr Sárváry Enikő SE Transzplantációs és Sebészeti Klinika, Budapest Igazgató: prof. Dr Langer Róbert MSZ EDDSZ ATV 2011. május 12.
Miről? - Áttekintés •
• •
•
Vizeletüledék • vizsgálat helye, helyzete (+kis történelem) Mikroszkópos vizsgálat hátránya Automatizálás, standardizálás lehetősége • Új módszer • Mérés elve • Tapasztalatok Jövője az orvosi diagnosztikában OVSZ -Testfolyadékok laboratóriumi vizsgálata; 2006
Bevezetés •
•
Vizelet: legszélesebb spektrumú vizsgálati anyag Vizeletüledék: • A korszerű vizsgáló eljárások elterjedése ellenére: fontos tanulmányok • a vizeletalkotók morfológiai sajátosságainak és diagnosztikus jelentőségének újabb felismerése miatt (pl:vvt finomabb morfológiája, elektronmikroszkóp) • Méltatlanul háttérbe szorult az elmúlt évtizedben (Dr de Chatel Rudolf)
Bevezetés •
•
•
Tanulmányok elején oktatják „mostoha gyerek”(Dr Nagy Erzsébet) Nagy mennyiségű információt hordoz (Dr Tislér András) Az üledékből kapott információ komoly segítsége lehet az orvosnak (Dr Gion Gábor)
A vizelet vizsgálatok célja • A diagnózis alátámasztása • vese, vizelet traktus, máj, metabolikus betegségek (pl. diabetes) • Monitorizálásban: • chronikus betegségek kezelésének hatékonysága • tünetmentes állapotban betegség szűrése:
•Nem szabad lebecsülni a negatív eredmény értékét
Történelem • • • • • • • • • •
• •
I.E.400. Hippocrates: szag/szín változás 1609 Scribonius: fekete vizelet (alkoptonuria) 1673 Dekkers: fehérje kimutatás ecetsavval 1674 Willis: édes vizelet (diabetes) 1674 Boerhaave: fajsúly mérés (dehidratáció) 1776 Dobson: cukor kimutatás (diabetes) 1787 Marabelli: bilirubin kimutatás salétromsavval 1810 Wollaston: vesekő analízis 1827 Bright: fehérje – vesebetegség 1911 Benedict: első stabil reagens a cukor kimutatására 1941Walter Ames Compton:CLINITEST 1970 Free: CLINISTIX
A vizelet jele (Babilon)
babiloni ékírásos emlékek- téglába égetve- időszámításunk előtt ezer esztendővel már kialakultak
A vizelet színe, mint diagnosztikai jellemző egy középkori orvosi könyvben
Az első vizelet vizsgálattal foglalkozó könyv címlapja
1617-ben
Labordiagnosztika a művészetben
Az első kereskedelmi vizeletvizsgáló készlet: CLINITEST
1941
Mikroszkópos vizsgálat hátránya, hibalehetőségei • Manuális előkészítés ⇒ létszámigény magas • Sokszor kell egy vizeletet kézbe venni, ID csere • Sok idő, sok hibalehetőség • nem pontosan azonos viz.mennyiség • Túl erős, vagy gyenge centrifugálás • Elveszik, vagy összetörik a partikulum • Túl sok felülúszó, v. kevés • Álnegatív eredmény • Az üledék nem homogén • Előkészítés sok időt vesz igénybe ⇒ automatizálás
Vizeletüledék vizsgálat automatizálása Lehetőségek és korlátok…..
Amit a laboros elvár.. Teljesen automata rendszer Olcsó üzemeltetés Automatikus alakfelismerés és számlálás
Preanalitikai fázis – résztvevő személyek
Hibalehetőségek •
A preanalitikai szakaszban és a mintaelőkészítés során • a vvt 20%-a, fvs 15 %-a széteshet • a cylinderek fele károsodhat • a residuális volumen eltéréseiből 30-45% szórás • mikroszkópos számlálás szórása (5 látótér): 13% • interobserver variabilitás: 25 %
Vizeletüledék analizátor automata
Mérési folyamat • • • • •
Képalkotás Digitális képfeldolgozás Sajátosságok leolvasása Részecske azonosítása Leletezés
Mérési folyamat
Stroboszkóp lámpa – 24 villanás másodpercenként Minta átáramlás az átfolyó cellán iQ Lamina segítségével Digitális fényképezés
Mérési folyamat Részecske felismerés
• Mindegyik felvételt analizálja • Mindegyik felismert részecskét vizsgálat alá veszi
Mérési folyamat Azonosítás
• Mindegyik részecskét megvizsgálja • Mindegyik részecskét megfelelő algoritmus alapján besorolja • Mindegyik részecskének megállapítja a mennyiségét
Mérési folyamat Részecske azonosítás
•Számszerű
értékek továbbítása az értékelő számítógépbe •Azonosítás: Auto-Particle Recognition (APRTM) szoftver segítségével •
26,000 részecske adatait tartalmazó fényképtár
•Besorolás
a 12 kategória valamelyikébe
Mérési folyamat Leletezés
• Valamennyi talált részecskére számszerű érték • Felhasználó által megállapított határértékek
Mérési folyamat Leletezés
12 részecske típus felismerése
Leletezés További osztályozás
Manuális besorolás további 26 csoportba
Azonosított részecskék: vértestek, fehérvérsejtek VVT:
FVS
FVS konglomerátumok
Azonosított részecskék: laphámsejtek Elszarusodó laphámsejt
Nem elszarusodó laphámsejt „Átmeneti” hámsejtek
Vese hámsejt
Azonosított részecskék:cilinderek Hyalin cilinderek
Patológiás cilinderek
Szemcsés
Sejtes
Azonosított részecskék: kristályok Kalcium oxalát
Kalcium foszfát
Húgysav
Tripel foszfát (TP04)
Azonosítás: méret LAPH.SEJT SQEP HY AL GRAN CE LL E PIC TREP NSE BY ST
“Nagy”CILINDER
W BC RE EP BA CT URIC SP RM CA PH RBC CA OX
“Kicsi” VVT
FVS
KEREK HÁMSEJT VESE HÁMSEJT
Azonosítás: alak “Négyszögletes” “Kerek” vvt
Ca-ox.
húgysav
hámsejt fvs
“Szögletes” húgysav TP04
“Más” laphámsejt
spermium fvs kong.
Ca-foszfát
Azonosítás: mintázat hyalin cilinder
fvs
szemcsés cilinder
Azonosítás: kontraszt Sejtes cilinder laphámsejt Hyalin cilinder
nyák
baktérium
baktériu m vvt
cilinder
Húgysav kristály
Integrált vizsgáló rendszer
Saját képek VVT
dismorph RBC
isomorph RBC
Acantocyta dismorph RBC
Saját képek
fvs
Gran+maggal
Lymphocytes
Granulocytes
Lymphocytes
Granulocytes Lymphocytes and Granulocytes
Vese Tx- ARE
Vese Tx- ARE
Gran-ly-vvt méret
Saját képek hámsejtek
Saját képek Fertőző „ágensek”
Egyéb fertőző ágensek Trichomonas
Budding yeast
red blood cells??
Real yeast
Saját képek Spermium
Saját képek Kristályok
Saját képek Cylinderek
Tapasztalatok • nagy előrelépés, fejlesztés - ÚJ • nincs versenytársa, megbízható • elegáns, kényelmes, tiszta műveletsor • könnyíti az asszisztens munkáját • kíméli a szemünket • gazdaságilag előnyös • 64 németpont helyett 400 pont kapható • gyorsítja a munkát (hardver-szoftver módosítás óta)
• párhuzamos scan és kiértékelés • ≅ 100 üledék/40 perc
Eredmények • jelentős időmegtakarítás • gyorsabb eredmény • standardizált mintakezelés⇒ ⇒ reprodukálható eredmény • alakos elemek nem károsodnak ⇒ valódi eredmény • eredmények informatikai rendszerbe továbbíthatóak • archiválhatók • adminisztrációs hiba csökken
Összefoglalás Van lehetőség a vizeletvizsgálat megbízható automatizálására Minden részecskét látótérbe hoz, nem veszhet el a diagnózis szempontjából lényeges információ
Összefoglalás Automatizált vizeletüled. vizsgálat •Megfelelő elméleti háttér birtokában, a szabályok betartásával nagy segítséget nyújthat a laboratóriumi munkában és a diagnózis felállításában •Megbízható, reprodukálható eredményt szolgáltat a klinikusoknak
Köszönöm a figyelmet!
