Studi Ekspresi IL-1α dan TNF-α pada Ovarium Tikus (Rattus norvegicus) Model Ca Mammae Hasil Induksi Multiple Low Dose DMBA Study Expression of ovary IL-1α and TNF-α on Mammary Cancer Rat (Rattus norvegicus) Models Induced by Multiple Low Dose of DMBA
Reny Purnama Hadi, Dyah Ayu Oktavianie A.P, Anna Roosdiana Program Studi Pendidikan Dokter Hewan Program Kedokteran Hewan, Universitas Brawijaya
[email protected] ABSTRAK Kanker mammae merupakan kanker yang paling sering menyerang hewan betina usia produktif. Senyawa 7,12 Dimetylbenz [a] Antracene (DMBA) merupakan salah satu zat karsinogenik yang dapat menginisiasi terjadinya kanker mammae (Ca Mammae) melalui kerusakan DNA dan inflamasi. Interleukin1 Alpha (IL-1α) dan Tumor Nuclear Factor Alpha (TNF-α) merupakan jenis sitokin proinflamatori yang turut berperan dalam terjadinya inflamasi pada kanker. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh induksi DMBA terhadap ekspresi IL-1α dan TNF-α pada ovarium tikus. Tikus putih (Rattus norvegicus) strain Sprague-dawley betina berusia 10-12 minggu, terbagi dalam dua kelompok, kelompok kontrol dan kelompok perlakuan. Induksi DMBA diberikan Multiple Low Dose (MLD) sebesar 10 mg/kg BB secara subkutan pada daerah mammae sebanyak 10x induksi yang diberikan setiap dua hari sekali. Induksi estrogen diberikan secara intramuskular dengan dosis 20.000 IU/kg BB sebanyak dua kali dalam seminggu. Ekspresi IL-1α dan TNF-α pada ovarium tikus diamati dengan menggunakan metode imunohistokimia (IHK). Analisa data dilakukan secara kuantitatif menggunakan uji T parametrik tidak berpasangan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa induksi DMBA mampu meningkatkan ekspresi IL-1α sebesar 25x (20.01±0.40) dan peningkatan ekpresi TNF-α sebesar 7,9x (15.09±0.23) dengan α=0,05. Kata kunci: DMBA, IL-1α, Kanker mammae, Ovarium, TNF-α,
ABSTRACT Mammary cancer is a cancer that occurred in mammary tissue and it is one of the most commonly cancer that affects productive females animal. 7,12 Dimetylbenz [a] Antracene (DMBA) is one of the carcinogenic substances that can initiate the occurrence of mammary cancer through DNA damage and inflammation. Interleukin-1 Alpha (IL-1α) and Tumor Nuclear Factor Alpha (TNF-α) are proinflammatory cytokine that play the main role of inflammation in cancer. This study was conducted to determine the effect of DMBA induction to the expression of IL-1α and TNF-α on rat ovary. Female Sprague-dawley rats (Rattus norvegicus) of 10-12 weeks old have been separated into two groups, the control group and the treatment group. DMBA induction was done through subcutaneous injection on the mammary using Multiple Low Dose (MLD) of 10 mg/kg BW every two days for 10 times. Estrogen induction was administrated intramuscularly at dose 20.000 IU/kg BW two times a week. The expression of IL-1α and TNF-α on the rat ovary were observed by immunohistochemistry (IHC) method. Analysis was perfomed quantitatively by parametric independent T test. The results showed that DMBA induction significantly increase the IL-1α expression at 25x (20.01±0.40) and TNF-α expression at 7,9x (15.09±0.23) with α= 0,05. Keywords: DMBA, IL-1α, Mammary Cancer, Ovary, TNF-α
1
Pemberian DMBA dapat memberikan
PENDAHULUAN Carcinoma (Ca) mammae atau kanker
efek samping berupa inflamasi pada organ-
mammae merupakan salah satu kejadian
organ di sekitar mammae, yang terpapar oleh
kanker yang paling sering terjadi pada hewan
zat metabolit aktif dari DMBA (Ranita dan
betina. Kasus kanker mammae dapat terjadi
Widyarini, 2010). Oleh sebab itu, penelitian
pada anjing, kucing, dan juga kuda. Akan
ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh
tetapi, kebanyakan kasus lebih sering terjadi
induksi DMBA pada mammae terhadap
pada anjing. (Amstrong, 2009).
kerusakan ovarium tikus dengan melihat ekspresi IL-1α dan TNF-α.
Penelitian mengenai Ca mammae telah banyak dilakukan untuk mempelajari lebih
lanjut
mengenai
patomekanisme
MATERI DAN METODE
penyakit tersebut. Zat karsinogen DMBA
Alat dan bahan
merupakan zat yang paling sering digunakan
Peralatan
Zat
sifat
Olympus, mikrotom, obyek glass, cover glass,
karsinogenik yang lebih stabil dibandingkan
timbangan analitik, seperangkat alat gelas,
zat karsinogenik yang lain (Currier, 2005).
entellan.
memiliki
lain:
dalam
penelitian
diketahui
antara
digunakan
dalam pembuatan hewan model Ca mammae. DMBA
ini
yang
mikroskop
Induksi DMBA akan dimetabolisme di
Bahan yang digunakan adalah: tikus
dalam tubuh membentuk suatu metabolit aktif
putih (Rattus norvegicus) usia 10-12 minggu,
berupa
dihidrodriol.
7,12 dimetylbenz (α) antrasene (DMBA),
Senyawa aktif tersebut akan berikatan dengan
minyak biji bunga matahari, normal saline
DNA dan menimbukan kerusakan pada DNA
(NS), NaCl fisiologis, antibodi primer IL-1α
yang disebut dengan DNA adduct. Hasil
(Anti-Rabbit IL-1 alpha), antibodi primer
metabolisme aktif DMBA, yang merupakan
TNF-α
senyawa karsinogen juga dapat meningkatkan
sekunder (Goat Anti Rabbit IgG biotin
jumlah ROS (reactive oxygen species) dalam
labeled), Xylol absolut, Etanol absolut,
sel premaligna. Peningkatan jumlah ROS
Aquades,
akan
jaringan
Phosphate Buffer Saline (PBS) pH 7.4, PBS-
secara sistemik yang ditandai dengan adanya
tween, buffer sitrat pH 6, EDTA pH 8,
peningkatan
proinflamatori
Hydrogen Perokssida (H2O2), methanol, susu
termasuk Interleukin-1 alpha (IL-1α) dan
skim 1%, SA-HRP (Strep Avidin Horse
Tumor
Radish
senyawa
epoxide
mengakibatkan
kerusakan
sitokin-sitokin
Nuclear
Factor
Alpha
(TNF-α)
(Anggarwal et al., 2006).
(Anti-Rabbit
TNFα),
paraformaldehyde
Peroxidase),
DAB
Benzidine), Mayer Hematoxyler. 2
antibodi
(PFA)
4%,
(Diamano
Perlakuan Hewan Coba
mammae tikus. Pengamatan dilakukan setiap
Hewan coba yang digunakan dalam
satu minggu sekali.
penelitian ini adalah tikus putih (Rattus norvegicus) strain Sprague-dawley betina
Pengambilan Organ dan pembuatan preparat
yang berusia kurang lebih 10-12 minggu
Ovarium Tikus
dengan aklimatisasi selama 1 minggu. Hewan coba
Pengambilan organ pada hewan coba
dibagi dalam 2 kelompok yaitu
kelompok
kontrol
(A)
dan
dilakukan pada hari ke-28. Hewan coba
kelompok
dieuthanasi dan diposisikan rebah terlentang,
perlakuan (B).
kemudian disayat pada bagian abdomen untuk dilakukan pengambilan organ ovarium. Organ
Perhitungan Dosis DMBA dan Estrogen
yang telah diambil, dicuci dengan NaCl
DMBA ditimbang dengan dosis 10
fisiologis untuk selanjutnya disimpan dan
mg/kg BB. DMBA dilarutkan dalam pelarut
direndam
dalam
pot
berisi
PFA
4%.
sesuai dengan metode dari Pugalendhi et al
Pembuatan preparat dari organ ovarium
(2011). Estrogen diberikan dengan dosis
dilakukan dengan metode dari Muntiha
20.000 IU/kg BB .
(2001).
Pembuatan Hewan Model Ca. Mammae
Pengamatan Ekspresi IL-1α dan TNF-α
Pembuatan hewan model dilakukan
Pemeriksaan ekspresi IL-1α dan TNF-
dengan induksi DMBA secara subkutan (SC)
α dilakukan menggunakan uji IHK atau
pada mammae tikus setiap 2 hari sekali.
Imunohistokimia
Induksi
dijelaskan
estrogen
diberikan
secara
oleh
dengan
metode
yang
Hayat
(2005).
Hasil
intramuskular (IM) sebanyak dua kali dalam
selanjutnya diamati dengan menggunakan
seminggu dengan interval waktu pemberian
mikroskop
setiap 4 hari sekali, bergantian dengan
Pengamatan ekspresi IL-1α dan TNF-α
pemberian induksi DMBA.
dengan
dengan
perbesaran
mengukur
presentase
400x.
area
menggunakan software Axio Vision melalui Pemeriksaan Terbentuknya Ca. Mammae. Pemeriksaan
dilakukan
pengamatan 5 bidang pandang.
dengan
penimbangan berat badan dan palpasi pada
Analisa Data
bagian mammae. Palpasi ini bertujuan untuk
Data
perhitungan
persentase
area
ekspresi IL-1α dan TNF-α dianalisa secara
mengamati apakah telah terbentuk nodul pada
statistika kuantitatif menggunakan Uji T (T 3
test) parametrik tidak berpasangan dengan
Berdasarkan pernyataan diatas, metabolit aktif
α=0,05.
DMBA
akan
menyebabkan
peningkatan
proliferasi sel, sehingga muncul massa sel pada mammae yang disebut dengan nodul.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pemberian estradiol bertujuan untuk
Pemeriksaan Nodul Kanker ke-14
mempercepat terjadinya kanker mammae.
menunjukkan bahwa telah terdapat bentukan
Kwi et al (2013) menyatakan bahwa estradiol
nodul atau benjolan pada bagian abdomen
mampu
tikus
Menurut
P450 melalui ikatannya dengan estrogen
McCarthy et al (2003), kanker pada kelenjar
receptor (ER). Dengan demikian dalam
mammae dapat didiagnosis melalui adanya
penelitian ini, pemberian estradiol mampu
benjolan pada daerah sekitar mammae yang
meregulasi sitokrom P450 yang kemudian
ditandai dengan adanya massa padat, keras
berfungsi untuk memetabolisme DMBA.
dan unmobile atau tidak bergerak. Pada
Semakin
penelitian
termetabolisme, maka kanker yang terbentuk
Pengamatan
kelompok
ini,
pada
hari
perlakuan.
pada
proses
palpasi
meregulasi
peningkatan
banyaknya
DMBA
ekspresi
yang
akan semakin cepat.
menunjukkan adanya benjolan massa padat yang keras dan tidak beraturan pada bagian mammae tikus yang tidak dapat digerakkan
Pengaruh DMBA terhadap ekspresi IL-1α
atau unmobile. Bentukan massa padat (nodul)
dan TNF-α pada Ovarium TIkus Ca.Mammae
semakin membesar dan mengeras pada hari
Hasil penelitian menunjukkan bahwa
ke-28 atau satu minggu setelah 10x induksi
induksi
DMBA
dan
estrogen
mampu
diberikan. Hal ini menunjukkan massa kanker
meningkatkan eskspresi IL-1α dan TNF-α
telah terbentuk pada mammae tikus.
pada ovarium tikus. Hasil pada Gambar 1 dan Gambar 2 menunjukkan ekspresi warna
Pemberian induksi DMBA secara DMBA
coklat pada gambar B memiliki intensitas
langsung menuju ke organ target yaitu
yang lebih tinggi dibandingkan gambar A.
mammae. Kerusakan DNA oleh metabolit
Hal ini menunjukkan bahwa ekspresi pada
aktif DMBA akan menyebabkan mutasi DNA
kelompok
dan menginaktivasi Tumor Suppressor Gen
dibandingkan dengan ekspresi pada kelompok
(p53). Gen p53 merupakan penghambat
kontrol.
subkutan
menyebabkan
paparan
pertumbuhan sel. Inaktivasi dari gen tersebut menyebabkan proliferasi sel terjadi secara terus-menerus
(Aman,
dkk.,
2010). 4
perlakuan
lebih
tinggi
Gambar 2 Ekspresi TNF-α Pada Ovarium Tikus (perbesaran 400x). A= ovarium tikus kelompok kontrol negatif (p1); B= ovarium tikus kelompok perlakuan (p2) induksi DMBA 10mg/kg BB; ( ) = ekspresi TNFα pada sitoplasma sel epitel ovarium.
Gambar 1 Ekspresi IL-1α dan Pada Ovarium Tikus (perbesaran 400x). A= ovarium tikus kelompok kontrol; B= ovarium tikus kelompok perlakuan induksi DMBA 10mg/kg BB; ( ) = ekspresi IL-1α pada nukleus sel epitel ovarium.
Tabel 1 Rata-Rata Persentase Area Ekspresi IL-1α dan TNF-α pada Ovarium Tikus Kelompok
Rata-rata Ekspresi
Rata-rata
Ekspresi Peningkatan
IL-1α ± SD (%)
TNF-α ± SD (%)
ekspresi
Peningkatan IL-1α ekspresi
dibandingkan
dibandingkan
kontrol
kontrol
Kontrol (A)
0.78 ± 0.03
1.7 ± 0.05
-
-
Perlakuan (B)
20.01 ± 0.40
15.09 ± 0.23
25 x
7,9 x
Pada Tabel 1 dapat dilihat bahwa rata-
TNF-α
post-ovulasi (Papacleovoulou et al., 2011),
rata persentase area pada kelompok perlakuan
sedangkan
menunjukkan
hasil
besar
merangsang terjadinya aksi apoptosis dalam
dibandingkan
dengan
kontrol.
proses ruptur folikel (Murdoch et al., 2014).
Hasil uji T parametrik tidak berpasangan yang
Berdasarkan hasil yang diperoleh,
telah dilakukan, juga menunjukkan bahwa
peningkatan jumlah ekspresi IL-1α dan TNF-
ekspresi pada kelompok perlakuan memiliki
α pada organ ovarium dalam kelompok
perbedaan
perlakuan
yang
yang
lebih
kelompok
signifikan
dibandingkan
ekspresi pada kelompok kontrol.
TNF-α
disebabkan
berfungsi
karena
dalam
pemberian
DMBA. Menurut Gunawan et al (2005), zat
Secara normal, sitokin IL-1α dan
asing yang diinduksikan secara subkutan akan
TNF-α berperan dalam proses ovulasi dan
didistribusi melalui jaringan kulit menuju
mekanisme ovuratori pada ovarium. IL-1α
pembuluh kapiler. Dengan demikian, zat
memiliki peranan dalam aksi perbaikan luka
DMBA yang masuk melalui kapiler akan
pada permukaan epitelium ovari dalam proses
menuju ke peredaran darah sistemik untuk 5
selanjutnya dimetabolisme di hepar oleh
hormonal dimana estrogen pada jaringan
sitokrom p-450. Devasagayam et al (2004)
meningkat. Estrogen dibutuhkan sel kanker
menyebutkan bahwa proses metabolisme
sebagai faktor untuk proliferasi sel, sehingga
suatu senyawa, mampu menghasilkan produk
sel-sel
berupa Reactive Oxygen Species (ROS).
Tingginya kebutuhan estrogen oleh sel kanker
Sesuai dengan penjelasan tersebut, proses
memicu
metabolisme
tersebut
estrogen lebih banyak. Peningkatan jumlah
menghasilkan produk senyawa radikal bebas
estrogen yang dihasilkan oleh ovarium ini
yaitu ROS yang mudah untuk diikat oleh
tidak hanya berpengaruh dalam petumbuhan
darah dan masuk ke dalam aliran darah
sel kanker, tetapi juga mampu memicu
sistemik dan menuju ke ovarium.
terbentuknya ROS di ovarium akibat adanya
dari
zat
DMBA
Sel-sel kanker yang terbentuk akibat paparan
DMBA,
mampu
peningkatan
menginisiasi
ROS.
akan
ovarium
terus
untuk
berkembang.
menghasilkan
proses metabolisme oksidatif dari estrogen. Hal ini sesuai dengan pernyataan yang ditulis
terjadinya inflamasi melalui respon tubuh terhadap
kanker
oleh Yager and Davidson (2006).
Menurut
Peningkatan
ROS
pada
ovarium
Baratawidjaja dan Rengganis (2010), sel-sel
kelompok perlakuan menyebabkan ketidak
kanker yang abnormal memicu terjadi respon
seimbangan oksidan dan antioksidan (kondisi
imun tubuh, dimana menyebabkan terjadinya
stres oksidatif). Stres oksidatif memicu
proses fagositosis sel kanker. Peningkatan
neutrofil dan makrofag untuk menghasilkan
jumlah ROS oleh kanker dapat diakibatkan
sitokin proinflamasi pada ovarium sehingga
karena ROS merupakan byproduct atau
terjadi
senyawa yang dihasilkan dari adanya proses
proinflamasi, yaitu IL-1α dan TNF-α (Devine
fagositosis.
Baratawidjaja,
et al., 2012).
menyebutkan,
senyawa
ekspresi
sitokin
yang
Kondisi stres oksidatif yang terjadi
darah
pada ovarium, memungkinkan sel-sel epitel
menyebabkan kondisi stres oksidatif secara
pada ovarium untuk menghasilkan IL-1α
sistemik. Sehingga, pada penelitian ini stres
dalam jumlah yang tinggi. Rider et al (2011)
oksidatif tidak hanya terjadi pada mammae,
menyatakan bahwa IL-1α merupakan sitokin
melainkan juga pada organ lain disekitar
promoter yang banyak diekspresikan dalam
mammae yaitu ovarium.
kondisi hypoxia atau stres fisiologis. IL-1α
terdistribusi
melalui
ROS
(2006)
peningkatan
aliran
Kanker mammae dapat menyebabkan
banyak ditemukan dalam sel pada kondisi
terganggunya siklus hormonal dalam tubuh.
tubuh yang abnormal, dan aktif dalam
Pada kanker mammae terjadi gangguan secara
lingkungan intraseluler terutama nukleus serta 6
berfungsi sebagai regulator transkripsi yang
inflamasi pada ovarium. hal ini sesuai dengan
berpengaruh dalam proses inflamasi serta
pernyataan dari Germano et al (2008).
imunitas di lur sel. Berdasarkan pernyataan
Menurut Baratwidjaja (2006), TNF-α
tersebut, peningkatan IL-1α terjadi sebagai
merupakan sitokin utama dalam proses
bentuk respon tubuh dengan adanya kondisi
inflamasi akut, namun pada kasus infeksi
stres oksidatif pada ovarium yang diakibatkan
yang berat dapat memicu produksi TNF-α
oleh akumulasi dari ROS yang tinggi.
dalam
Aktivasi Nuclear factor kappa beta (NF-kB)
menimbulkan reaksi inflamasi sistemik. Oleh
oleh ROS akan distranslokasikan ke nukleus
sebab itu, pada penelitian ini, akumulasi
untuk mengikat DNA target dan menginduksi
senyawa ROS pada ovarium memicu aktivasi
aktivasi sitokin IL-1α pada nukleus. Sitokin
makrofag pada sel-sel epitel ovarium untuk
IL-1α yang terdapat pada nukleus akan
menghasilkan sitokin proinflamatori TNF-α
berikatan dengan IL1 reseptor (IL1R1) dan
sebagai bentuk respon sel terhadap kondisi
teraktivasi. Sitokin IL1 α yang telah aktif,
stres oksidatif. Makrofag yang teraktivasi
selanjutnya akan ditransportasikan ke wilayah
akan
extraseluler sebagai bentuk pertahanan sistem
Histocompatibility Complex (MHC) kelas II
imun diluar sel serta mengaktivasi respon
pada permukaan sel dan berikatan dengan
imun yang lainnya untuk meregulasi sistem
reseptor sel T (Tcr) dari sel T helper (Th).
imun dengan cara mempromosikan reaksi
Aktivasi dari makrofag tersebut selanjutnya
inflamasi (Rider et al, 2011). Berdasarkan
akan memicu makrofag untuk mensekresikan
pernyataan tersebut, sitokin IL-1α pada
TNF-α. Sitokin TNF-α selanjutnya akan
ovarium dapat memicu aktivasi sel T untuk
diaktivasi oleh TNF reseptor (TNFR) pada
menghasilkan IFN γ yang berfungsi untuk
bagian sitoplasma untuk menghasilkan reaksi
merangsang sintesis TNF-α dan menimbulkan
inflamasi. Dengan demikian, aktivasi TNF-α
reaksi inflamasi. Interleukin 1 Alpha (IL-1α)
yang
berperan
menyebabkan
dalam
aktivasi
sel
T
untuk
meningkatkan ekspresi reseptor terhadap
jumlah
yang
berlebih
mengekspresikan
terjadi
dan
protein
pada
Mayor
ovarium,
terjadinya
akan
inflamasi
pada
ovarium.
Interleukin 2 (IL-2) dan Interferon gamma
Peningkatan ekspresi IL-1α dan TNF-
(IFNγ) dari sel T yang berfungsi dalam
α pada ovarium ini menunjukkan bahwa
proliferasi sel serta mengaktivasi makrofag
induksi
untuk menghasilkan TNF-α, dan bekerja
menyebabkan kerusakan pada ovarium yang
secara
ditandai
sinergis
untuk
mempromosikan
DMBA
dengan
pada
mammae
adanya
mampu
inflamasi
pada
ovarium. Tingginya ekspresi IL-1α dan TNF7
α pada ovarium ini menunjukkan bahwa
DAFTAR PUSTAKA
proses inflamasi yang terjadi pada ovarium
Aman, R.A., S. Gondhowiardjo, A. Rachman, A.SD. Suriadiredja, E. Syahruddin, D.L. Tobing, A. Munandar, H. Kodrat. 2010. Basic Science of Oncology: Ilmu Onkologi Dasar. Jakarta: Badan Penerbit FK UI. Amstrong, S. 2009. Homeopathic Approach to Cancer in Animal. Homeopathy in Practice. Page 56-59. Anggarwal, B.B., S. Shishodia, S.K. Sandur, M.K. Pandey, G. Sethi. 2006. Inflammation and Cancer: How hot is the Link. J Biochemical Pharmacology 72:1605-1621. Baratawidjaja, K. 2006. Imunologi Dasar. Ed 7. Jakarta: Penerbit FK UI. Baratawidjaja, K. dan I. Rengganis. Imunologi Dasar. Ed 9. Jakarta: Penerbit FK UI. Currier, N. 2005. Oncogenic Signaling Pathways Activated in DMBAInduced Mouse Mammary Tumors. Toxicol Pathol 2005 33: 726. DOI: 10.1080/01926230500352226. Devine, P.J., S.D. Perreault, and U. Luderer. 2012. Roles of Reactive Oxygen Species and Antioxidant in Ovarian Toxicity. Biol Reprod Journal 86(2):27. Devasagayam, T.P.A., J.C Tilak, K.K Boloor, S.S. Ketaki, S.G. Saroj, R.D. Lele. 2004. Free Radicals and Antioxidants in Human Health: Current Status and Future Prospects. Journal of Association of Physicians of India (JAPI) 52: 796. Germano, G., A. Paola, M. Alberto. 2008. Cytokines as a Key Component of Cancer-Related Inflammation. Cytokines Journal 43:374-379. Gunawan, S.G., R. Setiabudi, Nafrialdi, dan Elysabeth. 2005. Farmakologi dan Terapi Ed.5. Jakarta: Balai Penerbit FK UI. Hayat, M.A. 2005. Handbook of Immunohistochemistry and In situ Hybridization of Human Carcinomas,
telah mencapai ke tingkat kronis. Hal ini disebabkan
karena
merupakan
sitokin
IL-1α
dan
TNF-α
proinflamasi
yang
diketahui memegang peranan dalam reaksi inflamasi kronis. IL-1α bekerja dengan merangsang sekresi IFNγ oleh sel Th1 dan sel NK, yang selanjutnya akan mengaktifkan makrofag untuk meproduksi TNF-α. IFNγ dan TNF-α bekerja secara sinergis dalam inisiasi respon
inflamasi
kronis
(Baratawidjaja,
2006).
KESIMPULAN Berdasarkan
hasil
penelitian
yang
didapat, dapat disimpulkan bahwa induksi 7,12 dimethylbenz [a] antrachen (DMBA) dengan dosis 10 mg/kg BB pada mammae tikus
(Rattus
norvegicus)
mampu
menyebabkan terjadinya kanker mammae serta meningkatkan ekspresi IL-1α dan TNFα pada ovarium tikus sebagai efek dari inflamasi sistemik.
SARAN Sebagai penelitian lebih lanjut, perlu dilakukan observasi lebih dalam terkait dengan
dampak
induksi
pembuatan
hewan
terhadap
ovarium,
model
DMBA
dalam
Ca
Mammae
apakah
mampu
menyebabkan kanker atau hanya inflamasi. 8
2011. IL1α and IL4 Signalling in Human Ovarian Surface Epithelial Cells. Jurnal of Endocrinology 211, 273-283. Pugalendhi, P., S. Manoharan, K. Suresh, and N. Baskaran. 2011. Genistein and Daidzen, In Combination, Protect cellular Integrity During 7,12Dimethylbenz[A]Anthracene (DMBA) Induced Mammary Carcinogenesis In Sprague-dawley Rats. Afr J Tradit Complement Altern Med. 8(2):91-97. Ranita, T.B.M. dan S. Widyarini. 2010. Dampak Induksi Karsinogenesis Glandula Mammae dengan 7, 12 dimetilbenz(α)antrasen terhadap Gambaran Histopatologis Lambung Tikus Sprague Dawle. Jurnal Veteriner Vol.11 No.1: 17-23 Rider, P., Y. Carmi, O. Guttman, A. Braiman, I. Cohen, E. Voronov, M.R. White, C.A. Dinarello, and R.N Apte. 2011. IL-1α and IL-1β Recruit Different Myeloid Cell and Promote Different Stages of Sterile Inflammation. J.Immunol, DOI:10.4049.2202048. Yager, J.D. and N.E. Davidson. 2006. Estrogen Carcinogenesis in Breast Cancer. New England Journal of Medicine. 354:270-82.
vol 3: Molecular Genetics, Inner Carcinoma, and Pancreatic Carcinoma. Department of Biological Science. Kean University Union: New Jersey. Kwi, H.K., S. Jurkovic, K. Yang, S. Choi, Jin W. Jung, Kwang P. Kim, W. Zhang, and H. Jeong. 2012. Estradiol Induced Cytochrome P450 2B6 Expression at High Concentrations: Implication in Estrogen-Mediated Gene Regulation in Pregnancy. Biochem Pharmacol Journal 84(1): 93-103. McCarthy, A., P.J. Bair, K.S. Latimer. 2003. Canine Mammary Carcinoma. Department of Pathology, Veterinary Medicine, University of Georgia, Athens, GA 30602-7388. Muntiha, M. 2001. Teknik Pembuatan Preparat Histopatologi dari Jaringan Hewan dengan Pewarnaan Hematoksilin Eosin (H&E). Temu Teknis Fungsional Non Peneliti: Bogoe. Murdoch, W.J., D.C. Colgin, and J.A. Ellis. 2014. Role of Tumor Necrosis Factorα in the Ovulatory Mechanism of Ewes. J. Animal. Sci. 75: 1601-1605. Papacleovoulou, G., Hilary O. D. Critchley, Hillier Stephen G., and Mason J. Ian.
9
