PENGARUH EKSTRAK AKAR GINSENG JAWA (Talinum paniculatum) TERHADAP KONTRAKTILITAS OTOT POLOS VESIKA URINARIA GUINEA PIG IN VITRO
Laporan penelitian sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar SARJANA KEDOKTERAN
Muhamad Ichsan Pribadi NIM:110103000076
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN DOKTER FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS ISLAM NEGERI SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA 1434 H/2013
i
ii
iii
iv
KATA PENGANTAR Assalamu’alaikum wr.wb Puji serta syukur peneliti panjatkan kepada Allah SWT karena atas rahmat dan hidayah-Nya sehingga peneliti dapat menyelesaikan penelitian ini dengan baik. Shalawat serta salam semoga selalu tercurahkan kepada Nabi Muhammad SAW beserta keluarga dan sahabatnya. Judul penelitian ini adalah “Pengaruh Ekstrak Akar Ginseng Jawa (Talinum paniculatum) terhadap Kontraktilitas Otot Polos Vesika Urinaria Guinea Pig In Vitro”. Peneliti ingin mengucapkan terima kasih dan penghargaan kepada: 1. Prof. Dr. (hc). dr. M. K. Tadjudin, Sp.And. selaku DEKAN Fakultas Kedokteran dam Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta 2. dr. Witri Ardini, M.Gizi., Sp.GK. selaku Kepala Program Studi Pendidikan Dokter FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 3. dr. Nouval Shahab, Sp.U., Ph.D., FICS., FACS. dan Ibu Endah Wulandari, M.Biomed. selaku dosen pembimbing yang telah membantu, menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran untuk membimbing peneliti dari awal hingga akhir penelitian ini. 4. Seluruh dosen dan segenap Civitas Akademika UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang telah memberikan ilmu kepada peneliti. 5. Ayahanda dr. Panji Sulaksono, SpAn. dan Ibunda Ida fitriani SE yang memberikan dukungan moral dan material. 6. Adik kandung saya, Inayah Mutiara Pertiwi yang memberikan dukungan semangat dan doa. 7. Teman-teman kelompok penelitian yaitu Erwanda Desire Budiman, Muhammad Hafif kusasi, Muhammad Hazmi Anzhari dan Yesinta Diandra yang berjuang bersama-sama untuk menyelesaikan penelitian ini. 8. Pihak LIPI dan BALITRO yang telah membatu peneliti dalam pembuatan ekstrak.
v
9. Teman-teman PSPD 2010 yang telah banyak sekali memberikan ilmu dan pengalaman selama 3 tahun menjalani preklinik. 10. Cika Irlia Azzahra yang telah memberikan dukungan semangat dan doa dalam melaksanakan penelitian ini. 11. Teman-teman PSPD 2008, 2009, 2011, dan 2012 yang selalu memberi dukungan kepada peneliti. 12. Mba Lilis dan Mba Ai yang senantiasa membantu di Laboratorium Multiguna dan Laboratorium Biokimia FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 13. Bapak-bapak Satpam dan OB FKIK UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang senantiasa membuka pagar dan menunggu peneliti saat penelitian di hari libur.
Peneliti mengharapkan saran dan kritik yang membangun bagi peneliti. Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.
Ciputat, 10 September 2013
Peneliti
vi
ABSTRAK Muhamad Ichsan Pribadi. Program Studi Pendidikan Dokter. Pengaruh Ekstrak Akar Ginseng Jawa (Talinum paniculatum) terhadap Kontraktilitas Otos Polos Vesika Urinaria Guinea Pig In Vitro. 2013 Talinum paniculatum (ginseng jawa) merupakan tanaman sudah dikenal di Jawa dan digunakan sebagai tanaman obat untuk penyakit disfungsi seksual. Sampai saat ini belum pernah diteliti efek ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap otot polos kandung kemih. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap kontraktilitas otot polos kandung kemih guinea pig in vitro dengan menggunakan organ bath. Efek ekstrak akar Talinum paniculatum dengan konsentrasi 0,001%, 0,01%, 0,1%, 1%, dan 10% dapat merelaksasi otot polos kandung kamih guinea pig yang telah diinduksi kontrasi dengan carbachol secara signifikan (p<0,05). Perlu diteliti lebih lanjut mekanisme kerjanya. Kata kunci: ekstrak akar Talinum paniculatum, kontraksi otot polos, organ bath, vesika urinaria
ABSTRACT Muhamad Ichsan Pribadi. Medical Education Study Program. Effect of Talinum Paniculatum on the Smooth Muscle Contractility of the Guinea Pig Vesica Urinaria In Vitro. 2013. Talinum paniculatum (Java ginseng) is a well-known plant in Java, which is used as a medicinal plant for sexual dysfunction disease. The effects of Talinum paniculatum roots extract on detrusor smooth muscle contraction have not been reported recently. The aim of this study was to know the effect of Talinum paniculatum root extract on guinea pig detrusor smooth muscle contractility in vitro using the organ bath. The results of this study demonstrated that Talinum Paniculatum root extract relaxed detrusor smooth muscle contraction induced by carbachol with a concentration 10-6 %, 10-5 %, 10-4 %, 10-3 % 10-2 % significantly (p <0.05 ). Further study is required to know the underlying mechanisms. Keywords: Talinum paniculatum roots extract, smooth muscle contraction, vesica urinaria, organ bath.
vii
DAFTAR ISI JUDUL ......................................................................................................................... i LEMBAR PERNYATAAN ....................................................................................... ii LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING ......................................................... iii LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................................iv KATA PENGANTAR .................................................................................................v ABSTRAK ................................................................................................................ vii DAFTAR ISI ............................................................................................................ viii DAFTAR GAMBAR ...................................................................................................x DAFTAR TABEL .................................................................................................... xii DAFTAR SINGKATAN ......................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................ xiv BAB I ............................................................................................................................1 PENDAHULUAN ........................................................................................................1 1.1 Latar Belakang .....................................................................................................1 1.2 Rumusan Masalah ................................................................................................2 1.3 Hipotesis ..............................................................................................................2 1.4 Tujuan Penelitian ................................................................................................ 2 1.4.1 Tujuan Umum .................................................................................................. 2 1.4.2 TujuanKhusus .................................................................................................. 2 1.5 Manfaat Penelitian .............................................................................................. 2 BAB II ..........................................................................................................................4 TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................................................4 2.1 Talinum paniculatum ...........................................................................................4 2.2 Vesika Urinaria................................................................................................... 5 2.3 Anatomi Vesika Urinaria.................................................................................... 6 2.4 Histologi Vesika Urinaria ................................................................................... 8 2.5 Fisiologi Vesika Urinaria ................................................................................... 9 2.6 Otot Polos ......................................................................................................... 10 2.7 Mekanisme Kontraksi dan Relaksasi Otot Polos ............................................. 10 2.8 Organ Bath ....................................................................................................... 11 2.9 Kerangka Teori ................................................................................................. 13 2.10 Kerangka Konsep ........................................................................................... 14 2.11 Definisi Operasional ....................................................................................... 14
viii
BAB III ...................................................................................................................... 15 METODOLOGI PENELITIAN ............................................................................. 15 3.1 Desain Penelitian .............................................................................................. 15 3.2 Waktu dan Tempat Penelitian .......................................................................... 15 3.3 Alat dan Bahan Penelitian ................................................................................ 15 3.4Identifikasi Variabel .......................................................................................... 16 3.4.1Variabel Bebas ............................................................................................ 16 3.4.2 Variabel Terikat ......................................................................................... 16 3.5 Alur Penelitian .................................................................................................. 16 3.6 Cara Kerja Penelitian ........................................................................................ 16 3.6.1 Tahap Persiapan ......................................................................................... 16 3.6.1.1 Persiapan Ekstrak Talinum Paniculatum ............................................... 16 3.6.1.2 Persiapan Strip Otot Polos ...................................................................... 17 3.6.2 Tahap Penyiapan Kontraktilitas ................................................................. 18 3.7Analisis Data ..................................................................................................... 19 BAB IV ...................................................................................................................... 20 HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................ 20 4.1 Induksi Kontraksi Otot Polos Vesika Urinaria Oleh Carbachol ....................... 20 4.2 Efek Kontraktilitas Otot Polos Pada Pemberian Ekstrak ................................ 20 BAB V........................................................................................................................ 24 SIMPULAN DAN SARAN ...................................................................................... 24 5.1 Kesimpulan ....................................................................................................... 24 5.2 Saran ................................................................................................................. 24 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 25 LAMPIRAN .............................................................................................................. 27
ix
DAFTAR GAMBAR Gambar 2.1 Tanaman Talinum paniculatum................................................................ 5 Gambar 2.2 Vesika urinaria laki-laki tampak lateral ................................................... 7 Gambar 2.3 Vesika urinaria perempuan tampak lateral ............................................... 7 Gambar 2.4. Histologi dinding vesika urinaria. ........................................................... 8 Gambar 2.5 Vesika urinaria laki-laki ........................................................................... 9 Gambar 2.6. Vesika urinaria perempuan...................................................................... 9 Gambar 2.7 Mekanisme kontraksi otot polos ............................................................ 11 Gambar 3.1 Skema organ bath .................................................................................. 17 Gambar 3.2 Skema kontraksi otot polos pada pemberian charbacol......................... 18 Gambar 3.3 Skema kontraksi otot polos pada pemberian ekstrak T.paniculatum ..... 19 Gambar 4.2 Kontraksi otot polos vesika urinaria pada pemberian T.paniculatum .... 21 Gambar 4.3 Perubahan kontraktilitas otot polos pada pemberian DMSO ................. 21 Gambar 4.4 Grafik persentase kontraktilitas otot polos DMSO dan T.paniculatum 22 Gambar 6.1. Surat hasil determinasi tumbuhan ......................................................... 27 Gambar 6.2. Surat pengujian ekstrak ......................................................................... 28 Gambar 6.3. Alur pembuatan ekstrak ........................................................................ 29 Gambar 6.4. Proses mematikan guinea pig ................................................................ 34 Gambar 6.5. Proses pembedahan guinea pig. ............................................................ 34 Gambar 6.6. Vesika urinaria yang telah diambil dari guinea pig .............................. 34 Gambar 6.7. Alat-alat untuk membuat strip otot polos .............................................. 34 Gambar 6.8. Proses pemotongan strip otot polos ....................................................... 34 Gambar 6.9. Proses pengikatan strip otot polos ......................................................... 34 Gambar 6.10. Organ bath .......................................................................................... 35 Gambar 6.11. Water jacketed chamber ...................................................................... 35 Gambar 6.12. Water heater ........................................................................................ 35 Gambar 6.13. Proses penggantungan strip otot polos ................................................ 35
x
Gambar 6.14. Proses pemberian tegangan pada strip otot polos................................ 36 Gambar 6.15. Ekstrak akar Talinum paniculatum ..................................................... 36 Gambar 6.16. Proses pengujian ekstrak akar Talinum paniculatum .......................... 36 Gambar 6.17. Proses perekaman kontraktilitas otot polos pada software Labchart . 36
xi
DAFTAR TABEL Tabel 3.1 Komposisi Larutan Krebs Henseleit .......................................................... 16 Tabel 6.1 Persentase Kontraksi Strip Otot Polos dengan Pemberian DMSO ............ 30 Tabel 6.2. Persentase Kontraksi Otot Polos dengan Pemberian T. paniculatum ...... 30 Tabel.6.3. Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan T. paniculatum 10-6% .. 31 Tabel 6.4 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan T. paniculatum 10-5% .... 31 Tabel 6.5 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan T. paniculatum 10-4% .... 31 Tabel 6.6 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan T. paniculatum 10-3% .... 31 Tabel 6.7 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan T. paniculatum 10-2% .... 31 Tabel 6.8 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan DMSO pertama ............. 32 Tabel 6.9 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan DMSO kedua ................ 32 Tabel 6.10 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan DMSO ketiga .............. 32 Tabel 6.11 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan DMSO keempat .......... 32 Tabel 6.12 Uji normalitas data kontraksi otot polos dengan DMSO kelima ............. 32 Tabel 6.13 Uji independent samples t-Test ................................................................ 33
xii
DAFTAR SINGKATAN Ach ATP Ca2+ cAMP DAG DMSO IP3 IP3R MLCK MLCP NO NOS PIP2 PKC PLC RyR µM µL
: Acetilcoline : Adenosin trifosfatase : Calcium : Cyclic adenosin monophospate : Diacylglycerol : Dimethyl sulfoxide : Inositol triphosphate : Inositol triphosphate receptor : Myosin light chain kinase : Myosin light chain phosphatase : Nitrit oxide : Nitrit oxide syntase : Phosphoinositide : Protein kinase C : Phospholipase-C : Reseptor ryanodine : Mikro Molar : Mikro Liter
xiii
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Surat Hasil Determinasi Tumbuhan ....................................................... 27 Lampiran 2 Surat Pengujian Ekstrak ......................................................................... 28 Lampiran 3 Alur Pembuatan Ekstrak ......................................................................... 29 Lampiran 4 Persentase Kontraksi Strip Otot Polos dengan Pemberian DMSO......... 30 Lampiran 5 Persentase Kontraksi Otot Polos dengan Pemberian T. paniculatum..... 30 Lampiran 6 Uji Normalitas Data ................................................................................ 31 Lampiran 7 Uji Independent Samples t Test .............................................................. 33 Lampiran 8 Gambar proses penelitian ....................................................................... 34 Lampiran 9 Riwayat penulis ...................................................................................... 37
xiv
BAB 1 PENDAHULUAN 1.1
LatarBelakang Penggunaan tanaman sebagai obat sudah dilakukan sejak adanya peradaban
manusia. Di hutan tropis Indonesia terdapat 30.000 spesies tanaman, 9.600 spesies berkhasiat sebagai tanaman obat dan baru 200 spesies yang telah dimanfaatkan sebagai bahan baku pada industri obat internasional.1 Salah satu tamanan obat yang beredar di Indonesia khususnya di Pulau Jawa adalah ginseng Jawa dengan nama latin Talinum paniculatum.2 Akar dari Talinum paniculatum saat ini diduga memiliki khasiat untuk mengobati atau mengatasi enuresis, disfungsi seksual, stamina menurun, batuk, TB paru, haid tidak teratur, keputihan dan produksi ASI yang sedikit.3 Tanaman Talinum paniculatum saat ini diketahui memiliki kandungan kimia antara lain saponin, triterpen/sterol, polifenol.4 Pada penelitian sebelumnya diketahui bahwa saponin memiliki efek relaksasi pada otot polos vesika urinaria kelinci,uretra pars prostatika kelinci,5corpus cavernosum kelinci,6 dan bronkus manusia.7 Vesika urinaria merupakan bagian dari saluran kemih bawah yang berfungsi untuk menampung urin sebelum berkemih. Dinding dari vesika urinaria memiliki lapisan otot polos sehingga dapat berkontraksi.8 Pada penelitian in vitro otot polos vesika urinaria guinea pig sering digunakan sebagai bahan uji. Namun sampai saat ini belum terdapat penelitian yang membuktikan bahwa ekstrak
akar Talinum paniculatum dapat
menurunkan kontraktilitas pada otot polos. Oleh karena itu, peneliti ingin mengetahui pengaruh ekstrak akar Talinum Paniculatum pada kontraktilitas otot polos pada vesika urinaria guinea pig secara in vitro dengan menggunakan organ bath.
1
2
1.2
Rumusan Masalah Bagaimana pengaruh ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap kontraktilitas otot
polos vesika urinaria guinea pig ?
1.3
Hipotesis Hipotesis penelitian ini adalah ekstrak akar Talinum paniculatum dapat
menurunkan kontraktilitas otot polos vesika urinaria guinea pig
1.4
Tujuan
1.4.1 Umum Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap kontraktilitas otot polos vesika urinaria secara in vitro
1.4.2
Khusus
Menilai pengaruh ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap kontraktilitas otot polos vesika urinaria.
Mengetahui kadar ekstrak ekstrak ginseng yang memiliki pengaruh terhadap kontraktilitas otot polos vesika urinaria secara fisiologis.
1.5
Manfaat Manfaat yang diperoleh dari penelitian ini adalah:
Bagi peneliti Sebagai syarat kelulusan dari pendidikan pre-klinik Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
Bagi institusi Melaksanakan salah satu Tri Darma Perguruan Tinggi yaitu meningkatkan aspek penelitian.
Bagi keilmuan Mengetahui khasiat dari pengobatan-pengobatan tradisional
di
Indonesia
khususnya yang berasal dari akar Talinum paniculatum yang teruji secara klinis (in
3
vitro) dengan mengetahui pengaruhnya terhadap kontraktilitas otot polos vesika urinaria.
Bagi sosial Memberi informasi pada masyarakat tentang peran Talinum paniculatum terhadap penyakit-penyakit gangguan berkemih.
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1. Talinum paniculatum Talinum paniculatum merupakan salah satu tanaman yang digunakan sebagai bahan baku obat, tanaman hias dan sayuran yang cukup populer dan potensial untuk dibudidayakan. Tanaman ini diperkenalkan dari Suriname ke Pulau Jawa (Kebun Raya Bogor) pada tahun 1915. Tanaman ini berasal dari Amerika Tropis.4 Talinum paniculatum di Jawa dapat tumbuh pada ketinggian 5 – 1.250 m dpl merupakan tanaman menahun, tumbuh tegak, tidak bercabang. Tinggi tanaman 30 – 60 cm, batang bercabang di bagian bawah dan mengeras di bagian pangkal. Daun tanaman ini berbentuk majemuk, berbentuk bulat telur, menjari dengan 5 helai, 3 helai di ujung lebih besar, bagian ujung meruncing, agak melengkung, bergerigi kecil, tinggi 30 – 60 cm, lebar 1,5 - 5 cm. Pada tahun pertama umumnya memiliki satu daun, dan setiap tahun bertambah hingga tahun keenam. Perbungaan secara majemuk, bunga berbentuk payung yang mekar disore hari, berwarna merah keunguan, memiliki 5 kelopak dan 5 benang sari. Buah tanaman ini kecil dan berbentuk bulat gepeng, dengan diameter 3 mm, bijinya kecil dan hitam. Ketika sudah matang, warna menjadi merah terutama pada musim gugur.3 Reproduksi Talinum paniculatum dapat secara generatif dengan biji dan vegetatif dengan stek batang.4 Akar pada Talinum paniculatum bercabang mulai dari bagian tengah. Simplisia akar berbentuk menyerupai gulungan atau bentuk silindris, panjang hingga 20 cm, diameter hingga 3 cm, warna bagian luar kuning keabu-abuan, kasar, memiliki dua hingga tiga cabang, rhizome panjang 1-4 cm dengan diameter 0,3-1,5 cm agak melengkung.3 Tata nama taksonomi dari Talinum paniculatum adalah: Kingdom
: Plantae
Divisi
: Magnoliophyta
Kelas
: Magnoliopsida
Ordo
: Caryophyllidae
Famili
: Portulacaceae
Genus
: Talinum
Spesies
: Talinum paniculatum2
4
5
Bagian dari tanaman Talinum paniculatum yang sering digunakan sebagai bahan baku obat adalah akar. Potongan akar Talinum paniculatum dikeringkan. Senyawa kimia utama pada akar tanaman Talinum paniculatum adalah ginsenosida.3 Ginsenosida merupakan saponin dan dapat dibagi lagi menjadi dua kelas. Kelas protopanaksatriol terdiri dari Rg1, Rg2, Rf dan Re. Kelas protopanaksatriol yang terdiri dari Rc, Rd, Rb1, Rb2 dan Rb3. Talinum paniculatum juga mengandung saponin lain, polisakarida, asam amino (terutama glutamin dan arginin), minyak atsiri. Tiga hidrokarbon Rh1, Rh2, Rg3. Ginsenosida merupakan produk dalam tubuh diubah oleh bakteri usus deglikosida dan esterifikasi asam lemak menjadi metabolit aktif.3 Akar serabut Talinum paniculatum memiliki nilai total ginsenosida yang lebih tinggi dibandingkan akar utama, akar utama dan lateral adalah bagian tanaman yang lebih banyak dipilih untuk pengobatan.3 Ginsenosida Rb1 dan Rg1 meningkatkan sintesis nitrit oksida dari otot polos endotelium vesika urinaria kelinci, uretra pars prostatika kelinci, corpus cavernosum kelinci, bronkus manusia, ginjal, dan Jantung.3 Oleh karena itu Talinum paniculatumterapi alternatif untuk benign prostatic hyperplasia (BPH)/ gejala saluran kemih bawah (LUTS), asma dan hipertensi.3
Gambar 2.1 Tanaman Talinum paniculatum19
2.2
Vesika urinaria Vesika urinaria merupakan organ tempat penampung urin yang berasal dari ginjal
melalui ureter. Kapasitas vesika urinaria pada orang dewasa normal dalam menampung urin sekitar 400-500 mL. Vesika urinaria akan membesar ke arah rongga abdomen dan dapat lebih tinggi dari simfisis pubis ketika rongga vesika urinaria terisi penuh oleh urin. 8
5
6
Ketika urin dikeluarkan menuju uretra, maka urin di dalam rongga vesika urinaria akan berkurang dan lama-kelamaan vesika urinaria akan kolaps. Vesika urinaria yang terisi penuh oleh urin dapat dipalpasi dan diperkusi. Jika terjadi retensi urin, vesika urinaria akan terdistensi berlebihan sehingga akan terlihat menonjol.9
2.3
Anatomi Vesika Urinaria Vesika urinaria terletak di posterior simfisis pubis di dalam rongga pelvis.Vesika
urinaria pada orang dewasa dapat menampung urin kurang lebih 500 ml. Vesika urinaria pada laki-laki terletak di anterior dari rektum dan bagian posterior vesika urinaria laki-laki terdapat vesika seminalis dan vas deferens. Vesika urinaria perempuan terletak di bagian anterior dari vagina dan inferior dari uterus.10 Vesika urinaria terdiri dari bagian apeks, basis dan fasies superior. Apeks vesika terletak di posterior pinggir atas simfisis pubis yang dihubungkan dengan umbilikus melalui ligamentum umbilikal medianum. Fasies superior vesika berbatasan dengan peritoneum, ileum dan kolon sigmoid. Collum vesika yang terletak pada fasies superior prostat yang berhubungan dengan ligamentum puboprostatikum pada laki-laki dan ligamentum pubovesika pada perempuan. Tunika mukosa vesika urinaria berlipat-lipat pada saat tidak terisi urin atau kosong, namun lipatan-lipatan tersebut akan menghilang bila terisi penuh oleh urin. Daerah tunika mukosa di permukaan basis vesika urinaria dinamakan trigonum vesika liutaudi. Sudut-sudut superior trigonum ini ialah tempat muara ureter dan sudut inferiornya merupakan ostium uretra internum.11 Untuk mengetahui lebih jelas sintopi dari vesika urinaria dalam ringga pelvis lakilaki dan perempuan dapat dilihat pada gambar 2.2 dan 2.3.
6
7
Gambar 2.2 Vesika urinaria laki-laki tampak lateral.12
Gambar 2.3 Vesika urinaria perempuan tampak lateral.12
Vesika urinaria mendapat perdarahan dari arteri vesikalis superior dan inferior yang merupakan cabang dari arteria iliaka interna. Kemudian pembuluh vena vesika urinaria membentuk pleksus venosus vesikalis, lalu di bawahnya terhubung dengan pleksus venosus prostatikus. Setelah itu bermuara ke vena iliaka eksterna. Pembuluh limfe vesika urinaria akan bermuara ke nodi iliaka interni dan eksterni.11 Persarafan vesika urinaria berasal dari pleksus hipogastrikus inferior. Serabut postganglionik simpatis berasal dari ganglion lumbalis pertama dan kedua lalu berjalan ke
7
8
vesika urinaria melalui pleksus hipogastrikus. Sedangkan serabut preganglionik parasimpatikus yang terletak di nervi splanchici pelciki berasal dari nervus sakralis kedua, ketiga dan ke-empat, berjalan melalui nervus hipogastrikus menuju ke vesika urinaria dan bersinaps dengan postganglionic neuron. Saraf simpatis menghambat kontraksi muskulus detrusor vesika dan merangsang penutupan muskulus spingter vesika. Saraf parasimpatis merangsang kontraksi muskulus detrusor vesika dan menghambat kontraksi muskulus sfingter vesika.10
2.4
Histologi Vesika Urinaria Dinding vesika urinaria baik pada laki-laki dan perempuan memiliki tiga lapisan
yaitu lapisan mukosa, muskularis dan adventisia (jaringan ikat). Lapisan paling dalam dinding vesika urinaria adalah lapisan mukosa yang terdiri dari epitel transisional dan lamina propria. Lapisan mukosa dapat berubah bentuk menjadi lipatan-lipatan (rugae), sehingga dinding vesika urinaria dapat meluas atau meregang ketika rongga vesika urinaria terisi urin.9 Lapisan terdalam kedua adalah lapisan muskularis atau otot detrusor. Lapisan ini terdiri dari tiga lapis serat otot polos yaitu lapisan otot longitudinal dalam, sirkular tengah, dan longitudinal luar. Lapisan terluar dari bagian superior vesika urinaria terdiri dari jaringan ikat serosa yang membentuk lapisan viseral dari peritoneum. Lapisan terluar dari bagian inferior dan posterior vesika urinaria terdiri dari jaringan ikat areolar dan membentuk lapisan adventisia. Pada lapisan serosa atau disebut juga urotelium/ suburotelium dapat berfungsi sebagai sensorik terhadap sensasi.14
Gambar 2.4. Histologi dinding vesika urinaria.21
8
9
2.5
Fisiologi Vesika Urinaria Bila volume urin mencapai kurang lebih 300 ml, reseptor regangan di dalam
dinding vesika urinaria terangsang dan impuls tersebut diteruskan ke susunan saraf pusat. Sebagian besar impuls naik ke atas melalui nervi splanchnici pelvici dan masuk ke medulla spinalis segmen sakralis 2, 3 dan 4 medulla spinalis. Sebagian impuls aferen berjalan bersama dengan saraf simpatis yang membentuk pleksus hipogastrikus dan masuk segmen lumbalis 1 dan 2 medulla spinalis.10 Impuls eferen parasimpatis meninggalkan medulla spinalis dari segmen sakralis 2,3 dan 4 lalu menuju ke serabut preganglionik parasimpatis melalui nervi splanchnici pelvici dan pleksus dan pleksus hipogastrikus inferior ke dinding vesika urinaria, tempat saraf-saraf tersebut bersinaps dengan neuron postganglionik. Melalui lintasan saraf ini, otot polos dinding vesika urinaria berkontraksi dan muskulus spingter vesika dibuat relaksasi. Impuls eferen juga berjalan ke muskulus spingter uretra melalui nervus pudendus (S2, S3 dan 4), dan menyebabkan relaksasi.15
Gambar 2.5. Vesika urinaria laki-laki.25
Gambar 2.6. Vesika urinaria perempuan.25
10
2.6
Otot Polos Otot polos terdiri dari tiga filamen, yaitu filament miosin (tebal), filamen aktin
(tipis) yang memiliki tropomiosin dan sedikit troponin, dan filamen intermediet.27 Pada otot polos gambaran serat-lintang tidak terdapat karena susunan dari filamen-filamennya tidak teratur. Hal tersebut berbeda dari otot rangka dan jantung. Kontraksi pada otot polos yang bersifat tonik bergantung dari pergeseran filamen aktin dan miosin II satu sama lain. 9
Retikulum sarkoplasma pada otot polos tidak dapat berkembang dengan baik dan jumlah dari mitokondria hanya sedikit, sehingga untuk memenuhi kebutuhan metabolismenya kebanyakan dari proses glikolisis.13 Otot polos di dalam tubuh memiliki struktur, fungsi dan letak yang berbedabeda.Oleh karena itu terdapat beberapa jenis otot polos. Jenis yang pertama adalah otot polos viseral atau unitary berbentuk seperti lembaran yang luas, mempunyai banyak jembatan taut taut-celah yang berresistensi rendah dalam menghubungkan tiap sel otot. Jembatan
taut-celah
tersebut
dapat
berfungsi
sebagai
sinsitium
untuk
dapat
menyebarluaskan kontraksi pada otot polos viseral.14
2.7
Mekanisme kontraksi dan relaksasi otot polos Persarafan otot polos kandung kemih mendapatkan berasal dari inervasi saraf
parasimpatis postganglion. Saraf parasimpatis terminal mensekresi asetilkolin yang berikatan dengan reseptornya yaitu M3. Kemudian reseptor M3 akan mengaktifkan protein G. Setelah itu protein G mengaktifkan enzim phospholipase-C (PLC). PLC menghasilkan inositol triphosphate (IP3) dan diasilgliserol (DAG) dari membran phosphoinositides (PIP2).Kemudian IP3 dapat mengeluarkan kalsium dari tempat penyimpanan di dalam retikulum sarkoplasma intraseluler, sedangkan DAG memasukan kalsium melalui nifedipine-sensitive L-type Ca2+ channels dan juga dapat mengaktifkan protein kinaseC.Selain itukalsium yang masuk dari ekstrasel dapat menginduksi pengeluaran kalsium dari retikulum sarkoplasma melalui reseptor rianodin.14 Selain itu ATP melalui reseptor P2X purinergik yang merupakan non selective cation channels pada membrane, hal ini menyebabkan depolarisasi sehingga voltage sensitive Ca2+ channels terbuka. Hal tersebut menyebabkan lebih banyak lagi kalsium yang akan ada di sitoplasma dan merangsang otot polos untuk berkontraksi.15
11
Peningkatan jumlah kalsium di dalam sel akan berikatan dengan calmodulin menjadi Ca2+ calmodulin complex dan mengaktivasi MLCK yang merupakan enzim spesifik untuk memfosforilasi MLC menjadi MLC terfosforilasi yang aktif. Kemudian MLCp dapat mengaktivasi miosin ATPase. Sehingga miosin dapat berinteraksi dengan aktin dan menimbulkan kontraksi.16 Protein
G
mengaktivasi
Rho.Selanjutnya
Rho
dapat
bekerja
sebagai
Ca2+sensitization.Kemudian Ca2+ sensitization dapat menghambat MLCP. MLCP menjadi tidak dapat mendefosforilasi MLC terfosforilasi, sehingga MLC terfosforilasi tidak dapat menjadi MLC. Oleh karena itu teraktivasinya Rho secara tidak langsung mendukung proses kontraksi otot polos.16 Saraf simpatis terminal mensekresi NE yang berikatan dengan reseptornya yaitu M2. Reseptor M2 berikatan dengan protein Gi.17
Gambar 2.7. Mekanisme kontraksi otot polos.21
2.8 Organ bath Organ bath ialah seperangkat alat yang dapat digunakan untuk meneliti jaringan atau organ secara in vitro. Organ yang diteliti terlebih dahulu dibuat menjadi strip jaringan. Lapisan mukosa dan serosa dari jaringan otot dihilangkan saat persiapan strip jaringan. Selanjutnya strip jaringan akan direndam dalam larutan fisiologis dengan terikat pada pengaitnya ke tranduser. Sisi lain dari otot polos lainnya terikat pada arah yang berlawanan untuk menilai kontraksi isotonik. Berbeda halnya untuk menilai kontraksi isometrik yang
12
menggunakan transduser isometric yang dapat menilai perubahan tegangan otot tanpa pemendekan serat otot.15 Kemudian strip otot polos direndam dalam larutan fisiologis berupa laruan krebshenseleit’s pada suhu 37oC dan diberikan saturasi oksigen (95% O2 + 5% CO2) agar pH tetap pada nilai 7,5. Strip jaringan direndam selama satu jam yang diregangkan sebesar 0,5g . Kemudian itu strip jaringan otot akan diberikan stimulasi agonis atau dapat diberikan stimulasi elektrik untuk melihat puncak kontraksinya. Stimulasi agonis yang diberikan ke dalam organ bath adalah asetilkolin, karbakol atau pun mediator lainnya sampai kontraksi maksimal tercapai.18
13
2.9 KerangkaTeori
14
2.10 Kerangka konsep
2.11 Definisi Operasional No.
Variabel
Definisi
Alat Ukur
Operasional 1.
Kontraksi strip
Kemampuan
otot strip otot polos
polos vesika vesika
2.
Transducer
Hasil
Skala
Ukur
pengukuran
Tegangan
Numerik
otot (gram)
urinaria
urinaria
untuk memendek
Kadar
Persentase
larutan
ekstrak
ekstrak
Talinum
daun
paniculatum
Talinum
yang dilarutkan
persen akar
paniculatum dalam DMSO
Numerik
BAB III METODELOGI PENELITIAN 3.1
Desain Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental pada strip otot polos vesika
urinaria guinea pig yang diberikan perlakuan dengan ekstrak akar Talinum paniculatum secara in vitro dengan menggunakan alat organ bath untuk mengetahui pengaruh ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap kontraktilitas otot polos vesika urinaria guinea pig. 3.2
Waktu dan Tempat Penelitian Penelitianini akan dilakukan pada bulan Januari s.d Juli 2013 di Ruang Multiguna
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Proposal penelitian telah diajukan ke Komite Etik Penelitian Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. 3.3
Alat dan Bahan Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah instrumen organ bath, water
heater, papan bedah, timbangan, sendok, cawan petri, gunting jaringan, pinset mikro, kacamata pembesar, kulkas, laptop, gunting dan benang. Sedangkan bahan-bahan yang digunakan
penelitian ini adalah ekstrak akar
Talinum paniculatum, strip otot polos vesika urinaria, sarung tangan kapas, tissue, carbachol, DMSO (dimetil sulfoksida), akuades, alkohol, gas karbogen (O2 97% dan CO2 3%), dan larutan Krebs-Henseleit. Larutan Krebs-Hanseleit dibuat dalam volume 500cc yang terdiri dari komposisi seperti pada tabel 3.1. Tabel 3.1 Komposisi Larutan Krebs Henseleit No.
Komposisi
Molaritas
1.
NaCl
121,6 mmol/L
2.
KCl
4,7 mmol/L
3.
NaHCO3
15,4 mmol/L
4.
KH2PO4
1,2 mmol/L
5.
MgCl2
1,2 mmol/L
6.
D-(+)-Glucose
11,5 mmol/L
7.
CaCl2
2,5 mmol/L
15
16
3.4
Identifikasi variabel
1.4.1 Variabel Bebas Variabel bebas pada penelitian ini adalah kadar larutan ekstrak akar Talinum paniculatum. 1.4.2 Variabel terikat Variabel terikat pada penelitian ini adalah persentase efek kontraksi dan relaksasi otot polos verika urinaria guinea pig. 1.5
Alur Penelitian Persiapan ekstrak akar Talinum paniculatum
Persiapan alat dan bahan penelitian
Pengambilan organ kandung kemih dari guinea pig
Observasi dan pengukuran kontraksi otot polos
Pengujian kontraktilitas strip otot polos dengan organ bath
Persiapan strip otot polos vesika urinaria Guinea pig
Pengolahan data
3.6
Cara Kerja Penelitian
3.6.1 Tahap Persiapan 3.6.1.1 Persiapan Ekstrak akar Talinum paniculatum Bahan yang diuji pada penelitian ini adalah larutan ekstrak akar Talinum paniculatum. Akar Talinum paniculatum didapatkan dari Petak Pamer Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik (BALITRO). Kemudian akar Talinum paniculatum dideterminasi di Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI). Selanjutnya akar Talinum paniculatum diekstrak di BALITRO. Proses ekstrak dapat dilihat dalam lampiran 3. Sebelum pengujian dilakukan, ekstrak yang berupa stock solution dilarutkan dengan DMSO menjadi berbagai kadar yaitu 10%, 1%, 0.1%, 0.01%, dan 0.001%
17
3.6.1.2 Persiapan Strip Otot Polos Hewan coba pada penelitian ini adalah guinea pig 2 ekor jantan dan 3 ekor betina dengan berat badan 500 sampai 700 gram dan usia 6 bulan. Kemudian peneliti menyiapkan cawan diseksi yang diisi dengan larutan Krebs-Henseleit bersuhu 4oC yang diberikan gas karbogen. Selanjutnya proses mematikan hewan coba yaitu dengan cara membenturkan kepala guinea pig pada benda keras dan menyembelihnya secepat mungkin. Kemudian peneliti mengambil vesika urinarianya dengan prinsip menghindari peregangan pada jaringan. Pengambilan vesika urinaria dengan mendiseksi bagian abdomen bawah, kemudian memotong jaringan-jaringan ikat atau ligamen-ligamen pada vesika urinaria. Kemudian vesika urinaria dipindahkan ke dalam cawan diseksi yang sudah dipersiapkan lalu dipotong pada bagian anterolateral dan dibentuk strip sebanyak 4 buah dengan ukuran 0,5cm x 1cm. Selanjutnya lapisan mukosa dan serosa yang melapisi lapisan otot polos dibuang dengan menggunakan gunting jaringan dan dibantu dengan kaca pembesar. Kemudian strip otot polos yang telah disiapkan diikat dengan benang pada kedua sisinya. Kemudian salah satu ujung benang tersebut digantung pada transducer alat organ bath dan ujung lainnya diselipkan antara saluran keluar sehingga preparat tersebut dapat ditegangkan dan tidak menempel pada dinding chamber organ bath. Strip otot polos yang telah digantung, lalu direndam dalam larutan Krebs-Hanseleit dengan suhu 37oC dengan diberikan gas karbogen (O2 97% dan CO2 3%) pada chamber. ditunggu selama 60 menit dengan resting tension atau tegangan istirahat sebesar 0,5 gram. Transducer pada organ bath tersebut dihubungkan dengan laptop yang memiliki software Labchart untuk membaca kontraktilitas strip otot polos tersebut.
Gambar 3.1.Skema organ bath.
18
3.6.2 Tahap Pengujian Kontraktilitas Stelah strip otot polos diistirahatkan selama 60 menit diinduksi dengan pemberian charbacol 1µM dan kembali diistirahatkan selama 60 menit dalam larutan Krebs-Henseleit yang baru. Kemudian strip otot polos kembali diberikan carbachol dengan konsentrasi 0,01µM, 0,1µM, 1µM, 10µM, dan 100µM secara kumulatif. Selanjutnya peneliti melihat dan menganalisa hasil rekaman kontraktilitas strip otot polos yang diinduksi dengan carbachol pada komputer yang memiliki software Labchart.
Carbachol
Carbachol 0,01 µM
0,1 µM
1 µM
10 µM
100 µM
Gambar 3.2.Skema kontraksi otot polos pada pemberian carbachol.
Setelah otot polos diistirahatkan selama 60 menit, diinduksi kembali dengan carbachol 1µM. Ketika kontraksi otot polos telah stabil, ekstrak akar Talinum paniculatum dimasukan ke dalam chamber dengan konsentrasi yaitu yaitu 10-6%, 10-5%, 10-4%, 10-3%, dan 10-2% secara kumulatif. Tegangan otot polos akibat pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum dengan berbagai konsentrasi tersebut dapat dihitung dalam persentase, relative terhadap tegangan yang dihasilkan dari carbachol 1µM.
GIN 10-6%
19 GIN 10-5%
GIN 10-4% GIN 10-3%
Carbachol 1µM
GIN 10-2%
Carbachol 1 µM
Gambar 3.3. Skema kontraksi otot polos pada pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum
Selain itu, harus dilakukan juga pengujian pelarut ekstrak akar Talinum paniculatum saja yaitu DMSO. Sehingga dapat dianalisa perbandingan antara besar tegangan otot polos yang dihasilkan dari pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum dengan pelarutnya (DMSO).
3.7 Analisis Data Hasil pengujian yang telah terekam di program LabChart v7.1 diambil dan dihitung persentase kontraksinya dengan program Microsoft Office Excel 2007. Efek kontraksi yang diinduksi carbachol dinilai sebagai 100% dari kontraksi otot polos dan kontraksi yang telah diberikan ekstrak akarTalinum paniculatum ataupun DMSO dinilai menurut 100% kontraksi tersebut. Selanjutnya data-data tersebut ditentukan reratanya dan dianalisis dengan program SPSS 16.0. Perbandingan tegangan antara strip otot polos yang diberikan ekstrak akar Talinum paniculatum dan DMSO ditentukan dengan Independent Samples t Test apabila distribusi sampel dan kelompok normal, serta analisis Mann-Whitney apabila distribusi sampel dan kelompok tidak normal.
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1
Induksi Kontraksi Otot Polos Vesika Urinaria olehCarbachol Dalam penelitian ini, menggunakan guinea pig dengan rerata berat sebesar 587,62
± 14,525 gram. Sebelum dilakukan dengan bahan uji, dilakukan pemberian carbachol yaitu suatu senyawa agonis kuat yang berikatan dengan reseptor muskarinik (M3) otot polos vesika urinaria. Kontraksi otot polos vesika urinaria yang diinduksi oleh carbachol dimediasi oleh influks Ca2+ melalui kanal tipe L yang dipengaruhi dengan voltase dan aktivasi rho kinase.21 Efek kontraksi yang diinduksi oleh carbachol 1µM dinilai sebagai 100% kontraksi strip otot polos vesika urinaria dan didapatkan rerata persentase kontraksi otot polos dengan kadar carbachol 0,01µM, 0,1µM, 1µM, 10µM dan 100µM yaitu 0,81 ± 0,47%; 10,56 ± 6,09%; 102,39 ± 5,47%; 112,63 ± 10,55% dan 65,32 ± 9,89%. Terjadi peningkatan kontraksi strip otot polos seiring dengan peningkatan konsentrasi carbachol yang diberikan hingga konsenstrasi mencapai 10 µM. Pada konsentrasi tersebut terjadi efek kontraksi paling maksimal. Strip otot polos yang diberikan carbachol dengan konsentrasi 100 µM hanya dapat menimbulkan efek kontraksi sebesar 65,32%, karena efek yang dihasilkan sudah mencapai titik jenuh. Apabila sudah mencapai titik jenuh, maka kontraksi yang dihasilkan tidak akan melewati besarnya kontraksi saat pemberian konsentrasi maksimal (10 µM). Berdasarkan efek kontraksi yang didapatkan dari pemberian carbachol dengan konsentrasi yang berbeda, sehingga peneliti menggunakan dosis carbachol sebesar 1µM sebgai konsentrasi carbachol yang dapat digunakan untuk menginduksi kontraksi strip otot polos. 4.2
Efek pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum dan DMSO terhadap
kontraktilitas Otot Polos Dalam penelitian ini, DMSO digunakan sebagai pelarut pada larutan ekstrak akar Talinum paniculatum .Oleh sebab itu perlu dibandingkan kontraktilitas yang ditimbulkan oleh ekstrak akar Talinum Paniculatum terhadap efek pelarutnya.
20
21
Efek ekstrak akar Talinum paniculatum pada berbagai kadar (10-6 %, 10-5 %, 10-4 %, 10-3 %, dan 10-2 %) terhadap kontraktilitas strip otot polos vesika urinaria guinea pig, dapat dilihat pada gambar 4.2
Gambar 4.2. Kontraksi otot polos vesika urinaria pada pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum Pada awal pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum dengan kadar 10-6% didapatkan rerata kontraksi strip otot polos sebesar 59,30 ± 6,18 % . Pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum kedua dengan kadar 10-5% didapatkan rerata kontraksi strip otot polos sebesar 43,27 ± 5,24 %. Selanjutnya, pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum ketiga dengan kadar 10-4%, didapatkan rerata kontraksi strip otot polos yaitu 36,28 ± 4,56 %. Pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum yang keempat dengan kadar 10-3 % didapatkan rerata kontraksi strip otot polos sebesar 33,84 ± 4,79 %. Pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum yang terakhir dengan kadar 10-2 % didapatkan rerata kontraksi strip otot polos sebesar 30,66 ± 4,69 %. Perubahan kontraktilitas strip otot polos vesika urinaria guinea pig yang diberikan DMSO (pelarut) untuk masing-masing konsentrasi zat aktif (ekstrak akar Talinum paniculatum) dapat dilihat pada gambar 4.2.
Gambar 4.3. Perubahan kontraktilitas otot polos vesika urinaria guinea pig dengan pemberian DMSO Rerata kontraksi dari strip otot polos vesika urinaria guinea pig yang telah diberikan carbachol dan dilanjutkan dengan pemberian DMSO (pelarut) sebagai kontrol
22
untuk masing-masing zat aktif yaitu 83,86 ± 2,20 %, 59,08 ± 2,67 %, 51,09 ± 2,47 %, 45,18 ± 3,22 %, dan 40,91 ± 3,26 %.
Perbedaan antara rerata persentase kontraksi dari kelompok perlakuan yaitu pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum yang dilarutkan dalam DMSO dengan kelompok kontrol yaitu hanya pemberian DMSO saja dapat dilihat pada gambar 4.4
Persentase perubahan kontraktilitas strip otot polos
Gambar 4.4. Grafik perbandingan persentase kontraktilitas strip otot polos kelompok kontrol (DMSO) dan kelompok perlakuan (ekstrak akar Talinum paniculatum)
Didapatkan nilai p<0,05 yang menunjukan bahwa terdapat perbedaan yang bermakna antara kontraksirelatif otot polos yang diinduksi oleh ekstrak akar Talinum Paniculatum dengan konsentrasi 10-6%, 10-5%, 10-4%, 10-3%, 10-2% dibandingkan dengan kontraksi relatif otot polos yang hanya diinduksi oleh DMSO (pelarut). Hal tersebut membuktikan bahwa pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum dapat memberikan efek relaksasi pada otot polos vesika urinaria dengan konsentrasi larutan dari 10-6% hingga 10-2%.
23
Efek relaksasi yang dihasilkan dari ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap otot polos vesika urinaria guinea pig ini mendukung penelitian sebelumnya oleh Jang HA, dkk menyatakan bahwa kandungan kimia di dalam ekstrak akar Talinum paniculatum dapat meningkatkan produksi NO dan NOS dari endotelium. Kadar NO dan NOS yang tinggi dapat meningkatkan jumlah cGMP. cGMP meningkat dapat meningkatkan desensitisasi Ca2+ intraseluler. Ketika desensitisasi dari Ca2+ meningkat maka akan menurunkan kontraksi dari otot polos melalui tiga mekanisme.5 Mekanisme pertama adalah masuknya Ca2+ dari ekstraseluler ke intraseluler melalui L-Tipe Ca2+ channel di membrane sel otot polos akan dihambat sehingga Ca2+ tidak dapat berikatan dengan calmodulin, kemudian tidak dapat mengaktifkan MLCK, lalu proses fosforilasi dari MLC tidak terjadi dan terjadilah relaksasi otot polos. Mekanisme kedua adalah desensitisasi Ca2+ itu sendiri dapat meningkatkan kerja dari MLCP, sehingga MLC yang terfosforilasi menjadi defosforilasi, lalu terjadilah proses relaksasi otot polos. Mekanisme yang terakhir adalah desensitisasi dari Ca2+dapat meningkatkan reuptake Ca2+ dari retikulum sarkoplasma intraseluler, sehingga jumlah Ca2+ intraseluler semakin berkurang yang dapat menghambat proses kontraksi otot polos.9 Selain itu didukung pula pada penelitian Tamaoki dkk yang menyatakan bahwa ginsenosida dapat menginduksi relaksasi otot polos bronkus manusia dengan menstimulasi pembentukan NO dari epitelium saluran napas dan meningkatkan sintesis cGMP. Seperti yang telah dinyatakan sebelumnya bahwa, dengan meningkatkannya kadar NO dan cGMP dapat menginduksi relaksasi otot polos. Oleh karena itu dapat dijadikan terapi alternatif penyakit asma.7 Di Asia prevalensi overactive bladder sebesar 30% dari 2369 orang responden. Di Indonesia prevalensi overactive bladder sebesar 43% dari 242 orang responden. Namun di Asia pengobatan gejala overactive bladder lebih rendah dari pada Negaranegara barat. Oleh karena itu pada penelitian ini dapat dikembangkan tentang pengaruh ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap otot polos vesika urinaria abnormal seperti yang terjadi pada overactive bladder.28
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan Berdasarkan penelitian ini didapatkan perbedaan yang bermakna (p<0,05) antara rata-rata persentase kontraksi strip otot polos vesika urinaria guinea pig yang diberikan dimetil sulfoksida dengan ekstrak Talinum paniculatum pada kadar 10-6%, 10-5%, 10-4%, 10-3%, 10-2%. Hal tersebut menunjukan bahwa ekstrak akar Talinum paniculatum terbukti menurunkan kontraktilitas otot polos vesika urinaria guinea pig. 5.2 Saran Bagi peneliti berikutnya,
Kerusakan jaringan otot polos vesika urinaria dalam proses persiapan strip otot polos akibat oksigenasi yang tidak adekuat harus dihindari karena akan mempengaruhi hasil kontraksi strip otot polos.
Strip otot polos yang digantung tidak boleh terlalu tebal karena akan mempermudah terjadinya hipoksia jaringan tersebut.
Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui mekanisme yang menyebabkan relaksasi pada otot polos yang diberikan ekstrak akar Talinum paniculatum.
Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui pengaruh lain ekstrak akar Talinum paniculatum terhadap kontraktilitas jaringan dari organ lain tubuh.
24
25
DAFTAR PUSTAKA 1. Gunawan D, Mulyani S. Ilmu Obat Alam (Farmakologis). Jakarta: Penebar Swadaya. 2004. 2. Prajogo B. Studi Taksonomi Talinum Paniculatum (Jacq) Gaertn dan Talinum Triangulare (Jacq). Bogor: Warta Tanaman Obat Indonesia. 1994. 3. Munim A, Hanani E. Fitoterapi Dasar. Jakarta: Dian Rakyat. 2011. 4. Poerba YS. Penampilan Genotipe Talinum paniculatum Jacq (Gaertn) pada Generasi M2. Bogor: Berita Biologi. 2004. 5. Jang HA, Cho S. The relaxant effect of saponin on the bladder and prostatic urethra: an in vitro and in vivo Study. Urologia Internationalis. 2012; 88(4): 9-463. 6. Kim HJ, Woo DS, Lee G, Kim JJ. The relaxation effects of ginseng saponin in rabbit corporal smooth muscle: is it a nitric oxide donor. British Journal of Urology. 1998; 82(5): 744-748. 7. Tamaoki J, Nakata J, Kawatani K, Tagaya E, Nagai A. Ginsenoside-induced relaxation of human bronchial smooth muscle via release of nitric oxide. British Journal of Pharmacology 2000; 130 (8): 1859-1864. 8. Martini FH, Nath JL, Bartholomew EF. Fundamentals of Anatomy & Physiology. San Francisco: Benjamin Cummings. 2012. 9. Fry CH, Meng E, Young JS. The Physiological Function of Lower Urinary Tract Smooth Muscle. Autonomic Neuroscience. Basic and Clinical 2010; 154: 3-13. 10. Tortora GJ, Derrickson BH. Principles of Anatomy and Physiology. Hoboken: John Wiley & Sons. 2009. 11. Snell RS. Clinical Anatomy For Medical Students. 6 Ed. USA: Lippincott Williams & Wilkins. 2006. 12. Tank PW, Gest TR. Atlas of Anatomy. USA: Lippincott William & Wilkins. 2009. 13. Sherwood L. Introduction to Human Physiology. Singapore: Brooks/Cole, Cengange Learning. 2013. 14. Guyton AC, Hall JE. Textbook of Medical Physiology. Singapore: Elsevier Saunders. 2006. 15. Fry CH. Experimental Models to Study the Physiology, Pathophysiology, and Pharmacology of the Lower Urinary Tract. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 2004; 49: 201-210. 16. Tanagho EA, Jack W. Mc Aninch Smith’s General Urology. The McGraw-Hill. 2008. 17. Barrett KE, Barman SM, Boitano S, Brooks HL. Ganong’s Review of Medical Physiology. USA: The McGraw-Hill 2010. 18. Sibley GN. A Comparison of Spontaneous and Nerve-Mediated Activity in Bladder Muscle from Man, Pig, and Rabbit. J Physiol 1984; 354: 431-443. 19. Kimura Y, Okuda H, Arichi S. Effects of various ginseng saponins on 5hydroxytryptamine release and aggregation in human platelets. The Journal of Pharmacy and Pharmacology. 1988; 40(12): 838-843. 20. Lee YJ, et al. Ginsenoside Rc and Re stimulate c-fos expression in MCF-7 human breast carcinoma cells. Achieves of Pharmacal Research 2003; 26(1): 53-57. 21. Min KT, Koo BN, Kang JW, Bai SJ, Ko SR, Cho ZH. Effect of ginseng saponins on the recombinant serotonin type 3A receptor expressed in xenopus oocytes: implication of
26
possible application as an antiemetic. Journal of Alternative and Complementary Medicine 2003; 9(4): 505-510. 22. Ahn JY, Song JY, Yun YS, Jeong G, Choi IS. Protection of Staphylococcus aureusinfected septic mice by suppression of early acute inflammation and enhanced antimicrobial activity by ginsan. FEMMS Immunology and Medical Microbiology 2006; 46(2): 187-197. 23. Jung KY, et al. Platelet activating factor antagonist activity of ginsenosides. Biological and Pharmaceutical Bulletin 1998; 21(1): 79-80. 24. Chen X. Cardiovascular protection by ginsenosides and their nitric oxide releasing action. Clinical and Experimental Pharmacology and Physiology 1996; 23(8): 728-732. 25. Sakakibara K, Shibata Y, Higashi T, Sanada S, Shoji J. Effect of ginseng saponins on cholesterol metabolism. I. The level and the synthesis of serum and liver cholesterol in rats treated with ginsenosides. Chemical and Pharmacological Bulletin 1975; 23(5): 1009-1016. 26. Schneider T, Fetscher C, Krege S, Michel MC. Signal Transduction Underlying Carbachol-Induced Contraction of Human Urinary Bladder. The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 2004; 309: 1148-1153. 27. Chapple CR, Khullar V, Gabriel Z, Muston D, Bitoun CE, Weinstein D. The Effects of Antimuscarinic Treatments in Overactive Bladder: an Update of a Systematic Review and Meta-Analysis. European Urology 2008; 54: 543-562. 28. Moorthy P, Lapitan MC, Quek PLC, Lim PHC. Prevalence of overactive bladder in Asian Men: an Epidemiological Survey. BJU International 2004; 93: 528-531.
27
LAMPIRAN Lampiran 1 Surat hasil determinasi tumbuhan
Gambar 6.1 Surat hasil determinasi tumbuhan
28
Lampiran 2 Surat Pengujian Ekstrak
Gambar 6.2. Surat pengujian ekstrak
29
Lampiran 3 Cara Pembuatan Ekstrak
Simplisia dijadikan serbuk
Ditambah pelarut
Serbuk simplisia dicampur pelarut
Diaduk dengan stirrer ± 3 jam
Ampas
Mengendapkan selama 24 jam
Filtrat 1 Aduk selama 1 jam
Saring dengan kertas saring
Ampas
Filtrat 2
Ekstrak adalah filtrat 1 dicampur dengan filtrat 2
Gambar 6.3 Alur pembuatan ekstrak
30
Lampiran 4 Data Persentase Kontraksi Strip Otot Polos dengan Pemberian DMSO Tabel 6.1 Persentase Kontraksi Strip Otot Polos dengan Pemberian DMSO
Lampiran 5 Data Persentase Kontraksi Strip Otot Polos dengan Pemberian Ekstrak akar Talinum paniculatum Tabel 6.2. Persentase Kontraksi Strip Otot Polos dengan Pemberian Ekstrak Akar Talinum paniculatum
31
Lampiran 6 Uji Normalitas Data
Tabel.6.3. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum 10-6%
Tabel. 6.4. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum 10-5%
Tabel. 6.5. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum 10-4%
Tabel. 6.6. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum 10-3%
Tabel. 6.7. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian ekstrak akar Talinum paniculatum 10-2%
32
(Lanjutan)
Tabel 6.8. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian DMSO pertama Kolmogorov-Smirnova Statistic DMSO1
df
.200
Sig. 8
.200*
Shapiro-Wilk Statistic
df
.887
Sig. 8
.220
Tabel 6.9. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian DMSO kedua Kolmogorov-Smirnova Statistic DMSO2
df
.225
Sig. 8
.200*
Shapiro-Wilk Statistic
df
.862
Sig. 8
.125
Tabel 6.10. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian DMSO ketiga Kolmogorov-Smirnova Statistic DMSO3
df
.236
Sig. 8
.200*
Shapiro-Wilk Statistic
df
.899
Sig. 8
.281
Tabel 6.11. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian DMSO keempat Kolmogorov-Smirnova Statistic DMSO4
df
.212
Sig. 8
.200*
Shapiro-Wilk Statistic
df
.914
Sig. 8
.381
Tabel 6.12. Uji normalitas data kontraksi strip otot polos dengan pemberian DMSO kelima Kolmogorov-Smirnova Statistic DMSO5
.222
df
Sig. 8
.200*
Shapiro-Wilk Statistic .881
df
Sig. 8
.194
33
Lampiran 7 Uji Independent Samples t Test
Tabel 6.13. Uji Independent Samples t Test
34
Lampiran 8 Gambar Proses Penelitian
Gambar 6.4. Proses mematikan guinea
Gambar 6.5. Proses pembedahan
pig guinea pig
Gambar 6.6. Vesika urinaria yang telah
Gambar 6.7. Alat-alat untuk membuat
diambil dari guinea pig
strip otot polos
Gambar 6.8. Proses pemotongan strip otot polos
Gambar 6.9. Proses pengikatan strip otot polos
35
(Lanjutan)
Gambar 6.10.Organ bath
Gambar 6.12.Water heater strip otot polos
Gambar 6.11. Water jacketed chamber
Gambar 6.13. Proses penggantungan
36
(Lanjutan)
Gambar 6.14. Proses memberikan tegangan
Gambar 6.15. Ekstrak akar
pada strip otot polosTalinum paniculatum
Gambar 6.16. Proses pengujian ekstrak Akar Talinum paniculatumsoftware Labchart
Gambar 6.17. Proses perekaman pada
37
Lampiran 9 Riwayat Penulis
Nama
: Muhamad Ichsan Pribadi
Tempat, tanggal lahir : Jakarta, 24 April 1992 Alamat
: Jl. Intan No.1A, Cilandak Timur, Jakarta Selatan
No. HP
: +6289630004446
Email
:
[email protected]
Riwayat Pendidikan : 1. TK Wisanggeni
(1996-1998)
2. SD Don Bosco
(1998-2004)
3. SMPN 56 JAKARTA
(2004-2007)
4. SMAN 38 JAKARTA
(2007-2010)
5. PSPD FKIK UIN Jakarta
(2010-sekarang)
38
