Deteksi Antibodi Avian Influenza Virus Subtipe H5 dengan Uji Hambat Hemagglutinasi pada Serum Monyet Ekor Panjang (Macaca fascicularis) yang Dikoleksi oleh Pusat Studi Satwa Primata (PSSP) IPB
Maulana Ar Raniri Putra
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2008 1
ABSTRAK MAULANA ARRANIRI PUTRA. Deteksi Antibodi Avian Influenza Virus Subtipe H5 dengan Uji Hambat Hemaglutinasi pada Serum Monyet Ekor Panjang (Macaca fascicularis) yang Dikoleksi oleh Pusat Studi Satwa Primata (PSSP) IPB. Dibimbing oleh JOKO PAMUNGKAS dan DIAH ISKANDRIATI. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan penelusuran terhadap indikasi terdapatnya infeksi alami virus avian influenza subtipe H5 pada monyet ekor panjang (Macaca fascicularis) dengan melakukan deteksi antibodi terhadap antigen H5 dari virus tersebut. Penelitian ini memanfaatkan 132 sampel serum monyet ekor panjang yang dikoleksi oleh Pusat Studi Satwa Primata IPB. Serum-serum tersebut dikelompokkan berdasarkan jenis penangkaran asal sampel serum tersebut diperoleh, dengan kriteria penangkaran A adalah penangkaran di suatu pulau, penangkaran B merupakan penangkaran di suatu daerah yang terdapat peternakan ayam dalam radius kurang dari dua kilometer, dan penangkaran C merupakan penangkaran di suatu daerah yang tidak dijumpai peternakan ayam dalam radius lima kilometer dan diketahui tidak memiliki kontak dengan unggas liar. Deteksi antibodi terhadap antigen H5 dari virus avian influenza pada sampel serum monyet ekor panjang dilakukan dengan uji Hambat Hemaglutinasi (Haemagglutination Inhibition, HI) metode beta. Hasil penelitian ini menunjukan indikasi terdapatnya monyet ekor panjang yang pernah terpapar oleh virus avian influenza subtipe H5. Hal ini ditunjukkan oleh hasil uji yang dilakukan, dimana dari 132 sampel serum, sebanyak 124 serum (94%) memberikan hasil uji HI positif, sementara delapan serum (6%) memberikan hasil uji HI negatif. Apabila sampel serum dikelompokkan berdasarkan data jenis penangkaran asal sampel serum, maka diperoleh sebaran sampel serum yang positif hasil uji HI sebesar 97,7% pada jenis penangkaran A, 100% pada jenis penangkaran B, dan 89,4% pada jenis penangkaran C. Kata kunci: Antibodi, avian influenza, uji hambat hemaglutinasi, Macaca fascicularis.
2
ABSTRACT MAULANA ARRANIRI PUTRA. Detection of Avian Influenza Virus H5 Subtype Antibody with Hemagglutination Inhibition Test in Long Tail Macaques (Macaca fascicularis) Serum Collection of IPB Primate Research Center. Under direction of JOKO PAMUNGKAS and DIAH ISKANDRIATI. The objective of this serological study was to trace and confirm the indication of avian influenza virus (AIV) H5 subtype natural infection in long tail macaques (Macaca fascicularis) by antibody detection against the H5 antigen of the AIV. This study utilized 132 serum samples from long tail macaques that have been in the archive collection of IPB Primate Research Center (IPB PRC). Serum samples were grouped based on the type of breeding colony from which they were taken from. Three types of breeding colony were categorized as type A breeding colony for one managed as semi-free breeding colony on an island, type B breeding colony is outdoor captive breeding colony managed on area with the presence of poultry farms within the radius of two kilometers, while type C breeding colony is outdoor captive breeding colony managed on area with the absence of poultry farm within five kilometer range and direct contact with wild bird. The detection of antibodies to H5 antigen of the virus utilized the beta method of Hemagglutination Inhibition (HI) Test. The results showed strong indication of natural infection by H5 subtype of AIV in long tail macaques as shown that out of 132 serum samples, 124 (94%) were tested positive by HI, while only eight (6%) were tested negative. When analyzed based on their breeding type of origin, positive HI tested serum samples were found at 97.7% in type A breeding colony, 100% in type B breeding colony, and 89.4% in type C breeding colony. Keywords: Antibody, Avian influenza, hemagglutination inhibition test, Macaca fascicularis.
3
© Hak cipta milik Institut Pertanian Bogor, tahun 2008 Hak cipta dilindungi
Dilarang mengutip dan memperbanyak tanpa izin tertulis dari Institut Pertanian Bogor, sebagian atau seluruhnya dalam bentuk apa pun, baik cetak, fotokopi, mikrofilm, dan sebagainya
4
Deteksi Antibodi Avian Influenza Virus Subtipe H5 dengan Uji Hambat Hemagglutinasi pada Serum Monyet Ekor Panjang (Macaca fascicularis) yang Dikoleksi oleh Pusat Studi Satwa Primata (PSSP) IPB
Maulana Ar Raniri Putra B04104119
Skripsi Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2008
5
PRAKATA Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat dan karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sebagai syarat memperoleh gelar sarjana kedokteran hewan. Proses penyusunan skripsi ini merupakan suatu pejalanan panjang yang dilalui dengan penuh kesabaran dan perjuangan. Dalam melaksanaan tahap demi tahap pada proses penelitian dan penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari bantuan dan dukungan dari berbagai pihak, maka perkenankanlah penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Dr. drh. Joko Pamungkas MSc dan Dr. drh. Diah Iskandriati sebagai dosen pembimbing, atas segala ilmu, pengetahuan, keterampilan, nasehat, bimbingan, saran, kritik dan kesabarannya dalam membimbing penulis. Kepala Pusat Studi Satwa Primata LPPM-IPB dan Kepala Laboratorium Mikrobiologi dan Imunologi PSSP LPPM-IPB atas segala fasilitas dan kesempatan yang diberikan kepada penulis untuk melakukan penelitian ini. Drh. Dede Setiawan sebagai Pembimbing Lapang atas segala ilmu, pengetahuan, keterampilan, waktu, dukungan dan kesabarannya dalam mendampingi dan membimbing penulis selama penelitian. Drh. I Ketut Mudite Adnyane MSi sebagai pembimbing akademik pada tahun 2005-2007 dan Dr. drh. Adi Winarto sebagai pembimbing akademik 2007-2008, atas segala bentuk dorongan, motivasi dan petunjuk sehingga penulis dapat menyelesaikan semua perkuliahan dengan lancar. Ibu Isti, Pak Uus, Ibu Mita, Ibu Silmi dan Ibu Maryati atas segala bimbingan, keterampilan laboratorium, canda, tawa, saran dan dukungannya selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. Seluruh staf PSSP LPPM-IPB yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu atas segala bantuannya selama penelitian. Mama dan Papa atas doa, cinta, kasih sayang, motivasi, dukungan dan perhatian yang senantiasa diberikan kepada penulis kapan pun dan dimana pun penulis berada. Fhoci Stelladayef yang telah ikhlas dan sabar mendampingi penulis dan selalu memberikan dorongan dan motivasi kepada penulis dari awal penelitian hingga skripsi ini dapat terselesaikan. Dina dan Chipo sebagai rekan terbaik selama penelitian ini atas segala bentuk kerja samanya. Sahabat-sahabat terbaik penulis Sunu, Fikri, Rohi, Rizki, Dwi, Marwan dan seluruh anggota GPK atas persahabatan dan persaudaraan yang telah diberikan kepada penulis. Seluruh keluarga besar Asteroidea 41 atas segala bentuk bantuan, dukungan, hiburan dan semangat dalam menjalani masa-masa panjang selama perkuliahan.
6
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih sangat jauh dari kesempurnaan dan masih banyak terdapat kekurangan di dalamnya, namun penulis tetap berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat. Bogor, 6 Agustus 2008 Maulana ArRaniri Putra
7
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Bekasi pada 14 Juli 1987 dari ayah Drs. Eddy Setiadi dan ibu Ermanila SPdI. Penulis merupakan anak pertama dari empat bersaudara. Penulis menamatkan pendidikan di SD Negeri Mekarjaya XV Depok pada tahun 1998 dan SMP Negeri 3 Depok pada tahun 2001. Pada tahun 2004 penulis lulus dari SMU Negeri 4 Depok dan di tahun yang sama penulis diterima di Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI). Selama masa perkuliahan, penulis pernah menjadi asisten mata kuliah Anatomi Veteriner 1 pada periode 2006/2007 dan mata kuliah Histologi Veteriner 2 pada periode 2006/2007. Penulis pernah melakukan magang liburan pada tahun 2005 di RSH IPB dan pada tahun 2007 di PT. PKP (Parakan Salak Farm). Dalam organisasi intra kampus penulis aktif sebagai ketua divisi Pendidikan Himpunan Minat Profesi Ornithologi dan Unggas 2007/2008 dan Ketua Divisi Kaderisasi dan PSDM IMAKAHI cabang IPB 2006/2008. Selain itu penullis juga aktif sebagai anggota Veterinary English Club 2007/2008.
8
DAFTAR ISI
Halaman DAFTAR TABEL .................................................................................................. 10 DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. 11 PENDAHULUAN Latar Belakang .................................................................................................. 12 Tujuan Penelitian ............................................................................................. 13 Manfaat Penelitian ........................................................................................... 13
TINJAUAN PUSTAKA Virus Influenza ................................................................................................. 14 Avian Influenza ................................................................................................. 15
Morfologi dan Klasifikasi .......................................................... Replikasi Virus........................................................................... Variasi Antigenik ....................................................................... Gejala Klinis ..............................................................................
15 17 18 19
Monyet Ekor Panjang (Macaca fascicularis) .................................................... 19 Klasifikasi Macaca fascicularis ............................................................................ 21 Macaca fascicularis sebagai Hewan Model AI ................................................... 21 Uji Hambat Hemaglutinasi (Hemagglutination Inhibition, HI) ........................... 22
Pengertian dan Prinsip Uji .......................................................... 22 Uji HI pada Serum Mammalia .................................................... 24 METODOLOGI PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian ............................................................................. 25 Alat dan Bahan .................................................................................................... 25 Metode Penelitian ................................................................................... 25 HASIL DAN PEMBAHASAN Perlakuan Awal (Pre-treatment) terhadap Serum Macaca fascicularis . Sebaran Sampel Serum Positif dan Negatif ............................................ Sebaran Sampel Serum Positif Berdasarkan Jenis Asal Penangkaran .... Sebaran Sampel Serum Berdasarkan Tingkatan End Point .....................
28 29 31 32
KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................................... 34 DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................... 35
9
DAFTAR TABEL Halaman 1.Jumlah Sampel Serum Positif dan Negatif .................................................... 29 2.Sebaran sampel serum positif uji hambat hemaglutinasi (uji HI) menggunakan virus AI subtipe H5 yang dikelompokkan berdasarkan jenis asal penangkaran . 32 3. Jumlah sampel serum dari masing‐masing tingkatan end point dengan virus standar 4 HAU .................................................................................................. 33
10
