David Rumpík1, Stanislav Los Chovanec1, Taťána Rumpíková1 Jaroslav Loucký2, Radek Kučera3 Klinika reprodukční medicíny a gynekologie Zlín 1 Imalab s.r.o. Zlín 2 Beckman Coulter ČR, a Imunoanalytická laboratoř, Lékařská fakulta a Fakultní nemocnice, Plzeň 3
3 největší boom v IVF
Laboratorní: AMH Embryologická: Embryoscope
Cytogenetická: PGD /arrey CGH…karyomapping…
AMH – základní charakteristika AMH patří do skupiny růstových faktorů TGF-β.
Název Řetězec AMH
AMH-N AMH-C
Poločas (h) 48
AA
Molek. hmotnost (kDa)
Fyziologická funkce prenatální
Fyziologická funkce postnatální
560
72
Diferenciace pohlaví plodu
Muži: pohlavní zrání Ženy: zrání folikulocytů
(TGF-β)
AMH glykoproteinový-dimer AMH-N
AMH-C
II
I
AMH prostorová struktura→
AMH – produkce Řez varletem
Řez a exprese AMH v ovariálním folikulu
Produkce AMH probíhá v Sertoliho buňkách varlat v prenatálním i postnatálním období u mužů a v granulózových buňkách preantr. a malých antr. fol. do 4 mm vaječníků u žen.
Diferenciace reprodukčního ústrojí Johannes Müller (1801–1858) německý anatom
Caspar F. Wolff (1733–1794) německý anatom
Alfred Jost (1947, 1953) testikulární fragmenty samčích králičích embryí implantoval samičím králičím embryím – došlo k maskulinizaci
AMH – Fyziologická funkce - muži Hladiny AMH a testosteronu u mužů
AMH – Fyziologická funkce - ženy Model působení AMH ve vaječníku
primordiální
Visser J.A. et al., Reproduction, 2006
primární
preantrální / antrální
ovulační
AMH – Klinické využití
AMH serum levels
Stanovení ovariální rezervy
•Stabilní molekula •Relativně stabilní v průběhu cyklu 21-25
26-30
31-35
36-40
41-45
•Stabilní mezi cykly
>45
Age (years)
•Hormonální antikoncepce nemá vliv
AMH concentration course
•Validovaná závislost AMH na věku •Významná korelace s množstvím oocytů •Predikuje slabou odezvu
•Predikuje nadměrnou odezvu 0
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
22
24
26
Days Follicular phase
Ovulatory peak (day 14)
Luteal phase
28
AMH - normální hodnoty Příklad normálních hodnot používaných v ČR v ng/mL /jiné jednotky pmol/l/ Odpověď na hormonální stimulaci
Koncentrace AMH AMH Gen II kit (A79765/A79766)
Nedostatečná
< 0.2 ng/mL
Snížená
0.2 ng/mL – 1 ng/mL
Normální
1 ng/mL – 5 ng/mL
Zvýšená (riziko OHSS)
> 5 ng/mL
AMH – koncentrace u žen
AMH a IVF • Nižší hodnoty AMH korelují s vyšší spotřebou gonadotropinů • Vyšší hodnoty AMH korelují s vyšším ziskem M2 oocytů • Při hodnotách AMH nad 1 ng/ml je 17x vyšší pravděpodobnost klinické gravidity, než při hodnotách nižších
AMH a dárkyně oocytů • Stanovení hladiny AMH je dobrým prediktorem očekávaného počtu oocytů u dárkyně • Vyšší hodnoty AMH korelují s vyšším ziskem M2 oocytů
• Dle hladiny AMH lze vyloučit dárkyně, u nichž je předpoklad velké spotřeby gonadotropinů a malého zisku oocytů • Hladiny FSH a AMH jsou hlavními markery pro zařazení event. vyloučení dárkyně z programu OD
AMH vs. AFC • Poskytují podobnou nikoliv stejnou informaci • AMH se produkuje v rozsahu od preantrálních folikulů po folikulocyty do velikosti cca 6-8 mm • Na UZ jsou viditelné folikulocyty od cca 2 mm
Frank J. Broekmans, Lille 2012
AMH a PCOS • Zvýšení hladin AMH u žen s PCOS (2x – 4x) • AMH produkce je mnohem vyšší v granulózových buňkách polycystických ovarií FSH 2 FSH • Neovulující ovaria 2 produkují mnohem více AMH AMH 1 AMH než ovulující
• AMH hraje důležitou roli v mechanizmu zastavení ovulace při PCOS a následné neplodnosti • Snížení hladiny AMH při podávání metforminu o 20 – 60%
AMH a ovariální nádory • Hladiny AMH zvýšené při nádorech granulózových buněk (2x i více) • AMH je extrémně citlivý a specifický marker pro sledování žen po ovariektomii • AMH je marker časné detekce recidivy • Recidiva se může objevit až 10 let po odstranění primárního nádoru
AMH a cytostatika nebo radioterapie • V poslední době řada studií na toto téma • Hladiny AMH se v průběhu chemoterapie nebo radioterapie snižují • Vysoké riziko poškození oocytů – alkylující látky (mechlorethamine, cyclosporamide)
• Míra poškozená závisí na dávce a počtu chemoterapeutických cyklů • V některých případech bylo pozorováno obnovení (opětovné zvýšení) hladin AMH 1 – 2 roky po ukončení terapie
AMH a poruchy sexuálního vývoje u dětí • Hladiny AMH odráží funkčnost Sertoliho buněk u chlapců • Hladiny AMH odráží stav ovariálních granulózových buněk u dívek • Stanovení AMH se často používá v kombinaci s jinými parametry (LH, FSH, Testosterone, Estradiol, 17-OH Progesterone atd.)
• AMH je významný marker pro stanovení ovariální rezervy • Využití při IVF společně s FSH a AFC • Diagnostika, sledování, mechanizmus PCOS • AMH jako nádorový marker při nádorech granulózových buněk • Monitorace ovariální rezervy v průběhu onkologické léčby u žen • První studie a indikace AMH byly provedeny v souvislosti s diagnostikou poruch pohlavního vývoje u dětí – dnes opět aktuální
www.ivfzlin.cz
