Charm ROSA TEST MRL Beta-lactam určen pro Beta-lactamová antibiotika - porovnání citlivosti s maximálními reziduálními limity u syrového mléka

Charm ROSA® TEST MRL Beta-lactam

určen pro Beta-lactamová antibiotika - porovnání citlivosti s maximálními reziduálními limity u syrového mléka

Originál: Charm 2008 aktualizace 3/2009 verze 03

Váš dodavatel: Rhinestone s.r.o., sídlo: Národní obrany 823/37, PSČ 16000, Praha 6, kanceláře Octaris centrum: Bořetická 2668/1, 193 00 Praha 9 - H.Počernice, Tel.: +420 281 091 460, Fax: +420 281 866 264, iwww.rhinestone.cz

® ® CHARM ROSA TESTMRL MRL BL CHARM ROSA TEST Rychlý jednokrokový test urÜený ke stanovení beta- laktamových antibiotik v syrovém kravském mléku

x

x x x x

MRL BL TEST Citlivost testđ optimálnå koreluje s limity MRL stanovenými legislativou EU, viz. Maximální. reziduální limity (tabulka 1) MRL. Rychlá jednokroková analýza Minimální nároky na vybavení Výsledky do 8 minut! Možnost testování mléka od pĄeléÜených dojnic, bazénových vzorkđ, svozných cisteren i z pĄíjmových tankđ v mlékárnå

Tabulka 1: Citlivost testu (ppb)

Typ antibiotika

MRL

DetekÜní hladina rozsah

Maximální prevence pĄi kontrole ochranných lhđt, bazénových a cisternových vzorkđ a mlék urÜených pro procesní zpracování: Charm MRBL byl specificky vyvinut za úÜelem vyĄazení porušeného mléka z dodávky do zpracovatelských závodđ. PĄedstavuje rychlý screeningový test urÜený nikoliv pouze ke kontrole betalaktamových antibiotik, jejichž použití je pĄi léÜbå dojnic v posledních letech stále Üaståjší.

Charm MRL BL je kombinovaný test umožúující detekci våtšiny používaných beta-laktamđ a na hranici limitu nebo pod limitem MRL. Z aktuálnå používaných testđ pro rezidua výše uvedených antibiotik jeho citlivost koreluje s limity MRL nejoptimálnåji. Test je jednoduchý, umožúuje použití v terénu i v laboratoĄi a vyžaduje minimální vybavení. Charm MRL BL velmi rychle zachytí mléko, které pĄítomností antibiotických reziduí


neodpovídá zdravotnå bezpeÜným limitđm a mđže dále rovnåž zpđsobit zpracovatelđm technologické problémy ve výrobå. * Citlivost na vlastní Ceftiofur na úrovni pĄibližnå ¼ hodnoty uvedené v tabulce

Další používané CHARM ROSA® testy: x x x x x x

Aflatoxin M1 50 ppt Enrofloxacin MRL Beta laktam Tetracykliny Sulfadimethoxin/Sulfamethazin Sulfamethazin

Pracovní postup U testovacího stripu odlepte ÜásteÜnå krycí fólii až ke stanovené znaÜce. Na MRL BL strip napipetujte 300Pl vzorku mléka. Strip znovu pĄelepte krycí fólií a vložte do inkubátoru.

Po 8 minutách svåtelná kontrolka a akustická signalizace upozorní na ukonÜení inkubaÜní doby. Vyjmåte MRL BL strip z inkubátoru. Neprodlužujte dobu jeho setrvání v inkubátoru

PĄi orientaÜním testování: vizuálnå porovnejte Betalaktamový proužek (BL) a s kontrolním proužkem (C). PĄi pĄesném testování: vložte testovací strip po inkubaci do ROSA® ÜteÜky a odeÜtete .


Vybavení

ROSA® ÜteÜka

ÛtyĄmístný inkubátor

Dvoumístný inkubátor

x x x x

ROSA® ÜteÜka Výsledky båhem 5 sekund Možnost uložení výsledkđ do PC nebo vytisknutí PamåĹ na 4500 výsledkđ Možná identifikace vzorku, typu testu, Üi operátora, data, Üasu, Üísla šarže pĄípadnå komentáĄe k výsledkđm K vyhodnocení je možné použít i ÜteÜku iROSA.

x x x

ROSA® ÜtyĄmístný inkubátor ÛasovaÜ se svåtelnou a akustickou indikací Displej se zobrazením aktuálního Üasu (pouze u ÜtyĄmístného typu) Auto Start po uzavĄení víka Auto Reset pĄi otevĄení víka Pro 4 testovací stripy

x x x x

ROSA® dvoumístný inkubátor ÛasovaÜ se svåtelnou a akustickou indikací Auto Start po uzavĄení víka Auto Reset pĄi otevĄení víka Pro 2 testovací stripy

x x


Charm MRL Beta-lactam test Charm MRL Beta-lactam test UrÜen pro Beta-laktamová antibiotika - porovnání citlivosti s Maximálními reziduálními limity u syrového mléka. Úvod

Charm MRL Beta-lactam test je rychlý test využívající ROSA® technologii. Test je navržen k detekci beta-laktamových léÜiv dle kodexu EU = Maximum Residual Limits (MRL) v mléce. Test je použitelný v pĄíjmových mlékárenských laboratoĄích Üi na pĄíjmu mléka, dále na zemådålských farmách (kontrola bazénové dodávky Üi pĄeléÜených dojnic) nebo pĄi svozu mléka, kde provádí jednoduchou a rychlou kontrolu ĄidiÜ svozné cisterny pĄed napuštåním bazénu do cisterny.

Citlivost a selektivita

Citlivost – Tabulka 1: DetekÜní hladiny v syrovém kravském mléku v ppb (parts per bilion) pro beta-lactam test ROSA MRL Beta-laktamová léÜiva

EU / Kodex MRL (ppb*)

Amoxicillin 4 Ampicillin 4 Cefacetrile 125 Cefalexin 100 Cefalonium 20 Cefazolin 50 Cefoperazone 50 Cefquinome 20 Ceftiofur a Metabolite*** 100 Cefuroxime 50 Cephapirin 60 Cloxacillin 30 Dicloxacillin 30 Penicilin G 4 * ppb part per bilion, ug/kg nebo ng/ml ** stanovení positivity v urÜeném Üase s 95% jistotou *** Samostatný Ceftiofur má citlivost cca ¼ hladiny uvedené v tabulce.

DetekÜní hladina rozsah**(ppb) 3–4 3–4 8 – 18 30 – 60 3–5 12 – 20 5–9 15 – 20 30 – 60 3–5 6 – 10 25 – 35 20 – 30 2–3

Selektivita testu = pĄi analýze nejménå 100 negativních vzorkđ syrového mléka je vyhodnocen max.1 test jako pozitivní s pĄekroÜením krajních limitđ citlivosti s 95 % jistotou.

Interference a kĄížová reaktivita

U následujících léÜiv nedochází k žádným interferencím (v hladinå 100ppb): sulfadiazin, sulfanilamid, sulfathiazol, sulfamethazin, sulfapyridin, sulfadimethoxin, tetracyclin, oxytetracyclin, chlortetracyclin, doxycyclin, gentamicin, neomycin, furosemid, trichlormethiazid, chlorothiazid, oxytocin, thiabendazol, phenylbutazon, dexamethazon, PABA a dipyron. Nedochází k interferencím se somatickými buökami v množství 106 SCC/ml nebo baktériemi v množství 3 x 105 cfu/ml. Ostatní beta - laktamová léÜiva jsou detekována. Oxacillin a nafcillin jsou detekovány v hladinå 40 – 60, resp. 50 – 70 ppb.

Váš dodavatel: Rhinestone s.r.o., sídlo: Národní obrany 823/37, PSČ 16000, Praha 6, kanceláře Octaris centrum: Bořetická 2668/1, 193 00 Praha 9 - H.Počernice, Tel.: +420 281 091 460, Fax: +420 281 866 264, iwww.rhinestone.cz1

Skladování

Skladování testovacích Charm stripđ MRL beta-lactam a Penicilin G pozitivní kontroly dodržujte pĄi 0 – 7°C. Detailní informace viz. pĄíbalový leták.

Objednací informace

LF-MRLBL-100 - 1 balení se 100ks MRL beta-lactam testovacími stripy - 5 tablet 4 ppb Penicilin G pozitivní kontroly

LF-MRLBL-500 - 5 balení po 100ks MRL beta-lactam testovacími stripy - 25 tablet 4 ppb Penicilin G pozitivní kontroly

SpotĄební materiál PĄístroje - 1000ks jednorázových - ROSA ÜtyĄmístný špiÜek o objemu 1000įl inkubátor 56°C - 300įl fixní pipeta - 500ks jednorázových pipet 300įl - ROSA ÜteÜka - 5000ks jednorázových pipet 300įl

Použití a skladování reagencií: x x x x x x

Skladujte chlazené pĄi 0 – 7°C v neporušeném uzavĄeném obalu PĄi otevĄení skupinového obalu sejmåte plastové víÜko opatĄené tåsnåním k opåtnému uzavĄení obalu. Odstraúte vnitĄní ochrannou folii pĄivaĄenou k obalu. Zkontrolujte indikátor vlhkosti ve skupinovém obalu. KuliÜka uvnitĄ indikátoru by måla být modrá. Nepoužívejte testovací stripy v pĄípadå, že je kuliÜka bílá nebo rđžová. Zamezte kondenzaci vody otevĄením obalu pĄi pokojové teplotå v místech s vysokou vlhkostí Odeberte z obalu cca potĄebný poÜet stripđ, které spotĄebujete båhem jednoho dne. Tyto stripy ponechte båhem dne pĄi pokojové teplotå a spotĄebujte do 12 hodin. Skupinový obal s dalšími stripy ihned dđkladnå uzavĄete plastovým víÜkem a vraĹte do chladniÜky

Princip:

Charm MRL beta-lactam test využívá receptory vážící beta-laktamová léÜiva. PĄi protékání mléka pĄes testovací komđrku a podložku stripu dochází k vyhodnocení vzorku na kontrolním proužku T testovacího stripu. Slabší intenzita T proužku je zpđsobena pĄítomností beta-laktamových antibiotik ve vzorku. T proužek je porovnán s C (kontrolním) proužkem z dđvodu rozlišení event. pĄítomnosti beta-laktamđ v hladinå blízké stanoveným limitđm MRL dle legislativy EU. Je-li T proužek tmavší nebo srovnatelný s C proužkem, je hodnocený vzorek negativní. Pokud je T proužek svåtlejší než C nebo T proužek na stripu po analýze zcela chybí, je vzorek pozitivní na betalaktamy. V pĄípadå, že C proužek na stripu po analýze chybí je test neplatný a musí být opakován. Pomocí dodávané ÜteÜky (readeru) je možné analyzovat testovací stripy elektronicky.

Denní kontrola: x

x

Proveĵte kontrolu ROSA ÜteÜky pomocí kalibraÜních standardđ (proužkđ). Tím ovåĄíte její pĄesnost. KalibraÜní barevné standardy (pozitivní a negativní) budou po zasunutí do ÜteÜky automaticky odeÜteny a výsledky kalibrace se zobrazí na digitálním dispeji. Zároveú je možné výsledky vytisknout a uchovat pro pĄípadnou kontrolu. Kalibraci provádåjte dennå pomocí jedné negativní a jedné pozitivní stripové kontroly. Je nutná k ovåĄení kvality používaných reagencií, ale i ÜteÜky. PĄi ovåĄování doporuÜujeme stĄídání operátorđ. Negativní kontrola se musí pĄi odeÜtu pohybovat v záporných Üíselných hodnotách, resp.hodnota zobrazená po odeÜtu stripu na ÜteÜce musí být nižší nåž – 400. V tomto pĄípadå je potvrzen negativní výsledek.

2


x x

Pozitivní kontrola se musí pĄi odeÜtu pohybovat v kladných Üíselných hodnotách, resp. hodnota zobrazená pĄi odeÜtu stripu na ÜteÜce musí být vyšší než +400. V tomto pĄípadå je potvrzen pozitivní výsledek. V pĄípadå, že kalibraÜní standardy nebo kontroly neobsahují pĄesnou specifikaci, kontaktujte dodavatele.

Negativní kontrola

Ke kontrole použijte syrové mléko prosté reziduí beta-laktamových antibiotik. PĄesná negativní kontrola by måla vycházet silnå negativní, odeÜtený T proužek bude tmavší než kontrolní C proužek (viz. vizuální kontrola a interpretace výsledkđ). PĄi odeÜítání na ROSA readeru bude Üíselná hodnota nižší než -400 a výsledek bude negativní.

Pozitivní kontrola

K pĄípravå pozitivní kontroly použijte Penicilin G tablety k vytvoĄení 4,2 ± 0,4 ppb Penicilin G pozitivní kontroly. x V Üisté ampulce naĄeĵte 1 tabletu Penicilin G pozitivní kontroly s 6 ml negativní kontroly (syrové mléko) a lehce promíchejte. Inkubujte 5 minut v chladu a pĄed použitím znovu promíchejte. Tablety urÜené k pĄípravå pozitivní kontroly uchovávejte chlazené pĄi 0 – 7°C v uzavĄeném obalu.

Uchování kontrol x

x

x x

Negativní kontrola chlazená pĄi 0 – 7°C je stabilní po 72 hodin. PĄipravená pozitivní kontrola mđže být chlazená použita do 48 hodin. Pro delší skladování zamrazte 1ml pozitivní kontroly v Üisté ampuli do 6 hodin po naĄedåní pĄi -15°C až po dobu 2 måsícđ. K opåtovnému použití rozmrazte ve studené vodå a lehce promícháme. Rozmrazenou kontrolu je vhodné pĄed použitím odstĄedit optimálnå v centrifúze pĄi 1200 ± 200 G po dobu 3 minut. Zchlaĵte a použijte po odstĄedåní jako testovací pozitivní standard. Napipetujte odstĄedåné mléko do pipety, špiÜku pipety ponoĄte hloubåji do mléka, aby nedošlo k event. odbåru mléka se slabou tukovou vrstvou, která mđže být pĄítomna na povrchu mléka. Rozmrazená a zchlazená pozitivní kontrola je stabilní po dobu 24 hodin. Nepoužité zbytky rozmrazené pozitivní kontroly vyĄaĵte. Opåtovnå nezamrazujte.

Informace o testu: x x x

Syrové mléko musí být chlazené (0 – 7°C) Vzorky musí být pĄed testováním dobĄe promíchány Teplota okolního prostĄedí 10 – 30°C s pĄirozenou cirkulací vzduchu.

Upozornåní: x

x x x

VysokotuÜné vzorky mléka (!6,5% tuku) mohou být tåžko odeÜitatelné, mđže dojít k jejich zkreslení. NeodeÜítejte také porušené stripy v ROSA ÜteÜce. Povrchové Üástice pĄítomné na stripu mohou nepĄíznivå ovlivnit odeÜítací optiku. Udržujte proto pĄístroj v Üistotå a pĄed použitím odstraúte prach a zbytky mléka. ROSA inkubátor musí být Üistý, svítí – li svåtelná signalizace teploty zelenå signalizuje teplotu 56 ± 1°C. Dennå teplotu kontrolujte. Víko inkubátoru båhem testování uzavĄete. VyhĄátí ROSA inkubátoru mđže v závislosti na okolním prostĄedí trvat 10 – 60 minut. PĄi extrémních teplotách (0°C) mđže tato doba být ještå o 15 minut delší.

Váš dodavatel: Rhinestone s.r.o., sídlo: Národní obrany 823/37, PSČ 16000, Praha 6, kanceláře Octaris centrum: Bořetická 2668/1, 193 00 Praha 9 - H.Počernice, 3 Tel.: +420 281 091 460, Fax: +420 281 866 264, iwww.rhinestone.cz

x

PĄi testování zmrazeného vzorku nebo obnoveného sušeného mléka vzorek odstĄeĵte (3 minuty pĄi 1200 ± 200 G) a použijte dále spodní Üást vzorku.

Postup:

Krok 1 Dđkladnå vzorky promíchejte. x Mđže dojít k vytvoĄení påny na povrchu vzorku x V jedné šarži mohou být testovány 4 vzorky Krok 2 OznaÜte MRL Beta-lactam testovací strip popisem vzorku x Dejte pozor na poškození testovací Üásti sptripu.. Do inkubátoru mohou být umíståny stripy nepoškozené pĄi popisování. Krok 3 Vložte strip do ROSA inkubátoru plochou Üástí nahoru. Profilovaná spodní strana vzorkovacího stripu se vzorkovací komđrkou umožúuje jeho jednoduché uložení do inkubátoru ve správné poloze.

. Krok 4 PĄidržte strip v inkubátoru a odlepte vrchní ochrannou folii až k uvedené znaÜce x Dejte pozor na poškození a odlepené folie testovacího stripu Krok 5 Nasajte vzorek mléka bez påny a vzduchových bublin. x U fixních pipet navlhÜete špiÜku nasátím vzorku, vypuštåním, a opåtovným nasátím. x NezvlhÜujte poly-pipety pokud je používáte Krok 6 Umíståte pipetu kolmo nad správnou vzorkovací pozici stripu. Pomalu pipetujte 300 įl (± 15įl) syrového mléka nebo odstĄedåného vzorku na jednu stranu vzorkovací komđrky stripu Krok 7 Opåt pĄelepte vrchní ochrannou fólii pĄes testovací komđrky. x Pokud testujete více vzorkđ opakujte kroky 3 – 7 (odlepení, pipetování a opåtovné zalepení) u každého stripu. x DokonÜete pĄípravu všech vzorkđ båhem 2 minut od vložení prvního stripu do inkubátoru. Krok 8 UzavĄete víko inkubátoru a zajiståte jej. Po uzavĄení víka se automaticky spustí ÜasovaÜ.


Krok 9 Inkubujte 8 minut, ne však déle než 10 minut. Testování zbyteÜnå neprodlužujte. Po 8 minutách se spustí akustická signalizace nebo žlutå blikající kontrolka po dobu 2 minut. Krok 10 Vyjmåte testy z inkubátoru. UzavĄete víko, ale nezajišĹujte jej.

Vizuální kontrola a interpretace:

Vyjmåte testovací stripy z inkubátoru. Držte vzorek svisle testovacím polem smårem dolđ (jak je zobrazeno). Vzorkovacího pole nepoškoĵte. Opatrnå ze stripu setĄete pĄípadné nežádoucí Üástice.

Kontrola

Zkontrolujte C (Control) kontrolní proužek Jestliže C proužek chybí, je rozmazán nebo je nerovnomårný, event. pokud mléko zakrývá oba proužky C a T, je test neplatný. Opakujte test znovu. Nevkládejte neplatné stripy do ÜteÜky.

Vizuální interpretace výsledkđ

Porovnejte strip s referenÜní kartou. Porovnejte T (Test) proužek s C (Control) proužkem. Negativní výsledek – T proužek je stejnå zabarvený nebo tmavší než C proužek. Pozitivní výsledek – T proužek je zĄetelnå svåtlejší než C proužek nebo T proužek chybí Üi je nerovnomårnå zbarvený.

Interpretace odeÜítacím zaĄízením

ROSA ÜteÜka je dodávána jako volitelné pĄíslušenství. Výsledky jsou automaticky ukládány do pamåti a mohou být staženy a uloženy do PC nebo vytisknuty. Båhem 10 minut od dokonÜení testu, vložte Üistý a vizuálnå neporušený strip do ROSA ÜteÜky. Zasuúte jej celý do otvoru. OdeÜtåte výsledky na MRL kanálu ROSA ÜteÜky. MRL kanál je zobrazován v levém horním rohu obrazovky a mål by pomalu blikat. K vybrání kanálu stisknåte ESC na ÜteÜce a pomocí levé a pravé šipky zvolte kanál. Použijte šipku dolđ k pĄechodu na vzorek nebo operátora a zadejte identifikaci vzorku nebo Üísla operátora. Jestliže strip nebude vložen do odeÜítací komory správnå, bude ÜteÜka zobrazovat chybové hlášení: „ reinsert test strip and read again“(vyjmåte strip a opåtovnå odeÜtåte) Stisknåte ENTER k odeÜtení stripu. Numerické odeÜtení a výsledek jsou zobrazeny na displeji po


dobu 5 sekund. Výsledky jsou dále uloženy do pamåti k dalšímu vyvolání pĄenosu do PC nebo tisku. x Jestliže je odeÜteno záporné Üíslo nebo max. 0 bude ÜteÜka zobrazovat negativní výsledek. x Jestliže je odeÜteno kladné Üíslo bude ÜteÜka zobrazovat pozitivní výsledek. Vzorek by mål být znovu otestován pro potvrzení pozitivního výsledku pokud bude Üíselná hodnota kladná, ale bude se blížit nule.

Opakování zkoušky v pĄípadå pozitivity:

1. Pozitivní vzorek opakujte nejlépe duplicitnå s pozitivní i negativní kontrolou. 2. U negativní kontroly musí být odeÜet nižší než -400 a negativní výsledek na ÜteÜce. 3. U pozitivní kontroly musí být odeÜet vyšší než +400 a pozitivní výsledek na ÜteÜce. 4. Jestliže jedna z kontrol není v uvedeném rozsahu opakujte test. Pokud kontrola stále nebude v požadovaném rozsahu kontaktujte svého dodavatele. 5. Jestliže jsou obå kontroly v uvedeném rozsahu a jeden nebo oba duplicitní opakované vzorky jsou pozitivní, je vzorek pozitivní na beta-laktamy.

Skladování vyhodnocených testovaných stripđ a vzorkđ:

Uchovávání testovacích stripđ nebo vzorkđ k diagnostickým nebo záznamovým úÜelđm: x Vzorky mohou být po testování uchovány zmrazením na -15°C po dobu dvou måsícđ. Viz.Uchování kontrol pro rozmrazení vzorkđ. x Po inkubaci testovacích stripđ jsou výsledky stabilní pĄi pokojové teplotå 10 minut. Po nåkolika hodinách budou pozitivní výsledky více pozitivní zatímco negativní výsledky zđstanou stabilní. PĄi zchlazení stripđ 0 – 7°C jsou výsledky stabilní 1 hodinu. PĄi zmrazení na -15°C jsou výsledky stabilní po dobu 1 týdne.

Poly-pipeta:

Použití poly-pipety 1. Uchopte poly-pipetu kolmo (jak je zobrazeno) a zmaÜknåte nasávací Üást. 2. PonoĄte plastovou trubiÜku pipety do vzorku (pĄibližnå 1cm pod hladinu, zamezte nasátí påny Üi vzduchových bublin) a pomalu nasávací Üást uvolnåte. Nasáváni zastavte v pĄípadå, že vzorek zaÜne pĄetékat do spodní Üásti nasávací Üásti (baúky). 3. Pipetu ze vzorku vyjmåte. 4. K pĄipojení mléka ke vzorkovacímu stripu zmaÜknåte nasávací/vypouštåcí Üást pipety a pomalu vytlaÜte vzorek z polypipety. Vyhnåte se zpåtnému nasátí mléka do polopipety po vytlaÜení. PĄebyteÜný (pĄeteklý) vzorek by mål zđstat ve spodní baúce. 5. Poly-pipeta je urÜena pro jedno použití, opåtovnå ji nikdy nepoužívejte (možnost kĄížové kontaminace).

Dđležité informace:

Charm Science, Inc. , resp. dodavatel v ÛR a SR – Rhinestone s.r.o., poskytuje záruku na tento produkt (diagnostické testy, kontroly, atd.) do konce expiraÜní doby uvedené na každém skupinovém balení. Doba použitelnosti testđ je jeden rok od data výroby.


CHARM ROSA® TEST MRLBL Referenční karta

Negativný výsledek

Pozitivný výsledek

Neplatný výsledek

NEPLATNÝ: není možné odečíst kontrolní C proužek. Vyřaďte a testujte znovu. Pozor na správné umístění vzorkovacího stripu v ROSA čtečce


ní cího

CHARM MRL - Beta laktas / tetracyklin test

CHARM MRL - Beta laktam Pracovní postup

OvåĄená inkubaÜní teplota 56°C ± 1°C .

U testovacího stripu odlepte ÜásteÜnå krycí folii až ke stanovené znaÜce.

Pomalu nadávkujte 300įl vzorku na urÜenou Üást vzorkovací podložky umíståné v testovací komđrce. Strip opåt pĄelepte a uzavĄete krycí fólií. UzavĄete víko inkubátoru a proveĵte 8 minutovou inkubaci stripu. Po inkubaci vyjmåte testovací strip, vizuálnå jej zkontrolujte. Kontrolní proužek musí být celistvý a kompletní. Výsledky odeÜtåte v ROSA® ÜteÜce na rychle blikajícím MRL kanálu pro 2 3 proužkový mód.


Charm ROSA TEST MRL Beta-lactam určen pro Beta-lactamová antibiotika - porovnání citlivosti s maximálními reziduálními limity u syrového mléka

Recommend Documents