A tárgy neve Meghirdető tanszék(csoport) Felelős oktató: Kredit Heti óraszám típus Számonkérés Teljesíthetőség feltétele Párhuzamosan feltétel Előfeltétel Helyettesítő tárgyak Periódus Javasolt félév Kötelező vagy kötelezően választható
BIOLÓGIA ALAPJAI GYAKORLAT SZTE TTK Összehasonlító Élettani Tanszék Dr. Varga Csaba 1 2 Laborgyakorlat Gyakorlati jegy Biológia alapjai előadás
Őszi félév
AJÁNLOTT IRODALOM [Itt szúrja be az ajánlott irodalom listáját! (max 5, csak ezen az oldalon)]
Toldi J. és Varga Cs. : Élettani gyakorlatok, JATEPress, Szeged, 1999 Kállai L.: Laborállat könyv, Royal Press Hungary Kft., Budapest, 2003 Sós József: Laboratóriumi diagnosztika, Medicina, Budapest, 1974
A TANTÁRGY RÉSZLETES TEMATIKÁJA
I.
Műszer és eszköz ismeret
Cél, hogy a hallgatók az alapvető labortechnikai műszereket megismerjék, és alapfokon tanulják meg őket használni. a. Balesetvédelem 1. A laboratóriumi munka rendjének ismertetése 2. A labormunkák baleseti veszélyforrásai 1.1 Savak, lúgok 2.2. Mérgek 2.3 Elektromos eszközök 2.4. Vegyszerek 2.5. Állatok 2.6. Egyéb (mechanikai sérülések) b. A kísérletek során alkalmazott üvegeszközök bemutatása 1. Lombikok, petri csészék, stb. c. A kísérletek során alkalmazott fémeszközök bemutatása 1. Ollók, szikék, csipeszek, stb. d. A kísérletek során alkalmazott műanyag eszközök bemutatása 1. Eppendorfok 2. Pasteur pipetták 3. Állványok e. A kísérletek során alkalmazott centrifugák bemutatása 1. Szög és forgó rotoros fugák ismertetése 2. Tárázási alapelvek 3. Asztali és ultracentrifugák f. A kísérletek során alkalmazott mérlegek bemutatása 1. Tára mérlegek 2. Automata mérlegek 3. Mérlegek kalibrálása 4. Mérlegek karbantartása g. A kísérletek során alkalmazott pipetták bemutatása 1. Üvegpipetták, griffin labda 2. Automata pipetták 3. Többcsatornás automata pipetták 4. Automatikus adagolók 5. Pipetták karbantartása h. A kísérletek során alkalmazott fotométerek bemutatása 1. Fotométerek, elisa readerek i. A kísérletek során alkalmazott mikroszkópok bemutatása 1. Fénymikroszkópok 1.1 Mikroszkópok helyes beállítása és használata 2. Elektronmikroszkóp j. Egyéb alapvető laboreszközök megismerése 2
1. Vortex 2. Mágneses keverő 3. Vízfürdők 4. Termosztátok k. Műszerismeret alapjai 1. Ingerlők 2. Átalakítók, erősítők 1.1. Aluláteresztők 1.2. Felüláteresztők 1.3. Sávszűrők 3. Adatfeldolgozó és megjelenítő készülékek 1.4. Rekorderek 1.5. Oszcilloszkópok 1.6. Számítógépes megjelenítő és adatfeldolgozó rendszerek II.
A biológiai labormunkához elengedhetetlen kémiai alapfogalmak – szeminárium
Cél a napi rutin labormunkák során használt, alapvető elméleti ismeretek megszerzése a. b.
c.
d.
e.
f.
Vegyszerek elnevezése, a vegyszerek tisztasága Oldatok készítése 1. Térfogatmérések 2. Oldások 3. Koncentrációk kiszámolása, 4. 4.Koncentráció számolási feladatok 5. Hígítások Az oldatok kémhatásának fogalma, mérése és beállítása 1. A pH fogalma 2. Puffer-oldatok készítése 3. Indikátoros pH mérés 4. Elektromos pH mérés 1.1. Mérőelektródok 1.2. Az elektródok karbantartása Fehérjetartalom meghatározása 1. Biuret próba 2. Folin módszer 3. Bradford módszer Az anyagok elválasztása és tisztítása, tisztítási műveletek 1. Szűrés 2. Centrifugálás 3. Desztillálás 4. Szárítás 5. Extrahálás Vegyelemzés 1. Spektroszkópia (színképelemzés 3
g.
III.
2. Kromatográfia 1.1. Módszerek 1.1.1. Papírkromatográfia 1.1.2. Oszlopkromatográfia 1.1.3. Rétegkromatográfia 1.2. Típusai 1.2.1. Gélkromatográfia 1.2.2. Folyadékkromatográfia 1.2.3. Gázkromatográfia 3. Elektroforézis Izotópok, 1. Típusok 2. Sugárvédelmi eszközök 3. Detektálási módszerek 4. Dekontaminálás, tárolás A biológiai labormunkához elengedhetetlen kémiai alapfogalmak – gyakorlat
Cél az előző szemináriumon tanult alapfeladatok gyakorlati elsajátítása a. Oldatok készítése 1. Oldatok elkészítése cikk alapján b. Az oldatok kémhatásának fogalma, mérése és beállítása 1. Az elkészített oldatok kémhatásának ellenőrzése c. Az anyagok elválasztása és tisztítása, tisztítási műveletek 1. Az elméleti ismeretek gyakorlati alkalmazása d. Fehérje meghatározás 1. Ismeretlen oldat fehérjetartalmának meghatározása e. Vegyelemzés 1. Az elméleti ismeretek gyakorlati alkalmazása f. Izotópok, 1. 3H minták mérése
4
IV.
Mikrobiológiai kísérletek alapjai
Cél: a hallgatók megismertetése a mikrobiológiai laboratóriumokra vonatkozó különleges rendszabályokkal, különös tekintettel a fertőzésveszély forrásokra. Továbbá megismertetni a mikroorganizmusok tenyésztésének és tanulmányozásának alapvető módszereivel. a.. A mikrobiológiai laboratórium rendje b. Anyag és eszköz ismeret c. Táptalajok csoportosítása és készítése: 1, Folyékony és szilárd táptalajok 2, komplett és minimál táptalajok, speciális táptalajok összetétele 3, táptalaj készítés d. A mikroorganizmusok tenyésztéséhez használt edények és eljárások ismertetése e. Sterilezési módszerek 1, a sterilezés fizikai módszerei: oltóeszközök, sterilezés hővel, UV sugárzással, szűrőkkel, ultrahanggal 2, sterilezés kémiai úton 3, a steril oltófülkék g. Oltások gyakorlása 1, oltás ferde agarra 2, oltás magas agarba 3, oltás folyékony táptalajba 4, oltás Petri-csészébe h. A mikrobák telepmorfológiai jellegzetességeinek megfigyelése: baktérium telepek, élesztő- és penészgomba telepek leírása V.
Növényélettani kísérletek alapjai
a. A kísérletekben használt növényi anyag előállítása 1. Üvegház, fitotron. A megvilágítás szerepe: fényen és sötétben nevelt növények összehasonlítása. 2. Talaj- és folyadékkultúrák. 3. A tápelemek: minimális és teljes tápoldatok. A pH mérő és ionszelektív elektródok. Kísérlet: hiánytünetek kimutatása uborka csíranövényeken. 4. Csíráztatás. 5. Növénynevelés steril körülmények között. A steril munkahely bemutatása. b. A friss és száraztömeg meghározása 1. Mérleg használatának bemutatása és gyakorlása. 2. A szárító termosztát használata.
5
c. A növényi minták előkészítése 1. Az extraktumok készítése, tisztítása: szűrés, centrifugálás. Fehérjekivonatok: fehérjetartalom meghatározása Bradford módszerrel. Enzimaktivitás kimutatása: amiláz Szerves extrakció: a növényi fotoszintetikus pigmentek kivonása, vizsgálatuk spektrofotométerrel, rétegkromatográfiával. 2. Kloroplasztiszok izolálása és mikroszkópi vizsgálata. 3. Epidermisz nyúzat készítése és mikroszkópi vizsgálata. 4. Gázállapotú növényi minták: mintavétel és gázkromatográfia. d. A növények vízviszonyainak vizsgálatában használható műszerek bemutatása 1. Az Abbé-féle refraktométer. 2. Nyomáskamra. 3. Porométer.
VI.
Állatélettani kísérletek alapjai
Cél, hogy a hallgatók megismerjék az elemi állatélettani módszereket. a. Az állatkísérletek etikai szabályai 1. Állatok tartása 2. Kísérleti állatok száma 3. Altatás szabályai 4. Kísérletek menete b. Érzéstelenítés, altatás 1. Párolgó folyadékok (éter, kloroform) 2. Gáznemű anyagok (nitrogén-oxidul, kéjgáz, etilén) 3. Szilárd anyagok oldatai (barbiturátok, urethan, ketamin) c. Sebészeti műszerek és használatuk 1. A peán helyes használata 2. A szike használata d. Az élettani kísérletek főbb állatainak ismertetése 1. egér 2. patkány 3. béka 4. törpeharcsa e. Állatházi szabályok ismertetése 1. Tartási szabályok 2. Tenyésztési szabályok ismertetése 3. Munka szabályok f. Fertőtlenítési folyamatok 1. Munkaruházat (köpeny, kesztyű)
6
2. Fertőtlenítők 3. Állattetemek tárolása g. Alapvető kezelési, preparálási és műtéti eljárások 1. Az állatok helyes megfogása 2. Az állatok kezelése 1.1. Intra peritoneális kezelés 1.2. Sub cután kezelések 1.3. Intra vénás kezelések 1.4. Intra cranális kezelések 3. Műtéti technikák
VII.
Adatfeldolgozás
Cél, hogy a hallgatók mindegyike elemi számítógépes adatfeldolgozási ismereteket szerezzen. a. A Word szövegszerkesztő ismertetése b. Az Excell adatfeldolgozó rendszer ismertetése c. Alapvető grafikon szerkesztő programok ismertetése (Excell, Origin, Prisma)
7